СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА ПАНТОГЕМАТОГЕНА Российский патент 2009 года по МПК A61K35/14 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в производстве лечебно-профилактических препаратов из крови пантовых оленей.

Известен способ производства пантогематогена, включающий забор крови у маралов и пятнистых оленей в момент срезки пантов, дефибринирование крови, смешивание с 96%-ным спиртом-ректификатом, сахарным сиропом, фруктовой эссенцией, аскорбиновой кислотой с последующей пастеризацией продукта при 53°С в течение 1 ч 45 мин.

Однако, при дефибринировании крови теряется (с фибрином) 25% форменных элементов (в среднем из крови маралов и пятнистых оленей), при этом потеря общего белка составляет свыше 24%. Кроме этого использование пантогематогена, полученного данным способом, недопустимо для пациентов с непереносимостью спиртосодержащих препаратов, а также лечении болезней, где спиртсодержащие формы противопоказаны. В процессе пастеризации необходим четкий контроль температурного режима, что усложняет процесс, а превышение температуры даже на несколько градусов сопряжено с коагуляцией белков крови (см. «Пантовое оленеводство», В.Н.Егерь, Н.Г.Деев, учебник, М., «Колос», 1994, с.52-53).

Известен способ производства пантогематогена, включающий забор крови у маралов и пятнистых оленей, стабилизацию крови и ее смешивание со спиртом, глюкозой, фруктовой эссенцией и аскорбиновой кислотой с последующей пастеризацией продукта токами высокой частоты в течение 2 часов при температуре 48-50°С.

Однако поддержание столь незначительного колебания температуры для обеспечения качественных показателей продукта требует высокой точности контроля, в противном случае могут быть последствия, аналогичные с предыдущим аналогом, тем более, что в данном способе используется цельная кровь, а видимое выпадение в осадок (коагуляция) фибриногена наступает уже при 55°С (см. патент РФ №2200016, A61K 35/14, опубл. 2003.03.10).

Известен способ производства пантогематогена, путем консервирования дефибринированной крови пантовых оленей 96%-ным этиловым спиртом - 5,2-5,6%, с добавлением сахарного сиропа - 35-37%, фруктовой эссенции - 0,4-0,6% и аскорбиновой кислоты - 0,09-0,11%. Содержание дефибринированной крови в данном продукте составляет 56-60%.

Однако дефибринирование сопряжено с потерей свыше 24% общего белка крови, а использование в качестве консерванта этилового спирта способствует денатурации белков и кроме этого сужает область применения препарата, в частности в связи с индивидуальной непереносимостью части взрослых пациентов спиртсодержащих препаратов, а также при лечении детей и лечении болезней, где спиртсодержащие формы противопоказаны (см. патент РФ №2008008, A61K 35/14, опубл. 1994.02.08 - прототип).

Необходима разработка способа производства пантогематогена, позволяющего повысить качество продукта путем использования цельной крови и исключения денатурации белка, а также расширить область применения препарата.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе производства пантогематогена, включающем взятие крови у пантовых оленей, смешивание с сахарным сиропом, фруктовой эссенцией, аскорбиновой кислотой и консервантом, используют цельную стабилизированную кровь, а в качестве консерванта препарат «Цитросепт грейпфрутовый» при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Цельная стабилизированная   кровь марала, пятнистого оленя 62-64 Сахарный сироп 35-37 Фруктовая эссенция 0,4-0,6 Аскорбиновая кислота 0,08-0,1 Препарат «Цитросепт грейпфрутовый» 0,2-0,3

Препарат «Цитросепт грейпфрутовый» представляет собой экстракт биофлавоноидов семян грейпфрута (33%) и витамина С (т.н. комплекс витамина С). Препарат выпускается в виде капель внутреннего и наружного применения по 10, 20, 50, 100 мл во флаконе с капельным дозатором (10 мл = 260 капель). «Цитросепт» содержит исключительно растительные компоненты. Сто миллилитров препарата в жидкой форме содержит гликозиды, 19,4 г биофлавоноидов (кверцетин, гесперидин, нарингин и др.) и 4,9 г витамина С, в состав входит вода и пальмовый глицерол. Не содержит спирта и химических компонентов. Фармакологические свойства препарата: противогрибковое (фунгицидное и фунгистатическое), антибактериальное, противовирусное. «Цитросепт» обладает высокой биодоступностью, хорошей переносимостью, безопасностью, не разрушает внутреннюю микрофлору. В медицине препарат применяют при кандидозах, дерматозах, смешанных грибково-бактериальных поражениях кожи и ногтевых пластин, при лечении дыхательных путей, стоматологии, гастроэнтерологии, интоксикациях различной этиологии, лечении ран, ожогов, атеросклерозе и т.д. «Цитросепт» принимают в дозах 10-25 капель (0,38-0,96 мл) 2-3 раза в день в разведении с 100-250 мл любой жидкости. Препарат выпускается фирмой «Чинтамани интернэшнл» (Норвегия), представительство в России - ООО «Чинтамани» (Москва).

