Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, к лекарственным композициям инъекционной формы для профилактики и лечения заболеваний нервной системы.
Проблема роста заболеваний нервной системы стоит весьма остро, так, например, от болезни Альцгеймера страдают 26,6 млн. больных в мире, от болезни Паркинсона - 1% населения, травмы ЦНС происходит 1 млн. черепно-мозговых травм в год. В России в структуре заболеваний центральной нервной системы 270000 тяжелых, опухоли мозга занимают до 20% в структуре детской смертности. Также, весьма проблемными являются: болезнь Кройтцфельда-Якоба, болезнь Хентингтона, нейроВИЧ. Из сообщений Всемирной федерации неврологических обществ, ежегодно в мире регистрируется около 15 млн. инсультов. В России диагностируется более 450000 новых инсультов в год. В г.Москве количество пациентов с диагнозом инсульт, в течение уже длительного времени, около 20-ти лет, не снижается меньше 36000 пациентов в год.
В США по частоте причина смерти является инсульт третий в структуре смертности. Каждый год в США диагностируется 500000 инсультов. От инсульта и его осложнений в США умирают 150000 человек в год. У 2 млн. американцев имеются постинсультные осложнения.
Смертность после имевшегося ишемического инсульта в первый месяц составляет 20% и порядка 25% в течение первого года. После 6 месяцев после инсульта, инвалидность наступает у 40% выживших больных. Из них около 60-70% больных имеют инвалидизирующие неврологические расстройства к концу месяца с момента инсульта.
В 1992 г. показатель смертности от цереброваскулярных заболеваний в России составил 237,8, на 100000 населения [Верещагин Н.В., Варакин Ю.Я. Регистры инсульта в России: результаты и методологические аспекты проблемы. Инсульт 2001; 1:34-40.]; а в 1996 г. - 282,5 и 323,3 соответственно. С 1997 г. темпы роста смертности от цереброваскулярных заболеваний резко возросли, как и доля смертности от этой патологии в структуре общей смертности, достигнув уровня 660,2 на 100000 населения и 35,4% в 2000 г. по сравнению с цифрами 247,9 и 23,0% в 1991 г. Показатель смертности от цереброваскулярных заболеваний в 1998 г. приведенный Н.В.Верещагиным и Ю.Я.Варакиным, составил 292,1 на 100000 населения, и гораздо выше показателей смертности от цереброваскулярных заболеваний в экономически развитых странах мира. Показатели, отражающие распространенность инсульта (на 1000 человек населения), весьма вариабельны в разных странах и регионах: в США - 2,6-5,47; в Япония - 7,9; в странах СНГ - 2,0-11,97 [Одинак М.М., Михайленко А.А., Иванов Ю.С., Семин Г.Ф. Сосудистые заболевания головного мозга. СПб: Гиппократ; 1998]. Уровни смертности от инсульта значительно снизились в течение последних десятилетий в США, Канаде, Нидерландах, Норвегии, Франции, Финляндии, Израиле, Японии, Новой Зеландии, Австралии, Китае, Тайване [Feigin V.L, Wiebers D.O., Whisnant J.P., O' Fallon W.M. Stroke incidence and 30 - day case fatality rates in Novosibirsk, Russia, 1982 through 1992. Stroke 1995; 26:924-929].
Внедрение новых препаратов для лечения нейродегенеративных заболеваний и улучшения нейрональных функций является серьезным требованием современной фармакологии (Воронина Т.А., Середенин С.Б., 1998; Воронина, Т.А., 2003; Островская Р.У. и др., 2002; Bachurin, 2003; Середенин С.Б. и др., 2006).
Процессы демиелинизации и дегенерации аксонов нервных клеток приводят к нарушению сигналов по нервному стволу и, как следствие, нарушению трофических функций, а это нарушение метаболического обмена, играющего первостепенную роль в жизнедеятельности тканей и особенно - нервной и как следствие каскадное возрастание свободных радикалов, имеющих повреждающее действие.
