ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ, СОДЕРЖАЩАЯ АРСЕНИТ НАТРИЯ Российский патент 2007 года по МПК A61K33/36 A61P35/00 

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения злокачественной опухоли, в состав которой входит мышьяк.

Фармацевтические композиции, содержащие мышьяк, известны в терапии рака. Например, в обзоре S.Waxman и др. в The Oncologist 6 (suppl.2), 2001, сс.3-10 описывается применение дисульфида мышьяка, трисульфида мышьяка и триоксида мышьяка в упомянутой композиции, включающей соль мета-арсенита (AsO₂ ^-) и фармацевтически приемлемое вспомогательное средство.

Из-за присущей им токсичности и появления хороших альтернатив интерес к соединениям мышьяка до сих пор оставался низким.

В основу изобретения была положена задача предложить фармацевтическую композицию для терапии злокачественной опухоли, которая позволяет лечить солидные опухоли. Фармацевтическая композиция может быть использована для лечения таких солидных опухолей, для которых не существует общепринятого лечения, или в качестве альтернативного или дополнительного лечения таких солидных опухолей.

В связи с последним обстоятельством фармацевтическая композиция по настоящему изобретению отличается тем, что она является фармацевтической композицией для лечения солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, представленной опухолью ободочной кишки, опухолью желудка, опухолью молочной железы, опухолью яичника, опухолью простаты и опухолью почки; данная композиция включает соль мета-арсенита (AsO₂ ^-) и фармацевтически приемлемое вспомогательное средство.

Было обнаружено, что определенные типы опухолей необычайно чувствительны к соли мета-арсенита. При этом в соли контр-ион мета-арсенита может быть любым фармацевтически приемлемым контр-ионом.

В приведенной выше статье Waxman цитируется статья G.S. Tarnowski и др. в Cancer Research, 26, 1966, cc.181-206, где было исследовано действие 14 различных противоопухолевых химических соединений по отношению к опухолям 8 типов. Арсенит калия оказывал действие только на рост асцитной опухоли Эрлиха. Относительно опухоли этого типа отмечается, что она более чувствительна в асцитной форме, чем в солидной. Это подчеркивает удивительное открытие настоящего изобретения.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения применяют соль щелочного или щелочноземельного металла. В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения солью является соль натрия.

Такие соли легко растворяются и быстро проявляют свое противоопухолевое действие.

Изобретение также относится к использованию соли мета-арсенита (AsO₂ ^-) для создания фармацевтической композиции, предназначенной для лечения солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли желудка, опухоли молочной железы, опухоли яичника, опухоли простаты и опухоли почки.

Было обнаружено, что солидные формы таких опухолей, принадлежащие к группе, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли молочной железы, опухоли простаты и опухоли почки, особенно чувствительны.

Настоящее изобретение также имеет отношение к методу лечения человека, страдающего от солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли желудка, опухоли молочной железы, опухоли яичника, опухоли простаты и опухоли почки, фармацевтически эффективной дозой соли мета-арсенита (AsO₂ ^-).

Для лучшего понимания изобретения приводится пример, который иллюстрирует, но не ограничивает описываемое настоящее изобретение.

Пример

Различные опухолевые клетки человека выращивали при 37°С в увлажненной атмосфере (95% воздуха, 5% СО₂) в монослойных культурах на среде RPMI 1640 с феноловым красным (фирма Life Technologies, Karlsruhe, Германия) и с добавлением плодной сыворотки теленка. Клетки обрабатывали трипсином и пересевали еженедельно.

Изучение цитотоксичности

Для исследования антипролиферирующей активности изучаемых соединений применяли модифицированный метод с использованием иодида пропидиума (основанный на методе W.A.Dengler и др. в Anti-Cancer Drugs, 6, 1995, cc.552-532. В кратком изложении метод заключается в следующем. Клетки собирали в экспоненциальной фазе роста культуры на среде RPMI 1640 с добавлением 10% плодной сыворотки теленка, обрабатывали трипсином, подсчитывали и помещали в 96-луночные планшеты для микротитрования с плоскодонными лунками (140 мкл клеточной суспензии, 8×10 клеток/мл). После 24 ч инкубирования для достижения клетками экспоненциального роста в лунки добавляли по 10 мкл культуральной среды (6 контрольных лунок на планшетку) или культуральной среды, содержащей испытуемое лекарственное средство. Каждую концентрацию лекарственного средства исследовали в троекратной повторности. После 4 сут инкубации культуральную среду замещали водным раствором иодида пропидиума (6 мкг/мл). Планшеты для микротитрования выдерживали при температуре -18°С в течение 24 ч, что приводило к тотальной гибели клеток. После оттаивания планшеток измеряли флуоресценцию, используя Millipore Cytofluor 2350-ридер для микропланшеток (возбуждение 530 нм, эмиссия 620 нм), с целью установить общее число клеток. Анализ включал необработанный и положительный контроли (5-FU и vindesine).

