ГЕТЕРОЦИКЛИЛСУЛЬФИНОВЫЕ КИСЛОТЫ И ИХ ПРОИЗВОДНЫЕ, ФОКУСИРОВАННАЯ БИБЛИОТЕКА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ Российский патент 2005 года по МПК C07D207/36 C07D333/34 C07D213/32 C07D209/30 C07D209/34 C07D209/38 C07D215/36 C07D231/18 C07D233/42 C07D239/60 C07D239/95 C07D241/44 C07D243/14 C07D261/00 C07D263/58 C07D235/28 C07D277/76 C07D271/08 C07D285/10 C07D265/36 A61K31/428 A61K31/4184 A61K31/4164 A61K31/381 A61K31/40 A61K31/404 A61K31/4184 A61K31/42 A61K31/423 A61K31/4245 A61K31/433 A61K31/4406 A61K31/47 A61K31/498 A61K31/513 A61K31/517 A61K31/538 A61K31/5415 A61K31/5513 A61P33/00 A61P31/04 A61P35/00 

Данное изобретение относится к синтезу новых химических веществ, поиску новых физиологически активных веществ, соединений-лидеров и лекарственных кандидатов, получаемых на основании скрининга комбинаторных или фокусированных библиотек соединений, а также к фармацевтической композиции, способам их получения и применения.

Более конкретно, настоящее изобретение относится к новым гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновым кислотам их эфирам и амидам, представляющим интерес как потенциальные физиологически активные вещества (агонисты, антагонисты и модуляторы рецепторов, ингибиторы ферментов, онколитики, антибактериальные и противопаразитарные агенты, и т.д.), к фокусированной библиотеке и фармацевтической композиции.

Существует большое количество синтетических сульфиновых кислот и их производных, прежде всего физиологически активных сульфонилалкилкарбоновых кислот, их эфиров и амидов. Так, например, в ряду сульфиновых кислот наиболее изученными являются алкилсульфиновые кислоты и арилсульфиновые кислоты и их производные

(алкилсульфонил)алкилкарбоновые и (арилсульфонил)алкилкарбоновые кислоты, их эфиры и амиды. В научной и патентной литературе им посвящены сотни публикаций. В частности известна 3-(4-бифенилсульфонил)-пропионовая кислота [Child, R.G.; Osterberg, А.С.; Sloboda, А.Е.; Tomcufcik, A.S. Arzneim. Forsch. 1980, 30(4а), 695-702], N-гидрокси-3-(4-метоксибензолсульфонил)-4-фенил-бутирамид [Groneberg, R.D.; Burns, C.J.; Morrissette, M.M.; Ullrich, J.W.; et al. J. Med. Chem. 1999, 42 (4), 541-544], 3-бензолсульфонил-1-(2,6-диметилфенил)пирролидин-2,5-дион [Sumitomo Chemical Co. Pat. 1971, DE 2143601] и др.

Среди гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновых кислот и их производных извесны: (тиофен-2-сульфонил)-уксусная кислота [JP 2001-294621А2, 2001], (пиррол-3-сульфонил)-уксусная кислота [Concepcio, M. et al. J. Chem. Soc., Perkin Tr. I, 1998, 19, 3285-3292. Chade, S. Et al. J. Heterocecl. Chem., 1998, 35(4), 933-938], (пиразол-4-сульфонил)-уксусная кислота [Alabaster, R.J. tt fl. J. Chem. Soc. Sec. C, 1970, 78-81], (имизазол-4-сульфонил)-уксусная кислота [Grant, B.J. J. Chem. Soc., Perkin Tr.I, 1990, 4, 955-963. Ирадян, М.А. Хим.-Фарм. Ж., 1987, 27(6), 667-672. Fisher, M.T. et al. Canad. J. Chem., 1961, 39, 785-788], (пиридин-З-сульфонил)-уксусная кислота [JP 2001-294621А2, 2001], (бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-уксусная кислота и 1-(бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-циклопропанкарбоновая кислота [Блюмина, М.В.; Ватлина, Л.П.; Кориков, П.В.; Кобылинский, Д.Б. Изв. Вузов. Хим. Хим. Технология, 2003, 46(5), 24-25] и их эфиры, а также 3-(2-тиенилсульфонил)пропионовая кислота и 3-(5-бром-2-тиенилсульфонил)пропионовая кислота и их хлорангидриды и амиды [Тюнева, И.В.; Филимонов, С.И.; Соловьев, М.Ю.; Балакин, К.Б.; Скоренко, А.В.; Дорогов, М.В. Изв. Вузов. Хим. Хим. Технология, 2003, 46(7), 77-82].

