СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ УГНЕТЕНИЯ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2011 года по МПК A61B10/00 A61B3/09 

Изобретение относится к области медицины, в частности токсикологии и фармакологии, и предназначено для диагностики степени угнетения нервной системы при алкогольной интоксикации и оценки эффективности экспериментальной терапии.

Известен способ оценки состояния нервной системы при моделировании химической патологии, вызванной этанолом в эксперименте, разработанный Рейнюком В.Л. (Рейнюк В.Л. Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода: автореф. дис. … д-ра мед наук / В.Л.Рейнюк. - СПб, 2008. - 41 с.).

Недостатками этого способа являются невысокая точность и объективность диагностики состояния. Кроме того, невозможность дифференцировать состояния, формирующиеся при тяжелых отравлениях этанолом, по степени выраженности угнетения функций нервной системы на оглушение, сопор и кому; а также отсутствие градации признаков по степени выраженности и значимости угнетения неврологических функций не позволяет изучать динамику изменения состояния, как в процессе развития интоксикации, так и в ходе экспериментальной терапии.

Цель изобретения - повысить точность диагностики степени угнетения неврологических функций у лабораторных животных при острых отравлениях этанолом.

Цель достигается тем, что предлагается способ оценки клинических данных о функционировании нервной системы животных по следующей формуле:

ИТНН=5*ПЖ+4*ГР+3*БР+2*РС+2*ЗР+КР,

где:

ИТНН - индекс тяжести угнетения нервной системы, балл;

ПЖ - поведение животных: активная деятельность (грумминг, принятие пищи и др), сон, при взятии на руки активные целенаправленные реакции - 4 балла; лежит, при взятии на руки движения замедленные, но сохраняется их целенаправленность к избеганию, поворот головы - 3 балла, лежит на животе или боковое положение, при взятии на руки движения нецеленаправленные - 2 балла, лежит на животе или боковое положение, при взятии на руки двигательная активность отсутствует - 1 балл;

ГР - глоточный рефлекс: выраженный - 3 балла; ослаблен - 2 балла; отсутствует - 1 балл;

БР - тактильно-болевая чувствительность: реагирует на локальное одиночное воздействие агрессией или избеганием - 4 балла, реакция избегания на воздействие вялая, проявляется отползанием или поворотом тела и головы - 3 балла; нелокализованный ответ, в том числе и сокращением мышц брюшной стенки - 2 балла; реакция отсутствует - 1 балл;

PC - рефлекс сгибания задних конечностей: быстрое поджатие лапы в ответ на механическое болевое раздражение стопы, которое ненадолго сохраняется - 4 балла; замедленная реакция на раздражение, длительное сохранение сгибания - 3 балла; отсутствие реакции на одиночный стимул или нелокализованный ответ сокращением брюшной стенки - 2 балла, отсутствие ответа после многократного воздействия - 1 балл;

ЗР - зрачковый рефлекс: быстрое сокращение зрачков при освещении - 3 балла; замедленная фотореакция - 2 балла, отсутствие реакции - 1 балл;

КР - корнеальный рефлекс: выраженный - 3 балла; ослаблен - 2 балла; отсутствует - 1 балл.

При интерпретации значений, рассчитанных по формуле индекса тяжести угнетения нервной системы, используются следующие критерии: ИТНН более 55 баллов - состояние функционирования нервной системы в пределах физиологической нормы; от 46 до 55 баллов - оглушение; от 36 до 45 баллов - сопор; от 26 до 35 баллов - кома умеренная; от 18 до 25 баллов - кома глубокая, 17 баллов и ниже - кома запредельная.

Способ реализуется следующим образом. Крысам, которые являются животными выбора при моделировании алкогольной патологии, внутрижелудочно или внутрибрюшинно вводится этиловый спирт в широком диапазоне доз. У животных в баллах оценивают комплекс неврологических показателей функционирования нервной системы: поведение, глоточный рефлекс, тактильно-болевую чувствительность, рефлекс сгибания задней конечности, зрачковый и корнеальный рефлексы.