По эпидемиологическим данным в структуре детской смертности преобладают перинатальные поражения мозга, у взрослого населения - сосудистые поражения, как правило, мозга, что является вторым по численности после заболеваний сердца. Среди заболеваний с временной утратой трудоспособности второе место занимают заболевания периферической нервной системы и пограничные нервно-психические расстройства. В показателях стойкой утраты трудоспособности главенствующее место занимает сосудистые и периферические заболевания нервной системы. В структуре временной нетрудоспособности заболевания периферической нервной системы составляют 7-10% как в случаях, так и в днях нетрудоспособности. В России отмечается рост пограничных нервно-психических расстройств и в случаях и в днях нетрудоспособности.
Настоящее изобретение предлагает способ потенцирования терапевтического эффекта пиримидиновых нуклеотидов, которые в настоящее время считаются новым подходом в терапии нейропатий.
Пиримидиновыми основаниями, представляющими собой производные шестичленного гетероциклического азотистого основания пиримидина, являются цитозин (2-окси-6-аминопиримидин), урацил (2,6-диоксипиримидин) и тимин (5-метил-2,4-диоксипиримидин). Поскольку пиримидиновые нуклеотиды (цитидин, уридин и тимидин) входят в состав нуклеиновых кислот (цитидин - в ДНК и РНК, уридин - в РНК, тимидин - в ДНК) и макроэргических соединений, являются коферментами, то для нормального протекания обмена веществ и энергии в организме необходимы полноценные пиримидиновые основания.
Биосинтез пиримидиновых нуклеотидов представляет собой многостадийный ферментативный процесс, в котором на первом этапе из аспарагиновой кислоты и карбамоилфосфата (синтезируемого из СО2 и аммиака за счет энергии АТФ) образуется пиримидиновое кольцо в форме оротовой кислоты. Оротовая кислота превращается затем в уридиловую кислоту - уридинмонофосфат (УМФ), присоединяя фосфорибозильный фрагмент. Последовательные реакции, катализируемые соответствующими фосфотрансферазами, приводят к образованию из УМФ вначале уридиндифосфата (УДФ), затем уридинтрифосфата (УТФ).
УТФ может быть использован для синтеза РНК или в качестве макроэргических соединений в других реакциях. Для синтеза ДНК необходимо образование дезоксирибонуклеотидов. Дезоксиформа тимидиловой кислоты (дТМФ) возникает при метилировании пиримидинового кольца дУМФ и в результате дальнейшего фосфорилирования превращается в дУТФ, который наряду с дЦТФ является субстратом для синтеза ДНК (Дэвидсон Дж. Биохимия нуклеиновых кислот, пер. с англ. М., 1976; Мецлер Д.).
Исследования демонстрируют статистически значимое повышение потребности в пиримидиновых нуклеотидах при поражениях нервной ткани [Langford C.J., Scheffer J.W., Jeffrey P.L., Austin L. The in vitro synthesis of RNA within the rat nodose ganglion following vagotomy // J. Neurochm. - 1980. - Vol.34. - P.531-539. Moses E.K., Langford C.J., Austin L. Small molecular weight RNAs altered metabolism in regenerating nerve // Biochem. Int. - 1982. - Vol.5. - P.177-184.]. Введение пиримидиновых нуклеотидов оказывает влияние на синтез нуклеиновой кислоты и процесс построения миелиновых оболочек, а также на метаболизм, отвечающий за генерацию энергии в клетках [Sjoberg J., Kanje M. Incorporation of 32P phosphate into nucleotides of the dorsal root ganglia of regenerating rat sciatic nerve // Brain. Res. - 1987. - Vol.415. - P.270-274.]. Известно, что нервная ткань не способна синтезировать нуклеотиды, поскольку им не хватает соответствующих запасов ферментов [Gerbershaden H.U. Pharmakotherapie im Bereich des peripheren Nervensystem // TW Neurologie / Psyhiatrie. - 1992. - Vol.6. - P.21-23.]. Вследствие этого, в периоды повышенной потребности, причем данная потребность может быть вызвана как повышенной нагрузкой, так и недостаточной трофикой, по причине нарушения кровообращения, нервные клетки остро нуждаются в поступлении пиримидиновых нуклеотидов из пищи, богатой нуклеотидами, или из лекарственных препаратов, содержащих нуклеотиды.
