СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ, ПРОТИВОМИКРОБНЫМ, РЕПАРАТИВНЫМ, А ТАКЖЕ УЛУЧШАЮЩИМ МИРКОЦИРКУЛЯЦИЮ В ТКАНЯХ ДЕЙСТВИЕМ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2012 года по МПК A61K36/738 A61K36/28 A61K36/23 A61K36/15 A61K36/235 A61K36/484 A61K36/282 A61K36/53 A61K36/38 A61K36/66 A61P29/00 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию противовоспалительного, противомикробного, а также улучшающего микроциркуляцию и репаративные процессы в тканях средству и способу его получения.

Известны средства, обладающие противовоспалительным, антиоксидантным действием, на основе водных очищенных концентрированных экстрактов из листьев персика и растения очанки (патент RU №2308961), спиртовой настойки мелиссы (патент RU №2275931).

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату (прототип) является средство по патенту (RU №2177796), обладающее противовоспалительным, общеукрепляющим и спазмолитическим действием, содержащее ромашку аптечную, отличающееся тем, что оно выполнено в виде настойки на 40% спирте и дополнительно содержит корни лабазника шестилепестного, кровохлебки лекарственной, лапчатки прямостоячей, девясила высокого, змеевика (горца змеиного), элеутерококка колючего, боярышника кровяно-красного, шиповника коричного, подорожника большого, мать-и-мачехи, укропа пахучего (огородного), мас.%:

Ромашка аптечная (цветки) 0,90-1,00 Лабазник шестилепестной (корень) 1,30-1,50 Кровохлебка лекарственная (корень) 0,70-0,80 Лапчатка прямостоячая (корень) 0,30-0,50 Девясил высокий (корень) 0,40-0,50 Змеевик (горец змеиный) (корень) 0,80-1,00 Элеутерококк колючий 1,30-1,50 Боярышник кровяно-красный (плоды) 0,90-1,00 Шиповник коричный (плоды) 0,90-1,00 Подорожник большой (листья) 0,30-0,50 Мать-и-мачеха (листья) 0,30-0,50 Укроп пахучий (огородный) (семена) 0,10-0,20 Спирт этиловый 40%

Технической задачей изобретения является создание растительного средства, обладающего увеличенным фармакологическим действием, а также разработка способа его получения.

Данный технический результат достигается при помощи состава комплексного экстракта, который содержит помимо ромашки (цветков), шиповника (плодов) и фенхеля (плодов) также календулу (цветки), тмина (плоды), сосны (почки), тысячелистника (трава), мяты (листья), солодки (корень), полыни горькой (трава), чабреца (трава), зверобоя (трава), чистотела (трава) при следующих соотношениях, мас.%:

Ромашка (цветки) 5-10 Календула (цветки) 5-10 Тмин (плоды) 5-10 Сосна (почки) 5-10 Тысячелистник (трава) 5-10 Мята (лист) 5-10 Шиповник (плоды) 5-10 Фенхель (плоды) 5-10 Солодка (корень) 5-10 Полынь (трава) 5-10 Чабрец (трава) 5-10 Зверобой (трава) 5-10 Чистотел (трава) 5-10 Спирт этиловый 70%

Технология получения заключается в следующем.

Измельченное растительное сырье заливают 70% этиловым спиртом при соотношении сырье:экстрагент 1:5, экстрагируют методом настаивания при постоянном перемешивании в течение 3 дней, сливают, фильтруют, упаривают под вакуумом 20-25% сухого остатка.

Пример конкретного выполнения №1

Измельченное растительное сырье - ромашки (цветки) 7%, шиповника (плоды) 7%, фенхеля (плоды) 7%, календулы (цветки) 7%, тмина (плоды) 8%, сосны (почки) 8%, тысячелистника (трава) 8%, мяты (лист) 8%, солодки (корень) 8%, полыни горькой (трава) 8%, чабреца (трава) 8%, зверобоя (трава) 8%, чистотела (трава) 8%, смешивают между собой и заливают 70% этиловым спиртом при соотношении при соотношении сырье экстрагент 1:5, получают методом настаивания при постоянном перемешивании в течение 3 суток, затем сливают, фильтруют и упаривают под вакуумом до 20-25% сухого остатка.

Пример конкретного выполнения №2

Измельченное растительное сырье - ромашки (цветки) 9%, шиповника (плоды) 9%, фенхеля (плоды) 9%, календулы (цветки) 9%, тмина (плоды) 8%, сосны (почки) 7%, тысячелистника (трава) 7%, мяты (лист) 7%, солодки (корень) 7%, полыни горькой (трава) 7%, чабреца (трава) 7%, зверобоя (трава) 7%, чистотела (трава) 7% смешивают между собой и заливают 70% этиловым спиртом при соотношении сырье экстрагент 1:5, получают методом настаивания при постоянном перемешивании в течение 3 суток, затем сливают, фильтруют и упаривают под вакуумом до 20-25% сухого остатка.

Противовоспалительная активность была проверена в эксперименте на 70 беспородных мышах-самцах массой 18-24 г, подтвержден выраженный противовоспалительный эффект средства. В качестве препарата сравнения использовали экстракт состава-прототипа. Животные опытных групп в течение десяти дней получали исследуемые образцы внутрижелудочно через зонд в дозе 100 мг/кг. Группа интактных животных получала только воду очищенную и служила в качестве группы сравнения (% прироста массы отека у интактных животных составлял 0%).