Известны сульфонилалкил карбоновые кислоты и их производные, проявляющие различные виды биологической активности. Так, например, 2-(2-хлорбензосульфонил)-N-циклопропилметил-пропиоамид является спазмалитиком [Taisho, 1990, JP 1992145062], 2-(6-нитро-2,3-диоксо-1-тетрагидро-бензо[т]хиноксалин-8-сульфонил)-ацетамид является АМРА антагонистом [Novo Nordisk, 1991, Pat. EP 0511152], 1-(1-гуанидино-4-хлор-изохинолин-7-сульфонил)-циклопентанкарбоновой кислоты (2-диметиламино-этил)-амид является урокиназным ингибитором [Pfiztr, 1999, Pat. EP 1077945, PCT WO 0005214], а N-(4-циано-3-трифторметилфенил)-3-(4-фторбензолсульфонил)-2-гидрокси-2-метил-пропиоамид (Bicalutamide, Casodex. Raffolutil) является противораковым препаратом для лечения простаты [AstraZeneca, 1982, Pat. US 4636505, Pat. EP 0100172, Pat. JP 1990131462].

Учитывая высокий биологический потенциал и широкий спектр физиологической активности сульфонилалкилкарбоновых кислот и их производных, актуальным является разработка новых соединений этого типа, фокусированных библиотек и фармацевтических композиций, включающих этих соединения, а также способов их получения и применения.

В результате проведенных исследований, направленных на поиск новых физиологически активных веществ, соединений-лидеров, изобретатели получили неизвестные ранее гетероциклилсульфиновые кислоты, а на их основе новые гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновые кислоты и их производные, которым свойственна физиологическая активность, фокусированную библиотеку и фармацевтическую композицию, включающую эти соединения, разработали способы их получения и применения.

Следует отметить, что сведения о гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновых кислотах и их производных, опубликованные в патентной и научной литературе, ограничиваются лишь приведенными выше примерами.

Ниже приведены определения терминов, которые использованы в описании изобретения.

«Комбинаторная библиотека» означает коллекцию соединений, полученных параллельным синтезом, предназначенную для поиска соединения-хита или -лидера, а также для оптимизации физиологической активности хита или лидера, причем каждое соединение библиотеки соответствует общему скэффолду и библиотека является коллекцией родственных гомологов или аналогов.

«Фокусированная библиотека» означает комбинаторную библиотеку, или совокупность нескольких комбинаторных библиотек, или совокупность библиотек и веществ, специальным образом организованную с целью увеличения вероятности нахождения хитов и лидеров или с целью повышения эффективности их оптимизации. Дизайн фокусированных библиотек, как правило, связан с направленным поиском эффекторов (ингибиторов, активаторов, агонистов, антагонистов и т.п.) определенных биомишеней (ферментов, рецепторов, ионных каналов и т.п.).

«Соединение-хит» («хит») означает соединение, проявившее в процессе первичного скрининга искомую физиологическую активность.

«Соединение-лидер» («лидер») означает соединение с выдающейся (максимальной) физиологической активностью, связанной с конкретной биомишенью, относящейся к определенной (или нескольким) патологии или болезни.

«Параллельный синтез» означает метод ведения комбинаторного химического синтеза библиотеки.

«Скэффолд» означает общую структурную формулу, или молекулярный каркас, или инвариантную область соединений, характерную для всех соединений, входящих в комбинаторную библиотеку.

