Способ лечения острого послеродового эндометрита у коров Российский патент 2022 года по МПК A61K35/66 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для терапии острого послеродового эндометрита у коров.

Острые послеродовые эндометриты, диагностируемые у 40-70% новотельных коров, продолжают оставаться наиболее значимыми проблемами молочного скотоводства и ветеринарного акушерства. Данная патология способна вызывать нарушение репродуктивной функции, снижение продуктивности, а также повышать затраты на проведение лечебных мероприятий, что влечет за собой большие экономические потери. Послеродовой эндометрит - воспаление преимущественно слизистой оболочки матки. В зависимости от характера воспаления послеродовой эндометрит подразделяется на катаральный, гнойно-катаральный и фибринозный [Нежданов А.Г., Шабунин С.В., Михалев В.И., Филин В.В., Скориков В.Н. Послеродовой метрит у молочных коров // Ветеринария. - 2016. - №8. - С. 4-10].

Основным способом терапии острого послеродового эндометрита является антибактериальная терапия. Однако, необоснованно широкое применение антибиотических препаратов, вызывает ускоренную селекцию лекарственноустойчивых популяций патогенных микроорганизмов и усиление патогенного действия инфекционных агентов [Ильинский Е.В. О некоторых последствиях лекарственной терапии используемой в акушерско-гинекологической практике // Тезисы международной конференции. - Рига, 1997. - С. 68-70].

В последнее время для терапии острых послеродовых эндометритов у коров находят способы лечения без применения антибиотических средств. К группе таких средств относятся ферментные препараты, позволяющие получить достаточно высокую терапевтическую эффективность, повысить качество и безопасность животноводческой продукции.

Известен способ лечения острого послеродового эндометрита у коров, включающий введение в матку антимикробного средства - эмульсии, состоящей из стерильного подсолнечного масла, препарата АСД-3 и окситетрациклина, для приготовления которой берут 1000 мл стерильного подсолнечного масла, добавляют 35 мл препарата АСД-3 и 30 мл окситетрациклина-200. Полученную эмульсию выдерживают при комнатной температуре в течение суток, перед введением подогревают до температуры 38-39°С и вводят в дозе 110-150 мл на одно животное 2-3 раза с интервалом 48 часов [RU №2504383 C1, A61K 31/65, A61K 35/12, A61K 36/28, опубл. 20.01.2014 Бюл.№2].

Недостатком данного способа является низкая терапевтическая эффективность лечения и трудоемкое приготовление эмульсии.

Известен способ лечения острого эндометрита у коров, предусматривающий применение препарата «Метромикобаксан» внутриматочно в дозе 100 мл с интервалом 72 часа, утеротона в дозе 10 мл один раз в сутки, в промежутках между внутриматочными введениями и препарата «Лонгидаза» пятикратно с 48-часовым интервалом, начиная с первого дня терапии в дозе 3000 МЕ/животное внутримышечно. Терапевтическая эффективность способа лечения составляет 70,0% [Хохлов А.В., Роменский Р.В., Фурманов И.Л., Бреславец В.М., Роменская Н.В. Ферментный препарат «Лонгидаза» в лечении коров с острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом // Современные проблемы науки и образования. - 2015. - №2 (часть 2). - С. 135-139].

Недостатком данного способа терапии является недостаточно высокая терапевтическая эффективность.

Известен способ лечения острого эндометрита у коров, предусматривающий внутриматочное введение пробиотического препарата фометрин по 4 суппозитория 1 раз в день в течение 5-7 дней, плаценты денатурированной эмульгированной в дозе 20 мл трижды с 48-часовым интервалом и утеротона внутримышечно в дозе 10 мл трехкратно с 24-часовым интервалом. Эффективность способа терапии острого эндометрита у коров составляет 80,0% [Беляева Н.Ю., Чекункова Ю.А., Ашенбреннер А.И., Хаперский Ю.А., Кроневальд Е.А. Применение пробиотического препарата фометрин при лечении острого эндометрита у коров // Вестник Курганской ГСХА. - 2017. - №4. - С. 21-23].

Недостатком данного способа терапии является трудоемкость инъекции плацентарного препарата в виде эмульсии, низкая эффективность терапии при внутриматочном применении препаратов в форме суппозиториев.

