СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПЕРИНАТАЛЬНЫХ ГИПОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ У НОВОРОЖДЕННЫХ Российский патент 2007 года по МПК G01N33/68 G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и детской неврологии, и может быть использовано для прогнозирования развития перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у новорожденных детей, рожденных от матерей с гестозом различной степени тяжести.

Перинатальные поражения центральной нервной системы занимают ведущее место (до 80%) в структуре патологии нервной системы (1, 2), среди них 60,1% составляют гипоксически-ишемические поражения ЦНС у новорожденных детей (3). Гестоз считают одним из значимых факторов, способствующих возникновению перинатальных поражений центральной нервной системы у новорожденных (4).

Прогнозирование перинатальных поражений центральной нервной системы у новорожденных детей, рожденных от матерей с гестозом, представляет сложную клиническую проблему.

Известен способ прогнозирования перинатальной гипоксически-ишемической энцефалопатии у новорожденных путем исследования иммуногенетического статуса организма. В пуповинной крови определяют антигены локусов А, В, DR системы HLA и при наличии одного из антигенов A32, В8, В27, DR3 или их сочетания прогнозируют развитие перинатальной гипоксически-ишемической энцефалопатии у новорожденных. Точность способа неизвестна (патент №2157534 Россия, МПК 7 G01N 33/53. Способ прогнозирования перинатальной гипоксически-ишемической энцефалопатии у новорожденных / Джумагазиев А.А., Рахимова Л.Р., Гольденберг О.П. // Изобретения, Полезные модели. - 2000. - №28, Ч.2. - C.301).

Способ имеет недостатки:

- исследуется пуповинная кровь, что означает позднее прогнозирование перинатальной гипоксически-ишемической энцефалопатии у новорожденных и не позволяет своевременно провести профилактические мероприятия;

- способ требует определения четырех параметров для прогнозирования перинатальной гипоксически-ишемической энцефалопатии у новорожденных;

- в настоящее время определение антигенов системы HLA производится в реакции ПЦР, что требует дорогостоящего оборудования и реактивов.

Известен способ прогнозирования энцефалопатии новорожденного путем исследования биологического материала - ткани плаценты, из которой готовят 10% гомогенат, определяют активность НАДФН-оксидазы по восстановлению 2,6-дихлорфенилиндофенола в присутствии НАДФН, результаты реакции учитывают спектрофотометрически при длине волны 600 нм и при величине активности НАДФН-оксидазы, равной 13,5 единиц оптической плотности и выше, прогнозируют развитие энцефалопатии у новорожденного (патент №2254573 Россия, МПК 7 G01N 33/52. Способ прогнозирования энцефалопатии новорожденного / Крукиер И.И. // Изобретения. Полезные модели. - 2005. - №17).

Точность способа неизвестна.

Способ имеет недостатки:

- исследование проводится уже после рождения ребенка и не позволяет осуществить антенатальный прогноз перинатального поражения ЦНС у новорожденного;

- изготовление 10% гомогената плаценты требует дополнительного времени;

- не указано, какие участки плаценты используются для приготовления гомогената, а, как известно, в децидуальной оболочке и трофобласте уровень НАДФН-оксидазы может существенно различаться;

- обследование проводится двумя различными методами с использованием высокотоксичных химических реактивов.

Известен способ прогнозирования развития гипоксически-ишемической энцефалопатии у доношенных новорожденных путем клинического обследования беременной, с дополнительным проведением УЗИ маточных артерий, артерий пуповины и средней мозговой артерии плода, выявляют факторы риска, определяют их градации и числовые значения и рассчитывают прогностические коэффициенты F1 и F2 по формулам и при значении прогностического коэффициента F1≥F2 прогнозируют развитие гипоксически-ишемической энцефалопатии у доношенного новорожденного, который родится у обследованной женщины (патент №2167608 Россия, МПК 7 А61В 8/00. Способ прогнозирования развития гипоксически-ишемической энцефалопатии у доношенных новорожденных / Саютина С.Б., Шпрах В.В., Протопопова Н.В. и др. // Изобретения. Полезные модели. - 2001. - №15, Ч.1. - С.224).

