СРЕДСТВО, УВЕЛИЧИВАЮЩЕЕ РЕЗЕРВ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ОРГАНИЗМЕ Российский патент 2010 года по МПК C12N5/00 C12N9/26 A61L2/14 A61K47/06 

Описание патента на изобретение RU2405822C1

Изобретение относится к области экспериментальной биологии и медицины, конкретно к фармакологии и клеточным технологиям, и может быть использовано в регенеративной медицине.

Существуют способы увеличения содержания клеток-предшественников различных классов в определенных тканях с помощью линейно-рестриктированных и раннедействующих факторов роста [1].

Известна возможность увеличения резерва стволовых клеток в организме с помощью препарата нативной гиалуронидазы [2, 3].

Недостатками данного средства являются побочные эффекты и осложнения [4, 5], связанные с иммуногенностью гиалуронидазы, представляющей собой белковый препарат. В частности, системные и местные аллергические реакции различной интенсивности (вплоть до анафилактического шока) при ее парентеральном введении, представляющем собой единственно возможный путь назначения данного фермента. В связи с этим важное значение приобретает проблема создания средства, обладающего способностью увеличивать резерв стволовых клеток в организме, при использовании которого отсутствовали бы побочные эффекты, наблюдаемые при парентеральном применении нативной гиалуронидазы.

Задачей, решаемой данным изобретением, является создание средства, увеличивающего резерв стволовых клеток в организме, не имеющего иммуногенности, эффективного как при парентеральном, так и при пероральном введении.

Поставленная задача достигается иммобилизацией гиалуронидазы на носителях низкой молекулярной массы на носителях с помощью ионизирующего излучения. В качестве носителя используются биологически индифферентные вещества - водорастворимые полимеры с молекулярной массой 400-4000 Да.

Наиболее предпочтительным способом иммобилизации является воздействие на полимерный носитель и биологически активное соединение направленным потоком ускоренных электронов с энергией электронов 2,5 МэВ, поглощенная доза от 2 до 10 кГр, скорость набора дозы 1,65 кГр/час.

В качестве водорастворимого полимера используют полиэтиленгликоль, гидроксиэтилкрахмал, поливинилпирролидон и др. с молекулярной массой от 400 до 4000 Да.

Новым в предлагаемом изобретении является создание средства, представляющего собой гиалуронидазу, иммобилизированную с помощью ионизирующего излучения, увеличивающего резерв стволовых клеток в организме, не имеющего иммуногенности, и эффективного как при парентеральном, так и при пероральном введении.

Используемое нами оригинальное средство иммобилизированной с помощью ионизирующего излучения на низкомолекулярном носителе гиалуронидазы было разработано и получено НИИ фармакологии СО РАМН (г.Томск) совместно с ООО «Саентифик Фьючер Менеджмент» (г.Новосибирск).

В настоящее время весьма перспективными для лечения различных заболеваний выглядят способы клеточной терапии. При этом наиболее физиологичным и целесообразным подходом к решению задач регенеративной медицины является фармакологическая стимуляция эндогенных стволовых клеток (СК) [6]. Вместе с тем регуляторы функций СК в подавляющем большинстве представляют собой белковые соединения, применение которых в качестве препаратов для системного использования значительно ограничено вследствие их высокой иммуногенности [4, 5]. Известны способы преодоления иммуногенности белковых препаратов с помощью глюкокортикоидных гормоны, антигистаминных средств и др. Однако использование данных препаратов зачастую сопровождается развитием нежелательных побочных эффектов и осложнений, характерных для них самих [6, 7].

В то же время значительное снижение иммуногенности веществ наблюдается при энтеральном приеме лекарственных препаратов. Однако средства белкового происхождения в желудочно-кишечном тракте подвергаются расщеплению под влиянием протеолитических ферментов, что делает данный путь их введения в организм неэффективным. В то же время существуют данные о снижении иммуногенности и повышении устойчивости белков к протеазам при их иммобилизации на низкомолекулярных носителях [8]. Известен препарат - лонгидаза, представляющий собой конъюгат гиалуронидазы («Лидаза») и полиоксидония, получаемый путем химического синтеза [9]. Тем не менее, сведений о возможности уменьшения иммуногенных свойств гиалуронидазы, а также способа создания препарата с высокой гиалуронидазной активностью, эффективного, в том числе при приеме внутрь, за счет иммобилизации молекул фермента на носителях низкой молекулярной массы с использованием ионизирующего излучения, на сегодняшний день не существует. Более того, не существует данных о фармакологических преимуществах препаратов, полученных в результате иммобилизации биологически активных веществ с помощью ионизирующего излучения, перед соединениями, образующимися при конъюгировании тех же исходных субстанций, но химическим путем. То есть не известно существование качественных различий конечного продукта, связанных со способом его получения: технологии химического синтеза (с помощью которой получают лонгидазу) и электронно-лучевой технологией иммобилизации (с помощью которой осуществляется получение предлагаемого средства). В то же время известно, что процесс манипуляции разнородными субстанциями на молекулярном уровне [10, 11], в том числе с использованием физических факторов, обладающих высокой энергией, может сопровождаться существенными изменениями стереохимической структуры исходных веществ, и в конечном итоге приводить к модификации их свойств, характер которой зачастую является непредсказуемым.

