СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ МЕТАСТАЗОВ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ В НЕБНЫХ МИНДАЛИНАХ Российский патент 2007 года по МПК G01N33/483 

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии.

Известен способ выявления онкологических злокачественных заболеваний, неоплазмы (Н) посредством скрининга сформированных групп повышенного риска с предопухолевыми заболеваниями и злокачественными опухолями, основанного на жалобах и анамнезе (П.И.Шелестюк «Клиническая онкология: Курс лекций» // Саранск: Изд.-во. Мордов. ун-та., 1996).

Описанный способ имеет низкую производительность и достоверность. Люди чаще не подозревают о наличии у них неоплазмы (Н). Опухоль зачастую развивается без симптомов у заболевшего человека. Даже когда появляются определенные симптомы и жалобы, такие пациенты ходят от одного специалиста к другому с 3-я или даже 5-ю ошибочными диагнозами 2 года, пока симптомы накопятся и приобретут известную врачам форму, однако время чаще бывает упущено.

Известен способ диагностики Н (например, рака), включающий пункцию лимфатических узлов с последующей окраской клеточного материала и изучение последнего с помощью микроскопа (Справочник медицинской сестры по уходу / под ред. Н.Р.Палеева. М.: Медицина. - 1981).

Описанный способ травматичный, дорогой, имеет низкую производительность и достоверность, т.к. не может использоваться на ранних стадиях Н. Лимфатические узлы должны быть в достаточной степени поражены Н, чтобы их пунктировать. Но это уже не ранняя стадия. Врач и в этом случае также становится в выжидательную позицию. Часто возможность проведения лечения укладывается в 2-3 недели после установления правильного диагноза.

Известны способы диагностики онкологических заболеваний, основанные на обнаружении метастазов (и одиночных метастазов) различных типов Н гистологическим методом в биоптатах небных миндалин (1. Millar-EK, Vaughan-Jones-R, Zang. S. Prostatic adenocarcinoma metastatic to the palatine tonsil: a case report // J. Laryngol. - Otol. 108 (2) Feb. 1994. P.178-80), аденокарциномы прямой кишки (2. Wang W.S., Chiou T.J., Pan C.C., e.a. Signet-ring cell carcinoma of the rectum with tonsillar metastasic: a case repot // Chung Hua I Hsueh Tsa Chin Taipei. 1996 Sep; 58 (3): 209-12), также метастазов разных типов Н, включая лимфомы (3. Kojima M, Nakamura S, Shuimizu К, et al.: Marginal zone В cell lymphomas of Waldeyer's ring-a report of two tonsillectomy cases resembling histomorphological features of inflammatory lesions. Pathol Res Pract 2001; 197: 781-784. 4. Anagnostopoulos I, Foss HD, Hummel M, et al. Extranodal mantle cell lymphoma mimicking marginal zone cell lymphoma. Histopathology 2001; 39: 561-565. 5. Reiter ER, Randolph GW, Pilch BZ. Microscopic detection of occult malignancy in the adult tonsil. Otolaryngol Head and Neck Surg 1999; 120: 190-194. 6. Younis RT, Hesse SV, Anand VK. Evaluation of the utility and cost-effectiveness of obtaining histopathologic diagnosis on all routine tonsillectomy specimens. Laryngoscope 2001; 111: 2166-2169). Все описанные способы (1-6) выполнены на патологически измененных миндалинах. Описанный способ 6 является прототипом.

Прототип имеет существенные недостатки: 1. Низкая производительность и достоверность, т.к. обнаружение метастазов и тем более одиночного метастаза в гистологических образцах НМ после тонзилэктомии занимает много времени. 2. Тонзилэктомия метод небезопасный. 3. Тонзилэктомия осуществляется по строгим показаниям (при хроническом тонзиллите в стадии декомпенсации или когда НМ непосредственно поражены Н), по этому прототип не может применяться для массовых исследований, как скрининг Н. 4. Прототип не может быть использован на людях с неизмененными небными миндалинами, как скрининг Н, т.к. при этом исключается сама возможность массового обследования людей на наличие Н. Однако массовое обследование является отличительной чертой скрининга. 5. Тонзилэктомия с последующим гистологическим исследованием - метод дорогой, трудоемкий и требует значительных материальных затрат. 6. Выполнение способа, описанного в прототипе, занимает много времени.

