СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ИЗБИРАТЕЛЬНЫМ РАДИО- И ХИМИОЗАЩИТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2008 года по МПК A61K35/50 A61K35/64 A61K31/728 A61P39/00 

Описание патента на изобретение RU2339386C1

Изобретение относится к пищевой и медицинской промышленности, а именно к биологическим средствам и активным пищевым добавкам, избирательно повышающим радиорезистентность нормальных тканей организма при лучевой или химиотерапии злокачественных новообразований.

Как известно, в связи с увеличением продолжительности жизни человека и повышением загрязненности среды обитания в большинстве стран растет заболеваемость различными формами злокачественных новообразований, которые требуют совершенствования существующих методов терапии опухолей, в том числе и в плане ослабления вредных последствий радикальных методов их лечения. Более 50 лет известны радиозащитные свойства некоторых химических веществ, которые неизбирательно повышают выживаемость облученных клеток и тканей [1]. У 60-70% онкологических больных при лечении используют методы лучевой терапии, при которой наряду с воздействием ионизирующей радиации на опухоль в зону облучения попадают нормальные ткани, окружающие опухоль или создающие ее строму. Радиационное поражение нормальных тканей лимитирует уровень допустимого радиационного воздействия на опухоль. Еще большее повреждение нормальных тканей происходит при проведении химиотерапии онкологических больных. В этих случаях возможно значительное повреждение тканей различных жизненно важных органов (сердца, легких, печени, костного мозга и др.). Интенсивные исследования, проводившиеся радиобиологами различных стран на протяжении второй половины XX века, не смогли обеспечить создания радиозащитных средств, в полной мере отвечающих требованиям современной медицины и потребностям лучевой или комбинированной терапии злокачественных новообразований [2].

Противолучевым действием обладает целый ряд соединений из различных классов, во многом их изучение проводится в интересах защиты здоровых тканей у тех больных, которые в связи с онкологическими заболеваниями подвергаются интенсивной лучевой терапии. Использование химических радиопротекторов при радиотерапии не получило широкого распространения, поскольку по мнению радиологов нельзя обеспечить избирательную защиту только нормальных, а не опухолевых тканей. На сегодняшний день в практической медицине в качестве радиопротекторов вообще используется довольно ограниченное количество фармакологических препаратов.

В качестве средств профилактики лучевых поражений были рекомендованы: гаммафос, цистамин, индралин, мексамин. Всем перечисленным препаратам присущи определенные недостатки и свойства, ограничивающие возможность их широкого применения. Так, опасность токсических эффектов не позволяет принимать эти препараты многократно, а их переносимость резко снижается при неблагоприятных условиях внешней среды [3-4].

Гаммафос (амифостин, этиол, WR - 2721) [5] - производное тиофосфорной кислоты, точнее S-2-(3-аминопропиламино) этиловый эфир тиофосфорной кислоты - фармакопейный препарат - пока единственный радиопротектор (испытано более 4000 различных химических веществ), одобренный контролирующими инстанциями США для защиты от побочных эффектов радиотерапии. Он защищает здоровые клетки от мутагенного эффекта цитостатиков, что может способствовать снижению риска развития вторичных опухолей.

Однако даже этот препарат не обладает идеальными свойствами для использования в радиотерапии. По мнению специалистов, это должно быть менее токсичное вещество. Была доказана способность гаммафоса также защищать клетки от цитостатического действия химиопрепаратов, которое реализуется благодаря способности нейтрализовать повреждающее ДНК действие противоопухолевых препаратов и связывать свободные радикалы. Через 10-15 минут после внутривенного введения гаммафос исчезает из плазмы и накапливается в здоровых клетках, в которых активность щелочной фосфатазы во много раз выше, чем в опухолевых, и именно в это время проводят облучение опухоли или вводят химиопрепарат, достигая за счет различий в скорости накопления препарата в опухолевых и нормальных клетках и тканях избирательной защиты нормальных тканей от повреждающего действия радиации или химиопрепаратов. Гаммафос обладает комплексообразующей активностью, защищает клетки, не вовлеченные в опухолевый рост.

Применение гаммафоса имеет недостатком то обстоятельство, что в ряде опухолей, особенно в их периферической зоне, которая хорошо снабжена кровью, он может накапливаться также быстро, как и в нормальных тканях, и не достигается эффекта избирательной защиты.

Гаммафос имеет также ограничения по применению, побочные эффекты его действия связаны с потерей сознания, тошнотой, рвотой, аллергическими реакциями, риском развития гипокальциемии, потребностью в дополнительном введении противорвотных препаратов. Внутривенное введение препарата необходимо проводить строго в положении лежа пациента на спине.

Несмотря на эффективность других аналогичных радиозащитных средств, вводимых до облучения, все они имеют весьма ограниченные возможности для применения, т.к. сопровождаются побочными эффектами (рвота, потеря сознания и т.д.), что ограничивает их практическое применение.