«Нуклеофильный» означает электроноизбыточный реагент.

«Электрофильный» означает электронодефицитный реагент.

«Заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду или полупродукту синтеза в процессе их синтеза, например, «нуклеофильный заместитель», «электрофильный заместитель», «NH-защитный заместитель» или «инертный заместитель».

«Необязательно замещенный радикал» означает радикал без заместителей или содержащий один или несколько заместителей, в том числе: «нуклеофильный заместитель», «электрофильный заместитель», «NH-защитный заместитель» и/или «инертный заместитель».

«Нуклеофильный заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду в результате реакции с нуклеофильным реагентам, например, выбранным из группы первичных или вторичных аминов, спиртов, фенолов, меркаптанов и тиофенолов.

«Электрофильный заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду в результате реакции с электрофильным реагентом, например, выбранным из группы органических галогенидов (необязательно замещенных C₁-C₇ алкил галогенидов, необязательно замещенных арилC₁-C₇алкил галогенидов, необязательно замещенных гетероциклилC₁-C₇алкил галогенидов, необязательно замещенных арил галогенидов, необязательно замещенных гетероциклил галогенидов), органических кислот или их производных (ангидридов, имидазолидов, галогенангидридов), эфиров органических сульфокислот или органических сульфохлоридов, органических галогенформиатов, органических изоцианатов и органических изотиоцианатаминометилов.

«NH-Защитный заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду или полупродукту синтеза для временной защиты аминогруппы в мультифункциональных соединениях включая, но не ограничивая: амидный заместитель такой как формил, необязательно замещенный ацетил (например трихлорацетил, трифторацетил 3-фенилпропионил и др.), необязательно замещенный бензоил и др.; карбаматный заместитель такой как необязательно замещенный C₁-C₇ алкилоксикарбонил, например, метилоксикарбонил, этилоксикарбонил, трет-бутилоксикарбонил, 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc) и др.; необязательно замещенный C₁-C₇ алкильный заместитель, например, трет-бутил, бензил, 2,4-диметиксибензил, 9-фенилфлуоренил и др.; сульфонильный заместител, например, бензолсульфонил, п-толуолсульфонил и др. Более подробно «NH-Защитные заместители» описаны в книге: Protective groups in jrganic synthesis, Third Edition Greene, T.W. and Wilts, P.G.M. 1999, p. 494-653. Издательство John Wiley & Sons, Inc., New York, Chichester, Weinheim, Brisbane, Toronto, Singapore.

«Инертный заместитель» (или «не мешающий», "Non-interfering substituent") означает низко- или нереакционоспособный радикал включая, но не ограничивая C₁-C₇ алкил, C₂-C₇ алкенил, C₂-C₇ алкинил, C₁-C₇ алкокси, C₇-C₁₂ аралкил, замещенный инертными заместителями C₁-C₇ алкил, замещенный инертными заместителями C₂-C₇ алкенил, замещенный инертными заместителями аралкил, С₇-C₁₂ гетероциклилалкил, замещенный инертными заместителями гетероциклилалкил, С₇-C₁₂ алкарил, С₃-С₁₀ циклоалкил, С₃-С₁₀ циклоалкенил, фенил, замещенный фенил, толуил, ксиленил, бифенил, C₂-C₁₂ акоксиалкил, C₂-С₁₀ алкилсульфинил, С₂-С₁₀ алкилсульфонил, (СН₂)_m-O-(C₁-С₇ алкил), -(CH₂)_m-N(C₁-С₇ алкил)_n, арил, замещенный инертными заместителями арил, замещенный инертными заместителями алкокси, фторалкил, арилоксиалкил, гетероциклил, замещенный инертными заместителями гетероциклил и нитроалкил; где m и n имеют значение от 1 до 7. Предпочтительными «инертными заместителями» являются C₁-C₇ алкил, C₂-C₇ алкенил, C₂-C₇ алкинил, C₁-C₇ алкокси, С₇-C₁₂ аралкил, С₇-C₁₂ алкарил, С₃-С₁₀ циклоалкил, С₃-С₁₀ циклоалкенил, замещенный инертными заместителями C₁-С₇ алкил, фенил, замещенный инертными заместителями фенил, (CH₂)_m-O-(C₁-С₇ алкил), -(CH₂)_m-N(C₁-C₇ алкил)_n, арил, замещенный инертными заместителями арил, гетероциклил и замещенный инертными заместителями гетероциклил.

