СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДИСПЕПСИИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ Российский патент 2009 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к гематологии.

Аналогов предлагаемого способа лечения диспепсии с нормализацией повышенной чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации у новорожденных телят и поросят не существует.

В литературе имеются рекомендации по применению «Фосфопага»: дезинфекции помещений, орошению корнеплодов с целью их сохранения при хранении, обработки кожных покровов с целью профилактики и лечения кожных инфекций у животных (Ефимов К.М., Гембицкий П.А., Снежко А.Г. Полигуанидины - класс малотоксических дезсредств пролонгированного действия. // Дезинфекционное дело, 2000. - №4. - с.32-36, www.ruscience.newmail.ru/journals/jmed.htm). Однако никогда ранее «Фосфопаг» не применялся у новорожденных телят и поросят с целью лечения диспепсии с нормализацией имеющейся у них повышенной чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации аденозиндифосфату (АДФ), коллагену, тромбину, адреналину и сочетаниям индукторов - АДФ + адреналин, АДФ + коллаген, адреналин + коллаген, способной приводить к развитию гиперагрегации и микротромбированию сосудов, обуславливая ухудшение трофики тканей, задержку роста и развития животных.

Целью изобретения является нормализация повышенной чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации у новорожденных телят и поросят с диспепсией.

Сущность заявляемого способа заключается в том, что после взятия крови, ее стабилизации цитратом натрия 3,8%, разделения крови на плазму и эритроциты путем центрифугирования с получением богатой тромбоцитами плазмы (БТП) на предметных стеклах проводят тесты на агрегацию тромбоцитов с несколькими индукторами и их сочетаниями. Визуальная оценка агрегации тромбоцитов в этих условиях позволяет с небольшим объемом (0,02 мл) плазмы и малым объемом индукторов оценивать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации по развитию агрегационного процесса. При повышении их чувствительности к индукторам, регистрируемой по снижению необходимой для агрегации дозы индуктора при изолированном его применении или в двойном сочетании, возможно проводить ее коррекцию с помощью десятидневного применения «Фосфопага».

Заявляемый способ осуществляется следующим образом. После взятия у теленка или поросенка 9 мл крови в цитрат натрия 3,8% в соотношении 9:1 ее центрифугируют в течение 5 мин при 1000 об/мин для получения БТП. Часть плазмы отбирают, а оставшуюся центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин, получая бедную тромбоцитами плазму (БеТП). БТП стандартизируют по числу тромбоцитов путем разбавления исходной БТП аутологичным образцом БеТП (до 200·10⁹/л).

Из получившегося объема стандартизированной плазмы отбирают из расчета по 0,02 мл плазмы на каждый индуктор и исследуемую комбинацию индукторов. Оставшийся объем плазмы можно использовать для других гематологических и биохимических исследований.

Из отобранного объема стандартизированной плазмы на предметное стекло наносят 0,02 мл плазмы и разными пипетками растворы одного или двух индукторов (фиг.1 и 2) общим объемом, равным объему плазмы. При применении одного индуктора его объем составляет 0,02 мл, при использовании двух по 0,01 мл.

В качестве агонистов возможно использование АДФ, коллагена, тромбина, адреналина и сочетаний АДФ + адреналин, АДФ + коллаген, адреналин + коллаген, необходимые дозы которых в этом случае были ниже, чем при изолированном их использовании. Дозы индукторов, необходимые для агрегации у телят с диспепсией и минимальные взаимопотенциирующие дозы индукторов у них ниже стандартных (табл.1 и 2), способных вызывать агрегацию тромбоцитов у здоровых животных. Стеклянной палочкой смешивают плазму с индукторами и включают секундомер. Смесь перемешивают так, чтобы жидкость занимала окружность диаметром около 2 см (фиг.3). Покачивая стекло круговыми движениями в проходящем свете осветителя, на черном фоне следят через лупу за возникновением агрегатов. При появлении отчетливых агрегатов, просветлении раствора и прилипании части агрегатов к стеклу секундомер отключают, фиксируя время агрегации тромбоцитов.