Конечный технический результат предлагаемого решения заключается в следующем: 1. Повышение производительности, экономичности и достоверности в 20 раз с помощью анализа реакции клеток, полученных посредством соскоба, как с неизмененных, так и с измененных НМ при наличии отдаленных Н, которая характеризуется появлением разной величины атипичных ретикулярных клеток при состояниях, которые сопровождаются неконтролируемым размножением клеток, различных Н; при эпителиальных опухолях, злокачественных лимфомах и меланоме (полиморфные, обычно гипохромные, без ядрышек, с эксцентричным неправильной формы и с неровными краями ядром, с нежной голубоватой или дымчатой, обильной цитоплазмой с извилистыми кружевными краями, их размеры 14-32 мкм, даже единичные большие атипичные ретикулярные клетки НМ дают повод включить пациента, у которого они обнаружены, в группу риска), при липосаркоме появляются отдельно расположенные и в полиморфных (или железистоподобных) комплексах недифференцированные полиморфные гипохромные клетки разных размеров с полиморфными ядрами гетерогенного расслоенного хроматина, с пенистой или вакуолизированной цитоплазмой и асимметричные митоз(ы); при опухолях системы крови, гемобластозах, например лейкозах, доля полиморфных гипохромных незрелых клеток типа бластов и пролимфоцитов в НМ резко возрастает относительно эпителия и других клеток НМ и появляются клетки Мотта или морулы; при лимфогранулематозе выявляется реакция НМ, которая выражается в появлении атипичных ретикулярных клеток, а также специфических для этого заболевания огромных зрелых (даже единичных) и молодых клеток в состоянии неправильного (патологического) деления (даже единичных) - клетки лимфогранулематоза, клетки Рида-Штернберга (Ходжкина клетки), при наличии обычных митозов. Также обнаруживаются метастазы. Единичные небольшие атипичные ретикулярные клетки НМ выявляются при наличии предопухолевых заболеваний, например при мастопатии и др.

Способ обнаружения метастазов злокачественных новообразований в небных миндалинах при наличии отдаленного первичного очага неоплазмы выполняется с помощью микроскопического анализа цитологического материала, полученного с помощью соскоба с поверхности НМ, в котором оцениваются клеточные реакции лимфоидной ткани, поверхностного, промежуточного и базального слоя эпителия. При этом выявляются атипичные ретикулярные клетки, недифференцированные полиморфные клетки, клетки Мотта или морулы, отдельные или ассоциированные с эпителием, а также асимметричные, патологические митозы, полиморфные незрелые клетки (типа бластов и пролимфоцитов), а также метастазы разных типов злокачественных новообразований. Соскоб производится у пациента в положении сидя. Пациент открывает рот и высовывает язык. На типичном месте находиться НМ правая и левая. Соскоб цитологического материала НМ производится под визуальным контролем с помощью типа ложки для удаления желчных камней или типа кюретки стоматологической. Из полученного с помощью соскоба клеточного материала изготовляют мазок на предметном стекле, окрашивают его по Гимзе (или Романовскому-Гимзе) и изучают с помощью светового микроскопа.

Для достижения конечного технического результата решались следующие задачи.

Выявляется реакция клеточного состава НМ: атипичные ретикулярные клетки, недифференцированные полиморфные клетки с асимметричными митозами и без них, заметное увеличение количества полиморфных незрелых клеток (типа бластов и пролимфоцитов), клетки Мотта, а также обнаружение метастазов разных типов Н. Клеточный материал, полученный с помощью соскоба с НМ, переносится на предметное стекло и окрашивается по Гимзе (или Романовскому-Гимзе) и затем изучается с помощью светового микроскопа.

