СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ СВИНЦА В ОРГАНАХ СВИНЕЙ Российский патент 2006 года по МПК G01N33/48 

Описание патента на изобретение RU2285920C1

Предлагаемое изобретение относится к животноводству, ветеринарии и экологии и предназначено для использования в качестве критерия прижизненной оценки степени аккумуляции в органах и тканях свиней основного загрязнителя окружающей среды - свинца.

В Российской Федерации около 74 млн. га почв загрязнено промышленными токсикантами, основным из которых является свинец. Период полуудалентия этого металла в условиях почвенных лизиметров составляет 740...5900 лет.

Биологическая роль Pb изучена недостаточно. Установлено участие Pb в метаболизме костной ткани. В результате хронической токсикации свинцом происходят изменения состояния нервной, сердечно-сосудистой, кроветворной систем и органов желудочно-кишечного тракта. Свинец является сильным мутагеном, канцерогеном и тератогеном, а также синергистом при комбинированном и сочетанном действии на организм со многими другими агентами различной природы [1].

Основными путями поступления Pb считаются ингаляционный (до 70% содержащегося в аэрозоле элемента оседает в легких) и алиментарный (всасывается 5...10%, иногда до 50% от поступившего в ЖКТ металла). В наибольших количествах Pb накапливается в печени, почках, поджелудочной железе, костях и волосе. Повышенное содержание в рационе Са, Р, Mg, Zn снижает усвоение Pb, а дефицит Fe повышает. Свинец выделяется в основном через кишечник (80...90%) и почки, но его можно обнаружить в слюне, молоке и других экскретах [1, 2].

Для Pb установлены очень жесткие ПДК: атмосферный воздух селитебных зон - 0,0003 мг/кг, воздух рабочей зоны - 0,01 мг/кг, питьевая вода - 0,03 мг/кг, почва - 20 мг/кг, кости - 20 мг/кг, печень - 1 мг/кг, почки - 1,0 мг/кг, головной мозг 0,1 мг/кг, волос - 4 мг/кг, кровь - 0,1 мг/л для детей и 0,4 мг/л для взрослых [1].

Относительная простота получения Pb и большая распространенность в земной коре (16 мг/кг) сделали его классическим промышленным ядом и глобальным экотоксикантом. Антропогенная свинцовая нагрузка, в 10-40 раз превышающая геогенную, способна индуцировать нарушения практически на всех уровнях биологической организации, включая экосистемы [3].

Токсическое действие Pb обусловлено его способностью образовывать соединения с биологически важными анионами-лигандами: сульфгидрильными группами цистеина, стабилизирующими третичную структуру белков, имидазольными и карбоксильными группами, а также фосфатами. Следствием этого являются: угнетение синтеза белков и активности ферментов, нарушение порфиринового обмена и повреждение мембран.

Свинец может вызывать медленно развивающееся хроническое отравление (сатурнизм), характеризующееся разнообразной симптоматикой и полисиндромностью течения. Характерным проявлением свинцового токсикоза является микроцитарная анемия, морфологически неотличимая от железодефицитной - ингибирование активности АЛДГ, повышенное выделение копропорфирина с мочой, появление в крови и моче предшественников гема [1, 2].

С возрастом концентрация Pb увеличивается; например, у коров в возрасте от трех до восьми лет концентрация Pb возрастает в 9,2 раза, происходят хронические изменения в печени [9].

Живые организмы, находясь в динамическом равновесии со средой, постоянно выводят избыток поступающих с пищей, водой и воздухом химических элементов: из желудочно-кишечного тракта - с калом, из крови - с мочой, желчью, потом, молоком, а также посредством депонирования в костной ткани, коже и ее придатках - волосе и копытном роге. Многие ученые считают волос более информативным по отношению как к традиционным биосубстратам - кровь, моча, так и к тем, что используются сравнительно недавно - слеза, экспират, костная ткань, зубы и копыта [4]. Это обусловлено высокой митотической активностью клеток влагалища волосяного фолликула, которые уступают по пролиферации только стволовым клеткам гемопоэтической системы. Выходя за уровень кожных покровов, клетки волоса теряют влагу, сохраняя большинство метаболитов, включая Pb. Таким образом, волос интегрально отражает аккумуляцию Pb за довольно продолжительный период своего роста (до нескольких лет).

