АКТИВАТОРЫ ИЗОИНДОЛИН-1-ОН-ГЛЮКОКИНАЗЫ Российский патент 2005 года по МПК C07D401/12 C07D403/12 C07D413/12 C07D417/12 C07D401/12 C07D209/46 C07D213/60 C07D403/12 C07D209/46 C07D241/20 C07D413/12 C07D209/46 C07D263/58 C07D417/12 C07D209/46 C07D277/42 A61K31/404 A61P3/08 

Глюкокиназа (ГК) является одной из четырех гексокиназ, обнаруженных в организме млекопитающих (Colowick S.P., The Enzymes, т.9 (Р.Воуег, ed.) Academic Press, New York, NY, c.1-48 (1973)). Гексокиназы катализируют первую стадию метаболизма глюкозы, т.е. превращение глюкозы в глюкозо-6-фосфат. Глюкокиназа присутствует далеко не во всех типах клеток, а содержится главным образом в панкреатических β-клетках и в паренхимных клетках печени. Кроме того, ГК является скорость-определяющим ферментом метаболизма глюкозы в этих двух типах клеток, которые, как известно, играют решающую роль в гомеостазе глюкозы целого организма (Chipkin S.R., Kelly K.L. и Ruderman N.B., Joslin’s Diabetes, C.R. Khan и G.C.Wier, eds., Lea и Febiger, Филадельфия, PA, c.97-115 (1994)). Концентрация глюкозы, при которой ГК проявляет половину максимальной активности, составляет 8 мМ. Остальные три гексокиназы насыщаются глюкозой при существенно более низкой концентрации (<1 мМ). Следовательно, поступление глюкозы за счет глюкокиназного (ГК) пути возрастает по мере роста концентрации глюкозы в крови от “голодного” (5 мМ) до “послеобеденного” (~10-15 мМ) уровня после углеводного питания (Printz R.G., Magnuson М.А. и Granner D.K., Ann. Rev. Nutrition, т.13, R.E.Olson, D.M.Bier и D.B.McCormick, eds., Annual Review, Inc., Palo Alto, CA, c.463-496 (1993)). Десять лет назад эти данные стимулировали появление гипотезы, что в β-клетках и гепатоцитах ГК функционирует в качестве глюкозного сенсора (Meglasson M.D. и Matschinsky F.M., Amer. J. Physiol., 246, E1-E13 (1984)). В последнее время исследования на трансгенных животных подтвердили, что ГК действительно играет решающую роль в гомеостазе глюкозы всего организма. Животные, не экспрессирующие ГК, погибают через несколько дней после рождения от острого диабета, тогда как животные с гиперэкспрессией ГК хорошо переносят глюкозу (Grupe A., Hiltgren В., Ryan А. и др., Cell, 83, 69-78 (1995), Ferrie Т., Riu E., Bosch F. и др., FASEB J., 10, 1213-1218 (1996)). Рост устойчивости к глюкозе связан благодаря ГК с увеличенной секрецией инсулина в β-клетках и с увеличенным отложением гликогена в гепатоцитах и, вероятно, с пониженным продуцированном глюкозы.

Данные о том, что появление диабета совершеннолетних типа II в юности (MODY-2) вызвано потерей гена ГК из-за функциональных мутаций, свидетельствуют о том, что ГК выступает в роли глюкозного сенсора и в организме человека (Liang Y., Kesavan P., Wang L. и др, Biochem. J., 309, 167-173 (1995)). Дополнительные факты, подтверждающие участие ГК в регуляции метаболизма глюкозы в организме человека, получены при выявлении пациентов, которые экспрессируют мутантную форму ГК с более высокой ферментативной активностью. Эти пациенты проявляют гипогликемию натощак, связанную с необычно высоким уровнем инсулина в плазме (Glaser В., Kesavan Р., Heyman M. и др., New England J. Med., 338, 226-230 (1998)). Хотя мутации в гене ГК у большинства пациентов с диабетом типа II не обнаружены, соединения, которые активируют ГК и тем самым увеличивают чувствительность ГК-сенсорной системы, все же могут найти применение при лечении гипогликемии, характерной для всех вариантов диабета типа II. Активаторы глюкокиназы увеличивают метаболизм глюкозы в β-клетках и гепатоцитах, который сопряжен с повышенной секрецией инсулина. Такие агенты могут найти применение при лечении диабета типа II.

В настоящем изобретении предлагается соединение, включающее амид формулы

где

А означает незамещенный фенил или фенил, одно- или двузамещенный галогеном или однозамещенный группой (низш.)алкилсульфонил, (низш.)алкилтио или нитро,

R¹ означает циклоалкил, содержащий от 3 до 9 атомов углерода, или (низш.)алкил, содержащий от 2 до 4 атомов углерода,

R² означает незамещенный или однозамещенный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, связанный через атом углерода в цикле с указанной аминогруппой, причем пяти- или шестичленный гетероароматический цикл содержит от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из ряда сера, кислород или азот, причем один гетероатом является атомом азота, соседним с атомом углерода, связанным с аминогруппой, а цикл является моноциклическим или конденсированным с фенилом по двум атомам углерода в цикле, причем указанный однозамещенный гетероароматический цикл является однозамещенным по атому углерода в цикле, который не является соседним с указанным атомом углерода, связанным с аминогруппой, а заместитель выбран из группы, включающей галоген, (низш.)алкил, нитро, циано, перфтор(низш.)алкил; гидрокси, -(CH₂)_n-OR³, -(CH₂)_n-C(O)-OR³, -(CH₂)_n-C(O)-NH-R³, -C(O)C(O)-OR³ и -(CH₂)_n-NHR³, где R³ означает водород или (низш.)алкил, а

n означает 0, 1, 2, 3 или 4, или его фармацевтически приемлемые соли, или N-оксиды.

Предпочтительно R² означает пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, связанный через атом углерода в цикле с аминогруппой, указанной в формуле I, причем указанный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл содержит от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из ряда сера, кислород и азот, причем один гетероатом является атомом азота, который является соседним с атомом углерода, связанным с аминогруппой. Этот цикл может быть моноциклическим или конденсированным с фенилом по двум атомам углерода в цикле. В одном из вариантов настоящего изобретения соседний атом азота в азотсодержащем гетероароматическом цикле может присутствовать в форме N-оксида, когда атом азота, соседний с атомом углерода в цикле, превращают в N-оксид.

С другой стороны, соединения формулы I могут существовать в форме фармацевтически приемлемых солей.

Установлено, что соединения формулы I активируют глюкиназу in vitro. Активаторы глюкокинзы применяются для увеличения уровня секреции инсулина при лечении диабета типа II.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I в смеси с фармацевтически приемлемым носителем и/или адъювантом. Кроме того, настоящее изобретение относится к применению таких соединений в качестве терапевтически активных соединений, а также к их применению при получении лекарственных средств для лечения или профилактики диабета типа II. Кроме того, настоящее изобретение относится к способу получения соединений формулы I. Настоящее изобретение относится также к способу профилактики или теравпевтического лечения диабета типа II, причем способ включает введение соединения формулы I человеку или животному.

Более подробно в изобретении предлагается соединение, включающее амид формулы I или N-оксид амида формулы I, указанной выше, а также их фармацевтически приемлемые соли.

В соединении формулы I знак "*" означает асимметрический атом углерода в конкретном соединении. Благодаря наличию асимметрического атома соединение формулы I может существовать в форме рацемата. Однако предпочтительны S-энантиомеры, где асимметрический атом углерода в амиде имеет S-конфигурацию. Если фенильный цикл А монозамещен группами (низш.)алкилсульфонил, нитро или (низш.)алкилтио, предпочтительно, чтобы он был замещен в 5 или 6 положении, как указано для формулы I. Таким образом, если А означает фенил, замещенный нитрогруппой, предпочтительно, чтобы этот заместитель находился в положении 5 или 6, т.е. если А означает 5-нитрофенил и 6-нитрофенил.

В одном варианте формулы I указанный выше цикл R² означает одно моноциклическое (неконденсированное) кольцо. Моноциклическое кольцо R² предпочтительно представляет собой незамещенный пиридин. В другом варианте формулы I указанный выше цикл R² означает бициклическую систему, т.е. цикл, конденсированный с фенилом.

Термин “(низш.)алкил”, используемый в тексте заявки, означает алкильные группы с прямой и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 10, предпочтительно от 3 до 9 атомов углерода, прежде всего от 2 до 4 атомов углерода, такие как пропил, изопропил, гептил и т.п.

Термин “циклоалкил”, используемый в тексте заявки, означает 3-9-членное циклоалкильное кольцо, предпочтительно 5-8-членное, например циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил.

Термин “перфтор(низш.)алкил”, используемый в тексте заявки, означает любую группу (низш.)алкил, где все атомы водорода в группе (низш.)алкил замещены или заменены на атом фтора. Предпочтительные перфтор(низш.)алкильные группы включают трифторметил, пентафторэтил, гептафторпропил и т.п.

Термин “(низш.)алкилтио”, используемый в тексте заявки, означает (низш.)алкил, имеющий значения, указанные выше, связанный с остатком молекулы через атом серы тиогруппы.

Термин “(низш.)алкилсульфонил”, используемый в тексте заявки, означает (низш.)алкил, имеющий значения, указанные выше, связанный с остатком молекулы через атом серы сульфонильной группы.

Термин “галоген”, используемый наряду с термином “гало”, означает, если не указано иное, все четыре галогена, т.е. фтор, хлор, бром и йод.

Термин “N-оксид”, используемый в тексте заявки, означает отрицательно заряженный атом кислорода, ковалентно связанный с заряженным положительно атомом азота в гетероароматическом цикле.

Термин “гетероароматический цикл”, используемый в тексте заявки, означает пяти- или шестичленное ненасыщенное карбациклическое кольцо, в котором один или более атомов углерода заменены на гетероатом, такой как кислород, азот или сера. Гетероароматическое кольцо может означать один цикл или оно может быть бициклическим, т.е. образованным за счет конденсации двух циклов.

Гетероароматический цикл R² может означать незамещенный или однозамещенный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей кислород, азот и серу, и связанный по атому углерода в цикле с амином указанной амидной группы. По меньшей мере один гетероатом является атомом азота, который является соседним с атомом углерода, связанным с аминогруппой. Если присутствуют другие гетероатомы, то они могут означать серу, кислород или азот. Цикл R² может означать одно кольцо. Такие гетероароматические циклы включают, например, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, изоксазолил, изотиазолил, пиразолил, тиазолил, оксазолил и имидазолил. Предпочтительным гетероароматическим циклом является пиридинил. Цикл R² может быть бициклическим, т.е. конденсированным с фенилом по двум свободным атомам углерода. Примерами таких циклов являются бензимидазолил, бензотиазолил, хинолинил, бензоксазолил и т.п. Цикл R² связан через атом углерода в цикле с амидной группой, образуя амиды формулы I. Атом углерода в гетероароматическом цикле, принимающий участие в амидной связи с образованием соединения формулы I, не может содержать никакой другой заметитель. Если R² означает незамещенный или однозамещенный пятичленный гетероароматический цикл, предпочтительными являются такие циклы, которые содержат атом азота, соседний с атомом углерода в цикле, связанным с аминогруппой, и второй гетероатом, соседний с атомом углерода в цикле, связанным с аминогруппой.

