Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной иммунологии и химиотерапии, в частности к получению препарата для лечения респираторных и желудочно-кишечных бактериальных и вирусных заболеваний сельскохозяйственных животных и к способу их профилактики и лечения.
В настоящее время легочные и желудочно-кишечные заболевания имеют повсеместное распространение и наносят значительный ущерб, складывающийся из большого отхода и снижения веса молодняка сельскохозяйственных животных.
Известен препарат для лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекций сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии - левотетрасульфин [1], включающий, об.%:
Известен также препарат для лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекций сельскохозяйственных животных бактериальной этиологии Левотетрасульфин [2], включающий, г/100 мл:
Способ профилактики и лечения заключается во внутримышечном применении препарата 2- 3-кратном введении на телятах, ягнятах и поросятах в дозах соответственно от массы тела животных [2. Прототип].
В задачу исследований входило расширение ассортимента иммунологических препаратов и получение препарата, обладающего помимо иммуностимулирующего эффекта профилактическим и лечебным свойством против респираторных и желудочно-кишечных заболеваний животных бактериальной и вирусной этиологии.
Это удалось достичь благодаря подбору компонентов предложенного препарата, который включает:
водный раствор полиэтиленгликоля и поливинилпирролидона, коммерческий раствор Версена, водный раствор тетрациклина и коммерческий раствор трипсина, при следующем соотношении компонентов, об.%:
Предложенный препарат готовят следующим образом:
Пример 1. В 100 мл дистиллированной воды вносят 20 г ПЭГ и 20 г ПВП, тщательно перемешивают, после полного растворения стериллизуют автоклавированием при 121°С 45 минут.
Далее в стерильном флаконе смешивают путем взбалтывания по 20 мл ПЭГ и ПВП, добавляют 15 мл 0,02%-ного Версена, а также 10 г тетрациклина гидрохлорида и 0,25%-ный раствор трипсина (100-128 ЕД), доводя их объем состава до 100 мл.
Полученный таким образом препарат готов к применению.
Срок годности: препарат 12 месяцев при хранении в режиме 3+6°С.
Были приготовлены и испытаны следующие составы препарата - см., таблицу 1, 2 и 3.
Разработанные лекарственные формы обладают высокой лечебно-профилактической эффективностью, низким уровнем токсичности и иммуностимулирующим действием.
Предложенный препарат обладает широким спектром активности в отношении микробных и вирусных инфекций и является иммуностимулятором.
Внесение в состав 20%-ного водного раствора ПЭГ (ММ - 2000-6000) более 23 мл вызывает появление некробиоза или некроза на месте введения препарата, а количество ниже 10 мл не обеспечивает должного эффекта. Внесение в состав 20%-ного раствора ПЭГ обеспечивает эффект пролонгации. 20%-ный водный раствор ПВП (ММ - 28000-360000), превышающий 23 мл в составе, вызывает на месте введения некротические и дистрофические изменения тканей, меньшее количество (10 мл) - низкий уровень лечебного эффекта.
Состав, содержащий 20%-ный раствор ПВП, обладает иммуностимулирующим эффектом.
0,02%-ный коммерческий раствор Версена (этилендиаминтетраацет), (ЭДТА), внесенный в состав в превышающих количествах (более 15 мл), способствует развитию некроза и дистрофии с последующей атрофией тканей, а в уменьшенных количества (менее 10 мл), недостаточная эффективность выздоровления животных.
Использование в составе 0,02%-ного раствора Версена вызывает иммуномодулирующий эффект, разрушение микробов и вирусов в организме.
10%-ный водный раствор тетрациклина (окситетрациклина) гидрохлорида, превышающий максимальный уровень в составе (более 15 мл) вызывает некротические, некробиотические и дистрофические нарушения, а в меньших количествах (менее 10 мл) - низкий эффект лечения.
Использование в составе 10%-ного раствора тетрациклина гидрохлорида обеспечивает широкий спектр антимикробного, антивирусного действия.