Кроме того, из всех видов сельскохозяйственных животных свиньи являются наиболее удобным модельным объектом при изучении различных болезней человека, так как многие физиологические и биохимические процессы у них сходны.

В настоящее время известны способы определения содержания Pb в пищевом сырье, включая мышцы и другие органы и ткани, которые можно использовать только после забоя животных [5-8].

Недостатком этих способов является невозможность прижизненной оценки степени загрязнения Pb органов и тканей животных для оценки и коррекции экологической чистоты потенциального продовольственного сырья.

Прототип - ГОСТ 26932-86. Сырье и продукты пищевые. Методы определения свинца [5].

Предлагается способ определения содержания свинца в органах свиней, включающий анализ биосубстрата животного, отличающийся тем, что проводят микроэлементный анализ щетины свиньи методом атомно-абсорбционной спектрометрии, при этом для определения содержания свинца в печени устанавливают в щетине концентрацию одного или нескольких элементов, выбираемых из Pb, Cd, Cu, Fe, Zn, и рассчитывают уравнения регрессии:

у=0,1911+0,7571х, где х - концентрация Pb в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,1576+2,8652х, где х - концентрация Cd в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,7074-0,0458х, где х - концентрация Cu в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,2492+0,0024х, где х - концентрация Fe в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,6603-0,0023х, где х - концентрация Zn в щетине, а у - содержание Pb в печени;

для определения содержания свинца в легких устанавливают в щетине концентрацию Fe и/или Mn и рассчитывают уравнения регрессии:

у=0,6177+0,0022х, где х - концентрация Fe в щетине, а у - содержание Pb в легких;

у=0,5139+0,1026х, где х - концентрация Mn в щетине, а у - содержание Pb в легких;

а для определения содержания свинца в селезенке устанавливают в щетине концентрацию Fe и рассчитывают уравнения регрессии:

у=0,4437+0,0028х, где х - концентрация Fe в щетине, а у - содержание Pb в селезенке.

Предлагаемым способом решается задача оценки накопления Pb в барьерных органах свиней - печени, легких, селезенке.

Поставленная задача достигается путем установления содержания в щетине Fe, Zn, Cu, Pb, Cd, Mn с последующим расчетом уровня свинца в печени, легких и селезенке по уравнениям регрессии. По уровню одного или нескольких из нижеследующих элементов Fe, Zn, Cu, Pb, Cd рассчитывается концентрация Pb в печени, а по концентрации Fe - в легких и селезенке.

От существующих методов, при которых определение концентрации свинца в органах и тканях животных возможно только после забоя, заявленный способ отличается тем, что устанавливается содержание в щетине одного или нескольких из следующих элементов: Fe, Zn, Cu, Pb, Cd, Mn и по нему оценивается накопление Pb в печени, легких и селезенке. Содержание свинца в печени, легких и селезенке может быть определено по концентрации Fe в щетине.

Тестирование загрязнения паренхиматозных органов свинцом по заявленному способу обеспечивает точность метода, отсутствие стрессирования животных, безболезненность, исключение риска инфицирования, простоту и удобство при проведении исследования. Возможно создание банка проб щетины, так как волос имеет неограниченный срок хранения.

Волос является наиболее информативным неинвазивным биосубстратом, так как клетки луковицы (см. чертеж) хорошо снабжаются кровью, а по митотической активности уступают только клеткам красного костного мозга.

Таблица 1Содержание свинца в органах и тканях свиней, мг/кгОрган, тканьσCv, %LimПДК, мг/кгЛегкое0,72±0,050,2129,20,30-1,10Печень0,36±0,040,1644,40,16-0,791,0Сердце0,69±0,050,2029,00,36-1,02Мышечная ткань0,70±0,060,2231,40,44-1,27Почки0,66±0,040,1827,30,35-0,971,0Селезенка0,58±0,060,2746,60,22-1,12Щетина0,24±0,050,2395,80,01-1,024,0Копытный рог0,26±0,030,1142,30,09-0,47

Пробы щетины брали в области лопатки, отмывали детергентами и обезжиривали петролейным эфиром. Затем промывали дистиллированной водой и сушили при температуре 70°С в течение 24 часов. Массу навесок определяли с использованием торсионных весов. Озоление проб проводилось при постепенном увеличении температуры от 200 до 450°С. Озоленный остаток кипятили в концентрированной азотной кислоте при температуре 130...140°С до полного ее испарения. Далее - отжиг оставшейся органики при температуре 450°С до получения золы светлых тонов без темных включений (при наличии темных частиц повторялись две предыдущие операции). В заключение добавлялась концентрированная соляная кислота, минерализат выпаривался до мокрых солей и разбавлялся бидистиллятом.