Наиболее близким техническим решением, взятым за прототип, является способ лечения острого послеродового эндометрита у коров, предусматривающий трехкратное введение препарата плацента денатурированная эмульгированная на 1, 5 и 9-й день подкожно в дозе 5 мл/100 кг массы тела, 15% раствор АСД-2Ф на тривитамине внутримышечно в дозе 10 мл в 1, 3 и 5 дни лечения в сочетании с инъекциями 2%-ного масляного раствора синестрола в дозе 0,6 мл/100 кг массы тела на 1 и 2 день и введением окситоцина в дозе 10 ЕД/100 кг массы тела со 2-го по 5-й день, а также тетраметра внутриматочно, начиная с 1-го дня, в дозе 150 мл дважды с интервалом 48 ч и в последующем - по 100 мл. При данном способе лечения клиническое выздоровление зарегистрировано у 86,7% животных [Чупрын С.В., Михалев В.И. Комплексная терапия коров при послеродовом эндометрите // Ветеринария. - 2011. - №2. - С. 48-50].

Однако у данного способа терапии послеродового эндометрита у коров недостаточно высокая терапевтическая эффективность, а также продолжительные сроки браковки молока по причине применения антибиотика.

Технический результат изобретения - повышение эффективности терапии послеродового эндометрита у коров, снижение продолжительности бесплодия и коэффициента оплодотворения, снижение микробной контаминации матки.

Для достижения технического результата в способе лечения острого послеродового эндометрита у коров, включающем парентеральное введение препарата плацента денатурированная эмульгированная на 1, 5 и 9-й день в дозе 5 мл/100 кг массы тела, 15% раствора АСД-2Ф на тривитамине в дозе 10 мл в 1, 3 и 5 дни лечения и миотропного средства, согласно изобретению, дополнительно внутриматочно, начиная с 1-го дня, вводят препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D в дозе 100 мл трижды с 24-часовым интервалом, а в качестве миотропного средства используют утеротон в дозе 10 мл/животное четырехкратно с 24-часовым интервалом с первого дня лечения.

Плацента денатурированная эмульгированная (ПДЭ) - тканевый препарат, изготовленный из плаценты человека. Содержит комплекс биологически активных веществ: 20 аминокислот (в т.ч. незаменимые), низкомолекулярные пептиды, протеины, липиды, коэнзим Q10, цитокины (интерлейкины, интерфероны, факторы роста), альфа-фетопротеин, высшие жирные кислоты, в т.ч. полиненасыщенные (линолевая, линоленовая, арахидоновая), сбалансированный природный комплекс витаминов (A, D, Е, С, В₁ В₂, В₃, В₄, В₅, В₆, В₁₂, Н), а также макро- и микроэлементы (Mg, Si, K, Na, Са, Fe, Mn, Zn, Cu, Se). Препарат оказывает противовоспалительное действие, положительно влияет на репаративные процессы, улучшает обмен веществ, стимулирует воспроизводительную функцию у животных, повышает резистентность организма. Увеличение лактации обеспечивается активными природными пептидами и жирными кислотами плаценты. Назначают для профилактики и лечения послеродовых болезней у коров и свиноматок (в том числе задержания последа, эндометритов, маститов, синдрома метрит-мастит-агалактия (ММА). Крупному рогатому скоту, пушным зверям, собакам и кошкам ПДЭ применяют подкожно. При задержании последа коровам инъецируют подкожно 30 мл препарата двукратно с интервалом 24-36 часов. При эндометрите или мастите коровам ПДЭ вводят подкожно в дозе 20 мл через каждые 48 часов 5-7 раз [Инструкция по применению Плаценты денатурированной эмульгированной для инъекций. Номер регистрационного удостоверения 24-3-30.12-1183 № ПВР-3-4.9/00209 от 06.12.2012].

«Антисептик-стимулятор Дорогова фракция 2» («АСД-2Ф») содержит в своем составе карбоновые кислоты, алифатические углеводороды, амины и амиды, алкилбензолы и замещенные фенолы, соединения с активной сульфгидрильной группой и др., а также воду. Препарат назначают сельскохозяйственным животным, птице и плотоядным животным для профилактики и лечения болезней желудочно-кишечного тракта, органов дыхания, мочеполовой системы, при поражениях кожных покровов, нарушениях обмена веществ, для стимуляции деятельности центральной и вегетативной нервной системы, повышения естественной резистентности у ослабленных и переболевших инфекционными и инвазионными болезнями, а также для стимуляции роста и развития молодняка сельскохозяйственных животных и птицы. При острых и хронических эндометритах, миометрите и пиометрите у коров вводят 15% раствор "АСД-2Ф" [АСД фракция 2 инструкция по применению. Номер регистрационного удостоверения 02-3-31.12-2370 № ПВР-3-1.2/00910 от 22.10.14].