«Арил» означает один или более ароматических циклов, каждой из которых включает 5 или 6 атомов углерода. «Арил» может быть конденсированным полициклом, например, как нафталин или неконденсированным, например как бифенил. «Замещенный арил» имеет один или несколько заместителей.

«Галоген» означает атом фтора, хлора, брома или иода.

«Гетероцикл» означает один или несколько насыщенных, ненасыщенных или ароматических циклов с 5, 6 или 7 атомами, по крайней мере, один из которых является гетероатомом. Преимущественными гетероатомами являются сера, кислород и азот. «Гетероцикл» может быть конденсированным полициклом, например, как бензимидазол, бензоксазол, бензтиазол, хинолин или неконденсированным, например, как бипиридил.

«Азогетероцикл» означает гетероцикл, включающий, по крайней мере, один атом азота, например, как пиперидин, морфолин, пиррол, бензимидазол, бензоксазол, бензтиазол, хинолин.

«Замещенный гетероцикл» означает гетероцикл, имеющий один или несколько заместителей.

«Замещенный азогетероцикл» означает азогетероцикл, имеющий один или несколько заместителей.

Целью настоящего изобретения являются новые гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновые кислоты и их производные.

Поставленная цель достигается гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновыми кислотами и их производными общей формулы 1

или их фармацевтически приемлемыми солями, N-оксидами или гидратами, в которых:

W представляет необязательно замещенный гетероциклический радикал, в том числе пиррол-3-ил, тиофен-2-ил, изооксазол-4-ил, пиразол-4-ил, имидазол-4-ил, пиридин-3-ил, 1Н- 2,4-диоксо-пиримидин-5-ил, 2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил, 2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил, 1,3-дигидро-2-оксо-индол-5-ил, 2,3-диоксо-1Н-индол-5-ил, 2-оксо-3Н-бензооксазол-6-ил, бензотиазол-6-ил, 1Н-бензимидазол-5-ил, 1H-бензимидазол-5-ил, бензо[1,2,5]оксадиазол-4-ил, бензо[1,2,5]тиадиазол-4-ил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-ил, 3,4-дигидро-2-оксо-1Н-хинолин-6-ил, хинолин-8-ил, 1,4-дигидро-2,3-диоксо-хиноксалин-6-ил, 3-оксо-4Н-бензо[1,4]оксазин-7-ил, 3-оксо-4Н-бензо[1,4]тиазин-7-ил, 2,4-диоксо-1Н-хиназолин-6-ил, 2,4-диоксо-1,5-дигидробензо[b][1,4]диазепин-7-ил или 2,5-диоксо-3,4-дигидробензо[b][1,4]диазепин-7-ил;

Y представляет необязательно замещенную метиленовую группу;

R¹ атом хлора, необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную амино группу, необязательно замещенную азогетероциклил;

n имеет значение 1, 2 или 3; или

Y_n представляет собой атом углерода необязательно замещенного С₃-С₇циклоалкила или необязательно замещенного С₄-С₇гетероциклила;

исключая (тиофен-2-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиррол-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиразол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (имизазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиридин-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, 1-(бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-циклопропанкарбоновую кислоту и их эфиры, 3-(2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, 3-(5-бром-2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, их хлорангидриды и амиды.

