Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям с компонентами из лишайника бородатого (Usnea barbata), пригодным для применения прежде всего при кожных болезнях, которые проявляются воспалениями и ускоренным старением кожи в результате воздействия солнечных лучей и кислородных радикалов. Такие фармацевтические композиции можно применять также при кожных болезнях, возникновению которых способствуют различные дрожжевые грибы и бактерии.
К кожным болезням себорейного характера относятся угри, хронический дерматоз лица (розацеа) и себорейная экзема. Возникновению подобных кожных болезней способствуют различные бактерии, прежде всего Propionibacterium acnes или коринебактерии, а также дрожжевые грибы, прежде всего Pityrosporon. Помимо этого болезням себорейного характера присущи воспаления волосяных фолликул и окружающей их ткани. Подобные кожные болезни значительно снижают качество жизни страдающих ими людей. Легкие формы подобных болезней и их формы средней тяжести обычно лечат различными местными терапевтическими средствами. К обычным лечебным средствам подобного рода относятся отшелушивающие средства (например, пероксид бензоила, гликолевая кислота), антибиотики (например, эритромицин, клиндамицин, тетрациклин) и производные ретиноевой кислоты.
Лечение кожных болезней подобными обычными действующими веществами по разным причинам связано с проблемами. Несмотря на эффективность местного применения антибиотиков к ним, однако, может развиться резистентность. Развитие резистентности к антибиотикам в свою очередь сопровождается появлением новых проблем, поскольку антибиотики используют также при других тяжелых инфекционных заболеваниях. Пероксид бензоила вызывает раздражение кожи и помимо этого обесцвечивает белье. Ретиноевая кислота также вызывает выраженное раздражение кожи. Указанные вещества не обладают сколько-нибудь существенным противовоспалительным действием.
Кожные болезни себорейного характера (угри) часто создают значительные проблемы у страдающих ими людей. Поскольку раздражения кожи появляются прежде всего на лице, они могут стать причиной тяжелых психических расстройств. Поэтому существует потребность в эффективных фармацевтических композициях, которые, во-первых, позволяли бы эффективно и быстро устранять нежелательные симптомы, а во-вторых, обладали бы минимально возможными побочными действиями.
Из уровня техники известны различные препараты, которые в качестве действующих веществ содержат растительные компоненты.
В публикации WO 02/094300, озаглавленной "Herbal Compositions for the Treatment of mucosal Lesions", описаны терапевтические композиции, пригодные для борьбы с воспалительными заболеваниями слизистой оболочки вирусного происхождения. Подобные композиции содержат экстракты растений видов Echinacea purpurea и Sambucus nigra, а также экстракты по меньшей мере одного другого растения, выбранного из группы, включающей Hypericum perforatum, Commiphora molmol и Centella asiatica. Такие основные композиции могут содержать экстракты других растений, выбранных из группы, включающей Uncaria tomentosa, Thymus vulgaris, Matricaria recutita, Salix alba. Calendula officinalis, Usnea barbata, Ligusticum porterii, Gaultheria procumbens. Camellia sinensis, Vaccinium myrtillus, Melissa officinalis, Allium sativum и Crameria triandra. Из всех возможных комбинаций 19-ти различных растений, указанных в данной публикации, не очевидно, какая из них обладает особым эффектом. Кроме того, в публикации WO 02/094300 нигде не упоминаются заболевания себорейного характера и, в частности, угри. Более того, в указанной публикации речь преимущественно идет о вирусных воспалительных заболеваниях слизистой оболочки, о воспалительных заболеваниях слизистой оболочки иной этиологии и о реакциях на укусы насекомых.
В JP 52468876 говорится о возможном наличии у экстрактов лишайников антибактериального действия против грампозитивных бактерий.
В публикации WO 02/051427 описаны стабильные экстракты Hypericum perforatum, а также фармацевтические композиции, содержащие подобный экстракт, и лекарственные средства для местного применения, предназначенные для лечения угрей, атопического дерматита, псориаза и иных заболеваний аналогичного типа.
В публикации ЕР 1131063 описано применение гиперфорина из Hypericum perforatum в качестве антибактериального компонента, пригодного для лечения кожных болезней.
При создании изобретения неожиданно было установлено, что применение комбинации экстрактов Usnea barbata и Hypericum perforatum способствует неожиданному усилению противовоспалительного действия соответствующих отдельных компонентов. Помимо этого применение указанной комбинации экстрактов приводит к полному ингибированию индуцируемой ультрафиолетовым излучением активации коллагеназы. Особенно неожиданным при создании изобретения оказался тот факт, что применение комбинации экстрактов Usnea barbata и Hypericum perforatum приводит к неожиданной стабилизации важного для проявления лечебного действия гиперфорина. Благодаря этому удается объединить и усилить противовоспалительные и противомикробные действия, проявляемые индивидуально обоими отдельными компонентами.
Облучение кожи ультрафиолетовым излучением спектра В (УФ (В)) вызывает ее покраснение и воспаление, которые при их более сильном проявлении называют солнечным ожогом (Dermatitis solaris). Важным фактором возникновения солнечного ожога является продуцирование простагландина Е2 (PGE2) кератиноцитами. Важную роль при вызываемом ультрафиолетовым излучением воспалении кожи играют кислородные радикалы. Кислородные радикалы, активируя рецептор эпидермального фактора роста (EGF-фактора), приводят к позитивной регуляции циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2). ЦОГ-2 в свою очередь катализирует образование простагландина PGE2 (Ashida и др., Experimental Dermatology, 12, 2003, с.445-452).
Предлагаемая в изобретении композиция позволяет эффективно ингибировать индуцируемый ультрафиолетовым излучением синтез простагландина PGE2. При создании изобретения неожиданно было установлено, что экстракт Usnea barbata с определенным содержанием усниновой кислоты ингибирует индуцируемый ультрафиолетовым излучением синтез простагландина PGE2 в кератиноцитах.
