СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУПРАМОЛЕКУЛЯРНОГО ГЕЛЯ Российский патент 2008 года по МПК C07K17/04 

Описание патента на изобретение RU2317305C2

Изобретение относится к области получения гелей, которые применяются в качестве носителей, в частности пептидов и протеинов, и может быть использовано при производстве композиций, содержащих биологически активные вещества.

Технический результат настоящего изобретения заключается в том, что разработан способ получения супрамолекулярного (супрамолекулярный - образованный в результате ассоциации частиц, удерживаемых вместе межмолекулярными взаимодействиями (а не прочными химическими связями)) тиксотропного геля, в котором структурировано от 10 до 103 массовых долей растворителя (на долю растворенных веществ, обладающих биоцидными свойствами).

Технический результат достигается тем, что при температуре от 10 до 40°С смешивают водный раствор цистеина с водным раствором нитрата серебра, так что конечные концентрации (в смеси) составили цистеина от 1·10-3 М до 6·10-2 М и нитрата серебра от 3·10-3 М до 1·10-1 М, и оставляют стоять в защищенном от света месте в течение 15-24 часов.

Исследованием уровня техники установлено, что способов получения супрамолекулярного биоцидного геля на основе цистеина и нитрата серебра не обнаруживается.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Тиксотропный биоцидный гель на основе цистеина и нитрата серебра относится к классу сетчатых супрамолекулярных полимеров, имеющих фрактальную структуру (Б.Мандельброт. Фрактальная геометрия природы. М.: Мир, 2002; Е.Федер. Фракталы. М.: Мир, 1991; В.Смирнов. Физика фрактальных кластеров. М.: Наука, 1991).

Цистеин - это серосодержащая аминокислота, которая входит в состав кератина - основного белка ногтей, кожи и волос. Цистеин помогает обезвреживать токсические вещества и защищает организм от действия радиации. Это один из самых мощных антиоксидантов. Цистеин ускоряет выздоровление после операций, ожогов, связывает тяжелые металлы и растворимое железо, играет важную роль в активизации лейкоцитов и лимфоцитов.

В водном растворе цистеин взаимодействует с ионами серебра с образованием меркаптида серебра по SH-группе (тиольной группе). Это подтверждается данными ИК-спектроскопии: в ИК-спектре дегидратированного геля отсутствует полоса поглощения валентных колебаний тиольной группы.

В избытке ионов серебра меркаптид серебра образует ассоциаты с помощью слабых водородных, координационных связей и вандерваальсовских взамодействий. Эти ассоциаты имеют несколько активных точек дальнейшего роста: на Фиг.1 представлен результат ассоциации двух молекул меркаптида серебра и иона серебра с образованием димерной частицы (а), фрактального кластера (б) и слияния кластеров (в).

Зародышевые димерные частицы продолжают свой рост с образованием полимолекулярных ассоциатов со средним размером от нескольких нанометров до десятков и сотен нанометров, в зависимости от концентрации растворенного вещества. Это установлено с помощью метода динамического светорассеяния. Измерение интенсивности динамического светорассеяния осуществляли с помощью спектрометра, включающего AL-Sp 81 гониметр и цифровой фотонный коррелятор-структуатор ALV-5000 с углом рассеяния 90°. В качестве источника света использовали He-Ne лазер (длина волны 632,8 нм) мощностью 36 мВт. Фиг.2 иллюстрирует развитие кластерообразования во времени для раствора цистеина концентрации 1,31·10-3 М и нитрата серебра концентрации 3,73·10-3 М. С течением времени происходит увеличение среднего гидродинамического радиуса частиц (для а - 14 мин он равен 29,8 нм, б - 56 мин - 39,1 нм, в - 124 мин - 51,3 нм). Средний гидродинамический радиус частиц рассчитывается из уравнения Эйнштейна-Стокса на основании графика зависимости распределения коэффициента диффузии W(D) от коэффициента диффузии.

