СРЕДСТВО ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К АНТИМИКРОБНЫМ ПРЕПАРАТАМ Российский патент 2005 года по МПК C12Q1/04 C12Q1/18 C12N1/36 A61K35/08 

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано для повышения чувствительности микроорганизмов (бактерий, грибков).

Известен димексид (диметилсульфоксид) - препарат, применяемый для местной терапии заболеваний кожи (пиодермии, рожа, трофические язвы), при ожогах, ушибах и артритах. Помимо собственного противовоспалительного, местноанестезирующего и антисептического действия, димексид повышает чувствительность микробов, в том числе устойчивых к антибиотикам.

Обладает местнораздражающим действием: возможны легкое жжение, зуд, эритема, небольшие кожные высыпания.

Противопоказано применение при беременности, тяжелых поражениях паренхиматозных органов, стенокардии, инфаркте миокарда, инсультах, коматозных состояниях, выраженном атеросклерозе (Даниленко М.В., Туркевич Н.М. “Клиническое применение димексида”, Киев, 1976; “Лекарственные средства, применяемые в медицинской практике в СССР” под ред. М.А.Клюева, М., 1989).

Недостатки: низкая эффективность, наличие противопоказаний.

Изобретение направлено на решение задачи: уменьшение противопоказаний, расширение арсенала средств для повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам.

Поставленные задачи достигаются использованием питьевой минеральной воды (ПМВ) “Обуховская” с общей минерализацией 1,8-2,2 г/л в качестве средства для повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам.

Гидрокарбонатная хлоридо-натриевая ПМВ “Обуховская” применяется для питьевого лечения, полоскания зева, ванн, промывания кишечника, микроклизм, бассейна.

Химический состав минеральной воды “Обуховская” при рН 8,0:

При исследовании микрокомпонентного состава в ней обнаружено серебро, алюминий, бор, кобальт, железо, титан, марганец, бром, значительное количество меди. Растворенные в воде газы представлены азотом, метаном, углекислотой, сероводородом. Специфическими компонентами воды “Обуховская” являются органические вещества. По составу она относится к водам гумусового типа.

В качестве средства для повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам данная вода “Обуховская” ранее не использовалась.

Примеры конкретного выполнения, подтверждающие эффективность ПМВ.

В экспериментах использованы референс - штаммы гноеродных бактерий (S.aureus, Ps.aeruginosa, E.coli), а также клинические изоляты золотистого и эпидермального стафилококков (S.aureus, S.epidermidis), бета-гемолитического стрептококка (Str.pyogenes), энтеробактерий (E.coli, Proteus vulgaris) и дрожжеподобных грибков (Candida albicans). Всего использовано 35 микробных культур.

В качестве источника ПМВ “Обуховская” использовали коммерческие упаковки (пластиковые бутыли емкостью 1,5 л). Для контроля применяли 0,85%-ный стерильный раствор хлористого натрия (изотонический раствор).

Перед проведением исследований выращивали суточные (для грибков - двухсуточные) культуры на плотной питательной среде, из которых готовили смыв (маточную взвесь) при помощи стерильного изотонического раствора хлорида натрия. Поставлены эксперименты с применением дискодиффузионного метода.

Для воздействия ПМВ “Обуховская” на исследуемые культуры проводили контакт взвеси культур с ПМВ в течение 1 часа. После этого взвеси культур концентрировали центрифугированием и стандартизовали по плотности. Стандартизацию полученных взвесей производили с помощью стандарта мутности Государственного НИИ стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. Л.А.Тарасовича.

Далее при использовании дискодиффузионного метода стандартизованные взвеси засевали газоном на чашки с питательным агаром. Затем наносили на поверхность агара диски с антимикробными препаратами. Контролем служили чашки с засевами культур, контактировавших с изотоническим раствором. Результаты оценивали по наличию (или отсутствию) разницы в диаметрах зон угнетения роста в опыте и контроле.

В качестве препаратов изучения использовали: для грамотрицательных бактерий - Ампиокс, Цефотаксим (клафоран), Гентамицин, Полимиксин М и Ципрофлоксацин; для грамположительных - Ампиокс, Цефотаксим (клафоран), Гентамицин, Линкомицин и Ципрофлоксацин. Дрожжеподобные грибки исследовали на чувствительность к Кетоконазолу (низоралу), Флуконазолу (дифлюкану), Итраконазолу (орунгалу), Натамицину (пимафуцину) и Клотримазолу.

Статистическая обработка полученных данных с учетом их особенностей (пары значений “опыт” и “контроль”) проведена с использованием парного критерия Уилкоксона и парного критерия Стьюдента при помощи компьютерной программы “Биостат”.