Группа -C(O)OR³, используемая в тексте заявки, означает -C(=O)OR³ и т.п.

Термин “фармацевтически приемлемые соли”, используемый в тексте заявки, включает любую соль неорганической или органической фармацевтически приемлемой кислоты, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, азотная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, лимонная кислота, муравьиная кислота, малеиновая кислота, уксусная кислота, янтарная кислота, винная кислота, метансульфокислота, пара-толуолсульфокислота и т.п. Кроме того, термин “фармацевтически приемлемые соли” включает любую фармацевтически приемлемую соль основания, такую как соль амина, соль триалкиламина и т.п. Специалист в данной области легко может получить такие соли по известным методикам.

Кроме того, изобретение относится к пролекарствам соединения формулы I. Пролекарство представляет собой метаболический предшественник лекарственного средства, который при введении пациенту превращается в лекарственное средство и приемлемые побочные продукты. Соединения по настоящему изобретению можно превратить в любое Пролекарство. Конкретным пролекарством по настоящему изобретению являются N-оксиды, указанные выше. В общем случае в виде пролекарства можно получить любое индивидуальное соединение по изобретению.

При проведении реакций, представленных ниже на Схеме и описанных в комментариях, различные функциональные группы, такие как свободные карбоксильные и свободные гидроксильные группы, можно защитить с использованием гидролизуемых сложных и простых эфиров. Термин “защитные группы в виде гидролизуемых сложных и простых эфиров”, используемый в тексте заявки, означает любую сложноэфирную группу или группу простого эфира, которая обычно применяется для защиты карбоновых кислот или спиртов и которая гидролизуется с образованием соответствующей карбоксильной или гидроксильной группы. Типичными сложноэфирными группами, которые используются для этих целей, являются такие группы, в которых ацильные остатки означают (низш.)алкановые, арил(низш.)алкановые или (низш.)алкандикарбоновые кислоты. Активированные производные, пригодные для получения таких групп, включают ангидриды кислот, галогенангидриды кислот, предпочтительно хлорангидриды или бромангидриды арил- или (низш.)алкановых кислот. Примерами ангидридов являются ангидриды монокарбоновых кислот, такие как ангидрид уксусной кислоты, ангидрид бензойной кислоты, и ангидриды (низш.)алкандикарбоновых кислот, например янтарный ангидрид, а также хлорформиаты, например, предпочтительны трихлор- и этилхлорформиат. Пригодной группой простого эфира для защиты спиртов являются, например, тетрагидропиранильные простые эфиры, такие как 4-метокси-5,6-дигидрокси-2Н-пиранильные простые эфиры. Другим примером простых эфиров являются ароилметиловые эфиры, такие как бензильные, бензгидрильные или тритильные простые эфиры или α-(низш.)алкокси(низш.)алкильные простые эфиры, например метоксиметильный или аллильный простой эфир или алкилсилильные простые эфиры, такие как триметилсилильный эфир.

Термин “аминозащитная группа” означает любую обычную аминозащитную группу, которая может расщепляться с образованием свободной аминогруппы. Предпочтительными защитными группами являются обычные аминозащитные группы, используемые в пептидном синтезе. Более предпочтительными являются прежде всего такие аминозащитные группы, которые расщепляются в слабокислой среде, приблизительно при рН 2-3. Более предпочтительными аминозащитными группами являются трет-бутилкарбамат (ВОС), бензилкарбамат (CBZ) и 9-флуоренилметилкарбамат (FMOC).

В предпочтительных соединениях формулы I R¹ означает циклоалкил, содержащий от 5 до 8 атомов углерода, а R² означает незамещенный или однозамещенный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, связанный через атом углерода в цикле с указанной аминогруппой, причем указанный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл содержит от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из ряда сера, кислород и азот, причем один гетероатом означает атом азота, который является соседним с атомом углерода в цикле, связанным с аминогруппой, причем цикл может содержать одно кольцо или может быть конденсирован с фенилом по двум атомам углерода в цикле, причем указанный однозамещенный гетероароматический цикл монозамещен по атому углерода, который не является соседним с указанным атомом углерода, связанным с аминогруппой, а заместитель выбран из группы, включающей галоген или (низш.)алкил (формула АВ). Как указано в формуле АВ, R² является моноциклическим кольцом (формула А) или бициклической системой за счет конденсации с фенилом (формула В). В соединениях формулы А группа R² более предпочтительно означает замещенный или незамещенный пиридин. Кроме того, R² предпочтительно означает циклогексил. Фенил А предпочтительно является незамещенным.

В предпочтительном соединении формулы I группа R¹ означает циклогексил, а R² означает моноциклическое кольцо (формулы А-1). В соединении формулы А-1 фенил А предпочтительно является незамещенным. Более предпочтительно группа R² означает замещенный или незамещенный пиридин.

В одном варианте формулы А-1 группа R² означает незамещенный пиридин, а в другом варианте группа R² означает однозамещенный пиридин. Предпочтительно заместитель означает галоген, такой как бром, фтор или хлор, или (низш.)алкил, такой как метил.

В другом варианте формулы А-1 группа R² означает однозамещенный пиримидин. Предпочтительно заместитель означает (низш.)алкил, такой как метил, а фенил А является незамещенным. Кроме того, R² может означать незамещенный пиримидин формулы А-1. Предпочтительно фенил А является незамещенным или замещенным в положении 4 или 7 группой (низш.)алкилсульфонил.

В еще одном варианте формулы А-1 группа R² означает незамещенный тиазол. В таких предпочтительных соединениях группа А означает фенил, незамещенный или замещенный в положениях 5 и 6 хлором, или замещенный в положении 5 группой нитро, или замещенный в положении 4 или 7 группой галоген или (низш.)алкилсульфонил.

В еще одном варианте формулы А-1 группа R² означает однозамещенный тиазол. Предпочтительно заместитель означает галоген, а группа А означает фенил, незамещенный или замещенный в положениях 5 и 6 хлором, или замещенный в положении 5 группой нитро, или замещенный в положении 4 или 7 группой галоген или (низш.)алкилсульфонил.

В еще одном варианте формулы А-1 R² означает незамещенный пиразин. Группа А означает фенил, незамещенный или замещенный в положении 4 или 7 группой галоген или (низш.)алкилсульфонил.

В еще одном варианте А-1, где R¹ означает циклогексил, а R² означает моноциклическое кольцо, R² означает незамещенный имидазол, а А означает предпочтительно незамещенный фенил.

В еще одном варианте формулы I или формулы А фенил А является незамещенным, R² означает моноциклическое кольцо, предпочтительно замещенный или незамещенный тиазол (формула А-2). В одних соединениях формулы А-2 группа R¹ означает циклопентил, в других группа R¹ означает циклогептил, в третьих группа R¹ означает циклооктил.

В предпочтительном соединении формулы I группа R² означает бициклическое гетероароматическое кольцо, образованое при конденсации с фенилом по двум атомам углерода в цикле, а R¹ означает циклогексил (формула В-1). В соединениях формулы В-1 фенил А предпочтительно является незамещенным. Кроме того, R² предпочтительно означает бензтиазол, бензимидазол, бензоксазол или хинолин, каждый из которых предпочтительно является незамещенным.

В еще одном предпочтительном варианте настоящего изобретения А означает незамещенный фенил или фенил, который, возможно, является замещенным группой фтор, (низш.)алкилсульфонил или (низш.)алкилтио в положении 4 или 7, или хлором в положении 5 или 6 или 5 и 6, или группой бром или нитро в положении 5 или 6. В другом предпочтительном варианте А означает незмещенный фенил или фенил, который является одно- или двузамещенным галогеном или однозамещенным группой (низш.)алкилсульфонил или нитро. Наиболее предпочтительно А означает незамещенный фенил или фенил, однозамещенный галогеном, предпочтительно фтором.

В еще одном предпочтительном варианте настоящего изобретения R¹ означает циклоалкил, содержащий от 3 до 9, предпочтительно от 5 до 8 атомов углерода. Наиболее предпочтительно группы R¹ означают циклопентил или циклогексил.

В еще одном предпочтительном варианте настоящего изобретения R² означает незамещенный или однозамещенный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, связанный через атом углерода в цикле с указанной аминогруппой, причем указанный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл содержит 1 или 2 гетероатома, выбранных из ряда сера, кислород и азот, причем один гетероатом означает атом азота, который является соседним с атомом углерода, связанным с аминогруппой, причем цикл является моноциклическим или конденсированным с фенилом по двум атомам углерода в цикле, причем указанный однозамещенный гетероароматический цикл замещен по атому углерода, который не является соседним с указанным атомом углерода, связанным с аминогруппой, а заместитель выбран из группы, включающей галоген и (низш.)алкил. В другом предпочтительном варианте R² означает гетероароматический цикл, выбранный из ряда тиазолил, хинолинил, пиридил, пиримидил, пиразинил, имидазолил, бензимидазолил, бензотиазолил или бензоксазолил, причем указанный гетероароматический цикл необязательно монозамещен галогеном, предпочтительно хлором или бромом, или (низш.)алкилом, предпочтительно метилом. Более предпочтительно гетероароматические циклические остатки R² выбраны из ряда тиазолил, пиримидил, пиразинил или пиридил, причем указанный гетероароматический цикл необязательно монозамещен галогеном, предпочтительно хлором или бромом, или (низш.)алкилом, предпочтительно метилом. Наиболее предпочтительно остаток R² означает незамещенный гетероароматический цикл, выбранный из ряда тиазолил, пиримидил, пиразинил или пиридил, или однозамещенный гетероароматический цикл, выбранный из ряда тиазолил, замещенный хлором, или пиридил, замещенный хлором, бромом или (низш.)алкилом, предпочтительно метилом.

Предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения, выбранные из группы, включающей

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(R)-N-(5-бромпиридин-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-

N-5-хлорпиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-

N-4-метилпиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-

N-5-метилпиридин-2-илпропионамид,

3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpимидин-4-илпpoпиoнaмид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpимидин-4-илпpoпиoнaмид,

(S)-N-3-циклогексил-N-(2-метилпиримидин-4-ил)-2-(1-оксо-

1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиaзoл-2-илпpoпиoнaмид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиaзoл-2-илпpoпиoнaмид,

(S)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-хлор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-хлор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5-нитро-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(6-нитро-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-фтор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-фтор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpaзин-2-илпpoпиoнaмид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-N-(1Н-имидазол-2-ил)-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

3-циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-N-бензотиазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-бензоксазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-хинолин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-

N-(1-оксипиридин-2-ил)пропионамид и

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид.

Наиболее предпочтительные соединения по настоящему изобретению выбраны из группы, включающей

3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамид,

N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-5-

хлорпиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-

ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-

ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-

N-5-метилпиридин-2-илпропионамид и

(R)-N-(5-бромпиридин-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид.

Соединения по настоящему изобретению можно получить по следующим схемам реакций, где фенил A, R¹, R² и R³ имеют значения, указанные для формулы I.

Схемы реакций

Схема 1

Схема 2

Схема 2 Ra означает галоген, Rb означает H или галоген

Ra означает нитро, Rb означает H

Ra означает (низш.)аклкилтио, (низш.)алкилсульфонил,

Rb означает H

Схема 3

Соединения по настоящему изобретению можно получить при взаимодействии замещенного орто-фенилендиальдегида 1 или 1’ с производным аминокислоты 2 или 2’ в соответствующем растворителе, таком как ацетонитрил, с образованием производного карбоновой кислоты 3 или 3’. Затем соединения 3 или 3’ можно конденсировать с соответствующим гетероароматическим амином H₂N-R² в обычных условиях образования амидной связи с образованием соединений формулы I.

Соединения формулы I, где фенил А замещен галогеном (полученным из галогенфталевой кислоты) или нитрогруппой, получают, как показано выше на схеме 2, где соединение 4 означает соответственно замещенную фталевую кислоту, которая является коммерческим препаратом. Замещенные орто-фталевые диальдегиды 1 или 1’ можно получить восстановлением фталевых кислот 4 с образованием промежуточных диодов и последующим окислением с образованием соединения 1’.

Соединения формулы I, где фенил А замещен группой (низш.)алкилсульфонил, можно получить из фталевой кислоты 4, где Ra означает фтор, a Rb означает водород, по следующей последовательности реакций:

а) превращение в соответствующий диметиловый эфир в метаноле в присутствии серной кислоты,

б) нуклеофильное замещение фтора тиометоксидом натрия в соответствующем растворителе, таком как диметилсульфоксид, с образованием соединения 4, где Ra означает (низш.)алкилтио,

в) восстановление полученной фталевой кислоты 4, где Ra означает (низш.)алкилтио, с образованием диола с последующим окислением в соответствующий орто-фенилендиальдегид 1, где Ra означает (низш.)алкилтио,

г) взаимодействие орто-фенилендиальдегида 1, где Ra означает (низш.)алкилтио, с аминокислотой 2 при кипячении с обратным холодильником в ацетонитриле с образованием смеси изомеров (низш.)алкилтиокарбоновой кислоты 3, и

д) конденсация с H₂N-R² с образованием соединений формулы I, где Ra означает (низш.)алкилтио.

Соединения формулы I, где Ra означает (низш.)алкилсульфонил, a Rb означает водород, получают сначала окислением (низш.)алкилтио-изомеров, полученных на стадии (г), пероксидом водорода с образованием (низш.)алкилсульфонилкарбоновой кислоты формулы 3 (где Ra означает (низш.)алкилсульфонил, а Rb означает водород), а затем конденсацией полученной карбоновой кислоты формулы 3 с H₂N-R² с образованием соединения формулы I, где Ra означает (низш.)алкилсульфонил.

Соединения формулы I, где R¹ означает С₃-С₉циклоалкил или С₂-С₄алкил (в R, S или рацемической форме) получают, как описано выше, причем соединение 2 или 2’ означает соответствующую аминокислоту, которая является коммерческим препаратом. Аминокислоту 2 или 2’ можно получить по схеме 3 из соединения 5. Соединение 5 получают по методике, описанной в литературе (см. O’Donnell M.J., Polt R.L., J. Org. Chem., 47, 2663-2666 (1982)), а затем вводят в реакцию с соответствующим алкилгалогенидом, замещенным необходимым R¹, в присутствии основания и после кислотного гидролиза получают любую аминокислоту 2. Алкилгалогениды являются коммерческими препаратами, или их можно получить известными методами.

Соединения формулы I, где R² имеет значения, указанные в формуле I, можно получить конденсацией необходимого гетероароматического амина (который является коммерческим препаратом, или его можно получить известными методами) с производным карбоновой кислоты 3 или 3’ в обычных условиях взаимодейстия амина с кислотой. N-Оксид гетероароматического амина (например, 2-аминопиридин-N-оксид) можно конденсировать с соединением 3 или 3’, или соответствующее соединение формулы I можно окислить известными способами по незамещенному циклу R² с получением N-оксида.

Если необходимо получить R или S изомер соединения формулы I, изомеры разделяют обычными физическими и химическими методами. Физические методы означают разделение энантиомерных пар соединений формулы I с использованием хроматографа для жидкостной хроматографии высокого разрешения на колонке, заполненной хиральным агентом. Предпочтительные химические способы включают взаимодейстие промежуточной карбоновой кислоты 3 или 3’ с оптически активным основанием. Для проведения разделения можно использовать любое обычное оптически активное основание. Предпочтительными оптически активными основаниями являются оптически активные амины, такие как альфа-метилбензиламин, хинин, дегидроабиетиламин и альфа-метилнафтиламин. При проведении этой реакции применяют обычные методики, используемые для разделения органических кислот в присутствии оптически активных органических оснований, содержащих аминогруппу.

При разделении изомеров соединение 3 или 3’ взаимодействует с оптически активным основанием в инертном органическом растворителе с образованием солей оптически активного амина с R и S изомерами соединения 3 или 3’. При получении таких солей температура и давление не имеют решающего значения, соль образуется при комнатной температуре и атмосферном давлении. Соли R и S изомеров можно разделить обычным способом, таким как фракционная кристаллизация. После кристаллизации каждую из солей превращают в соответствующее соединение 3 или 3’, имеющее R и S конфигурацию, кислотным гидролизом. Предпочтительными кислотами являются разбавленные водные растворы кислот, например, с концентрацией от приблизительно 0,001н. до 2н. растворов кислот, таких как серная или хлористоводородная кислоты. Конфигурация соединения 3 или 3’, которое получают эти методом разделения изомеров, сохраняется в ходе проведения всей последовательности реакций, а в результате получают требуемый R или S изомер формулы I или II. Разделение R и S изомеров можно проводить ферментативным гидролизом любых гидрокси(низш.)алкильных сложных эфиров соединений 3 или 3’ (см., например, Ahmar М., Girard С., Bloch R., Tetrahedron Lett., 7053 (1989)), который приводит к получению смеси соответствующей хиральной кислоты и хирального сложного эфира. Сложный эфир и кислоту можно разделить любым известным методом отделения кислоты от сложного эфира. Другим предпочтительным методом разделения рацематов соединений 3 или 3’ является получение соответствующих диастереомерных сложных эфиров или амидов. Эти диастереомерные сложные эфиры или амиды можно получить конденсацией карбоновых кислот 3 или 3’ с хиральным спиртом или хиральным амином. Реакцию проводят обычным методом конденсации карбоновой кислоты со спиртом или амином. Соответствующие диастереомеры производных карбоновых кислот 3 или 3’ можно разделить любым обычным методом разделения, например, ЖХВР. Полученные чистые диастереомерные сложные эфиры или амиды можно затем гидролизовать с получением соответствующих чистых R или S изомеров. Гидролиз проводят любыми обычными методами гидролиза сложных эфиров или амидов, исключающими рацемизацию.

Благодаря способности активировать глюкокиназу соединения формулы I можно использовать в качестве лекарственных средств для лечения диабета типа II. Следовательно, как указано выше, объектом настоящего изобретения являются также лекарственные препараты, содержащие соединение формулы I, и способ получения таких лекарственных препаратов, причем указанный способ включает переработку одного или более соединений формулы I и, при необходимости, одного или более других терапевтически ценных соединений в готовую галеновую форму, например, смешивание соединения формулы I с фармацевтически приемлемым носителем и/или адъювантом.

Фармацевтические композиции можно вводить пероральным способом, например, в форме таблеток, таблеток в оболочке, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий. Ввведение можно также проводить ректальным способом, например, используя суппозитории, местным и чрескожным способом, например, используя мази, кремы, гели или растворы, или парентеральным способом, например внутривенным, внутримышечным, подкожным, подоболочечным или чрескожным способами, с использованием, например, инъекционных растворов. Кроме того, введение можно проводить подъязычным способом или в виде аэрозоля, например, в форме спрея. При получении таблеток, таблеток в оболочке, драже или твердых желатиновых капсул соединения по настоящему изобретению смешивают с фармацевтически инертными неограническими или органическими эксципипентами. Например, пригодные эксципиенты для таблеток, драже или твердых желатиновых капсул включают лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк или стеариновую кисилоту или ее соли. Пригодные эксципиенты для мягких желатиновых капсул включают, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые или жидкие полиолы и т.п., однако в зависимости от свойств активных ингредиентов в случае мягких желатиновых капсул эксципиент может оказаться ненужным. Эксципиенты для получения растворов и сиропов включают, например, воду, полиолы, сахарозу, инвертированный сахар и глюкозу. Эксципиенты для инъекционных растворов включают, например, воду, спирты, полиолы, глицерин и растительные масла. Эксципиенты для суппозиториев и местного или чрескожного введения включают, например, растительные и отвержденные масла, воски, жиры и полутвердые или жидкие полиолы. Фармацевтические композиции могут также содержать консерванты, солюбилизирующие агенты, стабилизирующие агенты, смачивающие агенты, эмульгаторы, подсластители, красители, ароматизаторы, соли для регуляции осмотического давления, буферные вещества, вещества оболочки или антиоксиданты. Как указано выше, композиции могут также содержать другие терапевтически ценные вещества. Предполагается, что все используемые при получении лекарственных препаратов адъюванты являются нетоксичными.

Предпочтительными формами применения являются внутривенный, внутримышечный или пероральный способ введения, наиболее предпочтителен пероральный способ. Дозы, в которых соединения формулы I вводят в эффективном количестве, зависят от природы конкретного активного ингредиента, возраста и состояния пациента, и способа введения. В общем случае речь идет о дозах приблизительно 1-100 мг/кг массы тела в сутки.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами, не ограничивающими его объем, указанный в пунктах формулы изобретения.

