СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ОСТЕОМИЕЛИТА У ЖИВОТНЫХ Российский патент 2009 года по МПК A61K38/00 

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам иммунотерапии заболеваний, протекающих со снижением иммунного статуса, конкретно к способам лечения больных хроническим остеомиелитом животных.

Известен способ лечения больных хроническим остеомиелитом (патент №2073514), включающий введение антибактериальных и десенсибилизирующих средств, витаминов, анаболов с дополнительным введением до и после операции ксимедона по 0,5 г 4 раза в день в течение 20 суток и последующим повторением курсов лечения через 6 месяцев на протяжении 1,5 лет.

Недостатками данного способа являются длительный курс лечения (до 20 суток) и необходимость проведения повторных курсов лечения данным препаратом через 6 месяцев на протяжении 1,5 лет.

Известен способ лечения остеомиелита (прототип - патент РФ на изобретение №2152214), включающий иммуностимулирующие препараты, согласно которому корригируют интерфероновый статус введением индукторов интерферона класса неовир, циклоферон в дозе 500-1600 мг на курс лечения. Данные стимуляторы интерферонообразования вводят с момента поступления больного внутримышечно через день курсом 5-7 инъекций в дозе 4-6 мг/кг, в итоге курс лечения по длительности составляет 14 суток.

Недостатками данного способа являются длительный курс лечения (до 14 суток) и необходимость проведения повторного курса лечения при существенном снижении интерферонового статуса.

Технической задачей является сокращение сроков лечения, устранение необходимости в проведении повторных курсов терапии.

Техническая задача достигается способом лечения хронического остеомиелита у животных путем осуществления традиционной комплексной терапии, включающей иммуностимулирующий препарат-корректор интерферонового статуса, отличающийся тем, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живого веса.

Отличие предлагаемого изобретения от прототипа состоит в том, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живого веса.

Способ осуществляют следующим образом.

Проводят традиционную комплексную терапию, включающую санацию гнойного очага, его дренирование, антибактериальную, дезинтоксикационную, десенсибилизирующую и антиоксидантную терапию, одновременно проводят стимуляцию иммунитета: коррекцию интерферонового статуса, дополнительное индуцирование роста, деления и активности Т- и В-лимфоцитов путем введения ронколейкина в дозе 80 тыс.МЕ/кг живого веса на курс лечения. При этом вводят с момента поступления больного животного внутримышечно или подкожно на 1, 2, 3 и 6 сутки по 20 тыс.ME на 1 кг живого веса.

Препарат обладает иммунокоррегирующими свойствами, направленными на осуществление противобактериального иммунитета, процессов восстановления поврежденных тканей, а при стойком иммунодефиците действует как иммунореабилитатор. Ронколейкин как стимулятор интерферонообразования, фактор роста, деления и активности Т-, В-лимфоцитов, использован в комплексном лечении 10 экспериментально больных кроликов с хроническим остеомиелитом. Проведен сравнительный анализ эффективности лечения с 10 экспериментально больными хроническим остеомиелитом кроликами, вкомплексном лечении которых применялся циклоферон по методу прототипа. Остеомиелит моделировали по методике Кошкина В.И., Нагибина В.И. (1970 г.) на 3-4-месячных кроликах породы «Нидерландская красная», массой 3,5-4,0 кг, подобранных по принципу аналогов. Модель основана на факторе длительного раздражения костного мозга и микробной флоры, которая бы длительное время находилась в месте введения и не могла бы быстро распространяться по кровяному руслу. В качестве инфекционного агента использовали однодневную культуру золотистого стафилококка. Кролика фиксировали к столу в положении лежа на спине. После удаления шерсти область нижней трети диафиза большеберцовой кости обрабатывали 10% раствором настойки йода. Под общей и местной анестезией на внешней поверхности нижней трети диафиза голени производили продольный разрез кожи длиной 2 см. Мышцы тупо раздвигали по ходу волокон до кости, надкостницу продольно рассекали и сдвигали в сторону. В отличие от вышеуказанной модели в освобожденной костной площадке проводили перфорацию кости не перфоратором, а спицей Киршнера, проходя первый кортикал до костномозгового канала. Также сочли излишним использование капроновой губки в качестве депонирующего элемента для бактериального агента. Микробную взвесь вводили непосредственно в костный канал шприцем. Отверстие в кости не пломбировали. Модель развивалась в течение 1-1,5 месяца. Все животные хорошо переносили моделирование, оставались подвижными. При наружном осмотре животные щадили пораженную конечность. Пальпаторное обследование обнаруживало плотный инфильтрат.К 30-45 суткам после заражения рентгенологически отмечали появление периостальных наслоений, очагов просветления в месте введения патогенного агента, в метафизе большеберцовой кости деструктивную полость с нечеткими контурами, имеющую округлую форму и окруженную склерозированной костной тканью, ослабление четкости рисунка кости, экзастозы. При иммунологическом исследовании у больных остеомиелитом животных выявлены глубокие нарушения в иммунной системе (таблица №1).

