БИОАКТИВНЫЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ПРЕПАРАТ И СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ТЕЛЯТ С ЕГО ПРИМЕНЕНИЕМ Российский патент 2009 года по МПК A61K36/185 A61K36/28 A61K36/484 A61P37/00 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, касается биоактивного ветеринарного препарата и может быть использовано в фармакологических целях для повышения неспецифической резистентности у молодняка сельскохозяйственных животных, преимущественно у телят, а также для профилактики болезней инфекционной и неинфекционной этиологии и в комплексной терапии этих болезней.

Установлено, что определенные изменения показателей неспецифической резистентности (пониженный показатель активности фагоцитоза, нарушение белкового обмена, выражающиеся в изменении количества общего белка и соотношения белковых фракций) и ограниченный диапазон приспособительных реакций обусловливают пониженную устойчивость новорожденных телят к болезням инфекционной и неинфекционной этиологии и на тяжесть их течения. Так, чем ниже величина показателей неспецифической резистентности, тем раньше заболевают телята и тяжелее и длительнее протекает болезнь /Ветеринарная, 1984, №10, с.57-59/.

Из биологически активных веществ, разнообразных по своему происхождению, физико-химическим, физиологическим свойствам и влиянию на организм животных, в частности на состояние обмена веществ и на факторы неспецифической резистентности, широкое применение нашли препараты синтетических аминокислот (лизин, метионин, триптофан), жирорастворимые витамины (каротин, A, D, Е, К), водорастворимые витамины (группы B₁…B₁₂, С, H, F, U), соли дефицитных микроэлементов /1/. Повышение общей сопротивляемости организма наблюдается под влиянием препаратов на основе растительного сырья: группы адаптогенов (женьшень, элеутерококк, родиола розовая, эхинацея пурпурная, заманиха и др.); группы фитонцидов (лук, чеснок, хрен, почки сосны и др.); группы лекарственных растений, содержащей витамин С (дягиль лекарственный, календула лекарственная, крапива двудомная, мать-и-мачеха, мята перечная, одуванчик лекарственный и др.) /2/. Препараты из растительного сырья являются более предпочтительными, поскольку биохимические процессы, происходящие в растительном и животном организмах, сходны, сходны промежуточные и конечные продукты обмена. Однако большая часть этих препаратов избирательно действует на отдельные показатели иммунитета. Этот недостаток частично устраняется комплексными лекарственными препаратами на основе лекарственных растений, например препаратом растительного происхождения тетраиммунофитом - фитоэкстракционным препаратом из травы зверобоя, листа сены, плодов шиповника и корнеплодов свеклы, обладающим иммуностимулирующим действием на гуморальный иммунный ответ /3/, препаратом «Реглидис» (лекарственным сбором, содержащим плоды шиповника, корень и корневище солодки и траву копеечника) /4/ и средством, обладающим иммуностимулирующим действием, представляющим собой водный экстракт из трав зверобоя продырявленного, тимьяна ползучего, мяты перечной и мать-и-мачехи, взятых в равных количествах /5/.

Технический результат заключается в создании нового биоактивного ветеринарного препарата, обеспечивающего стимуляцию защитных сил организма, на основе фармакологически активных веществ из растений.

Получение указанного результата достигается использованием настойки из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, которую заливают этиловым спиртом 70% концентрации при соотношении 1:10, выдерживают в темном месте при температуре 15-20°С в течение 7 суток, процеживают, отжимая сырье и фильтруют.

Используемые ингредиенты лекарственного средства широко применяются в фитотерапии. Обоснованием для выбора компонентов композиции послужили данные о фармакологических свойствах и химическом составе лекарственного растительного сырья. Каждый компонент содержит биологически активные вещества, одновременно активизирующие внутриклеточный метаболизм и обмен веществ, а также обладающие выраженным антимикробным действием на патогенную и условно патогенную микрофлору.

Трава и соцветия эхинацеи пурпурной обладают иммуномодулирующей активностью, подавляют активность гиалуронидазы - фермента, способствующего повышению проницаемости для вирусов и микробов, увеличивают противомикробную активность лейкоцитов, макрофагов и нейтрофилов крови и повышают синтез защитных антител и эндогенного интерферона.

Трава гармалы обыкновенной обладает выраженной антимикробной активностью, подтвержденной фармакологическими исследованиями.

