ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ МЕТРИТ-МАСТИТ-АГАЛАКТИИ У СВИНОМАТОК И ПОСЛЕРОДОВОГО ЭНДОМЕТРИТА У КОРОВ Российский патент 2006 года по МПК A61K31/10 A61K31/345 A61K31/495 A61P15/00 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к препаратам для лечения и профилактики метрит-мастит-агалактии у свиноматок и послеродового эндометрита у коров.

Метрит-мастит-агалактия - острое заболевание свиноматок, возникающее как общий синдром в первые двое суток после опороса и проявляющееся воспалением матки, молочной железы, а также снижением (гипогалактия) или прекращением (агалактия) секреции молока. Заболевание проявляется повышением температуры тела до 39,8-40,8°С, учащением пульса и дыхания, угнетением общего состояния, снижением или прекращением приема корма и воды. Свиноматки лежат, не допуская поросят к соскам. Из половых путей выделяется слизисто-гнойный экссудат жидкой или полужидкой консистенции в количестве от 10-20 до 200-300 мл. Наружные половые органы, слизистая оболочка влагалища гиперемированы. Основной формой воспаления молочной железы является субклинический мастит, которым поражается до 40-60% функционирующих долей молочной железы свиноматок. Клинически выраженный мастит регистрируется у 12-20% больных свиноматок.

Острый послеродовой эндометрит - воспаление преимущественно слизистой оболочки матки. В зависимости от характера воспаления послеродовой эндометрит подразделяется на катаральный, гнойно-катаральный и фибринозный. Считается, что основной формой проявления послеродового эндометрита у коров является гнойно-катаральный эндометрит. Острый послеродовой эндометрит клинически проявляется на 8-10 день после родов, реже на 6-7 день и характеризуется обильным выделением экссудата (слизистого, гнойно-слизистого, фибринозного) жидкой консистенции серо-бурого или желто-бурого цвета. Послеродовой эндометрит регистрируется у 20-57% отелившихся коров.

Для лечения и профилактики послеродовых болезней у свиноматок применяют препараты антимикробного действия, включающие антибиотики, сульфаниламидные, нитрофурановые средства. Но не все они дают ожидаемый эффект. Это, прежде всего, объясняется снижением чувствительности микрофлоры матки к препаратам. Поэтому необходима периодическая замена препаратов по мере снижения их терапевтической эффективности и достаточный арсенал используемых ротационных средств. В связи с этим возникает необходимость разработки новых эффективных препаратов. В качестве аналогов нами взяты два препарата, применяемые для лечения свиноматок, больных метрит-мастит-агалактией и лечения коров, больных послеродовым эндометритом.

Неофур - комплексный препарат, содержащий неомицин, фуразолидон и желатино-глицериновую основу. Применяют для лечения и профилактики воспалительного процесса в матке животных. Основным недостатком неофура является быстрое снижение его терапевтической и профилактической эффективности из-за снижения чувствительности микрофлоры и необходимость его многократного введения в связи с отсутствием в основе препарата пенетрирующих веществ /1/.

Лефуран - комплексный препарат, содержащий левомицетин и фурагин, растворенные в диметилсульфоксиде /2/.

Основными недостатками лефурана являются:

а) снижение его терапевтической эффективности из-за быстрого уменьшения чувствительности микрофлоры к левомицетину в связи с длительным (более 20 лет) применением данного антибиотика в свиноводстве;

б) высокая стоимость препарата из-за большой концентрации (65%) диметилсульфоксида (ДМСО).

Наиболее близким аналогом разработанного препарата является препарат энроцид /3/. Энроцид представляет собой 0,4% энрофлоксацин в растворе диметилсульфоксида и воды дистиллированной.

Недостатками энроцида являются снижение его терапевтической эффективности, связанное с развитием устойчивости микроорганизмов к энрофлоксацину. Выяснено, что это обусловлено нарушением структуры ДНК-гиразы - фермента, вызывающего репликацию бактериальной ДНК, а также снижением проникновения хинолонов через клеточную стенку бактерий /4/.

Кроме того, известно, что в однокомпонентных препаратах, содержащих одно лекарственное средство, устойчивость бактерий развивается быстрее.