Использование в составе 0,25%-ного раствора трипсина обеспечивает эффект пролонгации и иммуностимуляции, а также деструкцию вирусов микробов в организме.
Способ лечения и профилактики предложенным препаратом заключается во внутримышечном или подкожном его применении при заболеваниях респираторного и желудочно-кишечного тракта и т.д., вызванных вирусами и микробами.
Препарат вводят однократно в дозах: для мышей массой 12-28 г 0,5-0,8 мл подкожно, крысам массой 100-200 г и морским свинкам массой 200-350 г - 0,5-0,8 мл и кроликам массой 1,5-2,5 кг. - 0,5-1,0 мл для поросят на голову 0,5-1 мл.
Приводим конкретные примеры осуществления способа лечения.
Пример 1. Лечение трансмиссивного гастроэнтерита кроликов (ТГК).
Под опытом находилось 3 группы кроликов массой 2-3 кг., по 10 голов в каждой: 1 группе предложенный препарат (Повин-ВМ) вводился в дозе 1 мл. на голову. При проведении повторных экспериментов доза препарата колебалась от 1-2 мл./гол. Апробированы также и другие составы препарата. См. табл.1, 2, 3.
2 группа - введение левоэритроциклина (ЛЭЦ) в объеме 1 мл/гол., 3-я группа - 0,1 г/гол, тетрациклина по 1 мл (контроль).
Кратность применения и сроки лечения составили: для 1-й группы - однократное применение на весь курс лечения (5-7 дней), для 2-й - 2 раза, с интервалом в 3 дня, в течение 5-7 дней, а в 3 группе 2 раза в сутки в течение 5-7 дней. Результаты отражены в таблице 4.
Были проведены иммунологические исследования для определения эффективности иммуностимуляции предложенным препаратом. Для этого исследования проводили по общепринятой методике: определение антителообразующих клеток (АОК), реакцию торможения миграции лейкоцитов крови (РТМЛ), реакцию спонтанного изменения прилипаемости лейкоцитов (РСИПЛ).
Настоящий эксперимент проводили на 90 головах по 30 голов в каждой группе, с трехкратным повторным исследованием (результаты отражены в таблице 4).
Из представленных в таблице результатов по сравнительному определению лечебной эффективности можно отметить преимущество предложенного препарата. При этом из 30 леченных - 29 голов выздоровело полностью, что составляет 96,6% лечебной эффективности. Это в 1,5 раза превышает терапевтическую активность ЛЭЦ и в 14,6 раза - результаты лечения в 3-й группе (санация тетрациклином).
Следует отметить, что в группе, санированной предложенным препаратом, не отмечено ни одного случая рецидивов заболевания, тогда как в группе, получившей ЛЭЦ, частота рецидивов охватила 8 голов или 42,2% от числа выздоровевших.
Результаты иммунологических исследований по сравнению предложенного и известных препаратов позволило выявить значительное преимущество первого. Так, количество АОК, как показатель гуморального иммунитета в случаях применения предложенного препарата, превышало таковые показатели в прототипе в 1,8, а в аналоге - в 2,6 раза. Показатели РТМЛ свидетельствуют о том, что индекс торможения к 0,1% фитогемагглютинину был на 1,2 раза активнее при лечении предложенным препаратом по сравнению с прототипом и на 1,3 раза в аналоге. Это говорит о клеточной стимуляции предложенного препарата. Результаты по РСИПЛ также представляют факт клеточной стимуляции предложенного препарата. При этом процент прилипших лейкоцитов при лечении предложенным препаратом был в 1,3 раза выше по сравнению с прототипом и в 1,5 - по сравнению с аналогом.
Таким образом, проведенные испытания сравнительной лечебной эффективности предложенного препарата позволили отметить высокий терапевтический эффект при однократном применении, в отличие от однократного применения ЛЭЦ и многократного введения тетрациклина.