Ультрафиолетовое облучение кожи ускоряет также ее старение. Вследствие образования кислородных радикалов и провоспалительных цитокинов в фибробластах соединительной ткани кожи активируется такой фермент, как матриксная металлопротеиназа-1 (ММП-1) (Scharfetter и др., Archives of Dermatological Research, 283, 1991, с.506-511). ММП-1 называют также коллагеназой. Коллагеназа ускоряет разложение коллагена-1, который является важным компонентом соединительной ткани кожи. В результате активации коллагеназы происходит преждевременное, ускоренное старение кожи.
Предлагаемая в изобретении композиция позволяет эффективно ингибировать индуцируемую ультрафиолетовым излучением активацию ММП-1 (коллагеназы). При создании изобретения неожиданно было установлено, что экстракт Usnea barbata позволяет ингибировать индуцируемую ультрафиолетовым излучением положительную регуляцию коллагеназы в фибробластах. Подобное действие экстракта Usnea barbata можно дополнительно усилить при его использовании в комбинации с экстрактом Hypericum perforatum.
Объектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, отличающиеся тем, что они содержат СО2-экстракт Usnea barbata в количестве от 0,001 до 20 мас.%, предпочтительно от 0,01 до 10 мас.%, и СО2-экстракт зверобоя обыкновенного (Hypericum perforatum) в количестве от 0,01 до 80 мас.%, предпочтительно от 0,01 до 20 мас.%. Приведенные в массовых процентах данные указаны в пересчете на массу готовой фармацевтической композиции.
Согласно изобретению используют СО2-экстракт Usnea barbata (лишайника бородатого). Основным среди активных компонентов подобного экстракта является усниновая кислота, которая встречается в двух энантиомерных формах, а именно: в виде (+)-9bR-усниновой кислоты и в виде (-)-9bS-усниновой кислоты. Исходят из того, что в фармацевтике и косметике преимущественно используют прежде всего (+)-усниновую кислоту из-за ее биоцидного действия. В рассматриваемом случае предпочтительно использовать рацемат или (+)-9bR-усниновую кислоту.
Методы выделения усниновой кислоты из лишайников (Usnea barbata) известны из уровня техники (см., например, DE 3213095). При экстракции этими методами в качестве экстрагента используют органические растворители или спирт.
Недостаток этих известных методов состоит в том, что экстракция не обеспечивает уменьшение содержания вредных веществ в экстракте. Однако уменьшение содержания вредных веществ в экстракте имеет важное значение постольку, поскольку бородатые лишайники способны накапливать вредные вещества из окружающей атмосферы и осадков (например, тяжелые металлы). Поэтому в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно использовать экстракты Usnea barbata, полученные экстракцией под высоким давлением с использованием СО2 в качестве экстрагента. Преимущество этого метода экстракции состоит в отсутствии в получаемом экстракте тяжелых металлов и остатков растворителя. СО2-экстракция позволяет выделять усниновую кислоту в практически чистом виде.
В предлагаемых в изобретении фармацевтических композициях можно использовать экстракты Usnea barbata, полученные экстракцией под высоким давлением с использованием СО2 в качестве экстрагента. Преимущество этого метода экстракции состоит в отсутствии в получаемом экстракте остатков растворителя. СО2-экстракция позволяет выделять усниновую кислоту в практически чистом виде. Подобные экстракты, к которым добавляют растительное масло и эмульгаторы, являются коммерчески доступными продуктами (например, выпускаются под названием Flavex® фирмой Naturextrakte GmbH). Содержание действующего вещества в фармацевтической композиции можно регулировать добавлением фармацевтически приемлемых добавок и таким путем доводить его до требуемого.
Используемые экстракты лишайников содержат от 2 до 7 мас.%, предпочтительно от 3 до 5 мас.%, наиболее предпочтительно около 4 мас.%, усниновой кислоты. В СО2-экстракте в качестве другой лишайниковой кислоты присутствуют также производные усниновой кислоты в количестве до 0,5 мас.%, предпочтительно до 0,2 мас.%, наиболее предпочтительно до 0,1 мас.%.
Экстракт Usnea barbata, применение которого предпочтительно согласно изобретению, получают особым способом с использованием вызывающей набухание угольной кислоты под высоким давлением. При этом лекарственное растительное сырье (растительный материал) подвергают после его предварительного кондиционирования экстракционной обработке надкритическим СО2. Полученный таким путем неочищенный (сырой) экстракт содержит около 60% усниновой кислоты. На второй стадии очистки экстракта от усниновой кислоты практически полностью отделяют неактивные или нежелательные липофильные примеси, такие как летучие масла, жирные кислоты, углеводороды, хлорофиллы и другие лишайниковые кислоты.
Таким способом получают предпочтительный согласно изобретению СО2-экстракт в виде порошка, цвет которого варьируется от светло-желтоватого до слегка зеленоватого и который содержит около 92±5% усниновых кислот, тогда как отделенные от неочищенного экстракта компоненты, которые имеют вид темно-зеленого вязкого масла, направляют в отходы. Тем самым обеспечивают практически полное отделение от природной усниновой кислоты, представляющей собой производное дибензофурана без карбоксигруппы, возможно присутствующие в лишайниках потенциально аллергенные кислоты типа депсидонов или алифатические кислоты, характеризующиеся наличием одной или двух карбоксигрупп. На фиг.1 показана полученная методом жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР) хроматограмма очищенного СО2-экстракта лишайника бородатого с общим содержанием усниновых кислот 96,8%, из которых 88,3% приходится на (±)-усниновую кислоту, а 8,5% приходится на производное усниновой кислоты (изоусниновую кислоту).
В фармацевтических препаратах может потребоваться применять действующие вещества в низкой концентрации. В этом случае экстракты для снижения концентрации действующих веществ (например, для снижения концентрации усниновой кислоты до 4%, а гиперфорина - до 10%) разбавляют пригодными для этой цели разбавителями, такими, например, как триглицериды и эмульгаторы.
Несмотря на опубликованную в соответствующей литературе информацию о случаях аллергии к лишайниковым кислотам сенсибилизирующая способность лишайников считается незначительной и обусловлена не усниновой кислотой, а иными лишайниковыми кислотами. Поэтому в предлагаемых в изобретении фармацевтических композициях предпочтительно использовать очищенные СО2-экстракты с общим содержанием усниновых кислот по меньшей мере 85%. Содержание же в подобных СО2-экстрактах других лишайниковых кислот, которые могут вызывать аллергию, предпочтительно не должно превышать 0,1 мас.%, наиболее предпочтительно не должно превышать 0,1 мас.%.
