ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ Российский патент 2009 года по МПК A61K31/427 A61K31/335 A61K31/365 A61K47/40 A61K47/10 A61K9/19 A61K9/08 A61P35/00 

Перекрестные ссылки на родственные заявки

Настоящая заявка претендует, в соответствии с разделом 35 статьи 119 Кодекса Законов США, на приоритет по патентной заявке США с серийным No. 10/683952, поданной 9 октября 2003, и заявке PCT, PCT/US03/032055, поданной 9 октября 2003, каждая из которых во всей своей полноте включена в настоящее описание в виде ссылки.

Область изобретения

Настоящее изобретение связано с композицией и доставкой терапевтически активных веществ. Более конкретно, настоящее изобретение связано с композициями и способами лечения гиперпролиферативных заболеваний, в частности злокачественных опухолей. Изобретение относится к области фармакологии и медицинской химии.

Основы создания изобретения

Класс поликетидов, известных как эпотилоны, появился в качестве потенциальных терапевтических соединений, характер действия которых напоминает таковой у паклитаксела (Bollag, et al. 1995; Service 1996; Winkler and Axelsen 1996; Bollag 1997; Cowden and Paterson 1997). Интерес к эпотилонам и эпотилоновым аналогам возрос в связи с наблюдениями, согласно которым эпотилоны проявляют активность в отношении опухолей, которые приобрели резистентность к паклитакселу (Harris, et al. 1999a), а также в связи с их пониженным потенциалом в отношении возникновения нежелательных побочных эффектов (Muhlradt and Sasse 1997). Среди эпотилонов и эпотилоновых аналогов, изученных в отношении эффективности их терапевтического действия, отмечают эпотилон B 1 (Oza, et al. 2000) и аналоги полусинтетического эпотилона B, BMS-247550 2, известные также как "азаэпотилон B" (Colevas, et al. 2001; Lee, et al. 2001; McDaid, et al. 2002; Yamaguchi, et al. 2002), и BMS-310705 3.

Дезоксиэпотилон B 4, известный также как "эпотилон D", представляет собой другое производное эпотилона, с многообещающими противоопухолевыми свойствами, а именно паклитаксел, терапевтическая эффективность которого изучена (Su, et al. 1997; Chou, et al. 1998a; Chou, et al. 1998b; Harris, et al. 1999b; Chou, et al. 2001; Danishefsky, et al. 2001b; Martin and Thomas 2001; Danishefsky, et al. 2002). Было показано, что это соединение обладает меньшей токсичностью, чем эпотилоны, имеющие 12,13-эпоксиды, такие как эпотилон B или BMS-247550, в основном благодаря отсутствию высокореактивного эпоксидного фрагмента

Обычно фармакологи и врачи предпочитают терапевтические композиции перорального назначения, на которые пациенты соглашаются с большей готовностью и введение которых не связано с трудностями для пациентов (DeMario and Ratain 1998). Композиции, пероральная активность которых была продемонстрирована на мышах, описаны для препаратов BMS-247550 и BMS-310705 (Lee 2002a; b); однако указанные соединения лишены структурной комбинации кислорода лактона и олефина, обнаруживаемой в эпотилоне D.

В единственном сообщении о полиэтиленгликоль-400: этанольной (10:1) композиции эпотилона D, перорально введенной одной мыши (в дозе 50 мг/кг), говорится об отсутствии заметного эффекта в отношении размера опухоли (Chou, et al. 1998b). К сожалению, эпотилон D имеет низкую растворимость в воде; и имеющиеся в настоящее время композиции эпотилона D включают в себя агент, способствующий солюбилизации производного касторового масла, который имеется в продаже под торговым названием CREMOPHOR® (BASF Aktiengesellschaft), для повышения растворимости. Такие композиции пригодны только для внутривенного введения. Хотя имеющиеся в настоящее время композиции эпотилона D и являются приемлемыми для клинического и терапевтического применения, прием препарата CREMOPHOR® ассоциирован с дискомфортом и токсичностью у пациентов. Были описаны композиции эпотилона B для внутривенного введения, свободные от CREMOPHOR® (Van Hoogevest 1999). Следовательно, было бы предпочтительно получение усиленной композиции эпотилона D, которая не требует присутствия препарата CREMOPHOR®, а еще более предпочтительно, чтобы такая композиция была бы представлена в форме для перорального введения.

КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном из аспектов настоящее изобретение связано с получением фармацевтических композиций для лечения гиперпролиферативных заболеваний, обычно - хоть и не обязательно - у млекопитающего, предпочтительно у человека. В одном из воплощений настоящее изобретение связано с фармацевтической композицией, включающей в себя эпотилон и фармацевтически приемлемый носитель, воплощения которого более подробно будут описаны далее. Эпотилон обеспечен в терапевтически эффективной концентрации, и фармацевтическая композиция является эффективной для доставки терапевтически эффективного количества эпотилона путем перорального введения.

В особых воплощениях фармацевтических композиций, обеспечиваемых настоящим изобретением, такая фармацевтическая композиция согласно изобретению включает в себя по меньшей мере один циклодекстрин, а в более конкретных воплощениях указанный циклодекстрин представляет собой гидроксиалкил-β-циклодекстрин, а в еще более конкретном воплощении - гидроксипропил-β-циклодекстрин. В других воплощениях настоящего изобретения циклодекстрин представляет собой сульфоалкилциклодекстрин, а в более конкретных воплощениях сульфоалкилциклодекстрин представляет собой сульфопропил-β-циклодекстрин.

В других воплощениях настоящего изобретения эпотилон и циклодекстрин представлены в лиофилизированной форме, которая в некоторых воплощениях представляет собой "осадок" лиофилизата.

В другом воплощении, соединения и композиции согласно изобретению используются в комбинации с другими терапевтическими агентами или процедурами. В особых воплощениях другие терапевтические агенты включают в себя другие антипролиферативные агенты, агенты, которые усиливают антипролиферативную активность антипролиферативного соединения (например, ингибиторы Hsp90), и агенты, которые ослабляют нежелательные побочные эффекты антипролиферативного агента.

В другом аспекте согласно изобретению предлагаются фармацевтические композиции, используемые для лечения злокачественных опухолей. В особых воплощениях композиции, содержащие эпотилон, используются для лечения злокачественных опухолей, чувствительных к эпотилонам.

В других воплощениях предлагаемые фармацевтические композиции используются для лечения незлокачественных заболеваний, характеризующихся гиперпролиферативной активностью клеток (например, псориаз, рестеноз, множественный склероз, ревматоидный артрит, атеросклероз и т.д.).

В другом аспекте данного изобретения предлагаются фармацевтические композиции, эффективные для обеспечения терапевтически эффективных уровней дозировки эпотилона для пациента, нуждающегося в таком лечении. В особых воплощениях такая композиция является эффективной при обеспечении уровня дозировки приблизительно между 0,1 мг/м² и примерно 200 мг/м².

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном из аспектов настоящего изобретения предлагаются фармацевтические композиции (также называемые здесь просто "композициями") для лечения гиперпролиферативного заболевания, обычно - но не обязательно - у млекопитающего, предпочтительно у человека. В одном из воплощений в настоящем изобретении предлагается фармацевтическая композиция, содержащая эпотилон и фармацевтически приемлемый носитель, конкретные воплощения которого будут более подробно описаны далее. Эпотилон предлагается в терапевтически эффективной концентрации, и фармацевтическая композиция является эффективной для доставки терапевтически эффективного количества эпотилона пероральным путем. В определенных воплощениях фармацевтические композиции предлагаются в физической форме, пригодной для перорального введения, например, в виде мягких гелевых капсул.