Известно радиозащитное средство цистамин [1, 3-4]. Действие цистамина дигидрохлорида, введенного онкологическим больным в дозе 0,8-1,2 г (перорально за час до начала локального облучения грудной клетки в дозе 2,15 Гр), не является избирательным. В России цистамин разрешен для клинического применения при радиотерапии с целью уменьшения нежелательных пострадиационных эффектов. Таблетка содержит 0,4 г действующего вещества. Цистамин вводится по 0,6 г один раз в сутки за час до облучения при количестве лейкоцитов не менее 5000 в 1 мкл крови, лимфоцитов - 18-20% и общей дозе облучения порядка 40-50 Гр локально. При суммарных дозах 100-120 Гр и количестве лейкоцитов 4000 в 1 мкл рекомендуется пероральная доза (0,8 г в сутки) перед каждым следующим облучением.

Недостатки, возникающие при использовании цистамина, - у чувствительных лиц после приема цистамина могут появляться признаки раздражения пищеварительного аппарата. Острые заболевания желудочно-кишечного тракта, острая сердечно-сосудистая недостаточность и нарушения функций печени являются противопоказаниями к приему цистамина. Кроме того, как отмечено ранее, для него, как и для аналогичных препаратов, не доказана преимущественная защита нормальных тканей по сравнению с опухолью.

Другим радиопротекторным средством, разрешенным для применения в нашей стране, является мексамин гидрохлорид [1, 3-4]. В одной таблетке содержится 0,05 г препарата мексамина. Эта доза рекомендована для однократного перорального приема за 30-40 мин до каждого сеанса лучевой терапии. При хорошей переносимости доза может быть увеличена до 0,1 г. Исключение составляют признаки непереносимости, такие как тошнота, головокружение и рвота. Нежелательные эффекты устраняются или смягчаются введением кофеина. При продолжающейся непереносимости прием мексамина следует прекратить.

Противопоказаниями к приему мексамина служат склероз сосудов сердца и мозга, сердечно-сосудистая недостаточность, бронхиальная астма, болезни почек с функциональными нарушениями и беременность. Цистамин и мексамин необходимо предохранять от света при хранении. Защита опухолевых клеток от действия ионизирующего излучения безусловно нежелательна, а перечисленные соединения защищают экспериментальную опухоль.

Необходимость разработки средств, позволяющих активно вмешиваться в процессы жизнедеятельности организма на молекулярно-клеточном уровне, послужила предпосылкой для поиска новых соединений. К таким средствам относятся получаемые из органов и тканей фармакологические вещества, обладающие широким спектром биологического действия и, как показали последующие экспериментальные исследования, являющиеся достаточно эффективными в радиобиологии [6-9]. Однако они часто обладают слабой эффективностью и другими существенными недостатками из-за плохо разработанных схем и доз применения при воздействии радиации и химиопрепаратов.

Биологически активная добавка (БАД) «МИГИ - КЛП» [10], изготовленная из мидий, обладает радиозащитным и канцеростатическим действиями, нормализует энергетический, углеводный, гормональный и белковый обмен в облученном организме.

Однако побочные эффекты - тошнота и рвота, а также необходимость для пациента долго употреблять резко соленую жидкость препарата создают сложности при применении рекомендованного минимального курса приема - 2 недели.

В связи с этим является целесообразным использование различных агентов, в том числе и биологически активных пищевых добавок на основе плацентарных комплексов, которые способны ослаблять радиационное или химиотерапевтическое повреждение нормальных тканей при проведении противоопухолевой терапии без существенного изменения повреждения опухолевых тканей. В последние годы значительный интерес вызывают препараты плаценты, обладающие противовоспалительными и ранозаживляющими свойствами, стимулирующие иммунитет и другие защитные функции организма [11-12].

Известен способ получения биологически активных веществ из плаценты, разработанный ООО "МНПК Биотехиндустрия" [13]. Он включает обработку плацентарной ткани окисляющим раствором, отделение осадка фильтрованием с последующей очисткой фильтрата, содержащего целевой продукт, его лиофилизацию и стерилизацию при минимальном тепловом и химическом воздействии. Плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) выпускается ООО "МНПК Биотехиндустрия" и используется в ветеринарной практике для предотвращения тяжелых послеродовых осложнений у коров и свиней, повышения лактогенности, снижения падежа молодняка, повышения устойчивости маточного стада к вирусным и другим инфекциям, увеличения надоев молока [14]. ПДЭ используется также для ускорения заживления при ранениях и укусах у сельскохозяйственных и домашних животных [15]. Препарат под названием плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) в форме эмульсий для инъекций, предназначенный для профилактики и лечения послеродовых болезней у коров и свиноматок, зарегистрирован в РФ за № ПВР-2-4.9/00209 от 24 октября 2001 г. [16]. В настоящее время разработана и сертифицирована серия косметических средств "Плацентоль" (кремы, бальзамы, эмульсии, шампунь), содержащих до 40% ПДЭ.

Прототипом заявляемого изобретения является способ профилактики и лечения радиационного поражения [17], включающий введение в организм биологически активного вещества. В качестве биологически активного вещества плацентарного происхождения используют люплатекс, обладающий противолучевым свойством. Его вводят в эффективном количестве внутрибрюшинно за 10 мин до облучения или через 5-10 мин после облучения или перорально за 20-30 мин до облучения.

Люплатекс содержит в своем составе интерлейкин-1β (325-500 пг/мл), интерлейкин-6 (75-145 пг/мл), интерферон-гамма (60-80 пг/мл), интерферон-бета (16-32 Ед/мл), пептиды, нуклеиновые кислоты, полный набор аминокислот, микроэлементы, витамины, липиды. Люплатекс представляет собой стерильную желтовато-белую эмульсию, расфасованную во флаконы по 10,0 мл.

