СПОСОБ НОРМАЛИЗАЦИИ ПОВЫШЕННЫХ РЕОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КРОВИ В УСЛОВИЯХ IN VITRO Российский патент 2007 года по МПК A61M1/36 A61K35/14 A61N2/02 A61P9/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано для снижения повышенной вязкости крови.

У больных ишемической болезни сердца (ИБС), в частности нестабильной стенокардией, отмечается выраженное нарушение гемореологии: вязкости цельной крови, ее плазмы и сыворотки, агрегации и деформируемости эритроцитов. Лечение нестабильной стенокардии классическими медикаментозными средствами не всегда приводит к желаемому результату, так как имеет массу побочных эффектов и короткий промежуток ремиссии, а также несет определенные материальные затраты [Киричук В.Ф., Малиново Л.И., Креницкий А.П., Майбородин А.В., Тупикин В.Д. Гемореология и электромагнитное излучение КВЧ-диапазона. Саратов, Изд-во СГМУ, 2003, 188 с.].

Активное применение крайне высокочастотной терапии (КВЧ-терапии) в современной кардиологической практике достаточно убедительно доказало ее эффективность при лечении различных форм ишемической болезни сердца [Киричук В.Ф. КВЧ-терапия в комплексном лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы // Саратовский научно-медицинский вестник. - 2004. - №2. - с.47-63]. Важнейшие биологически активные вещества, кислород и оксид азота (NO) занимают ключевые места в процессах регуляции функционирования гемореологической системы [Dietrich H.H., Ellsowrth M.L., Sprague R.S. et al. Red blood cell regulation of microvascular tone through adenosine triphosphate // Am. J. Physiol. - 2000. - V.278. - Suppl.4. - P.H1294-H1298]. Экспериментально доказано участие оксида азота в предотвращении развития кардиоваскулярной дисфункции и, следовательно, увеличении долговременной выживаемости [Ruschitzka F.Т., Wenger R.H., Stall-mach Т. et al. Nitric oxide prevents cardiovascular disease and determines survival in poly-globulic mice over expressing erythropoietin // PNAS. - 2000. - V.97. - №21 - Р.11609-11613].

Прототипом настоящего исследования является способ восстановления нарушенных реологических свойств крови в условиях in vitro у больных нестабильной стенокардией терагерцовым излучением на частоте молекулярного спектра излучения и поглощения (МСИП) оксида азота 150, 176-150, 664 ГГц [Киричук В.Ф., Малиново Л.И., Креницкий А.П., Майбородин А.В., Тупикин В.Д. Гемореология и электромагнитное излучение КВЧ-диапазона. Саратов, Изд-во СГМУ, 2003, 188 с.]. Образцы цельной крови больных нестабильной стенокардией подвергались облучению на частоте МСИП оксида азота 150, 176-150, 664 ГГц (плотность мощности = 1 мВ/см²), в течение 5, 15 и 30 мин. Влияние электромагнитного излучения терагерцового диапазона (ТГЧ-диапазона) частоты МСИП оксида азота (150, 176-150, 664 ГГц) на реологические свойства крови было различно в зависимости от времени экспозиции и приводило в ряде случаев к уменьшению, а в ряде случаев к увеличению вязкости цельной крови больных стабильной стенокардией. Недостатком данного метода является то, что при всех режимах облучения на частотах МСИП NO 150, 176-150, 664 ГГц изменения функциональных параметров эритроцитов были разнонаправлены: установлено повышение агрегационной способности эритроцитов и недостаточное снижение деформируемости их мембран.

Впервые предложен способ нормализации повышенных реологических свойств крови в условиях in vitro, включающий облучение образцов цельной крови на частоте МСИП оксида азота 240 ГГц в течение 15 минут (плотность мощности = 1 мВ/см²).