Пример 1. Влияние ПМВ “Обуховская” на уровень лекарственной устойчивости грамположительных бактерий (культура золотистого стафилококка)

Показатели чувствительности культур золотистого стафилококка к антибактериальным препаратам, средний диаметр зоны угнетения роста, мм M±mпрепаратысредние показателиуровень достоверности покоэффициент опыт/контр опытконтрольСтьюдентуУилкоксону ампиокс11,00±1,239,20±1,020,009<0,0621,20цефотаксим17,00±1,6415,00±1,730,011<0,0621,13гентамицин18,40±1,6716,80±1,160,003<0,0621,10линкомицин15,80±2,0814,00±2,390,009<0,0621,13ципрофлокс.10,20±0,868,80±0,580,052*1,16Примечание: * - недостаточна выборка для вычислений

Пример 2. Влияние ПМВ “Обуховская” на уровень лекарственной устойчивости грамотрицательных бактерий (культура Е.соli)

Показатели чувствительности культур кишечной палочки к антибактериальным препаратам, средний диаметр зоны угнетения роста, мм M±mпрепаратысредние показателиуровень достоверности покоэффициент опыт/контр опытконтрольСтьюдентуУилкоксону ампиокс17,60±1,4716,20±1,360,005<0,0621,09цефотаксим24,00±1,4121,80±1,560,004<0,0621,10гентамицин25,80±8,8623,60±0,810,02<0,0621,09полимиксин М16,00±0,7111,80±0,730,002<0,0621,36ципрофлокс.22,80±0,6622,20±0,580,07*1,03Примечание: * - недостаточна выборка для вычислений

Пример 3. Влияние ПМВ “Обуховская” на уровень лекарственной устойчивости дрожжеподобных грибков рода Candida.

Показатели чувствительности культур дрожжеподобных грибков к антибактериальным препаратам, средний диаметр зоны угнетения роста, мм M±mпрепаратысредние показателиуровень достоверности покоэффициент опыт/контр опытконтрольСтьюдентуУилкоксону Кетоконазол22,57±0,9518,86±0,550,000<0,0161,20Флуконазол24,29±1,5121,57±1,340,02<0,0161,13Итраконазол10,57±0,678,14±0,510,012<0,0321,30Натамицин14,14±0,9911,71±0,090,000<0,0161,21Клотримазол16,86±0,5514,43±0,920,002<0,0161,17

Пример 4. Показатели чувствительности культур эпидермального стафилококка к антибактериальным препаратам, средний диаметр зоны угнетения роста, мм М±m

препаратысредние показателиуровень достоверности покоэффициент опыт/контр опытконтрольСтьюдентуУилкоксону ампиокс16,00+1,0014,40+1,250,078*1,11цефотаксим23,00+1,4120,20+1,070,002<0,0621,14гентамицин16,20+0,8614,60+1,030,035*1,11линкомицин19,40+1,3318,00+1,520,052*1,08ципрофлокс.9,33+0,337,67+0,330,038*1,22Примечание: * - недостаточна выборка для вычислений

Пример 5. Показатели чувствительности культур бета-гемолитического стрептококка к антибактериальным препаратам, средний диаметр зоны угнетения роста, мм М±m

препаратысредние показателиуровень достоверности покоэффициент опыт/контр опытконтрольСтьюдентуУилкоксону ампиокс22,20±0,9720,00±0,550,011<0,0621,11цефотаксим27,60±1,4426,00±1,520,035*1,06гентамицин23,00±1,8721,60±1,750,005<0,0621,06линкомицин20,40±0,8718,80±0,660,035*1,09ципрофлокс.14,80±0,0613,20±0,920,078*1,12Примечание: * - недостаточна выборка для вычислений

Пример 6. Показатели чувствительности культур вульгарного протея к антибактериальным препаратам, средний диаметр зоны угнетения роста, мм М±m

препаратысредние показателиуровень достоверности покоэффициент опыт/контр опытконтрольСтьюдентуУилкоксону ампиокс11,60±0,689,20±0,860,009<0,0621,26цефотаксим14,20±0,8612,80±0,660,005<0,0621,11гентамицин17,00±0,8415,20±0,920,009<0,0621,12линкомицин М11,80±0,588,80±0,660,005<0,0621,34ципрофлокс.21,20±0,6619,60±0,680,035*1,08Примечание: * - недостаточна выборка для вычислений

Применение ПМВ “Обуховская” позволяет значительно повысить чувствительность микроорганизмов, в том числе бактерий, грибков к антимикробным препаратам и расширить ассортимент средств для этой цели.

Средство не имеет противопоказаний.

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к средствам для повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. В качестве средства для повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам применяют гидрокарбонатную хлоридо-натриевую питьевую минеральную воду “Обуховская” с общей минерализацией 1,8-2,2 г/л, ранее применяемую как средство для лечения атопических дерматитов, а также в качестве средства для лечения йоддефицитных состояний. Экспериментально, с использованием метода дисков, показано, что минеральная вода “Обуховская” позволяет повысить чувствительность микроорганизмов, в том числе грибков, к антимикробным препаратам, таким как антибиотики и специфические препараты против дрожжеподобных грибков. 6 табл.

Применение гидрокарбонатно-хлоридонатриевой питьевой минеральной воды “Обуховская” с общей минерализацией 1,8-2,2 г/л в качестве средства для повышения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам.