СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИЖИЗНЕННОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ЭТАНОЛА У ТРУПА, ПОДВЕРГШЕГОСЯ ВОЗДЕЙСТВИЮ ОТКРЫТОГО ПЛАМЕНИ Российский патент 2006 года по МПК G01N33/48 G01N1/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для определения степени тяжести алкогольной интоксикации при жизни.

Согласно произведенной аналитической оценке результатов судебно-химических исследований, направленных на обнаружение этанола в мышечной ткани трупов, подвергшихся воздействию открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подлежащих тканей, было выявлено, что с учетом данных, полученных в ходе работы следственных органов, установленные показатели концентрации этанола в мышечной ткани часто противоречат ожидаемым. Данное обстоятельство обусловлено тем, что на содержание этанола, кроме прижизненного метаболического и токсико-динамического процессов, значительно влияет посмертное действие открытого пламени. Данное обстоятельство не отражено ни в научной, ни в методической литературе, которой руководствуются судебно-медицинские эксперты для оценки тяжести алкогольной интоксикации [1].

Известен способ определения концентрации этанола при проведении судебно-химического исследования с помощью газохроматографического исследования [2]. Суть ее заключается в следующем: условия хроматографического разделения: хроматограф ЛХМ-8 МД (мод. 5) с детектором по теплопроводности. Колонка стальная 200×0,3 см, наполненная хезасорбом - AW (0,25-0,36 мм) с 15% ПЭГ - 1500. Температура колонки 72°С, температура детектора - 100°С, ток детектора - 100 мА. Скорость газа-носителя гелия 1,4 ч/ч. Скорость диаграммной ленты - 720 мм/ч. Масштаб записи 1:10.

Методика исследования: метод основан на газохроматографическом разделении парогазовой фазы продуктов реакции этерификации алифатических спиртов азотистой кислотой. Реакция этерификации проводится непосредственно в исследуемой пробе при комнатной температуре.

Во флакон из дрота (из-под пенициллина), содержащий 0,5 мл раствора трихлоруксусной кислоты, вносят 0,5 г исследуемой пробы (биологической ткани). Флакон закрывают стандартной резиновой пробкой, которую фиксируют специальным зажимом. После энергичного перемешивания во флакон шприцем вводят 0,35 мл раствора нитрита натрия. Содержимое флакона энергично встряхивают (30 маятникообразных движений) и оставляют на 1 мин. Затем из флакона шприцем, путем прокола пробки, отбирают 0,5 мл парогазовой фазы, которую тотчас вводят в прибор.

При наличии в исследуемой пробе (биологической ткани) алифатических спиртов на хроматограмме появляются пики соответствующих алкилнитритов. С помощью секундомера измеряют время удерживания t_ri и по формулам рассчитывают параметры удерживания, а по таблице идентифицируют обнаруженные пики алкилнитритов.

Для идентификации алкилнитритов достаточно вычислить относительное время удерживания t_g.

Если на хроматограмме отсутствуют пики, то делают заключение о том, что проба не содержит алифатических спиртов.

Для количественного определения алифатических спиртов делают следующее. Во флакон из дрота, содержащий 0,5 г раствора трихлоруксусной кислоты, вносят 0,5 мл раствора изопропанола (внутренний стандарт) и 0,5 мл исследуемой пробы (биологической ткани), флакон закрывают стандартной пробкой, которую фиксируют специальным зажимом. Содержимое флакона перемешивают и во флакон шприцем вводят 0,35 мл нитрита натрия. Флакон энергично встряхивают (30 маятникообразных движений) и оставляют на 1 мин. После чего, из флакона шприцем, путем прокола пробки, отбирают 0,5 мл парогазовой фазы, которую тотчас вводят в прибор.

На хроматограмме измеряет высоту пиков и по формуле рассчитывают концентрации обнаруженных в пробе спиртов.