Примеры синтеза

Пример 1

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовая кислота

Смесь гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (5,00 г, 29,2 ммоля) и фталевого дикарбоксальдегида (4,21 г, 31,3 ммоля) в ацетонитриле (120 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 20 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем до 0°С. Твердое вещество отделяли фильтрованием и однократно промывали холодным ацетонитрилом (50 мл), при этом получали 6,54 г (выход 78%) (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₁₇H₂₁NO₃ (М⁺) 287,1521, найд. 287,1521.

Стадия Б

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

К раствору (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовой кислоты (286 мг, 1,0 ммоля, полученной, как описано на стадии А), гексафторфосфата O-бензотриазол-1-ил-N,N,N’,N’-тетраметилурония (ВОР, 500 мг, 1,1 ммоля) и 2-аминотиазола (125 мг, 1,2 ммоля) в сухом хлористом метилене (10 мл) при 0°С по каплям добавляли N,N-диизопропилэтиламин (0,55 мл, 3,1 ммоля). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Затем добавляли воду, органический слой промывали солевым раствором, сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали экспресс-хроматографией (колонка Biotage 40S, элюент: 3% метанол/хлористый метилен), при этом получали 325 мг (выход 75%) (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде пены светло-коричневого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₃N₃O₂S (М⁺) 369,1511, найд. 369,1513.

Пример 2

(S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид получали в виде твердого вещества белого цвета (выход 59%), MCBP(EI): m/e рассч. для С₂₀Н₂₂СlN₃O₂S (М⁺) 403,1121, найд. 403,1124, при конденсации (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовой кислоты (120 мг, 0,42 ммоля, полученной, как описано в примере 1, стадия А,) с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (90 мг, 0,51 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида.

Пример 3

(S)-N-(5-Бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

К суспензии (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида (21 мг, 0,06 ммоля, полученного, как описано в примере 1) и N-бромсукцинимида (11 мг, 0,06 ммоля) в безводном четыреххлористом углероде (1,0 мл) добавляли бензоилпероксид (1 мг, 0,004 ммоля). Смесь перемешивали при 95 С в запаянной пробирке. Через 1,5 ч добавляли N-бромсукцинимид (2 мг) и бензоилпероксид (1 мг) и смесь перемешивали в течение еще 30 мин. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и растворитель удаляли в вакууме. Остаток переносили в этилацетат и промывали водой. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 12S, элюент: 20% этилацетат/гексан), при этом получали 15 мг (выход 58%) (S)-N-(5-бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде пены серого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₃BrN₃O₂S (M⁺) 447,0616, найд. 447,0623.

Пример 4

(S)-3-Циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

4,5-Дихлор-1,2-дигидроксиметилбензол

К перемешиваемому раствору комплекса боран-тетрагидрофуран (45 мл 1,5 М раствора в тетрагидрофуране/диэтиловом эфире) при 0°С в атмосфере азота по каплям в течение 20 мин добавляли раствор 4,5-дихлорфталевой кислоты (5,013 г, 21,1 ммоля) в тетрагидрофуране (35 мл). После завершения добавления реагента смесь перемешивали при 0°С в течение 2,5 ч. Реакцию останавливали медленным добавлением метанола до прекращения выделения газа. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и растворитель удаляли в вакууме. Остаток переносили в этилацетат, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором. Органический экстракт сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме, при этом получали 4,41 г (выход 100%) 4,5-дихлор-1,2-дигидроксиметилбензола в виде твердого вещества белого цвета. MCHP(ES): рассч. для С₈Н₇Сl₂O₂ (М⁺-1) 205, найд. 205.

Стадия Б

4,5-Дихлорфталевый 1,2-дикарбоксальдегид

К перемешиваемому раствору оксалилхлорида (2,6 мл, 29,2 ммоля) в безводном хлористом метилене (35 мл) в атмосфере азота при -78°С по каплям добавляли раствор диметилсульфоксида (4,2 мл, 59,1 ммоля) в хлористом метилене (10 мл). Раствор перемешивали в течение 10 мин, затем по каплям добавляли раствор 4,5-дихлор-1,2-дигидроксиметилбензола (2,50 г, 12,1 ммоля) в 16 мл хлористого метилена/диметилсульфоксида, 1:1, и полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Затем к смеси медленно в течение 15 мин добавляли триэтиламин (30 мл, 17,6 ммоля) и смесь нагревали до комнатной температуры в течение 2 ч. Смесь разбавляли холодной водой (150 мл) и экстрагировали хлористым метиленом. Экстракты промывали 1н. HCl, сушили над сульфатом натрия и концентрировали, при этом получали 2,58 г 4,5-дихлорфталевого 1,2-дикарбоксальдегида в виде твердого вещества желтого цвета. MCHP(ES): рассч. для C₈H₃O₂ (M⁺-1) 201, найд. 201.

Стадия В

(S)-3-Циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

Смесь гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (1,05 г, 5,83 ммоля) и 4,5-дихлорфталевого дикарбоксальдегида (1,25 г, 5,86 ммоля, полученного на стадии Б) в ацетонитриле (35 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 ч. Смесь охлаждали и выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч. Твердое вещество отделяли фильтрованием и однократно промывали холодным ацетонитрилом, при этом получали 1,33 г (выход 64%) (S)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты в виде твердого вещества светло-коричневого цвета. МСВР(ЕI): m/е рассч. для C₁₇H₁₉Cl₂NO₃ (М⁺) 355,0742, найд. 355,0747.

Стадия Г

(S)-3-Циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид получали в виде пены бежевого цвета (выход 35%), MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁Cl₂N₃O₂S (М⁺) 437,0731, найд. 437,0725, при конденсации (S)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты (248 мг, 0,70 ммоля, полученной на стадии В) с 2-аминотиазолом (91 мг, 0,88 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида.

Пример 5

(S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-

оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид получали в виде твердого вещества бежевого цвета (выход 37%), MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₀Cl₃N₃O₂S (M⁺) 471,0342, найд. 471,0345, при конденсации (S)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты (250 мг, 0,70 ммоля, полученной, как описано в примере 4, стадия В) с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (154 мг, 0,88 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида.

Пример 6

(S)-N-(5-Бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-N-(5-Бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-

дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид получали в виде твердого вещества бежевого цвета (выход 40%), MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₀BrCl₂N₃O₂S (M⁺) 514,9837, найд. 514,9836, при конденсации (S)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты (248 мг, 0,70 ммоля, полученной, как описано в примере 4, стадия В) с гидрохлоридом 2-амино-5-бромтиазола (154 мг, 0,89 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида.

Пример 7

(S)-N-(1Н-Бензимидазол-2-ил)-3-циклогексил-2-

(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовую кислоту (287 мг, 1,0 ммоля, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-аминобензимидазолом (119 мг, 1,0 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой ЖХВР (хроматограф Rainin Dynamax SD-1, колонка C₁₈, элюент: градиент 10% ацетонитрил/вода/0,1% трифторуксусная кислота - 100% ацетонитрил). Объединенные фракции, содержащие продукт, концентрировали для удаления основного количества ацетонитрила и затем экстрагировали этилацетатом. Экстракты сушили (сульфат натрия) и концентрировали в вакууме, при этом получали 240 мг (выход 60%) (S)-N-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-

1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₄H₂₆N₄O₂ (М⁺) 402,2056, найд. 402,2056.

Пример 8

(S)-N-Бензотиазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовую кислоту (144 мг, 0,5 ммоля, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-аминобензотиазолом (81 мг, 0,55 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано пример 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Неочищенный продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент: 35% этилацетат/гексан), при этом получали 185 мг (выход 44%) (S)-N-бензотиазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₄H₂₅N₄O₂S (М⁺) 419,1667, найд. 419,1661.

Пример 9

(R)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

(R)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовая кислота

Смесь гидрохлорида (R)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (2,69 г, 15,7 ммоля) и фталевого дикарбоксальдегида (2,50 г, 14,6 ммоля) в ацетонитриле (120 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 42 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем до 0°С. Твердое вещество отделяли фильтрованием и однократно промывали холодным ацетонитрилом, при этом получали 2,65 г (выход 63%) (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₁₇H₂₁NO₃ (М⁺) 287,1521, найд. 287,1523.

Стадия Б

(R)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

К раствору (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовой кислоты (144 мг, 0,5 ммоля, полученной, как описано на стадии А), гексафторфосфата O-бензотриазол-1-ил-N,N,N’,N’-тетраметилурония (ВОР, 268 мг, 0,55 ммоля) и 2-аминотиазола (50 мг, 0,5 ммоля) в сухом хлористом метилене (3 мл) при комнатной температуре по каплям добавляли N.N-диизопропилэтиламин (0,20 мл, 1,15 ммоля) и смесь перемешивали в течение 1 ч. Затем смесь разбавляли хлористым метиленом и промывали водой. Органический слой сушили (Na₂SO₄), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент: 35% этилацетат/гексан), при этом получали 150 мг (выход 81%) (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде пены грязно-белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₃N₃O₂S (М⁺) 369,1511, найд. 369,1511.

Пример 10

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-хинолин-2-ил-пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-хинолин-2-ил-пропионамид получали в виде твердого вещества белого цвета (выход 99%), MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₆H₂₇N₃O₂ (М⁺) 413,2103, найд. 413,2103, при конденсации (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовой кислоты (288 мг, 1,0 ммоля, полученной, как описано в примере 1, стадия А) с 2-аминохинолином (180 мг, 1,2 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизо-индол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида.

Пример 11

11.1. (S)-3-Циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и

11.2. (S)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

4-Нитро-1,2-дигидроксиметилбензол

К перемешиваемому раствору комплекса боран-тетрагидрофуран (70 мл 1,5 М раствора в тетрагидрофуране/диэтиловом эфире) при 0°С в атмосфере азота по каплям в течение 20 мин добавляли раствор 4-нитрофталевой кислоты (7,01 г, 33,2 ммоля) в тетрагидрофуране (50 мл). После завершения добавления реагента смесь перемешивали при 0°С в течение 3,5 ч. Затем смесь нагревали до комнатной температуры и кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию останавливали добавлением метанола и смесь концентрировали в вакууме. Остаток переносили в этилацетат, промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором. Органический экстракт сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме, при этом получали 5,61 г (выход 92%) 4-нитро-1,2-дигидроксиметилбензола в виде твердого вещества белого цвета. MCHP(ES): рассч. для C₈H₈NO₄ (М⁺-1) 182, найд. 182.

Стадия Б

4-Нитро-орто-фенилен-1,2-дикарбоксальдегид

К перемешиваемому раствору оксалилхлорида (4,90 мл, 55,0 ммоля) в безводном хлористом метилене (60 мл) в атмосфере азота при -78°С по каплям добавляли раствор диметилсульфоксида (8,20 мл, 115 ммоля) в хлористом метилене (20 мл). Раствор перемешивали в течение 10 мин и по каплям добавляли раствор 4-нитро-1,2-дигидроксиметилбензола (3,99 г, 21,8 ммоля) в 20 мл хлористого метилена/диметилсульфоксида, 1:1. Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 3 ч, затем медленно в течение 15 мин добавляли триэтиламин (60 мл, 426 ммолей) и смесь нагревали до комнатной температуры в течение 2 ч. Смесь разбавляли холодной водой (300 мл) и экстрагировали хлористым метиленом. Экстракты промывали 1 н.hcl, сушили над сульфатом натрия и концентрировали, неочищенный 4-нитро-орто-фенилен-1,2-дикарбоксальдегид очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40M, элюент: 35% этилацетат/гексан), при этом получали 2,5 г (выход 64%) 4-нитро-1,2-дикарбоксальдегида. По данным ЯМР чистота продукта составляла 40%. MCHP(ES): рассч. для С₈H₄NO₂(М⁺-1) 178, найд. 178.

Стадия В

(S)-3-Циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

Смесь гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (0,708 г, 3,93 ммоля) и 4-нитрофталевого дикарбоксальдегида (2,02 г, 3,95 ммоля, полученного на стадии Б) в ацетонитриле (20 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона. Затем порциями в течение 2 ч добавляли дополнительное количество гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (0,775 г, 4,30 ммоля) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, твердое вещество отделяли фильтрованием и однократно промывали холодным ацетонитрилом, при этом получали твердое вещество бежевого цвета (0,511 г), содержащее (S)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту в смеси с региоизомером (S)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислотой в соотношении 1:2,7. Фильтрат концентрировали в вакууме, остаток перекристаллизовывали из ацетонитрила, при этом получали вторую порцию продукта (1,01 г), обогащенную (S)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислотой. MCHP(ES) смеси: рассч. для C₁₇H₁₉N₂O₅ (M⁺-1) 331, найд. 331.

Стадия Г

(S)-3-Циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и

(S)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (301 мг, 0,91 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная на стадии В) конденсировали с 2-аминотиазолом (116 мг, 1,12 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: 30% этилацетат/гексан) получали 131 мг (S)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-

ил)-N-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₂N₄O₄S (M⁺ ) 414,1362, найд. 414,1362, и 121 мг региоизомера(S)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₂N₄O₄S (М⁺) 414,1362, найд. 414,1368.

Пример 12

12.1. (S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5-нитро-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид и

12.2. (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(6-нитро-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (307 мг, 0,92 ммоля, смесь 5,6-региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная на стадии В) конденсировали с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (360 мг, 2,04 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: 25% этилацетат/гексан) получали 134 мг (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-

оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁ClN₄O₄S (М⁺) 448,0972, найд. 448,0970, и 111 мг региоизомера (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-

оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁ClN₄O₄S (М⁺) 448,0972, найд. 448,0972.

Пример 13

13.1. (S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид и

13.2. (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

Стадия А

3-Фтор-1,2-ди(гидроксиметил)бензол

К перемешиваемому раствору комплекса боран-тетрагидрофуран (50 мл 1,5 М раствора в тетрагидрофуране/диэтиловом эфире) при 0°С в атмосфере аргона по каплям в течение 15 мин добавляли раствор 3-фторфталевой кислоты (4,51 г, 24,0 ммоля) в тетрагидрофуране (40 мл). После завершения добавления реагента смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Затем смесь нагревали до комнатной температуры и кипятили с обратным холодильником в течение 20 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию останавливали добавлением метанола (30 мл) и смесь концентрировали в вакууме. Остаток переносили в этилацетат (150 мл) и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×125 мл) и объединенные экстракты промывали солевым раствором. Органический экстракт сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме, при этом получали 3,73 г (выход 99%) 3-фтор-1,2-ди(гидроксиметил)бензола в виде твердого вещества белого цвета. MCHP(ES): рассч. для C₈H₈FO₂ (М-1) 155, найд. 155.

Стадия Б

3-Фторфталевый дикарбоксальдегид

К перемешиваемому раствору оксалилхлорида (2,80 мл, 31,5 ммоля) в безводном хлористом метилене (35 мл) в атмосфере азота при -78°С по каплям добавляли раствор диметилсульфоксида (4,6 мл, 64,7 ммоля) в хлористом метилене (10 мл). Раствор перемешивали в течение 30 мин и затем по каплям добавляли раствор 3-фтор-1,2-дигидроксиметилбензола (2,00 г, 12,8 ммоля) в 20 мл хлористого метилена/диметилсульфоксида, 1:1. Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 2,5 ч, медленно в течение 15 мин добавляли триэтиламин (35 мл, 248,6 ммоля), перемешивали при -78°С в течение 30 мин, а затем нагревали до комнатной температуры в течение 4 ч. Смесь выливали в холодную воду (200 мл) и экстрагировали хлористым метиленом. Экстракты промывали 1н.HCl, солевым раствором, сушили (сульфат натрия) и концентрировали, при этом получали неочищенный 3-фторфталевый дикарбоксальдегид, который использовали без дальнейшей очистки. MCHP(ES): рассч. для С₈H₄FO₂(М⁺-1) 151, найд. 151.

Стадия В

(S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

Смесь гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (0,565 г, 3,14 ммоля) и 3-фторфталевого дикарбоксальдегида (1,60 г, 3,16 ммоля, полученного на стадии Б) в ацетонитриле (20 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона. Затем порциями в течение 7 ч добавляли дополнительное количество гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (0,437 г, 2,43 ммоля) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 72 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры в течение 3 ч и хранили в холодильнике в течение 1 ч. Твердое вещество отделяли фильтрованием и однократно промывали холодным ацетонитрилом, при этом получали твердое вещество белого цвета (1,39 г, выход 77%), содержащее (S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту в смеси с региоизомером (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислотой в соотношении приблизительно 1:1. MCHP(ES): рассч. для C₁₇H₁₉FNO₃ (M⁺-1) 304, найд. 304.

Стадия Г

(S)-N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-фтор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид и

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-фтор-

1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (501 мг, 1,64 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная на стадии В) конденсировали с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (643 мг, 3,64 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После ЖХВР продукта на нормальной фазе (хроматограф Waters Prep 500, при нанесении колонка уравновешена хлористым метиленом, элюент: 20% этилацетат/гексан) получали 194 мг (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-

оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁ClFN₃O₂S (М⁺) 421,1027, найд. 421,1024, и 173 мг региоизомера (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-

оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁ClFN₃O₂S (М⁺) 421,1027, найд. 421,1031.

Пример 14

3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-ил-пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А,) конденсировали с 2-аминопиримидином (108 мг, 1,14 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент: 50% этилацетат/гексан), при этом получали 271 мг (выход 74%) 3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₄N₄O₂ (М⁺) 364,1899, найд. 364,1893.

Пример 15

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-аминопиразином (95 мг, 1,00 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент 50% этилацетат/гексан), при этом получали 350 мг (выход 96%) (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₄N₄O₂ (M⁺) 364,1899, найд. 364,1908.

Пример 16

(S)-N-Бензоксазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (144 мг, 0,50 ммоля, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-аминобензоксазолом (67 мг, 0,50 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент 50% этилацетат/гексан), при этом получали 161 мг (выход 96%) (S)-N-бензоксазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₄H₂₅N₃O₃ (М⁺) 403,1896, найд. 403,1895.

Пример 17

3-Циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

3-Циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-пропионовая кислота

Смесь 2-амино-3-циклопентилпропионовой кислоты (0,800 г, 5,09 ммоля) и фталевого дикарбоксальдегида (0,684 г, 5,10 ммоля) в ацетонитриле (30 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч в атмосфере азота. Смесь охлаждали до комнатной температуры, образовавшееся твердое вещество отделяли фильтрованием, однократно промывали холодным ацетонитрилом (5 мл), при этом получали 1,16 г (выход 83%) 3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₁₆H₁₉NO₃ (M⁺) 273,1365, найд. 273,1374.

Стадия Б

3-Циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

3-Циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (273 мг, 1,00 ммоль, полученную на стадии А) конденсировали с 2-аминотиазолом (100 мг, 1,00 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент 40% этилацетат/гексан), при этом получали 132 мг (выход 37%) 3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₁₉H₂₁N₃O₂SNa (М⁺+Nа⁺) 378,1247. найд. 378,1250.

Пример 18

N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

3-Циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (277 мг, 1,01 ммоля, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (397 мг, 2,30 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40M, элюент 20% этилацетат/гексан), при этом получали 290 мг (выход 74%) N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде твердого вещества светло-желтого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для С₁₉Н₂₁N₃О₂S (М⁺) 389,0965, найд. 389,0966.

Пример 19

3-Циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

Циклогептанметанол

К перемешиваемому раствору комплекса боран-тетрагидрофуран (95 мл 1,5 М раствора в тетрагидрофуране/эфире) при 0°С в атмосфере аргона добавляли циклогептанкарбоновую кислоту (10,05 г, 69,3 ммоля) в 30 мл тетрагидрофурана. Через 2 ч реакцию останавливали осторожным добавлением метанола и смесь концентрировали в вакууме. Остаток переносили в этилацетат и последовательно промывали 1н. HCl насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором. Органический слой сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме, при этом получали 9,19 г (выход 100%) циклогептанметанола в виде бесцветного масла.

Стадия Б

Циклогептилметилиодид

К перемешиваемому раствору трифенилфосфина (24,59 г, 92,8 ммоля) и имидазола (6,40 г, 93,1 ммоля) в хлористом метилене (100 мл) при 0°С порциями в течение 10 мин добавляли иод (23,52 г, 92,7 ммоля). Затем в течение 5 мин добавляли раствор циклопентанметанола (9,14 г, 71,3 ммоля) в хлористом метилене (50 мл). Охлаждающую баню удаляли, смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Затем смесь разбавляли хлористым метиленом, промывали водой, органический слой сушили (сульфат магния), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией (элюент: гексан), при этом получали 15,35 г (выход 93%) циклогептилметилиодида в виде масла.