Факт иммобилизации гиалуронидазы на носителе с помощью ионизирующего излучения с достижением нового технического результата: создание средства, увеличивающего резерв стволовых клеток в организме, не имеющего иммуногенности и эффективного при парентеральном и пероральном приеме, для специалиста является не очевидным.

Заявляемые существенные признаки проявили в совокупности новые свойства, не вытекающие явным образом из уровня техники в данной области. Предлагаемое изобретение может быть использовано в экспериментальной биологии и медицине с выходом в практическое здравоохранение. Идентичной совокупности признаков при исследовании уровня техники по патентной и научно-медицинской литературе не обнаружено.

Исходя из вышеизложенного, следует считать заявляемое техническое решение соответствующим критериям: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».

Эксперименты были проведены на мышах-самцах линии CBA/CaLac в количестве 106 штук, массой 18-20 г, 27 морских свинках обоего пола массой 200-250 г. Животные получены из питомника отдела экспериментального биомедицинского моделирования НИИ фармакологии СО РАМН.

Пример 1

10% водный раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 400 Да облучали потоком ускоренных электронов в дозе 1,5 Мрад. Обработку проводили тормозным излучением, генерируемым ускорителем ИЛУ-6 с энергией электронов 2,5 МэВ, поглощенная доза от 2 кГр, скорость набора дозы 1,65 кГр/час. В облученный раствор вносили гиалуронидазу («Лидаза», ФГУП «НПО Микроген» МЗ РФ) до конечной концентрации 70 ЕД гиалуронидазы в 1 мл 10% полиэтиленгликоля. Смесь перемешивали 10 минут и получали конечный иммобилизиованный препарат в виде слегка опалесцирующего раствора. Выход готового продукта составляет 96,2%.

Пример 2

5% водный раствор гидроксиэтил-крахмала с молекулярной массой 1,5 кДа облучали потоком ускоренных электронов в дозе 1,5 Мрад. Обработку проводили тормозным излучением, генерируемым ускорителем ИЛУ-10 с энергией электронов 2,5 МэВ, поглощенная доза 10 кГр, скорость набора дозы 1,65 кГр/час. В облученный раствор вносили гиалуронидазу («Лидаза», ФГУП «НПО Микроген» МЗ РФ) до конечной концентрации 70 ЕД гиалуронидазы в 1 мл 5% гидроксиэтил-крахмале. Смесь перемешивали 10 минут и получали конечный иммобилизиованный препарат в виде слегка опалесцирующего раствора. Выход готового продукта составляет 97,3%.

Пример 3

Изучали специфическую активность имГД. В качестве препарата сравнения использовали «Лонгидазу» (НПО Петровакс Фарм. Россия), представляющую собой химический конъюгат гиалуронидазы («Лидаза») с полиоксидонием.

На 3, 5, 8 сут с помощью метода лимитирующих разведений определяли количество мезенхимальных (истинных) стволовых клеток (МСК) [12], а также методом клонирования в полувязкой среде изучали содержание гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) - гранулоцитарно-эритро-макрофагально-мегакариоцитарных единиц (КОЕ-ГЭММ), коммитированных мезенхимальных (КОЕ-Ф) и грануломоноцитарных (КОЕ-ГМ) клеток-предшественников в костном мозге [13], представляющем собой по современным представлениям депо СК в организме [6].