Концентрации изучаемых металлов определялись методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ААС). ААС основана на поглощении излучения оптического диапазона невозбужденными свободными атомами. Величина поглощенной энергии пропорциональна концентрации определяемого элемента в атомном паре.

Анализируя данные табл.1, необходимо отметить, что наибольшим накоплением Pb характеризуются легкие и мышечная ткань. По уровню аккумуляции свинца органы и ткани располагаются в следующем порядке: легкие > мышечная ткань > сердце > почки > селезенка > печень > копытный рог > щетина.

В волосе среди исследованных элементов больше всего аккумулируются Zn и Fe (табл.2). По концентрации в щетине изученные химические элементы образуют следующий ранжированный ряд: Zn > Fe > Cu > Mn > Pb > Cd.

Таблица 2Содержание химических элементов в щетине свиней, мг/кгЭлементσlimZn137,76±9,9742,2950,00-238,57Cu7,70±0,582,471,70-10,90Fe47,66±12,1249,9814,10-205,00Cd0,07±0,010,040,01-0,16Со0,75±0,240,960,10-3,90Mn2,05±0,301,230,90-4,70Pb0,24±0,050,230,01-1,02

Между концентрацией в щетине некоторых тяжелых металлов выявлены средние и высокие положительные и отрицательные корреляции (табл.3).

Таблица 3Корреляции уровней тяжелых металлов в щетинеКоррелирущие элементыРPb-Cd0,631±0,1500,009Pb-Fe0,673±0,1370,004Cd-Fe0,749±0,1400,001Cd-Cu-0,727±0,1320,001Fe-Cu-0,835±0,1740,000

С целью изучения связи уровня тяжелых металлов в щетине с концентрацией свинца в органах и тканях были вычислены коэффициенты корреляции. В табл. 4 приведены выявленные достоверные связи между содержанием химических элементов в щетине и свинца в паренхиматозных органах. Показано, что между изученными показателями существуют средние и высокие положительные и отрицательные корреляции. Для неинвазивного определения уровня свинца во внутренних органах были рассчитаны уравнения регрессии. Накопление Pb в печени можно определить по концентрации одного из следующих элементов в волосяном покрове: Fe, Zn, Cu, Pb, Mn и Cd. Аккумуляцию Pb в легких отражают Fe и Mn. Содержание Pb в селезенке можно установить только по уровню Fe в щетине.

Таблица 4Корреляции уровней тяжелых металлов в щетине с содержанием свинца в органах свинейКоррелирующие признаки, х-уRx/уу=а+bxPbволос - Pbпечень0,577±0,1780,5023у=0,1911+0,7571хCdволос - Pbпечень0,694±0,1390,1821у=0,1576+2,8652хCuволос - Pbпечень-0,833±0,082-9,0018у=0,7074-0,0458хFeволос - Pbпечень0,729±0,125226,1548у=0,2492+0,0024хFeволос - Pbлегкое0,567±0,175138,5632у=0,6177+0,0022хFeволос - Pbселезенка0,546±0,188107,6562у=0,4437+0,0028хZnволос - Pbпечень-0,579±0,178-155,0744у=0,6603-0,0023хMnволос - Pbлегкое0,667±0,1433,8794у=0,5139+0,1026х

Наиболее информативным показателем из всех изученных является концентрация железа в щетине. По концентрации этого металла в волосе с использованием уравнений регрессии можно установить аккумуляцию свинца в печени, легких и селезенке. В то же время по уровню Mn в волосяном покрове возможно определить концентрацию Pb только в селезенке. Степень связи содержания тяжелых металлов в щетине не всегда отражает корреляцию уровней этих элементов с аккумуляцией свинца в паренхиматозных органах (табл.3, 4).

