ИММУНОКОРРИГИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО ДЛЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ Российский патент 2010 года по МПК A61K31/07 A61K31/375 A61K31/41 A61K33/04 A61K33/26 A61K33/30 A61K33/34 A61K35/02 A61P37/00 

Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для стимуляции факторов иммунитета и естественной резистентности у сельскохозяйственных животных и птицы.

Значительное распространение среди сельскохозяйственных животных вторичных иммунодефицитов диктует необходимость разработки и применения новых препаратов, обладающих иммуномодулирующими свойствами.

Иммунокорригирующая терапия является одним из наиболее перспективных методов лечения иммунодефицитных состояний и представляет собой направленное восстановление сниженной или повышенной функциональной активности различных звеньев иммунитета с помощью лекарственных средств.

В связи с этим представляется актуальным создание и внедрение средств, корригирующих как состояние иммунной системы, так и общую резистентность организма.

Известна иммуномодулирующая кормовая добавка, содержащая цеолит и сырье животного происхождения, а именно органы иммунной системы молодняка крупного рогатого скота (Патент РФ №2194419, кл. 7 А23К 1/16), известен антипаразитарный препарат с иммуномодулирующими свойствами, содержащий авермектиновый комплекс и в качестве иммуномодулятора - рибав (Патент РФ №2212891, кл. 7 А61К 35/70). Однако данные препараты обладают однонаправленным действием на иммунную систему. Кроме того, эти композиции труднодоступны, так как производятся в ограниченных количествах, и их промышленный выпуск не налажен.

Наиболее близкой композицией к предлагаемому изобретению, принятой за ближайший аналог, является биологически активная добавка к кормам сельскохозяйственных животных и птицы и способ повышения резистентности животных к различным возбудителям вирусных и бактериальных заболеваний, содержащая: «Споровит» - 99,97-99,94% и левамизол 0,03-0,06% (Патент РФ №2310339, кл. А23К 1/00, 2006.01).

Недостатком данного средства является использование в рецептуре композиции без указания точного количественного состава биологически активных веществ, при этом не учитывают именно те биотические элементы (витамины и минералы), которые принимают непосредственное участие в формировании естественной резистентности организма. Все это снижает эффективность его применения в качестве средства иммунокоррекции.

Задачей является увеличение спектра воздействия на различные звенья иммунитета, улучшение его функциональной активности, сокращение срока лечения, а также расширение видового состава животных, повышение их продуктивности и сохранности.

Техническим решением задачи является лечение и профилактика иммунодефицитных состояний у сельскохозяйственных животных и птицы за счет создания оптимального состава ингредиентов, оказывающих комплексное воздействие на уровень защитных сил организма, благодаря коррекции дефектов как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета, что влечет за собой повышение терапевтического эффекта и снижение длительности лечения.

Поставленная задача достигается тем, что в иммунокорригирующее средство для сельскохозяйственных животных и птицы, включающее левамизол, дополнительно введены комплекс витаминов, микроэлементов и бентонитовая глина при следующем соотношении компонентов, г/кг:

Левамизол 75-80 Витамин А 0,35-0,40 Витамин С 0,2-0,3 Цинк 9,0-10,0 Медь 0,5-0,6 Железо 1,5-2,5 Селен 0,03-0,04 Бентонитовая глина остальное

Заявители присваивают средству название «Имунокор», образованное от сокращения слов «иммунитет» и «коррекция».

Отличительным признаком заявленного изобретения является подбор ингредиентов в оптимальном соотношении и дозировках, позволяющих наиболее эффективно устранять иммунодефицитные состояния у животных и птицы. Апробация различных соотношений предлагаемого комплекса ингредиентов, входящих в состав, является оптимальной.

Левамизол повышает общую сопротивляемость организма и может быть использован как средство для иммунотерапии. Он способен восстановить измененные функции Т-лимфоцитов, фагоцитов и вследствие своего тимомиметического эффекта (эффекта, направленного на усиление клеточных защитных сил организма) может регулировать клеточные механизмы иммунологической системы. Избирательно стимулируя регуляторную функцию Т-лимфоцитов, левомизол выполняет функции иммуномодулятора, способного усиливать слабую реакцию клеточного иммунитета, ослаблять сильную и не действовать на нормальную.

Значительный вклад в суммарный фармакологический эффект вносят витамины, представленные, в первую очередь, витамином А. Ретинол участвует в обмене веществ и тканевых окислительно-восстановительных реакциях. Отсутствие или недостаток ретинола обуславливает выраженные изменения эпителиальных покровов. Это приводит к очаговому ороговению эпителия слизистых оболочек и кожи, к уменьшению или исчезновению бактериостатического действия их секретов. При недостаточности витамина А понижается бактерицидная активность жидкостей организма.