Недостатки прототипа заключаются в том, что препарат надо вводить путем инъекций и в том, что в нем отсутствуют компоненты, способствующие более полному всасыванию препарата в организм и реализации эффекта различных компонентов комплексного препарата, в первую очередь, связанных со стимуляцией репаративных процессов в нормальных органах и тканях. Кроме того, этот прототип не очищен от гормонов, обычно содержащихся в плацентарной ткани (прогестерон, тестостерон, эстрадиол).

Для устранения недостатков прототипа и получения более выраженного технического эффекта, по мнению авторов, целесообразно использовать не временные различия в сроках накопления модификатора в нормальных и опухолевых тканях, а его биологические особенности действия на эти ткани, например более быстрое всасывание препарата в желудочно-кишечном тракте, а также усиление репаративных реакций в нормальных тканях. В качестве таких модификаторов целесообразно дополнительно использовать ряд природных веществ: гиалуроновую кислоту (ГК), мед натуральный, натуральное оливковое масло, крахмал картофельный. ГК играет важную роль в осуществлении репаративных процессов соединительных тканей (синтез гликозаминогликанов), снижении воспалительных реакций, улучшении кровоснабжения тканей. Применение ГК в составе биологически активной добавки способствует ее обновлению в соединительной ткани очага воспаления, противодействует распространению бактерий и лизирующему действию бактериальной гиалуронидазы, стимулирует фагоцитоз. При комбинировании различных по механизму действия агентов уменьшается побочное действие нестероидных противовоспалительных препаратов на желудочно-кишечный тракт и нервную систему [18].

Мед натуральный - активный биологический продукт содержит: глюкозу, фруктозу, сахарозу, мальтозу, белки, неорганические и органические кислоты, сбалансированный комплекс микроэлементов (алюминий, бор, железо, иод, магний, натрий, серу, цинк) и витаминов. Мед улучшает реологические свойства крови, уменьшает вязкость, показатели липидного обмена, стабилизирует артериальное давление. По сравнению с другими углеводами имеет очевидные преимущества: легче выводится выделительной системой, в том числе и почками, не вызывает раздражение пищеварительного тракта, быстро восстанавливает энергетические потери. Мед обладает иммуномоделирующим, антиоксидантным, противовоспалительным действием [19].

Оливковое масло - природный источник витамина Е (α - токоферол) и полиненасыщенных жирных кислот. Витамин Е обладает интенсивным антиоксидантным действием, снимает воспалительные процессы органов желудочно-кишечного тракта. Участвует в обмене белков и углеводов, способствует усвоению жиров и жирорастворимых витаминов.

Крахмал картофельный - коллоидный раствор применяется в гастроэнтерологической практике как обволакивающее средство при гастритах, энтеритах [20].

Сущность изобретения заключается в том, что в качестве средства, обладающего избирательным радио- и химиозащитным действием на поврежденные нормальные ткани, используют биологически активную добавку (БАД) с условным названием «Гастрофилин плюс», содержащую денатурированную, эмульгированную и дезагармоновую плаценту, т.е. без примеси гормонов, с дополнительно введенными в нее гиалуроновой кислотой, медом натуральным, натуральным оливковым маслом и крахмалом картофельным в соотношениях, обеспечивающих выраженный избирательный терапевтический эффект.

В МНПК «Биотехиндустрия» разработан способ получения денатурированной эмульгированной плаценты, на основе которой получают вспомогательное средство для комплексной терапии заболеваний органов желудочно-кишечного тракта и печени - БАД «Гастрофилин плюс» [21-23]. Вновь синтезированное вещество является природным источником натурального витамина Е и полиненасыщенных жирных кислот, низкомолекулярных пептидов, фосфолипидов, иммуноглобулинов, интерлейкинов, гамма-интерферонов, полисахаридов, сбалансированного природного комплекса витаминов, коэнзима Q10, альфа-фетопротеинов, сбалансированного комплекса макро- и микроэлементов. Полученный комплекс обладает выраженным антиоксидантным действием.

Проведенные нами исследования показали, что БАД «Гастрофилин плюс», используемый в качестве химио- и радиозащитного агента, способен избирательно защищать нормальные ткани при проведении противоопухолевой терапии без ослабления повреждающего действия лечебных воздействий на опухолевую ткань.

Сущность изобретения иллюстрируется примерами.

Пример 1

В качестве средства для избирательной защиты нормальных тканей при проведении радикальных курсов химио- или лучевой терапии предлагается комплекс «Гастрофилин плюс», созданный на основе денатурированной эмульгированной плаценты. Технология его приготовления включает вначале процесс очистки исходного плацентарного компонента от активной группы гормонов, затем смешивание его с наполнителями - мед 20-35%, оливковое масло 20-25%, крахмал 10-15%, гиалуроновая кислота 0,062-0,1%.

После тщательного перемешивания проводят расфасовку.