Здесь термин "эпотилон" используется для обозначения любого эпотилона, такого как - не ограничиваясь, однако, перечисленным - эпотилон A, эпотилон B, эпотилон C, эпотилон D, эпотилон E, эпотилон F, 4-дезметилэпотилон D, азаэпотилон B, 21-аминоэпотилон B, 9,10-дегидроэпотилон D, 9,10-дегидро-26-трифтор-эпотилон D, 11-гидроксиэпотилон D, 19-оксазолилэпотилон D, 10,11-дегидроэпотилон D, 19-оксазолил-10,11-дегидроэпотилон D, 9,10-дегидроэпотилон B, 9,10-дегидроэпотилон D, 26-трифтор-9,10-дегидроэпотилон B или D, а также их аналоги и производные. Эпотилон, используемый в фармацевтических композициях согласно изобретению, может таким образом представлять собой любой эпотилон, а более конкретно любой эпотилон, имеющий полезные терапевтические свойства (Hoefle, et al. 1993; Nicolaou, et al. 1998; Reichenbach, et al. 1998; Danishefsky, et al. 1999a; Danishefsky, et al. 1999b; Hoefle, et al. 1999; Nicolaou, et al. 1999a; Nicolaou, et al. 1999b; Vite, et al. 1999a; Vite, et al. 1999b; Vite, et al. 1999d; c; Hoefle, et al. 2000a; Hoefle, et al. 2000b; Danishefsky, et al. 2001a; Danishefsky, et al. 2001b; Santi, et al. 2001; Avery 2002; Danishefsky, et al. 2002; Nicolaou, et al. 2002a; Nicolaou, et al. 2002b; Wessjohann and Scheid 2002; White, et al. 2002). Такие эпотилоны могут быть получены с помощью любой комбинации полного химического синтеза, частичного химического синтеза или методов хемобиосинтеза, а также материалов, известных специалистам в области органической химии, медицинской химии и биотехнологии (Hoefle, et al. 1993; Hoefle and Kiffe 1997; Hofle and Kiffe 1997; Schinzer, et al. 1997; 1998; Hofle and Sefkow 1998; Mulzer and Mantoulidis 1998; Nicolaou, et al. 1998; Reichenbach, et al. 1998; Schinzer, et al. 1998; Wessjohann and Gabriel 1998; Wessjohann and Kalesse 1998; Altmann, et al. 1999; Danishefsky, et al. 1999a; Danishefsky, et al. 1999b; Hoefle, et al. 1999; Hofmann, et al. 1999; Kim and Borzilleri 1999; Kim and Johnson 1999; Klar, et al. 1999a; b; Mulzer and Mantoulidis 1999; Nicolaou, et al. 1999a; Nicolaou, et al. 1999b; Schupp, et al. 1999; Vite, et al. 1999a; Vite, et al. 1999b; Vite, et al. 1999d; c; Beyer and Mueller 2000; Borzilleri, et al. 2000; Buchmann, et al. 2000; Cabral 2000; Georg, et al. 2000; Gustafsson and Betlach 2000; Hoefle, et al. 2000a; Hoefle, et al. 2000b; Hofle, et al. 2000; Julien, et al. 2000; Kim and Johnson 2000; Li, et al. 2000; Mulzer, et al. 2000; Arslanian, et al. 2001; Danishefsky, et al. 2001a; Danishefsky, et al. 2001b; Kim and Johnson 2001; Klar, et al. 2001; Kumar, et al. 2001; Lee 2001; Li, et al. 2001); (Mulzer and Martin 2001; Santi, et al. 2001; Strohhaecker 2001; Vite, et al. 2001; Avery 2002; Danishefsky, et al. 2002; Dimarco, et al. 2002; Hoefle and Glaser, 2002; Julien, et al. 2002; Khosla and Pfeifer 2002; Koch and Oiseleur 2002; Kuesters and Unternaehrer 2002; Li, et al. 2002; Nicolaou, et al. 2002a; Nicolaou, et al. 2002b; Santi, et al. 2002a; Santi, et al. 2002b; Santi, et al. 2002c; Smith, et al. 2002; Wessjohann and Scheid 2002; Wessjohann, et al. 2002; White, et al. 2002). Специфические примеры эпотилонов, обладающих полезными терапевтическими свойствами, включают в себя, не ограничиваясь, однако, перечисленным, эпотилон A, эпотилон B, эпотилон C, эпотилон D, 4-дезметилэпотилон D, азаэпотилон B, 21-аминоэпотилон B, 9,10-дегидроэпотилон D, 9,10-дегидро-26-трифторэпотилон D, 11-гидроксиэпотилон D, 19-оксазолилэпотилон D, 10,11-дегидроэпотилон D, 19-оксазолил-10,11-дегидроэпотилон D, 9,10-дегидроэпотилон B, 9,10-дегидроэпотилон D, а также их аналоги и производные.

В более конкретных воплощениях предлагаемых в настоящем изобретении фармацевтических композиций фармацевтические композиции согласно изобретению включают в себя по меньшей мере один циклодекстрин. Используемый здесь термин "циклодекстрин" соответствует значению, охватывающему как нативные циклодекстрины (например, α-, β-, γ-циклодекстрины и т.п.), так и производные формы нативных циклодекстринов, таких как гидроксиалкилированные циклодекстрины (например, гидроксиэтилированные и гидроксипропилированные циклодекстрины), сульфоалкилированные циклодекстрины (например, сульфопропилированные и сульфобутилированные циклодекстрины), и другие химические производные циклодекстринов. В особых воплощениях циклодекстрин представляет собой гидроксиалкил-β-циклодекстрин, а в еще более конкретном воплощении - гидроксипропил-β-циклодекстрин. Еще более конкретные воплощения, в которых носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, включает в себя случаи, когда гидроксипропил-β-циклодекстрин имеет степень замещения, составляющую по меньшей мере приблизительно 4,6%, а более конкретно степень замещения, составляющую по меньшей мере приблизительно 6,5%. Еще более специфическими воплощениями фармацевтической композиции согласно изобретению являются такие, в которых носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, имеющий степень замещения, составляющую приблизительно от 4,6% и примерно до 6,5%. В других воплощения настоящего изобретения циклодекстрин представляет собой сульфопропил-β-циклодекстрин.

В одном из воплощений эпотилон, используемый в фармацевтической композиции, представляет собой эпотилон D. В более специфическом воплощении фармацевтическая композиция согласно изобретению содержит эпотилон D и гидроксиалкил-β-циклодекстрин, а в еще более специфическом воплощении - гидроксипропил-β-циклодекстрин. В еще более специфических воплощениях фармацевтических композиций, содержащих эпотилон D и гидроксипропил-β-циклодекстрин, указанный гидроксипропил-β-циклодекстрин имеет степень замещения, приблизительно составляющую по меньшей мере 4,6%, а более конкретно степень замещения, приблизительно составляющую по меньшей мере 6,5%. Еще более специфическими воплощениями фармацевтической композиции согласно изобретению являются такие, в которых эпотилон представляет собой эпотилон D, а носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, имеющий степень замещения, составляющую приблизительно от 4,6% и примерно до 6,5%. Среди фармацевтических композиций согласно изобретению, включающих в себя эпотилон D и гидроксипропил-β-циклодекстрин, более специфические воплощения включают в себя такие композиции, в которых эпотилон D и гидроксипропил-β-циклодекстрин комбинируют в весовом соотношении, составляющем приблизительно от 10 мг эпотилона D и приблизительно до 0,4 г гидроксипропил-β-циклодекстрина.

В других воплощения настоящего изобретения эпотилон и циклодекстрин представлены в лиофилизированной форме, которая в некоторых воплощениях представляет собой "осадок" лиофилизата. Такие воплощения могут быть получены с помощью материалов и технологий, которые хорошо знакомы специалистам в области фармации (Gennaro 2000). В одном из конкретных воплощений эпотилон и гидроксиалкил-β-циклодекстрин объединяют в водно-спиртовом растворе, который в дальнейшем подвергают лиофилизации. Более специфические воплощения включают в себя такие из них, в которых эпотилон D и гидрокспропил-β-циклодекстрин объединяют в водно-спиртовом растворе, который в дальнейшем подвергают лиофилизации. В еще более конкретных воплощениях приблизительно 10 мг эпотилона D и примерно 0,4 г гидрокспропил-β-циклодекстрина объединяют в 60%-ном растворе трет-бутанол - вода, который в дальнейшем подвергают лиофилизации. В еще более конкретных воплощениях приблизительно 10 мг эпотилона D и примерно 0,4 г гидрокспропил-β-циклодекстрина объединяют в 60%-ном растворе трет-бутанол - вода, который в дальнейшем лиофилизируют, с получением "осадка".

Неожиданно обнаружилось, что описанные выше лиофилизаты, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают весьма приемлемой растворимостью в фармацевтически применимых носителях, в особенности в фармацевтически применимых носителях, которые считаются еще более подходящими носителями, чем носители, содержащие препарат CREMAPHOR®. Таким образом, в другом аспекте в настоящем изобретении предлагаются применимые фармацевтические композиции, содержащие эпотилон и гидроксиалкил-β-циклодекстрин, как описано выше, в фармацевтически приемлемом носителе, который лишен сколько-нибудь существенного количества препарата CREMAPHOR®. Более конкретные воплощения настоящего изобретения включают в себя фармацевтические композиции, полученные в результате восстановления лиофилизата, описанного выше, с помощью смеси, включающей в себя воду, этанол и по меньшей мере один гликоль. В настоящем описании термином "гликоль" обозначают то, что вещество включает в себя такие молекулы, как пропиленгликоль, пропиленгликоль-400, полиоксиэтилен-сорбитан-моноолеат (имеющийся в продаже под торговым названием TWEEN 80) и родственные им оксигенированные углеводороды. Естественно, подразумевается, что гликоли с различной длиной цепи и различными молекулярными весами (например, полиэтиленгликоль-1000, другие TWEEN-соединения) также входят в рамки этого определения. Для терапевтических целей вода, используемая для восстановления смеси, представляет собой воду со степенью чистоты, которая соответствует таковой растворов для инъекций.

В некоторых воплощениях смесь, используемая для восстановления лиофилизата, включает в себя воду, этанол и полиоксиэтилен-сорбитан-моноолеат (TWEEN 80). В более специфических воплощениях такая смесь включает в себя по меньшей мере приблизительно 10% воды (% объем/объем), более конкретно по меньшей мере приблизительно 40% воды (% объем/объем) и еще более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 60% воды (% объем/объем). В некоторых воплощениях смесь, используемая для восстановления лиофилизата, включает в себя приблизительно от 60% воды и примерно до 70% воды (% объем/объем), более конкретно приблизительно от 60% воды и примерно до 65% воды (% объем/объем), а в особом воплощении приблизительно 62,5% воды (% объем/объем).

