СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ 2-ЭТИЛТИОБЕНЗИМИДАЗОЛА Российский патент 2012 года по МПК C01B31/00 A61K31/4184 A61P43/00 

Изобретение относится к области медицины, в частности фармакологии, и может быть использовано для повышения антигипоксической активности 2-этилтиобензимидазола.

В экспериментальной и клинической фармакологии достаточно известен препарат широкого спектра действия бемитил (гидробромид моногидрат 2-этилтиобензимидазола). Он выпускается отечественной фармацевтической промышленностью также под названиями «бемактор», «метапрот». Основным фармакологическим свойством препарата является повышение устойчивости организма к гипоксии, сохранение и восстановление работоспособности при выполнении физических нагрузок (Инструкция по применению бемитила). Бемитил основание можно рассматривать как пролекарство или как самый первый метаболит бемитила.

В настоящее время широко исследуются биологическая активность как самого фуллерена С₆₀, так и его влияние на фармакологические эффекты лекарственных препаратов. Фуллерен С₆₀ обладает хорошей проницаемостью через клеточные мембраны. При внутрибрюшинном введении больших доз (2,5 г/кг) в виде «микронизированной» суспензии он не вызывал гибели мышей и нарушений в поведении, то есть не проявлял острой токсичности. У фуллерена С₆₀ обнаружена антиоксидантная активность (Пиотровский Л.Б., Киселев О.И. Фуллерены в биологии. - СПб.: Росток, 2006. - 336 с.).

Известно экспериментальное применение фуллерена в мазях и даже в специальных биоактивных гидрогелевых раневых покрытиях с целью усиления биологического действия лекарственных препаратов (Венгерович Н.Г., Макин Д.Н., Попов В.А., Успенская М.В. Фуллеренсодержащее раневое покрытие // Сборник изобретений и рационализаторских предложений Военно-медицинской академии. - СПб., 2008. - Вып.39. - С.32). Однако пока накоплено слишком мало данных как о биологической активности самого фуллерена, так и его комбинации с другими лекарственными веществами.

Повышение фармакологической активности известного препарата за счет применения вспомогательных средств представляет весьма актуальную задачу.

Целью изобретения является существенное повышение антигипоксической активности бемитила основания за счет вспомогательных средств. Цель изобретения достигается путем применения бемитила основания в эквимольной смеси с фуллереном С₆₀.

В табл.1 представлены данные сертификата качества фуллерена С₆₀. В табл.2 приведены данные биологического изучения влияния бемитила, бемитила основания и их эквимольных смесей с фуллереном на продолжительность жизни мышей в модели гипоксии с гиперкапнией. В табл.3 приведена активность фуллерена через 60 минут после введения в модели гипоксии с гиперкапнией. На чертеже представлена диаграмма активностей изучаемых соединений и их эквимольных смесей с фуллереном (% превышения контроля).

Биологические исследования

Биологические исследования проводили на белых беспородных мышах самцах в модели гиперкапнической гипоксии. Использовали фуллерен, предоставленный ЗАО «ИЛИП» (Санкт-Петербург), сертификат качества приведен в табл.1.

Гипоксию с гиперкапнией (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Москва, 2000, 153-158) исследовали на мышах-самцах весом 18-20 г. Животных помещали в стеклянные банки объемом 250 мл с герметичными крышками, которые опускали под воду для избежания подсоса воздуха. Бемитил в дозе 50 мг/кг в виде водного раствора, изучаемые эквимольные смеси бемитила с фуллереном, бемитила основания в дозе 32 мг/кг с фуллереном и сам фуллерен в виде тонкой суспензии с твином-80 вводили за 60 минут до гипоксии внутрибрюшинно. Регистрировали время жизни животных. Активность бемитила (Б) и его смеси с фуллереном (Б+Ф), бемитила основания (БО) и его смеси с фуллереном (БО+Ф) и фуллерена (Ф) представлена в табл.2 и на чертеже.

По данным табл.2 видно, что бемитил увеличивает продолжительность жизни мышей на 21%, применение его в смеси с фуллереном не изменяет его активности. Бемитил основание менее активен, он увеличивает продолжительность жизни опытных животных лишь на 9%, но его эквимольная смесь с фуллереном достоверно удлиняет жизнь на 53%, то есть смесь БО+Ф в 1,53 раза удлиняет жизнь мышей по сравнению с контролем. По данным табл.3 сам фуллерен увеличивает продолжительность жизни мышей на 35%. В опыте не проявляется эффект сложения двух активностей: для Б+Ф обнаружено отсутствие эффекта, для БО+Ф он превышает простое суммирование. Поскольку известно, что фуллерен С₆₀ является активным акцептором электронов (Пиотровский Л.Б., Киселев О.И. Фуллерены в биологии. - СПб.: Росток, 2006. - 336 с.), можно предположить, что бемитил основание за счет электронов азота в имидазольном кольце осуществляет взаимодействие с фуллереном, образуя некий «комплекс». За счет свойств фуллерена преодолевать мембраны «комплекс» активно протаскивает лекарственное средство к месту приложения действия, что и обуславливает повышение активности. У бемитила такая возможность образования «комплекса» отсутствует, так как он уже находится в виде соли - гидробромида.

Таким образом, применение бемитила основания в эквимольной смеси с фуллереном С₆₀ в модели гипоксии с гиперкапнией выявляет новые свойства, не присущие 2-этилтиобензимидазолу.

Таблица 1 Сертификат качества на порошок С₆₀ Продукт: Фуллерен С₆₀ Чистота: >99.5 мас.% Примеси:   Растворители (о-ксилен) <0.05 мас.% Фуллерен C₇₀ <0.2 мас.% Высокие фуллерены <0.1 мас.% Эпоксиды <0.1 мас.%

Таблица 2 Продолжительность жизни мышей в модели гипоксии с гиперкапнией Группа Доза, мг/кг Число животных Время жизни через 60 мин, мин % к контролю К   6 18,27±1,90 100 Б 50 6 22,07±3,12 121 Б+Ф 50+130 6 22,53±2,60 123 БО 32 6 19,99±1,90 109 БО+Ф 32+130 6 27,87±3,04* 153 Примечание. Буквами обозначены: К - контроль (интактные мыши); Б - бемитил; Б+Ф - смесь бемитила с фуллереном, БО - бемитил основание; БО+Ф - смесь бемитила основания с фуллереном; Ф - фуллерен. *p<0,05 по отношению к контрольной группе.

Таблица 3 Активность фуллерена через 60 мин после введения в модели гипоксии с гиперкапнией Препарат Число животных Время жизни животных, мин % к контролю Контроль 7 25,63±5,00 100 Фуллерен 9 34,52±9,11 135

Изобретение относится к области медицины, в частности фармакологии, и может быть использовано для повышения антигипоксической активности бемитила основания (БО) при гипоксии с гиперкапнией. Способ включает введение эквимольной смеси бемитила основания с фуллереном C₆₀ при гипоксии с гиперкапнией. Использование изобретения позволяет повысить антигипоксическую активность БО за счет увеличения его биодоступности под действием фуллерена C₆₀. 3 табл., 1 ил.

Способ повышения антигипоксической активности бемитила основания при гипоксии с гиперкапнией, включающий введение эквимольной смеси бемитила основания с фуллереном C₆₀.