Изобретение относится к новым производным гидантоинов, тиогидантоинов, пиримидиндионов и тиоксопиримидинонов приведенной ниже общей формулы I, к способам их получения и к их применению в качестве лекарственных средств. Эти соединения обладают высоким сродством к некоторым подтипам рецепторов соматостатина и характеризуются, таким образом, ценными фармакологическими свойствами. Изобретение относится также к содержащим названные соединения фармацевтическим композициям и к их использованию для приготовления лекарственных средств, предназначенных для лечения патологических состояний или болезней, в которые вовлечен один (или несколько) из рецепторов соматостатина.
Соматостатин (ССТ) представляет собой циклический тетрадекапептид, который был впервые выделен из гипоталамуса в качестве вещества, ингибирующего гормон роста (Brazeau P. et al., Science 1973, 179, 77-79). Он действует также как нейропередатчик в мозге (Reisine Т. et al., Neuroscience 1995, 67, 777-790; Reisine T. et al., Endocrinology 1995, 16, 427-442). Молекулярное клонирование позволило доказать, что биоактивность соматостатина непосредственно зависит от семейства из пяти связанных с мембраной рецепторов.
Разнородность биологических функций соматостатина послужила причиной проведения исследований с целью попытаться идентифицировать отношения между строением и активностью пептидных аналогов на рецепторах соматостатина, что и привело к открытию 5 подвидов рецепторов (Yamada et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 251-255, 1992; Raynor К. et al., Mol. Pharmacol., 44, 385-392, 1993). В настоящее время активно изучается функциональная роль этих рецепторов. Сродство к разным подтипам рецепторов соматостатина ассоциировали с лечением следующих ниже расстройств/болезней. Активацию подтипов 2 и 5 ассоциировали с торможением гормона роста (GH) и, более конкретно, с подавлением аденом, секретирующих гормон роста (акромегалия), и аденом, секретирующих гормон TSH. Активацию подтипа 2, но не подтипа 5, ассоциировали с лечением аденом, секретирующих пролактин. Другими показаниями, ассоциируемыми с активацией подтипов рецепторов соматостатина, являются рестеноз, торможение секреции инсулина и/или глюкагона и, в частности, сахарный диабет, гиперлипидемия, нечувствительность к инсулину. Синдром X, ангиопатия, пролиферативная ретинопатия, феномен Дауна и нефропатия; торможение секреции желудочной кислоты и, в частности, желудочные язвы, внутрикожные и панкреатикокожные фистулы, синдром раздраженной толстой кишки, синдром Дампинга, синдром водянистых диарей, диареи, обусловленные СПИДом, диареи, обусловленные химиотерапией, острый или хронический панкреатит и секретирующие желудочно-кишечные раковые опухоли; лечение рака, такого как гепатомы; торможение ангиогенеза, лечение воспалительных расстройств, таких как артрит; хроническое отторжение аллотрансплантатов; ангиопластия; профилактика кровотечений пересаженных сосудов и желудочно-кишечных кровотечений. Агонисты соматостатина могут быть также использованы для уменьшения веса больного.
Из патологических нарушений, связанных с соматостатином (Moreau J.P. et al.. Life Sciences, 1987, 40, 419; Harris A.G. et al., The European Journal of Medicine, 1993, 2, 97-105), могут быть, например, названы: акромегалия, гипофизарные аденомы, болезнь Кушинга, гонадотрофиномы и пролактиномы, вторичные катаболические эффекты глюкокортикоидов, инсулино-зависимый диабет, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, гипертиреоз, гигантизм, гастроэнтеропанкреатические эндокринные опухоли с карциноидным синдромом, УТРома (VIP - вазоактивный кишечный пептид), инсулинома, незидиобластома, гиперинсулинемия, глюкагонома, гастринома и синдром Цоллингера-Эллисона, GRFома, а также острое кровотечение варикозно-расширенных вен пищевода, желудочно-пищеводный рефлюкс, гастродуоденальный рефлюкс, панкреатит, внутрикожные и панкреатические фистулы и кроме того диареи, стойкие диареи синдрома приобретенной иммунодепрессии, хроническая секреторная диарея, диарея, обусловленная синдромом раздраженного кишечника, расстройства, обусловленные пептидом, высвобождающим гастрин, патологии, обусловленные кишечными трансплантатами, портальная гипертензия, а также кровотечения варикозно-расширенных вен у больных циррозом, желудочно-кишечное кровотечение, кровотечение желудочно-двенадцатиперстнокишечной язвы, болезнь Крона, системные склерозы, дэмпинг-синдром, синдром тонкой кишки, гипотензия, склеродермия и медуллярная тироидная карцинома, болезни, обусловленные клеточной гиперпролиферацией, такие как раки и, в частности, рак молочной железы, рак простаты, рак щитовидной железы, а также рак поджелудочной железы и рак прямой кишки, фиброзы и, в частности, фиброз почки, фиброз печени, фиброз легкого, фиброз кожи, а также фиброз центральной нервной системы, носовой фиброз и фиброз, вызванный химиотерапией, и в других областях терапии: головные боли, включая головные боли, обусловленные гипофизарными опухолями, боли, панические приступы, химиотерапия, рубцевание ран, почечная недостаточность вследствие задержки роста, ожирение и обусловленная ожирением задержка роста, задержка роста матки, дисплазия скелета, синдром Нунана, синдром апноэ во время сна, базедова болезнь, поликистозная болезнь яичников, ложные кисты поджелудочной железы и асциты, лейкемия, менингиома, раковое истощение, угнетение привратника желудка, псориаз, а также болезнь Альцгеймера. Можно также упомянуть остеопороз.
Заявитель обнаружил, что описанные ниже соединения общей формулы I обладают сродством и селективностью в отношении рецепторов соматостатина. Поскольку соматостатин и его пептидные аналоги часто обладают плохой биодоступностью при приеме внутрь и слабой селективностью (Robinson С., Drugs of the Future, 1994, 19, 992; Reubi J.C. et al., TIPS, 1995, 16, 110), эти соединения, представляющие собой непептидные агонисты или антагонисты соматостатина, могут быть с успехом использованы для лечения патологических состояний или болезней, таких как те, что перечислены выше, и в которые вовлечен один (или несколько) из рецепторов соматостатина. Эти соединения могут быть преимущественно использованы для лечения акромегалии, гипофизарных аденом или эндокринных гастроэнтеропанкреатических опухолей, проявляющихся в виде карциноидного синдрома.