В некоторых воплощениях смеси, используемой для восстановления лиофилизата, содержащей воду в описанных выше концентрациях, такая смесь дополнительно включают в себя TWEEN 80 в концентрации приблизительно от 25% (% объем/объем) и примерно до 10% (% объем/объем), более конкретно приблизительно между 20% (% объем/объем) и примерно 15% (% объем/объем). В одном из конкретных воплощений TWEEN 80 представлен в концентрации, приблизительно составляющей 15% (% объем/объем).

В некоторых воплощениях описанная выше смесь, используемая для восстановления лиофилизата, включает в себя воду и TWEEN 80 в описанных выше концентрациях, уравновешенные смесью этанола. Примеры соответствующих восстанавливающих смесей включают в себя воду/этанол/TWEEN 80 в концентрациях (% объем/объем) порядка 10/65/25, 20/55/25, 40/35/25, 62,5/12,5/25, 60/20/20 и 60/25/15. В другом воплощении восстанавливающая смесь представляет собой смесь пропиленгликоль/этанол/вода в соотношении 40/10/50 (% объем/объем).

Описанные выше восстанавливающие смеси являются подходящими для применения с любым лиофилизатом, образуемым с использованием любой из комбинаций эпотилона (эпотилонов) и гидроксиалкил-β-циклодекстрина или сульфоалкил-β-циклодекстрина, описанных выше. Более конкретные воплощения включают в себя композиции, полученные при восстановлении лиофилизата, включающего в себя эпотилон D. Еще более конкретные воплощения включают в себя такие композиции, которые получаются в результате восстановления лиофилизата, в котором эпотилон представляет собой эпотилон D, а гидроксиалкил-β-циклодекстрин представляет собой гидроксипропил-β-циклодекстрин. Еще более конкретные воплощения включают в себя такие композиции, которые получаются в результате восстановления лиофилизата, в котором эпотилон представляет собой эпотилон D, а сульфоалкил-β-циклодекстрин представляет собой сульфоилпропил-β-циклодекстрин.

Некоторые воплощения согласно изобретению включают в себя композиции, получающиеся в результате восстановления лиофилизата, образованного приблизительно из 10 мг эпотилона D и примерно 0,4 г гидроксипропил-β-циклодекстрина, который смешан с 60% раствором трет-бутанол - вода, и восстанавливающей смеси, которая включает в себя комбинацию вода/этанол/TWEEN 80 (% объем/объем) в соотношении порядка 10/65/25, 20/55/25, 40/35/25, 62,5/12,5/25, 60/20/20 или 60/25/15. Более специфическое воплощение связано с композицией, получающейся в результате восстановления лиофилизата, образованного приблизительно из 10 мг эпотилона D и примерно 0,4 г гидроксипропил-β-циклодекстрина, смешанных с 60% раствором трет-бутанол - вода, и восстанавливающей смеси, включающей в себя комбинацию вода/этанол/TWEEN 80 (% объем/объем) в соотношении порядка 62,5/12,5/25, 60/20/20 или 60/25/15. Еще более специфическое воплощение представляет собой композицию, полученную в результате восстановления лиофилизата, образованного приблизительно из 10 мг эпотилона D и примерно 0,4 г гидроксипропил-β-циклодекстрина, смешанных с 60% раствором трет-бутанол - вода, и восстанавливающей смеси, включающей в себя комбинацию вода/этанол/TWEEN 80 (% объем/объем) в соотношении порядка 62,5/12,5/25.

В другом воплощении настоящего изобретения эпотилон, используемый в фармацевтической композиции, представляет собой 9,10-дегидроэпотилон D. В более специфическом воплощении настоящего изобретения фармацевтическая композиция содержит 9,10-дегидроэпотилон D и гидроксиалкил-β-циклодекстрин, а еще в более специфическом воплощении - гидроксипропил-β-циклодекстрин. В более специфических воплощениях настоящего изобретения фармацевтические композиции включают в себя 9,10-дегидроэпотилон D и гидроксипропил-β-циклодекстрин, причем гидроксипропил-β-циклодекстрин имеет степень замещения, по меньшей мере составляющую приблизительно 4,6%, а более конкретно степень замещения, по меньшей мере составляющую приблизительно 6,5%. Еще специфические воплощения фармацевтической композиции согласно изобретению представляют собой такие композиции, в которых эпотилон представляет собой 9,10-дегидроэпотилон D, а носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, имеющий степень замещения, составляющую приблизительно от 4,6% и примерно до 6,5%.

В других воплощения настоящего изобретения эпотилон предлагается в качестве концентрата для инъекций, включающего в себя эпотилон, растворенный в фармацевтически приемлемом носителе, и концентрат для инъекций разбавляют непосредственно перед введением. В особых воплощениях настоящего изобретения фармацевтически приемлемый носитель используют для получения концентрата для инъекций, включающего в себя спирт, например этанол. В дополнительных особых воплощениях настоящего изобретения фармацевтически приемлемый носитель, используемый для получения концентрата для инъекций, включает в себя спирт вместе с гликолем, например пропиленгликоль. В специфических воплощениях концентрат для инъекций включает в себя 9,10-дегидроэпотилон D, растворенный в концентрации приблизительно между 0,1 мг/мл и примерно 50 мг/мл в фармацевтически приемлемом носителе, включающем в себя этанол и пропиленгликоль. В более специфических воплощениях концентрат для инъекций включает в себя 9,10-дегидроэпотилон D, растворенный в концентрации приблизительно между 0,1 мг/мл и примерно 50 мг/мл в фармацевтически приемлемом носителе, включающем в себя приблизительно 50-90% (объем/объем) этанола и приблизительно 10-50% (объем/объем) пропиленгликоля. В более специфических воплощениях концентрат для инъекций включает в себя 9,10-дегидроэпотилон D, растворенный в концентрации приблизительно между 0,1 мг/мл и примерно 50 мг/мл в фармацевтически приемлемом носителе, включающем в себя приблизительно 70% (объем/объем) этанола и приблизительно 30% (объем/объем) пропиленгликоля. В еще более специфических воплощениях концентрат для инъекций включает в себя 9,10-дегидроэпотилон D, растворенный в концентрации приблизительно между 1 мг/мл и примерно 50 мг/мл в фармацевтически приемлемом носителе, включающем в себя приблизительно 70% (объем/объем) этанола и приблизительно 30% (объем/объем) пропиленгликоля. В еще более специфическом воплощении концентрат для инъекций состоит из 9,10-дегидроэпотилона D, растворенного в концентрации приблизительно 5 мг/мл в фармацевтически приемлемом носителе, состоящем приблизительно из 70% (объем/объем) этанола и примерно 30% (объем/объем) пропиленгликоля.

Описанный выше концентрат для инъекций перед введением разбавляют в соответствующих растворителях. В определенных воплощениях настоящего изобретения такие растворители включают в себя один или более циклодекстринов, выбранных из приведенного выше списка и растворенных в воде для инъекций. В особых воплощениях настоящего изобретения такой растворитель включает в себя гидроксиалкил-β-циклодекстрин, растворенный в воде для инъекций. В более специфических воплощениях настоящего изобретения такой растворитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, растворенный в воде для инъекций в концентрации приблизительно от 10 мг/мл и примерно до 1000 мг/мл. В еще более специфических воплощениях настоящего изобретения растворитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, растворенный в воде для инъекций в концентрации приблизительно от 50 мг/мл и примерно до 500 мг/мл. В еще более специфических воплощениях настоящего изобретения растворитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, растворенный в воде для инъекций в концентрации приблизительно от 50 мг/мл и примерно до 250 мг/мл. В еще более специфических воплощениях настоящего изобретения растворитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, растворенный в воде для инъекций в концентрации, приблизительно составляющей 133 мг/мл. В определенных воплощениях настоящего изобретения концентрат для инъекций растворяют в растворителе, производя при этом приблизительно от 2-кратного (объем/объем) и примерно до 20-кратного (объем/объем) разбавления в растворителе. В специфических воплощениях настоящего изобретения производят приблизительно от 5-кратного (объем/объем) примерно до 15-кратного (объем/объем) разбавления концентрата для инъекций в растворителе. В еще более специфических воплощениях настоящего изобретения концентрат для инъекций разбавляют в растворителе приблизительно 10-кратно (объем/объем).

Таким образом, в определенных воплощениях согласно изобретению предложены фармацевтические композиции, включающие в себя эпотилон, растворенный в фармацевтически приемлемом носителе, где носитель включает в себя спирт, гликоль и циклодекстрин. В специфических воплощениях в изобретении предложены фармацевтические композиции, включающие в себя 9,10-дегидроэпотилон, растворенный в фармацевтически приемлемом носителе, где носитель включает в себя спирт, гликоль и циклодекстрин. В более специфических воплощениях в изобретении предложены фармацевтические композиции, включающие в себя 9,10-дегидроэпотилон, растворенный в фармацевтически приемлемом носителе, где носитель включает в себя этанол, пропиленгликоль и гидроксипропил-β-циклодекстрин. В еще более специфических воплощениях в изобретении предложены фармацевтические композиции, состоящие из 9,10-дегидроэпотилона, растворенного в фармацевтически приемлемом носителе, где носитель в основном состоит из этанола, пропиленгликоля и гидроксипропил-β-циклодекстрина. В еще более специфических воплощениях в изобретении предложены фармацевтические композиции, состоящие приблизительно из 0,5 мг/мл 9,10-дегидроэпотилона, растворенного в фармацевтически приемлемом носителе, где носитель в основном состоит приблизительно из 7% этанола, приблизительно из 3% пропиленгликоля и примерно 12% (объем/объем) гидроксипропил-β-циклодекстрина в воде для инъекций.