За поведением животного наблюдают при нахождении его в клетке и при взятии на руки. Тактильно-болевая чувствительность исследуется при надавливании корнцангом на основание хвоста. Рефлекс сгибания задних конечностей вызывают путем надавливания корнцангом на стопу задней лапы. Оценку глоточного рефлекса выполняют с использованием зонда для внутрижелудочного введения. Зрачковый и корнеальный рефлексы оценивают по общепринятой методике.

Полученные данные, выраженные в баллах, используют для вычисления по формуле индекса тяжести угнетения нервной системы и оценки степени угнетения неврологических функций у лабораторных животных при острых отравлениях этанолом.

Нами впервые предложен способ комплексной оценки состояния нервной системы у экспериментальных животных при интоксикациях этиловым спиртом. Отличием предлагаемого способа от других является простота и высокая надежность (надежность данного способа оценки составляет 75%), возможность одновременно анализировать клиническую картину и выносить экспертное заключение о степени угнетения нервной системы и прогнозе исхода интоксикации. Предлагаемый способ позволяет быстро и точно оценить неврологический статус в динамике интоксикации, а также осуществлять мониторинг состояния животного в процессе экспериментальной терапии при скрининговых доклинических исследованиях.

Приводим примеры практической реализации способа оценки степени угнетения нервной системы при алкогольной интоксикации в эксперименте.

Пример 1. Животному внутрибрюшинно введен 30% раствор этанола в дозе 5,5 г/кг, что соответствует среднесмертельной дозе. В динамике оценивалось изменения степени угнетения неврологического статуса.

Так, через 1 час наблюдения получены следующие данные: поведение животных (ПЖ) - 1 балл, тактильно-болевая чувствительность (БР) - 2 балла, рефлекс сгибания задних конечностей (PC) - 2 балла, зрачковый рефлекс (ЗР) - 1, корнеальный рефлекс (КР) - 2, глоточный рефлекс (ГР) - 2 балла.

Подставляем полученные данные в формулу и проводим вычисления:

ИТНН=5*ПЖ+4*ГР+3*БР+2*РС+2*ЗР+КР=5*1+4*2+3*2+2*2+2*1+2=27.

Таким образом, рассчитанный ИТНН составил 27 баллов, что соответствует «умеренной коме».

Через 3 часа наблюдения: поведение животных (ПЖ) - 1 балл, тактильно-болевая чувствительность (БР) - 1 балл, рефлекс сгибания задних конечностей (PC) - 1 балл, зрачковый рефлекс (ЗР) - 2 балла, корнеальный рефлекс (КР) - 2 балла, глоточный рефлекс (ГР) - 1 балл.

ИТНН=19 баллов. Глубокая кома.

Животное погибло, через 3 ч 44 мин после введения этанола.

Пример 2. Животному внутрибрюшинно введен 30% раствор этанола в дозе 5,5 г/кг, что соответствует среднесмертельной дозе. В динамике оценивалось изменения степени угнетения неврологического статуса.

Динамика изменения состояния животного №2 представлена в таблице.

Время после введения этанола, ч Показатели неврологического статуса, баллы ИТНН, баллы Состояние ПЖ БР PC 3P KP ГР 0,5 1 3 4 3 1 2 37 Сопор 1 1 1 1 2 1 3 27 Умеренная кома 3 1 1 1 2 1 2 23 Глубокая кома 6 1 1 3 3 2 1 26 Умеренная кома 8 1 3 3 3 2 3 37 Сопор 24 4 4 4 3 3 3 61 Норма

Пример 3. Трем животным четырехкратно внутрижелудочно в течение 3 ч вводили 9% раствор этанола дозе 8 г/кг, что соответствует среднесмертельной дозе. Через 1 час после последнего введения оценивали состояние животных Данные о динамике изменения состояния животных представлены в таблице.

Номер животного Показатели неврологического статуса, баллы ИТНН, баллы Состояние Исход через 1 сут ПЖ БР PC 3P KP ГР 1 1 1 1 2 1 1 19 Глубокая кома Погибло 2 1 1 2 2 1 3 29 Умеренная кома Выжило 3 1 2 4 2 2 3 37 Сопор Выжило

Пример 4. Исследование выполнено на 92 белых беспородных крысах-самцах, которым вводили 30% раствор этанола внутрибрюшинно в диапазоне от 0,5 до 1,2 среднесмертельных доз. У животных в динамике оценивали показатели неврологического статуса, производили расчет суммы баллов по предлагаемому нами способу. Одновременно анализировалась клиническая картина, выносилось экспертное заключение о степени угнетения нервной системы.