Согласно изобретению наиболее предпочтительными соединениями общей формулы 1 являются 3-(гетероциклилсульфонил)-пропионовые кислоты и их производные общей формулы 1.1

или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты, в которых:

W и R¹ имеют вышеуказанное значение; R² и R³ независимо друг от друга представляют атом водорода или инертный заместитель, или R² и R³ вместе с атомами углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный циклоалкил; исключая 3-(2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, 3-(5-бром-2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, их хлорангидриды и амиды.

Согласно изобретению наиболее предпочтительными соединениями общей формулы 1 являются (гетероциклилсульфонил)-уксусные кислоты и их производные общей формулы 1.2

или их фармацевтически приемлемые солями, N-оксиды или гидраты, в которых:

W и R¹ имеют вышеуказанное значение; R⁴ и R⁵ независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель или R⁴ и R⁵ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный С₃-С₇циклоалкил или С₄-С₇гетероциклил; исключая (тиофен-2-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиррол-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиразол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (имизазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиридин-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, 1-(бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-циклопропанкарбоновую кислоту и их эфиры.

Целью настоящего изобретения являются фокусированная библиотека для поиска биологически активных соединений-лидеров.

Поставленная цель достигается фокусированной библиотекой, включающей, по крайней мере, одну (гетероциклилсульфонил)-алкилкарбоновую кислоту и ее производное общей формулы 1 или их фармацевтически приемлемую соль, N-оксид или гидрат.

Целью настоящего изобретения являются новая фармацевтическая композиция в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку.

Поставленная цель достигается фармацевтической композицией, включающей, по крайней мере, одну (гетероциклилсульфонил)-алкилкарбоновую кислоту и ее производное общей формулы 1 или их фармацевтически приемлемую соль, N-оксид или гидрат.

Фармацевтически приемлемые соли соединений могут быть получены традиционным путем, например, действием на соединения соответствующей кислотой или основанием. N-оксиды могут быть получены окислением соответствующих азотсодержащих соединений. Гидраты соединений могут быть получены, например, при перекристаллизации из водных растворов или образуются спонтанно в процессе синтеза.

Способ получения новых гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновых кислот и их производных основан на известных реакциях и заключается в сульфохлорировании гетероциклических соединений общей формулы 2, превращении образующихся сульфохлоридов 3 действием сульфита натрия в водно-щелочной среде в натриевые соли сульфиновых кислот 4, а затем действием на последние уксусной кислотой в сульфиновые кислоты 5 по приведенной ниже схеме:

где W имеет вышеуказанное значение.

Взаимодействием солей сульфиновых кислот общей формулы 4 с алкилаторами общей формулы 6 получают гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновые кислоты и их производные по приведенной ниже схеме:

в которых W, R¹, Y и n имеют вышеуказанное значение.

3-(Гетероциклилсульфонил)-пропионовыех кислоты и их производных общей формулы 1.1 получают взаимодействием сульфиновых кислот общей формулы 5 с акриловыми кислотами и их производными общей формулы 7.

в которых W, R¹, R² и R³ имеют вышеуказанное значение.

Ниже изобретение описывается с помощью примеров получения конкретных соединений и фокусированной библиотеки. Структуры полученных соединений подтверждались данными хроматографического и спектрального анализа.

Приведенные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают данное изобретение.

Пример 1. Общий способ получения гетероциклилсульфонил хлоридов общей формулы 3. Прибавляли в течение 30 мин при перемешивании и 30-40°С гетероциклическое соединение 2 (0,1 моль) к хлорсульфоновой кислоте [20 мл (0.3 моль)]. Реакционную смесь перемешивали при 40°С 15 мин и прибавляли при перемешивании и 50-70°С PCl₅ [25.0 г. (0.12 моль)]. Реакционную смесь нагревали до 80°С и перемешивали 1 час, после чего охлаждали до 5°С и выливали в лед (500 г). Осадок отфильтровывали, промывали на фильтре водой и экстрагируют хлороформом (100 мл). Экстракт промывали водой, сушили, отгоняли в вакууме хлороформм, остаток в случае необходимости перекристаллизовывали из подходящего растворителя. Получали гетероциклилсульфонил хлориды 3, выход и т.пл. которых приведены в таблице 1.

