МОДИФИКАЦИЯ АЛЬБУМИНА СОВИАЛЕМ КАК СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЕГО СТАБИЛЬНОСТИ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО БИОПРЕПАРАТА АЛЬБУМИНА В КОМПЛЕКСЕ С ГЕНТАМИЦИНОМ ИЛИ СТИМАДЕНОМ Российский патент 2011 года по МПК A61K38/38 A61P31/04 A61P37/02 

Описание патента на изобретение RU2414237C2

Изобретение относится к биологической или медицинской промышленности, в частности к технологии производства препарата альбумина, в составе которого присутствует антибиотик гентамицин или иммуномодулятор стимаден.

В лечебной практике альбумин нашел широкое применение, в т.ч. при инфекционных заболеваниях. Клинически эффективными признаны схемы сочетанного использования альбумина в комплексе с антибиотиками (Sort Р., Navasa М., Arroyo V., et al. Effect of intravenous albumin on renal impairment and mortality in patients with cirrhosis and spontaneous bacterial peritonitis. N. Engl. J. Med. 1999; 341:403-409; Arroyo V. Review article: hepatorenal syndrome - how to assess response to treatment and nonpharmacological therapy. Aliment. Pharmacol. Ther. 2004; 20 (Suppl. 3): 49-54). Предлагают также в качестве основы использовать биопрепарат альбумин, в который по необходимости вносится тот или иной антибиотик в зависимости от курса лечения (Временное наставление по применению препарата «Альбумин С» №13-4-03/0688; №001517-ОП; Временное наставление по применению препарата «Альбумин Н» №13-4-03/0691; №001518-ОП). Изложенный алгоритм изготовления альбуминового биопрепарата с дополнительным антибиотическим эффектом осуществляют непосредственно перед введением в неприспособленных для этой цели помещениях.

Технологический регламент производства альбумина включает обязательную стадию термообработки (инактивации инфекционных агентов) полуфабриката при 60°C в течение 10 часов (Русанов В.Н., Скобелев Л.И. «Фракционирование белков плазмы в производстве препаратов крови». - М.: Медицина, 1983, стр.10). Для сохранения свойств растворов физиологически активных белков, в т.ч. альбумина, при таком режиме термообработки используют сахара: 2% глюкозу (PDR. 1991. Physicians desk reference. 45th ed. Barnhart, Edward R., Publisher. Medical Economics Company, Inc., Oradell, NJ. p.636), 4,5% сахарозу («Иммуноглобулины». Сб. науч. тр. Под ред. В.В.Анастасиева. Н.Н.: Изд. Нижегородского мединститута, 1993, стр.70); 3% сахарозу (PDR. 1991. Physicians desk reference. 45th ed. Barnhart, Edward R., Publisher. Medical Economics Company, Inc., Oradell, NJ. p.1528).

Однако присутствие сахаров в составе препаратов альбумина из-за больших объемов и внутривенного способа введения ограничивает его применение, например, при диабете (М.К.Dea et al.: Albumin binding of acylated insulin (NN304) does not deter action to stimulate glucose uptake, Diabetes, 2002, vol.51, p.762-769; J.F.Day et al.: Nonenzymatically glucosylated albumin, The Journal of biological chemistry, 1979, vol. 254, p.595-597).

Наиболее близким техническим решением для производства фармацевтических биопрепаратов, которые по клиническим показаниям используются в большеобъемных дозах, являются биоорганические стабилизаторы, не вызывающие побочных осложнений у больных диабетом. Известны в качестве стабилизаторов белков при пастеризации плазмы: сорбит, тринатрийцитрат лизира, аргинин (патент RU 93004727 «Состав для стабилизации плазмы крови. Способ пастеризации плазмы и использование стабилизированной плазмы в терапии», опубл. 1996.10.20). В качестве стабилизаторов растворов альбумина используют в равных концентрациях ацетилтриптофанат натрия и каприлат натрия. Для 5%-ного раствора альбумина концентрации каждого из указанных стабилизаторов составляют 0,004 моль/л. В 25% растворе альбумина концентрации ацетилтриптофаната натрия и каприлата натрия увеличивают в 5 раз (PDR. 1991. Physicians desk reference. 45th ed. Barnhart, Edward R., Publisher. Medical Economics Company, Inc., Oradell, NJ. P.598-599). Bayer Corporation стабилизирует альбуминовый препарат 0,016 моль/л каприлатом натрия и 0,016 моль/л ацетилтриптофаном. Для стабилизации отечественных препаратов альбумина рекомендовано использовать 0,3% каприлат натрия (ФС 42-3543-98 «Раствор альбумина 5, 10 и 20%») или добавлять в препарат каприлат и N-ацетил-DL-триптофанат натрия в зависимости от концентрации альбумина по 80 мкмоль на 1 г белка (Русанов В.М., Левин И. «Лечебные препараты крови», ИД Медпрактика, Москва, 2004 г. 284 с).