Из литературы известно, что различные виды лишайников рода Usnea и усниновая кислота обладают широким спектром антибактериального действия и что поэтому они пригодны для лечения поверхностных инфекций и кожных язв. Накопленный при исследовании антибактериального действия усниновой кислоты опыт обобщен в обзорной статье авторов Cocchietto M. и др. (Naturwissenschaften, 89, 2002, с.137-146).
Другим важным компонентом предлагаемых в изобретении фармацевтических композиций является экстракт зверобоя обыкновенного (Hypericum perforatum). Зверобой широко и издавна используют в фитомедицине. Важным компонентом зверобоя является действующее вещество гиперфорин.
Поскольку для предлагаемого в изобретении применения наиболее важное значение имеет прежде всего действие гиперфорина, используют СО2-экстракт Hypericum perforatum. СО2-экстракты Hypericum perforatum в качестве биологически активных компонентов содержат практически только гиперфорины из группы ацилфлороглюцинов и практически не содержат гиперицины из группы нафтодиантронов. В СО2-экстрактах зверобоя отсутствуют также флавонолгликозиды, проантоцианидины, хлорофиллы и хлорогеновые кислоты.
Гиперфорин является антибактериальным веществом, содержащимся в зверобое (Hypericum perforatum} и пригодным для лечения воспалительных кожных болезней (ЕР 1131063). Это вещество обладает ярко выраженной липофильностью и поэтому хорошо растворимо лишь в неполярных растворителях и жирах. При эмульгировании гиперфорина в водных растворах наблюдается его быстрое разложение. Эту проблему можно устранить за счет перевода гиперфорина в его различные соли. В такой солевой форме гиперфорин стабилен при хранении (WO 99/41220). Однако при введении солей гиперфорина в водный раствор свободный гиперфорин диссоциирует и равным образом быстро разлагается.
Согласно изобретению предпочтительно использовать СО2-экстракт Hypericum perforatum. Такой экстракт получают из верхушек стеблей и цветков Hypericum perforatum путем экстракционной обработки, вызывающей набухание угольной кислотой при высоком давлении. Известно, что в ранний вегетационный период верхушки стеблей цветущего Hypericum perforatum содержат в основном гиперицины, тогда как на более поздней стадии цветения в них преобладают гиперфорины. При использовании оптимального в этом отношении сырья, которое для его экстракционной обработки подвергнуто щадящей переработке и кондиционированию, возможно получение СО2-экстрактов с общим содержанием гиперфоринов до 40%. В этом общем содержании гиперфоринов обычно от 82 до 86% приходится на гиперфорин и от 14 до 18% - на адгиперфорин. На фиг.2 показана ЖХВР-хроматограмма высококачественного СО2-экстракта с общим содержанием гиперфорина 40%, из которых 34,1% приходится на гиперфорин, а 5,9% - на адгиперфорин.
В предпочтительном варианте в используемом согласно изобретению экстракте зверобоя содержание гиперицина должно быть ниже предела его обнаружения. При анализе используемого согласно изобретению экстракта зверобоя путем ЖХВР в стандартных условиях гиперицин в нем не обнаруживается.
При создании настоящего изобретения неожиданно было установлено, что при применении комбинации из обоих указанных выше экстрактов наблюдается синергетический эффект, который существенно превышает действие, которое можно было бы наблюдать при простом сложении эффектов, проявляемых каждым экстрактом по отдельности.
Гиперфорин как таковой является нестабильным веществом. Однако при создании изобретения неожиданно было установлено, что применяемый согласно изобретению экстракт Usnea barbata способствует значительной стабилизации гиперфорина.
При применении экстракта зверобоя в комбинации с экстрактом лишайника противовоспалительное действие каждого из этих индивидуальных компонентов возрастает примерно в десять раз. Тем самым комбинация экстракта зверобоя с отрегулированным содержанием гиперфорина и экстракта лишайника с отрегулированным содержанием усниновой кислоты позволяет достичь неожиданного повышения фармацевтического действия.
Объектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, отличающиеся тем, что они содержат СО2-экстракт Usnea barbata в количестве от 0,001 до 20 мас.% и СО2-экстракт Hypericum perforatum в количестве от 0,01 до 80 мас.%, предпочтительно от 0,01 до 20 мас.%.
В предпочтительном варианте предлагаемая в изобретении фармацевтическая композиция содержит от 0,11 до 10 мас.% экстракта Usnea barbata и от 10 до 60 мас.% экстракта Hypericum perforatum. Наиболее предпочтительным является сочетание из 6 мас.% экстракта Usnea barbata и 40 мас.% экстракта Hypericum perforatum.
Наиболее предпочтительная технология приготовления фармацевтической композиции предусматривает совместную гомогенизацию 6 мас.% экстракта Usnea barbata и 40 мас.% экстракта зверобоя в коллоидной мельнице и обладает следующими преимуществами. Выявленное стабилизирующее действие усниновой кислоты на экстракт зверобоя целесообразно использовать на как можно более ранней технологической стадии. С этой целью труднорастворимый порошок концентрированной усниновой кислоты, экстрагированной из лишайника, переводят в жидкую форму добавлением растительного масла и эмульгатора(-ов). Далее в коллоидной мельнице частицы усниновой кислоты размалывают в щадящем режиме до размера менее 5 мкм. Затем аналитически точно измеряют содержание действующих веществ - гиперфорина и усниновой кислоты - в полученном гомогенизате, которое должно соответствовать количествам смешанных между собой индивидуальных компонентов, т.е. при приготовлении концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя не должна происходить реакция разложения действующих веществ. Переработка действующих веществ в виде их гомогенизата обеспечивает их ускоренное растворение и более равномерное распределение в готовом продукте. Таким путем получают концентрат, представляющий собой предварительную композицию, идеально пригодную для ее последующей переработки в предлагаемые в изобретении композиции для местного (наружного) применения. Такой концентрат, которым не ограничивается возможный конечный состав лекарственной формы, можно использовать и в гидрофильных, и в липофильных конечных продуктах. ЖХВР-хроматограмма подобного комбинированного экстракта представлена на фиг.3.
Предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя предпочтительно использовать в основах, предназначенных для местного применения лекарственных форм в концентрации от 0,01 до 10%. Более предпочтительно использовать такой концентрат в концентрации от 0,5 до 5%, наиболее предпочтительно около 2%. Подобная концентрация соответствует концентрации гиперфорина в готовом продукте около 0,3% и концентрации усниновой кислоты около 0,1%. Приведенные в % данные соответствуют массовым процентам в пересчете на готовый препарат.
Концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя прежде всего во введенном в основу водного геля виде представляет собой препарат, наиболее пригодный для лечения угрей и нечистой кожи. Другой возможной областью применения концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя является предотвращение вызываемого ультрафиолетовым излучением воспаления и старения кожи.
Концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя в другом предпочтительном варианте можно также вводить в иные широко известные безжировые гелевые основы. Вместе с тем благодаря липофильности компонентов концентрата его можно также вводить в липидные фазы, представленные, например, в виде липогелей, кремов, примочек, лосьонов и мазей.
Концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя пригоден не только для лечения вызываемых микробами кожных болезней, таких как угри и нечистая кожа. Благодаря своему не зависящему от этого противомикробного действия выраженному противовоспалительному действию подобная комбинация экстрактов в высшей степени пригодна также для лечения воспалительных кожных болезней, таких как экземы, красный лихен и псориаз, прежде всего при поражении ими лица и покрытой волосами части головы.
В остальном фармацевтическая композиция наряду с концентратом из экстрактов лишайника и зверобоя содержит различные добавки, тип которых зависит от выбранной лекарственной формы. Наряду с основами для гелей, мазей, примочек, лосьонов, настоек и иных аналогичных лекарственных форм фармацевтические композиции при необходимости могут содержать консерванты, антиокислители, пахучие вещества, красители и иные добавки. Очевидно, что суммарное количество всех индивидуальных компонентов готового препарата должно составлять 100 мас.% в пересчете на всю его массу.
В предпочтительном варианте предлагаемые в изобретении фармацевтические композиции представляют собой лекарственные формы для местного применения. Такие лекарственные формы для местного применения используют прежде всего при локальном лечении болезней кожи и реже при системных заболеваниях.
В фармации известно множество лекарственных форм для местного или наружного применения. Широко распространенными лекарственными формами для местного применения при дерматологических заболеваниях являются мази. При приготовлении мазей фармакологическое действующее вещество растворяют или суспендируют в полутвердой мазевой основе. Речь при этом обычно идет о гидрофобных, пригодных для намазывания мазях, препятствующих испарению влаги из кожи. Однако именно для лечения угрей применение мазей не предпочтительно, поскольку мазевая основа может способствовать возникновению нечистой кожи. При других же заболеваниях, например, при чешуйчатом лишае, как раз может оказаться предпочтительным введение предлагаемой в изобретении фармацевтической композиции в мазевую основу. В качестве мазевой основы часто используют жидкие, полутвердые и даже твердые углеводороды, обычно извлекаемые из нефти. Вместе с тем вполне можно использовать и природные воски (например, пчелиный воск или масло жожоба) либо синтетические воски, такие как цетилэфирные воски. В состав мазей можно также включать органические масла, прежде всего оливковое масло или хлопковое масло. Варьируя пропорции смешиваемых между собой отдельных компонентов, можно регулировать консистенцию готовой мази.
В следующем варианте предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя можно использовать в составе кремов. Речь при этом идет о полутвердых эмульсиях, более жидких и легче распределяемых по поверхности кожи по сравнению с мазями. Основные компоненты кремов способны поглощать небольшие количества воды и пригодны для переработки в эмульсии. Подобные кремы обычно могут смываться водой и не закупоривают поры кожи. Они являются нежирными и при нанесении на кожу придают ей приемлемый внешний вид. Кремы обычно состоят из двух фаз, одной из которых является маслоподобная внутренняя фаза, образованная преимущественно углеводородами и высокомолекулярными спиртами или жирными кислотами. Кремы содержат также водную фазу, которая часто содержит консерванты, влагоудерживающие вещества и буферные вещества. Помимо этого в состав кремов обычно входит один или несколько эмульгаторов. В качестве таких эмульгаторов часто используют анионогенные поверхностно-активные вещества, такие как лаурилсульфат натрия или стеарат триэтаноламина, а также неионогенные поверхностно-активные вещества, такие, например, как производные этиленоксида. Применение катионогенных поверхностно-активных веществ, таких как четвертичные аммониевые соли, менее предпочтительно, поскольку они нередко могут вызывать раздражение кожи.
Для улучшения растворимости фармацевтических действующих веществ кремы могут содержать жидкие и воскоподобные компоненты, такие, например, как полиэтиленгликоль.
В одном из предпочтительных вариантов предлагаемые в изобретении фармацевтические композиции включают в состав водных гелей. В водных гелях их жидкую водную внутреннюю фазу иммобилизуют в трехмерной матрице. Такую систему получают приготовлением коллоидных дисперсий неорганических веществ с молекулами небольшого размера или органических веществ с крупными молекулами в водной среде. В качестве гелеобразующих веществ предпочтительно использовать неионогенные или анионогенные производные целлюлозы, такие, например, как натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, кислые карбоксивиниловые полимеры или другие гидрофильные коллоиды, такие как алюмосиликат магния, альгинат натрия или трагакант.
Предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя в следующем предпочтительном варианте можно также использовать также в составе примочек, лосьонов или растворов, при этом в качестве эмульгатора предпочтительно можно применять пропиленгликоль. Применение пропиленгликоля в количестве от 5 до 10% позволяет эмульгировать липофильный экстракт с образованием геля.