Однако способ не позволяет точно определить прижизненное содержание этанола в ткани трупа, подвергшегося воздействию открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подлежащих тканей, так как не учитывает воздействие высоких температур на ткани, что делает невозможным для судебно-медицинского эксперта вынести научно обоснованное суждение о степени алкогольного опьянения, в котором находился человек незадолго до смерти в случаях воздействия открытого пламени [3, 4].

Для повышения точности установления прижизненной концентрации этанола проводят определение содержания этанола и содержания воды в мышечной ткани трупа и рассчитывают прижизненную концентрацию этанола по формуле:

где

ПрКЭ - прижизненная концентрация этанола, ‰;

ПКЭ - посмертная концентрация этанола, ‰;

К - коэффициент (2,11);

СВМТ - содержание воды в мышечной ткани трупа не подвергшегося воздействию открытого пламени (77,5%);

M₁ - масса мышечной ткани до высушивания, мг;

М₂ - масса мышечной ткани после высушивания, мг;

На практике способ осуществляется следующим образом:

1. Производят забор двух навесок наиболее сохранившейся мышечной ткани массой не менее 0,5 г (предпочтение следует отдавать бедренным мышцам).

2. Проводят стандартное судебно-химическое исследование на наличие этанола в мышечной ткани первой навески [1].

3. Вторую навеску помещают на предварительно взвешенную подложку из алюминиевой фольги размером 2×2 см и взвешивают. Затем помещают в сушильный шкаф с температурой 105±3°С и выдерживается там до получения постоянной массы в течение суток. Через сутки навеску вместе с подложкой охлаждают в эксикаторе и взвешивают еще раз, в результате чего получают массу сухой ткани. Для обезжиривания высушенную пробу заливают 30-40 мл петролейного эфира. Через сутки извлекают из эфира и досушивают в термостате в течение 2-3 ч при температуре 105°С, затем определяют массу сухого обезжиренного вещества [5].

4. На заключительном этапе проводят расчет по формуле:

Полученные данные подтверждены экспериментально.

Для изучения изменения концентрации этанола в органах и тканях, происходящих в процессе действия открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подлежащих тканей, была создана экспериментальная модель.

В эксперименте на подопытных животных (беспородных крысах) изучалось изменение концентрации этанола в мышечной ткани под действием открытого пламени за промежутки времени в 1, 3 и 5 минут. В опытах были использованы 10 беспородных крыс обоего пола (масса тела 150-200 г). Крысам вводили внутрибрюшинно 1,5-2 мл 38% раствора этанола, что вызывало смертельное отравление с концентрацией этанола в крови, в среднем равной 5,27‰ (от 3,85‰ до 6,31%). Через 10-15 мин, после введения раствора этанола у животных развивалась глубокая алкогольная кома, проявляющаяся крайней заторможенностью, гипорефлексией и нарушением дыхания, которая через 30 минут после введения заканчивалась гибелью животного.

Для судебно-химического исследования и определения исходной концентрации этанола сразу же, после остановки сердечной и дыхательной деятельности, производилось вскрытие брюшной и грудной полостей для забора крови из сердца, мочи, мышцы левой передней конечности. После забора контрольных проб наносили ожоги открытым пламенем в области правой передней и задних конечностей в течение 1, 3 и 5 минут, затем проводили забор мышечной ткани для судебно-химического исследования (см. таблицу).

Изменение концентрации этанола в мышечной ткани под действием открытого пламени.nСодержание этанола в контрольных пробах, ‰Изменение концентрации этанола в мышечной ткани под действием открытого пламени, ‰кровьмочаМышцы
(1 группа)1 мин.
(2 группа)3 мин.
(3 группа)5 мин.
(4 группа)14,945,003,12,332,192,1723,855,812,452,262,031,8836,315,113,713,232,792,6945,964,823,192,512,171,9755,844,903,022,882,712,4865,445,462,242,131,701,6575,125,012,361,982,172,0584,404,874,013,482,802,7095,615,213,462,452,422,11105,204,783,542,552,192,02M±m5,27±0,035,10±0,033,11±0,192,66±0,142,32±0,112,17±0,11Р   Р1 и 2<0,05Р1 и 3<0,005Р1 и 4<0,001Примечание: р - достоверность значений в зависимости от длительности температурного воздействия.

