СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МАСТИТА У КОРОВ Российский патент 2006 года по МПК G01N33/52 G01N33/04 G01N33/573 

Изобретение относится к животноводству, в частности к скотоводству, и может быть использовано для диагностики мастита у коров.

Известны способы диагностики клинических форм мастита у коров, например, по данным клинических обследований общего состояния животного, по органолептической оценке секрета молочной железы, с помощью физико-химических методов [Карташов В.М., Ивашура А.И. Маститы коров. М.: ВО "Агропромиздат", 1998, стр.62-66, 89-90, 93-94].

К недостаткам указанных способов относятся:

- необъективность и недостаточная точность диагностики;

- необходимость использования дорогостоящих реактивов и лабораторного оборудования.

Наиболее близким аналогом предлагаемому способу является способ определения хлоридов в молоке, заключающийся в глазомерной оценке хлоридов по желтой окраске исследуемой пробы молока [Логвинов Д.Д., Солодовников С.Б., Сидоренко А.Н. Болезни вымени у коров. Киев: Урожай, 1979, стр.60-61, 65-67 - прототип].

В пробирку вносят 5 мл 1,5%-ного раствора азотно-кислого серебра и 2 капли 10%-ного водного раствора хромовокислого калия. Добавляют 1 мл исследуемого молока. Молоко из пораженной четверти вымени окрашивается в желтый цвет, что соответствует содержанию хлоридов в нем выше 0,14%.

Недостатками этого способа являются:

- субъективность диагностики и в связи этим недостаточная точность диагностики. Задачей предлагаемого способа является повышение объективности и точности диагностики.

Поставленная задача решается благодаря тому, что в известном способе диагностики мастита у коров, заключающемся в исследовании молока, согласно изобретению исследуют молоко на содержание церулоплазмина в нем и при его значении более 0,4 единиц оптической плотности диагностируют мастит.

Церулоплазмин - белок с электрофоретической подвижностью альфа₂-глобулинов, является медьсодержащей оксидазой (КФ. 1.16.3.1), участвующей в острой фазе воспаления и стресса. Обнаружены антиоксидантные свойства церулоплазмина, синтезируются многими тканями.

Содержание церулоплазмина определяли по методике, основанной на взаимодействии церулоплазмина с парафенилендиамином. При взаимодействии церулоплазмина с парафенилендиамином образуется оранжевое окрашивание. Интенсивность оранжевой окраски определяется путем измерения оптической плотности на фотоэлектроколориметре (ФЕКе).

Необходимые реактивы:

- раствор №1: 0,4 М ацетатный буфер (рН 5,6). Для приготовления раствора берут 1 мл 0,4 М СН₃СООН и 7,2 мл 0,4 М CH₃COONa.

- раствор №2: 1%-ный водный раствор парафенилендиамина соляно-кислого. Берут 1 г парафенилендиамина солянокислого и растворяют в 99 мл Н₂О.

- раствор №3: 25%-ный раствор едкого натра (NaOH). Берут 25 г NaOH и растворяют в 75 мл Н₂O.

Способ осуществляют следующим образом.

К 0,1 мл молока прибавляют 1 мл раствора №1 (0,4 М ацетатного буфера (рН-5,6)) и 0,5 мл 1%-ного водного раствора парафенилендиамина (раствор №2). Полученную смесь помещают в водяную баню при температуре 60°С. Через 10 минут реакцию останавливают добавлением 3,5 мл охлажденного едкого натрия (раствор №3). Далее замеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора на ФЭКе при 440 нм против контроля, содержащего вместо 0,1 мл молока 0,1 мл дистиллированной воды.

В опытах использовались 35 коров черно-пестрой породы в возрасте 3-5 лет, с живой массой 320-430 кг и средним удоем за 305 дней лактации 3137 кг молока.

Пример 1.

У коровы с живой массой 320 кг и средним удоем за последнюю лактацию 2810 кг молока проводилось определение церулоплазмина в молоке. У коровы диагностирован мастит клинической формы, количество церулоплазмина в молоке соответствовало 0,7 единиц оптической плотности. Других заболеваний не обнаружено.

Пример 2.

В молоке коровы с живой массой 330 кг и средним удоем за последнюю законченную лактацию 2630 кг молока проводилось определение церулоплазмина. У коровы диагностирован мастит субклинической формы, количество церулоплазмина в молоке соответствовало 0,5 единиц оптической плотности.

Пример 3.

В молоке коровы с живой массой 310 кг и средним удоем за последнюю законченную лактацию 2750 кг молока проводилось определение церулоплазмина. У клинически здоровой коровы содержание церулоплазмина в молоке соответствовало 0,02 единицам оптической плотности.

Таким образом, наглядно видно из таблицы, при содержании церулоплазмина в молоке более 0,4 единиц оптической плотности диагностируют мастит, с высокой точностью и объективностью.

Предлагаемый способ дает возможность достаточно быстро и без использования дорогостоящих приборов и реактивов с высокой точностью и объективностью диагностировать мастит на ранней стадии заболевания (субклинический мастит).

Изобретение относится к животноводству и ветеринарии и может быть использовано для диагностики мастита у коров. Способ заключается в исследовании молока на содержание церулоплазмина в нем и при его значении выше 0,4 единиц оптической плотности диагностируют мастит. Предлагаемый способ дает возможность достаточно быстро, с большой точностью и объективностью диагностировать мастит на ранней стадии заболевания (субклинический мастит). 1 табл.

Способ диагностики мастита у коров, заключающийся в исследовании молока, отличающийся тем, что исследуют молоко на содержание церулоплазмина и при значениях его выше 0,4 единиц оптической плотности диагностируют мастит.