В другом варианте предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя можно также использовать в составе присыпки. Фармацевтическую композицию именно при ее применении на жирной коже может оказаться предпочтительным перерабатывать в присыпку, которую часто приготавливают на неорганической основе. В качестве основ присыпок предпочтительно использовать порошковые, впитывающие и обладающие высокой кроющей способностью прилипающие к коже нетоксичные вещества. Предпочтительно при этом использовать диоксид кремния, осажденный мел, карбонат магния, оксид цинка, а также тальк и смеси этих основ между собой. При приготовлении подобной лекарственной формы предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя обязательно должен быть представлен в форме, в которой основы присыпок могли бы впитывать, соответственно адсорбировать его. Для этого, например, можно растворить одну часть концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя в девяти частях 97%-ного этанола и распылением нанести полученный раствор на частицы диоксида кремния.
Предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя можно, кроме того, включать в состав водного геля, приобретающего твердую структуру за счет добавления в него соответствующих веществ с получением в результате карандашей, предпочтительно прозрачных, которые содержат фармацевтическую композицию и могут использоваться для обработки особых нечистых участков кожи. Подобные карандаши в предпочтительном варианте содержат многоатомные алифатические спирты, предпочтительно с 2-6 атомами углерода, такие как этиленгликоль, пропиленгликоль, триметиленгликоль, глицерин и смеси этих соединений между собой.
Для придания водному гелю жесткости можно также использовать насыщенные или ненасыщенные высшие жирные кислоты, предпочтительно с 14-22 атомами углерода. В качестве примера подобных кислот можно назвать миристиновую кислоту, пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту, олеиновую кислоту, линоленовую кислоту или смеси этих жирных кислот между собой.
При приготовлении галеновых препаратов предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя предпочтительно перерабатывать в наноэмульсию. Подобную наноэмульсию предпочтительно затем вводить в основу водного геля.
Предпочтительная гелевая основа содержит карбомер 50000, 2-пропанол, пропиленгликоль и воду (см. пример 1 рецептуры). Предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя предпочтительно можно также перерабатывать в другие водные лекарственные формы, такие как лосьоны, спреи, туалетная вода для лица и эмульсии для кожи головы. Наиболее предпочтительный водный раствор содержит комбинированный экстракт в эссенции из октилдодеканола, 2-пропанола, пропиленгликоля и воды.
При приготовлении некоторых лекарственных форм может оказаться предпочтительным добавление к ним гептагидрата сульфата цинка в концентрации от 0,5 до 1,5%, предпочтительно 1,0%.
Помимо введения предлагаемого в изобретении концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя в системы на водной основе он пригоден также для включения в состав кремов, лосьонов для умывания, липогелей и мазей, принципиальный состав которых широко известен.
Предлагаемый в изобретении концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя особо пригоден и для приема внутрь в капсулах. Для этого концентрат вводят в соответствующей концентрации в высококачественное растительное масло и полученную смесь в защищенных от света и воздействия кислорода условиях расфасовывают в непрозрачные твердожелатиновые капсулы. Равным образом концентрат можно перерабатывать и в расфасовываемую в капсулы микроэмульсию. В капсулах концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя можно применять для лечения кожных болезней, характеризующихся микробной инфекцией и воспалением. Принимаемые внутрь капсулы пригодны прежде всего для интенсивной терапии главным образом затяжных заболеваний себорейного характера, например, угрей и розацеа.
Концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя используется так же, как антибиотик, и не содержит вредных веществ и консервантов. Действующие вещества благодаря их липофильности способны особенно легко проникать в сальные железы, где они проявляют свое противомикробное действие. Однако при необходимости фармацевтические препараты могут также содержать вещества, способствующие ускоренному впитыванию действующих веществ.
Предлагаемые в изобретении фармацевтические композиции позволяют получить продукт на природной основе, который обладает высокой эффективностью по отношению к микроорганизмам-возбудителям кожных болезней себорейного характера и независимо от этого дополнительно проявляет противовоспалительное действие. Противовоспалительное действие предлагаемых в изобретении фармацевтических композиций было подтверждено в опыте с пролиферацией лимфоцитов, в опыте по ингибированию индуцируемого ультрафиолетовым излучением синтеза простагландина, а также в опыте с моделированием эритемы, возникающей под воздействием ультрафиолетового излучения.
Тем самым препараты с предлагаемым в изобретении концентратом из экстрактов лишайника и зверобоя могут благодаря их природным свойствам эффективно использоваться для лечения угрей и аналогичных кожных болезней. Применение предлагаемого в изобретении концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя позволяет добиться одновременного высокоэффективного действия против вызывающих угревую сыпь бактерий и против дрожжевых грибов Pityrosporon. Помимо этого подобный комбинированный экстракт обладает также противовоспалительным действием и не раздражает кожу. Кроме того, препараты с концентратом из экстрактов лишайника и зверобоя противодействуют вызываемому ультрафиолетовым излучением воспалению и ускоренному старению кожи.
В составе предназначенного для нанесения на кожу лица препарата концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя наиболее предпочтительно использовать в сочетании с фотозащитным компонентом (фактором). Пригодные для применения в этих целях фотозащитные факторы могут представлять собой химические и/или минеральные УФ-фильтры и достаточно хорошо и давно известны.
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения в качестве фотозащитного фактора добавляют CO2-экстракт из корня ратании (Krameria lappacea). СО2-экстракт ратании не содержит никаких полимерных катехиновых дубителей, наличие которых более чем нежелательно в случае чувствительной кожи, а содержит липофильные фенолы неолигнанового и норнеолигнанового типов. Тем самым экстракт ратании представляет собой хорошо переносимый кожей высококачественный фильтр ультрафиолетовых лучей спектров А2 и В с высокой фотостабильностью, эффективно задерживающий оптическое излучение в диапазоне длин волн менее 340 нм. Прозрачность же экстракта ратании для длинноволнового ультрафиолетового излучения спектра А1 с длинами волн в диапазоне от 340 до 400 нм желательна при многих показаниях. Экстракт ратании дополнительно усиливает противомикробное и противовоспалительное действие предлагаемого в изобретении концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя и благодаря своему защищающему от воздействия ультрафиолетового излучения действию может вносить дополнительный вклад в повышение стабильности гиперфорина в гидрофильных готовых препаратах. СО2-экстракт ратании получают аналогично другим рассмотренным выше в настоящем описании СО2-экстрактам, и он содержит по меньшей мере 60 мас.%, предпочтительно по меньшей мере 80 мас.%, активных компонентов.