Цветы липы мелколистой обладают иммуномодулирующими эффектами, которые проявляются в действии на гуморальные и клеточные механизмы иммунитета, миграцию лимфоцитов, синтез интерферона и систему комплемента.

Корни и корневища солодки голой обладают антиоксидантной активностью, гепатозащитным действием, способствуют восстановлению угнетенного иммунного статуса.

Химический состав лекарственного средства представлен комплексом биологически активных веществ, обеспечивающих его высокий фармакотерапевтический эффект. Доминирующими биологически активными веществами являются: фенольные соединения, флавоноиды, полисахариды, алкалоиды, дубильные вещества, витамины, микроэлементы, главными из которых можно считать цинк, селен и железо.

Флавоноиды (содержат все компоненты) ингибируют фермент катехол-орто-метилтрансферазу и обеспечивают адаптационно-трофическую функцию организма за счет адренопролонгирующего эффекта. Флавоноиды обладают Р-витаминной (капилляроукрепляющей) активностью. В суммарном противовоспалительном эффекте флавоноидов имеет значение их непосредственное действие на клеточные и тканевые мембраны - снижение их проницаемости, уплотнение мембран лизосом, ингибирование гиалуронидазы, антагонистическое действие по отношению к медиаторам воспаления.

Полисахариды (содержат все компоненты) оказывают противовоспалительное, иммунокорригирующее действие. Они стимулируют неспецифический иммунитет и фагоцитоз, деятельность макрофагов и нейтрофилов, а также бактерицидную функцию клеток.

Фенольные соединения (содержат все компоненты) оказывают противомикробное действие, механизм которого обусловлен их способностью сорбироваться компонентами цитоплазматической мембраны бактерий, образовывать прочные водородные связи с белками и повреждать мембрану, в частности повышая ее проницаемость для ионов (прежде всего калия) и важных метаболитов, теряемых клеткой, а также для воды, поступающей извне и способствующей лизису.

78% от общего количества алкалоидов, содержащихся в траве гармалы обыкновенной, составляет пеганин. Фармакологические исследования показали, что 1%-ный и 10%-ный настои травы гармалы обыкновенной обладают высокой противостафилококковой активностью, а 0,25%-ный раствор пеганина - высокой антимикробной активностью.

Дубильные вещества (солодка голая - до 9,46%, липа мелколистная - не менее 8,0%), проявляя мембраностабилизирующий эффект, восстанавливают процессы репарации в гепатоцитах и улучшают работу антиоксидантной системы печени.

Витамины (витамин С - цветы липы мелколистной, эхинацея пурпурная; витамин Е - солодка голая, витамин А - эхинацея пурпурная) участвуют во всех процессах обмена веществ, повышают устойчивость организма к заболеваниям, оказывают противовоспалительное действие, способствуют дезинтоксикации организма.

Микроэлемент цинк (липа мелколистная - 29 мкг/г, солодка голая - 0,33 мкг/г, гармала обыкновенная - 0,78 мкг/г) участвует в организме в иммунных процессах, селен (солодка голая - 12,14 мкг/г, гармала обыкновенная - 1,0 мкг/г, липа мелколистная - 0,13 мкг/г) является мощным антиоксидантом, а железо (эхинацея пурпурная - 48 мг/100 г, липа мелколистная - 0,2 мг/г, гармала обыкновенная - 0,14 мг/г, солодка голая - 0,7 мг/г,) - основным структурным компонентом гемоглобина крови и гемсодержащих ферментов.

Высокая эффективность лекарственного средства достигается благодаря сочетанию целого комплекса биологически активных веществ, вследствие чего наблюдается взаимное усиление полезных фармакологических свойств каждого отдельного компонента. Так, комбинация витаминов А, С и цинка стимулирует синтез антител, сочетание флавоноидов и дубильных веществ обеспечивает гепатозащитное действие, а сочетание флавоноидов и фенологликозидов усиливает детоксикационную функцию печени.

Настойка из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой готовится фармакопейным способом в соотношении сырья к извлекателю 1:10. В качестве извлекателя используют этиловый спирт концентрацией 70%. Лекарственное сырье измельчают до частиц размером 1-3 мм, смешивают в равных количествах, навеску сырья помещают в стеклянный сосуд, добавляют расчетное количество этилового спирта концентрацией 70%, выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°С. Затем спиртовую настойку процеживают через холст или два слоя марли, отжимая сырье, фильтруют.

