СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РЕСПИРАТОРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ МОЛОДНЯКА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2009 года по МПК A61K31/00 A61K31/7036 

Изобретение относится к области ветеринарии.

Большой экономический ущерб, причиняемый животноводческим хозяйствам респираторными заболеваниями молодняка, вызывает необходимость поиска путей и методов совершенствования и изыскания новых эффективных средств в их профилактике и лечении.

В комплексе мероприятий по борьбе с респираторными болезнями бактериальной этиологии у молодняка сельскохозяйственных животных широкое применение нашли такие химиотерапевтические средства, как сульфаниламиды, антибиотики, нитрофураны и др. Однако длительное и бессистемное применение их в животноводстве привело к появлению резистентности к ним у штаммов микроорганизмов.

Известен способ лечения бронхопневмонии телят с использованием препарата "Эридин", содержащего, мас.%: эритромицин 5,0-10,0; крахмал 7,5-12,5; кальция стеарат 1,0-2,0; диоксидин 4,0-8,0 и лактозу до 100%. Назначают его по 1 брикету 1-2 раза в сутки в течение 3-5 дней [RU 1424170, C, 20.12.1995 г.].

Известен способ лечения молодняка сельскохозяйственных животных препаратом энроксил 5%, представляющим из себя прозрачный раствор желтого цвета, 1 мл которого содержит 50 мг энрофлоксацина [Кленова И.Ф., Яременко НА., Ветеринарные препараты в России, Справочник. - М.: Сельхозиздат, 2001. - с.144.].

Известен способ лечения респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных с использованием раствора энрофлокса 5% производства фирмы «INVESA» (Испания) [Ветеринарные препараты в России: справочник в 2 томах, т.1 / Кленова И.Ф., Мальцева Л.М., Яременко Н.А., Архипов И.А. - М.: Сельхозиздат, 2004. - С.232].

Недостатком вышеуказанных средств является их узкий спектр действия, что требует комплексного применения препаратов, а также их низкая эффективность при ассоциативных инфекциях, которые постоянно регистрируются в животноводческих хозяйствах. С другой стороны, применение этих препаратов не всегда приводит к положительным результатам из-за развития устойчивости возбудителей заболевания к данным препаратам.

Наиболее близким техническим решением является способ лечения респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных с использованием гентамицина сульфата 4%, который представляет собой смесь нескольких антибиотиков, продуцируемых Micromonospora purpurea. Выпускается в виде стерильного раствора с содержанием 40 мг активного вещества в 1 мл. [Ветеринарные препараты в России: Справочник в 2 томах, т.1. / И.Ф.Кленова, К.Л.Мальцев, Н.А.Яременко, И.А. Архипов. - М.: Сельхозиздат, 2004. - С. 168-169].

Использование гентамицина сульфата 4% не всегда достаточно эффективно и не приводит к полному выздоровлению всех больных поросят при наличии побочного эффекта (нефро- и ототоксичность).

Технический результат изобретения - повышение эффективности.

Технический результат достигается использованием способа лечения респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных, в ходе которого применяется препарат Диоксиген.

Диоксиген - новый антибактериальный комбинированный препарат на основе гентамицина сульфата и диоксидина [Шахов А.Г. и др. Антимикробная активность комплексного препарата Диоксиген. // Первый съезд ветеринарных фармакоглогов России. Воронеж 21-23 июня 2007 года: Материалы съезда. - Воронеж, 2007. - С.658-660].

В лекарственной форме одновременно сочетаются два бактерицидных агента. Это обеспечивает синергидный эффект, за счет того что эти препараты действуют в одну фазу клеточного роста, но на разные метаболические пути.

В основе антибактериального действия диоксидина лежит избирательное подавление синтеза ДНК. Кроме этого, препарат снижает активность внеклеточной нуклеазы и плазмокоагулазы у микроорганизмов, что приводит к нарушению функции генетического аппарата микробной клетки, и в результате подавляется биосинтез биологически активных макромолекул, являющихся факторами патогенности.

Механизм действия гентамицина связывают с нарушением синтеза полипептидов микробной клетки в рибосомах.

