Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть применено в серийных анализах при производстве фармацевтических препаратов: биологически активных пищевых добавок, аминокислотных смесей, витаминных комплексов.
Технической задачей изобретения является раздельное определение аминокислот-триптофана и фенилаланина в водном растворе с применением экстракции трехкомпонентной смесью гидрофильных растворителей.
Техническая задача достигается тем, что в способе селективного определения триптофана и фенилаланина в водном растворе, характеризующегося тем, что готовят водный раствор триптофана и фенилаланина с исходными концентрациями 0,05 и 0,02 мг/мл соответственно, затем постепенно добавляют высаливатель - кристаллический сульфат лития до его содержания 25 мас.% по отношению к массе водного раствора аминокислот, к приготовленному водно-солевому раствору триптофана и фенилаланина добавляют экстрагент-трехкомпонентную смесь гидрофильных растворителей в объемном соотношении водно-солевого раствора и смеси экстрагентов 10:1, причем смесь гидрофильных растворителей предварительно готовят из 60-70 мас.% бутилового спирта, 20-25 мас.% ацетона и 5-20 мас.% этилацетата, затем экстрагируют на вибросмесителе в течение 5 мин, выдерживают несколько минут до полного разделения фаз, экстракт количественно переносят в ячейку для кондуктометрического титрования и определяют в экстракте содержание триптофана и фенилаланина, для этого по результатам кондуктометрического титрования строят кривую зависимости электроповодности раствора от объема прилитого титранта, по фиксированным точкам эквивалентности определяют массу триптофана и фенилаланина в экстракте, степень извлечения (R, %) триптофана и фенилаланина рассчитывают по формуле
где D - коэффициент распределения триптофана и фенилаланина между трехкомпонентной смесью гидрофильных растворителей и водно-солевым раствором, r - соотношение равновесных объемов водной и органической фаз.
Технический результат заключается в разработке способа селективного определения триптофана и фенилаланина в водном растворе с применением экстракции трехкомпонентной смеси гидрофильных растворителей, позволяющего определять до 97-98% триптофана и 98-99% фенилаланина.
Способ осуществляется следующим образом.
Готовят водный раствор триптофана и фенилаланина с исходными концентрациями 0,05 и 0,02 мг/мл соответственно, затем постепенно добавляют высаливатель - кристаллический сульфат лития до его содержания 25 мас.% по отношению к массе водного раствора аминокислот, к приготовленному водно-солевому раствору триптофана и фенилаланина добавляют экстрагент - трехкомпонентную смесь гидрофильных растворителей в объемном соотношении водно-солевого раствора и смеси экстрагентов 10:1, причем смесь гидрофильных растворителей предварительно готовят из 60-70 мас.% бутилового спирта, 20-25 мас.% ацетона и 5-20 мас.% этилацетата, затем экстрагируют на вибросмесителе в течение 5 мин, выдерживают несколько минут до полного разделения фаз, экстракт количественно переносят в ячейку для кондуктометрического титрования и определяют в экстракте содержание триптофана и фенилаланина, для этого по результатам кондуктометрического титрования строят кривую зависимости электроповодности раствора от объема прилитого титранта. В качестве титранта применяют этанольный раствор КОН с концентрацией 0,01 моль/дм3. Затем по фиксированным точкам эквивалентности определяют массу триптофана и фенилаланина в экстракте, степень извлечения (R, %) триптофана и фенилаланина рассчитывают по формуле
где D - коэффициент распределения триптофана и фенилаланина между трехкомпонентной смесью гидрофильных растворителей и водно-солевым раствором, r - соотношение равновесных объемов водной и органической фаз.
Способ иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Готовят 50 мл раствора триптофана и фенилаланина с концентрациями 0,05 и 0,02 мг/мл соответственно, добавляют высаливатель - кристаллический сульфат лития в количестве 25 мас.%. К водно-солевому раствору триптофана и фенилаланина добавляют 5 мл трехкомпонентной смеси гидрофильных растворителей в соотношении 10: 1, которую готовят из 60 мас.% бутилового спирта, 20 мас.% ацетона и 20 мас.% этилацетата. Затем экстрагируют на вибросмесителе в течение 5 мин, выдерживают несколько минут до полного разделения фаз, экстракт количественно переносят в ячейку для кондуктометрического титрования и определяют в экстракте содержание триптофана и фенилаланина. Для этого по результатам кондуктометрического титрования строят кривую зависимости электропроводности раствора от объема прилитого титранта. В качестве титранта применяют этанольный раствор КОН с концентрацией 0,01 моль/дм3. Затем по фиксированным точкам эквивалентности находят массу триптофана и фенилаланина в экстракте. Степень извлечения (R, %) триптофана и фенилаланина рассчитывают по формуле:
где D - коэффициент распределения триптофана и фенилаланина между трехкомпонентной смесью гидрофильных растворителей и водно-солевым раствором, r - соотношение равновесных объемов водной и органической фаз.
Органическая фаза содержит 97,5% триптофана и 98,8% фенилаланина по отношению к исходному содержанию аминокислот в анализируемом растворе. Данные анализа представлены в таблице.
Достигается практически полное 97-98 мас.%-ное извлечение триптофана и 98-99 мас.%-ное извлечение фенилаланина, способ выполним.
Пример 2.
Анализ выполняют аналогично примеру 1, но к водному раствору триптофана и фенилаланина добавляют трехкомпонентную смесь гидрофильных растворителей, состоящую из 70 мас.% бутилового спирта, 25 мас.% ацетона и 5 мас.% этилацетата. В органическую фазу переходит 97,7% триптофана и 98,2% фенилаланина от содержания в исходном растворе. Достигается практически 97-98 мас.%-ное извлечение триптофана и 98-99 мас.%-ное извлечение фенилаланина, способ выполним.