Соединения настоящего изобретения отвечают общей формуле I:
в рацемической форме, в форме энантиомера или в любых комбинациях этих форм, в которой:
R1 обозначает радикал (C1-C12)-алкил, -(С0-С6)-алкил-С(О)-OZ1, -(C0-C6)-алкил-С (О)-NH-(CH2)p-Z2 или возможно замещенный арил; Z1 обозначает Н, радикал (C1-C6)-алкил, - (СН2)р-арил; Z2 обозначает радикал амино, (C1-C12) -алкиламино, (С3-С8)-циклоалкиламино, N,N-ди-(C1-C12)-алкиламино, -NH-C(О)-О-(CH2)р-фенил, -NH-C(О)-О-(СН2)р-(C1-С6)-алкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил или возможно замещенный неароматический гетероциклический радикал;
R2 обозначает Н, (C1-C12)-алкил или возможно замещенный арил;
R3 обозначает Н или (СН2)р-Z3;
Z3 обозначает (C1-C12)-алкил, (C1-C12)-алкенил, (С3-С8)-циклоалкил, -Y1- (CH2)р-фенил- (X1) n, -S-(C1-C12)-алкил, -S-(C1-C12)-алкил-S-S-(C1-C12) -алкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил и, в частности, один из приведенных ниже радикалов:
возможно замещенный неароматический гетероциклический радикал, радикал бис-арилалкил или диарилалкил, или также радикал:
Y1 обозначает О, S, NH или отсутствует;
R4 обозначает -(CH2)p-Z4;
Z4 обозначает амино, (C1-C12)-алкил, (С3-С8)-циклоалкил, (C1-C12)-алкиламино, N/N-ди (C1-C12) -алкиламино, амино-(С3-С6)-циклоалкил, амино-(C1-C6)-алкил-(С3-С6)-циклоалкил-(C1-C6)-алкил, карбоциклический или гетероциклический аминоарил, (C1-C12)-алкокси, (C1-C12)-алкенил, -N-C(О)О-(C1-C6)-алкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил, возможно замещенный неароматический гетероциклический радикал, бис-арилалкил, диарилалкил или один из приведенных ниже радикалов:
или же Z4 обозначает радикал N(R6) (R7), в котором R6 и R7 совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-7-членный гетероцикл;
R5 обозначает Н, - (СН2)р-С (О)-(CH2)p-Z5, -(CH2)p-Z5, -(CH2)p-OZ5 или - (С0-С6)-алкил-С(О)-NH-(CH2)p-Z5, Z5 обозначает возможно замещенный радикал, выбранный из группы, в которую входят радикалы (C1-C12)-алкил, бензо[b]тиофенил, фенил, нафтил, бензо[b]фуранил, тиофенил, изоксазолил, индолил и
при условии, что возможно замещенный радикал или возможно замещенный фенил может быть замещен одним или несколькими заместителями, каждый из которых независимо предпочтительно выбирают из группы, в которую входят радикалы Cl, F, Br, I, CF3, NO2, ОН, NH2, CN, N3, -OCF3, (C1-C12)-алкил, (C1-C12)-алкокси, -(СН2)р-фенил-(Х1)g, -NH-CO-(C1-С6)-алкил, -NH-C(O)O-(C1-С6)-алкил, -S-(C1-С6)-алкил, -S-фенил-(X1)q, -О-(СН2) -фенил-(X1)q, -(CH2)p-C(О)-О-(C1-C6)-алкил, -(CH2)p-C(О)-(C1-С6)-алкил, -О-(CH2)p-NH2, -О-(CH2)p-NH-(C1-С6)-алкил, -О-(CH2)p-N-ди-(C1-С6)-алкил и -(C0-C12)-алкил-(X1)q;
X1, если он присутствует, независимо выбирается из группы, в которую входят радикалы Н, Cl, F, Br, I, CF3, NO2, ОН, NH2, CN, N3, -OCF3, (C1-C12)-алкил, (C1-C12)-алкокси, -S-(C1-С6)-алкил, -(СН2)р-амино, - (CH2)p-NH-(C1-C6)-алкил, -(CH2)p-N-ди-(C1-С6)-алкил, -(СН2)р-фенил и -(CH2)p-NH-(С3-С6)-циклоалкил;
р, если присутствует, независимо равно 0 или целому числу от 1 до 6;
q, если присутствует, независимо равно целому числу от 1 до 5;
Х обозначает О или S;
n равно 0 или 1, и, наконец,
когда n равно 0, m равно 1, 2 или 3, и когда п равно 1, m равно 0 или 1.
Согласно одному из предпочтительных вариантов изобретения, соединения общей формулы I являются такими, у которых R5 есть Н.
Соединения общей формулы I могут в отдельных случаях содержать более чем один асимметрический центр. В этом случае диастереомеры или любая смесь диастереомеров также включаются в изобретение. Например, когда соединения общей формулы I имеет два асимметрических центра, изобретение включает соединения общей формулы I с конфигурациями "R,S". "S,R". "R,R" и "S,S", а также какую-либо смесь с разными соотношениями последних.
В настоящем изобретении алкильные радикалы могут быть нормальными или разветвленными. Под алкилом, если не уточнено особо, подразумевается нормальный или разветвленный алкильный радикал, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Под циклоалкилом, если не уточнено особо, подразумевается моноциклическая углеродная система, содержащая от 3 до 7 атомов углерода. Под алкенилом, если не уточнено особо, подразумевается нормальный или разветвленный алкильный радикал, содержащий от 1 до 6 атомов углерода и обладающий по крайней мере одной ненасыщенностью (двойной связью). Под алкинилом, если не уточнено особо, подразумевается нормальный или разветвленный алкильный радикал, содержащий от 1 до 6 атомов углерода и обладающий по крайней мере одной двойной ненасыщенностью (тройной связью). Под карбоциклическим или гетероциклическим арилом подразумевается карбоциклическая или гетероциклическая система, содержащая по меньшей мере один ароматический цикл, причем эту систему называют гетероциклической, если по меньшей мере один из образующих эту систему циклов содержит по меньшей мере один гетероатом (О, N или S). Под арилом, если не уточнено особо, подразумевается карбоциклическая система, содержащая по крайней мере один ароматический цикл. Под галогеналкилом подразумевается алкильный радикал, у которого по меньшей мере один из атомов водорода (и возможно все атомы водорода) заменен атомом галогена. Под неароматическим гетероциклическим радикалом подразумевается гетероциклическая система, не содержащая ни одного ароматического цикла, а по крайней мере в одном из образующих ее циклов имеется по меньшей мере один гетероатом (О, N или S).
Под радикалами алкилтио, алкокси, галогеналкил, галогеналкокси, аминоалкил, алкиламино, алкенил, алкинил или арилалкил подразумеваются, соответственно, радикалы алкилтио, алкокси, галогеналкил, галогеналкокси, аминоалкил, алкиламино, алкенил, алкинил или арилалкил, в которых радикал алкил имеет значение, указанное выше.
Под радикалом N,N-ди(С1-С12)-алкиламино подразумевается радикал диалкиламино, два алкильных радикала которого, являющихся заместителями при атоме азота, могут независимо содержать от 1 до 12 атомов углерода.
В качестве нормального или разветвленного алкила, имеющего от 1 до 6 атомов углерода, предполагаются, в частности, радикалы: метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, пентил, неопентил, изопентил, гексил и изогексил. В качестве циклоалкила предполагаются, в частности, радикалы: циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. В качестве карбоциклического или гетероциклического арила предполагаются, в частности, радикалы: фенил, нафтил, пиридил, фурил, пирролил, тиофенил, тиазолил, инданил, индолил, имидазолил, бензофурил, бензотиофенил и фталимидил. В качестве карбоциклического или гетероциклического арилалкила предполагаются, в частности, радикалы: бензил, фенилэтил, фенилпропил, фенилбутил, индолилалкил и фталимидоалкил.
Если к химической структуре прилагается стрелка, последняя указывает на место присоединения. Например:
обозначает радикал аминоэтил.
Если изображенная стрелка пересекает би- или трициклическую группу, эта стрелка указывает на то, что эта би- или трициклическая группа может быть присоединена по любому из имеющихся у нее мест присоединения в любом из ее ароматических циклов. Например:
обозначает радикал, который присоединен по любому положению в бензольном цикле.
В частности, соединения общей формулы I по изобретению могут быть такими, что:
R1 обозначает возможно замещенный радикал арил;
R2 обозначает Н или радикал алкил;
R3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
;
R4 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
R5 обозначает Н или радикал алкил.
Соединения общей формулы I являются преимущественно такими, у которых:
R1 обозначает радикал фенил, возможно замещенный атомом галогена, или радикалом (C1-C12)-алкил, (C1-C12)-алкокси или нитро;
R2 и R5 обозначают Н или алкил;
R3 обозначает Н или (CH2)p-Z3;
Z3 обозначает (C1-C12)-алкил, (С3-С3) -циклоалкил, -Y1-(CH2)p-фенил-(Х1)n, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический радикал арил, возможно замещенный гетероциклический неароматический радикал, бис-арилалкил, диарилалкил или один из приведенных ниже радикалов:
Y1 обозначает О, S, NH или отсутствует;
R4 обозначает Н или (CH2)p-Z4;
Z4 обозначает амино, (С3-С8) -циклоалкил, (C1-C12)-алкиламино, N, N-ди- (C1-C12) -алкиламино, амино-(С3-С6)-циклоалкил, амино (C1-С6)-алкил (С3-С6) -циклоалкил (C1-C6)-алкил, карбоциклический или гетероциклический аминоарил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический радикал арил, возможно замещенный неароматический гетероциклический радикал, бис-арилалкил, диарилалкил или один из приведенных ниже радикалов:
при условии, что возможно замещенный радикал или возможно замещенный фенил может быть замещен одним или более заместителями, каждый из которых предпочтительно независимо друг от друга выбирают из группы радикалов, в которую входят:
Cl, F, Br, I, CF3, NO2, ОН, NH2, CN, N3, -OCF3, (C1-C12)-алкил, (C1-C12)-алкокси, -(СН2)p-фенил-(X1)q, -NH-CO-(C1-C6)-алкил, -NH-С(O)O-(C1-С6)-алкил, -S-(C1-С6)-алкил, -S-фенил-(X1)q, -О-(СН2)-фенил-(X1)q, -(СН2)p-С(О)-О-(C1-С6)-алкил, -(СН2)p-С(О)-(C1-C6)-алкил, -O-(СН2)p-NH2, -О-(СН2)p-NH-(C1-С6)-алкил, -O-(CH2)p-N-ди(C1-С6)-алкил) и -(C0-C12)-алкил-(X1)q;
X1, если он присутствует, независимо выбирается из группы, в которую входят радикалы Н, Cl, F, Br, I, CF3, N02, ОН, NH2, CN, N3, -OCF3, (C1-C12)-алкил, (C1-C12)-алкокси, -S-(C1-C6)-алкил, -(СН2)р-амино, -(CH2)p-NH-(C1-C6)-алкил, -(СН2)p-N-ди((C1-С6)-алкил), -(СН2)р-фенил и -(СН2)p-NH-(С3-С6)-циклоалкил;
р, если присутствует, независимо равно 0 или целому числу от 1 до 6;
q, если присутствует, независимо равно целому числу от 1 до 5;
Х обозначает О или S;
n равно 0 или 1, и, наконец,
когда n равно 0, m равно 1, 2 или 3, и когда n равно 1, m равно 0 или 1.