Основной целью сочетанного применения диоксидина и гентамицина является расширение спектра антибактериального действия, восполнение пробелов в спектре каждого из компонентов комбинации и предупреждение формирования устойчивости микроорганизмов.

Способ осуществляется следующим образом.

Препарат Диоксиген перед применением подогревают до 37-38°C. Препарат вводят внутримышечно ежедневно два раза в сутки в дозе 0,1 мл/кг массы тела в течение 5-7 дней, при тяжелом течении болезни - в течение 7-9 дней. Телятам вводится в одно место не более 5 мл, поросятам - не более 2,5 мл препарата. При введении больших объемов дозу разделяют и вводят в разные места. При повторных инъекциях рекомендуется менять место инъекций.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Изучение специфической активности препарата Диоксиген, применяемого в ветеринарии для лечения респираторных болезней у молодняка сельскохозяйственных животных

Изучение антимикробной активности проводилось in vitro методом серийных разведений. В качестве тест-культур использовали референтные и полевые (патогенные) штаммы микроорганизмов - возбудителей респираторных болезней поросят и телят, типированных по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим и серологическим свойствам.

Минимальную бактериостатическую концентрацию (МБсК) изучаемых препаратов определяли методом серийных разведений в мясо-пептонном бульоне (МПБ), минимальную бактерицидную концентрацию - путем высева из пробирок с прозрачной средой на плотные питательные среды (МПА), не содержащие препарат.

В качестве жидкой питательной среды применяли мясо-пептонный бульон. При определении чувствительности стрептококков к среде добавляли 1% глюкозы.

Основной раствор препарата Диоксиген 1000 мкг/мл (готовили с учетом плотности препарата). Из основного раствора препарата готовили рабочий раствор. Далее в 16 стерильных пробирок разливали по 4,5 мл мясо-пептонного бульона. В 1 пробирку добавляли 4,5 мл препарата, перемешивали, после чего 4,5 мл полученного раствора переносили в следующую пробирку, продолжая, таким образом, разведение до 15 пробирки. В качестве контроля роста культуры использовали 16 пробирку, не содержащую препарат.

Содержание микробных клеток в 1 мл среды составляло 500 тысяч.

Посевы инкубировали при 37°C в течение 18-20 часов. По истечении срока инкубации учитывали результат.

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1 Антимикробная активность гентамицина, диоксидина и диоксигена (мкг/мл) Культура микроорганизмов Гентамицин Диоксидин Диоксиген МБсК МБцК МБсК МБцК МБсК МБцК Salmonella dublin 59317 3,12 6,25 25,0 50,0 3,12 6,25 Salmonella dublin 3,12 6,25 25,0 50,0 3,12 6,25 Salmonella cholerae suis 3,12 12,5 25,0 50,0 3,12 6,25 Salmonella cholerae suis (п) 6,25 12,5 50,0 100,0 6,25 12,5 Staphylococcus aureus 209P 0,78 1,56 50,0 100,0 0,39 1,56 Staphylococcus aureus (п) 1,56 3,12 50,0 100,0 0,78 3,12 Streptococcus pneumoniae (п) 0,78 1,56 50,0 100,0 0,78 1,56 Pasteurella multocida 1314 3,12 6,25 25,0 50,0 3,12 6,25 Pasteurella multocida (п) 3,12 6,25 25,0 50,0 6,25 12,5 Bordetella bronchiseptica 6,25 12,5 25,0 50,0 6,25 12,5 Примечание - (п) - полевой (патогенный) возбудитель.

Изучение антимикробной активности сочетания гентамицина и диоксидина показало наличие синергического действия в отношении изученных патогенных культур.

Определение эффективности гентамицина, диоксидина и диоксигена в модельных опытах при экспериментальном заражении белых мышей Salmonella cholerae suis 434/9 (2,25 млн м.к./мышь) Salmonella dublin 59317 (3,25 млн м.к./мышь), Staphylococcus aureus 209P (500 млн м.к./мышь) и Pasteurella multocida 1314 (100 тыс. м.к./мышь).