Точность способа неизвестна.

Способ имеет недостатки:

- расчеты производятся по очень сложным формулам;

- данный метод не лишен субъективности, и результаты допплеровского исследования зависят от квалификации специалиста, проводящего данное исследование;

- нельзя заранее с точностью сказать доношенный ли родится ребенок у обследуемой женщины, а в случае преждевременных родов способ прогнозирования не применяется.

Наиболее близким по техническому решению является способ прогнозирования перинатальной патологии у беременных с хроническими инфекционно-воспалительными заболеваниями путем определения в венозной крови беременной способности лейкоцитов крови к продукции γ-интерферона, количества антител к γ-интерферону, аутоантител к основному белку миелина и S-100, и при снижении продукции γ-интерферона менее 16 МЕ/мл, аутоантител к основному белку миелина и S-100 менее (-) 40 условных единиц для каждого показателя и повышении антител к γ-интерферону более 20 условных единиц прогнозируют перинатальную патологию (патент №2256914 Россия, МПК 7 G01N 33/49, 33/53. Способ прогнозирования перинатальной патологии у беременных с хроническими инфекционно-воспалительными заболеваниями. / Тареева Т.Г., Ткачева И.И., Микаелян А.В. и др. // Изобретения. Полезные модели. - 2005. - №20).

Данный способ выбран нами в качестве прототипа. Исследование содержания аутоантител к основному белку миелина и S-100 свидетельствует о прогнозировании, в том числе и перинатальной патологии ЦНС. Основной белок миелина и S-100 являются специфическими маркерами нервной ткани, а появление в периферической крови аутоантител к ним свидетельствует о поражении ЦНС (7). Точность способа неизвестна.

Способ имеет недостатки:

- необходимость определения четырех параметров, каждый из которых требует дорогостоящих реактивов;

- для оценки продукции ИФА необходима стимуляция лейкоцитов крови вирусными макрофагами (Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. - Москва: Медицина. - 1996. - 240 с.);

- не ясен механизм развития патологии ЦНС у новорожденных при данном сочетании показателей, т.к. содержание γ-интерферона в крови менее 16 МЕ/мл, сниженный уровень аутоантител к основному белку миелина и S-100 соответствует неосложненному течению беременности и нормальному развитию плода, а повышение уровня антител к γ-интерферону может быть в результате развития аллергической реакции;

- изменение продукции γ-интерферона в венозной крови может сопровождать угрозу преждевременных родов.

- не указан срок беременности, при котором проводится данное исследование.

Указанные недостатки могут быть устранены в предлагаемом способе.

Заявляемый технический результат достигается тем, что в третьем триместре гестации в периферической венозной крови беременной женщины с гестозом определяют содержание интерлейкина-1β и при его значении >40 пкг/л прогнозируют развитие перинатального гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденного с точностью 78,4%.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать развитие гипоксических перинатальных поражений ЦНС у новорожденных детей, рожденных от матерей, чья беременность осложнилась гестозом, по определению содержания интерлейкина-1β (ИЛ-1β) в периферической венозной крови матери в третьем триместре гестации.

Ранее исследование содержания IL-1β проводилось при обследовании женщин с наружным генитальным эндометриозом с целью выявления воспалительного процесса. Было показано, что повышение концентрации IL-1 в перитонеальной жидкости, а также повышение его секреции клетками эктопического и эутопического эндометрия свидетельствуют о наличии воспалительного процесса (Д.И.Соколов, О.В.Павлов, Н.Г.Солодовникова. Нарушение баланса цитокинов при наружном генитальном эндометриозе // Иммунология репродукции: Республ. науч. конф. (11-14 апреля 2005 года, Иваново). - Иваново, 2005. - с.85). В акушерстве повышение концентрации IL-1 в экстрактах децидуальной ткани свидетельствовало о вирусно-хламидийном инфицировании женщин с гестозом (Царькова Р.Х. Особенности иммунного ответа на системном и локальном уровнях у женщин с гестозом и хламидийно-вирусной инфекцией // Автореферат на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. - Иваново. - 2003.) Для прогнозирования перинатальных гипоксических поражений ЦНС у новорожденных данный показатель используется впервые.