Проведенные нами исследования показали, что плацентарный комплекс, на основе которого приготавливается средство для избирательной защиты, в 1 л содержит: 45,4 г общего белка, 14,1 г альбумина, 31,6 г глобулинов; аминокислоты (общее количество азота 0,5 мг/мл); минеральные вещества и микроэлементы (железо - 0,04 мг, кальций - 0,08 мг, магний - 0,19 мг, калий - 0,94 мг, фосфор - 0,71 мг, кремний 0,07 мг, цинк - 0,16 мг). Содержание ненасыщенных жирных кислот 4,67 г/100 г, фосфолипидов - 45,30 мг/л, комплекс витаминов (в мг/100 г), вит. Е - 2,60, В1 - 0,07, В3 - 0,40, В4 - 90, В5 - 0,25, В6 - 0,01, В9 - 0,09, С - 2,10), гамма-интерферон 60-80 пкг/мл.

Технология приготовления «Гастрофилин плюс» позволяет очистить плацентарный комплекс от активной группы гормонов: прогестерона, тестостерона, эстрадиола, которые запрещены для применения в странах Европейского сообщества, что отвечает требованиям Cosmetics Directive №76/768.

Пример 2

Исследование влияния предложенного средства («Гастрофилин плюс», 25 мл/кг), вводимого мышам, на содержание стволовых кроветворных клеток в костном мозге животных, которое оценивается по тесту экзогенных КОЕ-С (колониеобразующие единицы, селезеночные), содержащихся в костном мозге интактных мышей линии С57В 1/6, самцов, в возрасте 3 месяцев и у подопытных животных той же линии, пола и возраста, получивших однократную инъекцию циклофосфамида (200 мг/кг массы тела). «Гастрофилин плюс» вводили мышам, донорам костного мозга, перорально по 0,5 мл за 1 сутки до взятия костного мозга, а циклофосфамид - внутрибрюшинно за 2 часа до взятия костного мозга. Для определения КОЕ-С 105 ядросодержащих клеток мышей-доноров, получавших изучаемые препараты, вводили внутривенно мышам-реципиентам, облученным за сутки до введения клеток костного мозга в дозе 9 Гр (аппарат «Луч», гамма-лучи Со60, мощность дозы 0,45 Гр/мин), и забивали для подсчета селезеночных колоний на 8 сутки после трансплантации костного мозга. На каждую точку использовали по 3 мыши-донора костного мозга, костный мозг которых перед введением пулировали, и по 12 мышей-реципиентов костного мозга. Результаты этого опыта представлены в таблице 1.

Таблица 1Содержание кроветворных стволовых клеток в костном мозге мышей, получавших «Гастрофилин плюс» и инъекцию химиопрепарата циклофосфамида, оценненое методом селезеночного экзотестаГруппаКоличество селезеночных экзоколоний на 105 введенных реципиенту клеток донорского костного мозга (М±m)1Интактный контроль12,3±1,22Введение «Гастрофилин плюс» за 1 сутки до взятия костного мозга18,7±2,03Введение циклофосфамида за 2 часа до взятия костного мозга7,2±1,14Введение «Гастрофилин плюс» за 1 сутки, а затем введение циклофосфамида за 2 часа до взятия костного мозга14,5±2,1Примечание: жирным текстом выделено достоверное (р<0,05) различие с группой интактного контроля.

Таким образом, предварительный прием «Гастрофилин плюс» способен полностью устранить повреждающее действие химиопрепарата на стволовые кроветворные клетки, которые являются одной из основных «мишеней» повреждающего действия химиотерапии.

Для изучения возможного защитного действия приема «Гастрофилин плюс» на стволовые кроветворные клетки при действии ионизирующей радиации была использована модель эндогенного селезеночного колониеобразования собственными выжившими после облучения КОЕ-С. Опыты были проведены на мышах-гибридах F1(CBAxC57B1/6), самцах, в возрасте 3 месяца, которым за одни сутки до облучения в дозе 6 Гр (аппарат «Луч», гамма-лучи Со60, мощность дозы 0,45 Гр/мин) перорально вводили различные дозы «Гастрофилин плюс». В каждой группе было по 15 мышей. Животных забивали через 8 суток после облучения, селезенки фиксировали в уксуснокислом спирте и подсчитывали число селезеночных эндоколоний на их поверхности. Результаты этого опыта представлены в таблице 2.

Таблица 2Радиозащитное действие «Гастрофилин плюс» на стволовые кроветворные клетки, оцененное методом селезеночного эндотестаГруппаСредняя масса селезенки (М±m), мгСреднее к-во эндоколоний, (М±m)1Введение «Гастрофилин плюс» (40 мл/кг) за 1 сутки до облучения в дозе 6 Гр54,4±3,25,5±0,62Введение «Гастрофилин плюс» (25 мл/кг) за 1 сутки до облучения в дозе 6 Гр50,2±2,95,1±0,63Введение «Гастрофилин плюс» (5 мл/кг) за 1 сутки до облучения в дозе 6 Гр46,8±3,03,2±0,44Контроль, 6 Гр43,1±2,11,9±0,4Примечание: жирным текстом выделено достоверное (р<0,05) различие с группой интактного контроля.

Данные проведенного опыта показывают, что «Гастрофилин плюс» при приеме до облучения обладает выраженным радиозащитным эффектом, уровень которого возрастает при повышении дозы принятого препарата. Так как эффект защиты в группах 1 и 2 (т.е. при приеме 40 и 25 мл/кг), статистически значимо не различается, то можно предположить, что при дозе 25 мл/кг и больше достигается уровень максимальной радиозащиты для данного типа радиопротектора для кроветворных стволовых клеток, которые являются одной из основных «мишеней» повреждающего действия и при действии лучевой терапии.