Недостатком всех перечисленных выше стабилизаторов растворов белков является их неспособность обеспечить производство субстанции альбумина в комплексе с лекарственными средствами типа гентамицин или стимаден.

Фармацевтический вариант изготовления на основе биопрепаратов альбумина путем внесения гентамицина или стимадена неприемлем из-за нестабильности белкового раствора. Уже при кратковременном хранении в течение 24 часов наблюдают видимую опалесценцию, мелкодисперсную взвесь, вплоть до выпадения незначительного осадка. Добавки гентамицина или стимадена в полуфабрикаты альбумина, стабилизированные с помощью любых из указанных выше стабилизаторов, и их последующая термообработка вызывает выпадение белка в осадок, который становится малорастворимым. Последнее обстоятельство свидетельствует о денатурирующем действии гентамицина и стимадена на структуру и свойства альбумина в условиях инкубирования в течение 10 часов при 60°C.

Задача изобретения состоит в создании стабилизированной формы альбумина с целью производства на его основе препаратов комплексного действия с антибиотическим (гентамицин) или иммуномодулирующим (стимаден) эффектами.

Поставленная задача решается с помощью модификации альбумина совиалем - сополимером N-винилпирролидона с диэтилацеталем акролеина на основе реакции поликонденсации альдегидных групп совиаля и свободных ε-аминогрупп остатков лизина в составе альбумина (Е.Ф.Панарин, И.И.Гаврилова. Способ получения водорастворимых полимеров, содержащих альдегидные группы. Авт. свид. №560425. БИ №47, 1977 г.; Т.Б.Аникина, Е.Ф.Панарин, О.А.Миргородская, Б.В.Москвичев, И.И.Гаврилова, Г.В.Самсонов. Способ получения водорастворимых физиологически активных полимеров. Авт. свид. №522198. БИ №27, 1976 г.; Н.Н.Куценко, З.А.Кузина, Е.Ф.Панарин, И.И.Гаврилова. Изучение влияния катионных полимеров и поверхностноактивных веществ на устойчивость бактерий к канамицину. Антибиотики и медицинская биотехнология. 1986. №6. С.422-426; Т.Б.Тенникова, Е.Ф.Панарин, О.А.Миргородская, Г.В.Самсонов, Б.В.Москвичев. Иммобилизация протеолитического фермента террилитина на водорастворимой полимерной матрице. Хим.-фармацевт. журн. 1977. Т.11. №7. С.80-90). Реакционноспособные альдегидные группы индуцируют кислотным гидролизом акролеинового звена совиаля. Реакцию поликонденсации осуществляют в условиях депротонирования свободных ε-аминогрупп лизина.

Оптимальные конструкции альбумина получают при количественных соотношениях 3-5 моль совиаля на 1 моль альбумина. Если инкубационная среда содержит 3-4 моль совиаля на 1 моль альбумина, то продукт реакции подвергают термальной предобработке. При пятикратном мольном избытке совиаля предобработка не требуется. Далее вносят в раствор модифицированного альбумина гентамицин или стимаден и выполняют стадию термоинактивации при 60°C, 10 часов в соответствии с регламентными требованиями технологии производства альбуминовых биопрепаратов человека и животных.