Одной из мер, предупреждающей развитие резистентности микроорганизмов, является разработка лекарственных форм, включающих несколько компонентов с разным механизмом антимикробного действия. В том случае, когда сочетание антибиотиков не приводит к синергидному эффекту, а ограничивается адаптивным действием, расширяется спектр действия комплексных препаратов, что важно при смешанных инфекциях. Комплексное применение антибиотиков также эффективно при воздействии на резистентные формы микроорганизмов. При этом используют различные механизмы воздействия на микробную клетку. Комбинированная антибиотикотерапия снижает возможность возникновения лекарственной устойчивости микроорганизмов /5/.

Благодаря взаимоусиливающему действию компонентов комплексных препаратов и достижению терапевтического эффекта меньшими дозами появляется возможность снижения токсичности отдельных компонентов /6/.

В связи с изложенным в состав заявляемого препарата, кроме энрофлоксацина, введено лекарственное средство нитрофуранового ряда - фуракрилин, также обладающее широким спектром антимикробного действия.

Техническим результатом изобретения является повышение эффективности, расширение спектра действия и усиление антимикробной активности.

Поставленная цель достигается применением комплексного препарата, состоящего из энрофлоксацина, фуракрилина, диметилсульфоксида и дистиллированной воды. Препарат применяется путем введения его в полость матки больным метрит-мастит-агалактией свиноматкам и больным послеродовым эндометритом коровам с лечебной целью и животным после опороса и отела с профилактической целью.

Заявляемый препарат состоит из следующих компонентов, мас.%:

Энрофлоксацин 0,3-0,5

Фуракрилин 0,021-0,027

Диметилсульфоксид 38-50

Вода дистиллированная Остальное

При этом оптимальным соотношением входящих в состав препарата компонентов является следующее, мас.%:

Энрофлоксацин 0,4

Фуракрилин 0,025

Диметилсульфоксид 40

Вода дистиллированная Остальное

Энрофлоксацин - производное хинолкарбоксильной кислоты, относится к группе фторхинолонов третьего поколения и состоит из одного радикала фтора в позиции 6, одного радикала пиперазинила в позиции 7 и радикала циклопропила в позиции 1 /7/.

Энрофлоксацин труднорастворим в воде; малорастворим в этаноле; хорошо растворим в хлороформе, в кислых и щелочных растворах.

Благодаря своей структуре энрофлоксацин обладает следующими преимуществами перед многими антибактериальными препаратами:

- активен в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, а также микоплазм;

- активен при пероральном введении, т.к. хорошо всасывается из желудочно-кишечного тракта и проникает во все органы и ткани организма;

- малотоксичен для животных и птиц.

Энрофлоксацин обладает широким спектром антибактериального действия, подавляет рост и развитие грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в том числе Е.coli, Haemophilus, Klebsiella, Pasteurella, Pseudomonas, Bordetella, Campylobacter, Erysipelothrix, Corynebacterium, Staphylococcus, Streptococcus, Actinobacillus, Clostridium, Bacteroides, Fusobacterium, а также Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma synoviae, Mycoplasma meleagridis, Mycoplasma iowae.

Энрофлоксацин блокирует действие специфического бактериального фермента ДНК-гиразы. Этот фермент необходим для раскрутки свернутой двойной спирали ДНК перед ее репликацией. Энрофлоксацин воздействует непосредственно на субъединицы А, что приводит к остановке репликации ДНК и появлению новых бактерий.

Энрофлоксацин непосредственно связан со специфическими участками ДНК, к которым обычно присоединяется ДНК-гираза. Тем самым фторхинолон препятствует началу репликации.

Специфический механизм действия фторхинолонов, отличающийся от других антибактериальных препаратов, обеспечил для энрофлоксацина отсутствие перекрестной резистентности со всеми антибиотиками, сульфаниламидами и нитрофуранами.

Отсутствие ДНК-гиразы, мишени для энрофлоксацина, в клетках млекопитающих и птиц делает препарат практически не токсичным для макроорганизма.