Подавление роста выражали отношением опыт/контроль × 100 (или О/К%). Значения ИК₅₀ и ИК₇₀ рассчитывали путем сопоставления концентрации вещества по отношению к числу клеток. Средние значения ИК₅₀ и ИК₇₀ рассчитывали по формуле:

где х = определенная линия опухолевых клеток и n = тотальное число изученных клеточных линий. Если ИК₅₀ и ИК₇₀ нельзя установить в пределах исследованной области доз, для подсчета использовали самую низкую или самую высокую изученную концентрацию.

Испытания считались значимыми только в том случае, если положительный контроль (5-FU) приводил к ингибированию роста опухоли О/К<30% и обработанные растворителем контрольные клетки имели интенсивность флуоресценции>500 единиц.

Результаты

Результаты суммированы в таблице, которая показывает, что, в частности, опухолевые клеточные линии такого типа, как опухоль желудка, опухоль яичников и, в особенности, опухоль простаты, опухоль молочной железы, опухоль почки и ободочной кишки были чувствительны к соединениям мета-арсенита. В сравнении с ними промиелоцитная лейкемия, которая, как известно, реагирует на триоксид мышьяка, показала значение ИК₇₀=6,82 мкг/мл. Следовательно, опухолевые клетки, к которым имеет отношение настоящее изобретение, почти в 2-20 раз более чувствительны к соединению мета-арсенита.

ОпухольЛиния клетокИК₇₀ (мкг/мл)Ободочной кишкиDLD10,48ЖелудкаGXF251L3,08Молочной железыMXAF401NL0,32ЯичниковOVCAR33,02ПростатыРС30,85ПочкиRXF486L0,63

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается фармацевтической композиции для лечения солидных опухолей, выбранных из группы, представленной опухолью толстой кишки, опухолью желудка, опухолью молочной железы, опухолью яичника, опухолью простаты и опухолью почки, при этом данные опухоли являются чувствительными к действию мета-арсенита натрия; данная композиция включает соль мета-арсенита (AsO₂ ^-) в фармацевтически эффективном количестве и фармацевтически приемлемое вспомогательное средство. Изобретение также относится к применению этой композиции для лечения солидных опухолей у пациента и способу лечения солидных опухолей, чувствительных к действию мета-арсенита натрия. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения солидных опухолей. 7 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Фармацевтическая композиция для лечения солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли желудка, опухоли молочной железы, опухоли яичника, опухоли простаты и опухоли почки, включающая мета-арсенит (AsO₂ ^-) натрия и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.2. Применение мета-арсенита (AsO₂ ^-) натрия для получения фармацевтической композиции для лечения солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли желудка, опухоли молочной железы, опухоли яичника, опухоли простаты и опухоли почки.3. Способ лечения человека, страдающего от солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли желудка, опухоли молочной железы, опухоли яичника, опухоли простаты и опухоли почки, предусматривающий использование фармацевтически эффективной дозы метаарсенита (AsO₂ ^-) натрия.4. Способ по п.3, в котором опухоль представляет собой опухоль ободочной кишки.5. Способ по п.3, в котором опухоль представляет собой опухоль желудка.6. Способ по п.3, в котором опухоль представляет собой опухоль молочной железы.7. Способ по п.3, в котором опухоль представляет собой опухоль яичников.8. Способ по п.3, в котором опухоль представляет собой опухоль простаты.9. Способ по п.3, в котором опухоль представляет собой опухоль почки.10. Фармацевтическая композиция для лечения солидной злокачественной опухоли, при том, что упомянутая композиция включает метаарсенит (AsO₂ ^-) натрия и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.11. Способ лечения пациента, страдающего от солидной злокачественной опухоли, предусматривающий введение пациенту фармацевтически эффективной дозы композиции, включающей метаарсенита (AsO₂ ^-) натрия.12. Фармацевтическая композиция для лечения солидной злокачественной опухоли, выбранной из группы, состоящей из опухоли ободочной кишки, опухоли желудка, опухоли молочной железы, опухоли яичника, опухоли простаты и опухоли почки, при том, что упомянутая композиция, по существу, включает метаарсенит (AsO₂ ^-) натрия и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.13. Способ лечения пациента, страдающего от солидной злокачественной опухоли, предусматривающий введение пациенту фармацевтически эффективной дозы композиции, по существу, содержащей метаарсенита (AsO₂ ^-) натрия.