Таким образом, экспериментально доказана возможность защитить кроветворные стволовые клетки от действия химиопрепаратов и ионизирующей радиации путем предварительного приема «Гастрофилин плюс».

Пример 3

Способность «Гастрофилин плюс» оказывать возможное радиозащитное действие было изучено также по тесту кожных реакций при локальном облучении левой задней конечности мышей-гибридов F1(CBAxC57B1/6), самцов, в возрасте 3 месяца, которым за одни сутки до локального облучения в дозе 12 Гр (аппарат «Луч», гамма-лучи Со60, мощность дозы 0,45 Гр/мин) перорально вводили различные дозы «Гастрофилин плюс». В каждой группе было по 15 мышей. Результаты проведенного опыта представлены в таблице 3.

Таблица 3Радиозащитное действие «Гастрофилин плюс» по тесту кожных реакций [24, 25]ГруппаВеличина максимальной кожной реакции в баллах, М±mВеличина средней кожной реакции в баллах, М±m1.Контроль, 12 Гр2,4±0,31,7±0,22.Введение «Гастрофилин плюс» (40 мл/кг) за 1 сутки до облучения в дозе 12 Гр1,5±0,21,1±0,23.Введение «Гастрофилин плюс» (25 мл/кг) за 1 сутки до облучения в дозе 12 Гр2,0±0,31,5±0,24.Введение «Гастрофилин плюс» (5 мл/кг) за 1 сутки до облучения в дозе 12 Гр2,3±0,31,6±0,2Примечание: жирным текстом выделено достоверное (р<0,05) различие с группой интактного контроля.

Как можно видеть, результаты этого опыта сходны с таковым, в котором эффект оценивали по выходу селезеночных колоний, только статистически значимые различия с контролем наблюдаются в группе, в которой мышам препарат вводили в дозе 40 мл/кг. Реакция кожи на облучение - обычно наиболее характерная реакция нормальных тканей, которая используется лучевыми терапевтами при проведении лучевой терапии злокачественных новообразований. Поэтому достижение в этом случае радиозащитного эффекта свидетельствует о перспективности использования изучаемого препарата в лучевой терапии 4.

Пример 4

Изучена возможность защиты от действия химиотерапии быстро растущей и метастазирующей опухоли мышей с помощью «Гастрофилин плюс» (25 мл/кг). Была использована хорошо растущая на мышах линии С57В1/6, самцах в возрасте 3 месяцев, перевиваемая опухоль - карцинома легких Льюис (штамм LLC), которая к 22 суткам после в/м трансплантации в мышцы правого бедра формирует не только значительную по размерам первичную опухоль на месте подкожной трансплантации опухоли животному, но и приводит к появлению большого количества метастазов в легких (порядка 20 узлов), которые выявляются после фиксации легких животных в уксуснокислом спирте. В этом опыте на каждую точку было использовано по 15 мышей, которые, начиная с 7 суток после перевивки опухоли, получали 4-х дневный курс химиотерапии циклофосфамидом (ежедневное в/б введение препарата в концентрации 50 мг/кг массы тела для получения животными общей дозы химиопрепарата, составляющей 200 мг/кг массы тела) и однократное введение «Гастрофилин плюс» (25 мл/кг) за сутки до начала проведения курса химиотерапии. Результаты этого опыта представлены в таблице 4.

Таблица 4Влияние «Гастрофилин плюс» на рост опухоли карциномы легких Льюис и метастазирование в легкие у контрольных мышей линии С57В1/6 и у мышей, подвергавшихся 4-х дневному курсу терапии циклофосфамидомГруппаСредний объем опухоли на 22 день после перевивки опухоли, мм3 (М±m)Среднее количество легочных метастазов на 22 день после перевивки опухоли (М±m)1Контрольные, мыши с ростом интактной опухоли LLC579±4521,8±4,42Мыши с ростом опухоли LLC, получившие «Гастрофилин плюс» на 8-е сутки после перевивки опухоли567±4422,5±4,93Мыши с ростом опухоли LLC, получившие в течение 9-12 суток после перевивки опухоли ежедневные инъекции циклофосфамида343±2912,3±4,14Мыши с ростом опухоли LLC, получившие «Гастрофилин плюс» на 8 сутки после перевивки опухоли, на 9-12 сутки после перевивки опухоли ежедневные инъекции циклофосфамида352±2811,4±4,5Примечание: жирным текстом выделено достоверное (р<0,05) различие с группой роста интактной опухоли у мышей.

Результаты этого опыта свидетельствую о том, что «Гастрофилин плюс» не защищает опухоль от действия химиотерапии ни по тесту роста первичной опухоли, ни по тесту продукции легочных метастазов. Повреждающее действие циклофосфамида в случае дачи животным-опухоленосителям «Гастрофилин плюс» сохраняется на том же уровне, что и у животных, которые этот препарат не получали.