Пример 2. Общий способ получения натриевых солей гетероциклилсульфиновых кислот общей формулы 4. К раствору Na₂SO₃ [63 г (0.5 моль)] и NaHCO₃ [4,2 г (0.05 моль] в воде (330 мл) прибавляли в течение 1 часа при 85-90°С и перемешивании гетероциклилсульфонил хлорида 3 (0.5 моль), поддерживая рН 9-10 прибавлением 30% водного NaOH. Реакционную смесь перемешивали 30 мин, охлаждали при 5°С в течение ночи, осадок отфильтровывали и сушили при комнатной температуре. Получали натриевую соль гетероциклилсульфиновой кислоты общей формулы 4 с выходом 75-97%, которую использовали в дальнейших синтезах без дополнительной очистки.

Пример 3. Общий способ получения 3-(гетероциклилсульфонил)-пропионовых кислот общей формулы 1 (n=2, R¹=ОН). Способ, пригодный для параллельного синтеза комбинаторной библиотеки соединений общей формулы 1 (n=2, R¹=ОН). К раствору натриевой соли гетероциклилсульфиновой кислоты общей формулы 4 (0,5 моль) в смеси воды (500 мль) прибавляли уксусную кислоту (0,5 моль). К полученному раствору гетероциклилсульфиновой кислоты общей формулы 5 прибавляли в течение 20-30 мин при перемешивании и 20°С акриловую кислоту общей формулы 7 (R¹ = ОН) (0,5 моль). Осадок отфильтровывали, получали 3-(гетероциклилсульфонил)-пропионовую кислоту общей формулы 1 (R¹=ОН) с выходом 80-92% (Таблица 2).

Пример 4. Общий способ получени хлорангидридов (гетероциклилсульфонил)-алкилкарбоновых кислот общей формулы 1 (R¹ = Cl). Прибавляли в течение 40 мин при комнатной температуре гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновую кислоту общей формулы 1 (R¹=ОН) (0,1 моль) к раствору PCl₅ (0,15 моль) в толуоле (300 мл). Затем реакционную массу кипятили при перемешивании до полного растворения кислоты 1 (R¹=ОН), после чего реакционную массу охлождали, осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали, если необходимо, из подходящего растворителя. Получали хлорангидриды (гетероциклилсульфонил)-алкилкарбоновых кислот общей формулы 1 (R¹=Cl) с выходом 50-75% (Таблица 3).

Пример 5. Общий способ получени амидов (гетероциклилсульфонил)-алкилкарбоновых кислот общей формулы 1 (R¹=NR⁷R⁸). Способ, пригодный для параллельного синтеза комбинаторной библиотеки соединений общей формулы 1 (R¹=NR⁷R⁸).

Способ А. К растворам соответствующих аминов или азогетероциклов общей формулы HNR⁷R⁸ 9 (1,5 ммоль), триэтиламина [0,26 мл (1,8-2 ммоль)] в ДМФ охлажденным до 10°С при перемешивании прибавляли соответствующие хлорангидриды общей формулы 1 (R¹=Cl) (1,5 ммоль). Реакционные массы перемешивали 1 час при 55°С и разбавляли водой, осадки отфильтровывали и перекристаллизовывыли из метанола. Получали с выходом 30-95% комбинаторную библиотеку замещенных амидов (гетероциклилсульфонил)-алкилкарбоновых кислот 1 (R¹=NR⁷R⁸), представленных в Таблицах 4 и 5.

Способ Б. Нагревали смесь гетероциклилсульфонил-алкилкарбоновых кислот общей формулы 1 (R¹=ОН) (0,0011 моль) и карбодиимидазола [0.16 г (0,001 моль)] в сухом диоксане (5 мл) при 40-60°С в течение 2 часов. К реакционной массе прибавляли соответствующий амин или азогетероцикл общей формулы 9 (0,0011 моль). Реакционную массу кипятили 1-2 часа, охлаждали и разбавляли водой. Осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из МеОН или MeOH/DMF. Получали комбинаторную библиотеку амидов 1 (R¹=NR⁷R⁸) с выходом 30-75%, представленных в Таблицах 4 и 5.