Средства, содержащие уридин, и его аналогов при («NucleomaxX»™, "Mitocnol"™) применяются при липоатрофии, развивающейся как побочный эффект антиретровирусной терапии (stavudine, zidovudine) у больных приобретенным вирусным иммунодефицитом (Sutinen J. et al., 2005). Указанное финское исследование применяло у 20 пациентов, БАД «NucleomaxX» (экстракт сахарного тростника), содержащий уридин, (36 г в три приема ежедневно).
Уридин 5'-трифосфат применяется в виде аэрозоля в комбинации с амилоридом (amiloride) у больных с муковисцидозом (cystic fibrosis) для разжижения бронхиального секрета, что помогает улучшить мукоцилиарный клиренс (W D Bennett e.a., 1996). Авторы делают вывод, что эффект уридина, как результат воздействия на электролитный транспорт в эпителии воздухоносных путей - способствует увеличению секреции Cl- и блокированию абсорбции Na+.
По некоторым данным (Германе С.К. и соавт., 1987), рибоксин, а следовательно, обладать свойствами опосредованно обезболивающего действия. Имеется предположение, что уридин может иметь отношение к нейроэндорфинной системе. Уридин, как и аденозин в эксперименте, теста «горячей пластинки», проявлял анальгезирующее действие в дозах 1-500 мг/кг (Германе С.К., 1987).
В соответствии с классификацией анксиолитиков Т.А. Ворониной и С.Б. Середенина (2002) - средств, применяемых для лечения тревожно-депрессивных состояний в неврологической практике - уридин наряду с оротатом калия входит в рубрику «традиционных средств этого ряда». По крайней мере, в эксперименте у депрессивных крыс это свойство уридина получается наглядным (Carlezon W.A.Jr. и соавт., 2005).
Имеются также экспериментальные данные о перспективности использования уридина при эпилепсии (Zhao Q. и соавт, Epilepsy Res 01-JUL. 2006; 70(1)).
Некоторые биологические эффекты уридина и его предполагаемых направлениях описаны в обзорной статье Pizzorno G. и соавторов (2002).
Итальянские исследователи из университета Павии Dagani F. и соавторы (1984) исследовали активность ферментов мозговой ткани при прерывистой гипоксии с применением уридина в эксперименте. Были обнаружены биологические эффекты.
Имеется статья о влиянии уридина на пресинаптические и NMDA- и каинатные рецепторы коры мозга крыс (Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, том 145, №3, стр.288, Л.Н.Петрова, А.В.Габриелян). Полученные результаты позволяют говорить о действии уридина на пресинаптические и NMDA- и каинатные рецепторы, что может быть одним из механизмов модуляции уридином синаптической передачи в ЦНС.
По данным Harvard-affiliated McLean Hospital (США), некоторые продукты могут обладать выраженными свойствами атидепрессантов.
В отчете, опубликованном в февральском номере издания Biological Psychiatry, исследователи сообщают о способности полиненасыщенных жирных кислот ряда омега-3 и уридина, оказывать антдепрессивный эффект.
Результаты применения комбинации омега-3 и уридина в эксперименте на крысах не отличались от таковых при лечении животных медикаментозными антидепрессантами (William Carlezon, McLean's Behavioral Genetics Laboratory).
Стоит отметить, что препараты уридина, применяемые внутрь в качестве предшественника пиримидина, хорошо переносятся, даже в высоких дозах (van Groeningen, 1986; Kelsen, 1997).