Обработку результатов проводили методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента и непараметрического U-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни. Частоту встречаемости МСК в костном мозге и периферической крови определяли с помощью обобщенной линейной модели для распределения Пуассона. Соответствие данных лимитирующих разведений одномерной модели Пуассона оценивалось посредством линейной log-log регрессии. При этом теоретическая фракция отрицательных лунок µi распределялась как µi=exp(-fxi), где f - частота встречаемости MCK, xi - количество клеток, высаженных в лунку [12]. Использовалась программа Statistica 6.0.

Препарат иммобилизированной с помощью электронно-лучевого воздействия на полиэтиленкликоле гиалуронидазы (имГД) в дозе 1000 Ед/кг, вводили интактным животным однократно внутрибрюшинно и перорально. Контрольным мышам в эквивалентном объеме (0,2 мл) внутрибрюшинно и перорально вводили препарат сравнения «Лонгидазу» (НПО Петровакс Фарм. Россия) в дозе 1000 Ед/кг.

Введение животным исследуемых препаратов во всех случаях, за исключением перорального введения препарата сравнения, приводило к существенному возрастанию содержания исследуемых прогениторных элементов в костном мозге.

При внутрибрюшинном введении лонгидазы количество MCK, КОЕ-ГЭММ, КОЕ-Ф и КОЕ-ГМ было повышенным на протяжении всего эксперимента и достигало максимальных значений на 5 сутки опыта.

Использование имГД приводило к значительно более выраженным и продолжительным изменениям со стороны изучаемых пулов прогениторных элементов. Причем следует отметить, что свою максимальную эффективность заявляемое средство проявляло в отношении наиболее ранних клеток-предшественников: МСК и КОЕ-ГМ. Более того, практически не наблюдалось различий в группах животных, получающих данный препарат разными способами (парентерально и перорально) (табл.1).

Пример 4

Средство получали путем иммобилизации гиалуронидазы на молекулах гидроксиэтил-крахмала с помощью разных видов ионизирующего излучения: 1) гамма излучения (имГД-1), 2) ультрафиолетового излучения (имГД-2) и 3) лазерного излучения (имГД-3). Препараты иммобилизированной ГД (ООО «Саентифик Фьючер Менеджмент», г.Новосибирск) в дозе 50 Ед/кг вводили интактным животным перорально 1 раз в сутки в течение 5 дней.

Введение имГД во всех случаях приводило к значительному и практически одинаковому увеличению содержания ранних (МСК, КОЕ-ГЭММ) и коммитированных прогениторных клеток (КОЕ-Ф) в гемопоэтической ткани. При этом наибольших величин повышение исследуемых показателей имело место в отношении МСК и КОЕ-ГЭММ на 8 сутки опыта (табл.2).

Таблица 2 Динамика содержания стволовых клеток и коммитированных клеток-предшественников гемопоэза в костном мозге мышей линии CBA/CaLac при введении ГД иммобилизированной с помощью гамма-излучения (имГД-1), ультрафиолетового излучения (имГД-2) и лазерного излучения (имГД-3), (X±m) Сроки исследования (сутки) МСК, на 106 миелокариоцитов КОЕ-Ф, на 250 тыс. миелокариоцитов СКК (КОЕ-ГЭММ), на 105 миелокариоцитов фон 18,0±2,4 6,3±0,51 5,67±0,57 3-е имГД-1 29,0±0,6* 12,4±0,63* 11,9±1,1* имГД-2 32,0±1,3* 11,7±0,21* 12,3±0,9* имГД-3 31,0±0,84* 10,9±0,36* 12,1±0,87* 8-е имГД-1 43,0±0,7* 17,3±1,2* 9,87±0,4* имГД-2 41,0±1,4* 18,6±0,97* 10,12±0,56* имГД-3 42,0±0,9* 19,3±0,56* 9,67±0,39* * - отмечена достоверность различий с фоновыми значениями при p<0,05

Пример 5

Проводили сравнительное изучение аллергизирующих (иммуногенных) свойств препаратов гиалуронидазы, иммобилизированной на полиэтиленгликоле с помощью ионизирующей радиации (имГД), и «Лонгидазу» (НПО Петровакс Фарм., Россия).

Препараты исследовались в одинаковых дозах (определяемых по единицам активности гиалуронидазы), которая была определена как оптимальная в отношении стимуляции стволовых клеток, и в 10 раз ее превышающей (содержание гиалуронидазы 100 и 1000 Ед/кг соответственно). Оценка аллергизирующих свойств препарата проводилась с использованием следующих тестов: реакции общей анафилаксии, реакции специфической агломерации лейкоцитов, при внутрикожном и конъюнктивальном тестировании на морских свинках, реакции гиперчувствительности замедленного типа на мышах [14].