Пример: в стеклянный сосуд поместили 500 г лекарственного сырья (равные количества из травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки), добавили 5,0 л этилового спирта концентрацией 70%, поставили в темное место и выдерживали при температуре 15-20°С в течение 7 суток, после чего процедили через холст, отжимая сырье, и профильтровали.

Для повышения общей неспецифической резистентности у телят на фоне коррекции вторичных иммунодефицитов внутримышечной инъекцией экзогенного иммуномодулятора применяют биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах.

Способ повышения общей неспецифической резистентности у телят с применением биоактивного ветеринарного препарата, представляющего собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, на фоне коррекции вторичных иммунодефицитов осуществляется следующим образом.

70% спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой в виде 7-8% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, применяют внутрь в дозе 2,5-3,0 мл/кг живой массы животного с интервалом в 24 часа в течение 10-15 суток в дополнение к внутримышечной инъекции гликопина в виде 0,2% водного раствора в дозе 1,5 мл/кг живой массы животного.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Стимулирующее влияние биоактивного ветеринарного препарата на факторы неспецифической резистентности определяли в эксперименте на клинически здоровых телятах 5-7-дневного возраста в двух сериях опытов. В обеих сериях опытов отобранных по принципу аналогов телят распределяли на пять групп. В первой серии опытов телятам первых четырех групп применяли внутрь биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 7% концентрации в течение 10 суток с интервалом в 24 часа в дозах 2,0, 2,5 и 3,0 и 3,5 мл/кг живой массы животного. Телята пятой группы препаратов не получали и служили контролем. Во второй серии телятам первых четырех групп применяли внутрь биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 7% концентрации в течение 10 суток с интервалом в 24 часа в дозах 2,0, 2,5 и 3,0 и 3,5 мл/кг живой массы животного на фоне внутримышечной инъекции гликопина в виде 0,2% водного раствора в дозе 1,5 мл/кг живой массы животного в течение 10 суток с интервалом в 24 часа. Телята пятой группы препаратов не получали и служили контролем. Неспецифическую резистентность оценивали по показателям бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по методу О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой, 1966), лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по методу В.Г.Дорофейчук, 1968) и функциональной активности нейтрофилов крови (определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия по А.Н.Маянскому и др., 1979). Результаты представлены в таблице 1. Как видно из таблицы 1, показатели бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови повышались равномерно во всех группах, но наиболее интенсивно в опытных группах. Результаты, полученные в первой серии опытов, подтвердили, что под воздействием биоактивного ветеринарного препарата в организме телят происходили изменения, свидетельствовавшие о повышении неспецифической резистентности. Так, в опытных группах относительно контрольной группы повысились показатели лизоцимной активности сыворотки крови на 20, 40, 45 и 40%, а показатели бактерицидной активности сыворотки крови - на 18,0, 28,6, 41,2 и 30,2%, показатели функциональной активности нейтрофилов крови в спонтанном тесте на 5,3, 14,7, 14,5 и 13,0%, а в индуцированном тесте - на 10,1, 44,0, 45,0 и 45,0%. Оптимальной дозой для применения на практике можно принять дозу 2,5 мл/кг живой массы животного, обеспечивавшую максимальные показатели относительно контроля и граничных доз. Граничные дозы обеспечивали повышение показателей относительно контроля, но являются экономически нецелесообразными. Анализ результатов, полученных в первой и второй сериях опытов, подтвердили эффективность применения биоактивного ветеринарного препарата на фоне внутримышечной инъекции гликопина. При сравнении показателей неспецифической резистентности до начала и после окончания опытов в обеих сериях в группах, получавших биоактивный ветеринарный препарат в заявленных дозах (2-я и 3-я группы), установлены следующие изменения в сторону повышения по основным показателям: лизоцимная активность сыворотки крови: первая серия: 2 группа - на 47,4%, 3 группа - на 52,6%, вторая серия: 2 группа - на 77,8%, 3 группа - на 88,9%; бактерицидная активность сыворотки крови: первая серия: 2 группа - на 31,4%, 3-я группа - на 44,0%; вторая серия: 2 группа - на 40,6%, 3-я группа - 46,6%; функциональная активность нейтрофилов крови - спонтанный тест: первая серия: 2 группа - на 100%, 3-я группа - на 109,1%, вторая серия: 2 группа - на 143,8%, 3-я группа - на 136,4%; индуцированный тест: первая и вторая серии: 2 группа - на 161,7%, 3-я группа - на 167,8%.

