ПРЕПАРАТ, СОДЕРЖАЩИЙ ИММУНОГЛОБУЛИН ПРОТИВ БОЛИВИЙСКОЙ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ ИЗ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЛОШАДЕЙ, РАСТВОР ДЛЯ ВНУТРИМЫШЕЧНОГО ВВЕДЕНИЯ Российский патент 2009 года по МПК A61K39/395 

Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарствам и медикаментам (к иммуноглобулинам) для терапевтических целей, и может быть использовано для экстренной профилактики Боливийской геморрагической лихорадки (БГЛ) у людей.

БГЛ - зоонозная природно-очаговая инфекция, возбудитель которой, вирус Мачупо, относится к семейству Arenaviridae и вызывает у людей острое лихорадочное заболевание, протекающее с выраженным геморрагическим синдромом и высокой (до 70%) летальностью [1, 2].

Специфические средства профилактики и лечения БГЛ в настоящее время в нашей стране отсутствуют. Лечение заболевших симптоматическое.

Из данных зарубежных источников известно, что при введении обезьянам иммунной сыворотки реконвалесцентов после перенесенной БГЛ с титром ВНА 1:2048 в количестве, равном 10 и 3 эквивалентным единицам плазмы для человека (200-250 мл), через 2 часа после подкожного заражения макаков вирусом Мачупо в дозе 10⁵ БОЕ заболевание не развивается. При лечебном назначении препарата развивается очень легкое заболевание продолжительностью до 2-х суток [3].

Введение донорского иммуноглобулина на 7-9 сутки от начала заболевания оказалось неэффективным [3].

Существенными недостатками иммунной плазмы (сыворотки) реконвалесцентов, являющейся сырьем для выделения донорского иммуноглобулина, являются возможное наличие в ней вирусных контаминантов (гепатитов В и С, ВИЧ и др.), опасных для человека и низкое содержание вируснейтрализующих антител.

Кроме того, Российская Федерация (РФ) не располагает сывороткой реконвалесцентов, так как БГЛ не является эндемичной для нашей страны, поэтому получение донорского иммуноглобулина в РФ невозможно.

Выходом из сложившейся ситуации может стать получение высокоочищенных гетерологичных иммуноглобулинов. Разрабатываемый препарат аналогов в РФ не имеет. В практике сывороточного дела традиционно используемым продуцентом для получения иммунных сывороток ко многим возбудителям является лошадь [4].

Целью данного изобретения является разработка препарата, содержащего иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствора для внутримышечного введения, предназначенного для экстренной профилактики БГЛ у людей.

Сущность изобретения заключается в способности вируса Мачупо индуцировать у лошадей выработку специфических протективных антител и использовании нативной гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, в качестве сырья для получения специфического препарата. Разработанный препарат, содержащий иммуноглобулин против БГЛ, представляет собой 9,0-11,0%-ный раствор иммуноглобулинов гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, обладает вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо и оказывает выраженное профилактическое действие при БГЛ.

Технический результат изобретения заключается в том, что разработанный препарат, обладающий титром вируснейтрализующих антител не менее 1:1024, обеспечивает специфическую экстренную профилактику БГЛ у экспериментальных животных и рекомендован для экстренной профилактики БГЛ у людей.

Разработанный препарат, содержащий иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствор для внутримышечного введения является новым, поскольку аналогичный гетерологичный препарат в мировой практике отсутствует.

Пример выполнения

Сырьем для получения препарата иммуноглобулина является гипериммунная лошадиная сыворотка, содержащая антитела к вирусу Мачупо. Выделение иммуноглобулина из сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, проводят методом спиртового фракционирования на холоду по Кону [5].

Препарат, содержащий иммуноглобулин против БГЛ из сыворотки крови лошадей, представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость, бесцветную или с желтоватым оттенком, иногда с наличием незначительного, легко разбивающегося при встряхивании осадка, с величиной рН от 7,0 до 7,5 и является 9,0-11,0%-ным раствором иммуноглобулинов сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо. Содержание гамма-глобулиновой фракции в нем составляет не менее 85,0% от количества общего белка. В качестве неспецифических примесей в препарате присутствуют альбумин, α- и β-глобулины в количестве не более 15,0% и остаточный этиловый спирт, содержание которого не более 4,5%. Препарат обладает вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо, характеризующейся титром вируснейтрализующих антител не менее 1:1024.

Препарат стерильный, апирогенный и нетоксичный. При внутримышечном введении он оказывает выраженное профилактическое действие при БГЛ.