Более предпочтительно, когда соединения общей формулы I являются такими, у которых:
R1 обозначает радикал фенил, возможно замещенный атомом галогена, или радикалом (C1-C12)-алкил, (C1-C12) -алкокси или нитро;
R2 и R5 обозначают Н или алкил;
R3 обозначает (CH2)p-Z3;
Z3 обозначает (С3-С8)-циклоалкил или возможно замещенный радикал, выбранный из радикалов: фенил, нафтил, фурил, тиофенил, индолил, пирролил и бензотиофенил;
R4 обозначает (CH2)p-Z4;
Z4 обозначает амино, (C1-C12)-алкиламино, N,N-ди ((C1-C12)-алкил)амино или амино (C1-С6)-алкил(С3-С6) -циклоалкил (C1-C6)-алкил;
Х обозначает S;
Р, если он присутствует, обозначает независимо число 0 или целое число от 1 до 6;
m обозначает 0, 1 или 2; и, наконец, n равно 0 или 1.
Еще более предпочтительно, когда соединения настоящего изобретения являются соединениями:
- приведенной ниже под-формулы (I)а:
в которой:
R'3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
и R'4 обозначает один из следующих радикалов:
;
- приведенной ниже под-формулы (I)b:
в которой:
R'3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
и R'4 обозначает один из следующих радикалов:
- приведенной ниже под-формулы (1)с:
в которой:
R'3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
и R'4 обозначает один из следующих радикалов:
Кроме того, изобретение относится к способам получения описанных выше соединений общей формулы I (пригодных также для получения соответствующих соединений под-формул (I)a, (I)b и (dc).
Описанные выше соединения общей формулы I, у которых n равно 0 и Х обозначает О или S, могут быть получены взаимодействием в апротонном растворителе соединений приведенной ниже общей формулы II:
в которой m, R1, R2, R3 и R5 имеют те же значения, что и в формуле I, а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, с изоцианатом или изотиоцианатом общей формулы III:
в которой R4 и Х имеют те же значения, что и в общей формуле I,
преимущественно в присутствии третичного основания в течение приблизительно от 1 до 24 час при температуре преимущественно в пределах от 20 до 60°С.
Описанные выше соединения общей формулы I, у которых n равно 1 и Х обозначает О или S, могут быть получены взаимодействием в апротонном растворителе соединений приведенной ниже общей формулы IV:
в которой m, R1, R2, R3 и R5 имеют те же значения, что и в формуле I, а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, с изоцианатом или изотиоцианатом общей формулы III:
в которой R4 и Х имеют те же значения, что и в общей формуле I,
преимущественно в присутствии третичного основания в течение приблизительно от 1 до 48 час при температуре преимущественно в пределах от 20 до 70°С.
Апротонный растворитель в названных выше процессах преимущественно полярен и может, в частности, быть ТГФ или дихлорметаном. Третичным основанием может, например, быть триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин.
Изобретение, кроме того, предлагает новые промежуточные соединения синтеза, используемые для получения соединений общей формулы I. Эти соединения - предшественники соединений общей формулы II и IV - отвечают общей формуле V:
в которой:
R1, R2, R3 и R5, m и n имеют те же значения, что и в формуле I;
а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси.
Предпочтительными промежуточными соединениями общей формулы V являются следующие соединения:
Бензиловый эфир (2S)-2-амино-3-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]пропановой кислоты;
Бензиловый эфир (2R)-2-амино-3-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]пропановой кислоты;
Бензиловый эфир (2S)-2-амино-4-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]бутановой кислоты;
Бензиловый эфир (2R)-2-амино-4-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]бутановой кислоты;
Бензиловый эфир (3R)-3-амино-4-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]пропановой кислоты;
Бензиловый эфир (3S)-3-амино-4-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]пропановой кислоты.
Предметом изобретения являются также описанные выше соединения общих формул I, (I)a, (I)b и (1)с или их фармацевтически приемлемые соли в качестве лекарственных средств. Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим названные выше соединения или их фармацевтически приемлемые соли, и к их использованию для приготовления лекарственных средств, предназначенных для лечения патологических состояний или болезней, в которые вовлечен один (или несколько) из рецепторов соматостатина.
В частности, описанные выше соединения общих формул I, (I)a, (I)b и (1)с или их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы для приготовления лекарственных средств, предназначенных для лечения патологических состояний или болезней, относящихся к группе следующих патологических состояний или болезней: акромегалия, гипофизарные аденомы, болезнь Кушинга, гонадотрофиномы и пролактиномы, вторичные катаболические эффекты глюкокортикоидов, инсулинозависимый диабет, диабетическая ретинопатия, диабетическая нефропатия, синдром X, феномен Дауна, ангиопатия, ангиопластия, гипертериоз, гигантизм, гастроэнтеропанкреатические эндокринные опухоли с карциноидным синдромом, VI Рома, инсулинома, незидиобластома, гиперинсулинемия, глюкагонома, гастринома и синдром Цоллингера-Эллисона, GRFома, а также острое кровотечение варикозно-расширенных вен пищевода, язвы, желудочно-пищеводный рефлюкс, гастродоуденальный рефлюкс, панкреатит, внутрикожные и панкреатические фистулы и, кроме того, диареи, стойкие диареи синдрома приобретенной иммунодепрессии, хроническая секреторная диарея, диарея, обусловленная синдромом раздраженного кишечника, диареи, обусловленные химиотерапией, расстройства, обусловленные пептидом, высвобождающим гастрин, вторичные патологии, обусловленные кишечными трансплантатами, портальная гипертензия, а также кровотечения варикозно-расширенных вен у больных циррозом, желудочно-кишечное кровотечение, кровотечение желудочно-двенадцатиперстнокишечной язвы, кровотечение трансплантированных сосудов, болезнь Крона, системные склерозы, дэмпинг-синдром, синдром тонкой кишки, гипотензия, склеродермия и медуллярная тироидная карцинома, болезни, обусловленные клеточной гиперпролиферацией, такие как раки и, в частности, рак молочной железы, рак простаты, рак щитовидной железы, а также рак поджелудочной железы и рак прямой кишки, фиброзы и, в частности, фиброз почки, фиброз печени, фиброз легкого, фиброз кожи, а также фиброз центральной нервной системы, носовой фиброз и фиброз, вызванный химиотерапией, и в других областях терапии: головные боли, включая головные боли, обусловленные гипофизарными опухолями, боли, воспалительные расстройства, такие как артрит, приступы паники, химиотерапия, рубцевание ран, почечная недостаточность вследствие задержки роста, ожирение и обусловленная ожирением задержка роста, задержка роста матки, дисплазия скелета, синдром Нунана, синдром апноэ во время сна, базедова болезнь, поликистозная болезнь яичников, ложные кисты поджелудочной железы и асциты, лейкемия, менингиома, раковое истощение, угнетение привратника желудка, псориаз, хроническое отторжение аллотрансплантатов, а также болезнь Альцгеймера и, наконец, остеопороз.
Предпочтительно, описанные выше соединения общих формул I, (I)a, (I)b и (1)с или их фармацевтически приемлемых солей могут быть использованы для приготовления лекарственных средств, предназначенных для лечения патологических состояний или болезней из группы патологических состояний или болезней, в которую входят акромегалия, гипофизарные аденомы или эндокринные гастроэнтеропанкреатические опухоли, проявляющихся в виде карциноидного синдрома, и желудочно-кишечные кровотечения.
Под фармацевтически приемлемой солью подразумеваются, в частности, солевые аддукты с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорид, сульфат, фосфат, дифосфат, гидробромид и нитрат, или с органическими кислотами, такие как ацетат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, памоат, оксалат и стеарат.