Таблица 1 Влияние биоактивного ветеринарного препарата на факторы общей неспецифической резистентности в зависимости от дозы Показатели Группы животных Опыт Контроль 1-я - n=10 2-я - n=10 3-я - n=10 4-я - n=10 Доза биоактивного ветеринарного препарата, мл/г живой массы животного Препаратов не применяли n=10 2,0 2,5 3,0 3,5 1-я серия Функциональная активность нейтрофилов крови, % - спонтанный тест - индуцированный тест Лизоцимная активность сыворотки крови, % Бактерицидная активность сыворотки крови, % Показатели Группы животных Опыт Контроль 1-я - n=10 2-я - n=10 3-я - n=10 4-я - n=10 Доза биоактивного ветеринарного препарата, мл/г живой массы животного Препаратов не применяли n=10 1,0 1,5 2,5 3,0 На фоне внутримышечной инъекции гликопина в виде 0,2% водного раствора в дозе 1,5 мл\кг живой массы животного 2-я серия Функциональная активность нейтрофилов крови, % - спонтанный тест - индуцированный тест Лизоцимная активность сыворотки крови, % Бактерицидная активность сыворотки крови, % Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - показатели после окончания опыта

Пример 2. Стимулирующее влияние биоактивного ветеринарного препарата на факторы неспецифической резистентности в зависимости от продолжительности его применения определяли на клинически здоровых телятах 5-6-дневного возраста. Подобранных по принципу аналогов телят распределяли на две группы - опытную и контрольную. Телятам опытной группы применяли внутрь биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 8% концентрации в дозе 2,5 мл/кг живой массы животного в течение 10-15 суток с интервалом в 24 часа. Телятам контрольной группы препаратов не назначили. Изменение показателей неспецифической резистентности определяли в динамике в возрасте 6, 16, 20 и 30 дней. Результаты представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, в 6-дневном возрасте различия практически отсутствовали. У животных опытной группы к 16-дневному возрасту происходило повышение показателей гуморального и клеточного иммунитета, которое продолжилось до 20-дневного возраста, и в отличие от животных контрольной группы положительная тенденция сохранялась до 30-дневного возраста. Важное практическое значение имело увеличение количества В-лимфоцитов крови по сравнению с контролем в 16-дневном возрасте на 44%, в 20-дневном возрасте - на 46% и в 30-дневном возрасте - на 56% и уровня иммуноглобулинов сыворотки крови IgG в 16-дневном возрасте - на 14%, в 20-дневном возрасте - на 28%, в 30-дневном возрасте - на 31%; IgM - в 16-дневном возрасте - на 30%, в 20-дневном возрасте -на 50% и в 30-дневном возрасте - на 77%, что свидетельствовало о лучшей усвояемости новорожденными телятами молозивных и более раннем начале синтеза собственных иммуноглобулинов.

Примечание: в числителе - показатели опытных, в знаменателе - показатели контрольных животных

Пример 3. Эффективность способа повышения неспецифической резистентности с применением биоактивного ветеринарного препарата, представляющего собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, на фоне внутримышечной инъекции гликопина в сравнении с известными изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят, обусловленным воздействием на организм ассоциаций вирусов, патогенной и условно патогенной микрофлоры на фоне нарушений условий содержания и кормления стельных коров и новорожденных телят. Острые желудочно-кишечные расстройства у молодняка выявляли в 2-3-дневном возрасте. У больных отмечали урежение частоты пульса и дыхания, понижение температуры тела, западение орбиты глаз, синюшность видимых слизистых оболочек, взъерошенность и тусклость шерсти, профузный понос. Бактериологическими и вирусологическими исследованиями подтверждена этиологическая роль рота-коронавирусов, а также бактерий родов Escherichia и Proteus. Заболеваемость - 85-90%, летальность - 25-30%. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 5-7-дневного возраста, которых распределяли на четыре группы. Телятам первых трех групп внутримышечно инъецировали гликопин в виде 0,2% водного раствора в дозе 1,5 мл/кг живой массы животного в течение 10 суток с интервалом в 24 часа и дополнительно телятам первой группы назначали внутрь биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 7% концентрации в течение 10 суток с интервалом в 24 часа в дозе 2,5 мл/ кг живой массы животного (заявленный способ), телятам второй группы - настойку травы тысячелистника в дозе 4,5 мл\кг живой массы животного в течение 10 суток с интервалом в 24 часа (способ-аналог). Телятам четвертой группы препаратов не назначали (контроль). Для контроля за состоянием животных ежедневно проводилось клиническое исследование. Учитывали количество заболевших телят, особенности течения заболевания, а после выздоровления в течение месяца велось наблюдение за ростом и развитием животных. Неспецифическую резистентность оценивали, как в примере 1. Результаты представлены в таблицах 3 и 4.