Известен патент ЕР 1465616, описывающий применение уридина, его предшественников и производных, соли, эфиры, таутомеры и т.д., для лечения осложнений статиновой терапии, в виде мышечной слабости и миалгии, синдроме, хронической усталости (chronic fatigue syndrome, фибромиалгии, миофасцикулярном болевом синдроме, вирусных инфекциях, миолизе и рабдомиолизе болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, хорея Хантингтона и деменция.
Патент US 5583117, ацилированные производные уридина и цитидина для повышение уровня уридина и цитидина в тканях. Патент раскрывает общие методы для доставки экзогенных цитидиновых или уридина в тканях животных в составе н ацилированных цитидиновых или ацилированных уридина, соответственно. Предлагает использование ацилированных производных уридина и цитидина при заболеаниях и повреждениях печени, респираторном дистресс синдроме, переломах костей, цереброваскулярных расстройствах, сенильной деменции, патологии сердца и др. клинических состояниях. Патент US 6258795, изобретение относится к композициям в составе ацильных производных цитидина и уридина. Описывает методы лечения гепатита, сахарного диабета, болезни сердца, цереброваскулярных расстроствах, расстройствах, болезни Паркинсона, респираторном дистресс синдроме новорожденных (infant respiratory distress syndrome). Патент US 6258795, описывающий применение уридина триацетата при различных онкологических, нейродегенаративных заболеваниях и т.н. митохондриальных заболеваниях. Известен патент РФ №2148399 «Способ профилактики и лечения атеросклероза», где упоминается применение уридина внутримышечно в дозе 50 мг/кг один раз в сутки в течение 6-8 дней на курс лечения. Опубликована заявка №2007147937 «Композиция, содержащая PUFA и/или уридин и способы их применения». Заявка №2005122934 «Соединения для нормализации цикла сна/бодрствования» описывается способ, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из группы, состоящей из цитидинсодержащего соединения, цитозинсодержащего соединения, уридинсодержащего соединения, креатинсодержащего соединения, аденозинсодержащего соединения и соединения, повышающего уровень аденозина, таким образом, нормализуя цикл сна/бодрствования указанного млекопитающего. Заявка №2005117631 «Соединения для лечения табачной зависимости и отвыкания от курения», указанный способ включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из группы, состоящей из цитидинсодержащего соединения, цитозинсодержащего соединения, уридинсодержащего соединения, креатинсодержащего соединения, аденозинсодержащего соединения и соединения, повышающего содержание аденозина.
Цитидин, основной компонент РНК (Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия. 3. М.: Высшая школа, 2000, 479 с.). В результате цитоплазматического превращения преобразуется в цитидинтрифосфат (ЦТФ). Цитидин - это нуклеозид, образующийся при соединении цитозина с рибозой β-N1-гликозидной связью.
Во время критической гипоксии нервной ткани истощение запасов АТФ вызывает накопление цитидин-5'-монофосфата в мембране, что в свою очередь усиливает накопление свободных жирных кислот. Данные продукты распада могут становиться для мембраны токсичными при достижении высоких уровней свободных радикалов, липидных пероксидов, а также арахидоновой кислоты и ее метаболитов, в частности лейкотриенов. Защитный эффект цитидина может проявляться в отношении этих патологических изменений.
Известен патент РФ 2255741 «Профилактического средства для лечения церебральной ишемии и способ лечения с его использованием». Применение CDP-холина (цитидин-дифосфат-холина) или его соли в качестве профилактического средства для лечения церебральной ишемии и способ такого профилактического лечения. Изобретение отличается тем, что для CDP-холина или его соли выявлен новый, неизвестный ранее механизм действия: ингибирование активации каспазной цепи, причем эффективность действия высока при профилактическом приеме.
Известны лекарственные препараты, содержащие комбинации уридина и цитидина «Нуклео Ц.М.Ф.»™, «Келтикан»™. Препарат, содержащий сложное соединение, включающее цитидин «Цитиколин»™, цитидин-5'-дифосфохолин.