Поражения слизистых оболочек с явлениями метаплазии выстилающего их эпителия и исчезновением бактерицидных свойств омывающей их слизи приводят к резкому снижению барьерных иммунобиологических функций и к проникновению в организм патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Витамин А усиливает продукцию интерлейкинов, а также образование активированных макрофагов и специфических клеток-киллеров, способных распознавать и убивать злокачественные клетки.

Витамин С или аскорбиновая кислота повышает активность макрофагов в борьбе с инфекционными агентами, при его недостатке задерживается реакция защитных средств на сигнал о патологическом состоянии, снижается скорость выработки антител для борьбы против инфекции, ослабевает способность клеток иммунитета разрушать внедрившиеся в организм чужеродные факторы.

Недостаток цинка в организме сопровождается нарушением белкового, углеводного, липидного, минерального обмена, угнетением синтеза белков, вызывает атрофию лимфоидной ткани тимуса, селезенки и лимфоузлов. Цинк играет важную роль в иммунной системе животных, являясь иммуномодулятором Т- и Б-лимфоцитов. Дефицит цинка ведет к лимфопении и ослаблению активности моно- и полинуклеарных фагоцитов, снижению выработки антител к специфическим и неспецифическим агентам. Дефицит цинка приводит также нарушению синтеза ДНК в клетках и снижению пролиферации последних, что обуславливает гипоплазию иммунокомпетентных органов и снижение резистентности организма.

Медь участвует во многих биологических процессах в организме животных. Она катализирует включение железа в структуру гемоглобина и способствует созреванию эритроцитов. При недостатке меди уменьшается число эритроцитов, нарушается эритропоэз, доходя лишь до стадии ретикулоцитов. Нарушается нормальное течение окислительно-восстановительных процессов, кератинизация и пигментация, вследствие чего существенно снижается естественная резистентность организма.

Дефицит железа в организме приводит к снижению синтеза гемоглобина, уменьшению его количества в эритроцитах. Это ведет к снижению окислительно-восстановительных процессов, ослаблению резистентности организма, отставанию в росте. Железо необходимо для синтеза миелопероксидазы, играющей важную роль в фагоцитозе бактерий.

Селен влияет на выработку иммуноглобулинов G и М, что обусловлено его положительным действием на функционирование В-лимфоцитов. Регуляторная функция этого микроэлемента на гуморальный иммунитет проявляется воздействием на Т-лимфоциты и макрофаги.

Бентонитовые глины положительно действуют на показатели неспецифической резистентности животных за счет повышения фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов, их поглотительной и переваривающей способности. Применение алюмосиликатов способствует возрастанию содержания Т-лимфоцитов за счет снижения нулевых клеток (0K - лимфоцитов), а также снижению циркулирующих иммунных комплексов. Их влияние на лизоцимную и бактерицидную активность сыворотки крови проявляется возрастанием этих показателей.

Таким образом, в профилактике и терапии иммунодефицитных состояний сельскохозяйственных животных и птицы весьма перспективным является использование вышеперечисленных компонентов, комплексное применение которых оказывает синергическое действие на иммунные процессы, что способствует повышению защитных функций организма, увеличению продуктивности и сохранности животных. При этом удобная форма препарата (в виде порошка) позволяет поддерживать постоянную концентрацию ингредиентов в корме.

Новизна заявленного средства обусловлена использованием как левамизола, так и минерально-витаминных комплексов, в том числе бентонитовой глины. В результате сочетанного их применения и именно в данном соотношении достигается эффект потенцирования, что дает основание считать, что данное предложение имеет изобретательский уровень. Именно благодаря такому соотношению и взаимовлиянию усиливаются иммуномодулирующие свойства каждого отдельно взятого компонента.

Таким образом, совокупность компонентов обеспечивают получение в заявляемом средстве сверхсуммарный эффект, заключающийся в усилении свойств указанных признаков.

Иммунокорригирующее средство получают путем смешивания составляющих его компонентов в указанных соотношениях. При этом используют субстанции левамизола, витамина А, витамина С, цинк сернокислый, купорос медный, купорос железный, натрия селенит, бентонитовую глину.

Апробация иммунокорригирующего средства «Имунокор» представлена в примерах на животных.

Научно-производственный опыт проводился на коровах в ЗАО Племзавод «им. В.И.Чапаева». Для этого было сформировано 2 группы по 10 животных в каждой (1 - опытной вводили иммунокорригирующее средство в дозе 1% от массы корма в течение 15 дней, 2 группа была контрольной). В начале эксперимента проводили скрининговые исследования крови для отбора животных в опыт с дисбалансом в иммунной системе, в последующем (через 30 дней) отслеживали изменения, происходящие в организме коров по следующим показателям: фагоцитарная активность лейкоцитов крови (ФАЛ), бактерицидная (БАСК) и лизоцимная (ЛАСК) активность сыворотки крови, %-ное содержание и концентрация Т- и В-лимфоцитов, общий белок и белковые фракции.