Таблица №1 Иммунологические показатели в процессе моделирования хронического остеомиелита у кроликов Срок моделирования Показатели Содержание γ-ИНФ, (пг/мл) Содержание Т-лимфоцитов, (%) Содержание В-лимфоцитов, (%) До начала моделирования М-19,14 М-37,3 М-13,1 m-1,32 m-1,20 m-1,12 К концу моделирования (к 45 суткам) М-8,94 М-23,4 М-9,2 m-1,03 m-0,23 m-0,13

Как видно из таблицы 1, количество Т-лимфоцитов в периферической крови экспериментальных животных к 45 суткам достоверно ниже (23,4%), чем до экспериментального моделирования (37,3%). В процессе экспериментального моделирования наблюдалась тенденция к стойкому снижению В-лимфоцитов. Так, до заражения их процент в среднем составлял 13,1, а уже к 45-м суткам болезни - 9,2. Уровень γ-ИНФ (γ-интерферон) перед экспериментальным моделированием составлял 19,14 пг/мл, а к 45-м суткам после операции резко снизился до 8,94 пг/мл. По данным иммунологических показателей, все кролики нуждались в иммунной реабилитации.

После окончания курса лечения экспериментально больных животных хроническим остеомиелитом кроликов по предлагаемому способу и по способу прототипа у кроликов, которым вводился ронколейкин, наблюдалось более благоприятное течение процесса по сравнению с группой, которой вводили циклоферон. Оно выражалось в ранней нормализации температуры, исчезновении рентгенологических признаков воспаления, развитии грануляционной ткани. Клиническое улучшение подтверждается данными лабораторных исследований, приведенных в таблице №2.

