СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РАДИАЦИОННОГО ПОРАЖЕНИЯ Российский патент 2004 года по МПК A61K35/50 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано для создания новых радиопротекторов.

Известно применение препарата плаценты денатурированной эмульгированной (ПДЭ) в растениеводстве для обработки семян, корней всходов бобовых, зерновых культур, кормовых трав, плодов кустарников с целью повышения всхожести семян, увеличения зеленой массы растений, повышения урожайности и сокращения сроков созревания. При выращивании грибов обработка всходов ПДЭ увеличивает урожайность и снижает накопление тяжелых металлов, нитратов и радионуклидов [1, 2]. В ветеринарной практике известно применение ПДЭ для предотвращения тяжелых послеродовых осложнений у коров и свиней, повышения лактогенности, снижения падежа молодняка, повышения устойчивости маточного стада к вирусным и другим инфекциям, увеличения надоев молока [1]. ПДЭ используется также для ускорения заживления при ранениях и укусах у сельскохозяйственных и домашних животных [2]. Препарат под названием плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) в форме эмульсий для инъекций, предназначенный для профилактики и лечения послеродовых болезней у коров и свиноматок, зарегистрирован в РФ за №ПВР-2-4.9/00209 от 24 октября 2001 г. [3]. В настоящее время разработана и сертифицирована серия косметических средств “Плацентоль” (кремы, бальзамы, эмульсии, шампунь), содержащих до 40% ПДЭ [4].

Способ получения биологически активных веществ из плаценты и указанного препарата ПДЭ разработан 000 “МНПК Биотехиндустрия” и включает обработку окисляющим раствором, отделение осадка фильтрованием с последующей очисткой фильтрата, содержащего целевой продукт, его лиофилизацию и стерилизацию при минимальном тепловом и химическом воздействии [5]. Плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) выпускается ООО “МНПК Биотехиндустрия” под названиями бальзам “Плацентоль-100%”, люплатекс, люрастим [6], далее по тексту используется наименование люплатекс. Люплатекс содержит в своем составе интерлейкин-1β (325-500 пг/мл), интерлейкин-6 (75-145 пг/мл), интерферон-гамма (60-80 пг/мл), интерферон-бета (16-32 Ед/мл), пептиды, нуклеиновые кислоты, полный набор аминокислот, микроэлементы, витамины, липиды. Люплатекс представляет собой стерильную желтовато-белую эмульсию, расфасованную во флаконы по 10,0 мл. Результаты аналитической оценки стандартности партий люплатекса представлены в табл. 1.

Целью изобретения является исследование и доказательство наличия у люплатекса противолучевых свойств.

Для достижения поставленной цели изучено противолучевое действие люплатекса при остром радиационном поражении.

В ходе исследований авторами обнаружено у люплатекса новое свойство, проявляющееся в повышении резистентности к воздействию ионизирующего излучения.

Выбор действующих противолучевых дозировок был осуществлен на основании предварительного изучения острой токсичности люплатекса, которую определяли в опытах на нелинейных мышах-альбиносах при 2 путях введения - внутрибрюшинном и пероральном. Наблюдение за животными вели в течение 6 суток.

Было показано, что люплатекс не вызывает гибели животных при однократном внутрибрюшинном введении до 50 мл/кг и пероральном - до 25 мл/кг (50-25 г/кг). Среднелетальную дозу (СД₅₀) определить не удается из-за невозможности увеличения объема вводимого препарата для данного вида животных (0,5-1,0 мл). Полученные данные свидетельствуют, что люплатекс нетоксичен и в соответствии с классификацией токсичности ядов [7] и ГОСТ 12.1.007-76 относится к практически безвредным веществам 6 класса (СД₅₀>3000-15000 мг/кг).

Противолучевая активность люплатекса была исследована на нелинейных белых мышах и гибридах F₁(CBA×C57B1). В качестве модели использовали однократное, равномерное радиационное воздействие в дозах 7,5 и 8,0 Гр, вызывающих костномозговую форму острой лучевой болезни тяжелой степени. Облучение животных проводилось в специальных пластиковых контейнерах, разделенных на индивидуальные ячейки, на гамма-установке ИГУР от источника ¹³⁷Cs с мощностью 2,09 рад/с. Неравномерность поля излучения в воздухе камеры не превышала ±10-15%. Люплатекс вводили в объеме 0,5 мл/мышь однократно внутрибрюшинно за 10 мин или через 5-10 мин после облучения, либо через желудочный зонд внутрь за 20-30 мин до воздействия. Показателем эффективности служила выживаемость мышей в течение 30 сут после воздействия.