Распределение данных, полученных расчетным методом и данных экспертной оценки, представлено на чертежах.

Фиг.1, 2, 3 и 4 отображают соотношение данных экспертной оценки состояния экспериментальных животных с данными, полученными при использовании предлагаемого способа оценки степени угнетения функций нервной системы, через 1, 3, 6 и 8 часов после введения этанола соответственно.

Из представленных данных видно, что совпадение прогноза с использованием разработанного нами способа и экспертной оценкой встречается в среднем в 75% наблюдений. Наиболее полное совпадение отмечается через 1 час после введения токсиканта, оно составляет 78%.

Изобретение относится к области медицины, в частности к токсикологии и фармакологии. По четырехбальной системе оценивают снижение неврологических показателей функционирования нервной системы: поведение (ПЖ), глоточный рефлекс (ГР), тактильно-болевую чувствительность (БР), рефлекс сгибания задних конечностей (PC), зрачковый рефлекс (ЗР), корнеальный рефлекс КР). Рассчитывают индекс тяжести угнетения нервной системы (ИТНН) по формуле: ИТНН=5*ПЖ+4*ГР+3*БР+2*РС+2*ЗР+КР. При значении ИТНН более 55 баллов состояние функционирования нервной системы оценивают в пределах физиологической нормы, от 46 до 55 баллов - оглушение; от 36 до 45 баллов - сопор; от 26 до 35 баллов - кома умеренная; от 18 до 25 баллов - кома глубокая, 17 баллов и ниже - кома запредельная. Способ позволяет повысить достоверность определения степени угнетения нервной системы при алкогольной интоксикации. 2 табл., 4 ил.

Способ оценки степени угнетения нервной системы при алкогольной интоксикации в эксперименте путем изучения клинической картины отравления у животных, отличающийся тем, что определяет по формуле индекс тяжести угнетения нервной системы:
ИТНН=5·ПЖ+4·ГР+3·БР+2·РС+2·ЗР+КР,
ИТНН - индекс тяжести угнетения нервной системы в баллах, где
ПЖ - поведение животных: активная деятельность, сон, при взятии на руки активные целенаправленные реакции - 4 балла; лежит, при взятии на руки движения замедленные, но сохраняется их целенаправленность к избеганию, поворот головы - 3 балла; лежит на животе или боковое положение, при взятии на руки движения нецеленаправленные - 2 балла, лежит на животе или боковое положение, при взятии на руки двигательная активность отсутствует - 1 балл,
ГР - глоточный рефлекс: выраженный - 3 балла; ослаблен - 2 балла; отсутствует - 1 балл,
БР - тактильно-болевая чувствительность: реагирует на локальное одиночное воздействие агрессией или избеганием - 4 балла; реакция избегания на воздействие вялая, проявляется отползанием или поворотом тела и головы - 3
балла; нелокализованный ответ, в том числе и сокращением мышц брюшной стенки - 2 балла; реакция отсутствует - 1 балл,
PC - рефлекс сгибания задних конечностей: быстрое поджатие лапы в ответ на механическое болевое раздражение стопы, которое ненадолго сохраняется - 4 балла; замедленная реакция на раздражение, длительное сохранение сгибания - 3 балла; отсутствие реакции на одиночный стимул или нелокализованный ответ сокращением брюшной стенки - 2 балла, отсутствие ответа после многократного воздействия - 1 балл,
ЗР - зрачковый рефлекс: быстрое сокращение зрачков при освещении - 3 балла; замедленная фотореакция - 2 балла, отсутствие реакции - 1 балл,
КР - корнеальный рефлекс: выраженный - 3 балла; ослаблен - 2 балла; отсутствует - 1 балл;
и при значении - индекса тяжести угнетения нервной системы более 55 баллов - состояние функционирования нервной системы оценивают в пределах физиологической нормы, от 46 до 55 баллов - оглушение; от 36 до 45 баллов - сопор; от 26 до 35 баллов - кома умеренная; от 18 до 25 баллов - кома глубокая, 17 баллов и ниже - кома запредельная.