Стадия В

Трет-бутиловый эфир 2-(бензгидрилиденамино)-3-циклогептилпропионовой кислоты

К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира (бензгидрилиденамино)уксусной кислоты (2,56 г, 8,68 ммоля) в 30 мл тетрагидрофурана при -78°С в атмосфере аргона по каплям добавляли раствор диизопропиламида лития (10,0 мл, 1,5 М раствор в циклогексане). Через 30 мин по каплям добавляли раствор циклогептилметилиодида (3,48 г, 14,6 ммоля, полученного на стадии Б) в 20 мл тетрагидрофурана, смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Затем реакцию останавливали добавлением насыщенного раствора хлорида аммония (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией (Biotage 40 M, элюент 5% этилацетат/гексан), при этом получали 2,56 г (выход 73%) трет-бутилового эфира 2-(бензгидрилиденамино)-3-циклогептилпропионовой кислоты в виде масла светло-желтого цвета.

Стадия Г

2-Амино-3-циклогептилпропионовая кислота

К раствору трет-бутилового эфира 2-(бензгидрилиденамино)-3-циклогептилпропионовой кислоты (1,34 г, 3,31 ммоля) в метаноле (5 мл) добавляли 10н.НСl (15 мл) и полученную смесь кипятили с обратным холодильником. Через 15 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, переносили в делительную воронку и промывали этилацетатом. Водный слой нейтрализовали концентрированным раствором гидроксида аммония, образовавшееся твердое вещество белого цвета отделяли фильтрованием и высушивали на воздухе, при этом получали 329 мг 2-амино-3-циклогептилпропионовой кислоты.

Стадия Д

3-Циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

Раствор фталевого дикарбоксальдегида (248 мг, 1,80 ммоля) и 2-амино-3-циклогептилпропионовой кислоты (318 мг, 1,72 ммоля) в ацетонитриле кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и выдерживали в холодильнике в течение 3 ч. Образовавшееся твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали холодным ацетонитрилом и высушивали на воздухе, при этом получали 424 мг (выход 82%) 3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты в виде твердого вещества бежевого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₁₈H₂₃NO₃ (M⁺) 301,1678, найд. 301,1668.

Стадия Е

3-Циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

3-Циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (173 мг, 0,58 ммоля, полученную на стадии Д) конденсировали с 2-аминотиазолом (97 мг, 0,94 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при полученияи (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40S, элюент: 35% этилацетат/гексан), при этом получали 217 мг (выход 99%) 3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₅N₃O₂S (M⁺) 383,1667, найд. 383,1660.

Пример 20

N-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

3-Циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (177 мг, 0,59 ммоля, полученную, как описано в примере 19, стадия Д) конденсировали с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (168 мг, 0,95 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40M, элюент 20% этилацетат/гексан), при этом получали 99 мг (выход 40%) N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде пены грязно-белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₄ClN₃O₂S (М⁺) 417,1278, найд. 417,1289.

Пример 21

3-Циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

Циклооктилметилиодид

К перемешиваемому раствору циклооктилметанола (5,00 г, 35,2 ммоля) и иода (8,93 г, 35,2 ммоля) в сухом хлористом метилене (100 мл) при комнатной температуре порциями в течение 10 мин добавляли трифенилфосфин (9,23 г, 35,2 ммоля). Через 1 ч смесь разбавляли хлористым метиленом, промывали водой и насыщенным раствором бисульфита натрия, органический слой сушили (сульфат магния), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией (элюент: гексан), при этом получали 5,35 г (выход 60%) циклооктилметилиодида в виде масла.

Стадия Б

Трет-бутиловый эфир 2-(бензгидрилиденамино)-3-циклооктилпропионовой кислоты

К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира (бензгидрилиденамино)уксусной кислоты (3,00 г, 10,1 ммоля) в 60 мл тетрагидрофурана при -78°С в атмосфере аргона по каплям добавляли раствор диизопропиламида лития (11,5 мл, 1,5 М раствор в циклогексане). Через 30 мин по каплям шприцом добавляли раствор циклогептилметилиодида (3,83 г, 15,2 ммоля, полученного на стадии А), смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Затем реакцию останавливали добавлением насыщенного раствора бикарбоната натрия и большую часть тетрагидрофурана удаляли в вакууме. Смесь разбавляли водой и экстрагировали хлористым метиленом. Объединенные экстракты сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией (элюент: 4% этилацетат/гексан), при этом получали 3,34 г (выход 79%) трет-бутилового эфира 2-(бензгидрилиденамино)-3-циклооктилпропионовой кислоты в виде масла светло-желтого цвета.

Стадия В

2-Амино-3-циклооктилпропионовая кислота

К раствору трет-бутилового эфира 2-(бензгидрилиденамино)-3-циклооктилпропионовой кислоты (2,00 г) в метаноле (15 мл) добавляли 10н. НСl (30 мл) и полученную смесь кипятили с обратным холодильником. Через 20 ч смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли 20 мл воды, переносили в делительную воронку и промывали этилацетатом. Водный слой нейтрализовали 10н. гидроксидом натрия и затем охлаждали до 0°С. Образовавшееся твердое вещество белого цвета отделяли фильтрованием и высушивали на воздухе, при этом получали 590 мг 2-амино-3-циклооктилпропионовой кислоты.

Стадия Г

3-Циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

Раствор фталевого дикарбоксальдегида (349 мг, 2,60 ммоля) и 2-амино-3-циклооктилпропионовой кислоты (500 мг, 2,51 ммоля) в ацетонитриле (20 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем смесь фильтровывали в горячем виде для удаления нерастворимого материала, охлаждали до комнатной температуры и затем до 0°С. Образовавшееся твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали холодным ацетонитрилом и высушивали на воздухе, при этом получали 480 мг (выход 62%) 3-циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты в виде твердого вещества белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₁₉H₂₅NO₃ (M⁺) 315,1834, найд. 315,1840.

Стадия Д

3-Циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

3-Циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (200 мг, 0,65 ммоля, полученную на стадии Г) конденсировали с 2-аминотиазолом (70 мг, 0,70 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (элюент: 30% этилацетат/гексан), при этом получали 226 мг (выход 88%) 3-циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₇N₃O₂S (M⁺) 397,1824, найд. 397,1825.

Пример 22

(R)-N-(5-Бромпиридин-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-амино-5-бромпиридином (173 мг, 1,00 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент 30% этилацетат/гексан), при этом получали 243 мг (выход 55%) (S)-N-(5-бромпиридин-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄BrN₃O₂ (M⁺) 441,1052, найд. 441,1036.

Пример 23

23.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и

23.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту и (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (499 мг, 1,63 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении 1:1) конденсировали с 2-аминотиазолом (376 мг, 3,64 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После экспресс-хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: 30% этилацетат/гексан) получали (S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид (221 мг), MCBP(EI): m/e рассч. для С₂₀Н₂₂FN₃O₂S (М⁺) 387,1417, найд. 387,1422, и неочищенный (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид, который очищали радиальной хроматографией (элюент: 35% этилацетат/гексан), при этом получали 48 мг чистого (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₂FN₃O₂S (М⁺) 387,1417, найд. 387,1415.

Пример 24

(S)-3-Циклогексил-N-(1Н-имидазол-2-ил)-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-аминоимидазолом (241 мг, 1,79 ммоля) в присутствии ВОР, аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40M, элюент: 4% метанол/хлористый метилен), при этом получали 320 мг (S)-3-циклогексил-N-(1Н-имидазол-2-ил)-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионамида, после перекристаллизации из этилацетата/гексана получали 209 мг чистого продукта. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₄N₄O₂ (M⁺) 352,1899, найд. 352,1895.

Пример 25

25.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид и

25.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту и (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (331 мг, 1,08 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении 1:1) конденсировали с 2-аминопиразином (232 мг, 2,41 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После экспресс-хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: 30% этилацетат/гексан) получали (S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид, которые затем очищали обращенно-фазовой ЖХВР (хроматограф Rainin Dynamax SD-1, колонке C₁₈, элюент: градиент 40% ацетонитрил/вода/0,1% трифторуксусная кислота →100% ацетонитрил), при этом получали 39 мг чистого (S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида в виде пены белого цвета, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₃FN₄O₂ (М⁺) 382,1805, найд. 382,1794, и 43 мг региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-Н-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₃FN₄O₂ (М⁺) 382,1805, найд. 382,1810.

Пример 26

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-

2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-аминопиридином (94 мг, 1,00 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент: 45% этилацетат/гексан), при этом получали 186 мг (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₅N₃O₂ (М⁺) 363,1947, найд. 363,1935.

Пример 27

(S)-N-3-Циклогексил-N-(2-метилпиримидин-4-ил)-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (150 мг, 0,52 ммоля, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-амино-6-метилпиримидином (57 мг, 0,52 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400, элюент: 65% этилацетат/гексан), при этом получали 109 мг (S)-3-циклогексил-N-(2-метилпиримидин-4-ил)-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₆N₄O₂ (М⁺) 378,2056, найд. 378,2054.

Пример 28

28.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и

28.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

Диметиловый эфир 3-фторфталевой кислоты

Через раствор 3-фторфталевой кислоты (2,00 г, 10,9 ммоля) в сухом метаноле при перемешивании при комнатной температуре в течение 2 мин пропускали газообразный хлористый водород. Смесь нагревали до кипения растворителя, кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч, добавляли 1 мл концентрированной серной кислоты и кипятили с обратным холодильником в течение 22 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Экстракты сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме, при этом получали 1,70 г диметилового эфира 3-фторфталевой кислоты в виде масла.

Стадия Б

3-Тиометилфталевая кислота

Смесь диметилового эфира 3-фторфталевой кислоты (2,27 г, 10,7 ммоля) и тиометоксида натрия (6,34 г, 85,9 ммоля) в ДМСО (20 мл) нагревали до 50°С. Через 24 ч добавляли измельченный лед и полученную смесь подкисляли 1н. HCl Раствор экстрагировали этилацетатом, экстракты промывали солевым раствором, сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой ЖХВР (хроматограф Rainin Dynamax SD-1, колонка C₁₈, элюент: градиент 0% ацетонитрил/вода/0,1% трифторуксусная кислота →100% ацетонитрил), при этом получали 802 мг 3-тиометилфталевой кислоты.

Стадия В

3-Тиометил-1,2-ди(гидроксиметил)бензол

К перемешиваемому раствору комплекса боран-тетрагидрофуран (14,0 мл 1,5 М раствора в тетрагидрофуране/диэтиловом эфире) при 0°С в атмосфере аргона добавляли раствор 3-тиометилфталевой кислоты (0,739 г, 3,48 ммоля) в 20 мл тетрагидрофурана. После завершения добавления смесь кипятили с обратным холодильником в течение 15ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию останавливали добавлением метанола (20 мл), кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч и концентрировали в вакууме. Остаток распределяли между 1 н.HCl и этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом, объединенные экстракты промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, солевым раствором, сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали в вакууме, при этом получали неочищенный 3-тиометил-1,2-ди(гидроксиметил)бензол, который очищали экспресс-хроматографией (колонка Biotage 40M, элюент: градиент 25%-50% этилацетат/гексан), при этом получали 454 мг чистого 3-тиометил-1,2-ди(гидроксиметил)бензола.

