СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ РАСПРОСТРАНЕННОГО РАКА ЯИЧНИКОВ Российский патент 2007 года по МПК G01N33/574 

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии.

Рак яичников (РЯ) составляет около 5% всех опухолей у женщин, занимает среди них 7 место по частоте и 3 место среди гинекологических опухолей после рака тела и шейки матки. Он имеет самые высокие показатели смертности среди всех гинекологических опухолей, что связано с поздней диагностикой заболевания. У 70-75% больных РЯ диагностируется в распространенной стадии. Среди всех злокачественных опухолей яичников РЯ составляет 90%, причем большая часть этих опухолей приходится на серозные карциномы.

Совершенствование химиотерапевтических методов лечения РЯ, в частности использование препаратов платины и таксанов, оказало определенное влияние на эффективность лечения больных РЯ. Вместе с тем, определение прогноза заболевания до сих пор остается актуальной задачей, так как от него в значительной степени зависит выбор той или иной лечебной тактики. К факторам прогноза относятся стадия заболевания, гистологический тип опухоли и степень ее дифференцировки (гистологическая градация), объем остаточных, не удаленных опухолевых масс при циторедуктивных операциях, возраст больных и др. Данные о прогностическом значении плоидности ДНК опухолевых клеток противоречивы. Одни авторы [Паниченко И.В. и соавт., 2002, Bakshi N. et al., 1998, Ozalp S. et al., 2001, и др.] считают, что плоидность опухолевых клеток имеет большое прогностическое значение, другие [Pfisterer J. et al., 1994, Reles A.E. et al., 1998, Resnik E. et al, 1997, и др.] высказывают противоположное мнение и полагают, что она не является независимым прогностическим фактором.

В диагностике распространенного РЯ большое значение имеет цитологическое исследование мазков, полученных из осадка после центрифугирования асцитической жидкости. При цитологическом исследовании в мазках обнаруживаются группы и комплексы клеток железистого рака, и в большинстве случаев может быть установлен правильный диагноз.

В качестве прототипа предлагаемого изобретения можно рассматривать работу Паниченко И.В., Богатырева В.Н., Козаченко В.П. и соавт. "Значение биологических факторов прогноза у больных эпителиальными опухолями яичников", опубликованную в журнале "Новости клинической цитологии России", 2002, - т. 6. - №1-2. - С.4-8. Авторы провели анализ содержания ДНК и плоидности опухоли у 77 больных раком яичников с помощью лазерной ДНК-проточной цитометрии суспензии опухолевых клеток из кусочков опухоли, полученных во время операции. Они установили, что плоидность опухоли является независимым прогностически высокозначимым фактором. Так, 2-летняя выживаемость больных раком яичников с диплоидными новообразованиями была достоверно выше, чем больных с анэуплоидными опухолями (соответственно 93 и 67%, p<0,05). Плоидность опухоли имела наибольший коэффициент весомости по сравнению с другими факторами прогноза, такими как стадия заболевания, степень дифференцировки и гистологический тип опухоли, размер остаточной опухоли после операции и др.

В доступной литературе нам не удалось найти работ, в которых плоидность опухоли и другие статистически значимые факторы были бы использованы для предсказания хорошего или плохого прогноза у каждой конкретной больной распространенным РЯ.

Технический результат настоящего изобретения состоит в верификации клинического диагноза при цитологическом исследовании материала асцитической жидкости, определении плоидности ДНК опухолевых клеток и предположительном определении прогноза течения заболевания у больных распространенным раком яичников.

Это достигается проведением цитологического исследования мазков, полученных из осадка после центрифугирования асцитической жидкости до лечения больной. Мазки, окрашенные гематоксилином и эозином, оцениваются опытным цитологом визуально, после этого наиболее информативные из них обесцвечиваются, переокрашиваются по методу Фельгена и исследуются с помощью анализатора микроизображений. Применение анализатора микроизображений позволяет объективизировать цитологические данные, оценить содержание ДНК опухолевых клеток и определить плоидность опухоли.