Таблица 3 Клиническая эффективность способов повышения неспецифической резистентности Показатели Способ повышения неспецифической резистентности Препаратов не назначали n=10 внутримышечная инъекция гликопина в виде 0,2% раствора в дозе 1,5 мл в течение 10 суток с интервалом в 24 часа биоактивный ветеринарный препарат n=10 настойка травы тысячелистника n=10 дополнительных препаратов не назначали n=10 Количество заболевших телят, гол.   2 2 7 Форма переболевания         - легкая - 1   1 - тяжелая - 1 2 2 Выздоровело, гол . 1 1 1 Пало, гол - 1 1 2 Сохранность, % 100,0 90,0 90,0 80,0 Среднесуточный прирост живой массы, г 637,9±93,0 629,0±27,0 612,0±25,0 468,0±67,0

Таблица 4 Уровень неспецифической резистентности клинически здоровых телят Показатели Способ повышения неспецифической резистентности Препаратов не назначали внутримышечная инъекция гликопина в виде 0,2% раствора в дозе 1,5 мл в течение 10 суток с интервалом в 24 часа биоактивный ветеринарный препарат настойка травы тысячелистника дополнительных препаратов не назначали Функциональная активность нейтрофилов крови, %         - спонтанный тест индуцированный тест Лизоцимная активность сыворотки крови, % Бактерицидная активность сыворотки крови, % Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - после окончания опыта

Проведенные исследования показали, что биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, не оказывает отрицательного влияния на здоровье животных, а его применение на фоне внутримышечной инъекции гликопина обладает высокой эффективностью лечебно-профилактического действия при желудочно-кишечных болезнях телят, существенно повышает их резистентность к желудочно-кишечным болезням, активизируя факторы неспецифической резистентности, не выводя их уровень за физиологические пределы, не вызывающие каких-либо негативных изменений в организме, улучшает качество жизни телят, они не теряют в весе.

Источники информации

1. Субботин В.М., Субботина С.Г., Александров И.Д.Современные лекарственные средства в ветеринарии. Ростов-на-Дону: Феникс, 2001. 600 с.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства.- Вильнюс, 1994. - 2 т.

3. Л.А.Маладзе // Ветеринария. - 1999 - №3.

4. RU 2029557 C1, 1995

5. RU 22501101 C1, 2005

Изобретение относится к ветеринарии, касается биоактивного ветеринарного препарата и способа повышения неспецифической резистентности у телят с его применением. Способ включает инъекцию гликопина и дополнительное применение внутрь спиртовой настойки из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 7-8% концентрации в дозе 2,5-3,0 мл/кг живой массы животного в течение 10-15 дней с интервалом в 24 часа. Препарат оказывает благоприятное воздействие на все органы и системы организма животных, регулирует обменные процессы и повышает резистентность организма (активация В- и Т-систем, фагоцитоза). Основные свойства препарата: естественное происхождение, способность легко метаболизироваться и выводиться из организма, высокая совместимость с другими лекарственными средствами, отсутствие сенсибилизации и индуцирования иммунопатологических реакций. 2 н.п. ф-лы, 4 табл.

1. Биоактивный ветеринарный препарат, представляющий собой спиртовую настойку растительного сырья, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют смесь равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, растительное сырье заливают этиловым спиртом 70%-ной концентрации при соотношении 1:10, выдерживают в темном месте при температуре 15-20°С в течение 7 суток, процеживают, отжимая сырье, и фильтруют.

2. Способ повышения неспецифической резистентности у телят, включающий внутримышечную инъекцию гликопина, отличающийся тем, что дополнительно внутрь применяют биоактивный ветеринарный препарат по п.1 в виде водного раствора 7-8%-ной концентрации в дозе 2,5-3,0 мл/кг живой массы животного в течение 10-15 дней с интервалом в 24 ч.