Не желая связывать себя какой-либо определенной теорией, авторам изобретения хочется отметить, однако, что эффективность комбинации гидроксипропил-β-циклодекстринового лиофилизата в одной из водных восстанавливающих смесей, описанных выше для образования терапевтически эффективной композиции, сопоставима с образованием комплекса между гидроксиалкил-β-циклодекстрином и эпотилоном в лиофилизате и более предпочтительно с комплексом включения (аддуктом) между гидроксиалкил-β-циклодекстрином и эпотилоном в лиофилизате. Таким образом, в некоторых воплощениях настоящее изобретение включает в себя комплексы эпотилона D-гидроксипропил-β-циклодекстрина, а более конкретно комплексы включения эпотилона D-гидроксипропил-β-циклодекстрина. Описанные выше комплексы и комплексы включения могут быть составлены или в виде лиофилизата, и/или в виде восстановленного раствора.

Терапевтические применения композиций согласно изобретению

Описанные здесь композиции являются эффективными для доставки терапевтически эффективного количества эпотилона для лечения опосредованного эпотилоном заболевания, т.е. заболевания, при котором введение эпотилона пациенту, такому как млекопитающее, а более предпочтительно человеку, вызывает благоприятный эффект. Таким образом, настоящее изобретение включает в себя также способы лечения опосредованных эпотилоном заболеваний. Примеры опосредованных эпотилоном заболеваний включают в себя, не ограничиваясь перечисленным, гиперпролиферативные заболевания, такие как злокачественная опухоль, включая злокачественные опухоли головы и шеи, которые включают в себя опухоли головы, шеи, носовой полости, параназальных синусов, носоглотки, ротовой полости, ротовой части глотки, гортани, гипофаринкса (подглоточника), слюнных желез и параганглиомы; злокачественные опухоли печени и желчного древа, в частности гепатоклеточную карциному; злокачественные опухоли кишечника, в частности рак ободочной и прямой кишки; рак яичника; мелкоклеточный и немелкоклеточный рак легкого; рак молочной железы, саркомы, такие как фибросаркома, злокачественная фиброзная гистиоцитома, эмбриональная рабдомиосаркома, лейомиосаркома, нейрофибросаркома, остеосаркома, синовиальная саркома, липосаркома и альвеолярная саркома мягких тканей; неоплазмы центральной нервной системы, в частности злокачественные опухоли головного мозга; лимфомы, такие как лимфома Ходжкина, лимфоплазмацитоидная лимфома, фолликулярная лимфома, ассоциированная со слизистой оболочкой лимфома лимфоидной ткани, лимфома клеток коры головного мозга, крупноклеточная лимфома B-клеток, лимфома Беркитта и крупноклеточная анапластическая лимфома T-клеток. В клиническом отношении применение способов и описанных здесь композиций (в случаях, когда они применимы) приведет к уменьшению размеров или количества злокачественных опухолей и/или к снижению ассоциированных с ними симптомов. В отношении патологии применение способов и описанных здесь композиций приведет к возникновению связанного с патологией ответа, такого как ингибирование пролиферации злокачественных клеток, уменьшение размеров злокачественного новообразования или опухоли, предотвращение дальнейшего образования метастазов и ингибирование опухолевого ангиогенеза.

Способы и композиции согласно изобретению могут быть использованы в комбинированной терапии. Иными словами, соединения и композиции согласно изобретению могут быть введены одновременно, до или после одной или более других терапевтических или медицинских процедур. При конкретной комбинации способов лечения и терапевтических приемов в комбинированном режиме следует учитывать сопоставимость разных видов лечения и/или терапевтических приемов с тем терапевтическим эффектом, которого стремятся достичь. Таким образом, описанные здесь композиции могут быть скомбинированы с иными способами лечения, такими как хирургическое лечение и/или радиация. Описанные здесь композиции могут быть использованы также в сочетании с другими онколитическими агентами, такими как 5-фторурацил или 5'-дезокси-5-фтор-N-[(пентилокси)карбонил]-цитидин (который продается под торговым названием XELODAV (Roche). Иллюстративные примеры других противораковых агентов включают в себя, не ограничиваясь, однако, ими, (i) алкилирующие лекарственные средства, такие как мехлорэтамин, хлорамбуцил, циклофосфамид, мелфалан, ифосфамид; (ii) антиметаболиты, такие как метотрексат; (iii) агенты, стабилизирующие микротрубочки, такие как винбластин, паклитаксел, доцетаксел, и дискодермолид; (iv) ингибиторы ангиогенеза; и (v) цитотоксические антибиотики, такие как доксорубицин (адриамицин), блеомицин и митомицин. Иллюстративные примеры других противораковых процедур включают в себя (i) хирургию; (ii) радиотерапию; и (iii) фотодинамическую терапию.

В другом воплощении соединения и композиции согласно изобретению используются в сочетании с агентом или процедурой, способствующими снижению потенциальных побочных эффектов, таких как диарея, тошнота и рвота, которые могут быть вызваны соединениями или композициями согласно изобретению. Диарею можно лечить с помощью антидиарейных агентов, таких как опиоиды (например, кодеин, дифеноксилат, дифеноксин и лоперамид (loeramide), бисмут, субсалицилат и октреотид. Явления тошноты и рвоты можно снимать противорвотными средствами, такими как дексаметазон, метоклопрамид, дифенилгидрамин, доразепам, ондансетрон, прохлорперазин, тиэтилперазин и дронабинол.

В другом аспекте согласно изобретению композиции согласно изобретению используются для лечения нераковых заболеваний, характеризующихся клеточной гиперпролиферацией. Иллюстративные примеры таких заболеваний включают в себя, не ограничиваясь перечисленным, атрофический гастрит, воспалительную гемолитическую анемию, отторжение трансплантата, воспалительную нейтропению, буллезный пемфигоид, глютеновую энтеропатию (целиакию), демиелинизирующую нейропатию, дерматомиозит, воспалительное заболевание кишечника (язвенный колит и болезнь Крона), множественный склероз, миокардит, миозит, носовой полип, хронический синусит, обыкновенную пузырчатку, первичный гломерулонефрит, псориаз, послеоперационные спайки, стеноз или рестеноз, воспаление склеры, склеродерму, экзему (включая атопический дерматит, раздражающий дерматит, аллергический дерматит), заболевание периодонта (т.е. периодонтит), поликистозное заболевание почек и диабет типа I. Другие примеры включают в себя васкулиты (например, гигантоклеточный артериит (темпоральный артериит, артериит (синдром) Такаясу), нодозный полиартериит, аллергический ангиит и гранулематоз (синдром Черджа-Строса), синдром наложения воспаления многих сосудов, аллергический (гиперчувствительный) васкулит (болезнь Шенлейн-Геноха), сывороточную болезнь, васкулит, вызванный лекарственным средством, инфекционный васкулит, неопластический васкулит, васкулит, ассоциированный с заболеваниями соединительной ткани, васкулит, ассоциированный с врожденными дефицитами системы комплемента, гранулематоз Вегенера, болезнь Кавазаки, васкулит центральной нервной системы, болезнь Бюргера (облитерирующий тромбангиит) и системный склероз); заболевания желудочно-кишечного тракта (например, панкреатит, болезнь Крона, язвенный колит, язвенный проктит, первичный склерозирующий холангиит, доброкачественная закупорка любой природы, включая идиопатическую (например, закупорка желчных протоков, пищевода, двенадцатиперстной кишки, тонкого кишечника или прямой кишки); заболевания дыхательных путей (например, астма, гиперчувствительный пневмонит, асбестоз, силикоз и другие формы пневмокониозов, хронический бронхит и хроническая обструктивная болезнь дыхательных путей); заболевания слезно-носового протока (например, закупорки всех видов, включая идиопатические); и заболевания евстахиевой трубы (например, закупорки всех видов, включая идиопатические).

Способ лечения таких заболеваний включает в себя введение субъекту, страдающему от таких заболеваний, терапевтически эффективного количества соединения согласно изобретению. В случае необходимости способ может быть воспроизведен повторно. Способы согласно изобретению более подробно описаны ниже, со ссылкой на три иллюстративных нераковых заболевания.