Из представленного материала следует, что по сравнению со стимуляцией одним индуктором у здоровых телят и поросят при применении у телят и поросят с диспепсией и особенно двух индукторов требуется гораздо меньшая концентрация агонистов для развития агрегации, что вероятно связано с задействованием нескольких механизмов активации. Необходимо отметить, что исследование агрегационной способности кровяных пластинок с двумя индукторами моделирует события, происходящие в кровотоке в области повреждения сосуда и инициации процесса гемостаза. Так, у новорожденных телят и поросят с диспепсией найденные закономерности выражены еще больше, чем у здоровых животных из-за повышения чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации с более низкой концентрацией индукторов, необходимой для развития агрегации кровяных пластинок.

Таблица 1
Дозы индукторов, вызывающие агрегацию тромбоцитов при их изолированном применении Индукторы АДФ, М Адреналин, М Коллаген, разведение основной суспензии Тромбин, ед./мл Стандартные дозы индукторов у здоровых телят(n=267) и поросят (n=231) 0,5×10^-4 5,0×10^-6 1:2 0,125 Минимальные дозы индукторов у новорожденных телят (n=153)и поросят n=(172) с диспепсией 5,0×10^-5-8,0×10^-6 3,0×10^-6-7,0×10^-7 1:2,3-1:2,8 0,112-0,120

Таблица 2
Минимальные взаимопотенцирующие концентрации индукторов агрегации у новорожденных телят и поросят при двойном их сочетании с любым агонистом Категория обследованных АДФ, М Адреналин, М Коллаген, разведение основной суспензии Тромбин, ед./мл Здоровые новорожденные телята (n=267) и поросята (n=231) 5,0×10^-6 5,0×10^-7 1:3 0,110 Новорожденные телята (n=153)и поросята (n=172) больные диспепсией 10^-7-10^-8 10^-7-10^-8 1:4-1:5 0,100-0,90

Диагносцировать повышенную чувствительность к индукторам агрегации у новорожденных телят и поросят возможно при развитии агрегации тромбоцитов при применении изолированных индукторов в дозах для АДФ ниже 0,5×10^-4 М, адреналин ниже 5,0×10^-6 М, коллаген ниже 1:2 разведения основной суспензии и тромбин ниже 0,125 ед./мл, а при их двойном сочетании для АДФ ниже 5,0·10^-6 M, адреналин ниже 5,0·10^-7 М, коллаген ниже разведения основой суспензии - 1:3, тромбин ниже 0,110 ед./мл. У новорожденных телят и поросят с диспепсией минимальные дозы индукторов, способные вызвать агрегацию тромбоцитов, в случае использования одного агониста или двух одновременно находятся в границах, представленных в табл.1 и 2.

При выявлении повышенной чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации новорожденным телятам и поросятам с диспепсией необходимо назначать раствор «Фосфопага» на 10 дней. Способ лечения диспепсии и тромбоцитопатии у новорожденных телят и поросят отличается тем, что для купирования диспепсии и нормализации повышенной чувствительности к индукторам агрегации новорожденным телятам и поросятам при начале лечения в первый день диспепсии назначается 0,005% раствор «Фосфопага» 100,0 мл в день на все 10 дней, включая его в схему выпаивания. При начале лечения во второй день диспепсии новорожденному теленку и поросенку дается раствор «Фосфопага» 0,01% 100,0 мл на все 10 дней лечения. При начале лечения в третий день диспепсии новорожденному теленку и поросенку дается раствор «Фосфопага» 0,015% по 100,0 мл на все 10 дней лечения.

Необходимые для лечения растворы готовятся следующим образом. 10 литров раствора 0,005% «Фосфопага» готовятся путем разведения 0,5 г сухого вещества «Фосфопаг» в 10 литрах дистиллированной воды. 10 литров раствора 0,01% «Фосфопага» готовятся путем разведения 1 г сухого вещества «Фосфопаг» в 10 литрах дистиллированной воды. 10 литров раствора 0,015% «Фосфопага» готовятся путем растворения 1,5 г сухого вещества «Фосфопаг» в 10 литрах дистиллированной воды.

