СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АРГИНИНА, ИЗОЛЕЙЦИНА И ЛИЗИНА В ПОЛИАМИНОКИСЛОТНЫХ ПРЕПАРАТАХ Российский патент 2010 года по МПК G01N27/26 G01N33/00 

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть использовано для определения аминокислот в составе фармацевтических средств и препаратах для спортивного питания.

Технической задачей изобретения является разработка способа определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах с применением высаливателя и смеси гидрофильных растворителей.

Для решения технической задачи предложен способ определения аргинина, изолейцина и лизина, характеризующийся тем, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105».

Технический результат заключается в определении активных компонентов (аргинина, изолейцина и лизина) в водной вытяжке полиаминокислотного препарата с применением высаливателя и смеси гидрофильных растворителей на уровне концентраций 5-15 мг/мл.

Предлагаемый способ определения аргинина, изолейцина и лизина в полиаминокислотных препаратах осуществляют по следующей методике.

Таблетки полиаминокислотного препарата, содержащего аргинин, изолейцин и лизин, взвешивают на аналитических весах, измельчают в ступке и готовят водную вытяжку, содержащую аминокислоты, с концентрациями (мг/мл): аргинин - 8,5; лизин - 6; изолейцин - 13. К 30 мл водной вытяжки аминокислот добавляют 20-25 мас.% высаливателя (кристаллический сульфат лития). Предварительно готовят смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, которую затем добавляют к водно-солевому раствору аргинина, изолейцина и лизина в количестве 3 мл (соотношение водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1). Далее экстрагируют на вибросмесителе 5 мин до установления межфазного равновесия, выдерживают 1-2 мин, после расслаивания фаз экстракт отделяют и анализируют методом капиллярного электрофореза («Капель-105»).

Осуществление способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1

Таблетки, содержащие аргинин, изолейцин и лизин, взвешивают на аналитических весах и измельчают в ступке, предварительно удалив окрашенную оболочку. Точную навеску измельченных таблеток растворяют в 30 мл дистиллированной воды, интенсивно перемешивая, раствор фильтруют через фильтр «белая лента». Концентрация аминокислот в полученной водной вытяжке составляет (мг/мл): аргинин - 8,5; лизин - 6; изолейцин - 13. К 30 мл водной вытяжки аминокислот добавляли 25 мас.% высаливателя (кристаллический сульфат лития), раствор тщательно перемешивали до полного растворения высаливателя, добавляли 3 мл (соотношение водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1) предварительно приготовленной смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 50 мас.% н. бутилового спирта, 20 мас.% этилацетата и 30 мас.% ацетона, экстрагируют на вибросмесителе 5 мин (в течение этого времени достигается межфазное равновесие), выдерживают 1-2 мин. Полученный экстракт анализировали методом капиллярного электрофореза («Капель-105»).

В органическую фазу переходит 98,2, 98,9 и 95,3 мас.% аргинина, лизина и изолейцина соответственно. Достигается практически полное извлечение аминокислот, способ выполним.

Пример 2

Анализ выполняли аналогично примеру 1, но к водной вытяжке, содержащей аргинин, изолейцин и лизин, добавляли высаливатель в количестве 25 мас.%. В органическую фазу переходит 97,5, 98,3 и 97,8% аргинина, лизина и изолейцина соответственно от их содержания в исходном растворе. Достигается практически полное извлечение аминокислот, способ выполним.

В таблице приведена сравнительная характеристика примеров определения аргинина, лизина и изолейцина в полиаминокислотном препарате по заявляемому способу.

Таблица Сравнительная характеристика примеров определения аргинина, лизина и изолейцина в полиаминокислотных препаратах по заявляемому способу Номер примера Содержание, мас.% Степень извлечения, % высаливателя н. бутиловый спирт этилацетат ацетон аргинин изолейцин лизин 1 20 50 20 30 98,2 98,9 95,3 2 25 50 20 30 97,5 98,3 97,8

Как следует из таблицы, положительный эффект по предлагаемому способу достигается при содержании высаливателя 20-25 мас.%, применении смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 50 мас.% н. бутилового спирта, 20 мас.% этилацетата и 30 мас.% ацетона, соотношении водно-солевой раствор - смесь гидрофильных растворителей 10:1.

При содержании высаливателя в системе менее 20 мас.%, органическая фаза не образуется, при содержании более 25 мас.% выделяются кристаллы соли, экстракция неосуществима.

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений применительно к анализу фармацевтических средств и препаратов для спортивного питания. Способ заключается в том, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н. бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105». Достигается возможность определения на уровне концентраций 5-15 мг/мл. 1 табл.

Способ определения аргинина, изолейцина и лизина, заключающийся в том, что предварительно готовят водную вытяжку аминокислот из препарата, содержащего в качестве активных компонентов аргинин, изолейцин и лизин, добавляют высаливатель в виде кристаллического сульфата лития в количестве 20-25 мас.%, раствор перемешивают, после чего добавляют к нему в объемном соотношении 1:10 смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 30 мас.% н.бутилового спирта, 30 мас.% этилацетата и 40 мас.% ацетона, перемешивают, процесс экстракции осуществляют в течение 20 мин, экстракт отделяют и определяют в нем содержание аргинина, изолейцина и лизина методом капиллярного электрофореза с применением системы «Капель-105».