Было получено 10 серий препарата иммуноглобулина против БГЛ из сыворотки крови лошадей.

По физико-химическим и иммунобиологическим показателям препарат иммуноглобулина лошадиного против БГЛ соответствует показателям качества коммерческих гетерологичных иммуноглобулинов, выделенных из сыворотки крови лошадей [6, 7].

Характеристика препаратов представлена в таблице.

Примером наилучшего использования препарата, содержащего иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствора для внутримышечного введения может являться его применение в качестве средства экстренной профилактики БГЛ у людей.

Таблица
Характеристика гетерологичных препаратов иммуноглобулина, полученных из сыворотки крови лошадейНаименование показателя качества, единица измеренияВеличина показателя для препаратов иммуноглобулинаантирабического [6, 7]против БГЛ (данные по 10 сериям)ОписаниеПрозрачная или слабо опалесцирующая жидкость, бесцветной или слабо желтой окраски.Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость, бесцветная или с желтоватым оттенком. Допускается наличие незначительного осадка, легко разбивающегося при встряхивании.Концентрация водородных ионов, ед. рНОт 6,6 до 7,4От 7,0 до 7,5Количество общего белка, процентОт 9,0 до 11,0От 9,1 до 10,7Содержание гамма-глобулиновой фракции, процентНе менее 80,0От 85,0 до 90,3Содержание остаточного этилового спирта, процентНе более 4,5От 4,0 до 4,5ПирогенностьАпирогенныйАпирогенныйТоксичностьНетоксичныйНетоксичныйСтерильностьСтерильныйСтерильный

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

1. Peters C.J., Buchmeier M., Rollin P.E., Ksiazek T.G. Arenaviruses. In: Fields. B.N. // Fields Virology. - 1996a. - P.1521-1551.

2. de Manzione N., Salas R.A., Paredes H., Godoy О., et al. Venezuelan hemorrhagic fever: clinical and epidemiological studies of 165 cases. // Clin. Infect. Dis. - 1998. - Vol.26. - P.308-313.

3. Eddy J.A. Prophylaxis and treatment of Bolivian hemorrhagic fever with immune serum or purified γ-globulin. // 1973. Usamriied planning sessions 18-19 October 1973. USA Medical Research Institute of Infection Disease, Fort Detrick, Frederick, Maryland. - P.19-24.

4. Бургасов П.Н. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. - М., 1978.

5. Cohn E.J., Strong L., Hughes W.L. et al. Preparation and properties of serum and plasma proteins // J. Amer. Chem. Soc. - 1946. - Vol.68, №3. - P.459-475.

6. Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади жидкий: ФСП 42-0020-4413-03 / Минздрав РФ.

7. Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади жидкий, раствор для инъекций 150 МЕ/мл: НД 42-13071-04 / Минздрав Украины.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарствам и медикаментам (к иммуноглобулинам) для терапевтических целей, и может быть использовано для экстренной профилактики Боливийской геморрагической лихорадки (БГЛ) у людей. Сущность изобретения включает 9,0-11,0% раствор иммуноглобулина для внутримышечного введения, обладающий вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо, полученный из гипериммунной сыворотки лошадей, содержащий гамма-глобулиновую фракцию в количестве не менее 85,0%, а в качестве неспецифических примесей- альбумин, альфа и бета-глобулиновые фракции в количестве не более 15,0% остаточный этиловый спирт в количестве не более 4,5%, имеющий рН от 7,0 до 7,5 и титр вируснейтрализующих антител не менее 1:1024 лихорадки, препарат содержит альбумин, α- и β-глобулиновые фракции в количестве не более 15,0% и остаточный этиловый спирт в количестве не более 4,5%. Преимущество изобретения заключается в разработке препарата для экстренной профилактики Боливийской геморрагической лихорадки. 1 табл.

Препарат, содержащий иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки (БГЛ) из сыворотки крови лошадей, раствор для внутримышечного введения, обладающий вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо и используемый для экстренной профилактики БГЛ у людей, представляющий собой 9,0-11,0%-ный раствор иммуноглобулинов гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, содержащий γ-глобулиновую фракцию в количестве не менее 85,0% от количества общего белка, в качестве неспецифических примесей содержащий альбумин, α- и β-глобулиновые фракции в количестве не более 15,0% и остаточный этиловый спирт в количестве не более 4,5%, имеющий величину рН от 7,0 до 7,5 и характеризующийся титром вируснейтрализующих антител не менее 1:1024.