Облучение мышей в дозах 8,0 и 7,5 Гр вызывало развитие типичной картины острой лучевой болезни, которая сопровождалась гибелью 80-100% контрольных животных в период с 8-х по 15-е сутки. Распределение животных по группам и полученные результаты представлены в табл. 2. Видно, что внутрибрюшинное введение люплатекса в ближайшие 5-10 мин как до, так и после облучения оказывало противолучевое действие. Выживаемость мышей-гибридов повышалась до 60% (в контроле - 20%, Р<0,05).

Отчетливый радиозащитный эффект наблюдался и при пероральном использовании люплатекса за 20-30 мин до облучения в абсолютно смертельной дозе для белых мышей (7,5 Гр). Выживаемость при данном варианте назначения люплатекса составила 48,3% (Р<0,05, см. табл.2).

Пример

Эксперименты проводятся на белых нелинейных мышах-самцах массой 20-22 г, которые содержатся в условиях вивария на обычном рационе при свободном доступе к воде. Мыши подвергаются однократному тотальному радиационному воздействию в дозе 7,5 Гр на гамма-установке ИГУР от источника ¹³⁷Cs с мощностью 2,09 рад/с в пластиковых контейнерах, разделенных на индивидуальные ячейки. Неравномерность поля излучения в воздухе камеры не должна превышать ±10-15%. Одной группе мышей за 20-30 мин до облучения вводят внутрь через желудочный зонд по 0,5 мл люплатекса, другой группе, служащей контролем, тем же способом и в том же объеме (0,5 мл) вводят физиологический раствор. Опытные и контрольные группы формируются методом случайной выборки. Наблюдение за животными осуществляется на протяжении 30 сут, по истечении которых регистрируют количество выживших животных в опыте и контроле. Опыты повторяют чередующимися сериями.

Установлено, что однократное пероральное введение люплатекса в дозе 0,5 мл увеличивает выживаемость мышей на 48,3% (из 29 выжило 14) при гибели всех 24 контрольных животных.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что люплатекс в экспериментах на мышах как линейных, так и нелинейных обладает противолучевыми свойствами при внутрибрюшинном введении и приеме внутрь. Противолучевые свойства при практически полной безвредности, простой и удобный способ применения (внутрь) позволяют использовать люплатекс для решения задач прикладной радиобиологии, в частности для создания на его основе новых радиопротекторов.

Источники информации

1. Инструкция по применению препарата ПДЭ в растениеводстве и ветеринарии. - МНПК “Биотехническая индустрия”.

2. Любимов Ю.И. Еще раз о садах на земле и в душе // Тверская жизнь, 26.02.2000 г.

3. Регистрационное удостоверение №РО77-2-4.1-1570 от 24.10.2001 г. Министерство сельского хозяйства РФ. Департамент ветеринарии. Плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) для профилактики и лечения послеродовых болезней у коров и свиноматок.

4. Огнева Т., Пчелкин В. Плацента от... оборонки // Природа и человек. - 1999.- №5-6.-С.8-11.

5. Патент РФ №2033797. Бюлл. №12, 1992 г. Воробьева Т.Н., Любимов Ю.И., Сушенцов В.А. Способ получения биологически активных веществ из плаценты.

6. Приказ №248 от 24.10.2001 г. Ген. директора МНПК “Биотехиндустрия” Ю.И. Любимова о синонимах названия биологически активного препарата “плацента денатурированная эмульгированная”.

7. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения // Токсикология новых промышленных химических веществ. - М., “Медицина”.-1973.- Вып.13.- С.47-51.

Приложения

1. Инструкция по применению препарата ПДЭ в растениеводстве и ветеринарии. - МНПК “Биотехническая индустрия”.

2. Регистрационное удостоверение №РО77-2-4.1-1570 от 24.10.2001 г. Министерство сельского хозяйства РФ. Департамент ветеринарии. Плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) для профилактики и лечения послеродовых болезней у коров и свиноматок.

3. Приказ №248 от 24.10.2001 г. Ген. директора МНПК “Биотехиндустрия” Ю.И.Любимова о синонимах названия биологически активного препарата “плацента денатурированная эмульгированная”.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии. Способ включает введение в организм биологически активного вещества - люплатекс в эффективном количестве внутрибрюшинно за 10 мин до облучения или через 5-10 мин после облучения или перорально за 20-30 мин до облучения. Способ прост и удобен в применении, эффективно повышает резистентность организма к воздействию ионизирующего излучения. 2 табл.

Способ профилактики и лечения радиационного поражения, включающий введение в организм биологически активного вещества, отличающийся тем, что в качестве биологически активного вещества используют люплатекс, который вводят в эффективном количестве внутрибрюшинно за 10 мин до облучения или через 5-10 мин после облучения или перорально за 20-30 мин до облучения.