Однако ИЛ-1β продуцируется клетками при любых воспалительных процессах и не является специфическим маркером поражения ЦНС. Поэтому мы считаем, что установленная нами взаимосвязь между повышением содержания ИЛ-1β в периферической крови беременной и поражением ЦНС ребенка определяется продукцией ИЛ-1β нейронами мозга при гипоксически-ишемических поражениях ЦНС. При несовершенстве гемато-энцефалических барьеров плода ИЛ-1β может поступать в общую систему маточно-плацентарного кровообращения, в то же время гестоз сопровождается увеличением проницаемости плацентарных барьеров, что способствует проникновению ИЛ-1β плода в системный кровоток матери (5).

Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом.

1. У женщины с гестозом в третьем триместре гестации производят забор 1 мл периферической венозной крови.

2. Кровь центрифугируют 5 минут при 1500 оборотах в минуту, для исследования отбирают 200 мкл отцентрифугированной сыворотки.

3. Количественное определение ИЛ-1β человека в образцах сыворотки крови методом твердофазного иммуноферментного анализа в соответствии с методическими рекомендациями фирмы-производителя, используемой тест-системы (OOO "Цитокин").

4. Результат анализа вычисляют по калибровочному графику после измерения оптической плотности и считают в пкг/л.

Отличительные признаки способа

Установлен новый прогностический параметр содержания ИЛ-1β в периферической венозной крови в третьем триместре беременности, осложненной гестозом, при количественном значении которого > 40 пкг/л прогнозируют развитие перинатальных гипоксических поражений ЦНС.

Преимущества заявляемого способа

1. Исследование проводится антенатально (до родов), что позволяет своевременно провести профилактические мероприятия.

2. Определение одного показателя интерлейкина-1β.

3. Простота проведения методики, способ не требует больших временных затрат.

4. Высокая специфичность способа.