Таблица №2 Иммунологические показатели у кроликов в процессе их лечения по предлагаемому способу и по способу прототипа Срок лечения Показатели Содержание γ-ИНФ, (пг/мл) Содержание Т-лимфоцитов, (%) Содержание В-лимфоцитов, (%) по предлагаемому способу по прототипу no предлагаемому способу по прототипу no предлагаемому способу по прототипу До начала лечения М-8,94 M-8,94 М-23,4 M-23,4 М-9,2 М-9,2 m-1,03 m-1,03 m-0,23 m-0,23 m-0,13 m-0,13 На 1 сутки лечения М-8,95 M-8,93 М-23,5 M-23,4 М-9,3 М-9,2 m-1,11 m-0,12 m-0,27 m-0,42 m-0,03 m-0,15 На 2 сутки лечения М-16,93 М-10,83 М-25,4 M-23,7 М-10,1 М-9,2 m-0,96 m-1,17 m-0,13 m-0,17 m-0,15 m-0,23 На 3 сутки лечения М-25,28 М-12,72 М-28,8 M-24,1 М-12,62 М-9,3 m-1,01 m-1,01 m-1,01 m-1,03 m-0,32 m-0,18 На 4 сутки лечения М-25,29 М-14,61 М-28,8 M-24,4 М-14,3 М-9,3 m-1,03 m-0,89 m-0,23 m-1,18 m-0,65 m-0,56 На 5 сутки лечения М-23,87 М-16,51 M-26,1 M-24,7 М-12,9 М-9,4 m-1,19 m-1,05 m-1,14 m-0,65 m-1,12 m-0,6 На 6 сутки лечения М-23,85 M-20,29 M-26,4 M-24,9 М-13,0 М-9,6 m-0,94 m-1,11 m-0,31 m-0,23 m-0,01 m-0,47 На 7 сутки наблюдения (через 6 суток от начала лечения) M-28,18 М-20,32 M-29,3 M-25,1 М-14,8 М-9,6 m-1,74 m-1,07 m-1,42 m-0,87 m-1,12 m-1,04 На 8 сутки наблюдения (через 7 суток от начала лечения) M-28,13 М-21,06 M-29,7 M-25,3 М-14,5 М-9,5 m-0,94 m-0,74 m-1,12 m-1,17 m-0,95 m-1,24 На 9 сутки наблюдения (через 8 суток от начала лечения) M-28,15 M-21,86 M-29,9 M-25,6 М-14,6 М-9,6 m-0,91 m-1,02 m-1,08 m-0,82 m-0,82 m-0,14 На 10 сутки наблюдения (через 9 суток от начала лечения) M-28,20 М-22,61 M-29,8 M-25,9 М-14,7 М-9,6 m-1,06 m-0,57 m-0,85 m-1,25 m-1,04 m-0,84 Через 14 суток от начала лечения М-28,86 M-27,02 M-32,14 M-26,3 М-17,6 М-9,6 m-1,94 m-1,17 m-1,59 m-0,76 m-1,43 m-0,68 Через 20 суток после курса лечения М-28,03 M-25,63 M-39,6 M-20,6 M-22,3 М-8,8 m-1,87 m-1,24 m-1,64 m-0,87 m-1,18 m-0,07

Иммунологические показатели уровня γ-ИНФ, Т- и В-лимфоцитов, представленные в таблице 2, свидетельствуют о том, что за первые трое суток введения происходит накопление препарата в крови, который провоцирует клетки организма к выработке γ-интерферона, Т- и В-лимфоцитов. Затем на 4 и 5 сутки уровень γ-интерферона, Т- и В-лимфоцитов остается практически без изменений, поэтому нет необходимости ежедневного введения препарата. Тем не менее, на 5-е сутки уровень γ-интерферона Т- и В-лимфоцитов несколько уменьшается, поэтому на 6-е сутки снова вводится ронколейкин. А после истечения 6-х суток, кроме нормализации иммунологических показателей, наблюдается улучшение состояния животных по клиническим признакам и стойкий терапевтический эффект в течение последующих суток наблюдения без регистрации случаев возникновения рецидивов.

Из таблицы 2 также видно, что применение препарата-корректора ронколейкина в комплексном лечении хронического остеомиелита через 6 суток курса терапии приводит к достоверному повышению в 1,3 раза уровня Т-лимфоцитов в периферической крови группы больных животных, леченных по предлагаемому способу. У больных животных, которым ронколейкин не применялся, а вводился циклоферон, через 6 суток лечения повышение Т-лимфоцитов было минимальным (в 1,1 раза). Через 6 суток от начала лечения наблюдалось увеличение количества В-лимфоцитов в 1,6 раза у кроликов, в комплексном лечении которых применялся ронколейкин, и практически не изменилось у экспериментальных животных, которым инъецировали циклоферон. Так, процент Т-лимфоцитов на 20-е сутки после окончания курса терапии составил 39,6 в крови кроликов, лечение которых проводилось по предлагаемому способу, и 20,6 - в крови кроликов группы сравнения. Относительное содержание В-лимфоцитов к этому же периоду составило 22,3 и 8,8% соответственно. Изменения в клеточном звене иммунитета кроликов, леченных по методу прототипа, позволяют выявить недостаточное функционирование иммунной системы. По окончании курса терапии по предлагаемому способу у экспериментально больных кроликов через 6 суток содержание γ-ИНФ увеличилось в 3 раза, в то время как у кроликов, леченных по методу прототипа, содержание γ-ИНФ увеличилось в 3 раза только через 14 суток. Кроме того, у животных, которым применялся ронколейкин, в отдаленном периоде (к 20-м суткам) после окончания курса терапии показатель γ-ИНФостался на высоком уровне, в то время как в группе кроликов, которым применялся циклоферон, произошло его снижение в 1,2 раза.