Для сенсибилизации морских свинок препараты вводили: сначала 1 раз подкожно, затем в той же дозе 2 раза внутримышечно, через день, в область бедра. Анафилактогенные свойства препаратов гиалуронидазы выявляли путем его внутрисердечного введения на 21-е сутки после последней сенсибилизирующей инъекции. Разрешающее тестирующее внутрисердечное введение препарата проводилось в дозе, равной суммарной сенсибилизирующей, т.е. 300 Ед/кг. Контролем служили несенсибилизированные морские свинки, которым препарат вводили внутрисердечно.

Учет интенсивности анафилактической реакции проводили с использованием формулы

,

где АИ - анафилактический индекс;

n - число животных, анафилактическая реакция которых заканчивалась смертельным исходом;

n1 - число животных со значительными проявлениями анафилактической реакции;

n2 - число животных со средними проявлениями реакции;

n3 - число животных со слабыми проявлениями реакции;

N - общее число животных в группе.

Для оценки кожно-сенсибилизирующих свойств препарата через 20 дней после окончания сенсибилизирующих инъекций на боковой поверхности тела морских свинок выстригали шерсть, и каждому животному внутрикожно вводили препарат имГД, либо лонгидазу в дозах 10 Ед/животное (50 Ед/кг) в 0,02 мл физиологического раствора (доза, не вызывающая визуальных изменений кожи у интактных морских свинок).

Реакцию кожи на введение препарата оценивали в баллах с учетом выраженности гиперемии и размеров гиперемированной области (средняя величина диаметра в миллиметрах). Были определены четыре степени гиперемии, которым соответствовали числовые индексы: сильная (+++) - 1,0; средняя (++) - 0,66; слабая (+) - 0,33; сомнительная (+/-) - 0,17. Умножение величины диаметра гиперемированной области на индекс соответствующей степени гиперемии, позволило в едином показателе (баллы) выразить обе характеристики реакции.

На 20-й день после завершения цикла сенсибилизирующих инъекций, проводилось конъюнктивальное тестирование. Тест заключался в закапывании в левый глаз каждого животного 0,02 мл физиологического раствора, содержащего 10 Ед препарата, в правый глаз - физиологического раствора в том же объеме. Оценка состояния конъюнктивы глаза проводилась через 4 и 24 часа после воздействия.

С целью подтверждения результатов, полученных вышеперечисленными тестами, использовалась реакция аллергодиагностики in vitro РСАЛ (реакция специфической агломерации лейкоцитов). Рабочая доза препаратов гиалуронидазы для этой реакции составляла 5 Ед на 0,05 мл крови животного.

На мышах сенсибилизацию проводили с использованием полного адьюванта Фрейнда (ПАФ). Препараты гиалуронидазы вводили однократно подкожно в основание хвоста в 0,06 мл ПАФ, который был взят в соотношении 1:1 к объему раствора препарата. Доза препарата составляла 1000 мкг/кг. Контрольным животным вводили ПАФ в том же объеме.

Через 5 суток после инъекции опытным и контрольным мышам в подушечку одной из задних лап вводили препараты гиалуронидазы в дозе 30 Ед/животное в 0,04 мл физиологического раствора, в другую лапу - физиологический раствор. Через 24 часа после второй инъекции с помощью инженерного микрометра типа МК измеряли толщину обеих лап. Величину реакции определяли как разницу в толщине опытной и контрольной лап, в миллиметрах.

В ходе эксперимента было установлено, что реакция морских свинок на внутрикожное введение препарата имГД по таким визуальным показателям, как покраснение или отек, не отличалась от соответствующих показателей у животных, которым вводили дистиллированную воду, в то время как при введении лонгидазы кожная реакция была достоверно более выражена. Конъюнктивальный тест и реакция аллергодиагностики in vitro не выявили признаков аллергизирующего действия у имГД, и обнаружили таковые у препарата сравнения. При тестирующем внутрисердечном введении препаратов имГД и лонгидазы имело место статистически значимое увеличение анафилактического индекса в группе животных, получавших лонгидазу, причем АИ был более единицы (табл.3).