Изложенный подход апробирован на образцах фармацевтических биопрепаратов человека и животных (ФС 42 0122-04 «Альбумин, раствор для инфузии 5, 10, 20%» или ФС 42-3543-98 «Раствор альбумина 5, 10 и 20%», ТУ 9382-004-436877-03 «Альбуминат», ТУ 9382-005-436877-03 «Альбумин С», ТУ 9382-006-436877-03 «Альбумин Н») или образцах их полуфабрикатов, полученных на стадии, предшествующей термообработке.

Известно, что сополимеры винилпирролидона с кротоновой кислотой используют для синтеза конъюгированных форм с антибиотиками (М.В.Соловский, Н.В.Никольская, В.М.Денисов Соли антибиотика гентамицина с карбоксилсодержащими сополимерами N-винилпирролидона, Химико-фармавцевтический журнал. Том 34, №11, 2000, с.21-24). Синтетические сополимеры на основе винилпирролидона применяются для экранирования антигенных детерминант ферментов бактериального происхождения с целью снижения их иммуногенности при парентеральном способе введения человеку (Б.В.Москвичев, М.С.Поляк. Иммобилизованные ферменты. М.: ЦДК. 112 с). Известны также конъюгированные формы антигенов, в которых искусственным полимерным цепям отводится иммуномодулирующая роль (В.А.Кабанов, Р.В.Петров, P.M.Хаитов. Журнал Всесоюзного химического общества им. Д.И.Менделеева, 1982, т.24, №4, стр.57-68). Однако использование модифицированных совиалем оптимальных конструкций альбумина для обеспечения надлежащего проведения регламентной стадии термоинактивации в присутствии фармакологических веществ с денатурирующим эффектом для производства комплексного лекарственного средства с дополнительным антибиотическим (гентамицин) или иммуномодулирующим (стимаден) эффектами на современном этапе развития уровня техники не известно. Помимо прямого стабилизирующего действия в присутствии биоорганических соединений с выраженным денатурирующим эффектом в техническом решении изобретения реализован и эффект повышенной термостабильности оптимальных сополимер-модифицированных конструкций.

Способ осуществляется следующим образом.

Раствор совиаля в соляной кислоте подвергают термообработке. После охлаждения активированный указанным выше образом совиаль вносят в раствор альбумина и проводят реакцию поликонденсации в течение 2 часов. При количественном соотношении 3-4 моль совиаля на 1 моль альбумина дополнительно проводят предварительную термообработку. В раствор модифицированного совиалем альбумина вносят гентамицин или стимаден, после чего следует регламентная стадия термообработки.

Примеры конкретного выполнения способа.

Готовят навеску совиаля из расчета 80-150 мг на 1 мл 0,01 моль/л соляной кислоты. Раствор совиаля в 0,01 моль/л соляной кислоте выдерживают в течение 2 часов на кипящей водяной бане. Затем охлаждают до температуры (22±2)°C. В полуфабрикаты или препараты альбумина при концентрации белка 50-100 мг/мл вносят раствор совиаля. Мольное соотношение должно быть в пределах 3-5 моль совиаля на 1 моль альбумина. Раствор совиаля к полуфабрикату или препарату альбумина добавляют постепенно в условиях постоянного перемешивания со скоростью 60-70 об/мин при одновременном доведении pH инкубационной среды до (9,5±0,1) с помощью 0,1 моль/л раствора гидроксида натрия. Инкубирование при pH (9,5±0,1) под контролем pH метра проводят в течение 2 часов при перемешивании (60-70 об/мин), добавляя при необходимости 0,1 моль/л раствор гидроксида натрия. Через 2 часа реакцию останавливают доведением pH инкубационной среды до (7,0±0,1) с помощью 0,1 моль/л соляной кислоты. При соотношениях 1 моль альбумина и 3-4 моль совиаля проводят предварительную стадию термообработки в режиме 60°C в течение 10 часов. При соотношении 1 моль альбумина и 5 моль совиаля термообработка не требуется.