На Фиг.3 представлены данные динамического светорассеяния, которые свидетельствуют о наличии в гелеобразующей системе фрактальных кластеров различных размеров, в частности на графике а - 52,4; 1235 нм (концентрации цистеина 3,12·10-3 М, нитрата серебра 8,85·10-3 М), на графике б - 15,0; 87,5; 454,9; 1731 нм (концентрации цистеина 7,6·10-3 М, нитрата серебра 21,0·10-3 М). С увеличением концентрации компонентов увеличивается средний гидродинамический радиус частиц и число групп кластеров. Растущие фрактальные кластеры взаимодействуют между собой по поверхности раздела с образованием пространственной гель-сетки, что иллюстрируется электронно-микроскопическими снимками, полученными на пропускающем электронном микроскопе «Zeiss ЕМ 10» Фиг.4, концентрации цистеина 1,32·10-3 М, нитрата серебра 3,72·10-3 М, подтверждающие образование сетки фрактальных кластеров при формировании структуры геля.

На Фиг.5 представлены электронно-микроскопические снимки высушенных гелей, полученные на сканирующем электронном микроскопе "DSM 962", Zeiss, концентрации цистеина 1,32·10-3 М, нитрата серебра 3,72·10-3 М, иллюстрирующие самоорганизацию твердой фазы при дегидратации супрамолекулярного геля: образуются характерные дендритные и палочкообразные структуры.

Такого рода гель может служить матрицей, например, для липосом - концентрических сфер из двойных фосфолипидных слоев с включенными в них биологически активными веществами.

Изменение упругих свойств системы с течением времени можно проиллюстрировать с помощью фиг.6, на которой показана способность геля (концентрации цистеина 1,32·10-3 М, нитрата серебра 3,72·10-3 М) к деформации при переворачивании цилиндра с гелем на 180°. Видно что с увеличением времени гелеобразования (а - исходная система, в - через 24 часа, с - через 48 часов) гель теряет способность к текучести.

Основное преимущество полученного геля - способность к гелеобразованию при очень низких концентрациях в водном растворе. Биоцидные свойства геля определяются внедрением в его каркас ионов серебра.

Гель-система на основе цистеина и нитрата серебра построена из физиологически активных компонентов, не токсична, фазовоустойчива и является перспективной матрицей для включения биологически активных веществ.

Гель совместим с другими супрамолекулярными системами: липосомами, мицеллами, и это открывает возможности для конструирования новых биоматериалов.

Получение композиций с гелем нового типа, имеющим принципиально другую структуру по сравнению с полимерными гелями, позволяет резко уменьшить содержание в композиции гелеобразующих веществ.

Развитие ассортимента фармакологических препаратов, предохранение их от разрушения под воздействием специфических ферментов, содержащихся в организме человека, осуществляется по пути иммобилизации биологически активных веществ на каком-либо носителе - матрице.

Самый старый способ иммобилизации - физическая адсорбция. Ее преимущество - простота методики, доступность и дешевизна сорбентов. Недостаток - десорбция, протекающая при изменении таких характеристик физиологических жидкостей, как рН, ионная сила, температура.

Недостатков адсорбции удается избежать при иммобилизации биологически активных веществ в поры геля. В качестве гелей-матриц используют несшитые полимерные гели, образуемые полисахаридами: крахмалом, агар-агаром, альгинатом, каррагинаном - при охлаждении их горячих растворов. В последнее время получили распространение сшитые полимерные гели - поливиниловый спирт и поливинилпирролидон. Способ получения последних заключается в облучении водных растворов полимеров средней молекулярной массы ультрафиолетовым светом, гамма-излучением или потоком электронов. При этом образуются свободные радикалы, частично сшивающие полимерные цепи. Широкое распространение получили полиакриламидные гели, сшивающий агент - метилен-бис-акриламид.

Недостатками композиций на основе полимерных гелей являются гелеобразование при высоких концентрациях полимера и тот факт, что гель является балластным веществом, функции которого исчерпываются свойством быть матрицей. Длительное хранение композиций невозможно без добавления бактерицидных веществ.

Способы получения сшитых полимерных гелей сложны и требуют дорогостоящего оборудования.

Заявляемый способ имеет простое аппаратурное оформление и принципиально отличается от существующих методом подхода к формированию гель-матрицы для биологически активных веществ.