Таблица 3 Оценка анафилактогенных свойств имГД и лонгидазы в эксперименте на морских свинках Группа животных Показатели Реакция кожи, баллы Конъюнктив. тест, баллы Коэффициент РСАЛ АИ Контроль 0,75±0,03 0 1,6±0,1 0,38 Лонгидаза 0,9±0,03* 0,7±0,01* 1,65±0,2 1,1 имГД 0,76±0,04 0 1,55±0,2 0,56 * - отмечена достоверность различия показателя от его значения в контроле при p<0,05

Кроме того, изучение аллергизирующих (иммуногенных) свойств показало, что внутрикожные тестирующие инъекции имГД, в отличие от лонгидазы, не приводили к изменению величины реакции ГЗТ по сравнению с контрольным уровнем показателя через 4 и 24 часа после воздействия (табл.4).

Таким образом, препарат, иммобилизированный с помощью ионизирующего излучения гиалуронидазы, не оказывает иммуногенного эффекта, проявляющегося аллергизацией организма, в то время как обычный конъюгат фермента с носителем обладает аллергизирующими свойствами.

Таблица 4 Оценка сенсибилизирующих свойств препарата рчГ-КСФ в эксперименте на мышах, (X±m) Условия эксперимента Реакция ГЗТ, мм Группа животных Сенсибилизирующая доза, Ед/кг Разрешающая Ед, мкг/кг 4 часа 24 часа Контроль - 1000 0,068±0,01 0,071±0,01 Лонгидаза 1000 1000 0,094±0,005* 0,09±0,004* имГД 1000 1000 0,071±0,02 0,79±0,01

Таким образом, средство, представляющее собой иммобилизированную на низкомолекулярном носителе с помощью ионизирующего излучения гиалуронидазу, способно значительно увеличивать содержание стволовых клеток различных классов в организме и не обладает иммуногенностью. При этом эффективность данного средства значительно превышает таковую у известных аналогов. Более того, особенности технологии получения данного средства приводят к возможности его эффективного использования не только парентерально, но и внутрь.

Цитируемая литература:

1. Metcalf D. Hemopoietic growth factors. 1. The Lancet. - 1989. - Vol.15. - P.825-827.

2. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Зюзьков Г.Н. и др. Роль гиалуронидазы в регуляции функций мезенхимальных клеток-предшественников. Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2007. - №2. - С.115-119.

3. Зюзьков Г.Н., Жданов В.В., Дыгай A.M., Гольдберг Е.Д. Роль гиалуронидазы в регуляции гемопоэза. Бюл. эксперим. биол. и медицины. - 2007. - №12. - С.690-695.

4. Anderson J.A. Allergic reactions to drugs and biologic agents. JAMA. - 1992. - Vol.268. - p.2845-2857.

5. De Swarte R.D., Drug allergy. In: Patterson R. e.a. Allergic Diseases Diagnosis and Management, 4th ed. Philadelphia, Ра. JB Lippincott. - 1993. - P.396-551.

6. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Жданов B.B., Зюзьков Г.Н. и др. Фармакологические аспекты регенеративной медицины. Бюл. эксперим. биол. и медицины. - 2008. - Приложение 2. - С.14-21.

7. Vial Т., Descotes J. Clinical toxicity of cytokines used as haemopoietic growth factors. Drug Saf. - 1995. - Vol.13. - №6. - P.371-406.

8. Vereschagin E.I., Khan Do-Hung, et al. Radiation Technology in the Preparation of Polyethylene Oxide Hydrophilic Gels and Immobilization of Proteases for Use in Medical Practice. Arch. Pharm. Res. - 2001. - V.24. - N 3. - P.229-233.

9. Дубницкая Л.В., Назаренко T.A. Возможности применения препарата Лонгидаза® в комплексной терапии патологических изменений эндометрия. Русский медицинский журнал. - 2008. - Т.16 - №19. - С.1248-1251.

10. Сейфулла Р.Д., Тимофеев А.Б., Орджоникидзе З.Г. и др. Проблемы использования нанотехнологии в фармакологии. Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2008. - №1. - С.61-69.

11. Евдокимов Ю.М. Пространственно упорядоченные формы ДНК и ее комплексов - основа создания наноконструкций для медицины и биотехнологий. Российские нанотехнологии. - 2006. - №1-2. - С.256-264.

12. In't Anker P.S., Noort W.A., Scherjon S.A. e.a. Mesenchymal stem cells in human second-trimester bone marrow, liver, lung, and spleen exhibit a similar immunophenotype but a heterogenous multilineage differentiation potential. Haematologica. - 2003. - Vol.88. - P.845-852.

13. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. - Томск: Изд-во ТГУ, 1992. - 272 с.

14. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Р.У.Хабриева. - 2 изд. - М.: ОАО «Изд-во «Медицина», 2005. - С.54-69.

Похожие патенты RU2405822C1

название год авторы номер документа
СРЕДСТВО, УСИЛИВАЮЩЕЕ МОБИЛИЗАЦИЮ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК 2009
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Афтанас Любомир Иванович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Верещагин Евгений Иванович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2442601C2
СРЕДСТВО ДЛЯ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ 2009
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Верещагин Евгений Иванович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2406528C2
ГЕМОСТИМУЛИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ГЕМОПОЭЗА 2009
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Верещагин Евгений Иванович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2414926C1
ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЕ СРЕДСТВО 2010
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2444569C1
СРЕДСТВО ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РОСТА ОРГАНИЗМА 2011
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
  • Чурин Алексей Александрович
RU2452509C1
ГЕМОСТИМУЛИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО 2010
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2437675C1
СРЕДСТВО, УСИЛИВАЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ 2009
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Верещагин Евгений Иванович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2421239C1
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2011
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Афтанас Любомир Иванович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2480236C1
АНАЛЬГЕТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО 2011
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Крылова Светлана Геннадьевна
  • Зуева Елена Петровна
  • Ефимова Лариса Анатольевна
  • Гурто Роман Владимирович
RU2452510C1
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ГИПОГЛИКЕМИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ ПРИ ИНСУЛИННЕЗАВИСИМОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ 2009
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Бекарев Андрей Александрович
  • Верещагин Евгений Иванович
  • Дыгай Александр Михайлович
  • Жданов Вадим Вадимович
  • Зюзьков Глеб Николаевич
  • Удут Владимир Васильевич
RU2416427C1

Реферат патента 2010 года СРЕДСТВО, УВЕЛИЧИВАЮЩЕЕ РЕЗЕРВ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ОРГАНИЗМЕ

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины, конкретно к созданию с помощью нанотехнологии радиоционного синтеза средства, увеличивающего резерв стволовых клеток в организме и обладающего низкой иммуногенностью, и может быть использовано в регенеративной медицине. Средство представляет собой гиалуронидазу, иммобилизированную на полимере, путем ее внесения в раствор низкомолекулярного водорастворимого полимера, предварительно подвергшегося воздействию ионизирующего излучения в дозе 1-5 Мрад, до конечной концентрации 70 ЕД в 1 мл. Изобретение позволяет получить иммобилизированную гиалуронидазу, которая характеризуется значительным повышением ее способности увеличивать резерв стволовых клеток в организме и эффективна как при парентеральном, так и при пероральном введении. 4 табл.

Формула изобретения RU 2 405 822 C1

Средство, увеличивающее резерв стволовых клеток в организме, представляющее собой иммобилизированную на низкомолекулярном водорастворимом полимере гиалуронидазу, отличающееся тем, что гиалуронидаза иммобилизирована на полимере путем ее внесения в раствор низкомолекулярного водорастворимого полимера, предварительно подвергшегося воздействию ионизирующего излучения в дозе 1-5 Мрад, до конечной концентрации 70 ЕД в 1 мл.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2010 года RU2405822C1

СПОСОБ СНИЖЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ АМФОТЕРИЦИНА В 2005
  • Артамонов Андрей Владимирович
  • Шкурупий Вячеслав Алексеевич
  • Гришин Олег Витальевич
  • Верещагин Евгений Иванович
  • Целевич Роман Евгеньевич
  • Троицкий Александр Васильевич
RU2297246C1
ЗЮЗЬКОВ Г.Н
и др
Роль гиалуронидазы в регуляции гемопоэза
Бюл
эксперим
биол
и медицины
Пресс для выдавливания из деревянных дисков заготовок для ниточных катушек 1923
  • Григорьев П.Н.
SU2007A1
VERESCHAGIN E.I
et al
Radiation technology in the preparation of polyethylene oxide hydrophilic gels and immobilization of proteases for use in medical practice
Arch
Pharm
Res
Перекатываемый затвор для водоемов 1922
  • Гебель В.Г.
SU2001A1

RU 2 405 822 C1

Авторы

Артамонов Андрей Владимирович

Бекарев Андрей Александрович

Верещагин Евгений Иванович

Дыгай Александр Михайлович

Жданов Вадим Вадимович

Зюзьков Глеб Николаевич

Удут Владимир Васильевич

Даты

2010-12-10Публикация

2009-03-05Подача