В рамки настоящего изобретения входят также (когда они пригодны для использования) соли, образуемые с основаниями, такими как гидроксид натрия или калия. В отношении других примеров фармацевтически приемлемых солей можно обратиться к "Pharmaceutical salts", J.Pharm. Sci. 66:1 (1977).
Фармацевтическая композиция может иметь форму твердого вещества, например порошки, гранулы, таблетки, желатиновые капсулы, липосомы или свечи. Подходящими твердыми носителями могут быть, например, фосфат кальция, стеарат магния, тальк, сахара, лактоза, декстрин, крахмал, желатин, целлюлоза, метилцеллюлоза, натриевая карбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон и воск.
Фармацевтические композиции, содержащие соединение изобретения, могут быть также в жидкой форме, например в виде растворов, эмульсий, суспензий или сиропов. Подходящими жидкими носителями могут быть, например, вода, органические растворители, такие как глицерин или гликоли, а также их смеси в различных соотношениях в воде. В качестве суспензий могут быть, в частности, суспензии микрочастиц с пролонгированным высвобождением, содержащие активное начало (в частности микрокапсулы из полиактидглюколидного сополимера (PLGA), см., например, патенты US 3773919, ЕР 52510 или ЕР 58481 или патентная заявка РСТ WO 98/47489), которые делают возможным введение ежедневной дозы, рассчитанной на период от нескольких дней до нескольких недель.
Введение лекарственного препарата согласно изобретению может осуществляться топическим путем, пероральным, парентеральным, внутримышечно и т.д.
Рекомендуемая вводимая доза лекарственного препарата согласно изобретению составляет от 0,1 мг до 10 г в зависимости от использованного активного соединения.
Эти соединения могут быть получены с помощью способов, которые описаны ниже.
ПОЛУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ПОЛУЧЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ИМИДАЗОЛА
Общая процедура:
i) Получение имидазольной группы методом циклизации
Аминокислоту превращают в ее цезиевую соль, используя карбонат цезия в полярном растворителе таком как, например, смесь ДМФ/Н2О (1:1) или EtOH/H2O (1:1). После этого получают сложный эфир, используя подходящий бромкетон в полярном апротонном растворителе, таком, например, как безводный ДМФ. Удаляют фильтрацией образовавшийся бромид цезия и добавляют ацетат аммония в апротонном растворителе, имеющем повышенную температуру кипения, например в ксилоле или толуоле, или в кислом протонном растворителе, например в уксусной кислоте. Смесь кипятят с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка, в течение времени от получаса до одного часа. В приведенной ниже схеме PG1 является защитной группой, преимущественно карбаматной, такой как t-Boc или бензилкарбамат, a PG2 также является защитной группой, преимущественно бензильной группой.
или
ii) N-замещение в имидазольной группе:
В отдельных случаях для получения соединений общей формулы I, у которых R5 не является Н, N-замещение в имидазольной группе осуществляют с помощью реакции, которая описана ниже.
Раствор полученного в предыдущей стадии промежуточного соединения, алкилирующий агент, такой как α-бромкетон, α-бром-содержащий сложный эфир, алкил- или арилбромид, в присутствии органического или неорганического основания (возможно иммобилизированного на смоле, такой как полистирольная смола) в апротонном растворителе, таком как ТГФ, ацетонитрил или ДМФ, нагревают при температуре от 20 до 80°С в течение от 2 до 48 час. Получение бензилового эфира (2S)-2-[(трет-бутоксикарбонил)-амино]-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)пропановой кислоты
Раствор Boc-L-Asp-OBn (12 г, 37,1 ммоль) и карбоната цезия (6,05 г, 0,5 экв.) в EtOH/H2O (1:1,7 мл) перемешивают в течение приблизительно 30 мин при приблизительно 20°С, и затем упаривают при пониженном давлении и приблизительно 40°С.
К образовавшейся соли, растворенной в 130 мл сухого ДМФ, добавляют 25 мл раствора 2-бромацетофенона (7,38 г, 1 экв.) в сухом ДМФ. Смесь перемешивают около 1 часа при приблизительно 20°С в атмосфере аргона, и затем упаривают при пониженном давлении. Добавляют этилацетат (100 мл), после чего смесь фильтруют, промывая CsBr этилацетатом, и упаривают фильтрат при пониженном давлении.
Раствор полученного остатка и ацетата аммония (58 г, 20 экв.) в ксилоле (280 мл) кипятят с обратным холодильником приблизительно полчаса при приблизительно 140°С. Избыток NH4OAc и воды удаляют с помощью ловушки Дина-Старка. За ходом реакции следят с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ, элюент: этилацетат/гептан 1:1). После этого смесь, температуру которой доводят до приблизительно 20°С, последовательно промывают водой, насыщенным раствором NaHCO3 до получения щелочного рН и затем рассолом до нейтрального значения рН. Органическую фазу сушат над Na2S04 и упаривают при пониженном давлении.
Очистка полученного остатка флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: этилацетат/гептан 1:1) дает целевое соединение (8,2 г, 52%).
ЯМР (1Н, 400 МГц, CDCl3): 7,64-7,14 (м, 11Н, Н аром.); 5,95 (д, 1Н, NHBoc); 5,21-5,13 (АВ, 2Н, OCH2Ph, JAB=12 Гц); 4,73 (м, 1Н, СН); 3,30 (м, 2Н, СН2); 1,42 (с, 9Н, (СН3)3С).
SM/CL: рассчитанная мол.масса 421/2; m/z = 422,2 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для бензилового эфира (2S)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)пропановой кислоты, получили следующие соединения:
Стадия деблокирования
Общая методика: N-Boc-защищенные производные имидазола обрабатывают органической или неорганической кислотой, такой, например, как трифторуксусная кислота или хлористый водород (водный или газообразный) в апротонном растворителе, таком, например, как дихлорметан или этилацетат при температуре в пределах от 0 до 25°С в течение от 0,5 до 5 час.
Получение дигидрохлорида бензилового эфира (3S)-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)-3-аминопропановой кислоты
Через раствор бензилового эфира (3S)-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)-3-[(трет-бутоксикарбонил)аминопропановой кислоты (5 г) в этилацетате (120 мл) при 0°С пропускают поток сухого HCl до тех пока ТСХ (элюент: 100%-ный этилацетат) не покажет полное исчезновение исходного соединения. Образовавшуюся смесь после этого упаривают при пониженном давлении. К полученному твердому веществу добавляют диэтиловый эфир и полученную смесь фильтруют. Дигидрохлорид несколько раз промывают дихлорметаном и затем диэтиловым эфиром и сушат при пониженном давлении, получая 4,6 г целевого соединения (выход 98%). ЯМР (1Н, 400 МГц, ДМСА d6): 9,21 (с ушир., 2Н, NH); 8,03-7,28 (м, Н аром., 11Н); 5,10 (с, 1Н, OCH2Ph); 5,04 (м, 1Н, СН); 3,61 (дд, 1Н, CH2, 3J=9 Гц, 2J=17,0 Гц); 3,39 (дд, 1Н, CH2', 3J=5,5 Гц, 2J=17,0 Гц).
SM/CL: рассчитанная мол. масса 321,2; m/z=322,1 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для дигидрохлорида бензилового эфира (3S)-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)аминопропановой кислоты, получили следующие соединения:
РЕАКЦИЯ N-АЛКИЛИРОВАНИЯ
Общая методика: на свободный амин формулы (а) или (b) действуют альдегидом в протонном или апротонном растворителе, предпочтительно в дихлорметане или тетрагидрофуране, в течение времени от 1 до 15 час при 20-50°С. Образовавшийся имин после этого восстанавливают с помощью восстанавливающего агента, предпочтительно триацетоксиборогидрида натрия или цианоборогидрида натрия в присутствии или в отсутствие кислоты, такой как уксусная кислота, при температуре в пределах от 20 до 50°С в течение времени от 0,2 до 5 час. N-алкилированное соединение выделяют добавкой воды и экстракцией с последующей флэш-хроматографией на силикагеле или кристаллизацией.