В одном из воплощений соединения согласно изобретению используются для лечения псориаза, состояния, характеризующегося клеточной гиперпролиферативной активностью кератиноцитов, которые нарастают на коже, образуя наросты в виде чешуйчатых поражений. Способ включает в себя введение субъекту, страдающему от псориаза, терапевтически эффективного количества соединения согласно изобретению. В случае необходимости способ может быть воспроизведен повторно либо для устранения поражений, либо для снижения числа пораженных участков или степени поражения. В клиническом отношении применение способа приведет к уменьшению размеров или количества кожных поражений, уменьшению кожных симптомов (боль, жжение и кровоизлияние на коже) и/или к снижению ассоциированных симптомов (например, покраснение, повышение температуры и отек сустава, диарея, боли в области живота). В отношении патологии применение способа приведет к возникновению одной из следующих реакций: ингибированию пролиферации кератиноцитов, уменьшению воспаления кожи (отражаясь, например, на аттрактивности и факторах роста, представлении антигенов, образовании продуктов реактивного кислорода и матриксных металлопротеиназ) и ингибированию ангиогенеза в коже.

В другом аспекте соединения согласно изобретению используют для лечения множественного склероза, состояния, характеризующегося прогрессивной демиелинизацией в головном мозге. Хотя точные механизмы, вовлеченные в потерю миелина, пока еще не выяснены, однако известно, что происходит повышение пролиферации астроцитов и их накопление в областях разрушения миелина. В этих областях отмечается макрофагальноподобная активность и повышенная протеолитическая активность, которая, по крайней мере, частично, ответственна за деградацию миелиновой оболочки. Способ включает в себя введение терапевтически эффективного количества соединения согласно изобретению субъекту, страдающему от множественного склероза. В случае необходимости способ может быть воспроизведен повторно либо для ингибирования пролиферации астроцитов, и/или уменьшения степени тяжести потери моторной функции, и/или для предотвращения или ослабления хронического прогрессирования заболевания. В клиническом отношении применение способа приведет к уменьшению зрительных симптомов (потеря зрения, диплопия), уменьшению нарушений походки (слабость, аксиальная неустойчивость, потеря чувствительности, спастичность, гиперрефлексия, потеря физической ловкости), уменьшению дисфункции верхних конечностей (слабость, спастичность, потеря чувствительности), уменьшению дисфункции мочевого пузыря (неотложные позывы к мочеиспусканию, недержание мочи, нерешительность, неполное опорожнение), депрессии, эмоциональной лабильности и торможению ухудшения когнитивной функции. В отношении патологии применение способа приведет к снижению одного или более из таких явлений, как потеря миелина, разрушение гематоэнцефалического барьера, околососудистая инфильтрация мононуклеарных клеток, иммунологические аномалии, образование рубца глии и пролиферация астроцитов, продуцирование металлопротеиназ и замедление скорости проводимости.

В другом аспекте композиции согласно изобретению используют для лечения ревматоидного артрита, мультисистемного хронического рецидивирующего воспалительного заболевания, которое характеризуется тем, что порой приводит к разрушению и анкилозу пораженных суставов. Ревматоидный артрит характеризуется значительным утолщением синовиальной оболочки, которая образует ворсинчатые выступы, проникающие в пространство сустава, многослойностью выстилки синовиоцитов (пролиферация синовиоцитов), инфильтрацией синовиальной оболочки белыми клетками крови (макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками и лимфоидными фолликулами; так называемый "воспалительный синовит") и отложением фибрина, с некрозом клеток внутри синовиума. Ткань, образованная в результате такого процесса, называется паннусом, и в конечном итоге паннус разрастается, заполняя пространство сустава. Образование паннуса сопровождается развитием обширной сети вновь образованных кровеносных сосудов в процессе ангиогенеза, который представляет собой обычное явление при синовитах. Высвобождение пищеварительных ферментов (матриксные металлопротеиназы (например, коллагеназа, стромелизин)) и другие медиаторы процесса воспаления (например, перекись водорода, супероксиды, лизосомные ферменты и продукты метаболизма арахидоновой кислоты) из клеток ткани паннуса приводит к прогрессирующему процессу деструкции хрящевой ткани. Паннус инвазирует суставной хрящ, что приводит к эрозиям и фрагментации хрящевой ткани. В конечном итоге происходит эрозия субхондральной кости с фиброзным анкилозом и в конце концов анкилозом кости вовлеченного в процесс сустава.

В другом аспекте композиции согласно изобретению используют для лечения атеросклероза и/или рестеноза, в частности, у пациентов, у которых ограничение подвижности суставов можно лечить с помощью эндоваскулярного стента. Атеросклероз представляет собой хроническое поражение сосудов, при котором некоторые из нормальных клеток гладких мышц сосудов (vascular smooth muscle cells, "VSMC") в артериальной стенке, которые обычно контролируют тонус сосудов, регулируя поток крови, меняют свою природу, развивая поведение, сходное с таковым у "раковоподобных" клеток. Такие VSMC становятся аномально пролиферирующими, секретируя вещества (факторы роста, ферменты тканевой деградации и другие белки), которые позволяют им инвазировать, давая возможность проникать во внутреннее пространство сосудов, блокируя ток крови и создавая условия, при которых сосуд становится аномально предрасположенным к полной блокаде под действием локального тромба, образующегося в этом сосуде. Рестеноз, рецидив стеноза или блокада артерии после корригирующих процедур, представляет собой ускоренную форму атеросклероза. Альтернативно, композиции согласно изобретению могут быть использованы для обеспечения покрывающего стент слоя, включающего в себя терапевтически эффективное количество эпотилона, для установления стента в больном сосуде пациента, страдающего атеросклерозом. Способы покрытия стента соединением описаны, например, в патентах США No. 6156373 и 6120847. В клиническом отношении применение согласно изобретению приведет к проявлению одного или более из следующих эффектов: (i) увеличению артериального тока крови; (ii) снижению тяжести клинических признаков заболевания; (iii) снижению частоты рестеноза; или (iv) предотвращение/ослабление хронического прогрессирования атеросклероза. В отношении патологии применение согласно изобретению приведет по меньшей мере к одному из следующих эффектов в сайте имплантации стента: (i) снижению воспалительного ответа, (ii) ингибированию секреции клетками VSMC матриксных металлопротеиназ; (iii) ингибированию накопления клеток гладкой мускулатуры сосудов; и (iv) ингибированию дедифференцировочного фенотипа клеток VSMC.

Уровни и введение дозировок

В одном из воплощений композиции согласно изобретению эффективны для обеспечения уровней дозировок эпотилона, в частности эпотилона D, или эпотилона, выбранного из группы, состоящей из эпотилона A, эпотилона B, эпотилона C, 4-дезметилэпотилона D, азаэпотилона B, 21-аминоэпотилона B, 9,10-дегидроэпотилона D, 9,10-дегидро-26-трифтор-эпотилона D, 11-гидроксиэпотилона D, 19-оксазолилэпотилона D, 10,11-дегидроэпотилона D, 19-оксазолил-10,11-дегидроэпотилона D, 9,10-дегидроэпотилона B, 9,10-дегидроэпотилона D, 26-трифтор-9,10-дегидроэпотилона D и 26-трифтор-9,10-дегидроэпотилона B, в лекарственной форме вводимые субъекту, страдающему злокачественной опухолью или же нераковым заболеванием, характеризующимся клеточной пролиферацией, составляют приблизительно от 0,1 мг/м² и приблизительно до 200 мг/м² и могут быть введены в виде болюса (с использованием любого подходящего пути введения, включая пероральное или внутривенное введение) или в виде непрерывной инфузии (например, одночасовой, трехчасовой, шестичасовой, 24-часовой, 48-часовой или 72-часовой) еженедельно, раз в две недели или, по потребности, раз в три недели. Следует понимать, однако, что подбор конкретных уровней дозировки для того или иного пациента будет зависеть от многих различных факторов. Такие факторы включают в себя активность конкретно используемого соединения; возраст больного, вес его тела, общее состояние здоровья, пол и субъективные пристрастия в диете; время и путь введения, а также скорость выведения лекарственного средства; то, используется ли комбинированное лечение лекарственными средствами; и степень тяжести состояния, которое подлежит лечению.

В другом воплощении уровни дозировок составляют приблизительно от 10 мг/м² и приблизительно до 150 мг/м², предпочтительно примерно от 10 мг/м² и приблизительно до 75 мг/м² и более предпочтительно приблизительно от 15 мг/м² и приблизительно до 50 мг/м², в три недели раз, по необходимости и в зависимости от переносимости. В другом воплощении уровни дозировок составляют приблизительно от 1 мг и приблизительно до 150 мг/м², предпочтительно приблизительно от 10 мг/м² и приблизительно до 75 мг/м² и более предпочтительно приблизительно от 25 мг/м² и приблизительно до 50 мг/м², в две недели раз, по необходимости и в зависимости от переносимости. В другом воплощении уровни дозировок составляют приблизительно от 1 мг/м² и приблизительно до 100 мг/м², предпочтительно приблизительно от 5 мг/м² и приблизительно до 50 мг/м² и более предпочтительно приблизительно от 10 мг/м² и приблизительно до 25 мг/м², один раз в неделю, по необходимости и в зависимости от переносимости. В другом воплощении уровни дозировок составляют приблизительно от 0,1 мг/м² и приблизительно до 25 мг/м², предпочтительно приблизительно от 0,5 мг/м² и приблизительно до 15 мг/м² и более предпочтительно приблизительно от 1 мг/м² и приблизительно до 10 мг/м², ежедневно, по необходимости и в зависимости от переносимости.