Примеры 6. Составили фокусированную библиотеку, включающую 196 соединений общей формулы 1.1 (таблица 4) и 46 соединений общей формулы 1.2 (таблица 5) и испытали ее на способность ингибировать активность протеин-киназы, которая определялась следующим образом. Раствор полипептида (Calbiochem, USA), состоящего из случайной последовательности глутаминовой кислоты и тирозина в количественном соотношении 4:1 соответственно, выдерживался в лунках 96-луночных тарелок с оптически прозрачным дном в течение ночи. За это время полипептид прочно сорбировался на поверхности лунок. Сорбированный полипептид служил субстратом для киназы, которая фосфориллировала тирозин в этом полипептиде.

Добавляли 100 микролитров 1U киназы (Calbiochem, USA, 1U определялась как концентрация этого фермента, способная присоединить к субстрату 1 пикомоль фосфата за 1 минуту) в лунки с адсорбированным полипептидом без тестируемых соединений (контрольная активность) или в присутствии разных концентраций этих соединений. После 30-минутной инкубации эти растворы удаляли путем вытряхивания из лунок и лунки дважды промывались физиологическим раствором. В лунки заливали 100 микролитров раствора антифосфотирозиновых моноклональных IGg антител с конъюгированной пероксидазой из хрена (Sigma, USA). Количество связавшихся антител определялось по соответствующей активности пероксидазы, которая, в свою очередь, определялась по скорости преобразования пероксидазного субстрата (OPD, o-phenolenediamme dihydrochloride, Sigma) в окрашенный продукт. Концентрация этого продукта, образовавшегося за 30 минут реакции, определялась по оптической плотности при 490 nm, измеренной с помощью параллельного 96-луночного считывателя VICTOR²V (PerkinElmer, USA).

Для расчета процента ингибирования киназной активности каждая 96-луночная тарелка содержала следующие контрольные лунки:

1) реакционный раствор, содержащий все компоненты кроме киназы;

2) реакционный раствор вместе с киназой.

Оптическая плотность, измеренная в контрольных лунках (1), принималась за нулевую активность (OD₀), а оптическая плотность, измеренная в контрольных лунках (2), за 100% (OD₁₀₀). Оптические плотности, измеренные в присутствии тестируемых соединений (OD_i), выражались в процентах от максимальной активности, и процент ингибирования киназной активности рассчитывался по следующей формуле:

Величины ингибирования ABL-киназы (тирозиновой киназы, ответственной за развитие лейкемии Абельсона, - хронической миелогенной лейкемии,) полученные при испытании фокусированной библиотеки соединений 1 при концентрации 30 мкМ, колеблются в интервале от 2 до 20%, что подтверждает биологическую активность соединений общей формулы 1.

Данное изобретение относится к новым гетероциклилсульфонилалкилкарбоновым кислотам и их производным общей формулы 1