Способ позволяет нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации у новорожденных телят и поросят с диспепсией в течение 10-дневного периода лечения, переводя ее на уровень, характерный для здоровых телят или поросят соответственно. При соблюдении в последующем режима рационального питания возможно исключить повышение чувствительности тромбоцитов телят и поросят к индукторам агрегации, что позволит существенно снизить риск тромботических осложнений, способствуя нормальному росту и развитию телят и поросят.

Пример 1. Новорожденный теленок №114, 3 сутки жизни с диспепсией, 1 день обследован в условиях телятника. У теленка была взята и исследована кровь с оценкой минимальной дозы индукторов, вызывающей агрегацию тромбоцитов с рядом изолированных индукторов и их сочетаний. Было выявлено снижение необходимых для развития агрегации тромбоцитов доз изолированных индукторов (АДФ 5,0×10^-5 М, коллаген 1:2,4 разведения основной суспензии, тромбин 0,120 ед./мл, адреналин 3,0×10^-6 М) и при их двойном сочетании (АДФ - 10^-7 М, коллаген 1:4 разведения основной суспензии, адреналин - 10^-7 М, тромбин 0,100 ед./мл), что указывало на повышение чувствительности тромбоцитов теленка к индукторам агрегации.

Теленку назначен раствор «Фосфопага» 0,005% 100,0 мл на 10 суток, включая его в схему выпаивания. Это позволило через 10 суток полностью купировать диспепсию и нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации. При использовании изолированных индукторов и их сочетаний необходимая для агрегации их концентрация соответствовала норме (АДФ 0,5×10^-4 М, коллаген 1:2 разведения основной суспензии, тромбин 0,125 ед./мл, адреналин 5,0×10^-6 М), при двойном сочетании - АДФ 5,0×10^-6 М, коллаген 1:3 разведения основной суспензии, адреналин 5,0×10^-7 M, тромбин 0,110 ед./мл, что исключило риск развития тромботических нарушений.

В дальнейшем данного теленка было рекомендовано содержать на рациональном режиме питания, что профилактировало рецидив усиления чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации и риск возникновения тромбоцитарных нарушений.

Пример 2. Новорожденный теленок №127, 4 сутки жизни с диспепсией, 2 день обследован в условиях телятника. У теленка была взята и исследована кровь с оценкой минимальной дозы индукторов, вызывающей агрегацию тромбоцитов с рядом изолированных индукторов и их сочетаний. Было выявлено снижение необходимых для развития агрегации тромбоцитов доз изолированных индукторов - АДФ 10^-5 М, коллаген 1:2,8 разведения основной суспензии, тромбин 0,115 ед./мл, адреналин 10^-6 М и при их двойном сочетании - АДФ - 5,0×10^-8 М, коллаген 1:4 разведения основной суспензии, адреналин -5,0×10^-8 М, тромбин 0,090 ед./мл, что указывало на повышение чувствительности тромбоцитов теленка к индукторам агрегации.

Теленку назначен раствор «Фосфопага» 0,01% 100,0 мл на 10 суток, включая его в схему выпаивания. Это позволило через 10 суток полностью купировать диспепсию и нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации. При использовании изолированных индукторов и их сочетаний необходимая для агрегации их концентрация соответствовала норме (АДФ 0,5×10^-4 М, коллаген 1:2 разведения основной суспензии, тромбин 0,125 ед./мл, адреналин 5,0×10^-6 M), при двойном сочетании (АДФ 5,0×10^-6 M, коллаген 1:3 разведения основной суспензии, адреналин 5,0×10^-7 M, тромбин 0,110 ед./мл), что исключило риск развития тромботических нарушений.