В другом воплощении уровни дозировок составляют приблизительно от 0,1 мг/м² и приблизительно до 50 мг/м², предпочтительно приблизительно от 0,1 мг/м² и приблизительно до 25 мг/м² и более предпочтительно приблизительно от 0,5 мг/м² и приблизительно до 25 мг/м², раз в три недели, по необходимости и в зависимости от переносимости.

Для того чтобы убедиться в том, что уровни допустимой токсичности не превышены, проводили мониторинг побочных эффектов, включая периферическую нейропатию, которая может как таковая проявляться в виде ощущения оцепенения в нижних конечностях, головокружения и прочего. Мониторинг следует проводить по истечении определенного времени после введения (инфузии); обычно, чем ниже доза, тем продолжительнее интервал между введением и мониторингом. Например, при уровне дозировки от 9 до 60 мг/м² на инфузию мониторинг обычно начинают проводить на 5-й день и продолжают до 15-го дня; однако при более высоких дозах, таких как от 90 до 120 мг/м², мониторинг следует начинать на следующий день после завершения инфузии. Другие побочные эффекты могут включать в себя тошноту и рвоту, усталость, сыпь, алопецию и изменения в основных показателях жизненно важных функций, таких как ортостатическая гипотензия. Следует проводить мониторинг также и миелосупрессии, хотя обычно миелосупрессии под действием данного лекарственного средства не наблюдают. Миелосупрессия как таковая может проявляться в виде анемии, нейтропении, тромбоцитопении и прочего.

Фармакокинетика, как правило, благоприятная. Фармакокинетика не является зависимой от дозы, а кривая зависимости концентрации от времени выведения, AUC, при дозировках от 9 до 150 мг/м² имеет линейный характер. Время полужизни эпотилона D имело среднее значение порядка 9,6 ± 2,2 часа, а распределительный объем (Vz) составляет 172 ± 74 л, что указывает на хороший уровень проникновения лекарственного средства. Это в среднем несколько выше, чем те же показатели у паклитаксела, которые составляют 140 ± 70 л. Эти фармакокинетические параметры не меняются при второй инфузии по сравнению с первой инфузией.

Эффективность лекарственного средства можно подвергнуть мониторингу путем проведения количественной оценки формирования пучков микротрубочек в интерфазных клетках. Это считается приемлемым показателем эффективности агентов, стабилизирующих микротрубочки, таких как паклитаксел или эпотилон. Формирование пучков микротрубочек можно легко измерить методом иммунофлуоресценции или методом Вестерн-блоттинга. Обычно при таком определении у пациента отбирают цельную кровь и для оценки формирования пучков микротрубочек из нее выделяют мононуклеарные клетки (PBMC). Существенные значения формирования пучков микротрубочек получают при таких низких дозах, как 18 мг/м², и с повышением дозы это значение увеличивается. При 120 мг/м² почти все микротрубочки сформированы в пучки.

ПРИМЕРЫ

Следующие далее примеры, в помощь специалистам в данной области, иллюстрируют определенные аспекты настоящего изобретения для облегчения его реализации. Эти примеры никоим образом не призваны ограничить объем, охватываемый настоящим изобретением.

ПРИМЕР 1

Образование лиофилизата эпотилон D-гидроксипропил-β-циклодекстрин

Комбинацию десяти миллиграммов ("мг") эпотилона D и 0,4 граммов ("г") гидроксипропил-β-циклодекстрина ("HPβCD") растворяли в 60% растворе трет-бутанола в воде с получением 1 миллилитра ("мл") раствора. Получали второй раствор, содержащий десять мг эпотилона D и десять мг маннита, растворенного в 60% растворе трет-бутанола в воде. Получали также третий раствор, содержащий десять мг эпотилона D и десять мг маннита, растворенного в 60% растворе трет-бутанола в воде. Растворы композиций, содержащих десять мг/мл эпотилона D, вливали в 8-миллилитровые стеклянные флаконы для лиофилизации.

Каждый из трех растворов лиофилизировали с использованием коммерчески доступного аппарата для лиофилизации, с образованием превосходного лиофильного осадка. Лиофильный осадок, содержащий гидроксипропил-β-циклодекстрин, казался более твердым и менее гладким, чем два остальных осадка.

ПРИМЕР 2

Восстановление лиофилизата эпотилон D-гидроксипропил-β-циклодекстрина и растворимость в нормальном физиологическом растворе

Растворимости лиофилизатов, полученных, как было описано в разделе 0, определяли в различных восстанавливающих растворителях при температуре окружающей среды (т.е. при температуре приблизительно между 20°C и приблизительно 25°C). Приблизительно один мг эпотилона D помещали в стеклянную пробирку. В пробирках делали серийные разведения восстанавливающим раствором, получая растворы объемом в 100 микролитров ("мкл"), 900 мкл и 9,0 мл. После каждого добавления восстанавливающего раствора полученный раствор интенсивно перемешивали в течение тридцати секунд. При растворении лиофилизата определяли растворимость при разбавлении нормальным физиологическим раствором.

Только те лиофилизаты, которые были получены с использованием гидроксипропил-β-циклодекстрина, как оказалось, обладают удовлетворительной растворимостью (т.е. растворимостью, приблизительно большей, чем один мг/мл). Результаты, полученные в случае использования различных восстанавливающих растворителей, показаны в таблице. ("Wfl" означает воду, "PG" означает пропиленгликоль,"EtOH" означает этанол, а "PEG400" означает полиэтиленгликоль-400. Символ "D" означает растворение; а буква "P" означает преципитацию.)

Восстанавливающий Растворитель (% объем/объем) Растворимость, S(мг/мл) Растворимость после разведения нормальным физиологическим раствором 1:10/1:20/1:100 WfI/EtOH/Tween-80     10/65/25 1 ≤ S < 10 D// 20/55/25 1 ≤ S < 10 D// 40/35/25 1 ≤ S < 10 D// 62,5/12,5/25 1 ≤ S < 10 D// 60/20/20 2 ≤ S < 10 D/D/ 60/25/15 S ≥ 10 D/D/D 60/35/5 S ≥ 10 P// PG/EtOH/Wfl     40/10/50 0,1 ≤ S < 1,0 D//

Наилучшие результаты были получены при использовании трехкомпонентной системы растворителей: WfI/EtOH/Tween-80 = 60/25/15 (% объем/объем), которую можно было 100-кратно разбавлять в нормальном физиологическом растворе, не наблюдая при этом выпадения осадка. Композиции, в которых количество Tween-80 составляло более чем приблизительно 20% по объему или менее чем приблизительно 10% по объему, обладали менее удовлетворительными свойствами растворимости.

ПРИМЕР 3

Пероральная активность эпотилона D

Трем тестируемым группам, в каждую из которых входило по пять крыс, вводили либо внутривенную дозу эпотилона D (10 мг/кг), либо пероральную дозу эпотилона D 20 мг/кг, либо пероральную дозу эпотилона D 40 мг/кг. Образцы крови отбирали у крыс по прошествии 24-часового периода после введения дозировки. Абсолютная биодоступность при введении пероральных доз в 20 мг/кг и в 40 мг/кг изменялась соответственно в пределах от 7-10% и 10-20%. Время полужизни составляло 8 часов для групп внутривенного введения и 5,6-6 часов для групп перорального введения. Как и ожидалось, значение C_max оказалось значительно выше, а клиренс - быстрее при внутривенном введении дозировок.

В сходном исследовании трем собакам породы бигль внутривенно вводили одну дозу 2 мг/кг эпотилона D, а затем, с интервалами в одну неделю, через зонд вводили пероральные дозы 2 мг/кг и 4 мг/кг эпотилона D в том же самом носителе, что и при внутривенном введении (30% пропиленгликоль, 20% Chremophor® и 50% этанол), разбавленном 1:10. Образцы крови отбирали перед началом введения дозы, в конце инфузирования дозы или же непосредственно после введения пероральной дозы и через 48 часов после введения пероральной дозы. Проводили мониторинг гематологических и химических показателей крови с тем, чтобы перед введением очередной дозировки убедиться в том, что животные успели восстановиться (оправиться). У собак, которым внутривенно вводили эпотилон D, проявлялись заметные реакции гиперчувствительности, при этом, однако, пероральное введение переносилось ими очень хорошо.

Полученные у собак образцы плазмы крови изучали с помощью LC/MS/MS-анализа, ратифицированного в области от 2 нг/мл до 500 нг/мл, и полученные данные анализировали с использованием версии 4.1.1 компьютерной программы Kinetica (InnaPhase Corporation, Philadelphia, PA). Фармакокинетические параметры подсчитывали с помощью некомпартментализованного анализа и моделировали с использованием двухкомпартментной внесосудистой модели. Вычисленные AUC для пероральных доз, составляющих 2 мг/кг и 4 мг/кг, составляли 9,856 ± 3,879 нг*час/мл и 15,486 ± 8,060 нг*час/мл соответственно, а биодоступность при пероральном приеме составляла > 50%. Среднее время полужизни при пероральном приеме составляло 9,13 часов, при этом время полужизни при пероральном приеме 4 мг/кг оказалось несколько больше (10,9 часов вместо 6,4 часов - времени полужизни, полученном при введении дозы 2 мг/кг). Среднее значение клиренса при пероральном введении составляло 0,27 л/час/кг, V_ss = 2,57 л/кг, а MRT = 9,81 часа. Показатели клиренса, V_ss, MRT и времени полужизни были в основном такими же, какие наблюдались и при внутривенном введении лекарственного средства.