Этот вывод был подтвержден в опытах, проведенных этой опухолью, подвергнутой лучевой терапии путем локального гамма-облучения на аппарате «Луч» (мощность дозы 0,45 Гр/мин) в однократной дозе 10 Гр. В таблице 5 представлены материалы опытов, проведенных с трансплантированной мышам линии С57В1/6 в/м карциномой легких Льюис за 7 суток до облучения. Средний объем опухолей в этот период составлял 18,4±2,3 мм3. Препарат «Гастрофилин плюс» вводился мышам перорально по 0,5 мл (25 мл/кг массы тела) за одни сутки до локального облучения опухоли в дозе 10 Гр. В каждой группе было по 15 мышей линии С57В1/6, самцов, в возрасте 3 месяца в начале опыта.

Таблица 5Влияние «Гастрофилин плюс» на рост опухоли карциномы легких Льюис и метастазирование в легкие у контрольных мышей линии С57В1/6 и у мышей, получивших локальное облучение опухоли в дозе 10 Гр через одни сутки после приема «Гастрофилин плюс»ГруппаСредний объем опухоли на 22 день после перевивки опухоли, мм3 (М±m)Среднее количество легочных метастазов на 22 день после перевивки опухоли (М±m)1Контрольные, необлученные опухоли564±4123,5±3,82Необлученные опухоли у мышей, получивших «Гастрофилин плюс»550±3825,2±4,63Опухоли облученные в дозе 10 Гр232±2116,2±3,04Опухоли облученные в дозе 10 Гр у мышей, получивших «Гастрофилин плюс»216±1714,9±3,3Примечание: жирным текстом выделено достоверное (р<0,05) различие с группой роста интактной опухоли у мышей.

Как можно видеть, введение мышам-опухоленосителям «Гастрофилин плюс» в дозе 25 мл/кг статистически значимо не влияет на эффект радиации (как впрочем и не стимулирует рост опухоли у необлученных животных или продукцию метастазов).

Таким образом, из материалов опытов, представленных в таблицах 4 и 5, следует, что используемое в данном патенте для реализации эффекта избирательной защиты средство («Гастрофилин плюс») не подавляет действие химиопрепаратов или облучения на первичную опухоль и не оказывает влияния на процесс метастазирования опухоли.

Учитывая наличие у данного средства достаточно высокого уровня защиты нормальных тканей, обусловленного применением комплекса рекомендуемых нами биологически активных соединений и их очистки, можно считать обоснованным использование «Гастрофилин плюс» в качестве агента, избирательно защищающего нормальные ткани, но не ткань первичной опухоли или ее отдаленных метастазов от лечебного действия химиотерапии или лучевой терапии, которые наиболее часто применяются при лечении больных со злокачественными новообразованиями.

Анализ тенденций развития научных исследований радиозащитных средств показал, что перед исследователями ставится задача получения максимально удобных в употреблении, совершенно безвредных и экономически приемлемых лекарственных препаратов или пищевых ингредиентов. Учитывая полипатогенетический характер действия ионизирующего излучения, именно многокомпонентные системы, обладающие широким спектром биологического действия, направленного на активизацию защитных сил организма, наиболее перспективны для использования в радиационной медицине. В полной мере этому отвечает предложенное средство - «Гастрофилин плюс», вводимое животным за сутки до облучения или воздействия химиопрепарата. В эксперименте на лабораторных животных оно показало свою эффективность при защите нормальных тканей, но не тканей опухоли при проведении лучевой терапии или лечении с помощью химиопрепаратов. Введение данного средства в изученных дозах не вызывало каких-либо видимых проявлений токсического действия. Однократный пероральный способ применения средства, отсутствие побочных эффектов дают возможность рассматривать его как перспективное соединение для применения в комплексной химио- и лучевой терапии в связи со следующими важными свойствами:

- эффективность при отсутствии токсичности;

- удобство лекарственной формы (пероральное однократное введение);

- избирательность защитного (регенеративного) эффекта только в отношении нормальных тканей, но не опухоли.

Более того, рекомендуемое средство хорошо переносится больными, при этом нежелательные явления или реакции не выявлены. Важно также отметить, что материалы проведенных исследований свидетельствуют, что применяемое средство не ускоряет рост опухоли и не стимулирует процесс метастазирования. Использование данного средства в комплексной терапии неопухолевых заболеваний показало, что оно способствует уменьшению клинических проявлений заболевания и улучшению общего состояния больных с эрозивно-язвенными заболеваниями желудка и 12-перстной кишки, обладает способностью стимулировать кроветворение путем увеличения пула клеток-предшественников.

Изучаемое средство также выгодно отличается от известных радиопротекторов тем, что оно оказывает эффективное действие при однократном пероральном применении, практически безвредно, не вызывает токсические реакции, которые присущи ранее известным радиопротекторам с физико-химическим механизмом действия, а также очищено от нежелательной гормональной активности.

Источники информации

1. Тиунов Л.А., Васильев Г.А., Вальдштейн Э.А. Противолучевые средства. М.-Л. изд. «Наука», 1964, 320 стр.

2. Ярмоненко С.П., Конопляников А.Г., Вайнсон А.А. Клиническая радиобиология. М.: Медицина, 1992, 320 стр.

3. Владимиров В.Г., Красильников И.И. и др. Радиопротекторы: структура и функции. Киев: Наукова думка, 1989, 264 стр.

4. Легеза В.И., Гребенюк А.Н. и др. Медицинские средства противорадиационной защиты. Ред: Легеза В.И., Гребенюк А.Н. СПб.: Лань, 2001, 95 стр.