Эксперименты проведены на половозрелых конвенциональных нелинейных разнополых белых мышах с массой тела 20-22 г разведения вивария Всероссийского НИВИ патологии, фармакологии и терапии. Животные содержались в условиях вивария при 20-22°C и влажности 40-60%. Содержание животных и обеспечение кормами соответствовало нормативным требованиям Международной конвенции.

Группы животных формировали по принципу парных аналогов по 16 голов в каждой, учитывая массу тела, развитие и клиническое состояние. Животные контрольных групп лечению не подвергались. За подопытными животными вели клиническое наблюдение в течение 10 дней, учитывали заболеваемость, гибель, сроки выздоровления. Специфичность гибели определяли бактериологическим методом выделения исходных культур микроорганизмов.

Заражение животных проводили внутрибрюшинно смывом суточных агаровых культур возбудителей. Разведения культур делали на стерильном физиологическом растворе. Концентрацию микробных клеток определяли по стандарту мутности.

Лечение мышей начинали через 6 часов после заражения. Препараты вводили 2 раза в сутки внутримышечно.

О терапевтической эффективности препаратов судили по количеству выживших мышей после окончания лечения и числу мыше-дней для каждой группы через 10 дней после инфицирования.

Как видно из данных, представленных в таблице 2, лечение экспериментальных инфекций гентамицином в дозе 80 мкг/мышь малоэффективно (эффективность препарата 56,3-81,3%). Лечение экспериментальных инфекций, вызванных Salmonella cholerae suis 434/9, Salmonella dublin 59317, диоксидином в дозе 20 мкг/мышь также малоэффективно (эффективность препарата 56,3-62,5%), а вызванных Staphylococcus aureus 209P и Pasteurella multocida 1314 неэффективно (эффективность препарата 18,8%).

При экспериментальном заражении мышей Salmonella cholerae suis 434/9 и Pasteurella multocida 1314 лечение диоксигеном в дозе 80+20 мкг/мышь обеспечило сохранность животных в пределах 87,5%, что было выше на 12,5-25% по сравнению с таковой при использовании для терапии гентамицина и на 25-68,7% при назначении диоксидина.

Лечение белых мышей, зараженных Salmonella dublin 59317, диоксигеном в дозе 80+20 мкг/мышь обеспечило максимальную сохранность животных (100%) по сравнению с таковой при раздельном применением гентамицина (81,3%) и диоксидина (56,3%).

При экспериментальной инфекции мышей, вызванной Staphylococcus aureus 209P, терапевтическая эффективность диоксигена была выше, чем у гентамицина, на 25% и диоксидина на 68,7%.

Также отмечено увеличение суммарной продолжительности жизни белых мышей в зависимости от микроорганизма-возбудителя на 8-70 дней в группах, подвергнутых лечению диоксигеном.

Проведенные исследования показали, что препарат Диоксиген обладает широким спектром антимикробного действия в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов.

В результате изучения антимикробного действия гентамицина в сочетании с диоксидином в опытах in vivo и in vitro установлено, что эти препараты обладают взаимоусиливающим действием в отношении изученных штаммов микроорганизмов.

Таким образом, полученные экспериментальные данные свидетельствуют о том, что препарат обладает широким спектром антимикробной активности в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов - основных бактериальных возбудителей респираторных болезней у молодняка сельскохозяйственных животных.

Пример 2. Эффективность лечения бронхопневмонии у телят

Изучение эффективности диоксигена для лечения бронхопневмонии у телят проведено в трех опытах на телятах 2-2,5-месячного возраста весом 55-95 кг.

По принципу парных аналогов животные были разделены на две группы. Диагноз на заболевание бронхопневмонией устанавливали комплексно на основании изучения эпизоотической ситуации в хозяйстве, данных клинического обследования животных и патологоанатомического вскрытия, результатов лабораторных исследований.

За животными вели ежедневное клиническое наблюдение в течение 15 дней, при этом учитывали общее состояние, падеж, скорость роста, сроки выздоровления.

Телят контрольной группы лечили раствором гентамицина сульфата 4%, который вводили внутримышечно в дозе 3 мг/кг массы тела два раза в сутки в течение 5 дней.

Животным опытной группы для лечения применяли диоксиген внутримышечно ежедневно два раза в сутки в дозе 0,1 мл/кг массы тела в течение 5-7 дней, при тяжелом течении болезни - в течение 7-9 дней.