После окончания стадии предварительной термообработки, необходимость которой зависит от степени модификации альбумина, к раствору полуфабриката добавляют гентамицин или стимаден. Их предельные возможные концентрации составляют 30 мг/мл гентамицина (для мольного соотношения 5/1), 20 мг/мл гентамицина (для мольного соотношения 3/1), 50 мг/мл стимадена. Имеются в виду максимальные концентрации фармакологических веществ, позволяющие осуществлять стадию технологического процесса - термообработку при 60°C в течение 10 часов без выпадения альбумина в осадок. Внесение антибиотика или иммуномодулятора осуществляют при перемешивании. Дополнительное перемешивание проводят еще 2 часа. Затем следует регламентная стадия термоинактивации альбумина в течение 10 часов при 60°C. Конечный препарат представляет собой раствор альбумина, модифицированного совиалем при мольных соотношения сополимер/белок 3/1-5/1 и антибиотика гентамицина (концентрация до 20-30 мг/мл) или иммуномодулятора стимадена (концентрация до 50 мг/мл). На чертеже приведены электрофореграммы образцов сополимерно-модифицированных форм альбумина в градиентном ПААГ (3-25%), полученных стандартным методом по Дэвису-Лэммли в нативных условиях (Laemmli U.K. Nature, 1970, 227, p.680; Гааль Э., Медьеши Г., Верецкеи Л. Электрофорез в разделении биологических макромолекул. М.: Мир, 1982, стр.226). Мольное соотношение совиаль/белок в треках: 1-1/1, 2-2/1, 3-3/1, 4-4/1, 5-5/1, 6-10/1, 7-15/1, 8-20/1, количество наносимого белка - 40 мкг на трек. В таблице 1 представлены данные по денситометрированию электрофореграмм нативного альбумина и его модифицированных конструкций. Денситометрирование гелей выполняли на приборе ImageScaner «Amersham Biosciences)) (Великобритания) в красном свете. Площадь всего трека принималась за 100%. Доля нативного альбумина рассчитывалась как отношение площади пика, соответствующего расположению нативного альбумина, к суммарной площади. Долю модифицированного альбумина определяли по разности, за вычетом доли нативного альбумина. В таблицах 2 и 3 приводятся данные по влиянию модификации на термостабильность препарата в присутствии гентамицина или стимадена в условиях, предусмотренных регламентными стадиями термообработки. Образцы (без предварительной термообработки) готовили внесением гентамицина до концентрации 8 мг/мл и далее осуществляли регламентную стадию пастеризации (60°C, 10 ч). Образцы с предварительной термообработкой выдерживали при 60°C в течение 10 часов, далее вносили гентамицин или стимаден и затем подвергали регламентной пастеризации. Вязкость образцов определяли на вискозиметре типа ВК-4. Из приведенных данных на чертеже и в таблице 1 следует, что при трехкратном мольном избытке совиаля практически весь альбумин находится в сополимерно-модифицированном состоянии. При этом модифицированные формы альбумина помимо более высокой стабильности в условиях белок-денатурирующих воздействий приобретают повышенную устойчивость к протеолитическим ферментам (таблица 4). Гидролиз проводился при мольном соотношении фермент/белок, равном 1/100. Условия обработки пепсином: 20 мин, при pH 2,9±0,05; трипсином: 60 мин, pH 8,15±0,05. Фракционный состав гидролизатов исследовался методом диск-электрофореза в градиентном (5-25%) ПААГ в диссоциирующих восстанавливающих условиях с последующим денситометрированием. В таблице 5 приводятся данные по изучению иммунохимических свойств нативного и модифицированного альбуминов. Прямым конкурентным методом в иммуноферментном анализе (ИФА) (с использованием адсорбционно иммобилизованных IgG кролика, специфичных к альбумину собаки и конъюгата альбумина собаки, меченого пероксидазой хрена) установлено снижение уровня антигенных детерминант в составе модифицированных форм альбумина. Процент иммунохимического сходства (α) нативного и модифицированного альбуминов рассчитывали как соотношение концентраций С0,5 для специфического (нативный альбумин) и модифицированного (3/1 и 5/1) альбуминов по формуле

, где

СH0,5 - концентрация нативного альбумина, приводящая к 50% ингибированию;

СM0,5 - концентрации модифицированных альбуминов (3/1 и 5/1), приводящие к 50% ингибированию.