Применение витаминов группы «В» для лечения поражений периферической нервной системы. В частности, у пациентов, с диагнозом сахарный диабет. Также используются сочетания жиро- и водорастворимой формы тиамина (вит.B1), витамина B6 и/или витамина B12.
При этом необходимо сделать уточнение, что витамины группы «В» не обладают собственной терапевтической активностью, а являются т.н. коферментами, являющимися катализаторами ряда метаболических процессов.
При ситуациях острой и хронической гипоксии возникает потребность в комплексных лекарственных средствах, защищающих пораженную нервную клетку и позволяющих обеспечить ее жизнедеятельность. Поскольку, при патологических процессах, нарушается нормальная жизнедеятельность нервных клеток, основное поражение выражается в поражении дыхательной, т.н. окислительно-восстановительной функции клеток, уменьшении или прекращении синтеза белков и ферментов клеткой и как следствие к накоплению продуктов распада, что генерирует дальнейшее усугубление патологического процесса.
Создание комплексных лекарственных препаратов, защищающих нервную клетку от патологических процессов и стабилизирующие ее нормальную жизнедеятельности, является актуальной, социально-значимой и важной задачей. Создание комплексных лекарственных препаратов, способных предотвратить разрушение нервной ткани и способствовать функциональной жизнедеятельности, а как следствие улучшение качества жизни, снижение случаев инвалидизации и соответственно снижение затрат на одного пациента, является актуальной и важной задачей.
Задачей настоящего изобретения является создание инъекционной формы эффективного фармацевтического состава, содержащего уридин, более экономичного в технологии изготовления с сохранением всех фармакинетических свойств активного вещества, пригодного для использования в любых условиях.
Данный фармацевтический состав содержит агенты, участвующие в поддержании и/или усиление метаболических процессов, и компоненты, обеспечивающие включение этих агентов в метаболические процессы и эффективной утилизации продуктов жизнедеятельности и распада в клетках поврежденных органов и тканей.
Поставленная задача по первому варианту решается тем, что заявленный фармацевтический состав, обладающий нейропротекторным действием, содержит естественные для биологического объекта агенты, участвующие в метаболизме нервной ткани, так называемый кофермент и местноанестезирующее и вспомогательные вещества. В качестве активных терапевтических агентов содержит цитидин, уридин, пиридоксин гидрохлорид, лидокаина гидрохлорид и вспомогательные вещества: натрия полифосфат, калия феррицианид, натрия гидроксид, спирт бензиловый и воду для инъекций, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Поставленная задача по первому варианту решается тем, что заявленный фармацевтический состав, обладающий нейропротекторным действием, содержит естественные для биологического объекта, агенты, участвующие в метаболизме нервной ткани, так называемый кофермент и местноанестезирующее и вспомогательные вещества. В качестве активных терапевтических агентов содержит цитидин, уридин, фолиевую кислоту, лидокаина гидрохлорид и вспомогательные вещества: натрия полифосфат, калия феррицианид, натрия гидроксид, спирт бензиловый и воду для инъекций, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного получения композиции для инъекций
Пример 1.
В реактор для приготовления раствора из мерника загружают около 80 л свежеперегнанной воды для инъекций комнатной температуры. Навески субстанций отвешивают на весах в промаркированную тару и переносят к реактору для приготовления раствора.
Загрузку в реактор для приготовления раствора ведут в следующей последовательности:
При включенной мешалке в реактор для приготовления раствора загружают натрия гидроксид (возможно введение натрия гидроксида в виде раствора с ранее определенной концентрацией 30% в количестве 2 л) и перемешивают 5-10 мин. Затем загружают пиридоксина гидрохлорид и перемешивают до полного растворения 5-10 мин.
После полного растворения в реактор для приготовления раствора последовательно загружают натрия полифосфат, перемешивание 5-10 мин), лидокаина гидрохлорид, перемешивание 10-15 мин.
Далее в реактор загружают цитидин 5'фосфат-динатриевая соль и перемешивают 5-10 мин. После полного растворения цитидина в реактор загружают калия феррицианид и перемешивают 5-10 мин и уридин 5'фосфат-динатриевая соль, перемешивают 5-10 мин.