Предлагаемый нами способ разработан при ретроспективной оценке клинических данных, данных цитологического и гистологического исследований, анализа цитометрических показателей и определения плоидности опухолей, а также результатов прослеживания 52 больных с распространенным раком яичников (III-IV стадии, серозная аденокарцинома). При использовании однофакторного анализа 5-летней выживаемости больных по методу Каплан-Мейера (программа Statistica 6.0) нами было установлено, что статистически значимыми факторами прогноза течения заболевания (p<0,05) являются следующие факторы: гинекологический статус больных (репродуктивный период, или постменопауза); наличие или отсутствие гидроторакса; стадия III или IV; возможность или невозможность проведения циторедуктивной операции; размер остаточной опухоли до 2 см или более 2 см ; лечение препаратами платины или другие схемы химиотерапии; наличие анэуплоидных или диплоидных опухолей. Указанные факторы были исследованы с помощью многофакторного дискриминантного анализа (программа Statistica 6.0) с целью выработки решающего правила для разделения больных с хорошим или плохим прогнозом заболевания при оценке 5-летней выживаемости больных. Для проведения анализа указанные факторы закодированы следующим образом (таблица 1).

Таблица 1Кодирование прогностических факторов для дискриминантного анализаПрогностический факторХарактеристикаКодГинекологический статусРепродуктивный период1 Постменопауза2ГидротораксИмеется1 Отсутствует0СтадияIII1 IV2Циторедуктивная операцияПроведена1 Не проведена0Размер остаточной опухоли<2 см1 >2 см2ХимиотерапияПрепаратами платины1 Другие схемы0Плоидность опухолиАнэуплоидные1 Диплоидные2

При проведении многофакторного дискриминантного анализа оказалось, что наиболее значимыми факторами для разделения больных с хорошим и плохим прогнозом были гинекологический статус, размер остаточной опухоли, гидроторакс и плоидность опухоли. Определена одна статистически значимая каноническая линейная дискриминантная функция - КЛДФ (р=0,00001).

Рассчитаные значения (центроиды) для больных раком яичников с хорошим (-2,24016) и плохим (0,34847) прогнозами представлены на чертеже.

Середина расстояния между центроидами (-0,94584) является дискриминационным значением (ДЗ). Если при расчете КЛДФ получается значение меньше ДЗ, можно предполагать хороший прогноз заболевания, если расчетное значение превышает ДЗ, предполагается плохой прогноз.

Константа и коэффициенты для расчета КЛДФ представлены в таблице 2.

Таблица 2Коэффициенты для расчета КЛДФПризнаки Значения коэффициентовГинекологический статус(х1)1,28017Гидроторакс(х2)0,64462Остаточная опухоль(x3)1,55890Плоидность(х4)-0,65926Константа -4,35465

КЛДФ рассчитывается по следующей формуле:

КЛДФ=-4,35465+х1*1,28017+х2*0,64462+х3*1,55890-х4*0,65926,

где х1-х4 - значения кодов соответствующих признаков.

Сущность способа поясняется примерами.

ПРИМЕР 1. К., 52 лет, ИБ №1910 от 18.05.88. Клинический диагноз: Рак яичников, асцит. Больная в постменопаузе (код 2), гидроторакс отсутствует (код 0). При цитологическом исследовании асцитической жидкости (№147304 от 18.05.88) установлен диагноз железистого рака. С 10.06.88 больной начата химиотерапия (ТИОТЭФ, 5-фторурацил, затем препараты платины). 8 июля 1988 г. произведена пробная лапаратомия, удаление левых придатков и большого сальника. Размер остаточной опухоли >2 см (код 2). При гистологическом исследовании (№ О-185662 от 08.07.88) установлено наличие умереннодифференцированной серозной аденокарциномы с метастазами в большой сальник. Архивные мазки переокрашены по Фельгену, исследованы с помощью анализатора изображений. Установлена анэуплоидная опухоль (код 1).

Подставив данные в приведенную выше формулу, рассчитываем значение КЛДФ. КЛДФ=-4,35465+2,56034+0+3,1178-0,65926=0,66423. Полученное значение больше ДЗ (-0,94584), следовательно, прогноз неблагоприятный. Больная умерла через 13 мес. после начала лечения.