Полученные данные показали, что эпотилон D обладает хорошей биодоступностью при пероральном введении, что свидетельствует о том, что пероральное введение больным со злокачественной опухолью или же больным, страдающим другими гиперпролиферативными состояниями или заболеваниями, является вполне осуществимым.

ПРИМЕР 4

Композиция 9,10-дегидроэпотилона D

Концентрат для инъекций получали путем растворения транс-9,10-дегидроэпотилона D в концентрации 5 мг/мл в 70% (объем/объем) этаноле и 30% (объем/объем) пропиленгликоле. Концентрат для инъекций (2 мл ± 0,2 мл) стерильно переносили в 5-миллилитровые стеклянные сывороточные флаконы типа I (с горловиной в 22-мм), закрывали 20-миллиметровыми покрытыми тефлоном крышками и крышки запечатывали путем обжима крышек поверх белого лакированного металлического хомута. В процессе заполнения флаконов концентратом для инъекций для вытеснения воздуха использовали стерильный сухой азот.

Разбавленный препарат получали путем растворения гидроксипропил-β-циклодекстрина в концентрации 133 мг/мл в воде для инъекций. Растворитель (18 мл) асептически заливали в 20-миллилитровые стеклянные сывороточные флаконы типа I (с горловиной в 22-мм), закрывали 20-миллиметровыми покрытыми тефлоном крышками и крышки запечатывали путем обжима крышек поверх белого лакированного металлического хомута.

Парентеральную дозированную лекарственную форму транс-9,10-дегидроэпотилона D получали, отбирая 2 мл концентрата для инъекций и добавляя их во флакон, содержащий 18 мл растворителя. Полученный раствор, содержащий 0,5 мг/мл транс-9,10-дегидроэпотилона D, осторожно перемешивали. Полученную парентеральную дозированную лекарственную форму можно дополнительно растворить в физиологическом растворе (0,9% NaCl, вес/объем), чтобы получить растворы для инъекций, содержащие транс-9,10-дегидроэпотилон D в меньших концентрациях. Обычно такие разведения колеблются приблизительно от 0,05 мг/мл и приблизительно до 0,1 мг/мл, однако указанные пределы могут быть пересмотрены, в зависимости от конкретных терапевтических нужд.

Источники информации

Указанные ниже ссылки во всей их полноте включены в настоящее описание путем цитирования и для любых целей.

(1998). Ger. Offen. DE 19821954.

Altmann, K.-h., Bauer, A., et al. (1999). PCT Int. Appl. WO 9959985.

Arslanian, R. L., Ashley, G., et al. (2001). PCT Int. Appl. WO 0183800.

Avery, M. A. (2002). PCT Int. Appl. WO 0230356.

Beyer, S. and Mueller, R.-J. (2000). Ger. Offen. DE 19846493.

Bollag, D. M. (1997). "Epothilons: novel microtubule-stabilizing agents." Expert Opinion on Investigational Drugs 6 (7): 867-873.

Bollag, D. M., McQueney, P. A., et al. (1995). "Epothilons, a new class of microtubule-stabilizing agents with a taxol-like mechanism of action." Cancer Res 55 (11) : 2325-33.

Borzilleri, R. M., Kim, S.-H., et al. (2000). PCT Int. Appl. WO 0057874.

Buchmann, B., Klar, U., et al. (2000). PCT Int. Appl. WO 0000485.

Cabral, F. (2000). PCT Int. Appl. WO 0071752.

Chou, T.-C., O'Connor, O. A., et al. (2001). "The synthesis, discovery, and development of a highly promising class of microtubule stabilization agents: curative effects of desoxyepothilons B and F against human tumor xenografts in nude mice." Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 98 (14) : 8113-8118.

Chou, T. C., Zhang, X. G., et al. (1998a). "Desoxyepothilon B is curative against human tumor xenografts that are refractory to paclitaxel." Proc Natl Acad Sci U S A 95 (26): 15798-802.

Chou, T.-C., Zhang, X.-G., et al. (1998b). "Desoxyepothilon B is curative against human tumor xenografts that are refractory to paclitaxel." Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 95 (26): 15798-15802.

Colevas, A. D., West, P. J., et al. (2001). "Clinical trials referral resource. Current clinical trials of epothilon B analog (BMS-247550)." Oncology (Huntingt) 15 (9): 1168-9, 1172-5.

Cowden, C. J. and Paterson, I. (1997). "Synthetic chemistry. Cancer drugs better than taxol?" Nature 387 (6630): 238-9.

Danishefsky, S. J., Balog, A., et al. (1999a). PCT Int. Appl. WO 9943653.

Danishefsky, S. J., Balog, A., et al. (1999b). PCT Int. Appl. WO 9901124.

Danishefsky, S. J., Bertinato, P., et al. (2001 a). U. S. 6204388.

Danishefsky, S. J., Lee, C. B., et al. (2001b). PCT Int. Appl. WO 0164650.

Danishefsky, S. J., Stachel, S. J., et al. (2002). U. S. Pat. Appl. Publ. 20020058286.

DeMario, M. D. and Ratain, M. J. (1998). "Oral Chemotherapy: Rationale and Future Directions." J Clin Oncol 16 (8): 2557-2567.

Dimarco, J. D., Gougoutas, J. Z., et al. (2002). PCT Int. Appl. WO 0214323.

Gennaro, A. R., Ed. (2000). Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia, Lipincott Williams & Wilkins.

Georg, G. I., Nair, S. K., et al. (2000). PCT Int. Appl. WO 0058254.

Gtafsson, C. and Betlach, M. C. (2000). U. S. 6090601.

Harris, C. R., Balog, A., et al. (1999a). "Epothilons: microtubule stabilizing agents with enhanced activity against multidrug-resistant cell lines and tumors." Actualites DE Chimie Therapeutique 25: 187-206.

Harris, C. R., Kuduk, S. D., et al. (1999b). "New Chemical Synthesis of the Promising Cancer Chemotherapeutic Agent 12,13-Desoxyepothilon B: Discovery of a Surprising Long-Range Effect on the Diastereoselectivity of an Aldol Condensation." Journal of the American Chemical Society 121 (30): 7050-7062.

Hoefle, G., Bedorf, N., et al. (1993). Ger. Offen. DE 4138042.

Hoefle, G. and Glaser, N. (2002). PCT Int. Appl. WO 0224712.

Hoefle, G., Glaser, N., et al. (2000a). Ger. Offen. DE 19907588.

Hoefle, G., Glaser, N., et al. (2000b). PCT Int. Appl. WO 0050423.

Hoefle, G. and Kiffe, M. (1997). Ger. Offen. DE 19542986.

Hoefle, G., Reichenbach, H., et al. (1999). PCT Int. Appl. WO 9965913.

Hofle, G., Glaser, N., et al. (2000). Eur. Pat. Appl. Ep 987268.

Hofle, G. and Kiffe, M. (1997). PCT Int. Appl. WO 9719086.

Hofle, G. and Sefkow, M. (1998). PCT Int. Appl. WO 9838192.

Hofmann, H., Mahnke, M., et al. (1999). PCT Int. Appl. WO 9942602.

Julien, B., Katz, L., et al. (2002). U. S. 6410301.

Julien, B., Katz, L., et al. (2000). PCT Int. Appl. WO 0031247.

Khosla, C. and Pfeifer, B. (2002). PCT Int. Appl. WO 0268613.

Kim, S.-H. and Borzilleri, R. M. (1999). PCT Int. Appl. WO 9927890.

Kim, S.-H. and Johnson, J. A. (1999). PCT Int. Appl. WO 9928324.

Kim, S.-H. and Johnson, J. A. (2000). PCT Int. Appl. WO 0071521.

Kim, S.-h. and Johnson, J. A. (2001). U. S. 6320045.

Klar, U., Gay, J., et al. (2001). PCT Int. Appl. WO 0166154.

Klar, U., Schwede, W., et al. (1999a). Ger. Offen. DE 19735575.

Klar, U., Schwede, W., et al. (1999b). Ger. Offen. DE 19735574.

Koch, G. and Loiseleur, O. (2002). PCT Int. Appl. WO 0257251.

Kuesters, E. and Unternaehrer, H. (2002). PCT Int. Appl. WO 0246196.

Kumar, A. M., Klein, J. P., et al. (2001). PCT Int. Appl. WO 0126693.

Lee, F. Y. (2001). PCT Int. Appl. WO 0172721.

Lee, F. Y., Borzilleri, R., et al. (2001). "BMS-247550: a novel epothilon analog with a mode of action similar to paclitaxel but possessing superior antitumor efficacy." Clin Cancer Res 7 (5): 1429-37.

Lee, F. Y. F. (2002a). PCT Int. Appl. WO 0266033.

Lee, F. Y. F. (2002b). PCT Int. Appl. WO 0266038.

Li, W., Matson, J. A., et al. (2000). PCT Int. Appl. WO 0039276.

Li, W.-s., Thornton, J. E., et al. (2002). PCT Int. Appl. WO 0260904.