На фиг.1 показана ЖХВР-хроматограмма концентрированного СО2-экстракта лишайника бородатого с общим содержанием усниновых кислот примерно 96,8 мас.%.
На фиг.2 показана ЖХВР-хроматограмма СО2-экстракта зверобоя обыкновенного с общим содержанием гиперфоринов примерно 40 мас.%.
На фиг.3 показана ЖХВР-хроматограмма совместно гомогенизированных СО2-экстрактов зверобоя обыкновенного и лишайника бородатого.
На фиг.4 в графическом виде представлено антипролиферативное действие различных СО2-экстрактов, одним из которых является СО2-экстракт зверобоя, другим - СО2-экстракт лишайника, а третьим - смесь СО2-экстрактов зверобоя и лишайника. Пролиферацию определяли путем люминесцентного анализа содержания аденозинтрифосфата (АТФ) (при возбуждении светом).
На фиг.5 в графическом виде представлено противовоспалительное действие полученного из лишайника экстракта, который наносили на кожу испытуемых в составе водного геля с концентрацией 5%. Предлагаемую в изобретении фармацевтическую композицию можно использовать для лечения воспаления кожи, вызываемого ультрафиолетовыми лучами спектра В. В соответствии с этим предлагаемые в изобретении фармацевтические композиции пригодны также для лечения воспалений кожи, обусловленных чрезмерным воздействием солнечных лучей (солнечного ожога).
На фиг.6 в графическом виде представлено зависящее от дозы облучения ингибирующее действие экстракта лишайника на индуцируемый ультрафиолетовым излучением синтез простагландина.
На фиг.7 в графическом виде представлено ингибирующее действие экстракта лишайника на индуцируемую ультрафиолетовым излучением положительную регуляцию матриксной металлопротеиназы-1 (ММП-1) и усиление такого ингибирующего действия при применении комбинации экстракта лишайника и экстракта зверобоя.
Ниже изобретение проиллюстрировано на примерах.
Пример 1 рецептуры: водный гель с пропиленгликолем
а) 3% экстракта зверобоя (Hypericum perforatum)
2% экстракта лишайника (Usnea barbata)
Гелевая основа до 100,0
Гелевая основа
б) 1% концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя
Гелевая основало 100,0
Гелевая основа
Пример 2 рецептуры: туалетная вода для лица
а) 3% экстракта зверобоя (Hypericum perforatum)
2% экстракта лишайника (Usnea barbata)
1% гептагидрата сульфата цинка
Спиртовая эссенция до 100,0
Спиртовая эссенция
Используемые экстракты
Экстракт зверобоя: "СО2-экстракт зверобоя", фирма FLAVEX.
Экстракт лишайника бородатого: "Водорастворимый СО2-экстракт лишайника бородатого", фирма FLAVEX.
б) 2% концентрата из экстрактов лишайника и зверобоя
1% гептагидрата сульфата цинка
Спиртовая эссенция до 100,0
Спиртовая эссенция
Пример 1: Противомикробное действие CO2-экстракта лишайника бородатого
Действие СО2-экстракта лишайника бородатого (Usnea barbata L.) на ряд аэробных и анаэробных бактерий исследовали в опыте с разведением агаром в соотношениях 1:10, 1:50, 1:100, 1:500 и 1:1000. Очищенную усниновую кислоту исследовали в концентрациях 128, 64, 32, 16, 8, 4, 2, 1, 0,5, 0,25 и 0,125 мкг/мл. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) представляет собой ту концентрацию действующего вещества, при которой оно ингибирует рост бактерий более чем на 90% в течение 24 ч. Минимальная бактерицидная концентрация (МБК) представляет собой ту концентрацию действующего вещества, при которой оно ингибирует рост бактерий более чем на 90% в течение 48 ч. При создании изобретения неожиданно было установлено, что бактерии Propionibacterium acnes с высокой чувствительностью реагируют на экстракт лишайника и усниновую кислоту. Полученные результаты приведены в таблице 1.
Помимо этого исследовали также действие 1%-ного экстракта лишайника в оливковом масле на дрожжевые грибы Pityrosporon в сравнении с действием 1%-ного амфотерицина. С этой целью чешуйки кожи больных себорейной экземой пациентов наносили на агар Сабуро и покрывали сверху слоем масла. После четырехдневной инкубации в термостате подсчитывали количество колониеобразующих единиц (КОЕ). Экстракт лишайника и амфотерицин полностью ингибировали рост дрожжевых грибов Pityrosporon, однако их рост не ингибировался оливковым маслом при его индивидуальном применении. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Пример 2: Усиление антипролиферативного действия комбинации экстракта зверобоя и экстракта лишайника
Мерой противовоспалительной активности действующих веществ может служить степень ингибирования пролиферации активированных лимфоцитов. Поэтому исследовали ингибирующее действие экстракта лишайника на пролиферацию лимфоцитов. Помимо этого исследовали, может ли экстракт лишайника усиливать известное ингибирующее действие СО2-экстракта зверобоя на пролиферацию лимфоцитов. С этой целью с использованием градиента плотности фиколла выделяли лимфоциты периферической крови и высевали их в лунки титрационных микропланшетов в количестве 100000 клеток/мл. Затем клетки стимулировали фитогемагглютинином, который добавляли в концентрации 1 мкг/мл, и инкубировали в течение 24 ч с добавлением или без добавления экстрактов растений, соответственно растворителя в качестве контроля. Для исследования приготавливали следующие маточные растворы: 25% экстракта лишайника в 70%-ном этаноле, 25% экстракта зверобоя в этаноле, 12,5% экстракта лишайника и 12,5% экстракта зверобоя в этаноле. Все маточные растворы использовали в серийных разведениях в пропорции, изменявшейся от 1:100 до 1:3200. Затем определяли пролиферацию клеток, измеряя содержание АТФ (при возбуждении светом). 50%-ное ингибирование пролиферации клеток (IC50) экстрактом лишайника достигалось уже при разведении 1:400. При создании изобретения неожиданно было установлено, что добавление экстракта лишайника к экстракту зверобоя не только приводит к аддитивному действию, но и усиливает его антипролиферативное действие (фиг.4).