Параллельно фиксировали изменения концентрации воды. Для этого был использован следующий метод [2]: сразу после разреза забиралась небольшая навеска массой 300-500 мг, которую помещали на предварительно взвешенную подложку из алюминиевой фольги размером 2×2 см и взвешивали. Затем пробу помещали в сушильный шкаф с температурой 105±3°С и выдерживали там до получения постоянной массы в течение суток. Через сутки кусочки вместе с подложкой охлаждали в эксикаторе, и взвешивали еще раз, в результате чего получали массу сухой ткани. Расчет процентного содержания воды производили по следующей формуле:

где

СВ - содержание воды, в %

АСВ - абсолютное содержание воды, в мг

МВВ - масса влажного вещества, в мг.

Для обезжиривания высушенную пробу заливали 30-40 мл петролейного эфира. Через сутки извлекали из эфира и досушивали в термостате в течение 2-3 ч при температуре 105°С, затем определяли массу сухого обезжиренного вещества [5]. Масса сухого остатка контрольных проб в среднем составила 19,5%. Взвешивание образцов мышечной ткани, после действия открытого пламени, показало отчетливое падение содержания воды в течение 1 минуты на 58,33%, 3 минут на 64,83%, 5 минут на 67,55%.

Установлено, что при действии открытого пламени на ткани в течение 1 минуты происходит уменьшение концентрации этанола в мышечных тканях подопытных животных на 0,45‰ (или 14,5%), к концу 3 минуты на 0,79‰ (или 25,4%), к концу 5 минуты на 0,94‰ (или 30,23%). Таким образом, суммарное уменьшение содержания этанола в течение 5 минут составляет 30,23% (или 0,94‰), а воды на 67,55%.

На основании экспериментальных исследований было доказано, что в мышечной ткани, подвергшейся воздействию открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подлежащих тканей, падение содержания воды и этанола происходит взаимосвязанно и одновременно. Рассчитан коэффициент снижения концентрации этанола и воды, этот коэффициент равен 2,11.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1.

Гр-н Х был обнаружен в своем доме во время тушения пожара, при этом на теле трупа были обнаружены ожоги 1-2 степени площадью 25%, 3а-б степени площадью около 70%. Одним из интересующих следователя вопросов касался определения степени тяжести алкогольного опьянения. С целью определения прижизненной концентрации этанола в мышечной ткани трупа было проведено судебно-химическое исследование и расчет с учетом полученных нами данных. При судебно-химическом исследовании было установлено, что в мышце трупа этиловый алкоголь обнаружен в количестве 2,8‰, что обычно соответствует сильной степени алкогольного опьянения у живых лиц. Ответить на вопрос об уровне прижизненной концентрации этанола не представлялось возможным. Решить эту проблему удалось, применив разработанный метод.

1. Произвели забор двух навесок мышечной ткани по 0,5 г из области бедер.

2. Затем было проведено стандартное судебно-химическое исследование на наличие этанола в мышечной ткани первой навески, которое выявило концентрацию этанола равную 2,8‰.

3. Вторую навеску поместили на предварительно взвешенную подложку из алюминиевой фольги размером 2×2 см и взвесили - масса навески составила 500 мг. Затем поместили в сушильный шкаф с температурой 105±3°С и выдержали там до получения постоянной массы в течение суток. Через сутки навеску вместе с подложкой охладили в эксикаторе и взвесили еще раз, в результате чего получили массу сухой ткани. Для обезжиривания высушенную пробу залили 30 мл петролейного эфира. Через сутки извлекли из эфира и досушили в термостате в течение 2 ч при температуре 105°С, затем определили массу сухого обезжиренного вещества, которая равнялась 350 мг. Потеря воды составила 70%.