Данные анализа представлены в таблице.
Как видно из таблицы, положительный эффект по предлагаемому способу достигается при содержании высаливателя 25 мас.%, применении трехкомпонентной смеси гидрофильных растворителей, состоящей из 60-70 мас.% бутилового спирта, 20-25 мас.% ацетона и 5-20 мас.% этилацетата, при объемном соотношение смеси растворителей и водно-солевого раствора 1:10.
Предложенный способ позволяет:
1. селективно определять триптофан и фенилаланин в водном растворе без их предварительного разделения;
2. проводить электрохимические измерения без применения вредно-действующих реагентов.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ СЕЛЕКТИВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИРОЗИНА И ФЕНИЛАЛАНИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2005 |
|
RU2276784C1 |
СПОСОБ РАЗДЕЛЬНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИПТОФАНА И ТИРОЗИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2006 |
|
RU2305832C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АСПАРАГИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2005 |
|
RU2319143C2 |
СПОСОБ РАЗДЕЛЬНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АСПАРАГИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ГЛУТАМИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2006 |
|
RU2294537C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВАЛИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2006 |
|
RU2305831C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛИЦИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2005 |
|
RU2277085C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИЗИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2006 |
|
RU2299433C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛАНИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2006 |
|
RU2305834C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АРГИНИНА, ИЗОЛЕЙЦИНА И ЛИЗИНА В ПОЛИАМИНОКИСЛОТНЫХ ПРЕПАРАТАХ | 2008 |
|
RU2390010C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 4-АМИНОБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ | 2003 |
|
RU2243553C1 |
Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть применено в серийных анализах при производстве фармацевтических препаратов: биологически активных пищевых добавок, аминокислотных смесей, витаминных комплексов.Способ селективного определения триптофана и фенилаланина в водном растворе характеризуется тем, что готовят водный раствор триптофана и фенилаланина с исходными концентрациями 0,05 и 0,02 мг/мл соответственно, затем постепенно добавляют высаливатель кристаллический сульфат лития до его содержания 25 мас.% по отношению к массе водного раствора аминокислот, к приготовленному водно-солевому раствору триптофана и фенилаланина добавляют экстрагент - трехкомпонентную смесь гидрофильных растворителей в объемном соотношении водно-солевого раствора и смеси экстрагентов 10:1, причем смесь гидрофильных растворителей предварительно готовят из 60-70 мас.% бутилового спирта, 20-25 мас.% ацетона и 5-20 мас.% этилацетата, затем экстрагируют на вибросмесителе в течение 5 мин, выдерживают несколько минут до полного разделения фаз, экстракт количественно переносят в ячейку для кондуктометрического титрования и определяют в экстракте содержание триптофана и фенилаланина, для этого по результатам кондуктометрического титрования строят кривую зависимости электроповодности раствора от объема прилитого титранта, по фиксированным точкам эквивалентности определяют массу триптофана и фенилаланина в экстракте, степень извлечения (R, %) триптофана и фенилаланина рассчитывают по формуле R=D·100/D+r, где D - коэффициент распределения триптофана и фенилаланина между трехкомпонентной смесью гидрофильных растворителей и водно-солевым раствором, r - соотношение равновесных объемов водной и органической фаз. Технический результат заключается в разработке способа селективного определения триптофана и фенилаланина в водном растворе с применением экстракции трехкомпонентной смеси гидрофильных растворителей, позволяющего определять до 97-98% триптофана и 98-99% фенилаланина. 1 табл.
Способ селективного определения триптофана и фенилаланина в водном растворе, характеризующийся тем, что готовят водный раствор триптофана и фенилаланина с исходными концентрациями 0,05 и 0,02 мг/мл соответственно, затем постепенно добавляют высаливатель - кристаллический сульфат лития до его содержания 25 мас.% по отношению к массе водного раствора аминокислот, к приготовленному водно-солевому раствору триптофана и фенилаланина добавляют экстрагент-трехкомпонентную смесь гидрофильных растворителей в объемном соотношении водно-солевого раствора и смеси экстрагентов 10:1, причем смесь гидрофильных растворителей предварительно готовят из 60-70 мас.% бутилового спирта, 20-25 мас.% ацетона и 5-20 мас.% этилацетата, затем экстрагируют на вибросмесителе в течение 5 мин, выдерживают несколько минут до полного разделения фаз, экстракт количественно переносят в ячейку для кондуктометрического титрования и определяют в экстракте содержание триптофана и фенилаланина, для этого по результатам кондуктометрического титрования строят кривую зависимости электроповодности раствора от объема прилитого титранта, по фиксированным точкам эквивалентности определяют массу триптофана и фенилаланина в экстракте, степень извлечения (R, %) триптофана и фенилаланина рассчитывают по формуле
R=D·100/D+r,
где D - коэффициент распределения триптофана и фенилаланина между трехкомпонентной смесью гидрофильных растворителей и водно-солевым раствором, r - соотношение равновесных объемов водной и органической фаз.
СПОСОБ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ | 1991 |
|
RU2012869C1 |
СПОСОБ СЕЛЕКТИВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИРОЗИНА И ФЕНИЛАЛАНИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ | 2005 |
|
RU2276784C1 |
Способ количественного определения гиббереллинов | 1959 |
|
SU131133A1 |
US 2005176070 A, 11.08.2005 | |||
WO 2006122113 A, 02.03.2006 | |||
US 4604483 A, 05.08.1986 | |||
US 6468416 A, 22.12.2002 | |||
GUTHRIE R., SUSI A | |||
Приспособление к комнатным печам для постепенного сгорания топлива | 1925 |
|
SU1963A1 |
Авторы
Даты
2007-09-10—Публикация
2006-06-20—Подача