Останавливают процесс смешивания в реакторе и проводят отбор пробы на определение рН раствора, должно соответствовать от 4,5 до 4,7. При необходимости доводят рН раствора 30% раствором натрия гидроксида.
После установки рН раствора в реактор добавляют спирт бензиловый и перемешивают 10-15 мин.
Затем реактор останавливают, добавляют раствора свежеперегнанной водой для инъекций комнатной температуры до 100,0 л. Далее в реакторе перемешивают в течение 10-15 мин.
По завершении процесса перемешивания раствора из реактора, проводят отбор пробы на анализ по показателям: рН раствора 4,4-4,8, содержание в 1 мл раствора: пиридоксина гидрохлорида от 0,040 г до 0,060 г; цитидина 5'фосфат-динатриевая соль от 0,0015 г до 0,0035 г; уридина 5'фосфат-динатриевая соль от 0,0005 г до 0,00015 г; лидокаина гидрохлорида от 0,009 г до 0,011 г; спирта бензилового от 0,018 г до 0,022 г.
При необходимости проводят корректировку количественного содержания действующих веществ в растворе. Следует учесть, что при получении количественного содержания одного из компонентов выше регламентируемого проводят расчет разбавления раствора по данному веществу, а остальные компоненты вводят согласно количеству воды для инъекций, взятой для разбавления раствора.
После получения положительных результатов анализа раствор передают на фильтрацию, ампулирование и стерилизацию.
Ампулы при производстве композиции необходимо использовать из светозащитного стекла.
Пример 2.
В емкость, реактор для приготовления раствора, из мерника заправляют порядка 80 л подготовленной воды для инъекций, комнатной температуры. Подготовленные субстанции отвешивают на весах в промаркированную тару и загружают в реактор.
Загрузку в реактор для приготовления раствора ведут в следующей последовательности.
При включенной мешалке в реактор для приготовления раствора загружают натрия гидроксид (возможно введение натрия гидроксида в виде раствора с ранее определенной концентрацией 30% в количестве 2 л) и перемешивают 5-10 мин. Затем загружают фолиевую кислоту и перемешивают до полного растворения 5-10 мин.
После полного растворения в реактор для приготовления раствора последовательно загружают натрия полифосфат, перемешивание 5-10 мин), лидокаина гидрохлорид, перемешивание 10-15 мин.
Далее в реактор загружают цитидин 5'фосфат-динатриевая соль и перемешивают 5-10 мин. После полного растворения цитидина в реактор загружают калия феррицианид и перемешивают 5-10 мин и уридин 5'фосфат-динатриевая соль, перемешивают 5-10 мин.
Останавливают процесс смешивания в реакторе и проводят отбор пробы на определение рН раствора, должно соответствовать от 4,5 до 4,7. При необходимости доводят рН раствора 30% раствором натрия гидроксида.
После установки рН раствора в реактор добавляют спирт бензиловый и перемешивают 10-15 мин.
Затем реактор останавливают, добавляют раствора свежеперегнанной водой для инъекций комнатной температуры до 100,0 л. Далее в реакторе перемешивают в течение 10-15 мин.
По завершении процесса перемешивания раствора из реактора проводят отбор пробы на анализ по показателям: рН раствора 4,4-4,8, содержание в 1 мл раствора: фолиевой кислоты от 0,00005 г до 0,00015 г; цитидина 5'фосфат-динатриевая соль от 0,0015 г до 0,0035 г; уридина 5'фосфат-динатриевая соль от 0,0005 г до 0,00015 г; лидокаина гидрохлорида от 0,009 г до 0,011 г; спирта бензилового от 0,018 г до 0,022 г.
При необходимости проводят корректировку количественного содержания действующих веществ в растворе. Следует учесть, что при получении количественного содержания одного из компонентов выше регламентируемого проводят расчет разбавления раствора по данному веществу, а остальные компоненты вводят согласно количеству воды для инъекций, взятой для разбавления раствора.