Получение бензилового эфира (2S)-4-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)-2-[(3-тиенилметил)амино]бутановой кислоты
К раствору бензилового эфира (2S)-2-амино-4-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)бутановой кислоты в форме свободного основания (3,6 г, 1 экв.) в тетрагидрофуране (далее ТГФ, 40 мл) добавляют тиофен-3-карбоксальдегид (1 мл, 1 экв.). Смесь перемешивают 15 час при приблизительно 20°С и разбавляют добавкой 50 мл тетрагидрофурана, после чего добавляют NaBH(OAc)3 (4,73 г, 2 экв.). После перемешивания в течение 1 часа при приблизительно 20°С реакцию останавливают добавкой воды (40 мл), после чего добавляют этилацетат (100 мл). После разделения фаз декантацией и экстракцией объединенные органические фазы промывают рассолом, высушивают над Na2SO4 и затем упаривают при пониженном давлении и 40°С. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: этилацетат/гептан 9:1) дает целевое соединение в виде желтого масла (3,08 г, выход 66%). ЯМР (1Н, 400 МГц, CDCl3): 7,62-7,04 (м, 15Н, Н аром., NH); 5,18 (с, 2Н, OCH2); 3,87-3,69 (АВ, 2Н, CH2NH, 2JAB = 13 Гц); 3,38 (дд, 1Н, CHNH, 3J = 4,5 Гц, 2J = 8,5 Гц); 2,98 (м, CH2CH); 2,88 (м, 1Н, CH2CH); 2,17 (м, 1Н, СН2); 1,97 (м, 1Н, СН2). SM/CL: рассчитанная мол.масса 431,2; m/z = 432,2 (М+Н); m/z = 430,8 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для бензилового эфира (2S)-4-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)-2-[(3-тиенилметил)амино]бутановой кислоты, получили следующие соединения (в двух их энантиомерных формах):
В приведенных выше формулах R3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
ПОЛУЧЕНИЕ ГИДАНТОИНОВ И ТИОГИДАНТОИНОВ
Общая процедура:
На амин формулы II, в которой m, R1, R2, R3 и R5 имеют те же значения, что и в общей формуле I, а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, действуют изоцианатом или изотиоцианатом общей формулы R4-NCX, в которой R4 имеет то же значение, что и в общей формуле I, в присутствии или в отсутствие третичного основания, такого как триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин, в апротонном растворителе, преимущественно тетрагидрофуране или дихлорметане, при температуре в пределах от 20 до приблизительно 60°С и в течение от 1 до приблизительно 24 час. Образовавшийся гидантоин или тиогидантоин может быть выделен с выходом от 60 до 95% либо флэш-хроматографией на силикагеле, либо добавлением к реакционной смеси нуклеофильного реагента на полимерном носителе, например аминометилполистирольной смолы (приобретенной у фирмы Novabiochem) с последующей фильтрацией и упариванием фильтрата.
Когда R4 обозначает радикал, имеющий концевую первичную аминогруппу (например, R4 представляет собой аминоэтил, аминопропил и т.д.), реагентом является не R4-NCX, а соответствующее соединение, в котором аминогруппа защищена подходящей защитной группой, например группой трет-бутоксикарбонил. Таким образом, для получения соединения общей формулы I необходима заключительная стадия деблокирования (осуществляемая в обычных условиях, например обработкой кислотой).
Получение некоторых не имеющихся в продаже изотиоцианатов общей формулы III
Эти соединения получают следующим образом: на первичный амин общей формулы R4-NH2 действуют смесью сероуглерода и N-циклогексилкарбодиимид-N-метилполистирольной смолы в апротонном растворителе, предпочтительно в тетрагидрофуране или дихлорметане, в течение времени от 1 до 18 час при 20-50°С. Полученный изотиоцианат выделяют фильтрацией на фриттированном стекле с последующим упариванием фильтрата.
Получение 6-изотиоцианато-N,N-диметил-1-аминогексана
К суспензии N-циклогексилкарбодиимид-N-метилполистирольной смолы (7,8 г, 1,1 экв.; приобретенной у фирмы Novabiochem; концентрация 1,95 ммоль/г) в безводном ТГФ (120 мл) последовательно прибавляют по каплям сероуглерод (8,3 мл, 10 экв.) и раствор N,N-диметил-1,6-диаминогексана (2 г, 1 экв.) в ТГФ (10 мл). Суспензию перемешивают 2 часа при приблизительно 20°С и затем фильтруют на фриттированном стекле. Фильтрат после этого досуха упаривают при пониженном давлении и 40°С, получая желаемое изотиоцианатное производное (2,6 г, выход 93%).
ЯМР 1Н, 400 МГц, CDCl3, δ): 3,50 (т, 2Н), 2,24 (т, 2Н), 2,20 (с, 6Н), 1,68 (кв, 2H), 1,50-1,31 (м, 6Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для 6-изотиоцианато-N,N-диметил-1-аминогексана, получили следующие соединения:
Получение (5S)-1-(1H-индол-3-илметил)-3-(4-нитрофенил)-5-[2-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)этил]-2-тиоксо-4-имидазолидинона
К раствору бензилового эфира (2S)-2-[(1H-индол-3-илметил)амино]-4-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)бутановой кислоты (93 мг, 1 экв.) в ТГФ (2 мл) добавляют 4-нитрофенилизотиоцианат (43 мг, 1,2 экв.). Смесь перемешивают 2 часа при приблизительно 20°С и разбавляют 4 мл ТГФ, после чего добавляют аминометилполистирольную смолу (приобретенную у фирмы Novabiochem, концентрация 3,2 ммоль/г, 125 мг, 2 экв.) и затем триэтиламин (200 мкл). Смесь перемешивают 15 час при приблизительно 20°С, после чего фильтруют на фриттированном стекле. Фильтрат досуха упаривают при пониженном давлении и 40°С (для удаления избытка триэтиламина необходимо совместное упаривание с дихлорметаном). Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: этилацетат/гептан 9:1) дает целевое соединение (90 мг, выход 84%).
ЯМР (1Н, 400 МГц, CDCl3): 8,24-7,09 (м, 17Н, Н аром., NH); 5,88, 4,64 (АВ, 2Н, CH2N, 2JAB = 15 Гц); 3,38 (дд, 1Н, СН, 3J = 3,0 Гц, 2J = 8,5 Гц); 2,92 (м, 2Н, CH2CH); 2,74 (м, 1Н, СН2); 2,24 (м, 1Н, CH2). SM/CL: рассчитанная мол.масса 536,2; m/z = 537,1 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для (5S)-1-(1H-индол-3-илметил)-3-(4-нитрофенил)-5-[2-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)этил]-2-тиоксо-4-имидазолидинона (за исключением заключительной очистки флэш-хроматографией на силикагеле, которая не является обязательной), получили следующие соединения (в двух их энантиомерных формах):
В приведенных выше формулах R3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
a R4 обозначает один из радикалов, приведенных ниже:
Получение (5S)-1-(1H-индол-3-илметил)-5-[2-(4-фенил-1H-имидазол-2-ил)этил]-3-[3-(трифторметил)фенил]-2,4-имидазолидиндиона
К раствору бензилового эфира (2S)-2-[ (1H-индол-3-илметил)амино]-4-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)бутановой кислоты (23 мг, 1 экв.) в 2 мл ТГФ добавляют 3-трифторметил-фенилизоцианат (11 мг, 1,2 экв.). Смесь перемешивают 2 часа при приблизительно 20°С и разбавляют 2 мл ТГФ, после чего добавляют аминометилполистирольную смолу (приобретенную у фирмы Novabiochem, концентрация 3,2 ммоль/г, 125 мг, 2 экв.) и затем триэтиламин (200 мкл). Смесь перемешивают 15 час при приблизительно 20°С, после чего фильтруют на фриттированном стекле. Фильтрат досуха упаривают при пониженном давлении и 40°С (для удаления избытка триэтиламина необходимо совместное. упаривание с дихлорметаном), получая целевое соединение (25 мг, выход 92%).
ЯМР (1H, 400 МГц, CDCl3): 7,75-6,99 (м, 17Н, Н аром., NH); 2,25, 4,44 (АВ, 2Н, CH2N, JAB = 15 Гц); 3,77 (м, 1Н, СН); 2,92 (м, 1Н, CH2CH); 2,88 (м, 1Н, СН2СН); 2,72 (м, 1Н, CH2); 2,17 (м, 1Н, CH2).