В дальнейшем данного теленка было рекомендовано содержать на рациональном режиме питания, что профилактировало рецидив усиления чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации и риск возникновения тромбоцитарных нарушений.

Пример 3. Новорожденный теленок №154, 6 сутки жизни с диспепсией, 3 день обследован в условиях телятника. У теленка была взята и исследована кровь с оценкой минимальной дозы индукторов, вызывающей агрегацию тромбоцитов с рядом изолированных индукторов и их сочетаний. Было выявлено снижение необходимых для развития агрегации тромбоцитов доз изолированных индукторов (АДФ 8,0×10^-6 M, коллаген 1:2,8 разведения основной суспензии, тромбин 0,112 ед./мл, адреналин 7,0×10^-7 М) при их двойном сочетании (АДФ - 10^-8 М, коллаген 1:5 разведения основной суспензии, адреналин - 10^-8 М, тромбин 0,090 ед./мл), что указывало на повышение чувствительности тромбоцитов теленка к индукторам агрегации.

Теленку назначен раствор «Фосфопага» 0,015% 100,0 мл на 10 суток, включая его в схему выпаивания. Это позволило через 10 суток полностью купировать диспепсию и нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации. При использовании изолированных индукторов и их сочетаний необходимая для агрегации их концентрация соответствовала норме - АДФ 0,5×10^-4 М, коллаген 1:2 разведения основной суспензии, тромбин 0,125 ед./мл, адреналин 5,0×10^-6 M, при двойном сочетании - АДФ 5,0×10^-6 M, коллаген 1:3 разведения основной суспензии, адреналин 5,0×10^-7 M, тромбин 0,110 ед./мл, что исключило риск развития тромботических нарушений.

В дальнейшем данного теленка было рекомендовано содержать на рациональном режиме питания, что профилактировало рецидив усиления чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации и риск возникновения тромбоцитарных нарушений.

Пример 4. Новорожденный поросенок №22, 4 сутки жизни с диспепсией, 1 день обследован в условиях свинарника. У поросенка была взята и исследована кровь с оценкой минимальной дозы индукторов, вызывающей агрегацию тромбоцитов с рядом изолированных индукторов и их сочетаний. Было выявлено снижение необходимых для развития агрегации тромбоцитов доз изолированных индукторов (АДФ 5,0×10^-5 M, коллаген 1:2,4 разведения основной суспензии, тромбин 0,120 ед./мл, адреналин 3,0×10^-6 М) и при их двойном сочетании (АДФ - 10^-7 М, коллаген 1:4 разведения основной суспензии, адреналин - 10^-7 М, тромбин 0,100 ед./мл), что указывало на повышение чувствительности тромбоцитов поросенка к индукторам агрегации.

Поросенку назначен раствор «Фосфопага» 0,005% 100,0 мл на 10 суток, включая его в схему выпаивания. Это позволило через 10 суток полностью купировать диспепсию и нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации. При использовании изолированных индукторов и их сочетаний необходимая для агрегации их концентрация соответствовала норме (АДФ 0,5×10^-4 М, коллаген 1:2 разведения основной суспензии, тромбин 0,125 ед./мл, адреналин 5,0×10^-6 M), при двойном сочетании - АДФ 5,0×10^-6 M, коллаген 1:3 разведения основной суспензии, адреналин 5,0×10^-7 М, тромбин 0,110 ед./мл, что исключило риск развития тромботических нарушений.

В дальнейшем данного поросенка было рекомендовано содержать на рациональном режиме питания, что профилактировало рецидив усиления чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации и риск возникновения тромбоцитарных нарушений.

Пример 5. Новорожденный поросенок №34, 3 сутки жизни с диспепсией, 2 день обследован в условиях свинарника. У поросенка была взята и исследована кровь с оценкой минимальной дозы индукторов, вызывающей агрегацию тромбоцитов с рядом изолированных индукторов и их сочетаний. Было выявлено снижение необходимых для развития агрегации тромбоцитов доз изолированных индукторов - АДФ 10^-5 М, коллаген 1:2,8 разведения основной суспензии, тромбин 0,115 ед./мл, адреналин 10^-6 М и при их двойном сочетании - АДФ - 5,0×10^-8 М, коллаген 1:4 разведения основной суспензии, адреналин - 5,0×10^-8 М, тромбин 0,090 ед./мл, что указывало на повышение чувствительности тромбоцитов поросенка к индукторам агрегации.