Первый опыт по изучению эффективности применения диоксигена для лечения бронхопневмонии телят проведен в ОАО «Юбилейное» Хохольского района Воронежской области.

Второй опыт по изучению эффективности диоксигена для лечения бронхопневмонии телят проведен в СХА «Свобода» Россошанского района Воронежской области.

Третий опыт по изучению эффективности диоксигена для лечения бронхопневмонии телят проведен в ООО «Чистая дубрава» Липецкого района Липецкой области.

Результаты опытов по изучению эффективности применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у телят представлены в таблицах 3-5.

Таблица 3 Эффективность применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у телят в ОАО «Юбилейное» Хохольского района Воронежской области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 87 93 Выздоровело, голов 74 87 % 85,1 93,5 Пало, голов - - % - - Осталось больными, голов 13 6 % 14,9 6,5 Сроки выздоровления, дни 6,7±0,4 4,9±0,6 Терапевтическая эффективность, % 85,1 93,5

Таблица 4 Эффективность применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у телят в СХА «Свобода» Россошанского района Воронежской области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 43 46 Выздоровело, голов 35 41 % 81,4 89,1 Пало, голов 3 2 % 7,0 4,4 Осталось больными, голов 5 3 % 11,6 6,5 Сроки выздоровления, дни 8,4±0,7 6,6±0,4 Терапевтическая эффективность, % 81,4 89,1

Таблица 5 Эффективность применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у телят в ООО «Чистая дубрава» Липецкого района Липецкой области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 71 81 Выздоровело, голов 55 72 % 77,5 88,9 Пало, голов 11 8 % 15,5 9,9 Осталось больными, голов 5 1 % 7,0 1,2 Сроки выздоровления, дни 6,3±0,6 4,1±0,4 Терапевтическая эффективность, % 77,5 88,9

Как показали проведенные исследования, диоксиген обладает высокой терапевтической эффективностью при лечении бронхопневмонии у телят. Во всех опытах при применении препарата Диоксиген по сравнению с контрольными группами сократились сроки выздоровления на 1,8-2,2 дня, падеж животных снизился в среднем в 1,6 раза. Терапевтическая эффективность диоксигена в среднем по трем опытам составила 90,5%, что на 9,2% выше эффективности раствора гентамицина сульфата 4%.

Пример 3. Эффективность лечения бронхопневмонии у поросят

Изучение эффективности диоксигена для лечения бронхопневмонии у поросят проведено в трех опытах на поросятах 30-45-дневного возраста весом 8,0-12,0 кг.

По принципу парных аналогов животные были разделены на две группы. Диагноз на заболевание бронхопневмонией устанавливали комплексно на основании изучения эпизоотической ситуации в хозяйстве, данных клинического обследования животных и патологоанатомического вскрытия, результатов лабораторных исследований.

За животными вели ежедневное клиническое наблюдение в течение 10-15 дней, при этом учитывали общее состояние, падеж, скорость роста, сроки выздоровления.

Поросят контрольной группы лечили раствором гентамицина сульфата 4%, который вводили внутримышечно в дозе 4 мг/кг массы тела два раза в сутки в течение 3-5 дней.

Животным опытной группы для лечения применяли диоксиген внутримышечно ежедневно два раза в сутки в дозе 0,1 мл/кг массы тела в течение 5-7 дней, при тяжелом течении болезни - в течение 7-9 дней.

Первый опыт по изучению эффективности применения диоксигена при лечении бронхопневмонии у поросят проведен в СХА «Родина» Россошанского района Воронежской области с апреля по июнь 2004 года.

Таблица 6 Эффективность применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у поросят в СХА «Родина» Россошанского района Воронежской области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 121 125 Выздоровело, голов 106 118 % 87,6 94,4 Пало, голов 5 3 % 4,1 2,4 Остались больными, голов 10 4 % 8,3 3,2 Сроки выздоровления, дни 6,5±0,5 5,7±0,5 Терапевтическая эффективность, % 87,6 94,4

Второй опыт проведен в СПК «Алексеевский» Алексеевского района Белгородской области с мая по июнь 2004 года.