SM/CL: рассчитанная мол.масса 543,2; m/z = 544,2 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для (5S)-1-(1H-индол-3-илметил)-5-(2-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)-этил]-3-[3-(трифторметил)фенил]-2,4-имидазолидиндиона получили следующие соединения (в двух их энантиомерных формах):
В приведенных выше формулах R3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
а R4 обозначает один из следующих радикалов:
ПОЛУЧЕНИЕ ДИГИДРОПИРИМИДИН-2,4-ДИОНОВ И 2-ТИОКСОТЕТРАГИДРО-4-ПИРИМИДИНОНОВ
Общая процедура:
На амин формулы IV, в которой m, R1, R2, R3 и R5 имеют те же значения, что и в общей формуле I, а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, действуют изоцианатом или изотиоцианатом общей формулы R4-NCX в присутствии третичного основания, такого как триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин, в апротонном растворителе, предпочтительно в тетрагидрофуране или дихлорметане, при температуре в пределах от 20 до 70°С в течение от 1 до 48 час. Полученное соединение может быть выделено с выходом от 40 до 90% либо флэш-хроматографией на силикагеле, либо добавлением к реакционной смеси нуклеофильного реагента на полимерном носителе, например аминометилполистирольной смолы (приобретенной у фирмы Novabiochem) с последующей фильтрацией и упариванием фильтрата.
Когда R4 обозначает радикал, имеющий концевую первичную аминогруппу (например, R4 представляет собой аминоэтил, аминопропил и т.д.), реагентом является не R4-NCX, а соответствующее соединение, в котором аминогруппа защищена подходящей защитной группой, например группой трет-бутоксикарбонил. Таким образом, для получения соединения общей формулы I необходима заключительная стадия деблокирования (осуществляемая в обычных условиях, например обработкой кислотой).
Получение (6S)-1-(1H-индол-3-илметил)-3-пропил-6-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)-2-тиоксотетрагидро-4(1Н)-пиримидинона
К раствору бензилового эфира (3S)-3-[(1H-индол-3-илметил)амино]-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)пропановой кислоты (90 мг, 1 экв.) в 2 мл ТГФ добавляют пропилизотиоцианат (25 мкл, 1,2 экв.). Смесь перемешивают 15 часов при температуре, близкой к 40°С, и разбавляют 2 мл ТГФ, после чего добавляют аминометилполистирольную смолу (приобретенную у фирмы Novabiochem, концентрация 3,2 ммоль/г, 125 мг, 2 экв.). Смесь перемешивают 5 час при приблизительно 20°С, после чего фильтруют на фриттированном стекле. Фильтрат упаривают при пониженном давлении и 40°С. К остатку добавляют 1 мл ТГФ и 1 мл триэтиламина. Смесь перемешивают 15 час при температуре, близкой к 40°С, и упаривают при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: этилацетат/гептан 8:2) дает целевое соединение (72 мг, выход 82%).
ЯМР (1Н, 400 МГц, CDCl3): смесь двух атропоизомеров: 8,69-6,45 (м, 12Н, Н аром., NH); 6,42, 4,89 (AB, 1Н, CH2, JAB = 14,5 Гц); 5,78, 5,42 (AB, 1H, CH2, JAB = 14,5 Гц); 4,99 (м, 1Н, СН); 4,41-4,36 (м, 1H, CH2); 4,20-4,11 (м, 1H, CH2); 3,49, 2,94 (AB, 1H, CH2CO, JAB = 16 Гц); 3,28, 2,80 (AB, 1H, CH2CO, JAB = 16 Гц); 1,52 (м, 1H, CH2); 1,40 (м, 1H, CH2); 0,76, 0,62 (2м, 3Н, СН3).
SM/CL: рассчитанная мол.масса 443,2; m/z = 444,2 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для (6S)-1-(1H-индол-3-илметил)-3-пропил-6-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил) -2-тиоксотетрагидро-4(1H)-пиримидинона (за исключением заключительной очистки флэш-хроматографией на силикагеле, которая не является обязательной), получили следующие соединения (в двух их энантиомерных формах):
В приведенной выше формуле R3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
a R4 обозначает один из следующих радикалов:
;
Получение (6S)-1- (1H-индол-3-илметил)-3-(4-метоксифенил)-6-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)дигидро-2,4 (1Н,3Н)-пиримидиндиона
К раствору бензилового эфира (3S)-3-[(1H-индол-3-илметил)амино]-3-(4-фенил-1Н-имидазол-2-ил)пропановой кислоты (100 мг, 1 экв.) в ТГФ (2 мл) добавляют 4-метоксифенилизоцианат (40 мкл, 1,2 экв.). Смесь перемешивают 5 час при температуре, близкой к 20°С, и разбавляют 2 мл ТГФ, после чего добавляют аминометилполистирольную смолу (приобретенную у фирмы Novabiochem, концентрация 3,2 ммоль/г, 138 мг, 2 экв.). Смесь перемешивают 3 часа при температуре, близкой к 20°С, после чего фильтруют на фриттированном стекле. Фильтрат досуха упаривают при пониженном давлении и 40°С. К остатку добавляют 2 мл ТГФ и 2 мл триэтиламина. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 24 час, после чего упаривают при пониженном давлении. Очистка остатка флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: этилацетат/гептан 8:2) дает целевое соединение (80 мг, выход 74%).
ЯМР (1Н, 400 МГц, CDCl3): смесь двух атропоизомеров: 9,67-8,96 (2с, 1Н, NH); 8,49 (с, 1Н, NH); 5,15, 4,36 (АВ, 1Н, CH2, JAB = 15 Гц); 5,08, 4,69 (АВ, 1Н, CH2, JAB= 15 Гц); 4,67, 4,57 (2м, 1Н, СН); 3,72 (с, 3Н, ОСН3); 3,29-2,79 (м, 2Н, СН2СО).
SM/CL: рассчитанная мол.масса 491,2; m/z = 492,3 (М+Н).
Используя процедуру, аналогичную той, которая описана для (6S)-1-(1H-индол-3-илметил)-3-(4-метоксифенил)-6-(4-фенил-1H-имидазол-2-ил)дигидро-2,4(1Н,3Н)-пиримидиндиона (за исключением заключительной очистки флэш-хроматографией на силикагеле, которая не является обязательной), получили следующие соединения (в двух их энантиомерных формах):
В приведенной выше формуле R3 обозначает один из приведенных ниже радикалов:
;
a R4 обозначает один из следующих радикалов:
ПРИМЕРЫ
В приведенные ниже таблицы сведены примеры, полученные с помощью описанных выше способов. Эти примеры представлены в качестве иллюстраций приведенных выше процедур и ни в коем случае не должны рассматриваться как ограничение объема изобретения.
Аналитические методы, использованные для характеристики
соединений
Полученные соединения охарактеризовывали с помощью времени удерживания (tr) и масс-спектрометрии (МН+).
а) Масс-спектрометрия
Для проведения масс-спектрометрии использовали простой четырехполюсный масс-спектрометр (Micromass, модель Platform), оборудованный источником электрораспыления, с разрешением от 0,8 Да до 50% минимального значения.
Калибровку проводят ежемесячно в пределах масс от 80 до 1000 Да с использованием калибровочной смеси йодида натрия и йодида рубидия, растворенной в смеси изопропиловый спирт/вода (1/1 по объему).
б) Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
Для жидкостной хроматографии была использована система ВЭЖХ НР1100 (Hewlett-Packard), включающая дегазатор на линии, четырехходовой насос, трубчатую печь и УФ-детектор с планкой и диодами.
Были использованы разные условия элюирования, как это следует из примеров:
- Условия (i):
Элюенты: А вода + 0,04% трифторуксусной кислоты
В ацетонитрил
Расход: 1,1 мл/мин
Вводимый объем: 5 мкл
Колонка: Uptisphere ODS 3 мкм 33·4,6 mm i.d.
Температура: 40°С
- Условия (ii):
Элюенты: А вода + 0,04% трифторуксусной кислоты
В ацетонитрил
Расход: 1 мл/мин
Вводимый объем: 5 мкл
Колонка: Uptisphere ODS 3 мкм 50·4,6 mm i.d.
Температура: 40°С
Условия элюирования (i) были использованы для охарактеризовывания продуктов примеров 1-479, 560-572 и 733-1040. Условия (ii), в свою очередь, были использованы для примеров 480-559, 573-732 и 1041-1234. УФ-детектирование во всех примерах производится на длине волны 220 нм.
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СОЕДИНЕНИЙ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Соединения настоящего изобретения были протестированы и могут быть протестированы на их сродство к различным подтипам рецепторов соматостатина с использованием описанных ниже процедур.
ИЗУЧЕНИЕ СРОДСТВА К ПОДТИПАМ РЕЦЕПТОРОВ СОМАТОСТАТИНА ЧЕЛОВЕКА
Сродство соединения изобретения к подтипам рецепторов соматостатина 1-5 (соответственно sst1, sst2, sst3, sst4 и sst5) определяют измерением ингибирования связи (125I-Tyr11] SRIF-14 с трансфицированными клетками СНО-К1.