Утеротон состоит из пропранолона гидрохлорида в качестве действующего вещества, лимонной кислоты, хлорэтона и натрия метабисульфита, в качестве консервантов, и воды для инъекций. В 1 мл утеротона содержится 5% пропранолона гидрохлорида. Утеротон оказывает блокирующее действие на β-адренорецепторы миометрия, что способствует проявлению активности эндогенного окситоцина, вследствие чего усиливаются сокращения гладкой мускулатуры матки и молочной железы. Утеротон применяют для стимуляции родов, при атонии, гипотонии матки, лечения и профилактики задержания последа, субинволюции матки, послеродовых эндометритов у коров и синдрома «метрит-мастит-агалактия» у свиноматок, повышения оплодотворяемости, извлечения эмбрионов у коров-доноров. Утеротон вводят внутримышечно или внутривенно в дозе 10 мл на корову и 5 мл на свиноматку [Инструкция по применению препарата утеротон для стимуляции родов, лечения и профилактики гинекологических заболеваний у коров и синдрома «метрит-мастит-агалактия» у свиноматок. Номер регистрационного удостоверения 44-3-10.17-3857 № ПВР-3-5.0/00530 от 29.08.2017].

Препарат с рабочим названием ПАО-1, разработанный во ФГБНУ «ВНИВИПФиТ», в качестве действующего вещества содержит фермент протеиназу, выделенную из культуральной жидкости микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D, представляющую собой негликозилированный белок сериновую протеиназу [Осмоловский А.А., Звонарева Е.С., Крейер В.Г., Баранова Н.А., Егоров Н.С. Секреция протеиназ с фибринолитической активностью микромицетами рода Aspergillus //Вестник Московского университета. Серия 16. Биология. - 2018. - №73 (1). - С. 47-51]. Препарат ПАО-1 по внешнему виду представляет собой суспензию для внутриматочного введения, расфасованную по 1000 мл в бутылки полимерные, закрытые навинчиваемыми полиэтиленовыми крышками.

Сущность технического решения изобретения поясняется примерами.

Пример 1. Изучение эффективности заявляемого способа терапии острого послеродового эндометрита у коров проведено на 29 животных, разделенных по принципу аналогов на две группы.

Животных первой группы (прототип, n=15) подвергали комплексному лечению с применением миотропных (инъекции 2%-ного масляного раствора синестрола в дозе 0,6 мл/100 кг массы тела на 1 и 2 день и введение окситоцина в дозе 10 ЕД/100 кг массы тела со 2-го по 5-й день), общестимулирующих (трехкратное введение препарата плацента денатурированная эмульгированная на 1, 5 и 9-й день подкожно в дозе 5 мл/100 кг массы тела и 15% раствора АСД-2Ф на тривитамине внутримышечно в дозе 10 мл/животное в 1, 3 и 5 дни лечения) и этиотропных (тетраметр внутриматочно, начиная с 1-го дня, в дозе 120-150 мл/животное с 48-часовым интервалом) средств.

Коровам второй группы (заявляемый способ, n=14) инъецировали миотропные (утеротон внутримышечно в дозе 10 мл/животное четырехкратно с 24-часовым интервалом с первого дня лечения) и общестимулирующие (плацента денатурированная эмульгированная на 1, 5 и 9-й день подкожно в дозе 5 мл/100 кг массы тела и 15% раствор АСД-2Ф на тривитамине внутримышечно в дозе 10 мл в 1,3 и5 дни лечения) средства, а также внутриматочно, начиная с 1-го дня, вводили препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D в дозе 100 мл на животное трижды с 24-часовым интервалом.

Животных подвергали ежедневному клиническому обследованию. Учитывали время исчезновения клинических признаков заболевания, количество выздоровевших животных, результаты осеменения и оплодотворения, продолжительность периода от отела до оплодотворения.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.

Из приведенных в таблице 1 данных следует, что комплексное лечение коров с острым послеродовым эндометритом с использованием прототипа сопровождается выздоровлением 73,3% животных в среднем через 13,2±0,56 дней. Наиболее эффективным оказалось лечение с применением заявляемого способа, сопровождающееся клиническим выздоровлением 92,9% животных, что на 19,6% больше по сравнению с животными группы прототипа, при сокращении продолжительности выздоровления на 17,4%. Коэффициент оплодотворения после проведенного лечения с использованием заявляемого способа терапии меньше на 16,0% в сравнении с прототипом, а период от отела до оплодотворения - на 14,7%.