Кровь бралась из локтевой вены у больных при поступлении утром натощак в промежутке 8.30-9.00 часов. Цельная кровь смешивалась с раствором цитрата натрия 3,8% в соотношении 9:1. Стабилизированная кровь разделялась на две части: опытную и контрольную. Опытней образец крови подвергался облучению на частоте МСИП оксида азота на частоте 240 ГГц (плотность мощности = 1 мВ/см², тип волны ЕН₁₁) в течение 5,15 и 30 мин. Контрольный образец не облучался.

После окончания воздействия определялись реологические свойства цельной крови в образцах объемом 0.85 мл с помощью ротационного вискозиметра АКР-2 со свободно плавающим цилиндром [Парфенов А.С., Пешков А.В., Добровольский Н.А. Анализатор крови реологический АКР-2. Определение реологических свойств крови: Методические рекомендации. - M. 1994]. Методика ротационной вискозиметрии соответствует требованиям, предъявляемым к оценке реологических свойств крови [Дементьева И.Н., Ройтман Е.В. Экспресс-диагностика реологических свойств крови у кардиохирургических больных: Методические рекомендации. - М., 1995; Кручинский Н.Г., Теплякова А.И., Гапонович В.Н. и др. Экспресс-оценка реологических свойств крови и методы коррекции их нарушений у пациентов с атеросклерозом: Методические рекомендации. - Минск, 2000]. Вязкость цельной крови определяли при скоростях сдвига 300, 200, 150, 100, 50, 20, 10 и 5 с^-1. На основании полученных данных вычисляли индексы агрегации (ИАЭ) и деформируемости эритроцитов (ИДЭ) [Парфенов А.С., Пешков А.В., Добровольский Н.А. Анализатор крови реологический АКР-2. Определение реологических свойств крови: Методические рекомендации. - M. 1994].

Как видно из данных, представленных в таблице 1, при облучении цельной крови ТГЧ-излучением на частоте МСИП оксида азота 240 ГГц в естественном поле в течение 5 минут не было зарегистрировано статистически достоверных различий в показателях, характеризующих вязкость крови, при больших и малых скоростях сдвига, а также индексов деформируемости и агрегации эритроцитов.

При 15 минутном облучении образцов цельной крови происходило статистически достоверное снижение показателей вязкости крови при всех скоростях сдвига: 300, 200, 150, 100, 50, 20, 10 и 5 с^-1, а также статистически достоверное уменьшение индекса агрегации и индекса деформируемости эритроцитов по сравнению с данными больных нестабильной стенокардией, цельная кровь которых не подвергалась облучению.

При 30 минутном воздействии терагерцовых волн отмечено статистически достоверное снижение вязкости цельной крови при больших скоростях сдвига: 300 и 200 с^-1, но не было зарегистрировано статистически значимых различий вязкости крови при малых скоростях сдвига и индекса агрегации эритроцитов (таблица 1). Индекс деформируемости эритроцитов при данном режиме облучения достоверно увеличивался.

Наибольшим ингибирующим воздействием на повышенные реологические свойства крови обладает облучение, в течение 15 минут, которое было применено для воздействия на образцы цельной крови 20 больных, при этом во всех случаях наблюдались выраженное снижение вязкости крови на всех скоростях сдвига, а также статистически достоверное уменьшение индекса агрегации и индекса деформируемости эритроцитов.

Пример 1.

Больной К., диагноз: нестабильная стенокардия. Забор крови произведен через 6 часов после поступления в стационар. Приготовлены образцы цельной крови - контрольный и опытный. Опытный образец крови подвергнут воздействию электромагнитного излучения на частоте 240 ГГц (плотность мощности = 1 мВ/см², тип волны ЕН₁₁), в течение 15 минут (Таблица 2). В контрольном образце обнаружено изменение показателей, свидетельствующие о повышении вязкости крови, по сравнению с показателями относительно здоровых людей, в опытном образце - снижение большинства показателей до уровня относительной физиологической нормы: при скорости сдвига 300 с^-1 - 4 мПа*с и 3 мПа*с; при 200 с^-1 - 4 мПа*с и 3 мПа*с; при 150 с^-1 - 4,1 мПа*с и 3 мПа*с; при 100 с^-1 - 4,2 мПа*с и 3,1 мПа*с; при 50 с^-1, 4,8 мПа*с и 3,6; мПа*с при 20 с^-1 - 5,4 мПа*с и 4,2 мПа*с; при 10 с^-1 - 6,2 мПа*с и 4,9 мПа*с; при 5 с^-1 - 7,8 мПа*с и 6,5 мПа*с.