Способ осуществляется следующим образом.

При температуре от 10 до 40°С смешивают водный раствор цистеина с водным раствором нитрата серебра, так что конечные концентрации (в смеси) составили цистеина от 1·10-3 М до 6·10-2 М и нитрата серебра от 3·10-3 М до 1·10-1 М, и оставляют стоять в термостате при температуре от 10 до 40°С в течение 15-24 часов.

Изменяя соотношение компонентов, получают фрактальные кластеры желаемого объема, способные к избирательной иммобилизации биологически активных веществ.

Пример выполнения способа.

При температуре 25°С смешивают водный раствор цистеина с водным раствором нитрата серебра, так что конечные концентрации (в смеси) составили цистеина от 1,31·10-3 М и нитрата серебра от 3,73·10-3 М, и оставляют стоять в термостате при температуре 25°С в течение 24 часов.

Фиг.7 иллюстрирует способность геля к иммобилизации липосом (1 - липосомы в геле, 2 - липосомы в воде): в присутствии геля водная дисперсия липосом стабилизируется. По изменению оптической плотности водной дисперсии липосом в зависимости от времени хранения можно судить о ее устойчивости. В присутствии геля отмечается меньшее изменение оптической плотности со временем по сравнению с нестабилизированным раствором, следовательно, эта система фазоустойчива.

Выбор носителя и метода иммобилизации для каждого конкретного случая в настоящее время носит только эмпирический характер и может контролироваться только экспериментально.

Создав банк данных по структуре и объему фрактальных кластеров для супрамолекулярного геля на основе цистеина и нитрата серебра в зависимости от условий его получения, можно прогнозировать возможность иммобилизации на нем как на матрице того или иного вещества.

Полученный супрамолекулярный гель не подвергается изменениям в течение двух лет при хранении при комнатной температуре.

Разрушителями геля могут быть кислоты - рН меньше 4, щелочи - рН больше 9, ацетонитрил, изопропиловый спирт, соли переходных металлов, взятые в количествах, превышающих содержание нитрата серебра. Однако с учетом того, что в организме человека такие разрушительные факторы практически не имеют места, супрамолекулярный гель на основе цистеина и нитрата серебра можно считать очень устойчивой матрицей для иммобилизации. Одним из основных требований, предъявляемых к иммобилизуемому биологически активному веществу, является его химическая индифферентность по отношению к супрамолекулярном гелю, то есть иммобилизат не должен искажать его химическую структуру.

Заявляемый способ соответствует критерию "Промышленная применимость", так как не требует специального оборудования и может быть внедрен на существующих фармацевтических предприятиях соответствующего профиля, а необходимые препараты выпускаются отечественной промышленностью.