Градуировочную зависимость для проведения ИФА готовили из особо чистой и конформационно нативной формы альбумина собаки в концентрациях от 0,1 мкг/мл до 100 мкг/мл (Теория и практика иммуноферментного анализа. / Под ред. Егорова A.M., Дзантиева Б.Б. - М.: Высшая школа, 1991. - 278 с; Tijssen Р. Practice and theory immunoassays. - Elsevier: Amsterdam New York Oxford, 1985. - 549 p.). В традиционных методах иммуноанализа использовали сыворотки крови кроликов, иммунизированных нативной и модифицированными формами альбумина. При определении титра антител в двойной иммунодиффузии (ДИД) в центральную лунку помещали антиген (альбумин) в концентрации 1 мг/мл и раститровывали иммуносыворотки с шагом (разведением) 2. Наличие перекрестных реакций определяли по методу двойной радиальной иммунодиффузии (Фримель X., Брок И. Основы иммунологии. - М., 1986; Антитела. Методы: Кн.1: Пер. с англ. / Под ред. Д.Кэтти. - М.: Мир, 1981, стр.201-207). Полученные результаты свидетельствуют, что экранирующий эффект модификации не вызывает образования новых антигенных детерминант, способных к индукции антител.

Таким образом, предложенный способ модификации альбумина позволяет в стандартном технологическом процессе производить на его основе фармацевтические биопрепараты с дополнительным антибиотическим или иммуномодулирующим механизмом действия. Важно также, что собственно сополимерно-модифицированные формы альбумина обладают повышенной стабильностью к физико- (60°C, 10-20 часов) химическим (гентамицин, стимаден) воздействиям, при этом более устойчивы к гидролизу протеазами и не содержат опосредованных модификацией антигенных детерминант, способных индуцировать антитела.

Таблица 1. Влияние мольного соотношения совиаль/белок в инкубационной смеси на степень модификации альбумина (по данным электрофореза в нативных условиях) Мольное соотношение
совиаль/белок
Доля нативного
альбумина, X±S, %
Доля модифицированного
альбумина, X±S, %
1/1 41,7±12,3 58,3±12,3 2/1 18,0±9,0 82,0±9,0 3/1 6,6±2,9 93,4±2,9 4/1 3,7±2,3 96,3±2,3 5/1 1,9±0,8 98,1±0,8 10/1 0 100 15/1 0 100 20/1 0 100 Примечание: X - среднее значение, S - среднеквадратичное отклонение.

Таблица 2. Влияние степени модификации на вязкость и термостабильность альбумина в присутствии гентамицина (8 мг/мл) Соотношение совиаль/белок Относительная вязкость образцов после пастеризации, X±S Достоверность различий Без предварительной термообработки С предварительной термообработкой 1/1 гель гель - 2/1 9,04±0,96 5,56±0,25 Р<0,05 3/1 5,55±1,19 2,53±0,03 Р<0,05 4/1 2,87±0,17 2,44±0,09 Р<0,05 5/1 3,0±0,3 2,63±0,15 Р>0,05 Примечание: Х - среднее значение, S - среднеквадратичное отклонение.

Таблица 3. Изменение вязкости альбумина после пастеризации в присутствии различных концентраций стимадена Концентрация стимадена, мг/мл степень модификации, X±S 0 1 2 3 4 5 2 осадок - - - - - 5-10 - 2,1±0,2 - - - - 10 - гель 3,2±0,3 - - - 20 - - гель - - - 40-50 - - - 4,3±1,5 4,0±0,5 3,4±0,4 100 - - - гель гель гель Примечание: X - среднее значение, S - среднеквадратичное отклонение.

Таблица 4. Фракционный состав гидролизатов образцов нативного и сополимерно-модифицированных форм альбумина Соотношение совиаль/белок Пепсиновый гидролиз, % Трипсиновый гидролиз, % Совместный пепсиновый и трипсиновый гидролиз, % Мr>66 kD Мr<66 kD Мr>66 kD Мr<66 kD Мr>66 kD Мr<66 kD 0 0 100 27,2±1,1 72,8±1,1 5,98±1,8 94,02±1,8 1/1 13,0±2,1 87,1±2,1 44±5,6 56±5,6 33,7±5,1 66,3±5,1 3/1 35,6±2,7 64,4±2,7 37,7±6,5 62,3±6,5 30,3±2,2 69,7±2,2 5/1 24,1±1,4 75,9±1,4 44,8±1,3 55,2±1,3 29,0±1,7 71,0±1,7 10/1 54,0±3,9 46,0±3,9 65,5±5,8 34,5±5,8 61,8±2,9 38,2±2,9 Примечание: X - среднее значение, S - среднеквадратичное отклонение.