Ген рецептора sst1 соматостатина человека был проклонирован в виде геномного фрагмента. Сегмент PstI-XmnI размером 1,5 кб, содержащий 100 пар оснований нетранскрибируемого участка 5', а также 1,17 кб участка, кодирующего в целом, и 230 пар оснований из нетранскрибированной области 3', модифицируют добавлением линкера Bg1II. Образовавшийся фрагмент ДНК субклонируют на принадлежащем pCMV-81 сайте BamHI, образуя плазмиду экспрессии у млекопитающих (предоставлена д-ром Graeme Bell, Университет Chicago). Линию клонированных клеток, стабильно экспрессирующих рецептор sst1, получают трансфекцией в клетках СНО-К1 (АТСС) с использованием метода кальцийфосфатной сопреципитации. Плазмиду pRSV-neo (АТСС) включают в качестве маркера отбора. Линии клонированных клеток были отобраны в среде RPMI 1640, содержащей 0,5 мг/мл G418 (Gibco), клонированных по кругу и размноженных в культуре.
Ген рецептора sst2 соматостатина человека, выделенный в виде геномного фрагмента ДНК размером 1,7 Кб BamHI-Hindlll и субклонированный в плазмидном векторе pGEM3Z (Promega), был предоставлен д-ром G.Bell (Университет Chicago). Вектор экспрессии клеток млекопитающих конструируется внедрением фрагмента BamHI-Hindlll 1,7 кб в сайты рестрикционной эндонуклеазы, совместимые с плазмидой pCMV5. Линию клонированных клеток получают трансфекцией в клетках СНО-К1 с использованием метода кальцийфосфатной сопреципитации. Плазмиду pRSV-neo включают в качестве маркера отбора.
Рецептор sst3 выделяют в качестве геномного фрагмента, а полная кодирующая последовательность содержится во фрагменте BamHI-Hindlll 2,4 кб. Экспрессирующую плазмиду у млекопитающих pCMV-h3 конструируют внедрением фрагмента NcoI-HindIII 2 кб в сайт EcoR1 вектора pCMV после модифицирования окончаний и добавления линкеров EcoR1. Линию клонированных клеток, устойчиво экспрессирующих рецептор sst3, получают трансфекцией в клетках СНО-К1 (АТСС) с использованием метода кальцийфосфатной сопреципитации. Плазмиду pRSV-neo (АТСС) включают в качестве маркера отбора. Линии клонированных клеток были отобраны в среде RPMI 1640, содержащей 0,5 мг/мл G418 (Gibco), клонированных по кругу и размноженных в культуре.
Плазмида экспрессии рецептора sst4 человека, pCMV-HX, была предоставлена д-ром Graeme Bell (Университет Чикаго). Этот вектор содержит фрагмент генома, кодирующего рецептор sst4 человека, размером 1,4 кб NheI-NheI, а также 456 пар оснований нетранскрибируемого участка 5' и 200 пар оснований нетранскрибируемого участка 3', клонированный в сайты XbaI/EcoR1 плазмиды pCMV-HX. Линия клонированных клеток, стабильно экспрессирующих рецептор sst4, получена трансфекцией в клетках СНО-К1 (АТСС) методом фосфаткальциевой сопреципитации. Плазмиду pRSV-neo (АТСС) включают в качестве маркера отбора. Линии клонированных клеток были отобраны в среде RPMI 1640, содержащей 0,5 мг/мл G418 (Gibco), клонированных по кругу и размноженных в культуре.
Ген, соответствующий рецептору sst5 человека, полученный методом PCR с использованием геномного клона λ в качестве зонда, был поставлен д-ром Graeme Bell (Университет Chicago). Образующийся фрагмент размером 1,2 кб содержит 21 пару оснований из нетранскрибированного участка 5', полностью кодирующего участка и 55 пар оснований из нетранскрибированного участка 3'. Клон внедряют в сайт EcoR1 плазмиды pBSSK(+). Внедренный фрагмент изолируют в виде фрагмента HindIII-XbaI 1,2 кб для субклонирования в экспрессирующем векторе у млекопитающих, pCVM5. Линию клонированных клеток, устойчиво экспрессирующих рецептор sst4, получают трансфекцией в клетках СНО-К1 (АТСС) с использованием метода кальцийфосфатной сопреципитации. Плазмиду pRSV-neo (АТСС) включают в качестве маркера отбора. Линии клонированных клеток были отобраны в среде RPMI 1640, содержащей 0,5 мг/мл G418 (Gibco), клонированных по кругу и размноженных в культуре.
Клетки СНО-К1, устойчиво экспрессирующие один из рецепторов sst человека культивируют в среде RPMI 1640, содержащей 10% эмбриональной сыворотки теленка и 0,4 мг/мл генетицина. Клетки собирают с помощью 0,5 мМ ЭДТА и центрифугируют при скорости 500 g в течение 5 мин при приблизительно 4°С. Центрифугат повторно суспендируют в 50 мМ Трис-буфере с рН 7,4 и дважды центрифугируют при скорости 500 g в течение приблизительно 5 мин при приблизительно 4°С. Клетки лизируют действием ультразвука и центрифугируют при 39000 g в течение приблизительно 10 мин при 4°С. Центрифугат повторно суспендируют в той же буферной среде и центрифугируют при 50000 g в течение 10 мин при приблизительно 4°С, а мембраны в полученном центрифугате хранят при -80°С.
Тесты на конкурентное ингибирование связи [125I-Tyr11] SRIF-14 проводят попарно с помощью полипропиленовых пластинок с 96 лунками. Клеточные мембраны (10 мкг белка в лунке) инкубируют с [125I-Tyr11] SRIF-14 (0,05 нМ) в течение приблизительно 60 мин при температуре около 37°С в 50 мМ буфере HEPES (рН 7,4), содержащем 0,2% сывороточного альбумина быка, 5 мМ MgCl2, 200 KIU/мл Trasylol/ 0,02 мг/мл бацитрацина и 0,02 мг/мл фенилметилсульфонилфторида.
Связанный [125I-Tyr11] SRIF-14 отделяют от свободного [125I-Tyr11]SRIF-14 путем немедленной фильтрации через фильтровальные пластинки из стекловолокна GF/C (Unifilter, Packard), предварительно пропитанного 0,1% полиэтиленимином с использованием Filtermate 196 (Packard). Фильтры промывают 50 мМ буфером HEPES при приблизительно 0-4°С в течение приблизительно 4 сек и определяют их радиоактивность с помощью счетчика (Packard Top Count).
Специфическую связь получают, вычитая неспецифическую связь (определенную в присутствии 0,1 мкМ SRIF-14) из суммарной связи. Данные относительно связи анализируют с помощью нелинейного регрессионного анализа с использованием компьютера и определяют значения констант ингибирования (Ki).
Определение агонистического или антагонистического характера соединений настоящего изобретения производят с помощью описанного ниже теста.
Функциональный тест: ингибирование внутриклеточной продукции циклического АМФ (АМРс):
Клетки СНО-К1, экспрессирующие подтипы рецепторов соматостатина человека (SRIF-14) культивируют на пластинах с 24 лунками в среде RPMI 1640 с 10% эмбриональной сыворотки теленка и 0,4 мг/мл генетицина. Среду заменяют за один день до эксперимента.
Клетки в количестве 105 клеток на 1 лунку дважды промывают 0/5 мл новой средой RPMI, содержащей 0,2% сывороточного альбумина быка с добавкой 0,5 мМ 3-изобутил-1-метилксантина (IBMX) и инкубируют в течение приблизительно 5 мин при приблизительно 37°С.
Продуцирование циклического АМФ стимулируют добавкой 1 мМ форсколина (FSK) в течение 15-30 мин при приблизительно 37°С.
Ингибирующий эффект соединений, являющихся агонистами соматостатина, измеряют при одновременном добавлении FSK (1 мкМ), SRIF-14 (10-12-10-6 М) и тестируемого соединения (10-10-10-5 М).
Антагонистический эффект соединений измеряют при одновременном добавлении FSK (1 мкМ), SRIF-14 (1-10 нМ) и тестируемого соединения (10-10-10-5 М).