После получения положительных результатов анализа раствор передают на фильтрацию, ампулирование и стерилизацию.
Ампулы при производстве композиции необходимо использовать из светозащитного стекла.
Пример 3.
Реактор с якорной мешалкой, заполняют 8 л воды для инъекций. Затем в реактор подают стерильного азота и барботируют воду в течение 5 минут. Затем последовательно загружают 10 г субстанции уридина 5'фосфат-динатриевая соль, 25 г субстанции цитидина 5'фосфат-динатриевая соль и 500 г субстанции пиридоксина гидрохлорида. При этом идет постоянное перемешивание получаемого раствора и барботаж получаемого раствора азотом. Перемешивание ведут до полного растворения. Значение рН раствора доводят до значения 4,5-5,5 рН путем добавления 1 М раствора уксусной кислоты. Раствор доводят до объема 10 л водой для инъекций и затем пропускают через стерилизующий фильтр. В асептических условиях происходит розлив в ампулы емкостью 2 мл. Ампулы помещают в сублимационную камеру, где происходит заморозка до температуры минус 40°С при скорости замораживания 10°С/ч, далее подвергают высушиванию путем вакуумирования. Ампулы с содержанием сухой лиофилизированной формой препарата запаивают под азотом.
Пример 4.
Реактор с якорной мешалкой заполняют 8 л воды для инъекций. Затем в реактор подают стерильного азота и барботируют воду в течение 5 минут. Затем последовательно загружают 20 г субстанции уридина 5'фосфат-динатриевая соль, 25 г субстанции цитидина 5'фосфат-динатриевая соль и 2 г субстанции фолиевой кислоты. При этом идет постоянное перемешивание получаемого раствора и барботаж получаемого раствора азотом. Перемешивание ведут до полного растворения. Значение рН раствора доводят до значения 4,5-5,5 рН путем добавления 1 М раствора уксусной кислоты. Раствор доводят до объема 10 л водой для инъекций и затем пропускают через стерилизующий фильтр. В асептических условиях происходит розлив в ампулы емкостью 2 мл. Ампулы помещают в сублимационную камеру, где происходит заморозка до температуры минус 40°С при скорости замораживания 10°С/ч, далее подвергают высушиванию путем вакуумирования. Ампулы с содержанием сухой лиофилизированной формой препарата запаивают под азотом.
Изобретение иллюстрируется следующим примерами.
Эксперименты проведены на белых беспородных крысах-самцах весом 200-250 г. Животных содержали в клетках при температуре 18-20°С со свободным доступом к воде и пище в стандартных условиях. Во всех группах животных производили шов пересеченного нерва. На следующий день всем прооперированным животным вводили композиции следующих терапевтических средств:
1. Цитидин - 2,5 мг, уридин - 1 мг, фолиевая кислота - 200 мкг, в 2 мл раствора.
2. Цитидин - 2,5 мг, уридин - 1 мг, пиридоксин (витамин B6) - 100 мг, в 2 мл раствора.
3. Витамин B1 - 100 мг, витамин B6 - 100 мг, витамин B12 - 1000 мкг, в 2 мл раствора.
Затем, чтобы приблизить терапевтические концентрации к дозировкам животным, разводили по формуле: «(2 мл раствора/70 (ср. масса человека))×7».
И уже адаптированную терапевтическую дозу вводили в течение 3 недель, через хвостовую вену.