С целью выявления возможности использования препарата «Цитросепт», в качестве консерванта при производстве пантогематогена и доз, обеспечивающих сохранность пантогематогена в пределах 12-13 месяцев срока годности, были проведены исследования. В процессе опыта были приготовлены опытные образцы пантогематогенов заявленным способом и по прототипу, исключив пастеризацию данных образцов. Температура окружающей среды в течение 17 месяцев поддерживалась на уровне 22-26°С. Бактериальную обсемененность определяли с 0,5 до 17 месяцев методом последовательных разведений, посев проводили на чашки Петри с мясопептонным агаром и дальнейшим инкубированием в термостате при +37°С. Цвет, запах и консистенцию определяли органолептическим методом.

Таблица 1 Срок хранения пантогематогенов, месяц Количество «Цитросепта» в 100,0 г пантогематогена, г Пантогематоген прототип (без пастеризации) 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,5 н о н о н о н о н о н о н о 1 н о н о н о н о н о н о 13×10⁵ 2 н о н о н о н о н о н о   3 н о н о н о н о н о н о   4 н о н о но н о н о н о   5 9×10⁵ н о н о н о н о н о   6   н о н о н о н о н о   7   н о н о н о н о н о   8   н о н о н о н о н о   9   11×10⁵ н о н о н о н о   10     н о н о н о н о   11     н о н о н о н о   12     н о н о н о н о   13     н о н о н о н о   14     н о н о н о н о   15     н о н о н о н о   16     8×10⁵ н о н о н о   17       10×10⁵ н о н о   н о - роста колоний не обнаружено

Согласно таблице 1 видно, что в пантогематогене, консервированном препаратом «Цитросепт» в дозах 0,05 и 0,1 г, рост колоний обнаружен на 5 и 9 месяц соответственно. При этом в течение последующего месяца у данных образцов цвет из темно-вишневого перешел в коричневый, появился гнилостный запах, плотная с хлопьями консистенция с пузырьками брожения. У пантогематогена, изготовленного по прототипу (без пастеризации), такая же картина наблюдалась на 30-й день проведения эксперимента. Пантогематоген, консервированный в дозах 0,2-0,5 г, на протяжении 13-15 месяцев имел темно-вишневый цвет, фруктовый запах и жидкую консистенцию.

По окончании опыта был проведен биохимический анализ пантогематогена, приготовленного заявленным способом и по прототипу. Пантогематоген по прототипу в данном случае был приготовлен одновременно с опытным (17 месяцев назад), но при соблюдении всех технологических требований (в частности, наличие пастеризации). Биохимические показатели анализируемых пантогематогенов приведены в таблицах 2, 3.

Таблица 2 Показатели, % Заявленный пантогематоген Пантогематоген по прототипу Вода 60,03 60,52 Жир 2,21 1,05 Белок 21,04 17,75 Зола 2,45 1,90 Таблица 3 Аминокислотный состав образцов Аминокислота, % Заявленный пантогематоген Пантогематоген по прототипу 1. Треонин 0,88 0,68 2. Триптофан 0,13 0,13 3. Серин 0,73 0,69 4. Изолейцин 0,27 0,10 5. Глицин 0,77 0,53 6. Аланин 0,76 0,67 7. Валин 0,68 0,59 8. Метионин 0,28 0,10 9. Лейцин 0,67 0,92 10. Глутамин 2,27 1,78 11. Пролин 0,00 0,00 12. Фенилаланин 1,40 0,69 13. Лизин 1,53 1,05 14. Аргинин 0,87 0,85 15. Метионин + Цистин 0,59 0,50 Общее количество 11,83 9,28

Согласно биохимическому анализу (таб.2, 3) пантогематоген, изготовленный заявленным способом, содержит на 52,5% больше жира, 15,63% белка, 22,5% золы и 21,6% аминокислот. Анализируемые пантогематогены (заявленный и прототип) исследовали на биологическую активность (на мышах).