Так ЛД₅₀ при однократном пероральном введении для цыплят колеблется в пределах 2000-2500 мг/кг массы тела, что в сотни раз превышает терапевтическую дозу.

Фуракрилин - антимикробное средство широкого спектра действия, оказывает антимикробное действие на грамположительных и грамотрицательных бактерий, особенно на гноеродные организмы. Высокоактивен по отношению к возбудителям дизентерии, колиэнтеритов, листериоза и к антибиотико-устойчивым микробам. Фуракрилин малотоксичен. Кумулятивным действием не обладает. При назначении внутрь в терапевтических дозах хорошо всасывается и в течение 6 часов сохраняется в крови в эффективных концентрациях. Повышает фагоцитарную активность лейкоцитов, не влияет на состав крови.

Механизм антимикробного действия фуракрилина основан на блокировании клеточного дыхания. Будучи акцепторами водорода, они конкурируют с флавиновыми ферментами, нарушают синтез нуклеиновых кислот, блокируя структурный ген ДНК, угнетают метаболизм пирувата, активность дегидрогеназ, альдолаз и транскетолаз, что отрицательно сказывается на энергетическом обмене микробной клетки, ее росте и размножении) /8/.

Диметилсульфоксид (ДМСО) используется в качестве растворителя. Он является единственным малотоксичным веществом, обладающим способностью проникать через неповрежденные ткани и нести с собой растворенные лекарственные вещества (пенетрирующие и транспотные свойства) /9/.

Заявляемый препарат вводится свиноматкам внутриматочно с помощью прибора для искусственного осеменения свиней - ПОС-5. При лечении однократно в дозе 0,7 мл/кг массы тела при необходимости вводится повторно через 24 часа. Для профилактики доза составляет 0,5 мл/кг массы тела через 6-12 часов после опороса, однократно.

Препарат для лечения коров, больных острым послеродовым эндометритом, вводится внутриматочно с помощью шприца Жане 3-4 раза (первые два раза в дозе 200 мл, а затем по 150 мл) с 48-часовым интервалом до выздоровления.

Для профилактики послеродового эндометрита коровам внутриматочно однократно вводить препарат в дозе 200 мл сразу после оперативного отделения последа или через 6-12 часов после нормальных родов в случаях широкого распространения данной патологии в хозяйстве.

Препарат изготавливается следующим образом (компоненты в мас.%). В ДМСО (40%) вносится фуракрилин 0,025% и перемешивается до полного растворения, к нему постепенно добавляется 0,4% энрофлоксацина в виде водного раствора и добавляется дистиллированная вода до 100%.

Проверка эффективности препарата проводилась на свиноматках племзавода-агрофирмы ЗАО «Краснодонское» Иловлинского района Волгоградской области и коровах ООО «Воронежпищепродукт» Новоусманского района Воронежской области.

Сущность заявляемого технического решения поясняется примерами.

Пример 1.

Опыт проводили на свиньях крупной белой породы по второму-четвертому опоросам. Диагноз ставился на основании клинического, акушерско-гинекологического обследования.

Препарат вводили в полость матки при помощи ПОС-5 в дозе 0,7 мл/кг массы тела в подогретом до 40% виде. Если эффекта после введения заявляемого препарата не получено, то препарат вводился повторно. Опыт проводили с использованием трех композиций действующих компонентов заявляемого препарата:

№1 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,3, фуракрилин 0,021, диметилсульфоксид 38 и дистиллированную воду до 100;

№2 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,4, фуракрилин 0,025, диметилсульфоксид 40 и дистиллированную воду до 100;

№3: содержит (мас.%) энрофлоксацин 0,5, фуракрилин 0,027, диметилсульфоксид 50 и дистиллированную воду до 100.

Животных контрольной группы лечили с использованием базового препарата неофура. Суспензию неофура, приготовленную из расчета 3-4 свечи на 150 мл дистиллированной воды, вводили с 24-часовым интервалом до выздоровления в соответствии с наставлением к препарату /1/.

За животными проводили ежедневное клиническое обследование, учитывая время исчезновения клинических признаков заболевания (t, пульс, дыхание, выделение из наружных половых органов, общее состояние, прием корма и воды, состояние поросят).