Реакционную среду удаляют и добавляют 200 мл 0,1 н. HCl. Количество АМРс измеряют с помощью радиоиммунологического теста (Kit FlashPlate SMP991A, New England Nuclear). Результаты:
Тесты, проведенные согласно описанным выше протоколам, позволили доказать, что определенные в настоящей заявке соединения общей формулы I обладают хорошим сродством к по меньшей мере одному из подтипов рецепторов соматостатина, поскольку константа ингибирования Ki для сотен испытанных соединений (и в частности для соединений, представленных в приведенных ниже таблицах I и II) меньше 1 мМ.
Изобретение относится к новым соединениям общей формулы I, в рацемической форме, в форме энантиомера или в любых комбинациях этих форм, обладающим сродством к рецепторам соматостатина, которые могут быть использованы для лечения патологических состояний или болезней, акромегалия, гипофизарные аденомы, болезнь Кушинга и др. В общей формуле I:
R1 обозначает фенил, R2 обозначает Н, R3 обозначает Н или (CH2)p-Z3 или один из следующих радикалов:
Z3 обозначает (С3-С8) - циклоалкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил, причем карбоциклический арил выбирают из фенила, нафтила и флуоренила, и он может быть замещен, а гетероциклический арил выбирают из индолила, тиенила, тиазолила, карбазолила или радикалов формул:
, и он может быть замещен одним или несколькими заместителями, или также радикал
R4 обозначает (CH2)p-Z4 или 
; Z4 обозначает амино, (C1-C12) - алкил, (С3-С8)-циклоалкил, циклогексил, замещенный -CH2-NH-C(O)O-(C1-C6)-алкилом, радикал (C1-C6)-алкиламино, N,N-ди-(C1-C12)-алкиламино, амино-(С3-С6)-циклоалкил, амино-(C1-C6)-алкил-(С3-С6) -циклоалкил-(C1-C6)-алкил, (C1-C12)-алкокси, (C1-C12)-алкенил, -NH-C(О)О-(C1-C6)-алкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил, р, если присутствует, независимо равно 0 или целому числу от 1 до 6; q, если присутствует, независимо равно целому числу от 1 до 5; Х обозначает 0 или S;n равно 0 или 1. Изобретение также относится к способам получения соединений общей формулы I, промежуточным продуктам и фармацевтической композиции. 5 н. и 6 з.п. ф-лы, 2 табл.
в рацемической форме, в форме энантиомера или в любых комбинациях этих форм,
в которой R1 обозначает фенил,
R2 обозначает Н,
R3 обозначает Н или (CH2)p-Z3 или один из следующих радикалов:
Z3 обозначает (С3-С8) -циклоалкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил, причем карбоциклический арил выбирают из фенила, нафтила и флуоренила и он может быть замещен одним или несколькими заместителями,каждый из которых, предпочтительно,независимо выбран из группы,состоящей из радикалов Cl,F,Br,CF3 ,NO2,CN, -OCF3,(C1-C12)-алкила, (C1-C12)-алкокси,-(СН2)р-фенил-(XI)q,-NH-CO-(C1-C6)-алкила,-О-(СН2)р-фенил-(XI)q и (C0-C12)-алкил-(XI)q;
XI в каждом случае независимо выбирают из группы, состоящей из радикалов Н и -(СН2)р-N-ди-((C1-C6)-алкила);
а гетероциклический арил выбирают из индолила,тиенила,тиазолила,карбазолила или радикалов формул
и может быть замещен одним или несколькими заместителями,каждый из которых, предпочтительно,независимо выбран из группы, состоящей из радикалов NO2, (C1-C12)-алкила, -(СН2)р-С(О)- (C1-C6)-алкила;
или также радикал
R4 обозначает (CH2)p-Z4 или 
;
Z4 обозначает амино, (C1-C12) -алкил, (С3-С8) -циклоалкил, циклогексил, замещенный -CH2-NH-C(O)O-(C1-C6) -алкилом, радикал (C1-C12) -алкиламино, N,N-ди-(C1-C12)-алкиламино, амино- (C1-C6) -алкил- (С3-С6) -циклоалкил- (C1-C6) -алкил, (C1-C12)-алкокси, (C1-C12)-алкенил, -NH-C(О)О-(C1-C6) -алкил, возможно замещенный карбоциклический или гетероциклический арил,
причем карбоциклический арил является фенилом и он может быть замещен одним или несколькими заместителями,каждый из которых ,предпочтительно,независимо выбран из группы радикалов Cl,F,Br,CF3 ,NO2, NH2 ,CN, N3 ,-OCF3,(C1-C12)-алкила, (C1-C12)-алкокси, -NH-C(О)О-(C1-C6) -алкила, -СН2-NH-C(О)О-(C1-C6)-алкила, -S-(C1-C6) -алкила, О-(СН2)р-фенил-(XI)q, -(СН2)р-С(О)-О-(C1-C6) -алкила, -(СН2)р-С(О)-(C1-C6) -алкила, (C0-C12)-алкил-(XI)q;
XI в каждом случае независимо выбирают из группы, состоящей из радикалов Н, (C1-C12) -алкокси, -(СН2)р-амино и -(СН2)р-N-ди-((C1-C6)-алкила);
а гетероциклический арил выбирают из фурила или одного из радикалов
или тетрагидрофурила;
или же Z4 обозначает радикал N(R6)(R7), в котором R6 и R7 совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолиновый гетероцикл;
R5 обозначает Н,
р, если присутствует, независимо равно 0 или целому числу от 1 до 6;
q, если присутствует, независимо равно целому числу от 1 до 5;
Х обозначает 0 или S;
n равно 0 или 1, и, наконец,
когда n равно 0, m равно 1,2 или 3, и когда n равно 1, m равно 0 или 1,
или его фармацевтически приемлемая соль.
R3 обозначает один из радикалов
R4 обозначает один из радикалов
при условии, что когда радикал R4 включает атом азота, указанный атом азота связан с одним или несколькими атомами водорода в случае,когда заместитель не указан.
R3 обозначает -(СН2)-Z3,
Z3 обозначает (С3-С8)-циклоалкил или возможно замещенный радикал, выбранный из фенила, нафтила,тиенила и индолила;
R4 обозначает -(СН2)-Z4,
Z4 обозначает амино, (C1-C12) -алкиламино, N,N-ди(C1-C12)-алкиламино или амино-(C1-C6)-алкил(C3-C6)-циклоалкил-(C1-C6)-алкил;
Х обозначает S;
M обозначает 0,1 или 2, и, наконец,
n равно 0 или 1.
(Ia)
в которой
R'3 обозначает один из радикалов
и R4 обозначает один из радикалов
приведенной подформулы (1)b
(I)b
в которой
R'3 обозначает один из радикалов
и R4 обозначает один из радикалов
приведенной подформулы (I)с
(I)с
в которой
R'3 обозначает один из приведенных радикалов
и R4 обозначает один из радикалов
которой m, R1, R2, R3 и R5 имеют те же значения, что и в
формуле I по п.1, а радикал О-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, подвергают действию изоцианата или изотиоцианата общей формулы III
R4-N=C=X, (III)
в которой R4 и X имеют те же значения, что и в общей формуле I по п.1,
в апротонном растворителе предпочтительно в присутствии третичного основания в течение приблизительно от 1 до 24 ч при температуре преимущественно от 20 до 70°С.
в которой m, R1, R2, R3 и R5 имеют те же значения, что и в формуле I по п.1, а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, подвергают действию изоцианата или изотиоцианата общей формулы III
R4-N=C=X (III)
в которой R4 и X имеют те же значения, что и в общей формуле I по п.1,
в апротонном растворителе предпочтительно в присутствии третичного основания в течение приблизительно от 1 до 48 ч при температуре преимущественно от 20 до 70°С.
(V)
в которой R1, R2, R3 и R5, m и n имеют те же значения, что и в формуле I по
п.1, а радикал O-GP является уходящей защитной группой, производной от спирта, в частности группой бензилокси, метокси или трет-бутокси, в качестве промежуточного соединения в синтезе соединений общей формулы(I).
Бензиловый эфир (2S)-2-амино-3-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]пропановой кислоты;
Бензиловый эфир (2R)-2-амино-3-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]пропановой кислоты;
Бензиловый эфир (2S)-2-амино-4-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]бутановой кислоты; или
Бензиловый эфир (2R)-2-амино-4-[(4-фенил)-1Н-имидазол-2-ил]бутановой кислоты
или фармацевтически приемлемую соль этих соединений.
| ЗАМЕЩЕННЫЕ ФЕНИЛИМИДАЗОЛИДИНЫ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ОБЛАДАЮЩАЯ АНТИАНДРОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ | 1993 |
|
RU2116298C1 |