Таким образом, с использованием уравнений регрессии возможно неинвазивное тестирование концентрации свинца в печени, легких и селезенке по уровню железа в щетине.

Литература

1. Скальный А.В., Рудаков И.А. Биоэлементы в медицине. - М.: Издательский дом «ОНИКС 21 век»: Мир, 2004. - С.186-190.

2. Антонов А.Р. Микроэлементы в жизни человека / А.Р.Антонов, А.В.Ефремов // Природные минералы на службе здоровья человека. - Новосибирск, 1999. - С.28-39.

3. Летувнинкас А.И. Антропогенные геохимические аномалии и природная среда - Томск: Изд-во НТЛ, 2002. - С.122-221.

4. Скальный А.В. Мониторинг и оценка риска воздействия свинца на человека и окружающую среду с использованием биосубстратов человека / А.В.Скальный, А.В.Есенин // Токсикологический вестник. - 1996. - №6 - С.16-23.

5. ГОСТ 26932-86. Сырье и продукты пищевые. Методы определения свинца. - М.: Госстандарт России, 1986, - С.1-7.

6. ГОСТ Р 51301-99. Продукты пищевые и продовольственное сырье. Инверсионно-вольтамперометрические методы определения содержания токсичных элементов (кадмия, свинца, меди и цинка): - М.: Госстандарт России, 1999.- С.7-13.

7. ГОСТ 30538-97. Продукты пищевые. Методика определения токсичных элементов атомно-эмиссионным методом. - М.: Госстандарт России, 1997. - С.10-21.

8. ГОСТ 26929-94. Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения содержания токсичных элементов (кадмия, свинца, меди и цинка): - М.: Госстандарт России, 1994. - С.2-7.

Похожие патенты RU2285920C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ КАДМИЯ В ОРГАНАХ И МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ СВИНЕЙ 2007
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Желтикова Ольга Александровна
  • Желтиков Александр Исаевич
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Камалдинов Евгений Варисович
  • Себежко Ольга Игоревна
RU2342659C1
Способ определения уровня свинца в мышечной ткани крупного рогатого скота 2016
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Шишин Николай Иосифович
  • Федяев Юрий Иванович
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Камалдинов Евгений Варисович
  • Петухова Елизавета Игоревна
  • Маренков Владимир Григорьевич
  • Сысо Александр Иванович
  • Осадчук Людмила Владимировна
RU2629605C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ КАДМИЯ В ПЕЧЕНИ И ЛЕГКИХ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 2014
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Зайко Ольга Александровна
  • Купцов Алексей Владимирович
  • Гревцов Дмитрий Сергеевич
  • Миллер Ирина Сергеевна
  • Стрижкова Мария Владимировна
RU2548774C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ СВИНЦА В ОРГАНАХ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 2010
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Стрижкова Мария Валерьевна
  • Камалдинов Евгений Варисович
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Петухова Татьяна Валерьевна
RU2421726C1
Способ оценки содержания меди в печени овец 2021
  • Саурбаева Радмила Тимуровна
  • Андреева Виктория Алексеевна
  • Климанова Екатерина Андреевна
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Тарасенко Екатерина Игоревна
  • Петухова Елизавета Игоревна
  • Назаренко Андрей Вячеславович
RU2765236C1
Способ определения уровня цинка в почках свиней 2021
  • Зайко Ольга Александровна
  • Назаренко Андрей Вячеславович
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Романенко Мария Александровна
  • Королева Ирина Александровна
  • Андреева Виктория Алексеевна
  • Климанова Екатерина Андреевна
RU2761031C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ СВИНЦА В ЛЕГКИХ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 2015
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Зайко Ольга Александровна
  • Стрижкова Мария Владимировна
  • Панов Борис Леонидович
  • Бирюля Ирина Константиновна
  • Камалдинов Евгений Варисович
  • Петухова Елизавета Игоревна
RU2602915C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ КАДМИЯ В ПЕЧЕНИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 2015
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Солошенко Владимир Андреевич
  • Бирюля Ирина Константиновна
  • Зайко Ольга Александровна
RU2591825C1
Способ определения уровня железа в печени свиней 2021
  • Зайко Ольга Александровна
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Назаренко Андрей Вячеславович
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Королева Ирина Александровна
  • Романенко Мария Алексеевна
RU2762614C1
Способ оценки кадмия в мышечной ткани крупного рогатого скота 2020
  • Нарожных Кирилл Николаевич
  • Соколова Элина Сергеевна
  • Коновалова Татьяна Валерьевна
  • Себежко Ольга Игоревна
  • Короткевич Ольга Сергеевна
  • Петухов Валерий Лаврентьевич
  • Рудой Евгений Владимирович
  • Зайко Ольга Владимировна
  • Стрижкова Мария Владимировна
RU2758902C1