Пример 2.
Сравнительная лечебная эффективность предложенного препарата при пневмоэнтеритах у морских свинок.
В опытах использовали по 25 голов морских свинок, составивших три группы:
1 группа - лечение предложенным препаратом в дозе 1 мл/гол., однократно, внутримышечно, на весь курс лечения (состав препарата табл.2),
2 группа - лечение ЛЭЦ в дозе 1-2 мл/гол. однократно, внутримышечно и в
3 группа - внутримышечное введение иммуноглобулина в объеме 3-5 мл/гол, двукратно и 4-я группа - применение тетрациклина в дозе 0,1-0,3 г/гол., 2 раза в день, внутримышечно. За подопытными животными осуществляли наблюдение в течение 6-8 месяцев с целью выявления случаев рецидивов заболеваний респираторной и желудочно-кишечной системы у морских свинок.
Результаты представлены в табл.5.
Анализ таблицы показал, что терапевтический эффект в случае применения предложенного препарата составляет 96,0%, что более чем в 1,5 превышает данные по лечению во 2-й группе и приблизительно в 2 раза, в 3-й и 4-й группах.
Проведенные наблюдения за санированными морскими свинками всех 4-х групп (в течение 6-8 месяцев) позволили установить отсутствие рецидивов в 1 группе. Во 2, 3 и 4 группах их количество составило, соответственно 5 голов (38,4%), 4 гол. (34.3%) и 6 гол. (54,5%) от числа клинически выздоровивших морских свинок.
Надо отметить также хорошую переносимость предложенного препарата у морских свинок в период наступления лечебного эффекта. Сопоставляя эти результаты можно отметить, что в 1 группе наступление лечебного эффекта действия препарата было отмечено уже спустя 6-10 часов, тогда как во 2, 3 и 4-й группах спустя 12-15 и 16-22 часа, соответственно. Лечебный эффект сочетался из показаний температуры тела, одышки, клиники респираторного синдрома, прекращению диареи, поедаемости кормов, общего состояния.
Обращает на себя внимание и такой немаловажный факт, как кратность применения препаратов, составляющих в 1 и 2 группах - 1 раза, в 3-2 раза и в 4-10-14 раз. В качестве положительного момента следует отметить и дешевизну предложенного препарата.
Лечебная эффективность предложенного препарата при наличии полиэтилогического фактора заболевания составила 96,0%. При этом от применения ЛЭЦ, тетрациклина и миксоглобулина была в 2 раза ниже и составили соответственно 52,0%, 44,0% и 48,0%.
Повин-ВМ применен однократно, внутримышечно на поросятах в четырехдневном или 2-4 месячном возрасте, в дозе 0,5-1,0 мл/гол., независимо от массы тела.
Контрольную группу составили животные, получившие только вакцины.
Профилактическая эффективность предложенного препарата на свиньях для предотвращения респираторных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии отражена в таблице 6.
Анализ полученных результатов по апробации "Повина-ВМ" выявили его перспективное значение. Препарат применяют однократно в течение всего периода выращивания и сдачи на мясокомбинат.
Очевиден низкий уровень падежа (в 3,7 раз) и вынужденного убоя животных (в 0,3 раз).
Отменен высокий процент выживаемости свиней (в 1,2 раза), среднесуточный привес (в 0,7 раза), вес поголовья при сдаче на мясо (в 0,8 раза).
Повин-ВМ позволил предупредить вирусные и микробные заболевания в связи с входящими в препарат ингредиентами.
Побочных реакций не отмечено, как в момент отъема, так и в возрасте 2-4 месяцев. Животные, получившие Повин-ВМ, гораздо активнее.
Таким образом, разработанный иммуностимулятор однократного применения с профилактической целью, Повин-ВМ, позволил избежать многократного использования традиционных вакцин и др. препаратов, повысил сохранность поголовья, привесы, значительно сократил падеж и вынужденный убой свиней, что позволит сдать государству дополнительные тысячи тонн мяса.