Наблюдение прекращалось через 6 недель после операции, животных выводили из опыта. Для получения гистологических исследования, хирургически иссекали участки оперированного седалищного нерва дистальнее уровня швов. После готовили гистологический препарат. Срезы получали на ультратомах и окрашивали. Под микроскопом, при использовании компьютерной программы, с каждого нерва методом цифровой фотографии выделяли примерно от 40 до 70 полей зрения с изображениями более 350 мякотных нервных волокон. Далее определялись диаметры мякотных волокон и их аксонов и определяли среднюю толщину миелина. Отношение аксон/миелин выражали как число G = частное от деления диаметра осевого цилиндра на диаметр волокна) [Schmitt F.O., Bear R.S. The optical properties of vertebrate nerve axons related to fiber size // J. Cell Comp. Physiol. - 1937. - V.9. - №3]. В компаративные подсчеты включали такие показатели, как: средний диаметр мякотных волокон - Dмнв, процентные доли волокон мелкого S=<4 мкм, среднего - М=3,9-6,9 мкм, крупного калибров - L=>7,0 мкм. В расчет также брали показатели волокон более 10 мкм диаметром. Рассчитывали долю в процентном отношении в общем объеме выборки следующих данных: диаметры - максимальный Dмакс, средний Dсредн; средняя толщина миелина Lмиел, среднее число Gсредн. Для контроля служили морфологические данные гистологических препаратов седалищных нервов интактной группы животных.
Через 6 недель после операции в экспериментах всех трех групп снижена объемная плотность регенерировавших мякотных нервных волокон. По количественным показателям плотность мякотных, безмякотных нервных волокон в дистальном отрезке нерва в группах оперированных животных превышала подобный показатель не оперированной группы. Показатель деструктивных нервных волокон в дистальном отрезке оперированного нерва в группах, которым вводили терапевтические средства, не превысило 1%. Следовательно, в этих группах были минимизированы явления вторичной дегенерации.
Средние диаметры фракции толстых волокон группы, получавшей «цитидин - уридин - пиридоксина гидрохлорид», был равен 95,5% от интактной группы, средняя толщина миелиновой оболочки толстых волокон - 79,2%; в группе, получавшей «цитидин - уридин - фолиевая кислота» - 93,8%, средняя толщина миелиновой оболочки толстых волокон - 72,4%; в группе, получавшей «витамин B1, витамин B6, витамин B12» - 86,8%, средняя толщина миелиновой оболочки толстых волокон - 67,6%.
Как видно из таблицы, наиболее активно восстанавливались волокна, в том числе и толстые нервные волокна, в группе, получавшей комбинацию уридина и цитидина. Т.о. комбинации с уридином и цитидином оказывают положительное влияние процесс миелинизации и способствует регенерации и перестройки в клетках безмякотных и мякотных нервных волокон.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, и касается фармацевтических композиций, применяемых для профилактики и лечения заболеваний нервной системы. Фармацевтическая композиция в качестве активных терапевтических агентов содержит цитидин, уридин, пиридоксин гидрохлорид или фолиевую кислоту, лидокаина гидрохлорид и вспомогательные вещества: натрия полифосфат, калия феррицианид (III), натрия гидроксид, спирт бензиловый и воду для инъекций. Фармацевтическая композиция выполнена в форме ампул для инъекций. 2 н.п. ф-лы, 1 табл.
1. Фармацевтическая композиция для лечения неврологических нарушений в качестве активных терапевтических агентов содержит цитидин, уридин, пиридоксин гидрохлорид, лидокаина гидрохлорид и вспомогательные вещества: натрия полифосфат, калия феррицианид, натрия гидроксид, спирт бензиловый и воду для инъекций при следующем соотношении компонентов, мас.%:
2. Фармацевтическая композиция для лечения неврологических нарушений в качестве активных терапевтических агентов содержит фолиевую кислоту, цитидин, уридин, лидокаина гидрохлорид и вспомогательные вещества: натрия полифосфат, калия феррицианид, натрия гидроксид, спирт бензиловый и воду для инъекций, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| Паньков В.И | |||
| Новый подход к лечению поражений переферических нервов с помощью пиримидиновых нуклеотидов | |||
| Международный эндокринологический журнал, 2006, №3, вып.5, найдено в сети Интернет по адресу <http://endocrinology-mif-ua.com/archive/issue-2079/article-2096/print.html> | |||
| Uve Rüchert, Keltican forte bei |