Высокая клиническая эффективность заявляемого способа подтверждается результатами лабораторных исследований крови и шеечно-вагинального экссудата (пример 2, табл.2).

Пример 2. Перед началом лечения и после были отобраны пробы крови для проведения лабораторных исследований. Результаты представлены в таблице 2.

В группе коров после лечения с использованием прототипа установлено снижение в крови содержания лейкоцитов на 23,6% (в том числе эозинофилов - на 14,3%, палочкоядерных нейтрофилов - на 16,7%, моноцитов - на 14,3%), средних молекулярных пептидов (СМП) - на 13,1% и индекса эндогенной интоксикации (ИЭИ) - на 12,6%, а также повышение концентрации витамина А на 17,4%, активности каталазы - на 19,7% и глутатионпероксидазы (ГПО) - на 31,7%.

В группе коров после лечения с использованием заявляемого способа, изменения показателей обмена веществ свидетельствуют о снижении воспалительного процесса в матке, интенсивности перекисного окисления липидов, активизации гуморального и клеточного звена иммунитета, ферментативного и неферментативного звена антиоксидантной защиты. Отмечено снижение концентрации лейкоцитов на 29,2%, эозинофилов - на 26,4%, палочкоядерных нейтрофилов - на 23,8%, моноцитов - на 22,4%, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) - на 27,3%, малонового диальдегида (МДА) - на 23,3%, СМП - на 35,0%, ИЭИ - на 24,1%, при повышении содержания общих иммуноглобулинов - на 51,7%, фагоцитарного числа (ФЧ) - на 28,0%, витамина А - на 26,1%, витамина Е - на 28,5%, витамина С - на 29,9%, активности каталазы - на 31,2%, ГПО - на 54,8%.

Пример 3. Перед лечением и по окончании терапевтического курса отобраны пробы шеечно-вагинального экссудата для проведения бактериологических исследований (степень микробной контаминации и видовой состав микрофлоры). Результаты представлены в таблице 3.

При микробиологическом исследовании больных острым послеродовым эндометритом коров было установлено, что микрофлора в основном представлена ассоциациями грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов и микроскопических грибов.

Установлено, что терапия острого послеродового эндометрита у коров с применением прототипа сопровождается снижением общей микробной контаминации матки коров в 6,8 раза. Микрофлора маточного содержимого коров после терапевтического курса с применением прототипа представлена Е. coli - 13,3% случаев, Proteus vulgaris - 6,7%, Ent. faecalis - 6,7%, свидетельствующее о неполной санации полости матки в процессе лечения.

После комплексного лечения коров с применением заявляемого способа степень микробной контаминации матки составила 384,1±19,3 КОЕ/мл, что в 9,0 раз меньше по сравнению с больными животными и на 24,2% - чем у животных группы прототипа. Из маточного содержимого выздоровевших коров изолированы в небольшом количестве представители индигенной нормальной микрофлоры слизистых: Ent. faecium - 21,4% и Staph, epidermidis - 14,3%, что подтверждает клиническую эффективность лечения.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для терапии острого послеродового эндометрита у коров. Коровам инъецируют утеротон внутримышечно в дозе 10 мл/животное четырехкратно с 24-часовым интервалом с первого дня лечения, и плаценту денатурированную эмульгированную на 1, 5 и 9-й день подкожно в дозе 5 мл/100 кг массы тела, и 15% раствор АСД-2Ф на тривитамине внутримышечно в дозе 10 мл в 1, 3 и 5 дни лечения, а также внутриматочно, начиная с 1-го дня, вводят препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D в дозе 100 мл на животное трижды с 24-часовым интервалом. 3 табл., 3 пр.

Способ лечения острого послеродового эндометрита у коров, включающий парентеральное введение препарата плацента денатурированная эмульгированная на 1, 5 и 9-й день в дозе 5 мл/100 кг массы тела, 15% раствора АСД-2Ф на тривитамине в дозе 10 мл в 1, 3 и 5 дни лечения и миотропного средства, отличающийся тем, что дополнительно внутриматочно, начиная с 1-го дня, вводят препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D в дозе 100 мл трижды с 24-часовым интервалом, а в качестве миотропного средства используют утеротон в дозе 10 мл/животное четырехкратно с 24-часовым интервалом с первого дня лечения.