4. На заключительном этапе проводят расчет по формуле:

После проведения коррекции полученных цифр с использованием вышеприведенной формулы удалось установить, что прижизненная концентрация этанола в мышечной ткани трупа составляла 3,4‰, что обычно соответствует тяжелому отравлению у живых лиц. В ходе дальнейшего расследования уголовного дела полученные данные нашли свое подтверждение.

Пример 2.

Гр-н У был эвакуирован из своей квартиры во время тушения пожара, при этом на теле трупа были обнаружены ожоги 1-2 степени площадью около 70%, За степени площадью около 20%. С целью определения прижизненной концентрации этанола в мышечной ткани трупа было проведено судебно-химическое исследование и расчет с учетом полученных нами данных. При судебно-химическом исследовании было установлено, что в мышце трупа этиловый алкоголь обнаружен в количестве 1,4‰, что обычно соответствует легкой степени опьянения у живых лиц. Решить вопрос об уровне прижизненной концентрации этанола не представлялось возможным. Применив разработанный метод (исследование проводится поэтапно, аналогично примеру 1), было установлено, что объем испарившейся воды в мышце равняется 72%. После проведения коррекции полученных цифр с использованием вышеприведенных формул удалось установить, что прижизненная концентрация этанола в мышечной ткани трупа составляла 1,58‰, что обычно соответствует средней степени опьянения у живых лиц. В ходе дальнейшего расследования уголовного дела полученные данные нашли свое подтверждение.

Таким образом, применение предлагаемого способа позволяет установить прижизненную концентрацию этанола в мышечной ткани трупа подвергшегося воздействию открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подлежащих тканей.

ЛИТЕРАТУРА

1. Методические рекомендации МЗ СССР "Система газохроматографического исследования биологических проб на наличие алкоголя и его суррогатов", 1985 г.

2. "Система газохроматографического исследования биологических проб на наличие алкоголя и его суррогатов", методические рекомендации, М., 1985 г.

3. Пиголкин Ю.И., Попов В.Л.// Судебная медицина: Учебник. - М., 2003.

4. Судебная медицина: Руководство для врачей./ Под ред. А.А.Матышева - М., 1998.

5. Медведев Н.А., Гайкова О.Н., Гусев Г.П. - Архив патологии, 1988, №11, с.77-79.

Изобретение относится к судебной медицине и может быть использовано определения прижизненной концентрации этанола у трупа, подвергшегося воздействию открытого пламени. Определяют содержание воды в мышечной ткани трупа, не подвергшейся воздействию открытого пламени, массу мышечной ткани до и после высушивания и рассчитывают прижизненную концентрацию этанола по формуле:

где

ПрКЭ - прижизненная концентрация этанола в ‰;

ПКЭ - посмертная концентрация этанола в ‰;

СВМТ - содержание воды в мышечной ткани трупа, не подвергшейся воздействию открытого пламени, равное 77,5%;

М₂ - масса мышечной ткани после высушивания в мг;

M₁ - масса мышечной ткани до высушивания в мг;

К - коэффициент, равный 2,11. Данное изобретение способствует повышению точности определения этанола в мышечной ткани трупа, подвергшегося воздействию открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подлежащих тканей. 1 табл.

Способ определения прижизненной концентрации этанола у трупа, подвергшегося воздействию открытого пламени с обугливанием кожных покровов и подкожно-жировой клетчатки, включающий взятие и исследование биологических тканей трупа с определением посмертной концентрации этанола в мышечной ткани с помощью газохроматографии, отличающийся тем, что определяют содержание воды в мышечной ткани трупа, не подвергшейся воздействию открытого пламени, массу мышечной ткани до и после высушивания и рассчитывают прижизненную концентрацию этанола по формуле

где ПрКЭ - прижизненная концентрация этанола в ‰;

ПКЭ - посмертная концентрация этанола в ‰;

СВМТ - содержание воды в мышечной ткани трупа, не подвергшейся воздействию открытого пламени, равное 77,5%;

М₂ - масса мышечной ткани после высушивания в мг;

M₁ - масса мышечной ткани до высушивания в мг;

К - коэффициент, равный 2,11.