Таблица 4 Наименование теста Заявленный способ (n=21) Прототип (n=21) Контроль (n=21) Адаптогенное действие, мин 103,2±13,6 64,6±5,2 31,1±3,3 Тонизирующее действие, мин 67,4±5,9 48,3±4,4 23,7±2,7 Вертикальная решетка + + + Открытое поле (после пробежки за 5 минут) 33,5±3,5 21,6±2,2 12,3±1,9 «Челночные пробежки» (число пробежек за 5 минут) 19,6±2,9 15,9±3,1 11,2±2,8 «Лестница» (количество ступеней за 5 минут) 17,4±2,6 12,5±2,3 7,4±1,4 «Горячая пластинка», с 8,5±2,6 10,3±2,1 9,5±1,7

Эксперименты были выполнены на 63-х мышах самцах массой тела 19-21 г. Первой опытной группе заявленный пантогематоген задавали в дозе 10 мл/кг при помощи зонда в течение 20 дней, второй опытной группе пантогематоген (прототип) по такой же схеме. Контрольным животным давали физиологический раствор. Результаты исследований отражены в таблице 4.

В ходе изучения биологической активности пантогематогенов установлено, что заявленный пантогематоген превосходит анализируемые образцы по адаптогенному и тонизирующему действию, способствует увеличению двигательной активности (в тесте «открытое поле»), болевой чувствительности (в тесте «горячие пластинки») и т.д.

Пример. Способ приготовления пантогематогена осуществляется следующим образом. Сахарный сироп (из расчета 1 часть воды и 2 части сахара) кипятят в течение 5 минут и охлаждают до комнатной температуры. В 355 г сахарного сиропа вливают 5 г фруктовой эссенции, 1 г аскорбиновой кислоты, затем после тщательного перемешивания добавляют 637 г цельной стабилизированной крови. После полного смешивания всех компонентов пантогематогена вводят 2 г препарата «Цитросепт» и снова все тщательно перемешивают.

Срок годности пантогематогена по ТУ 9358-004-04801122-95, включающего дефибринированную кровь марала - 58%, сахарный сироп - 36%, спирт ректификат - 6%, фруктовую эссенцию и аскорбиновую кислоту, составляет 12 месяцев. Срок годности пантогематогена по заявленному способу может быть продлен до 15 месяцев.

Стабилизацию крови проводят 8,5%-ным раствором триполифосфата или 10%-ным раствором пирофосфата натрия.

Таким образом, исключение этилового спирта из состава пантогематогена и процесса пастеризации, при его производстве, а также использование цельной крови позволило снизить денатурацию белка, повысить качество продукта за счет усиления адаптогенного и тонизирующего действия и мобилизирующих свойств организма. Использование в качестве консерванта при производстве пантогематогена природного препарата «Цитросепта грейпфрутового» позволяет применять пантогематоген для лечения и профилактики больных с непереносимостью спиртсодержащих препаратов, а также для детей, поскольку «Цитросепт» детям не противопоказан. При этом наличие в пантогематогене данного препарата, обладающего широким спектром воздействия, на наш взгляд естественным образом повышает лечебные и профилактические показатели пантогематогена, изготовленного заявленным способом.

Изобретение относится к медицине, а именно к производству лечебно-профилактических препаратов из крови пантовых оленей. Способ производства пантогематогена включает забор крови у марала и пятнистого оленя, ее смешивание с сахарным сиропом, фруктовой эссенцией, аскорбиновой кислотой и консервантом, при этом используют цельную стабилизированную кровь, а в качестве консерванта применяют препарат «Цитросепт грейпфрутовый». Изобретение позволяет повысить качество продукта и расширить область его использования. 4 табл.

Способ производства пантогематогена, включающий забор крови у марала и пятнистого оленя, ее смешивание с сахарным сиропом, фруктовой эссенцией, аскорбиновой кислотой и консервантом, отличающийся тем, что используют цельную стабилизированную кровь, а в качестве консерванта применяют препарат «Цитросепт грейпфрутовый» при следующем соотношении компонентов, мас.%:
цельная стабилизированная кровь марала   и пятнистого оленя 62-64 сахарный сироп 35-37 фруктовая эссенция 04-06 аскорбиновая кислота 0,08-0,1 препарат «Цитросепт грейпфрутовый» 0,2-0,3