Сохранение показателя γ-ИНФ на высоком уровне свидетельствует о достижении стойкого клинического эффекта, что исключает необходимость в проведении повторных курсов терапии. Предложенный способ сокращает сроки лечения с 14 до 6 дней (таблица №3).

Таблица №3 Сравнительные показатели продолжительности курса лечения по предлагаемому способу и по способу-прототипу Показатель По прототипу По предлагаемому способу Продолжительность курса лечения (сутки) 14 6

В качестве примера проводим следующее клиническое наблюдение. Кролик №5, 4 мес., породы «Нидерландская красная», массой 3,5 кг. Диагноз - хронический остеомиелит нижней трети диафиза большеберцовой кости. Состояние животного средней тяжести. Наблюдается вялость, плохой аппетит, бледность слизистых оболочек и кожи на непигментированных участках тела животного. При наружном осмотре животное щадит пораженную конечность, при движении отмечается хромота. При пальпации отмечается резкая болезненность. Температура тела - 39,9°С. В анализе крови: эритроциты 4.9×10¹²/л, гемоглобин 89 г/л, лейкоциты 12,6×10⁹/л со сдвигом ядра влево, СОЭ 8 мм/ч. Содержание γ-ИНФ 8,3 пг/мл, относительное содержание Т-лимфоцитов 21%, В-лимфоцитов 8%. Температура кожи в области поражения выше на 1,5°С по сравнению с симметричным участком. При рентгенологическом исследовании отмечен в метафизе большеберцовой кости очаг деструкции с нечеткими границами, вокруг которого располжена склерозированная костная ткань, в области поражения наблюдается нечеткость границ кортикального слоя кости, имеются зоны расслоения и экзастозы. Проводилась традиционная комплексная терапия: внутримышечное введение цефазолина, витаминотерапия. Проведен курс иммунокорректора ронколейкина по 70 тыс.ME внутримышечно на 1, 2, 3 и 6 сутки, 4 инъекции. Курсовая доза составила 280 тыс.ME. На вторые сутки после введения ронколейкина температура тела снизилась, достигнув нормального значения. Через 6 суток от начала лечения состояние больного животного удовлетворительное, хромота отсутствует, животное подвижно, охотно потребляет корм и воду. Температура кожи на симметричных участках одинаковая. В анализе крови: эритроциты 7,4×10¹²/л, гемоглобин 110 г/л, лейкоциты 8,1×10⁹/л, СОЭ 1,5 мм/ч. Содержание γ-ИНФ 27,8 пг/л, Т-лимфоцитов 26%, В-лимфоцитов 14%. Контрольное обследование проводили на 20-е сутки после окончания курса терапии. На контрольной рентгенограмме выявили исчезновение признаков воспаления, заполнение деструктивной полости молодыми грануляциями, четкость рисунка кости. В анализе крови: эритроциты 7,8×10¹²/л, гемоглобин 125 г/л, лейкоциты 6,1×10⁹/л, СОЭ 1,5 мм/ч. Уровень γ-ИНФ составил 27,9 пг/л, Т-лимфоцитов 37%, В-лимфоцитов 20%.

Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод, что использование ронколейкина в коррекции нарушений процессов костеобразования и иммунодепрессий является эффективным и может быть использован в клинике.

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает комплексную терапию и иммуностимулирующий препарат-корректор интерферонового статуса. Дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живой массы на курс лечения. Способ сокращает сроки лечения, устраняет необходимость проведения повторных курсов терапии. 3 табл.

Способ лечения хронического остеомиелита у животных путем осуществления традиционной комплексной терапии, включающей иммуностимулирующий препарат-корректор интерферонового статуса, отличающийся тем, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живой массы на курс лечения.