Li, W. S., Thornton, J. E., et al. (2001). PCT Int. Appl. WO 0170716.

Martin, N. and Thomas, E. J. (2001). "Total syntheses of epothilons B and D: applications of allylstannanes in organic synthesis." Tetrahedron Letters 42 (47): 8373-8377.

McDaid, H. M., Mani, S., et al. (2002). "Validation of the Pharmacodynamics of BMS-247550, an Analogue of Epothilon B, during a Phase I Clinical Study." Clin Cancer Res 8 (7): 2035-43.

Muhlradt, P. F. and Sasse, F. (1997). "Epothilon B stabilizes microtubuli of macrophages like taxol without showing taxol-like endotoxin activity." Cancer Res 57 (16): 3344-6.

Mulzer, J. and Mantoulidis, A. (1998). Ger. Offen. DE 19726627.

Mulzer, J. and Mantoulidis, A. (1999). PCT Int. Appl. WO 9903848.

Mulzer, J., Mantoulidis, A., et al. (2000). Ger. Offen. DE 19848306.

Mulzer, J. and Martin, H. (2001). PCT Int. Appl. WO 0107439.

Nicolaou, C. K., He, Y., et al. (1998). PCT Int. Appl. WO 9825929.

Nicolaou, K. C., He, Y., et al. (2002a). U. S. 6441186.

Nicolaou, K. C., Hepworth, D., et al. (1999a). PCT Int. Appl. WO 9967253.

Nicolaou, K. C., King, N. P., et al. (2002b). U. S. 6380394.

Nicolaou, K. C., King, N. P., et al. (1999b). PCT Int. Appl. WO 9967252.

Oza, A., Zamek, R. M., et al. (2000). "A phase I and pharmacologic trial of weekly epothilon B in patients with advanced malignancies." Annals of Oncology 1l (Suppl. 4): 133.

Reichenbach, H., Hofle, G., et al. (1998). PCT Int. Appl. WO 9822461.

Santi, D., Ashley, G., et al. (2002a). U. S. Pat. Appl. Publ. 20020052028.

Santi, D., Fardis, M., et al. (2001). PCT Int. Appl. WO0192255.

Santi, D., Metcalf, B., et al. (2002b). PCT Int. Appl. WO 0208440.

Santi, D. V., Ashley, G., et al. (2002c). PCT Int. Appl. WO 0212534.

Schinzer, D., Limberg, A., et al. (1997). Ger. DE19636343.

Schinzer, D., Limberg, A., et al. (1998). PCT Int. Appl. WO 9808849.

Schupp, T., Ligon, J. M., et al. (1999). PCT Int. Appl. WO 9966028.

Service, R. F. (1996). "Tumor-killer made; how does it work?" Science 274 (5295): 2009.

Smith, A. B., Beauchamp, T. J., et al. (2002). U. S. Pat. Appl. Publ. 20020103387.

Strohhaecker, J. (2001). PCT Int. Appl. WO 0160976.

Su, D.-S., Meng, D., et al. (1997). "Total synthesis of (-)-epothilon B: an extension of the Suzuki coupling method and insights into structure-activity relationships of the epothilons." Angewandte Chemie, International Edition in English 36 (7): 757-759.

Van Hoogevest, P. (1999). PCT Int. Appl. WO 9939694.

Vite, G. D., Borzilleri, R. M., et al. (1999a). PCT Int. Appl. WO 9954330.

Vite, G. D., Borzilleri, R. M., et al. (1999b). PCT Int. Appl. WO 9902514.

Vite, G. D., Kim, S.-H., et al. (2001). PCT Int. Appl. WO 0173103.

Vite, G. D., Kim, S.-H. K., et al. (1999c). PCT Int. Appl. WO 9954318.

Vite, G. D., Kim, S.-H. K., et al. (1999d). PCT Int. Appl. WO 9954319.

Wessjohann, L. A. and Gabriel, T. (1998). Ger. Offen. DE 19701758.

Wessjohann, L. A. and Kalesse, M. (1998). Ger. Offen. DE 19713970.

Wessjohann, L. A. and Scheid, G. (2002). Ger. Offen. DE 10051136.

Wessjohann, L. A., Scheid, G., et al. (2002). PCT Int. Appl. WO 0232844.

White, J. D., Carter, R. G., et al. (2002). U. S. Pat. Appl. Publ. 20020062030.

Winkler, J. D. and Axelsen, P. H. (1996). "A model for the taxol (paclitaxel)/epothilon pharmacophore." Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 6 (24): 2963-2966.

Yamaguchi, H., Paranawithana, S. R., et al. (2002). "Epothilon B analogue (BMS-247550)-mediated cytotoxicity through induction of Bax conformational change in human breast cancer cells." Cancer Res 62 (2): 466-71.

Изобретение относится к области фармакологии и медицинской химии. Описана фармацевтическая композиция для перорального введения, включающая 9,10-дегидроэпотилон вместе с фармацевтически приемлемым носителем. По второму варианту фармацевтическая композиция для перорального введения включает транс-9,10-дегидроэпотилон D и фармацевтически приемлемый носитель, содержащий гидроксипропил-β-циклодекстрин, этанол и пропиленгликоль. Концентрат для инъекций включает 9,10-дегидроэпотилон D в фармацевтически приемлемом носителе. Композиции по изобретению обеспечивают хорошую биодоступность эпотилона D. 3 н. и 18 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Фармацевтическая композиция для перорального введения, включающая в себя 9,10-дегидроэпотилон вместе с фармацевтически приемлемым носителем, в которой 9,10-дегидроэпотилон представлен в терапевтически приемлемой концентрации для введения пациенту.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой 9,10-дегидроэпотилон представляет собой 9,10-дегидро-12,13- дезоксиэпотилон.

3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой 9,10-дегидроэпотилон представляет собой 9,10-дегидроэпотилон D.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой 9,10-дегидроэпотилон представляет собой транс-9,10-дегидроэпотилон D.

5. Фармацевтическая композиция по п.1, которая включает в себя по меньшей мере один циклодекстрин.

6. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой циклодекстрин выбран из группы, состоящей из β-циклодекстрина, гидроксипропил-β-циклодекстрина и сульфопропил-β-циклодекстрина.

7. Фармацевтическая композиция по п.6, в которой циклодекстрин представляет собой гидроксипропил-β-циклодекстрин.

8. Фармацевтическая композиция по п.5, которая дополнительно включает в себя гликоль.

9. Фармацевтическая композиция по п.8, в которой гликоль представляет собой пропиленгликоль.

10. Фармацевтическая композиция по п.5, которая дополнительно включает в себя этанол.

11. Фармацевтическая композиция по п.8, которая дополнительно включает в себя этанол.

12. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой фармацевтически приемлемый носитель включает в себя циклодекстрин, этанол, пропиленгликоль.

13. Фармацевтическая композиция для перорального введения, включающая в себя транс-9,10-дегидроэпотилон D в фармацевтически приемлемом носителе, где фармацевтически приемлемый носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин, этанол и пропиленгликоль.

14. Фармацевтическая композиция по п.13, в которой фармацевтически приемлемый носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин в количестве, составляющем приблизительно между 5% объем/объем и приблизительно 20% объем/объем, этанол в количестве, составляющем приблизительно между 5% объем/объем и приблизительно 20% объем/объем, и пропиленгликоль в количестве, составляющем приблизительно между 1% объем/объем и приблизительно 10% объем/объем.

15. Фармацевтическая композиция по п.13, в которой фармацевтически приемлемый носитель включает в себя гидроксипропил-β-циклодекстрин в количестве, составляющем приблизительно 12% объем/объем, этанол в количестве, составляющем приблизительно 7% объем/объем, и пропиленгликоль в количестве, составляющем приблизительно 3% объем/объем.

16. Фармацевтическая композиция по п.13, в которой фармацевтически приемлемый носитель в основном состоит из гидроксипропил-β-циклодекстрина в количестве, составляющем приблизительно 12% объем/объем, этанол в количестве, составляющем приблизительно 7% объем/объем, и пропиленгликоль в количестве, составляющем приблизительно 3% объем/объем в воде.

17. Концентрат для инъекций, включающий 9,10-дегидроэпотилон D в фармацевтически приемлемом носителе, причем 9,10-дегидроэпотилон D представлен в терапевтически приемлемой концентрации для разведения концентрата для инъекций и введения пациенту.

18. Концентрат для инъекций по п.17, в котором фармацевтически приемлемый носитель включает в себя этанол и пропиленгликоль.

19. Концентрат для инъекций по п.17, в котором фармацевтически приемлемый носитель включает в себя этанол в количестве, составляющем приблизительно между 50% объем/объем и приблизительно 90% объем/объем, вместе с пропиленгликолем в количестве, составляющем приблизительно между 10% объем/объем и приблизительно 50% объем/объем.

20. Концентрат для инъекций по п.19, в котором фармацевтически приемлемый носитель включает в себя этанол в количестве, составляющем приблизительно 70% объем/объем, и пропиленгликоль в количестве, составляющем приблизительно 30% объем/объем.

21. Концентрат для инъекций по п.17, в котором 9,10-дегидроэпотилон D представляет собой транс-9,10-дегидроэпотилон D.