Результаты опыта представлены в таблице 1.

Таблица 1Терапевтическая эффективность заявленного и известного препаратов при лечении метрит-мастит-агалактии у свиноматокПоказателиС применением базового вариантаС применением различных соотношений компонентов заявленного препарата№1№2№3Количество больных животных17201920Терапевтический эффект после однократного внутриматочного введения11 (64,7%)13 (65,0%)16 (84,2%)16 (80,0%)Терапевтический эффект после повторного введения невыздоровевшим животным13 (76,5%)16 (80,0%)19 (100%)19 (95,0%)Не выздоровело после двукратного введения14 (23,5%)4 (20,0%)-1 (5,0%)Пораженность долей мол. железы свиноматок через 5 суток от начала лечения (%)70,323,40,713,2

Из таблицы 1 следует, что наилучший терапевтический эффект достигнут при применении композиции №2, содержащей (мас.%): энрофлоксацин 0,4, фуракрилин 0,025, диметилсульфоксид 40 и дистиллированную воду до 100.

Пример 2.

Опыт проводили на свиноматках крупной белой породы по 2-5 опоросам с массой тела 180-230 кг. Профилактику метрит-мастит-агалактии проводили путем однократного внутриматочного введения препарата при помощи ПОС-5 через 4-6 часов после опороса в дозе 50 мл на 100 кг массы тела. Опыт проводили с использованием трех композиций действующих компонентов заявляемого препарата:

№1 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,3, фуракрилин 0,021, диметилсульфоксид 38 и дистиллированную воду до 100;

№2 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,4, фуракрилин 0,025, диметилсульфоксид 40 и дистиллированную воду до 100;

№3: содержит (мас.%) энрофлоксацин 0,5, фуракрилин 0,027, диметилсульфоксид 50 и дистиллированную воду до 100.

Животным контрольной группы с применением базового варианта однократно внутриматочно вводили суспензию неофура, приготовленную из расчета 1 суппозиторий на 50 мл дистиллированной воды через 4-6 часов после опороса.

Животным контрольной группы без применения прототипа никаких препаратов после опороса не вводили.

За животными проводили ежедневное клиническое обследование, учитывая уровень заболеваемости свиноматок метрит-мастит-агалактией и эндометритом.

Результаты опыта представлены в таблице 2.

Таблица 2Эффективность заявленного и известного препаратов для профилактики метрит-мастит-агалактии у свиноматокПоказателиЗаявленный препарат, композицииС применением базового вариантаБез применения препарата№1№2№3Количество животных в опыте2527272928Эндометрит1010111116ММА42329Здоровые111513163

Из таблицы 2 следует, что лучший профилактический эффект достигнут при применении композиции действующих компонентов №2: энрофлоксацина, фуракрилина и диметилсульфоксида в соотношении 0,4:0,025:40,0.

Пример 3.

Опыт проводили на коровах красно-пестрой породы 4-6-летнего возраста. Диагноз ставили на основании клинического, акушерско-гинекологического обследования, данных анамнеза.

Препарат вводили в полость матки при помощи шприца Жане первые два раза в дозе 200 мл, а затем по 150 мл с 48-часовым интервалом до клинического выздоровления. Опыт проводили с использованием трех композиций действующих компонентов заявляемого препарата:

№1 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,3, фуракрилин 0,021, диметилсульфоксид 38 и дистиллированную воду до 100;

№2 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,4, фуракрилин 0,025, диметилсульфоксид 40 и дистиллированную воду до 100;

№3: содержит (мас.%) энрофлоксацин 0,5, фуракрилин 0,027, диметилсульфоксид 50 и дистиллированную воду до 100.

Животных контрольной группы лечили с использованием базового препарата - неофура. Суспензию неофура, приготовленную из расчета 3-4 свечи на 150-200 мл дистиллированной воды, вводили с 48-часовым интервалом до выздоровления в соответствие с наставлением к препарату /1/.

За животными проводили ежедневное клиническое обследование, учитывая время исчезновения клинических признаков заболевания, количество выздоровевших и оплодотворившихся животных, коэффициент оплодотворения, продолжительность периода от отела до оплодотворения.