Третий опыт по изучению эффективности диоксигена при лечении бронхопневмонии у поросят проведен в СХА «Александровское» Россошанского района Воронежской области с февраля по апрель 2005 года.

Результаты опытов по изучению эффективности применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у поросят представлены в таблице 7-8.

Проведенные исследования показали, что диоксиген обладает высокой терапевтической эффективностью при лечении бронхопневмонии у поросят. По сравнению с базовым вариантом при применении препарата Диоксиген уменьшался срок выздоровления на 0,8-1,6 дня и падеж животных на 1,7-2,3-5,7%.

Таблица 7 Эффективность применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у поросят в СПК «Алексеевский» Алексеевского р-на Белгородской области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 134 138 Выздоровело, голов 117 130 % 87,3 94,2 Пало, голов 5 2 % 3,7 1,4 Остались больными, голов 12 6 % 9,0 4,4 Сроки выздоровления, дни 6,1±0,7 4,6±0,6 Терапевтическая эффективность, % 87,3 94,2

Таблица 8 Эффективность применения диоксигена для лечения бронхопневмонии у поросят в СХА «Александровское» Россошанского района Воронежской области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 108 124 Выздоровело, голов 85 112 % 78,7 90,3 Пало, голов 14 9 % 13,0 7,3 Остались больными, голов 9 3 % 8,3 2,4 Сроки выздоровления, дни 6,4±0,6 4,8±0,3 Терапевтическая эффективность, % 78,7 90,3

Пример 4. Эффективность лечения пневмонии у поросят

Изучение эффективности диоксигена при легочном пастереллезе у поросят проведено в опыте на поросятах 65-100-дневного возраста в ОАО Агрофирма «Ливенское мясо» Ливенского района Орловской области.

По принципу парных аналогов животные были разделены на две группы. Диагноз на заболевание устанавливали комплексно на основании данных клинического обследования животных, результатов бактериологического исследования (выделена культура Pasteurella multocida из пораженных легких), патологоанатомических данных с учетом эпизоотической ситуации в хозяйстве.

За животными вели ежедневное клиническое наблюдение в течение 15 дней, при этом учитывали общее состояние, падеж, скорость роста, сроки выздоровления.

Поросят контрольной группы лечили раствором энрофлокса 5% производства фирмы «INVESA» (Испания), который вводили в дозе 0,5 мл/10 кг массы тела один раз в сутки в течение 10 дней.

Животным опытной группы для лечения применяли диоксиген внутримышечно ежедневно два раза в сутки в дозе 0,1 мл/кг массы тела в течение 5-7 дней, при тяжелом течении болезни - в течение 7-9 дней.

Таблица 9 Эффективность применения диоксигена при легочном пастереллезе поросят в ОАО Агрофирма «Ливенское мясо» Ливенского района Орловской области Показатели Группа животных Контроль Опыт Количество животных, голов 101 98 Выздоровело, голов 81 79 % 80,2 80,6 Пало, голов 0 0 % 0 0 Остались больными, голов 20 19 % 19,8 19,4 Сроки выздоровления, дни 9,1±0,1 8,9±0,2 Терапевтическая эффективность, % 80,2 80,6

Проведенные испытания способа лечения респираторных заболеваний у поросят и телят показали его высокую эффективность.

На основании результатов проведенных исследований установлено, что диоксиген обладает широким спектром антимикробного действия, выраженным лечебным действием при респираторных болезнях бактериальной этиологии у поросят и телят.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ включает внутримышечное введение диоксигена. Диоксиген вводят по следующей схеме: ежедневно два раза в сутки в дозе 0,1 мл/кг массы тела в течение 5-7 дней, при тяжелом течении болезни - в течение 7-9 дней. Способ позволяет повысить эффективность лечения респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных, 9 табл.

Способ лечения респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных, включающий внутримышечное введение лекарственного средства, отличающийся тем, что в качестве лекарственного средства используют препарат диоксиген по следующей схеме: ежедневно два раза в сутки в дозе 0,1 мл/кг массы тела в течение 5-7 дней, при тяжелом течении болезни - в течение 7-9 дней.