Пример 2.

Больной А., диагноз: нестабильная стенокардия. Забор крови произведен через 6 часов после поступления в стационар. Приготовлены образцы цельной крови - контрольный и опытный. Опытный образец крови подвергнут воздействию электромагнитного излучения на частоте 240 ГГц (плотность мощности = 1 мВ/см², тип волны ЕН₁₁), в течение 15 мин (Таблица 3). В контрольном образце обнаружено изменение большинства показателей, свидетельствующие о повышении вязкости крови, по сравнению с показателями относительно здоровых людей, в опытном образце - снижение большинства показателей до уровня относительной физиологической нормы: при скорости сдвига 300 с^-1 - 4,1 мПа*с и 3,2 мПа*с; при 200 с^-1 - 4,1 мПа*с и 3,2 мПа*с; при 150 с^-1 - 4,2 мПа*с и 3,2 мПа*с; при 100 с^-1 - 4,3 мПа*с и 3,3 мПа*с; при 50 с^-1 - 4,9 мПа*с и 3,8 мПа*с; при 20 с^-1 - 5,7 мПа*с и 4,5 мПа*с; при 10 с^-1 - 6,4 мПа*с и 5,1 мПа*с; при 5 с^-1 - 8 мПа*с и 6,8 мПа*с.

Предлагаемый способ, основанный на воздействии на образцы цельной крови терагерцовым излучения на частоте МСИП оксида азота 240 ГГц, дает возможность нормализовать повышенные реологические свойства крови больных нестабильной стенокардией в условиях in vitro.