ПРИМЕР 2. Больная С., 67 лет, ИБ №4811 от 10.11.93. Клинический диагноз: Подозрение на опухоль яичника? Толстой кишки? Больная в постменопаузе (код 2), гидроторакс отсутствует (код 0). При цитологическом исследовании асцитической жидкости (№205370 от 10.11.93) установлено наличие единичных мелких папиллярной формы комплексов опухолевых клеток, скорее всего из яичника. 11 ноября 1993 г. выполнена двусторонняя аднексэктомия с резекцией большого сальника. Размер остаточной опухоли <2 см (код 1). При гистологическом исследовании (№ О-210585 от 11.11.93) установлено наличие высокодифференцированной папиллярной цистаденокарциномы яичника. С 30.11.93 начата химиотерапия препаратами платины. Архивные мазки переокрашены по Фельгену, исследованы с помощью анализатора изображений. Установлена диплоидная опухоль (код 2).

Подставив данные в приведенную выше формулу, рассчитываем значение КЛДФ. КЛДФ=-4,35465+2,56034+0+1,5589-1,31852=-1,55393. Полученное значение меньше расчетного (-0,94584), следовательно, предполагается хороший прогноз. Больная умерла в апреле 1999 г., через 65 мес. после начала лечения.

Таким образом, проведение расчетов по представленной выше формуле, которое можно производить с помощью калькулятора или программы Microsoft Exel, позволяет определить значение КЛДФ, сравнить его с дискриминационным значением и с достаточно высокой точностью предсказать хороший или плохой прогноз распространенного РЯ.

На нашем материале КЛДФ позволила в 88,5% случаев правильно предсказать хороший или плохой исход заболевания при оценке 5-летней выживаемости больных РЯ. Классификационный матрикс этой функции представлен в табл.3.

Таблица 3Классификационный матрикс КЛДФ при оценке 5-летней выживаемости больных РЯНаблюдаемые группы% правильного предсказанияПредсказание по КЛДФУмерлиЖивыБольные умерли в теч. 5 лет86,7396Больные живы в теч. 5 лет100,007Всего88,53913

Способ по сравнению с известными имеет преимущество, заключающееся в том, что используется материал, полученный во время эвакуации асцитической жидкости во время обследования больной. Полученный материал является достаточным как для установления цитологического диагноза, так и для проведения цитометрических исследований и определения плоидности опухоли. Способ позволяет с точностью 88,5% предсказать хороший или плохой прогноз заболевания у больных распространенным раком яичников при оценке 5-летней выживаемости больных.

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии. В способе производится цитологическое исследование асцитической жидкости до лечения, мазки переокрашиваются по Фельгену и определяется плоидность опухоли. Показатели гинекологического статуса больной (репродуктивный период - 1, постменопаузальный - 2), наличия (1) или отсутствия (0) гидроторакса, размера остаточной опухоли до 2 см (1) или более 2 см (2) и плоидности опухоли (анэуплоидной - 1 или диплоидной - 2) используются для вычисления канонической линейной дискриминантной функции (КЛДФ) по формуле: КЛДФ=-4,35465 + код статуса*1,28017 + код гидроторакса*0,64462 + код остаточной опухоли*1,55890-код плоидности*0,65926. В случае, если расчетный показатель меньше дискриминационного значения (Д3=-0,94584), предполагают благоприятный прогноз заболевания, если показатель больше ДЗ, предполагают неблагоприятный прогноз заболевания. Способ прост в исполнении и позволяет осуществить прогноз с высокой точностью. 3 табл., 1 ил.

Способ прогнозирования течения распространенного рака яичников, включающий цитологическое исследование асцитической жидкости и определение плоидности содержания ДНК с помощью анализа изображения, учета гинекологического статуса больных, наличия или отсутствия гидроторакса и размера остаточной опухоли, отличающийся тем, что вычисляют значение канонической линейной дискриминантной функции (КЛДФ) по формуле: КЛДФ=-4,35465 + код статуса·1,28017 + код гидроторакса·0,64462 + код остаточной опухоли·1,55890 - код плоидности·0,65926, - сравнивают это значение с дискриминантным значением (Д3=-0,94584) и при расчетном показателе меньше ДЗ предполагают благоприятный прогноз заболевания, а при показателе больше ДЗ предполагают неблагоприятный прогноз заболевания.