Пример 3: Противовоспалительное действие в опыте с вызванной ультрафиолетовым излучением эритемой
Семь здоровых испытуемых подвергали воздействию ультрафиолетовых лучей спектра В с дискретно возрастающей дозой облучения. Затем опытные участки кожи на спине испытуемых облучали дозой, которая в 1,5 раз превышала минимальную эритемную дозу (МЭД). Тестируемые вещества на 24 ч помещали в лунки Финна. Вызванную ультрафиолетовым излучением эритему определяли фотометрически перед облучением и после воздействия тестируемых веществ. При этом было установлено, что 5%-ный экстракт лишайника позволяет ингибировать обусловленное ультрафиолетовым излучением воспаление столь же эффективно, что и кортизоновый препарат предникарбат (Dermatop) (фиг.5).
Пример 4: Стабилизация гиперфорина добавлением экстракта лишайника
При создании изобретения неожиданно было установлено, что применение комбинации из экстракта зверобоя со стандартизованным содержанием гиперфорина, равным 10%, и экстракта лишайника со стандартизованным содержанием усниновой кислоты, равным 4%, в составе водного геля с пропиленгликолем приводит к повышению стабильности гиперфорина на 100% (таблица 3).
В таблице 3 приведены данные о стабилизирующем действии СО2-экстракта лишайника на СО2-экстракт зверобоя. Из приведенных в таблице 3 данных со всей очевидностью следует, что добавление СО2-экстракта лишайника почти вдвое увеличивает содержание гиперфорина. Подобная стабилизация гиперфорина во времени имеет исключительно важное значение для фармацевтических и косметических продуктов, поскольку они должны обладать стойкостью при хранении в течение максимально длительного периода времени без разложения действующих веществ.
Пример 5: Стабилизация гиперфорина комбинацией экстракта зверобоя и экстракта лишайника в опыте с облучением светом
Для моделирования готового к применению конечного продукта предпочтительный согласно изобретению предварительно приготовленный в коллоидной мельнице концентрат из экстрактов лишайника и зверобоя растворяли в предпочтительной концентрации 2% в триглицеридах со средней длиной цепи. Измеренное содержание гиперфорина в готовом составе составило 0,305%. В сравнительных целях в триглицеридах со средней длиной цепи также в 2%-ной концентрации растворяли приготовленную аналогичным путем предварительную композицию, содержавшую только экстракт зверобоя без экстракта лишайника, при этом измеренное содержание гиперфорина в готовом составе составило 0,313%. По 5 г каждого из жидкотекучих масляных составов разливали на поверхности стеклянных пластин, на которых при этом они растекались с образованием тонких масляных пленок толщиной около 1 мм. Обе стеклянные пластины подвергали воздействию дневного света вне помещения, при этом тонкие масляные пленки образуют большую по площади поверхность, подверженную воздействию света и кислорода. С обеих стеклянных пластин с определенными интервалами времени брали образцы масляных пленок и с помощью ЖХВР определяли содержание в них гиперфорина. Таким путем можно отслеживать разложение гиперфорина в обоих готовых составах. В конце серий измерений содержание гиперфорина в составе, содержавшем только экстракт зверобоя без экстракта лишайника, составило 0,057%, тогда как выявленное по истечении такого же промежутка времени содержание гиперфорина в составе со смесью экстрактов зверобоя и лишайника составило 0,117%, т.е. было вдвое выше. Тем самым еще раз подтверждается более высокая стабильность гиперфорина и в разбавленных формах применения, содержащих комбинацию из экстракта зверобоя и экстракта лишайника.
Пример 6: Ингибирование индуцируемого ультрафиолетовым излучением продуцирования простагландина Е2 (PGE2) экстрактом лишайника
Кератиноциты линии НаСаТ (100000 клеток/мл) культивировали до конфлюэнтности в чашках Петри с культуральной средой (RPMI-среда с 10% фетальной телячьей сыворотки (ФТС)). Затем культуральную среду заменяли на фосфатный буфер и насыщали циклооксигеназу добавлением арахидоновой кислоты (АК). Одну из смесей оставляли в темноте, а другую смесь облучали ультрафиолетовыми лучами спектра В в дозе 30 мДж/см2. Обе смеси после добавления культуральной среды и после добавления экстракта лишайника в разных концентрациях инкубировали в течение 24 ч. Затем удаляли надосадочные жидкости и путем твердофазного иммуноферментного анализа (R&D Systems) определяли продуцирование простагландина PGE2.
Зависящее от дозы облучения ингибирующее действие экстракта лишайника на индуцируемый ультрафиолетовым излучением синтез простагландина в графическом виде представлено на фиг.6.
Пример 7: Ингибирование индуцируемой ультрафиолетовым излучением положительной регуляции матриксной металлопротеиназы-1 (ММП-1) экстрактом лишайника и комбинацией из экстракта лишайника и экстракта зверобоя
Первичные человеческие фибробласты выделяли из кожи человека путем ферментации и культивировали в несколько пересевов в культуральной среде (модифицированная по способу Дульбекко среда Игла с 10% ФТС) в чашках Петри. Затем клетки высевали в чашки Петри в количестве 100000 клеток/мл и после прикрепления инкубировали совместно со средой, экстрактом лишайника и экстрактом зверобоя. В одной из смесей культуральную среду заменяли на фосфатный буфер и клетки облучали ультрафиолетовыми лучами спектра А1 (в ч дозе 60 Дж/см2). После добавления культуральной среды часть облученных клеток в течение 24 ч инкубировали с экстрактом лишайника или комбинацией из экстракта лишайника и экстракта зверобоя с концентрацией по 0,1 об.%. Затем клетки лизировали на льду и определяли активность ММП-1 соответствующим методом анализа ферментативной активности ММП-1 (R&D Systems).
Ингибирующее действие экстракта лишайника на индуцируемую ультрафиолетовым излучением положительную регуляцию матриксной металлопротеиназы-1 (ММП-1) и усиление такого ингибирующего действия при применении комбинации экстракта лишайника и экстракта зверобоя в графическом виде представлено на фиг.7.