Таблица 5. Уровень сходства иммуногенов по результатам их анализа в прямом конкурентном методе ИФА и качество иммуносывороток, индуцированных нативной и сополимерно модифицированными формами альбумина. Форма иммуногена Процент сходства иммуногенов по результатам их анализа в ИФА (X±S) Качество иммуносывороток, индуцированных иммуногенами По титру ДИД (X±S) По выявлению шпор в перекрестных реакциях на основе ДИД Нативный альбумин 100 341±147 Не обнаружено Модифицированная форма альбумина при мольном соотношении сополимер/белок -3/1 18,9±4,9 256±128 Не обнаружено Модифицированная форма альбумина при мольном соотношении сополимер/белок -5/1 13,2±5,9 149±98 Не обнаружено Примечание X - среднее значение, S - среднеквадратичное отклонение

Похожие патенты RU2414237C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ МОДИФИКАЦИИ ГЕНТАМИЦИНА СОПОЛИМЕРОМ ВИНИЛПИРРОЛИДОНА С ДИАЦЕТАЛЕМ АКРОЛЕИНА 2017
  • Барсуков Алексей Константинович
  • Нестерова Ольга Юрьевна
  • Сасу Нурсия Вазиховна
  • Кожевникова Ольга Владимировна
  • Кузнецов Александр Иванович
  • Панарин Евгений Федорович
  • Гаврилова Ирина Иосифовна
  • Полещук Леонтий Федорович
  • Шарафуллин Харис Хатыпович
RU2659032C1
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ТЕРМОСТОЙКОСТИ АЛЬБУМИНА ПРИ МОДИФИЦИРОВАНИИ ЕГО МЕТАЛЛУГЛЕРОДНЫМИ НАНОСТРУКТУРАМИ 2011
  • Барсуков Алексей Константинович
  • Теребова Надежда Семеновна
  • Кожевникова Ольга Владимировна
  • Шабанова Ирина Николаевна
RU2480235C2
ПРЕПАРАТ РЕКОМБИНАНТНОГО ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО СЫВОРОТОЧНОГО АЛЬБУМИНА И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 2006
  • Воробьев Андрей Иванович
  • Мирошников Анатолий Иванович
  • Габибов Александр Габибович
  • Воробьев Иван Иванович
  • Костромина Татьяна Ивановна
  • Пономаренко Наталья Александровна
  • Бобик Татьяна Владимировна
  • Ажигирова Мария Алексеевна
  • Карякин Александр Владимирович
  • Коротаев Геннадий Константинович
RU2337966C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОМЕРНОГО АЛЬБУМИНА 1997
  • Исрафилов А.Г.
  • Хакимова Ф.З.
  • Кудашева Г.Б.
  • Лютов А.Г.
RU2125888C1
СПОСОБ ХРАНЕНИЯ ПЛАЗМЫ ИЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫХ И АЛЬБУМИНОВЫХ БИОПРЕПАРАТОВ 2006
  • Барсуков Алексей Константинович
  • Бармин Андрей Викторович
  • Нестерова Ольга Юрьевна
  • Касимов Флюр Минисалихович
  • Кузнецов Александр Иванович
  • Ушнурцева Светлана Александровна
  • Желтышев Евгений Николаевич
  • Журавлев Виталий Анатольевич
RU2338375C2
Штамм метилотрофных дрожжей Pichia pastoris Yst-HSA-PDI1, продуцирующий рекомбинантный человеческий сывороточный альбумин 2019
  • Бобик Татьяна Владимировна
  • Мокрушина Юлиана Анатольевна
  • Смирнов Иван Витальевич
  • Габибов Александр Габибович
RU2733423C1
Способ изготовления полуфабрикатов иммуноглобулиновых и альбуминовых биопрепаратов из боенской, трупной крови животных, абортной и плацентарной крови человека 2016
  • Барсуков Алексей Константинович
  • Нестерова Ольга Юрьевна
  • Кожевникова Ольга Владимировна
  • Кузнецов Александр Иванович
  • Скурыгин Владимир Вячеславович
  • Боталова Ирина Алексеевна
  • Гасников Андрей Семенович
  • Захаров Александр Владимирович
  • Макарова Евгения Александровна
  • Полещук Леонтий Федорович
  • Шарафуллин Харис Хатыпович
RU2703537C2
АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ БЕЛКОВАЯ ГУБКА ДЛЯ ХИМИОТЕРАПИИ ИНФИЦИРОВАННЫХ РАН И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 2016
  • Лозинский Владимир Иосифович
  • Родионов Илья Александрович
  • Цискарашвили Арчил Важаевич
  • Еськин Николай Александрович
RU2637634C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЛЬБУМИНА 1998
  • Кудашева Г.Б.
  • Хакимова Ф.З.
  • Исрафилов А.Г.
  • Лютов А.Г.
  • Еникеева С.А.
RU2140287C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА, МОДИФИЦИРОВАННОГО ПРИСОЕДИНЕНИЕМ АЛЬБУМИНА ЧЕЛОВЕКА, ИЗ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ ДРОЖЖЕЙ 2007
  • Падкина Марина Владимировна
  • Карабельский Александр Владимирович
  • Зиновьева Юлия Григорьевна
  • Самбук Елена Викторовна
  • Смирнов Михаил Николаевич
RU2373286C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 414 237 C2