Результаты опыта представлены в таблице 3.

Таблица 3Терапевтическая эффективность заявленного и известного препаратов при лечении эндометрита у коровПоказателиЗаявленный препарат, композицииБазовый вариант№1№2№3Количество животных, гол12131312Сроки выздоровления, дни14,8±0,7813,3±0,4613,9±0,5115,4±0,67Количество введений препаратов5,24±0,393,91±0,314,02±0,285,69±0,24Выздоровело, гол911109Терапевтическая эффективность, %75,084,676,975,0Период от отела до оплодотворения, дни79,1±3,0965,2±2,0768,4±2,4778,9±3,41Оплодотворилось при первом осеменении:    гол61097%50,076,969,258,3Коэффициент оплодотворения1,91±0,191,48±0,081,56±0,091,89±0,17Токсический эффект, гол0000

Из таблицы 3 следует, что лучший терапевтический эффект достигнут при применении композиции действующих компонентов №2: энрофлоксацина, фуракрилина и диметилсульфоксида в соотношении 0,4:0,025:40,0.

Пример 4.

Опыт проводили на коровах красно-пестрой породы 4-6-летнего возраста. Профилактику послеродового эндометрита проводили путем однократного внутриматочного введения препарата при помощи шприца Жане сразу после оперативного отделения последа или через 6-8 часов после нормальных родов в дозе 200 мл. Опыт проводили с использованием трех композиций действующих компонентов заявляемого препарата:

№1 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,3, фуракрилин 0,021, диметилсульфоксид 38 и дистиллированную воду до 100;

№2 содержит (мас.%): энрофлоксацин 0,4, фуракрилин 0,025, диметилсульфоксид 40 и дистиллированную воду до 100;

№3: содержит (мас.%) энрофлоксацин 0,5, фуракрилин 0,027, диметилсульфоксид 50 и дистиллированную воду до 100.

Животным контрольной группы с применением базового варианта однократно внутриматочно вводили суспензию неофура в дозе 200 мл сразу после оперативного отделения последа или через 6-8 часов после нормальных родов /1/.

Животным контрольной группы без применения прототипа никаких препаратов после опороса не вводили.

За животными проводили ежедневное клиническое наблюдение, учитывая уровень заболеваемости коров послеродовым эндометритом, процент оплодотворившихся животных, период от отела до оплодотворения, коэффициент оплодотворения.

Результаты представлены в таблице 4.

Таблица 4Эффективность заявленного и известного препаратов для профилактики послеродового эндометрита у коровПоказателиЗаявленный препарат, композицииС применением базового вариантаБез применения препарата№1№2№3Количество животных, гол1112121212Заболело послеродовым эндометритом:     гол,31235%27,38,316,725,041,7Профилактическая эффективность, %72,791,783,375,058,3Период от отела до оплодотворения, дни59,8±3,1446,7±2,1749,8±2,0758,1±3,0475,6±4,21Оплодотворилось при первом осеменении:     гол,69875%50,075,066,758,341,7Коэффициент оплодотворения1,51±0,091,33±0,081,38±0,081,47±0,082,14±0,17Токсический эффект, гол00000

Из таблицы 4 следует, что лучший профилактический эффект достигнут при применении композиции действующих компонентов №2: энрофлоксацина, фуракрилина и диметилсульфоксида в соотношении 0,4:0,025:40,0.

Пример 5.

Для проверки антимикробной активности заявляемого препарата в сравнении с прототипом проведен опыт. Заявляемый препарат был взят в оптимальном соотношении действующих компонентов, мас.%:

Энрофлоксацин 0,4

Фуракрилин 0,025

Диметилсульфоксид 40

Вода дистиллированная Остальное

Определена антимикробная активность (БС - бактериостатическая активность, БЦ - бактерицидная активность) заявляемого препарата методом серийных разведений.

Таблица 5Антимикробная активность заявляемого препарата и энроцидаКультураКонцентрация препарата, мкг/млэнроцидзаявляемый препаратБСБЦБСБЦStaph. aureus1,953,91,01,0Е.coli О 8660,490,490,0150,03E.coli О 1413,97,81,953,9Str. agalactiae0,490,490,080,32

Из таблицы 5 следует, что заявляемый препарат обладает более высокой антимикробной активностью по сравнению с энроцидом.