5. Отсутствие необходимости работы врача-лаборанта с вирусами.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Беременная В., 33 лет. Первые три беременности закончились медицинскими абортами, без осложнений. Данная беременность четвертая. На учет по беременности в женскую консультацию встала в сроке 7 недель. В сроке 28 недель развился гестоз в форме нефропатии. Женщина неоднократно находилась на стационарном лечении по поводу лечения гестоза. В сроке 36 недель женщина госпитализирована в клинику по поводу утяжеления гестоза. Выставлен диагноз - беременность 36 недель. Сочетанный гестоз тяжелой степени тяжести в форме нефропатии II степени на фоне вегетососудистой дистонии по гипертоническому типу. Задержка внутриутробного развития плода I степени. Хроническая внутриутробная гипоксия плода. При обследовании заявляемым способом в сроке 36 недель беременности концентрация интерлейкина-1β составляет 148,9 пкг/л; прогнозируется развитие перинатального гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденного. В сроке 38 недель женщина родоразрешена путем операции кесарево сечение. Родился живой доношенный мальчик массой 2600 граммов, ростом 49 сантиметров, с оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов. Ребенок наблюдался в раннем неонатальном периоде неонатологом и детским неврологом, выявлены признаки гипертензивного синдрома. По данным нейросонографии - усилена пульсация внутримозговых сосудов, дилятированы затылочные рога боковых желудочков до 5 мм. С учетом клинической картины и результатов нейросонографии выставлен диагноз: перинатальное поражение центральной нервной системы, церебральная ишемия II степени, гипертензивный синдром. На 10 день жизни ребенок переведен на долечивание. Заключение: прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2. Беременная Р., 20 лет. Данная беременность первая. На учет по беременности в женскую консультацию встала в сроке 20 недель. В сроке 34 недели развился гестоз средней степени тяжести в форме нефропатии, лечение проводилось амбулаторно в условиях женской консультации. Эффекта от лечения не было, в связи с этим беременная направлена на стационарное лечение в сроке 39 недель. В клинике при обследовании выставлен диагноз - беременность 39-40 недель. Сочетанный гестоз средней степени тяжести в форме нефропатии I степени на фоне анемии I степени, хронического пиелонефрита, вне обострения. Крупный плод. При обследовании заявляемым способом в сроке 39-40 недель беременности концентрация интерлейкина-1β составляет 19,7 пкг/л; не прогнозируется развитие перинатального гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденного. В сроке 41 неделя произошли первые своевременные роды. Родилась живая доношенная девочка весом 3750 граммов, ростом 55 сантиметров, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. В раннем неонатальном периоде ребенок наблюдался неонатологом. При обследовании новорожденного патологии со стороны центральной нервной системы не выявлено. Заключение: прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3. Беременная X., 26 лет. Первая беременность закончилась медицинским абортом, без осложнений. Данная беременность вторая. На учет по беременности в женскую консультацию встала в сроке 8 недель. В сроке 35 недель развился гестоз в форме водянки, женщине было дано направление на стационарное лечение. В клинике при обследовании был выставлен диагноз - беременность 37 недель. Сочетанный гестоз легкой степени тяжести в форме водянки на фоне хронического пиелонефрита вне обострения. При обследовании в сроке 37 недель заявляемым способом концентрация интерлейкина-1β составляет 435,7 пкг/л; прогнозируется развитие перинатального гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденного. В сроке 39 недель произошли первые своевременные роды. Родилась живая доношенная девочка весом 3750 граммов, ростом 53 сантиметра, с оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов. Ребенок наблюдался в раннем неонатальном периоде неонатологом и детским неврологом, выявлены признаки гипертензивного синдрома. По данным нейросонографии - усилена пульсация внутримозговых сосудов, дилятированы затылочные рога боковых желудочков до 4 мм. С учетом клинической картины и результатов нейросонографии выставлен диагноз - перинатальное поражение центральной нервной системы, церебральная ишемия I степени, умеренный гипертензивный синдром. На 5 день жизни ребенок выписан домой. Заключение: прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 4. Беременная Г., 33 лет. Первая беременность закончилась преждевременными оперативными родами в срок 35-36 недель и рождением живой недоношенной девочки массой 2560 граммов и ростом 46 сантиметров, с оценкой по Апгар 7/8 баллов, по Даунсу 3 балла. Две следующие беременности закончились самопроизвольными выкидышами в сроке 7-8 недель. Данная беременность четвертая.

На учет по беременности в женскую консультацию встала в сроке 5-6 недель. В сроке 32 недели развился гестоз в форме нефропатии, женщине было дано направление на стационарное лечение. От госпитализации женщина отказалась. Проводилось амбулаторное лечение. На приеме в женской консультации в сроке 35 недель отмечается ухудшение состояния, и по скорой помощи женщина госпитализирована в стационар. В клинике при обследовании был выставлен диагноз - беременность 35 недель. Сочетанный гестоз средней степени тяжести в форме нефропатии на фоне ожирения 2 степени. При обследовании в сроке 35 недель заявляемым способом концентрация интерлейкина-1β составляет 399,9 пкг/л; прогнозируется развитие перинатального гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденного. В сроке 35-36 недель произошли вторые преждевременные оперативные роды. Родилась живая недоношенная девочка массой 3050 граммов, ростом 46 сантиметров, с оценкой по шкале Апгар 6/7 баллов, по Даунсу 3 балла. Ребенок наблюдался в раннем неонатальном периоде неонатологом и детским неврологом, выявлены признаки гипертензивного синдрома. По данным нейросонографии - структурность паренхимы мозга умеренно снижена, межполушарная щель 1-2 мм, боковые желудочки S>D, передние рога S=2 мм, D поджат. Левое сосудистое сплетение расширено, умеренно неоднородно. С учетом клинической картины и результатов нейросонографии выставлен диагноз - перинатальное поражение центральной нервной системы, церебральная ишемия II степени, внутрижелудочковое кровоизлияние I-II степени, гипертензивный синдром. На 9 день жизни ребенок переведен на долечивание. Заключение: прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 5. Беременная Т., 29 лет. Первая беременность закончилась своевременными родами и рождением живой доношенной девочки массой 3850 граммов и ростом 53 сантиметра, с оценкой по Апгар 8-9 баллов. Вторая беременность закончилась медицинским абортом, без осложнений. Данная беременность третья. На учет по беременности в женскую консультацию встала в сроке 10 недель. В сроке 36 недель развился гестоз легкой степени тяжести в форме водянки, лечение проводилось амбулаторно в условиях женской консультации. Беременная направлена на дородовую госпитализацию в сроке 39 недель. В клинике при обследовании выставлен диагноз - беременность 39-40 недель. Сочетанный гестоз легкой степени тяжести в форме нефропатии I степени на фоне анемии I степени. При обследовании заявляемым способом в сроке 39-40 недель беременности концентрация интерлейкина-1β составляет 40,0 пкг/л; не прогнозируется развитие перинатального гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденного. В сроке 39-40 недель произошли вторые своевременные роды. Родилась живая доношенная девочка весом 3200 граммов, ростом 49 сантиметров, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. В раннем неонатальном периоде ребенок наблюдался неонатологом. При обследовании новорожденного патологии со стороны центральной нервной системы не выявлено. Заключение: прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Результаты исследований сведены в таблицу.