Реферат патента 2006 года СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ СВИНЦА В ОРГАНАХ СВИНЕЙ

Изобретение относится к животноводству ветеринарии и экологии и касается способа оценки содержания свинца во внутренних органах свиней, который производится по уровню Fe, Zn, Cu, Pb, Cd и Mn в щетине. Для этого у свиней в области лопатки состригается щетина (0,2 г) и в ней определяется содержание одного или нескольких из вышеназванных элементов. Предусматривается по уровню одного или нескольких из нижеприведенных элементов Fe, Zn, Cu, Pb и Cd определять концентрацию Pb в печени, по концентрации Fe - в легких и в селезенке, а по Mn или Fe - в легких. Наиболее информативным показателем для определения уровня свинца в печени, легких и селезенке является концентрация железа в щетине. Технический результат: обеспечение точности, отсутствие стрессирования животных, безболезненность, исключение риска инфицирования, простота и удобство при проведении, возможность создания банка проб щетины, т.к. волос имеет неограниченный срок хранения. 1 ил., 4 табл.

Формула изобретения RU 2 285 920 C1

Способ определения содержания свинца в органах свиней, включающий анализ биосубстрата животного, отличающийся тем, что проводят микроэлементный анализ щетины свиньи методом атомно-абсорбционной спектрометрии, при этом для определения содержания свинца в печени устанавливают в щетине концентрацию одного или нескольких элементов, выбираемых из Pb, Cd, Cu, Fe, Zn, и рассчитывают уравнения регрессии:

у=0,1911+0,7571х, где х - концентрация Pb в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,1576+2,8652х, где х - концентрация Cd в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,7074-0,0458х, где х - концентрация Cu в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,2492+0,0024х, где х - концентрация Fe в щетине, а у - содержание Pb в печени;

у=0,6603-0,0023х, где х - концентрация Zn в щетине, а у - содержание Pb в печени;

для определения содержания свинца в легких устанавливают в щетине концентрацию Fe и/или Mn и рассчитывают уравнения регрессии:

у=0,6177+0,0022х, где х - концентрация Fe в щетине, а у - содержание Pb в легких;у=0,5139+0,1026х, где х - концентрация Mn в щетине, а у - содержание Pb в легких;

а для определения содержания свинца в селезенке устанавливают в щетине концентрацию Fe и рассчитывают уравнения регрессии:

у=0,4437+0,0028х, где х - концентрация Fe в щетине, а у - содержание Pb в селезенке.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2006 года RU2285920C1

Контрольное приспособление к замку с выдвижной дужкой 1930
  • Овчинников К.И.
SU26932A1
Сырье и продукты пищевые
Методы определения свинца
- М.: Госстандарт России, 1986, с.1-7
Машина для проходки тоннелей с вращающимся радиальным баром 1936
  • Дорман Я.А.
SU51301A1
Продукты пищевые и продовольственное сырье
Инверсионно-вольтамперометрические методы определения содержания токсичных элементов (кадмия, свинца, меди и цинка)
- М.: Госстандарт России, 1999, с.7-13
СТАНОЧНЫЕ ТИСКИ ДЛЯ СВЕРЛИЛЬНЫХ РАБОТ 1931
  • Наркевич А.В.
SU30538A1
Продукты

RU 2 285 920 C1

Авторы

Петухов Валерий Лаврентьевич

Патрашков Сергей Анатольевич

Короткевич Ольга Сергеевна

Мармулева Надежда Ивановна

Матиосов Александр Джангирович

Себежко Ольга Игоревна

Желтиков Александр Исаевич

Камалдинов Евгений Варисович

Батенева Екатерина Валерьевна

Даты

2006-10-20Публикация

2005-02-04Подача