Поросенку назначен раствор «Фосфопага» 0,01% 100,0 мл на 10 суток, включая его в схему выпаивания. Это позволило через 10 суток полностью купировать диспепсию и нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации. При использовании изолированных индукторов и их сочетаний необходимая для агрегации их концентрация соответствовала норме (АДФ 0,5×10^-4 M, коллаген 1:2 разведения основной суспензии, тромбин 0,125 ед./мл, адреналин 5×10^-6 М), при двойном сочетании (АДФ 5,0×10^-6 M, коллаген 1:3 разведения основной суспензии, адреналин 5,0×10^-7 M, тромбин 0,110 ед./мл), что исключило риск развития тромботических нарушений.

В дальнейшем данного поросенка было рекомендовано содержать на рациональном режиме питания, что профилактировало рецидив усиления чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации и риск возникновения тромбоцитарных нарушений.

Пример 6. Новорожденный поросенок №64, 5 сутки жизни с диспепсией, 3 день обследован в условиях свинарника. У поросенка была взята и исследована кровь с оценкой минимальной дозы индукторов, вызывающей агрегацию тромбоцитов с рядом изолированных индукторов и их сочетаний. Было выявлено снижение необходимых для развития агрегации тромбоцитов доз изолированных индукторов (АДФ 8,0×10^-6 М, коллаген 1:2,8 разведения основной суспензии, тромбин 0,112 ед./мл, адреналин 7,0×10^-7 М) при их двойном сочетании (АДФ - 10^-8 М, коллаген 1:5 разведения основной суспензии, адреналин - 10^-8 М, тромбин 0,090 ед./мл), что указывало на повышение чувствительности тромбоцитов поросенка к индукторам агрегации.

Поросенку назначен раствор «Фосфопага» 0,015% 100,0 мл на 10 суток, включая его в схему выпаивания. Это позволило через 10 суток полностью купировать диспепсию и нормализовать чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации. При использовании изолированных индукторов и их сочетаний необходимая для агрегации их концентрация соответствовала норме - АДФ 0,5×10^-4 М, коллаген 1:2 разведения основной суспензии, тромбин 0,125 ед./мл, адреналин 5,0×10^-6 M, при двойном сочетании - АДФ 5,0×10^-6 M, коллаген 1:3 разведения основной суспензии, адреналин 5,0×10^-7 M, тромбин 0,110 ед./мл, что исключило риск развития тромботических нарушений.

В дальнейшем данного поросенка было рекомендовано содержать на рациональном режиме питания, что профилактировало рецидив усиления чувствительности тромбоцитов к индукторам агрегации и риск возникновения тромбоцитарных нарушений.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ предусматривает включение в схему выпаивания 100 мл «Фосфопага» на 10 дней с началом лечения на 1-й, 2-й и 3-й день заболевания соответственно. При лечении с 1-го дня заболевания используют 0,005%-ный раствор «Фосфопага» в течение 10 дней. При лечении со 2-го дня заболевания используют 0,01%-ный раствор «Фосфопага» в течение 10 дней. При лечении с 3-го дня заболевания - 0,015%-ный раствор «Фосфопага» соответственно. Изобретение позволяет снизить чувствительность тромбоцитов к индукторам агрегации у новорожденных телят и поросят. 3 ил., 2 табл.

Способ лечения диспепсии у новорожденных телят и поросят путем включения в схему выпаивания 100,0 мл «Фосфопага» на 10 дней при начале лечения в первый день диспепсии в виде 0,005% раствора, во второй день - в виде 0,01% раствора, в третий день - в виде 0,015% раствора.