2-АМИНО-4-АЦЕТИЛ-7-БРОМ-8-ГИДРОКСИ-3,8-ДИГИДРОТИАЗОЛО[5,4-B]ИНДОЛА, ЗАЩИЩАЮЩИЙ ПЕЧЕНЬ ОТ ОТРАВЛЕНИЯ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ Российский патент 2006 года по МПК C07D513/04 A61K31/429 A61P1/16 

Изобретение относится к химии конденсированных азотсодержащих гетероциклических систем и конкретно касается соединения формулы 1

Ранее была установлена гепатопротекторная активность гидробромида 2-амино-4-ацетил-8^б-гидрокси-3^а,8^б -дигидротиазоло[5,4-b]индола, другие сведения о биологической активности производных этой гетероциклической системы отсутствуют (Патент 2009127 РФ, МКИ³ 5 С 07 D 209/36, А 61 К 31/395. Гидробромид 1-ацетил-2-изотиоуреидо-3-индолинона, защищающий печень от отравления четыреххлористым углеродом / Вележева B.C., Мельман А.И., Томчин А.Б., Марышева В.В., Смирнов А.В., Оковитый С.В., Гайворон-ская В.В. (РФ) - 5018404/04; Заявлено 03.07.91). Первоначально соединению 2 было приписано цепное строение, позднее было установлено, ему соответствует приведенная кольчатая таутомерная форма (Имидазо[4,5-b]индолы / В.С.Вележева, А.Б.Томчин, А.И.Мельман, В.В.Марышева //ЖОрХ, 1998. - т.34 - №4. - С.604-617)

Известны гепатопротекторные свойства у гидробромида 4-ацетилтиазоло[5,4-b]индола (Патент 2076867 РФ, МКИ³ 6 С 07 D 487/04, А 61 К 31/40. Гидробромид 4-ацетилтиазоло[5,4-b]индола, защищающий печень от отравления четыреххлористым углеродом и способ его получения / Вележева B.C., Мельман А.И., Томчин А.Б., Смирнов А.В., Оковитый С.В., Гайворонская В.В. (РФ) - 5042409/04; Заявлено 19.05.1992) - соединение 3.

Указанное свойство позволяет предполагать возможность применения этого соединения для предотвращения и лечения у людей острых ингаляционных отравлений парами четыреххлористого углерода. Широкое применение четыреххлористого углерода в промышленности, сельском хозяйстве и военном деле делает актуальным поиск фармакологических средств, защищающих организм от воздействия этого токсиканта. Для восстановления функции печени применяют эссенциале, однако его активность недостаточна.

Поставленная цель достигается химической структурой нового соединения формулы 1, обладающего вышеуказанными свойствами.

Заявляемое соединение представляет собой белое кристаллическое вещество, труднорастворимое в воде, растворимо в метиловом и этиловом спиртах, ацетоне и легко растворимо в диметилформамиде и диметилсульфоксиде. Заявляемое соединение получают действием 30%-ного ацетата натрия на гидробромид 2-амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^а,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индола.

Пример 1. Гидробромид 2-амипо-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^а,8^б-дигидротиазоло-[5,4-b]индола. К раствору 17.3 г (0.068 моль) 5-бром-N-ацетилиндоксила в 170 мл диоксана при 20°С прибавляли раствор 3,36 мл (0,0715 моль) брома в 90 мл диоксана, выдерживали при перемешивании в течение 1 мин. Прибавляли приготовленный при нагревании и охлажденный до 25°С пересыщенный раствор 6,2 г (0,0817 моль) тиомочевины в 180 мл 2-пропанола и кипятили с обратным холодильником 5 мин. Фильтровали в горячем состоянии, осадок промывали 2-пропанолом (2×30 мл), диоксаном (2×30 мл) и эфиром (4×30 мл), сушили в вакууме над фосфорным ангидридом. Получили соединение в виде серовато-белых кристаллов, вес 22,68 г (81,4%). По данным ТСХ индивидуальное вещество наносят в ДМФА, сушат при 60°С 30 мин, элюент этилацетат-ацетон, R_f=0,21, Т. пл. 266-267°С (разл.).