Фоновыми исследованиями (таблица 1) установлено, что в показателях, характеризующих иммунную реактивность организма у животных, выявлены: гипопротеинемия, при этом изменения в протеинограммах связаны с недостаточным уровнем γ-глобулинов, которые представлены, в основном, иммуноглобулинами, следовательно, их низкая концентрация свидетельствует о иммунодефицитном состоянии у животных, также выявлен дисбаланс как в клеточном, так и в гуморальном звене иммунитета.

Из данных, приведенных в таблице, видно, что у животных после применения иммунокорригирующего средства идет повышение фагоцитарного процесса (разница в проценте активных фагоцитов в сравнении с контролем составляет 7,6%). Аналогичная ситуация прослеживается и в динамике поглотительной и переваривающей способности нейтрофильных гранулацитов.

Таблица 1 Эффективность иммунокорригирующего средства при вторичных иммунодефицитах (M±m; n=10) Показатели Фон Конец опыта опыт контроль ФАЛ 56,8±0,42 64,7±0,39* 57,1±0,64 ФЧ 2,31±0,07 3,84±0,02 3,05±0,06 %П 58,1±0,26 69,7±0,56* 61,4±0,45 БАСК 40,8±1,12 51,7±0,56* 41,2±0,75 ЛАСК 31,3±0,54 49,4±0,1 36,1±0,82 Общий белок, г/л 68,2±3,2 88,4±6,6* 64,2±3,2 Белковые фракции: % альбумины 47,9±5,4 34,6±3,9 44,9±5,4 α-глобулины 12,2±1,4 13,6±2,0 12,2±1,4 β-глобулины 19,5±6,4 18,8±3,4 19,5±6,4 γ-глобулины 20,4±1,1 32,9±2,8 22,8±4,4 *- Р<0,05

При сравнении параметров ЛАСК в динамике опыта отмечалось, что концу эксперимента данный показатель у опытных коров был значительно выше, чем у интактных животных (49,4±0,1% против 36,1±0,82%, разница составляет 13,3%), бактерицидная активность сыворотки крови в опытной группе в отличие от контрольных животных достигла значений нормы. Наличие достоверной разницы (Р≤0,05) в показателях общего белка и белковых фракций у коров опытной группы указывает на положительное влияние иммунокорригирующего средства на белковый обмен. За время эксперимента уровень общего белка у животных опытной группы повысился на 29,6%. Кроме того, у опытных коров наблюдалась тенденция увеличения γ-глобулиновой фракции до значений нормы. В результате анализа данных исследования клеточного и гуморального звеньев иммунитета установлено, что применение предлагаемого средства способствовало достоверному возрастанию содержания Т- и В-лимфоцитов за счет снижения NK-лимфоцитов. В опытной группе количество Т-клеток составило 61,5%, В-клеток - 27,3%, в то время как у интактных животных количество Т- и В-лимфоцитов составило 56,4% и 24,3% соответственно (разница 5,1-3%).

В гуморальном звене иммунитета определялось содержание иммуноглобулинов класса А и М у всех экспериментальных животных. Анализ этих данных позволил сделать вывод о том, что иммунокорригирующее средство способствует достоверному увеличению Ig A (2,3 мг/мл против 1,4 мг/мл в контроле), а в концентрации Ig M отмечена тенденция к увеличению (18,31 мг/мл против 15,67 мг/мл в контроле).

Таким образом, применение иммунокорригирующего средства оказывает выраженное стимулирующее влияние на иммунокомпетентные системы организма, в результате чего повышается уровень неспецифической защиты животного.

Научно-производственный опыт по изучению эффективности заявленного иммунокорригирующего средства проводился в условиях СХП ВВС «Рассвет» Динского района Краснодарского края при вакцинации молодняка крупного рогатого скота против ПГ-3 и ИРТ. Опытную группу телят (25 голов) 3-5-месячного возраста прививали вакциной против парагриппа-3 и ринотрахеита КРС согласно наставлению по применению (за 10 дней до вакцинации животным вводили иммунокорригирующее средство в дозе 1% от массы корма). Контрольную группу телят (25 голов) иммунизировали только вышеуказанной вакциной. Повторно опытную и контрольную группы телят вакцинировали через 18 дней аналогичным способом.

У 10 телят из каждой группы брали кровь для серологических исследований на наличие специфических антител к вирусам ПГ-3 и ИРТ до вакцинации, перед второй вакцинацией и через 16 дней после повторной вакцинации. Титр антител к вирусу ПГ-3 определяли в РТГА, к вирусу ИТР - в РН (1000 ТЦД₅₀). Результаты серологических исследований приведены в таблице 2.