Во всех группах, санированных предложенным препаратом, ЛЭЦ и тетрациклином у разных видов лабораторных и сельхозживотных (свиней) при той или иной этиологии заболевания проведено микроскопическое исследование пораженных тканей (легкие, желудок, кишечник, молочные железы и т.д.). Осуществлено микроскопичское и электронномикроскопическое изучение препаратов, приготовленных по общепринятым методикам. Результаты проведенных исследований показали, что только в группах животных, санированных предложенным препаратом (Повином-ВМ) отмечена не только полная деструкция и лизис микроорганизмов, но и структурные изменения клеточной стенки у них. Так, в частности, у микробов выявлено набухание, разрыхление и частичный лизис внешней оболочки, а у вирусов - разбухание вирионов, рельефность и утонченность суперкапсидной оболочки, а также комкование нуклеокапсида.
На основании проведенных экспериментов по применению предложенного препарата можно с уверенностью отметить следующие его преимущества:
- обладает высоким терапевтическим эффектом (95,0-96,0%) при широком этиологическом спектре возбудителей заболеваний (вирусы, микробы);
- безвреден при однократном мышечном введении лабороторным животным и сельхозживотным (свиньям). Химиотерапевтический индекс составил 5,5;
- однократная инъекция обеспечивает полный курс лечения при инфекционных заболеваниях различной системой локализации;
- препарат можно приготовить в лабораторных условиях и сохранить терапевтическую активность при 3+6°C в течении 12 месяцев;
- обладает не только пролонгированным антибактериальными противовирусным, но и иммуностимулирующим действием. Кроме того, он способен нейтрализовать возбудителя с сохранением его антигенной структуры в той или иной степени, что важно в контексте выработки специфической защиты у организма.
Предложенный препарат, применяемый предложенным способом для профилактики и лечения легочных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии у сельхозживотных, апробирован с положительным результатом с 1990 по 2005 г. во Владимирской, Самарской и Тверской областях.
Препарат и способ его применения найдет широкое распространение в в свиноводческих хозяйствах и частных секторах Российской Федерации и позволит резко сократить вышеупомянутые заболевания и увеличить выход полноценного молодняка и мяса.
Просим препарат назвать ПОВИН-ВМ согласно разрабатываемой документации.
Источники информации
1. Каталог отечественных и зарубежных препаратов. - М.: ИРИС ПРЕСС, 1994 г., стр.74.
2. Патент РФ №2214821, кл. А 61 К 31/00, А 61 Р 1/00, 2003 г.
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к препарату для лечения респираторных и желудочно-кишечных инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии сельскохозяйственных животных, а также к способу профилактики и лечения респираторных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии сельскохозяйственных животных, при этом препарат содержит тетрациклин (окситетрациклин) (8-10% раствор) в количестве 10-15 об.%, полиэтиленгликоль (15-20% раствор) - 10-15 об.%, поливинилпирролидон (15-20% раствор) - 10-20 об.%, этилендиаминтетраацетат (0,01-0,02% раствор Версена) - 10-15 об.%, а также трипсин (0,01-0,25% раствор) - остальное, а способ предполагает однократное внутримышечное введение данного препарата сельскохозяйственным животным (преимущественно поросятам) в дозе 0,5-1,0 мл на голову. Препарат по настоящему изобретению обладает иммуностимулирующими свойствами и обеспечивает эффективное лечение респираторных и желудочно-кишечных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии. 2 н.п. ф-лы, 6 табл.
| ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РЕСПИРАТОРНЫХ И ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЭТИОЛОГИИ | 2000 |
|
RU2214821C2 |
| RU 2053772 C1, 10.02.1996 | |||
| Каталог отечественных и зарубежных препаратов | |||
| - М.: ИРИС ПРЕСС, 1994, с.74. | |||