Похожие патенты RU2317305C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОМПОЗИЦИЙ ЛИПОСОМ С ГЕЛЯМИ, СИНТЕЗИРОВАННЫМИ ИЗ ЦИСТЕИНА И НИТРАТА СЕРЕБРА 2006
  • Овчинников Максим Максимович
  • Пахомов Павел Михайлович
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
RU2310663C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДНОЙ СИСТЕМЫ РАЗВЕТВЛЕННЫХ ФРАКТАЛЬНЫХ КЛАСТЕРОВ НА ОСНОВЕ L-ЦИСТЕИНА 2009
  • Овчинников Максим Максимович
  • Пахомов Павел Михайлович
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
RU2423384C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НИЗКОКОНЦЕНТРИРОВАННЫХ ГЕЛЕЙ НА ОСНОВЕ N-АЦЕТИЛ-L-ЦИСТЕИНА И НИТРАТА СЕРЕБРА 2013
  • Овчинников Максим Максимович
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
  • Пахомов Павел Михайлович
RU2530572C1
СПОСОБ ИЗМЕНЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОЙ ВЯЗКОСТИ НИЗКОКОНЦЕНТРИРОВАННЫХ ГЕЛЕЙ НА ОСНОВЕ L-ЦИСТЕИНА И НИТРАТА СЕРЕБРА 2009
  • Овчинников Максим Максимович
  • Пахомов Павел Михайлович
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
RU2432937C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУПРАМОЛЕКУЛЯРНОГО ГИДРОГЕЛЯ 2016
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
  • Овчинников Максим Максимович
  • Адамян Анна Нориковна
  • Пахомов Павел Михайлович
  • Межеумов Игорь Николаевич
RU2641111C1
КАТИОННЫЙ АНТИСЕПТИК НА ОСНОВЕ КОМПОЗИЦИЙ L-ЦИСТЕИН-СЕРЕБРЯНОГО РАСТВОРА И ПИЩЕВОГО ХИТОЗАНА 2014
  • Овчинников Максим Максимович
  • Червинец Вячеслав Михайлович
  • Червинец Юлия Вячеславовна
  • Михайлова Елена Сергеевна
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
  • Пахомов Павел Михайлович
RU2562113C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НАНОЧАСТИЦ СЕРЕБРА 2013
  • Баранова Ольга Алексеевна
  • Пахомов Павел Михайлович
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
RU2526390C1
Способ получения тиксотропных супрамолекулярных гидрогелей заданной прочности 2017
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
  • Овчинников Максим Максимович
  • Лагусева Вера Сергеевна
  • Пахомов Павел Михайлович
RU2676473C1
Способ получения гелей для медицинских целей на основе L-цистеина, нитрата серебра и поливинилового спирта 2019
  • Вишневецкий Дмитрий Викторович
  • Иванова Александра Ивановна
  • Межеумов Игорь Николаевич
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
  • Пахомов Павел Михайлович
RU2709181C1
Способ получения супрамолекулярного геля, содержащего наночастицы серебра 2021
  • Вишневецкий Дмитрий Викторович
  • Потапенкова Татьяна Викторовна
  • Аверкин Дмитрий Вадимович
  • Адамян Анна Нориковна
  • Межеумов Игорь Николаевич
  • Хижняк Светлана Дмитриевна
  • Пахомов Павел Михайлович
RU2761210C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 317 305 C2

Реферат патента 2008 года СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУПРАМОЛЕКУЛЯРНОГО ГЕЛЯ

Изобретение относится к области коллоидной химии. Смешивают водный раствор цистеина с водным раствором нитрата серебра, так что конечные концентрации (в смеси) составляют от 1·10-3 М до 6·10-2 М цистеина и от 3·10-3 М до 1·10-1 М нитрата серебра, и оставляют стоять в термостате при температуре 10-40°С в течение 15-24 часов. Данное изобретение позволяет получать гель, используемый в качестве носителя для пептидов и протеинов, который обладает биоцидными свойствами и не изменяется в течение двух лет при хранении при комнатной температуре. 7 ил.

Формула изобретения RU 2 317 305 C2

Способ получения супрамолекулярного геля, заключающийся в том, что при температуре от 10 до 40°С смешивают водный раствор цистеина с водным раствором нитрата серебра, так что конечные концентрации (в смеси) составили цистеина от 1·10-3 до 6·10-2 М и нитрата серебра от 3·10-3 до 1·10-1 М, и оставляют стоять в термостате при температуре 10-40°С в течение 15-24 ч.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2008 года RU2317305C2

JP 7316009 А, 05.12.1995
JP 10274631 А, 13.10.1998
US 6348212 А, 19.02.2002
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕЛЯ 1989
  • Салганик Р.И.
  • Гончар А.М.
  • Дерибас В.И.
  • Троицкий А.В.
  • Богданова Л.А.
RU2026349C1
ГЕЛЬ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ СУСТАВНОГО ХРЯЩА И МЕЖПОЗВОНОЧНЫХ ДИСКОВ "СТОПАРТРОЗ" И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 2002
  • Шевцов В.И.
  • Лунева С.Н.
  • Гнеушев В.Г.
  • Канджа С.Н.
RU2241473C2

RU 2 317 305 C2

Авторы

Овчинников Максим Максимович

Пахомов Павел Михайлович

Хижняк Светлана Дмитриевна

Даты

2008-02-20Публикация

2006-03-29Подача