5. Glover D., Fox K.R., Weiler C. et al. // Perspective in radioprotection (Eds. Weiss J.F., Simic M.G.), Oxford, Pergamon Press, 1988, P.3-7.

6. Stuart С., Tomiselli G. // Riv. Radiol., 1965. V.5, №4, P.775-783.

7. Айрапетян Ф.О. // В кн.: «Механизмы биологического действия ионизирующего излучения». Тез. докл. Респ. научн. конф./, Львов, 1965, стр.6.

8. Белугина З.Т. // В кн. «Вопросы радиобиологии». Л., 1957, Т.2, стр.378-388.

9. Атаманова О.М., Чертков К.С., Андрианова И.Е. // Х Научн. конф. «Восстановительные и компенсаторные процессы при лучевых поражениях». Тез. докл., СПб., 1992, стр.8-9.

10. Новикова М.В., Рехина М.И., Беседина Т.В. и др.Биологически активная добавка из мяса мидий - «МИГИ - КЛП». // Поликлиника, 2005, №2, стр.191.

11. Ролик И.С. Фетальные органопрепараты: клиническое применение. М.: РегБиоМед, 2003.

12. Ролик И.С. Биологические препараты в реабилитации больных раком. М., Арнебия-2004.

13. Воробьева Т.Н., Любимов Ю.И., Сушенцов В.А. Способ получения биологически активных веществ из плаценты. Патент РФ №2033797. Бюл. №12, 1992.

14. Инструкция по применению препарата ПДЭ в растениеводстве и ветеринарии. // МНПК "Биотехническая индустрия", 1999.

15. Любимов Ю.И. Еще раз о садах на земле и в душе. // Тверская жизнь, 26.02.2000.

16. Регистрационное удостоверение №РО 77-2-4.1-1570 от 24.10.2001 г. Министерство сельского хозяйства РФ. Департамент ветеринарии. Плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) для профилактики и лечения послеродовых болезней у коров и свиноматок. 2001.

17. Патент RU №2235551 С2, 10.09.2004.

18. Ikeya H., Kitagawa H. "Hyaluronic acid and its salt for skin diseases". Patent US 5728391, 1998.

19. Дубцова Е.А., Царегородцева О.А., Серова Т.И. Влияние продуктов пчеловодства на уровень цитокинов крови в процессе лечения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2004, №1, стр.155-156.

20. Клиническая фармакология. Ред. Закусов В.В., М.: Медицина, 1978, 325 стр.

21. Любимов Ю.И., Смирнова Е.Г., Малинина Т.Г., Любимова Е.Ю. Плацентарный комплекс - активный антиоксидант. // Биохимия, 2002, Т.67, Вып.11, стр.1539-1544.

22. Санитарно-эпидемиологическое заключение №77.99.20 919.Б.000197.10.03.

23. Малинина Т.Г., Любимова Е.Ю., Андрианова И.Е. Перспективные биокомплексы для современной медицины. Матер. Междунар. конф. «Биотехнология и медицина». Москва, 14-17 марта 2006 г.