Таблица 2 Поствакцинальные титры антител к вирусам ПГ-3 и ИТР при использовании иммунокорригирующего средства Группа Титр антител в log₂ До вакцинации 18 сутки 34 сутки к вирусу ИРТ Опытная 1,5±0,12 2,8±0,2 5,4±0,26 Контрольная 1,4±0,15 2,3±0,12 4,5±0,21 к вирусу ПГ-3 Опытная 2,7±0,2 4,7±0,3 6,4±0,24 Контрольная 2,6±0,18 3,5±0,28 5,1±0,12

Полученные результаты свидетельствуют о выраженной иммуностимулирующей активности иммунокорригирующего средства при иммунизации крупного рогатого скота против ПГ-3 и ИТР.

Научно-производственный опыт по изучению эффективности заявленного иммунокорригирующего средства проводился при вакцинации молодняка птицы против болезни Марека. Опытной группе цыплят за 10 дней до вакцинации вводили иммунокорригирующее средство в дозе 1% от массы корма, затем прививали вакциной против болезни Марека согласно наставлению по применению. Контрольную группу птицы иммунизировали только вышеуказанной вакциной. Результаты опыта приведены в таблице 3.

Испытание иммунокорригирующего средства на птице показывает его эффективность в отношении увеличения среднесуточных привесов и сохранности поголовья птицы при вакцинации.

Таблица 3 Привесы и сохранность цыплят при использовании иммунокорригирующего средства Группы Кол-во птицы тыс. Среднесуточный, привес г Сохранность, % Опыт 32 8,1 96,2 Контроль 32 7,8 95,8

Таким образом, проведенные исследования показали, что заявленное иммунокорригирующее средство обладает иммуностимулирующей активностью и может быть использовано как для коррекции вторичных иммунодефицитов, так и для стимуляции антителообразования при вакцино-профилактике сельскохозяйственных животных и птицы.

Результаты клинических испытаний позволяют рекомендовать заявленный препарат в ветеринарную практику.

Примеры на получение средства:

Пример 1.

Для получения 1 кг иммунокорригирующего средства взяли левамизола 75,0 г; витамина А 0,35 г; витамина С 0,20 г; цинка 9,0 г; меди 0,5 г; железа 1,5 г; селена 0,03 г; бентонитовой глины 913,42 г. Смешивание осуществляли при непрерывном перемешивании.

Пример 2.

Для получения 1 кг иммунокорригирующего средства взяли левамизола 80,0 г; витамина А 0,40 г; витамина С 0,30 г; цинка 10,0 г; меди 0,6 г; железа 2,5 г; селена 0,04 г; бентонитовой глины 906,16 г.

Смешивание проводили аналогично примеру 1.

Пример 3.

Ослабленному поросенку 30-дневного возраста с массой тела 7,9 кг назначали ежедневно однократно в течение 15 дней с сухим кормом иммунокорригирующее средство в дозировке 1% от массы корма. К концу профилактического курса у животного регистрировали улучшение клинического состояния, повышение двигательной активности, хорошую выраженность рефлексов и аппетита, увеличение ежедневного прироста массы тела.

Последующее наблюдение за поросенком в течение 30 дней показало, что применение иммунокорригирующего средства позволило повысить уровень естественной резистентности животного и предупредить заболевание гастроэнтеритом, в отличие от аналогов, не получающих препарат.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения вторичных иммунодефицитных состояний у сельскохозяйственных животных и птицы. Иммунокорригирующее средство содержит левамизол, витамины, микроэлементы и бентонитовую глину в следующем соотношении, г/кг: левамизол - 75-80; витамин А - 0,35-0,40; витамин С - 0,2-0,3; цинк - 9,0-10,0; медь - 0,5-0,6; железо - 1,5-2,0; селен - 0,03-0,04; бентонитовая глина - остальное. Использование предлагаемого средства путем добавления в корм животных и птицы оказывает выраженное стимулирующее влияние на иммунокомпетентные системы организма, что, в свою очередь, способствует повышению защитных функций организма и увеличению продуктивности и сохранности животных. Средство может быль использовано для стимуляции антителообразования при вакцинопрофилактике сельскохозяйственных животных и птицы. 3 табл.

Иммунокорригирующее средство для сельскохозяйственных животных и птицы, включающее левамизол, отличающееся тем, что в целевое начало дополнительно введены комплекс витаминов, микроэлементов и бентонитовая глина при следующем соотношении компонентов, г/кг:
Левамизол 75-80 Витамин А 0,35-0,40 Витамин С 0,2-0,3 Цинк 9,0-10,0 Медь 0,5-0,6 Железо 1,5-2,0 Селен 0,03-0,04 Бентонитовая глина Остальное