Таблица 1
Влияние терагерцового излучения МСИП оксида азота на частоте 240 ГГц на реологические показатели крови больных нестабильной стенокардиейПоказателиОтносительно здоровые доноры (n=20)Больные нестабильной стенокардией (n=60)Облучение на частоте МСИП оксида азота 240 ГГц5(n=20)15(n=20)30 (n=20)300 с^-13.12 (3; 3.2)3.85 (3.4; 4.2)3.58 (3.35; 3.75)3.23 (3; 3.4)3.34 (3.1; 3.6)P₁=0.000001Р₂=0.746626P3=0.000126P4=0.015502Z₁=4.97Z₂=0.32Z3=3.83Z4=2.42200 с^-13.03 (2,9; 3.1)3.72 (3.4; 4.1)3.49 (3.25; 3.65)3,45 (2.9; 3.3)3.31 (3.05; 3.45)P1=0.000001P2=0.614399P3=0.000069P4=0.017472Z1=5.1Z2=0.5Z3=3.98Z4=2.37150 с^-13.07 (2.9; 3.2)3.71 (3.3; 4)3.54 (3.35; 3.7)3.23 (3; 3.4)3.42 (3.2; 3.5)P1=0.000004P2=0.476529P3=0.000148P4=0.053906Z1=4.59Z2=0.71Z3=3.79Z3=1.92100 с^-13.2 (3; 3.3)3.86 (3.45; 4.2)3.72 (3.45; 3.9)3.5 (3.25; 3.8)3.66 (3.4; 3.8)P1=0.000002P2=0.456421P3=0.006715P4=0.205877Z1=4.74Z2=0.74Z3=2.71Z4=1.2650 с^-13.54 (3.3; 3.7)4.3 (3.8; 4.7)4.1 (3.7; 4.5)3.8 (3.6; 4.15)4.05 (3.7; 4.3)P1=0.000006P2=0.622118P3=0.003393P4=0.179710Z1=4.51Z2=0.49Z3=2.92Z4=1.3420 с^-14.31 (3.9; 4.7)5.24 (4.5; 5.8)5.09 (4.6;5.8)4.46 (4.2; 4.7)4.83 (4.4; 5.25)P1=0.00003 8P2=0.965057P3=0.000196P4=0.130684Z1=4.12Z2=0.04Z3=3.72Z4=1.5110 с^-15.04 (4.7; 5.3)6.23 (5.3; 7)6.1 (5.5; 6.7)5.29 (4.7; 6)5.71 (5.3; 6)P1=0.000007P2=0.746626P3=0.000941P4=0.084532Z1=4.48Z2=0.32Z3=3.3Z4=1.725 с^-16.17 (5.9; 6.4)7.39 (6.3; 8.2)7.5 (6.8; 8.1)6.15 (5.4; 6.8)6.92 (6.25; 7.45)P1=0.000235P2=0.856594P3=0.000039P4=0.074227Z1=3.67Z2=0.18Z3=4.1Z4=1.78Индекс деформируемости эритроцитов, усл.ед.1 (1; 1)1.03 (1; 1.05)1.06 (1.03; 1.09)1.1 (1.08; 1.13)1.1 (1.07; 1.14)P1=0.074533P2=0.873820P3=0.000549P4=0.005978Z1=1.78Z2=0.15Z3=3.45Z4=2.7Индекс агрегации эритроцитов, усл.ед.1.31 (1.2; 1.3)1.34 (1.27; 1.4)1.36 (1.3; 1.4)1.273 (1.21; 1.32)1.31 (1.25; 1.36)P1=0.072743P2=0.160949P3=0.002504Р4=0.283128Z1=1.79Z2=1.4Z3=3.02Z4=1.07Примечание: в каждом случае приведены средняя величина (медиана - Me), нижний и верхний квартили (25%; 75%). Достоверность при Р<0.05000. P1 - достоверность различий между относительно-здоровыми донорами и больными; Р2 - достоверность между группой больных и 5 мин облучением; Р3 - достоверность между группой больных и 15 мин облучением; Р4 - достоверность между группой больных и 30 мин облучением

Таблица 2Изменение реологических показателей крови больного К. до и после 15 минутного облучения терагерцовыми волнами на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения NOПоказателиДо облучения (мПа*с)Облучение 15 минут (мПа*с)300 с^-143200 с^-143150 с^-14.13100 с^-14.23.150 с^-14.83.620 с^-15.44.210 с^-16.24.95 с^-17.86.5

Таблица 3Изменение реологических показателей крови больного А, до и после 15 минутного облучения терагерцовыми волнами на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения NOПоказателиДо облучения (мПа*с)Облучение 15 минут (мПа*с)300 с^-14.13.2200 с^-14.13.2150 с^-14.23.2100 с^-14.33.350 с^-14.93.820 с^-15.74.510 с^-16.45.15 с^-186.8

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано для снижения повышенной вязкости крови. Способ нормализации повышенных реологических свойств крови в условиях in vitro включает облучение образцов крови больных нестабильной стенокардии терагерцовым облучением, при этом на образец крови воздействуют излучением на частоте МСИП оксида азота 240 ГГц плотностью мощности 1 мВ/см² в течение 15 минут. Изобретение дает возможность нормализовать повышенные реологические свойства крови больных нестабильной стенокардией в условиях in vitro. 3 табл.

Способ нормализации реологических свойств крови в условиях in vitro, включающий облучение образцов крови больных нестабильной стенокардии, стабилизированной 3,8%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 9:1, терагерцовым облучением, отличающийся тем, что на образец крови воздействуют излучением на частоте молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота 240 ГГц плотностью мощности 1 мВт/см² в течение 15 мин.