24. Field S.B. // Radiology, 1968, V.93, N.4, P.915-920.

25. Hendry J.H., Sutton N.L. // Brit. J. Radiol., 1976, V.51, P.927-928.

Похожие патенты RU2339386C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ЗАЩИТЫ ЖИВОТНЫХ ОТ ВЫСОКОДОЗОВОГО ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ 2019
  • Богачев Сергей Станиславович
  • Долгова Евгения Владимировна
  • Поттер Екатерина Анатольевна
  • Проскурина Анастасия Сергеевна
  • Риттер Генрих Сергеевич
  • Николин Валерий Петрович
  • Попова Нелли Александровна
  • Ефремов Ярослав Рейнгольдович
  • Кисаретова Полина Эдуардовна
  • Таранов Олег Святославович
  • Кирикович Светлана Сергеевна
  • Левитес Евгений Владимирович
  • Дубатолова Татьяна Дмитриевна
RU2701155C1
СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО ПОЛИСАХАРИДА В КАЧЕСТВЕ РАДИОПРОТЕКТОРА И СТИМУЛЯТОРА КОЛОНИЕОБРАЗОВАНИЯ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК СЕЛЕЗЕНКИ ОБЛУЧЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 2013
  • Генералов Евгений Александрович
RU2537033C1
ИНГИБИТОР ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ КРОВЕТВОРНЫХ КЛЕТОК-ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ 2006
  • Розиев Рахимджан Ахметджанович
  • Гончарова Анна Яковлевна
  • Подгородниченко Владимир Константинович
  • Саенко Александр Семенович
  • Замулаева Ирина Александровна
  • Семина Ольга Вячеславовна
  • Семенец Тамара Николаевна
  • Орлова Нина Владимировна
  • Смирнова Светлана Гурьевна
  • Цыб Анатолий Федорович
RU2317074C1
РАДИОЗАЩИТНОЕ СРЕДСТВО 2010
  • Драчев Игорь Сергеевич
  • Турлаков Юрий Сергеевич
  • Чепур Сергей Викторович
  • Легеза Владимир Иванович
  • Воробьев-Десятовский Николай Владимирович
RU2428192C1
РАДИОПРОТЕКТОР 1992
  • Минухин Валерий Владимирович[Ua]
  • Цыганенко Анатолий Яковлевич[Ua]
  • Иванова Нина Николаевна[Ua]
  • Петров Василий Иванович[Ua]
  • Темиров Юрий Павлович[Ua]
  • Пилипенко Николай Иванович[Ua]
  • Ткаченко Виктория Леонидовна[Ua]
  • Абрамова Лилия Павловна[Ua]
  • Звягинцева Татьяна Владимировна[Ua]
  • Васильченко Валерий Николаевич[Ua]
  • Кузьминова Ирина Анатольевна[Ua]
  • Лосева Елена Владимировна[Ua]
RU2049469C1
СРЕДСТВО ПРОФИЛАКТИКИ ОСТРОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ 2015
  • Красильников Игорь Иванович
RU2599844C1
Способ фармакологической защиты от ионизирующих излучений 2017
  • Филимонова Марина Владимировна
  • Макарчук Виктория Михайловна
  • Филимонов Александр Сергеевич
  • Шевченко Людмила Ивановна
  • Чеснакова Екатерина Александровна
  • Галкин Всеволод Николаевич
  • Каприн Андрей Дмитриевич
RU2663465C1
РАДИОЗАЩИТНОЕ СРЕДСТВО 1996
  • Красильников И.И.
RU2144357C1
СПОСОБ СОЧЕТАННОЙ ТЕРАПИИ СОЕДИНИТЕЛЬНОТКАННОЙ САРКОМЫ М-1 КРЫС С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОНЬЮГАТА ДИПРОПОКСИБАКТЕРИОПУРПУРИНА С ДОКСОРУБИЦИНОМ 2023
  • Абрамова Ольга Борисовна
  • Островерхов Петр Васильевич
  • Дрожжина Валентина Владимировна
  • Козловцева Екатерина Александровна
  • Архипова Любовь Михайловна
  • Грин Михаил Александрович
  • Иванов Сергей Анатольевич
  • Каприн Андрей Дмитриевич
RU2808909C1
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей 2015
  • Розиев Рахимджан Ахметджанович
  • Гончарова Анна Яковлевна
  • Еримбетов Кенес Тагаевич
  • Подгородниченко Владимир Константинович
  • Бондаренко Екатерина Валерьевна
RU2646497C2

Реферат патента 2008 года СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ИЗБИРАТЕЛЬНЫМ РАДИО- И ХИМИОЗАЩИТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию средства, обладающего избирательным радио- и химиозащитным действием на поврежденные нормальные ткани. Средство содержит денатурированную, эмульгированную, дезагармоновую плаценту, т.е. без примеси гормонов, а также гиалуроновую кислоту, мед натуральный, натуральное оливковое масло и крахмал картофельный в соотношениях, обеспечивающих выраженный избирательный терапевтический эффект. Средство не вызывает токсические реакции, обладает способностью стимулировать кроветворение путем увеличения пула клеток-предшественников. 5 табл.

Формула изобретения RU 2 339 386 C1

Средство, обладающее избирательным радио- и химиозащитным действием, включающее денатурированную, эмульгированную, дезагормоновую плаценту, гиалуроновую кислоту, мед натуральный, оливковое масло натуральное и крахмал картофельный при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

мед натуральный20-35оливковое масло натуральное20-25крахмал картофельный10-15гиалуроновая кислота0,062-0,19денатурированная, эмульгированная,дезагормоновая плацентаостальное

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2008 года RU2339386C1

Федеральный реестр БАД
- СПб., 2005, с.279
Федеральный реестр БАД
- М., 2002, с.386
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РАДИАЦИОННОГО ПОРАЖЕНИЯ 2002
  • Любимов Ю.И.
  • Малинина Т.Г.
  • Андрианова И.Е.
  • Глушков В.А.
RU2235551C2
ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ РАДИАЦИОННЫХ ПОРАЖЕНИЙ 1995
  • Лосев Юрий Павлович[By]
  • Амадян Масис Гарегинович[Am]
  • Хлюстов Станислав Валентинович[By]
  • Пленина Людмила Васильевна[By]
  • Оганесян Николай Месропович[Am]
  • Абрамян Арменуи Карапетовна[Am]
  • Федулов Александр Сергеевич[By]
  • Шагоян Аида Гургеновна[Am]
  • Хачкаванкцян Асмик Степановна[Am]
RU2108791C1
РАДИОПРОТЕКТОР 1992
  • Минухин Валерий Владимирович[Ua]
  • Цыганенко Анатолий Яковлевич[Ua]
  • Иванова Нина Николаевна[Ua]
  • Петров Василий Иванович[Ua]
  • Темиров Юрий Павлович[Ua]
  • Пилипенко Николай Иванович[Ua]
  • Ткаченко Виктория Леонидовна[Ua]
  • Абрамова Лилия Павловна[Ua]
  • Звягинцева Татьяна Владимировна[Ua]
  • Васильченко Валерий Николаевич[Ua]
  • Кузьминова Ирина Анатольевна[Ua]
  • Лосева Елена Владимировна[Ua]
RU2049469C1

RU 2 339 386 C1

Авторы

Коноплянников Анатолий Георгиевич

Любимова Елена Юрьевна

Малинина Татьяна Георгиевна

Даты

2008-11-27Публикация

2007-03-16Подача