Пример 6.

Для определения чувствительности микрофлоры, изолируемой из полости матки больных эндометритом коров и свиноматок, к заявляемому препарату и энроциду проведен опыт. Заявляемый препарат был взят в оптимальном соотношении действующих компонентов, мас.%:

Энрофлоксацин 0,4

Фуракрилин 0,025

Диметилсульфоксид 40

Вода дистиллированная Остальное

Чувствительность выделенной микрофлоры определена с использованием индикаторных дисков.

Таблица 6Чувствительность микрофлоры к заявляемому препарату и энроцидуКультураЗона задержки роста, ммэнроцидЗаявляемый препаратЕ.coli О 86*24Е.coli О 1261327Staph. aureus1528Staph. epidermidis1324Str. β-гемолитический718Str. agalactiae1824Str. disagalactiae1227*Примечание: при зоне задержки роста менее 10 мм микроорганизмы считаются нечувствительными, при зоне задержки роста от 10 до 15 мм - малочувствительными, от 15 до 20 мм - чувствительными и более 20 мм - высокочувствительными.

Из таблицы 6 следует, что заявляемый препарат обладает более широким спектром антимикробного действия, поскольку в отношении него практически все выделенные микроорганизмы проявляют высокую чувствительность.

Таким образом, проведенные исследования показали эффективность заявляемого препарата и широкий спектр его действия для лечения и профилактики метрит-мастит-агалактии у свиноматок и послеродового эндометрита у коров.

Источники информации

1. Червяков Д.К. и др. Лекарственные средства в ветеринарии. - М.: Колос, 1977. - С.342.

2. Сотников А.В. Диагностика и лечение субклинического мастита при ММА (метрит-мастит-агалактии) у свиноматок. / Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. - Воронеж, 1985.

3. Временное наставление по применению препарата энроцид для профилактики и лечения послеродовых гинекологических заболеваний у коров и свиноматок (в порядке широкого производственного испытания в 2000-2002 гг.) №13-5-2/2007. Утверждено департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 15.05.2000 г.

4. М.Gellert. DNA topoisomerases / Ann. Rev. Biocem. - 1981. - V.50. - P.879-910.

5. Ковалев В.Ф. и др. Антибиотики в продуктах животноводства. - М., 1977.

6. Рабинович М.И. Практикум по ветеринарной фармакологии и рецептуре. / 3-е изд., испр. и доп. - Агропромиздат, 1988. - 239 с.

7. Сазонова Е.М. Разработка антибактериального препарата на основе энрофлоксацина, изучение его токсичности, фармакокинетики и терапевтической эффективности. / Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук. - Воронеж, 2000.

8. Ковалев В.Ф., Волков И.Б., Виолин Б.В. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии: Справочник // Агропромиздат, 1988.

9. Диметилсульфоксид: фармакология, применение в дерматологии и смежных специальностях. - Пермь, 1975.

Использование: в области ветеринарии. Сущность изобретения: препарат для лечения и профилактики метрит-мастит-агалактии у свиноматок и послеродового эндометрита у коров, содержащий энрофлоксацин, диметилсульфоксид, фуракрилин и дистиллированную воду, при следующем соотношении компонентов, мас.%: энрофлоксацин 0,3-0,5; фуракрилин 0,021-0,027; диметилсульфоксид 38-50%; вода дистиллированная остальное. Препарат вводится внутриматочно свиноматкам с помощью прибора для искусственного осеменения свиней ПОС-5. По сравнению с аналогами препарат обладает более широким спектром антимикробного действия и высокой антимикробной активностью. 6 табл.

Препарат для лечения и профилактики метрит-мастит-агалактии у свиноматок и послеродового эндометрита у коров, содержащий энрофлоксацин, диметилсульфоксид и дистиллированную воду, отличающийся тем, что он дополнительно содержит фуракрилин при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Энрофлоксацин0,3-0,5Фуракрилин0,021-0,027Диметилсульфоксид38-50Вода дистиллированнаяОстальное