Пример 2. 2,0 г (4,88 ммоль) гидробромида 2-амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^а,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индола растворяют при 50°С в 150 мл воды, фильтруют от взвеси и к фильтрату добавляют 30%-ный ацетат натрия до рН 6 по универсальному индикатору. Постепенно по всему объему начинают выпадать белые кристаллы основания, которые через 1 час отфильтровывают, промывают спиртом и эфиром. Сушат на воздухе, выход 1.0 г (62,5%). Для аналитических целей вещество кристаллизуют из метанола. Получают блестящие белые кристаллы. Проба Бейльштейна отрицательна. Температура плавления зависит от температуры внесения в прибор. В случае внесения при 160°С вещество плавится при 174-175°С (с разложением).

Вещество однородно по данным ТСХ. Адсорбент - силуфол УФ-254, растворитель для нанесения - диметилформамид, элюент - ацетон: гексан=1:1; R_f 0,28.

Спектр ПМР в ДМСО d₆. 300 МГц, м.д.: 2.25 с + 2.40 с (3Н, СН₃), 5.77 с + 6.10 с (1Н, Н^3a), 6.65 м (3H, NH₂, OH), 7.30 д (1Н, Н⁶), 7.45 с (1Н, Н⁸), 8.03 с (1Н, Н⁵).

Исследование биологической активности заявляемого соединения.

Острую токсичность определяли на белых беспородных мышах-самцах массой 18-22 г по известной методике (Прозоровский В.Б. и др. «Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки». Фармакология и токсикология, 1978, №4, с.494-502). Изучаемое соединение вводили внутрибрюшинно однократно в виде суспензии в воде с добавлением твина-80. LD₅₀ 1950±180 мг/кг, что позволяет отнести заявляемое соединение к малотоксичным веществам.

Гепатотропное действие изучали на крысах-самцах массой 140-170 г. Четыреххлористый углерод вводили подкожно ежедневно в 50%-ном растворе в вазелиновом масле в течение 4 дней подряд в количестве 0,4 мл/100 г массы. Одновременно с CCl₄ вводили соединение 1 в дозе 71,0 мг/кг внутрибрюшинно. Его сравнивали с известным гепатопротектором эссенциале и прототипами в эквимолярной дозе: соединением 2 в дозе 71,4 мг/кг и соединением 3 в дозе 67,5 мг/кг.

Клиническая картина отравления CCl₄ развивается медленно. Основные симптомы тяжелой интоксикации проявляются только к концу 2-х суток и через 4-7 суток приводят к летальному исходу. У всех больных наблюдается тяжелое поражение печени вплоть до жирового перерождения органа. Оценку защитного действия соединения 1 и аналогов проводили, исследуя активность специфической для печени аланиновой трансферазы (АлАТ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ) в сыворотке крови. Изменение активности АлАТ и АсАТ в сыворотке крови свидетельствует о повреждающем действии CCl₄ на клеточные мембраны и органеллы клетки. Результаты опытов приведены в табл.1.

Таблица 1.
Изменение активности АлАТ и АсАТ в сыворотке крови на седьмой день эксперимента.Группы животныхАлАТ, %АсАТ, %Интактные100100CCl₄281151CCl₄+эссенциале127*105*CCl₄+соединение 1112**111*CCl₄+соединение 2151*120CCl₄+соединение 3136*110*Примечание. *р<0,05; **р<0,01 по отношению к группе, получавшей CCl₄.

Полученные данные свидетельствуют о том, что применение соединения 1 в 2,5 раза уменьшает концентрацию АлАТ и в 1,36 раза концентрацию АсАТ. Таким образом, по способности защищать печень от отравления четыреххлористым углеродом соединение 1 превосходит аналоги 2 и 3, а также эссенциале по снижению АлАТ.

Изобретение относится к новому 2-амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^а,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индолу формулы:

защищающему печень от отравления четыреххлористым углеродом. Соединение характеризуется т.пл. 174-175°С (разл.) и LD₅₀ 1950±180 мг/кг. Описан способ получения соединения. 1 табл.

2-Амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^a,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]-индол формулы

защищающий печень от отравления четыреххлористым углеродом.