Предложенный способ реализуется следующим образом (конкретные примеры).

1. В случае карциномы (аденокарцинома желудка): а) пациент находится в положении (в положении лежа, зависит от состояния пациента). Пациента просят открыть рот, высунуть язык и сказать «А», показать горло. С правой НМ под визуальным контролем с помощью кюретки стоматологической производится соскоб. Материал соскоба равномерно распределяется на предметном стекле и окрашивается по Гимзе; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) выявляются метастазы карциномы, ретикулярные клетки различной величины с атипичными признаками, асимметричные митозы.

2. В случае меланомы: а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются метастазы меланомы, ретикулярные клетки различной величины с атипичными признаками, асимметричные митозы.

3. В случае острого лимфобластного лейкоза (гемобластоз): а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются полиморфные гипохромные незрелые клетки типа бластов, пролимфоцитов, которые создают фон мазка, клетки Мотта, метастазы.

4. В случае хронического лимфолейкоза (гемобластоз): а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются полиморфные гипохромные незрелые клетки типа лимфоцитов, пролимфоцитов, бластов в различных количественных соотношениях, которые создают фон мазка, клетки Мотта, метастазы.

5. В случае липосаркомы: а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются метастазы липосаркомы, недифференцированные полиморфные гипохромные клетки разных размеров с пенистой, вакуолизированной цитоплазмой, расположенные отдельно или сгруппированные в полиморфные комплексы, асимметричные митозы, метастазы.

6. В случае лимфоретикулосаркомы (злокачественная лимфома): а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются атипичные ретикулярные клетки, асимметричные митозы, метастазы, которые представлены разрастанием атипичных лимфоцитов и полиморфных ретикулярных клеток.

7. В случае лимфогранулематоза (злокачественная лимфома): а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются атипичные ретикулярные клетки, клетки Рида-Штернберга, асимметричные митозы, метастазы.

8. В случае мастопатии (предопухолевое заболевание): а) ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются единичные небольшие атипичные клетки.

9. В случае кисты шеи (предопухолевое заболевание): ...выполняются условия пункта «а» случая 1; б) в мазке с помощью микроскопа (X 400-900) обнаруживаются единичные небольшие атипичные клетки.

Существенные преимущества предлагаемого решения.

1. Предложенный способ позволяет существенно увеличить количество обследуемых лиц с неизмененными НМ, без ЛОР-патологии, пациенты не предъявляют жалоб на ЛОР-органы, также и НМ, а также с измененными НМ, тем самым увеличить производительность в 12 раз за счет увеличения количества обследуемых групп пациентов и расширения показаний к предлагаемому способу: Показания к методу: 1. Люди, работающие на опасных для здоровья производствах. 2. Люди, генетически предрасположенные к онкологическим и другим заболеваниям, родственники которых страдают или страдали онкологическими заболеваниями. 3. Пациенты, страдающие злокачественными заболеваниями с уже установленным диагнозом (для исключения у них 4-й стадии распространения заболевания). 4. Пациенты с доброкачественными опухолями: полипы, попиломы, аденомы, липомы, фибромы, лимфангиомы, гемангиомы, дермоидные кисты, миксомы и т.д.. 5. Пациенты, страдающие предраковыми состояниями: мастопатии, полипоз органов желудочно-кишечного тракта (желудка, кишечника и др.), гиперплазия молочных желез, пигментная ксеродерма; хронические воспалительные процессы: бронхиты, незаживающие язвы, дисплазии, эрозии шейки матки и др. 6. Пациенты, лечившиеся по поводу какого-либо онкологического заболевания (систематическое обследование). 7. Пациенты с лихорадкой неясного генеза (повышение температуры тела), имеющие разнообразные сомнительные или непонятные рентгенологические (УЗИ) находки и др. 8. Пациенты, имеющие увеличенное СОЭ, с анемией и другие изменения показателей крови, а также с эндокринными нарушениями. 9. Пациенты с увеличенными и/или уплотненными, болезненными лимфатическими узлами. 10. Пациенты с неясными, сомнительными диагнозами. 11. Пациенты с кахексией, изменениями аппетита, потерей веса, нарушением двигательных функций, акта глотания, кровотечения и т.д. 12. Любой пациент, который желает обследоваться этим методом; периодически контролировать и корректировать устойчивость своего организма к онкологическим заболеваниям. Указанные группы пациентов преимущественно бывают без ЛОР-патологии, исключая тонзиллиты. Предложенный способ противопоказаний не имеет. Прототип не позволяет выполнить вышеизложенные 12 пунктов и выполняется ретроспективно, после тонзилэктомии, которая осуществляется по строгим показаниям только в стационаре.