Реферат патента 2011 года МОДИФИКАЦИЯ АЛЬБУМИНА СОВИАЛЕМ КАК СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЕГО СТАБИЛЬНОСТИ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО БИОПРЕПАРАТА АЛЬБУМИНА В КОМПЛЕКСЕ С ГЕНТАМИЦИНОМ ИЛИ СТИМАДЕНОМ

Изобретение относится к медицине и касается способа стабилизации альбумина для изготовления на его основе фармацевтических биопрепаратов с дополнительными антибиотическим (гентамицин) или иммуномодулирующим (стимаден) механизмами действия путем модификации белка совиалем. Изобретение обеспечивает повышенную стабильность сополимерно-модифицированных форм альбумина к физико(60°С, 10 часов)-химическим (гентамицин, стимаден) воздействиям с выраженным белок-денатурирующим эффектом. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл.

Формула изобретения RU 2 414 237 C2

1. Способ стабилизации альбумина для изготовления фармацевтических биопрепаратов с дополнительным антибиотическим (гентамицин) или иммуномодулирующим (стимаден) механизмами действия, характеризующийся тем, что раствор совиаля в соляной кислоте подвергают термообработке, после охлаждения активированный указанным выше образом совиаль вносят в раствор альбумина из расчета 3-5 моль совиаля на 1 моль альбумина и проводят реакцию поликонденсации в течение двух часов, далее в раствор модифицированного совиалем альбумина вносят гентамицин или стимаден, после чего следует регламентная стадия термообработки.

2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что проводят предварительную стадию термообработки в режиме 60°С в течение 10 ч при соотношениях: 1 моль альбумина на 3-4 моль совиаля.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2011 года RU2414237C2

Барсуков А.К
Исследование иммуногенеза, индуцированного нативными и сополимерно модифицированными формами IgG
Нестерова О.Ю., Кузнецов А.И
VI конференция иммунологов Урала
Материалы конференции
- Ижевск, 2007, с.23-24
JP 3058783 А, 13.03.1991.

RU 2 414 237 C2

Авторы

Барсуков Алексей Константинович

Нестерова Ольга Юрьевна

Касимов Флюр Минисалихович

Кожевникова Ольга Владимировна

Кузнецов Александр Иванович

Ушнурцева Светлана Александровна

Панарин Евгений Федорович

Гаврилова Ирина Иосифовна

Даты

2011-03-20Публикация

2008-04-30Подача