ТаблицаПоказательКоличество обследованныхВсего обследовано женщин51Истинно-положительный результат28Ложно-положительный результат3Истинно-отрицательный результат12Ложно-отрицательный результат8Итого: точность заявляемого способа 78,4%, чувствительность заявляемого способа 77,8%, специфичность заявляемого способа 80% 

Таким образом, заявленный способ прост в исполнении и позволяет с высокой точностью прогнозировать развитие гипоксических перинатальных поражений ЦНС у новорожденных детей, рожденных от матерей с гестозом различной степени тяжести, что позволяет выбрать правильную тактику лечения беременных в третьем триместре гестации и способ родоразрешения. Своевременно принятые мероприятия будут способствовать снижению частоты перинатальных поражений ЦНС у новорожденных детей и одновременно позволят снизить экономические затраты на их лечение.

Источники информации

1. Шабалов Н.П. Неонатология.: Учебное пособие. В 2-х томах. T.1 - М.: МЕДпресс-информ, 2004. - 608 с.

2. Барашнев Ю.И., Бессонова Ю.В. Индикаторы перинатальных повреждений головного мозга плода и новорожденного // Акушерство и гинекология. - 1997. - №2. - С.28-33.

3. Барашнев Ю.И. Неонатальная неврология: действительность, иллюзии и надежды // Акушерство и гинекология. - 1993. - №1. - С.14-19.

4. Кулаков В.И. Репродуктивное здоровье населения России // Акушерство и гинекология. - 2002. - №2. - С.4-7.

5. Sargent I., Redcliffe J., Borzychowski A., Croy A.B., Redman C.W.J. The role of the innate immune system in type1/type2 immunity shifts in normal pregnancy and pre-eclampsia // AJRI. - 2004. - v.51. - P.460-461.

Изобретение относится к области медицины, а именно к перинатологии и детской неврологии. Для прогнозирования перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у новорожденных проводят определение содержания интерлейкина-1β в периферической венозной крови беременной с 35 недели беременности, осложненной гестозом. При его значении > 40 пкг/л прогнозируют перинатальные гипоксические поражения центральной нервной системы у новорожденных. Использование способа позволяет повысить точность и специфичность прогнозирования перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у новорожденных, что позволяет выбрать правильную тактику лечения беременных во второй половине третьего триместра гестации и способ родоразрешения. 1 табл.

Способ прогнозирования перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у новорожденных путем иммунологического исследования периферической венозной крови беременной, отличающийся тем, что с 35 недели беременности, осложненной гестозом, определяют содержание интерлейкина-1β, и при его значении > 40 пкг/л прогнозируют развитие перинатальных гипоксических поражений ЦНС.