2. Предложенный способ позволяет определить группу риска относительно неоплазмы (Н), но и в некоторых случаях предсказать результат верификации Н, дифференцировать карциномы от гемобластозов (лейкозов) и лимфом не просто на ранней стадии развития этих опухолей, а даже на стадии первой атаки, при неизмененных НМ. Прототип не позволяет этого сделать при неизмененных НМ.

3. Предложенный способ может охватить практически все слои населения, успешно выполняется как в стационаре, амбулатории, так и на дому и у постели больного в стационаре непосредственно. - Прототип не позволяет этого сделать.

4. Предложенный способ выполняется с минимальным повреждением тканей НМ и без осложнений. С 1964 г. - 1600 наблюдений без осложнений. Прототип иногда выполняется с осложнениями.

5. Предложенный способ не имеет противопоказаний. Прототип имеет противопоказания (например, при гемобластозах противопоказана биопсия, тем более тонзилэктомия) и осуществляется по строгим показаниям.

6. Предложенный способ во много раз (более чем в 200 раз) повышается производительность и достоверность исследования. Предложенный способ у одного пациента занимает в среднем 1 час: от начала соскоба и выдачи на руки заключения. Прототип имеет низкую производительность и достоверность. Тонзилэктомия НМ с последующей гистологией образцов НМ займет в лучшем случае как минимум 12 дней. Многие пациенты, болеющие Н, не имеют изменений со стороны НМ и поэтому не могут исследоваться с помощью прототипа.

7. Предложенный способ в 10 раз экономичнее. Прототип включает материальные затраты, кроме гистологического оборудования, предоперационную подготовку, хирургические инструменты, анестезию, перевязочный материал для проведения тонзилэктомии, койка-дни.

8. Предложенный способ выполняется с минимальным стрессом. Прототип включает операционный стресс и стресс долгого ожидания результата.

9. В предложенном способе выявляется реакция клеток НМ при наличии отдаленных Н: немногочисленные крупные атипичные ретикулярные клетки, или увеличение количества этих клеток различной величины при карциномах и лимфогранулематозе, а также и метостазы; недифференцированные полиморфные клетки и асимметричные митозы при липосаркомах, полиморфные незрелые клетки типа бластов и пролимфоцитов и клетки Мотта при лейкозах. Это легко обнаруживается даже при беглом осмотре мазка. Прототип включает обнаружение метастаза, что непроизводительно, тем более если искать единичный метастаз. Причем метастазы в НМ явление редкое, а реакция клеток НМ при наличии отдаленной Н всегда появляется.

Существенные отличия предлагаемого способа от прототипа.