Стадия Г

3-Тиометилфталевый дикарбоксальдегид

К перемешиваемому раствору оксалилхлорида (0,42 мл, 4,72 ммоля) в безводном хлористом метилене (5 мл) в атмосфере аргона при -78°С по каплям добавляли раствор диметилсульфоксида (0,70 мл, 9,67 ммоля) в хлористом метилене (2 мл). Раствор перемешивали в течение 10 мин и затем по каплям добавляли раствор 3-тиометил-1,2-ди(гидроксиметил)бензола (0,415 г, 2,25 ммоля) в 3 мл хлористого метилена/диметилсульфоксида, 1:1. Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч, затем по каплям добавляли триэтиламин (5,5 мл, 17,4 ммоля), постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 20 ч. Смесь выливали в ледяную воду и слои разделяли. Экстракт промывали солевым раствором, сушили (сульфат натрия) и концентрировали, при этом получали неочищенный 3-тиометилфталевый дикарбоксальдегид, который использовали без дальнейшей очистки.

Стадия Д

(S)-3-Циклогексил-2-(4-метилтио-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

Смесь гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты (0,125 г, 0,70 ммоля) и неочищенного 3-тиометилфталевого дикарбоксальдегида (0,250 г, 1,4 ммоля, полученного на стадии Г) в ацетонитриле (5 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 18 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали экспресс-хроматографией (колонка Biotage 40S, элюент: 5% метанол/хлористый метилен), при этом получали 260 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-метилтио-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислоты в смеси с региоизомером (S)-3-циклогексил-2-(7-метилтио-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислоты в соотношении приблизительно 1:1.

Стадия Е

(S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовая кислота

К раствору (S)-3-циклогексил-2-(4-метилтио-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислоты и региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-метилтио-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислоты (0,790 г, 2,37 ммоля, смесь приблизительно 1:1) в муравьиной кислоте (4 мл) при 0°С по каплям добавляли 30% раствор пероксида водорода (1,3 мл, 12,7 ммоля), нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 19 ч. Смесь концентрировали в потоке азота для удаления муравьиной кислоты и получали 0,901 г смеси неочищенных (S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислоты и региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовой кислоты.

Стадия Ж

(S)-3-Циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовую кислоту и региоизомер (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)пропионовую кислоту (112 мг, 0,31 ммоля) конденсировали с 2-аминотиазолом (54 мг, 0,52 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-окси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После экспресс-хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: градиент 15%-50% этилацетат/хлористый метилен) получали 51 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₅N₃O₄S₂ (M^+-2) 445,1130, найд. 445,1125, и 39 мг (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₅N₃O₄S₂ (M⁺) 447,1286, найд. 447,1280.

Пример 29

29.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизо-индол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид и

29.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту и региоизомер (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (200 мг, 0,55 ммоля) конденсировали с 2-аминопиразином (88 мг, 0,91 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После экспресс-хроматографии продукта (Biotage 40S, элюент: градиент 20%-60% этилацетат/хлористый метилен) получали неочищенную смесь, которую очищали обращенно-фазовой ЖХВР (хроматограф Rainin Dynamax SD-1, колонка C₁₈, элюент: градиент 10% ацетонитрил/вода/0,1% трифторуксусная кислота →100% ацетонитрил), при этом получали 21 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄N₄O₄SNa (M⁺+Na⁺) 465,1567, найд. 465,1570, и 13 мг (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄N₄O₄SNa (M⁺ +Na⁺) 465,1567, найд. 465,1568.

Пример 30

30.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpимидин-4-илпpoпиoнaмид и

30.2. (S)-3-диклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту и региоизомер (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (200 мг, 0,55 ммоля) конденсиролваи с 4-аминопиримидином (89 мг, 0,91 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После экспресс-хроматографии продукта (Biotage 40S, элюент: градиент 25%-70% этилацетат/хлористый метилен) получали 83 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамида в виде пены, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄N₄O₄SNa (M⁺+Na⁺) 465,1567, найд. 465,1568, и 77 мг (S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамида в виде пены, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₆N₄O₄SNa (M⁺+Na⁺) 465,1567, найд. 465,1572.

Пример 31

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-5-метилпиридин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-амино-5-метилпиридином (143 мг, 1,32 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40S, элюент: 30% этилацетат/гексан), при этом получали 352 мг (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-5-метилпиридин-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₃H₂₇N₃O₂ (M⁺) 377,2103, найд. 377,2107.

Пример 32

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-4-метилпиридин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-амино-4-метилпиридином (143 мг, 1,32 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (Biotage 40S, элюент: 30% этилацетат/гексан), при этом получали 344 мг (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-

ил)-N-4-метилпиридин-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. MCBP(EI): m/e рассч. для С₂₃H₂₇N₃О₂ (М⁺) 377,2103, найд. 377,2106.

Пример 33

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-5-хлорпиридин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с 2-амино-5-хлорпиридином (129 мг, 1,00 ммоль) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 1, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (элюент: 25% этилацетат/гексан), при этом получали 160 мг (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-5-хлорпиридин-2-илпропионамида в виде пены белого цвета. МСВР(ЕI): m/e рассч. для C₂₃H₂₄N₃O₂ClNa (M⁺+Na⁺) 420,1449, найд. 420,1451.

Пример 34

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-(1-оксипиридин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (287 мг, 1,00 ммоль, полученную, как описано в примере 1, стадия А) конденсировали с N-оксидом 2-аминопиридина (110 мг, 1,00 ммоль) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б), при получении (R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. Продукт очищали экспресс-хроматографией (силикагель 60 фирмы Merck, 230-400 меш, элюент: 2% метанол/этилацетат), при этом получали 340 мг (выход 55%) (S)-N-(пиридин-N-оксид-2-ил)-3-циклогексил-2-

(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида в виде пены грязно-белого цвета. По данным ЯМР продукт являлся негомогенным, и его дополнительно очищали обращенно-фазовой ЖХВР (хроматограф Rainin Dynamax SD-1, колонка C₁₈, элюент: градиент 10% ацетонитрил/вода/0,1% трифторуксусная кислота →100% ацетонитрил), при этом получали 188 мг чистого (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-(1-оксипиридин-2-ил)пропионамида. МСНР(Е S): m/е рассч. для C₂₂H₂₅N₃O₃ (М⁺+Н⁺) 380, найд. 380.

Пример 35

35.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид и

35.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (501 мг, 1,64 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная, как описано в примере 13, стадия В) конденсировали с 2-аминопиридином (643 мг, 3,64 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После обращенно-фазовой ЖХВР продукта (хроматограф Rainin Dynamax SD-1, колонка C₁₈, элюент: градиент 40% ацетонитрил/вода/0,1% трифторуксусная кислота →70% ацетонитрил) получали 157 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄FN₃O₂Na (M⁺ +Na⁺) 404,1745, найд. 404,1748, и 99 мг региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄FN₃O₂Na (M⁺+Na⁺) 404,1745, найд. 404,1749.

Пример 36

36.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и

36.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

Стадия А

3-Хлор-1,2-ди(гидроксиметил)бензол

3-Хлор-1,2-ди(гидроксиметил)бензол получали с выходом 97% при восстановлении 3-хлорфталевой кислоты бораном аналогично тому, как описано в примере 13, стадия А, при получении 3-фтор-1,2-ди(гидроксиметил)бензола. 3-Хлорфталевую кислоту получали по методике, описанной в литературе (см. Fertel L.B. и др. J. Org. Chem., 58(1), 261-263 (1993)).

Стадия Б

3-Хлорфталевый дикарбоксальдегид

3-Хлорфталевый дикарбоксальдегид получали окислением 3-хлор-1,2-ди(гидроксиметил)бензола (полученного на стадии А) аналогично тому, как описано в примере 13, стадия Б, при получении 3-фторфталевого дикарбоксальдегида. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия В

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота и

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовая кислота

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту и (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (в соотношении приблизительно 1:1) получали конденсацией гидрата (S)-(+)-α-аминоциклогексанпропионовой кислоты с 3-хлорфталевым дикарбоксальдегидом (полученным на стадии Б) аналогично тому, как описано в примере 13, стадия В, при получении (S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты и (S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионовой кислоты.

Стадия Г

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид и

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (326 мг, 1,0 ммоль, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная на стадии В) конденсировали с 2-аминотиазолом (231 мг, 2,23 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: градиент 5%-30% этилацетат/гексан) получали 132 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для С₂₀Н₂₂СlN₃O₂S (M⁺+Na⁺) 426,1013, найд. 426,1016, и 91 мг региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₂ClN₃O₂SNa (M⁺+Na⁺) 426,1013, найд. 426,1017.

Пример 37

(S)-Н-(5-Хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид и

37.2. (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (151 мг, 0,47 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная, как описано в примере 36, стадия В) конденсировали с гидрохлоридом 2-амино-5-хлортиазола (186 мг, 1,05 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3 -дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: градиент 5%-20% этилацетат/гексан) получали 67 мг (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁Cl₂N₃O₂S (M⁺) 437,0731, найд. 437,0727, и 46 мг региоизомера (S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-

дигидроизоиндол-2-ил)пропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₀H₂₁Cl₂N₃O₂S (M⁺+Na⁺) 437,0731, найд. 437,0726.

Пример 38

38.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид и

38.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (201 мг, 0,62 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная, как описано в примере 36, стадия В) конденсировали с 2-аминопиридином (132 мг, 1,39 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После хроматографии продукта (Biotage 40S, элюент: 30% этилацетат/гексан) получали 107 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄ClN₃O₂ (М⁺) 397,1557, найд. 397,1563, и 46 мг региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₂H₂₄ClN₃O₂ (М⁺) 397,1557, найд. 397,1551.

Пример 39

39.1. (S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид и

39.2. (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид

(S)-3-Циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионовую кислоту (243 мг, 0,76 ммоля, смесь региоизомеров в соотношении приблизительно 1:1, полученная, как описано в примере 36, стадия В) конденсировали с 2-аминопиразином (170 мг, 1,77 ммоля) в присутствии ВОР аналогично тому, как описано в примере 9, стадия Б, при получении (S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамида. После хроматографии продукта (Biotage 40M, элюент: 20% этилацетат/гексан) получали 53 мг (S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-

2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/е рассч. для C₂₁H₂₃ClN₄O₂ (М⁺) 398,1510, найд. 398,1520, и 41 мг региоизомера (S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамида, MCBP(EI): m/e рассч. для C₂₁H₂₃ClN₄O₂ (М⁺) 398,1510, найд. 398,1507.