Помимо этого на фиг.5 в графическом виде представлено противовоспалительное действие полученного из лишайника экстракта, который наносили на кожу испытуемых в составе водного геля с концентрацией 5%. Предлагаемую в изобретении фармацевтическую композицию можно использовать для лечения воспаления кожи, вызываемого ультрафиолетовыми лучами спектра В. В соответствии с этим предлагаемая в изобретении фармацевтическая композиция пригодна также для лечения воспалений кожи, обусловленных чрезмерным воздействием солнечных лучей (солнечного ожога).
Пример 8: Применение геля. содержащего экстракт лишайника, и геля, содержащего экстракты лишайника и зверобоя, при угрях
Применение на 3-х пациентах предлагаемого в изобретении геля, состав которого указан в примере 1 рецептуры, позволило за две недели вылечить изменения кожи на лице пациентов.
Полученные в этом примере результаты приведены в таблице 4.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТВЕРДОГО ЭКСТРАКТА, ОБОГАЩЕННОГО УСНИНОВОЙ КИСЛОТОЙ, ИЗ СЛОЕВИЩ ЛИШАЙНИКА РОДА "Cladonia" | 2014 |
|
RU2582978C2 |
| КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АТОПИЧЕСКИХ ДЕРМАТИТОВ, АЛЛЕРГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ КОЖИ И УГРЕЙ | 2004 |
|
RU2361601C2 |
| Косметическая композиция против воспалений на коже для использования в составе косметических средств | 2017 |
|
RU2646494C1 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ГИПЕРФОРИНА, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ СОСТАВЫ | 2003 |
|
RU2320636C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ГИПЕРФОРИНА, ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ И ПРЕПАРАТЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ЭТИ ПРОИЗВОДНЫЕ | 1999 |
|
RU2240304C2 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО РАДИОЗАЩИТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ | 1996 |
|
RU2123857C1 |
| СПОСОБ ЭКСТРАКЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ ЗВЕРОБОЯ ПРОДЫРЯВЛЕННОГО (Hypericum perforatum L.) | 2014 |
|
RU2568912C1 |
| Способ выделения гиперфорина и адгиперфорина из травы зверобоя продырявленного | 2019 |
|
RU2720457C1 |
| Способ установления подлинности и качества зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.) | 2015 |
|
RU2614200C1 |
| УВЛАЖНЯЮЩИЙ КРЕМ С ТВЕРДЫМИ ЛИПИДНЫМИ НАНОЧАСТИЦАМИ | 2012 |
|
RU2491911C1 |
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для лечения кожи. Фармацевтическая композиция, содержащая СО2-экстракт лишайника бородатого и СО2-экстракт зверобоя обыкновенного, взятые в определенном количестве. Применение композиции - для приготовления медикамента, предназначенного для лечения кожной болезни себорейного характера. Применение фармацевтической композиции для приготовления медикамента, предназначенного для лечения болезней себорейного характера, при этом медикамент представляет собой медикамент для приема внутрь. Применение композиции для приготовления медикамента, предназначенного для лечения лучевых поражений кожи. Применение композиции для приготовления медикамента, предназначенного для лечения и профилактики старения кожи. Вышеописанная композиция эффективна для лечения кожной болезни себорейного характера, лучевых поражений кожи, угрей. 5 н. и 14 з.п. ф-лы, 4 табл., 7 ил.
1. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что она содержит CO2-экстракт лишайника бородатого в количестве от 0,01 до 20 мас.% и CO2-экстракт зверобоя обыкновенного в количестве от 0,01 до 80 мас.%.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что она содержит экстракт лишайника бородатого в количестве от 0,11 до 10 мас.% и экстракт зверобоя обыкновенного в количестве от 0,11 до 10 мас.%.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что она содержит экстракт лишайника бородатого в количестве от 0,5 до 5 мас.% и экстракт зверобоя обыкновенного в количестве от 0,5 до 5 мас.%.
4. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что СО2-экстракт лишайника бородатого содержит от 3 до 6 мас.% усниновой кислоты.
5. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что СО2-экстракт лишайника бородатого содержит по меньшей мере 85 мас.% усниновой кислоты.
6. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что СО2-экстракт зверобоя обыкновенного содержит от 5 до 15 мас.% гиперфорина.
7. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что СО2-экстракт зверобоя обыкновенного содержит по меньшей мере 40 мас.% гиперфорина.
8. Фармацевтическая композиция по одному из предыдущих пунктов, отличающаяся тем, что она представляет собой водный гель.
9. Фармацевтическая композиция по одному из пп.1-7, отличающаяся тем, что она представляет собой примочку или лосьон.
10. Фармацевтическая композиция по одному из пп.1-7, отличающаяся тем, что она представляет собой мазь.
11. Фармацевтическая композиция по одному из пп.1-7, отличающаяся тем, что она представляет собой отвержденный гель, применяемый в виде карандаша.
12. Фармацевтическая композиция по одному из пп.1-7, отличающаяся тем, что она представляет собой присыпку.
13. Применение композиции по одному из пп.1-12 для приготовления медикамента, предназначенного для лечения кожной болезни себорейного характера.
14. Применение по п.13, отличающееся тем, что кожная болезнь представляет собой угри.
15. Применение по п.13 или 14, отличающееся тем, что композиция представляет собой препарат для местного применения.
16. Применение фармацевтической композиции по одному из пп.1-7 для приготовления медикамента, предназначенного для лечения болезней себорейного характера, отличающееся тем, что медикамент представляет собой медикамент для приема внутрь.
17. Применение композиции по одному из пп.1-12 для приготовления медикамента, предназначенного для лечения лучевых поражений кожи.
18. Применение по п.17, отличающееся тем, что поражение кожи возникло в результате воздействия на нее солнечного излучения.
19. Применение композиции по одному из пп.1-12 для приготовления медикамента, предназначенного для лечения и профилактики старения кожи.
| СТЕНД-ТРЕНАЖЕР ВОДОЛАЗА | 1993 |
|
RU2094300C1 |
| DE 10131641 A1, 27.06.2002 | |||
| JP 6345625 A, 20.12.1994. | |||