1. В предложенном способе производится соскоб. В прототипе - тонзилэктомия (биопсия). 2. В предложенном способе соскоб выполняется у постели больного в стационаре, в его доме, в поликлинике, амбулатории, в поле, в поезде, при повышенной температуре и при нормальной температуре. В прототипе - в стационаре, в операционной, при нормальной температуре. 3. Предложенный способ осуществляется одним инструментом типа кюретки стоматологической. В прототипе - набор хирургического инструментария для тонзилэктомии. 4. Предложенный способ включает изготовление мазка из полученного материала. В прототипе - проводку и изготовление гистологических срезов. 5. В предложенном способе окрашиваются мазки. В прототипе - гистологические срезы. 6. В предложенном способе не применяется микротом для изготовления гистологических срезов. В прототипе - применяется микротом. 7. При выполнении предложенного способа пациент не теряет лимфоидный орган НМ, который обеспечивает иммунитет организма и др. При выполнении прототипа пациенты лишаются лимфоидного органа НМ, которая обеспечивает иммунитет организма и другие важные функции. 8. Предложенный способ не имеет противопоказаний. Прототип показан только в одном случае: хронического тонзиллита в стадии декомпенсации. 9. Выполнение предложенного способа занимает около 1 часа. Прототип - в среднем 12 дней. 10. Предложенный способ не нуждается в специальной подготовке пациента. Прототип включает предоперационную подготовку. 11. Выполнение предложенного способа не требует проведения лабораторных предварительных анализов крови и мочи и др. В прототипе лабораторные анализы обязательны. 12. Любой человек, который желает обследоваться и периодически контролировать устойчивость своего организма к онкологическим заболеваниям, может воспользоваться предложенным способом. 13. Предложенный способ предлагает оценить реакцию НМ при наличии отдаленной неоплазмы. Прототип не оценивает реакцию НМ. 14. В предложенном способе берутся во внимание крупные атипичные ретикулярные клетки, недифференцированные полиморфные клетки, увеличение количества полиморфных незрелых клеток (типа бластов и пролимфоцитов), клетки Мотта. Прототип эти структуры не берет во внимание. 15. Предложенный способ берет во внимание недифференцированные полиморфные клетки и асимметричные митозы при неизмененных НМ при отдаленной липосаркоме. В прототипе этот признак не берется во внимание. 16. Предложенный способ противопоказаний не имеет. Прототип противопоказан всем людям, которые не страдают хроническим тонзиллитом в стадии декомпенсации (в настоящее время и при этом заболевании стараются сохранить НМ) или неоплазмой, локализованной в самих НМ. 17. Предложенный способ выполняется на неизмененных НМ и измененных НМ. Прототип выполняется только на измененных НМ.

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано для скрининга онкологических заболеваний с помощью изучения особенностей клеточного состава неизмененных и измененных небных миндалин, эпителия и лимфоидной ткани, которые получают посредством соскоба с поверхности небных миндалин. Сущность способа заключается в том, что с помощью светового микроскопа определяют наличие атипичных ретикулярных клеток в комбинации с неправильными (асимметричными) митозами, полиморфных незрелых клеток, клеток Мотта, недифференцированных полиморфных одиночных клеток или сгруппированных в железистоподобные, полиморфные комплексы с асимметричным митозом. Техническим результатом является разработка способа, позволяющего обнаружить метастазы злокачественных новообразований в небных миндалинах при наличии отдаленного первичного очага неоплазмы.

Способ обнаружения метастазов злокачественных новообразований в небных миндалинах при наличии отдаленного первичного очага неоплазмы, отличающийся тем, что проводят микроскопический анализ цитологического материала, полученного соскобом с поверхности визуально неизмененной небной миндалины на наличие ретикулярных клеток различной величины с атипичными признаками, недифференцированных полиморфных клеток с асимметричным митозом, полиморфных незрелых клеток, клеток Мотта, Рида-Штернберга, атипичные ретикулярные клетки обнаруживают при наличии метастазов карцином, меланом или злокачественных лимфом, атипичные ретикулярные клетки вместе с клетками Рида-Штернберга обнаруживают при наличии метастазов при лимфогранулематозе, гипохромные полиморфные незрелые клетки и клетки Мотта обнаруживают при наличии метастазов при лейкозах, при наличии метастазов отдаленного очага липосаркомы обнаруживают недифференцированные полиморфные клетки, расположенные отдельно или сгруппированные в полиморфные комплексы с асимметричным митозом, а при предопухолевых заболеваниях обнаруживают единичные небольшие атипичные клетки.