или их фармацевтически приемлемым солям, N-оксидам или гидратам, обладающим действием ингибитора киназ, а также к фокусированной библиотеке для поиска биологически активных соединений-лидеров, включающей по крайней мере одно вышеуказанное соединение. В общей формуле 1 W представляет необязательно замещенный гетероциклический радикал, в том числе: пиррол-3-ил, тиофен-2-ил, изооксазол-4-ил, пиразол-4-ил, имидазол-4-ил, пиридин-3-ил, 1Н-2,4-диоксопиримидин-5-ил, 2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил, 2,3-дигидро-1H-индол-7-ил, 1,3-дигидро-2-оксо-индол-5-ил, 2,3-диоксо-1Н-индол-5-ил, 2-оксо-3Н-бензоксазол-6-ил, бензотиазол-6-ил, 1H-бензимидазол-5-ил, бензо[1,2,5]оксадиазол-4-ил, бензо[1,2,5]тиадиазол-4-ил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-ил, 3,4-дигидро-2-оксо-1Н-хинолин-6-ил, хинолин-8-ил, 1,4-дигидро-2,3-диоксохиноксалин-6-ил, 3-оксо-4Н-бензо[1,4]оксазин-7-ил, 3-оксо-4Н-бензо[1,4]тиазин-7-ил, 2,4-диоксо-1Н-хиназолин-6-ил, 2,4-диоксо-1,5-дигидробензо[b][1,4]диазепин-7-ил или 2,5-диоксо-3,4-дигидробензо[b][1,4]диазепин-7-ил; Y представляет необязательно замещенную метиленовую группу; R¹ представляет атом хлора, необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенный азагетероциклил; n имеет значение 1,2 или 3; или Y_n представляет собой атом углерода необязательно замещенного С₃-С₇циклоалкила или необязательно замещенного С₄-С₇гетероциклила. Изобретение также относится к фармацевтической композиции в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку. 3 н. и 2 з.п. ф-лы, 5 табл.

1. Гетероциклилсульфонилалкилкарбоновые кислоты и их производные общей формулы 1

(1)

или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты,

в которой W представляет необязательно замещенный гетероциклический радикал, в том числе пиррол-3-ил, тиофен-2-ил, изооксазол-4-ил, пиразол-4-ил, имидазол-4-ил, пиридин-3-ил, 1Н-2,4-диоксо-пиримидин-5-ил, 2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил, 2,3-дигидро-1H-индол-7-ил, 1,3-дигидро-2-оксо-индол-5-ил, 2,3-диоксо-1Н-индол-5-ил, 2-оксо-3Н-бензоксазол-6-ил, бензотиазол-6-ил, 1H-бензимидазол-5-ил, бензо[1,2,5]оксадиазол-4-ил, бензо[1,2,5]тиадиазол-4-ил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-ил, 3,4-дигидро-2-оксо-1Н-хинолин-6-ил, хинолин-8-ил, 1,4-дигидро-2,3-диоксохиноксалин-6-ил, 3-оксо-4Н-бензо[1,4]оксазин-7-ил, 3-оксо-4Н-бензо[1,4]тиазин-7-ил, 2,4-диоксо-1Н-хиназолин-6-ил, 2,4-диоксо-1,5-дигидробензо[b][1,4]диазепин-7-ил или 2,5-диоксо-3,4-дигидробензо[b][1,4]диазепин-7-ил;

Y представляет необязательно замещенную метиленовую группу;

R¹ представляет атом хлора, необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенный азагетероциклил;

n имеет значение 1,2 или 3;

или Y_n представляет собой атом углерода необязательно замещенного С₃-С₇циклоалкила или необязательно замещенного С₄-С₇гетероциклила, исключая (тиофен-2-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиррол-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиразол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (имидазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиридин-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, 1-(бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-циклопропанкарбоновую кислоту и их эфиры, 3-(2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, 3-(5-бром-2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, их хлорангидриды и амиды.

1.1

или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты,

в которой W и R¹ имеют вышеуказанное значение;

R² и R³ независимо друг от друга представляют атом водорода или инертный заместитель или R² и R³ вместе с атомами углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный циклоалкил; исключая 3-(2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, 3-(5-бром-2-тиенилсульфонил)пропионовую кислоту, их хлорангидриды и амиды.

1.2

или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты,

в которой W и R¹ имеют вышеуказанное значение;

R⁴ и R⁵ независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель или R⁴ и R⁵ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены образуют необязательно замещенный С₃-С₇циклоалкил или необязательно замещенный С₄-С₇гетероциклил; исключая (тиофен-2-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиррол-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиразол-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (имидазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, (пиридин-3-сульфонил)-уксусную кислоту, (бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-уксусную кислоту, 1-(бензо[1,2,3]тиадиазол-4-сульфонил)-циклопропанкарбоновую кислоту и их эфиры.