Примеры биологических испытаний

Все соединения по настоящему изобретению, которые включают соединения, описанные в примерах, активируют глюкокиназу in vitro по данным определения биологической активности (пример А). Указанные соединения увеличивают приток метаболической глюкозы, который вызывает увеличение секреции инсулина. Следовательно, соединения формулы I являются активаторами глюкокиназы и используются для увеличения секреции инсулина.

Пример А

Определение биологической активности соединений in vitro

Определение активности глюкокиназы:

Активность глюкокиназы (ГК) определяли по образованию НАДН глюкозо-6-фосфатдегидрогеназой (Г6ФДГ, 0,75-1 кед/мг, фирмы Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN) из Leuconostoc mesenteroides (схема 2), сопряженному с синтезом глюкозо-6-фосфата.

Схема 2

Рекомбинантную ГК1 из печени человека экспрессировали в E.coli в виде химерного белка с глютатион S-трансферазой (ГSТ-ГК) (Liang и др., 1995) и очищали хроматографией на аффинной колонке с глютатион-сефарозой 4В по методике фирмы-производителя (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ). Ранее было установлено, что ферментативные свойства нативной ГК и ГSТ-ГК практически идентичны (Liang и др., 1995, Neet и др., 1990).

Анализ проводили при 25°С в 96-луночных планшетах с плоским дном для тканевых культур (фирмы Gostar, Cambridge, MA), конечный объем реакционной смеси составлял 120 мкл. Реакционная смесь имела следующий состав: 25 мМ буферного раствора HEPES (рН 7,1), 25 мМ КСl, 5 мМ D-глюкоза, 1 мМ АТФ, 1,8 мМ НАД, 2 мМ MgCl₂, 1 мкМ сорбит-6-фосфат, 1 мМ дитиотреит, анализируемое лекарственное средство или 10% ДМСО, 1,8 ед/мл Г6ФДГ и ГК (см. ниже). Все органические реагенты имели степень очистки >98% (фирмы Boehringer Mannheim, D-глюкоза и HEPES фирмы Sigma Chemical Co, St. Louis, МО). Анализируемые соединения растворяли в ДМСО и добавляли в реакционную смесь, не содержащую ГSТ-ГК, в конечном объеме 12 мкл, причем конечная концентрация ДМСО составляла 10%. Полученную смесь предварительно инкубировали в термостатированной камере спектрофотометра для микропланшетов SPECTRAmax 250 (фирма Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA) в течение 10 мин для достижения температурного равновесия и затем инициировали реакцию добавлением 20 мкл ГSТ-ГК.

После добавления фермента активность ГК определяли по увеличению оптической плотности (OD) при 340 нм после инкубирования в течение 10 мин. В реакционную смесь добавляли количество ГSТ-ГК, необходимое для увеличения OD₃₄₀ от 0,08 до 0,1 ед. через 10 мин инкубирования в лунках, содержащих 10%-ный ДМСО и не содержащих анализируемое соединение. В предварительных экспериментах было установлено, что реакция ГК характеризуется линейной зависимостью в течение указанного периода времени даже в присутствии активаторов, которые приводят к 5-кратному увеличению активности ГК. Активность ГК в контрольных лунках сравнивали с активностью в лунках, содержащих исследуемые активаторы ГК, и рассчитывали концентрацию активатора, при которой происходит увеличение активности ГК на 50%, то есть SC_1,5.

Все соединения по настоящему изобретению, описанные в примерах по синтезу, характеризуются величиной SC_1,5 менее 30 мкМ за исключением соединения, описанного в примере 9, которое характеризуется величиной SC_1,5 36 мкМ. Полученные результаты свидетельствуют, что соединения обладают активирующей активностью в отношении ГК.

Литература, относящаяся к примеру А

Liang Y., Kesavan P., Wang L., Niswender К., Tanizawa Y., Permut M.A., Magnuson M. и Matschinsky P.M., Variable effects of maturity-onset-diabetes-of-youth (MODY)-associated glucokinase mutations on the substrate interactions and stability of the enzyme, Biochem. J. 309,167-173 (1995).

Neet К., Keenan R.P. и Tippett P.S., Observation of a kinetic slow transition in monomeric glucokinase. Biochemistry, 29, 770-777 (1990).

Пример Б

Определение биологической активности соединений in vivo

Методика анализа активатора глюкокиназы in vivo:

После голодания в течение 2 ч мышам C57BL/6J перорально через желудочный зонд вводили активатор ГК в дозе 50 мг/кг массы тела. Содержание глюкозы в крови определяли пятикратно в течение 6-часового периода после введения.

Мышей взвешивали (6 особей) и перед введением соединений не кормили в течение 2 ч. Активаторы ГК растворяли при концентрации 6,76 мг/мл в носителе Gelucire (этанол:Gеluсirе 44/14:ПЭГ400 q.s., 4:66:30 об./мас./об). Мышам вводили перорально по 7,5 мкл состава на 1 г массы тела, что эквивалентно дозе 50 мг/кг. Непосредственно перед введением определяли уровень глюкозы в крови (время ноль). При отборе крови отсекали кончик хвоста (~1 мм) и отбирали 15 мкл крови в гепаринизированную капиллярную пробирку для анализа. Уровень глюкозы в крови определяли через 1, 2, 4 и 6 ч после введения активатора ГК, причем кровь отбирали, как указано выше. Результаты интерпретировали при сравнении средних величин содержания глюкозы в крови у 6 мышей, обработанных носителем, с содержанием глюкозы у 6 мышей, обработанных активатором ГК в течение 6 часов. К активным соединениям относили такие соединения, которые вызывали статистически достоверное снижение (р<0,05) уровня глюкозы в крови по сравнению с уровнем глюкозы в крови у животных, обработанных носителем, при двух последовательных замерах.

По результатам анализа соединения, описанные в примерах 1, 18, 22, 23.1, 25.1, 26, 14, 15, 31, 33, обладали чрезвычайно высоким активирующим действием в отношении ГК in vivo при пероральном введении по методике, описанной в примере Б.

Пример А

Таблетки, содержащие следующие ингредиенты, получали по стандартной методике:

Ингредиенты мг/таблетка

Соединение формулы I 10,0-100,0

Лактоза 125,0

Кукурузный крахмал 75,0

Тальк 4,0

Стеарат магния 1,0

Пример Б

Капсулы, содержащие следующие ингредиенты, получали по стандартной методике:

Ингредиенты мг/капсула

Соединение формулы I 25,0

Лактоза 150,0

Кукурузный крахмал 20,0

Тальк 5,0

Изобретение относится к новым активаторам изоиндолин-1-он-глюкокиназы формулы 1

где

А означает незамещенный фенил или фенил, одно- или двузамещенный галогеном или однозамещенный группой (низш.)алкилсульфонил, нитро;

R¹ означает С₃-C₉циклоалкил;

R² означает незамещенный или однозамещенный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, связанный через атом углерода в цикле с указанной аминогруппой, причем пяти- или шестичленный гетероароматический цикл содержит от 1 или 2 гетероатома, выбранных из ряда сера, кислород или азот, один из которых является атомом азота, соседним с атомом углерода, связанным с аминогруппой, причем цикл является моноциклическим или конденсированным с фенилом по двум атомам углерода в цикле, указанный однозамещенный гетероароматический цикл является однозамещенным по атому углерода в цикле, который не является соседним с указанным атомом углерода, связанным с аминогруппой, а заместитель выбран из галогена или группы (низш.)алкил;

* означает ассиметричный атом углерода в конкретном соединении, или его фармацевтически приемлемые соли, или N-оксиды.

Соединения 1 активируют глюкокиназу, что позволяет использовать их в фармацевтической композиции при лечении диабета типа II. 8 н. и 15 з.п. ф-лы.

1. Амид общей формулы

где А означает незамещенный фенил или фенил, одно- или двузамещенный галогеном или однозамещенный группой (низш.)алкилсульфонил или нитро,

R¹ означает циклоалкил, содержащий от 3 до 9 атомов углерода,

R² означает незамещенный или однозамещенный пяти- или шестичленный гетероароматический цикл, связанный через атом углерода в цикле с указанной аминогруппой, причем пяти- или шестичленный гетероароматический цикл содержит 1 или 2 гетероатома, выбранных из ряда сера, кислород или азот, один из которых является атомом азота, соседним с атомом углерода, связанным с аминогруппой, причем цикл является моноциклическим или конденсированным с фенилом по двум атомам углерода в цикле, указанный однозамещенный гетероароматический цикл является однозамещенным по атому углерода в цикле, который не является соседним с указанным атомом углерода, связанным с аминогруппой, а заместитель выбран из галогена или группы (низш.)алкил,

* означает асимметричный атом углерода в конкретном соединении или его фармацевтически приемлемые соли или N-оксиды.

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(R)-N-(5-бромпиридин-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-5-хлорпиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-4-метилпиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-5-метилпиридин-2-илпропионамид,

3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpимидин-4-илпpoпиoнaмид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpимидин-4-илпpoпиoнaмид,

(S)-N-3-циклогексил-N-(2-метилпиримидин-4-ил)-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(R)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-диrидpoизoиндoл-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-бромтиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5,6-дихлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(5-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(6-нитро-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(5-xлopтиaзoл-2-ил)-3-циклoгeкcил-2-(7-фтop-1-оксо-1,3дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-метилсульфонил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиpaзин-2-илпpoпиoнaмид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклoгeкcил-2-(4-xлop-1-oкco-1,3-дигидpoизoиндoл-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-N-(1Н-имидазол-2-ил)-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклогептил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

3-циклооктил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-N-бензотиазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-N-бензоксазол-2-ил-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-хинолин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-(1-оксипиридин-2-ил)пропионамид и

(S)-3-циклогексил-2-(7-хлор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид.

3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиримидин-4-илпропионамид,

N-(5-хлортиазол-2-ил)-3-циклопентил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-5-хлорпиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(4-фтор-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклoгeкcил-2-(4-фтop-1-oкco-1,3-дигидpoизoиндoл-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиразин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-пиридин-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-тиазол-2-илпропионамид,

(S)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-N-5-метилпиридин-2-илпропионамид и

(R)-N-(5-бромпиридин-2-ил)-3-циклогексил-2-(1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид.

где А и R¹ имеют значения, указанные в п.1,

с соответствующим гетероароматическим амином формулы

H₂N-R²,

где R² имеет значения, указанные в п.1,

в обычных условиях образования амидной связи, с образованием соединения формулы I

где *, A, R¹ и R² имеют значения, указанные в п.1.