Статистическую обработку полученных результатов проводили путем расчета средней (X) и средней квадратичной ошибки (m). О достоверности различий судили, используя параметрический (t-критерий Стьюдента) и непараметрический (U-критерий Манна-Уитни) методы. Значимость различий считали достоверной при P_t, Р_u<0,05. Расчеты проводили с использованием программ STATISTICA 6.0.

Введение мышам 1% раствора агара приводило к развитию острого воспаления, прирост массы отека при этом составлял 63%. Экстракт по прототипу достоверно снижал прирост массы отека по сравнению с нелеченными животными в 0,8 раза.

Экстракт заявляемый достоверно снижал прирост массы отека по сравнению с экстрактом прототипа в 1,25 раза.

Противомикробное действие средства в жидкой питательной среде МПБ методом серийных разведений с последующим высевом на твердые селективные среды. Проявление противомикробной активности считают при полном отсутствие роста бактерий. Бактерицидная нагрузка составляла 250000 микробных тел в 1 мл.

Полное подавление роста золотистого стафилококка, синегнойной палочки и протея наблюдают у средства как в чистом виде, так и разведении (см. таблицу).

Опыты по фармакологическим исследованиям репаративного действия проводили на нелинейных половозрелых крысах-самцах. Статистическую обработку результатов исследования фармакологической активности проводили по общепринятым в фармакологии методам, рассчитывая средние значения показателей и стандартную ошибку. Достоверность различий между средними значениями определяли по t критерию Стьюдента. Вероятность полученных результатов оценивали на уровне значимости не менее 95% (Р<0,05). При исследовании антиэкссудативной активности травматический отек вызывали на фоне наркоза (нембутал, 30 мг/кг, в/б) ударом груза массой 500 г, свободно падающего с высоты 40 см на подошвенную поверхность правой задней стопы крыс (при строгом условии неповреждения голеностопного сустава). Препараты наносили на правую заднюю (воспаленную) стопу крыс в эквивалентных дозах по действующему веществу через 2 часа после травмы и в последующем 1 раз в сутки до полного регресса отека в количестве, достаточном для обработки равномерным тонким слоем всей поверхности голеностопа.

Регистрацию объема стопы осуществляли до, через 2 ч после травмы и в дальнейшем ежедневно 1 раз в сутки на электронном плетизмометре (Уго Базиле, Италия; мод. 7150). Антиэкссудативную активность препаратов определяли в динамике, оценивая ее по степени ингибирования прироста отека стопы на фоне препаратов по сравнению с контролем - группой нелеченных животных. Эффект препарата рассчитывали по формуле: [(^ΔV_к-^ΔV_о)/^ΔV_к]×100%, где ^ΔV_o и ^ΔV_к - средний прирост объема отечной стопы в опытной и контрольной группах. Травмирование задней стопы крыс сопровождается быстрым развитием отека, максимальный прирост которого регистрируется через 2 ч после нанесения травмы. Регресс отека в группе контрольных нелеченных крыс происходит постепенно и достаточно медленно. Нормализация объема травмированной стопы в контроле наблюдается на 12-14 сутки.

Установлено, что нанесение на поверхность стопы животных заявляемого препарата через 2 ч после травмы и в последующем ежедневно 1 раз в сутки обеспечивает выраженное антиэкссудативное действие. Эффект исследуемого комплексного экстракта проявляется уже через сутки после начала лечения и составляет для новой композиции - 12,7%. В дальнейшем действие экстракта возрастает и составляет соответственно: на 3 сутки - 52,4%, на 5 сутки - 60,2%, на 7 сутки - 68,8%, на 10 сутки - 95,1% соответственно. Полный регресс воспалительного отека при накожном применении предлагаемой комбинации наблюдается через 10 суток, т.е. быстрее, чем у крыс в нелеченном контроле.

Модель полнослойных асептических ран у крыс является наиболее распространенной при изучении фармакологии процессов репарации кожи. Раны наносили на предварительно депилированные участки кожи крыс в области спины по обе стороны от позвоночника с помощью металлического пробойника диаметром 11 мм. Операцию проводили под общим наркозом (этаминал натрия, 30 мг/кг, в/б). Исходная площадь одной раны составляла 95 мм². Полученные раны находились на расстоянии 1,5-2,0 см друг от друга. Препараты в эквивалентных дозах по действующему веществу (10 мг/животное в пересчете на декспантенол) наносили на всю площадь ран непосредственно после их образования, затем через 6 ч и в дальнейшем ежедневно дважды в сутки (утром и вечером) в количестве, достаточном для обработки поверхности ран равномерным тонким слоем.

Лечение проводили до полного заживления ран, критерием которого являлась эпителизация всей площади раневой поверхности. Контролем служила группа нелеченных крыс. Репаративный эффект исследуемых препаратов определяли в динамике на 1, 2, 3, 4, 5, 7 и 10 сутки, оценивая площадь зажившей поверхности раны по отношению к данному показателю в контрольной группе. Для этого определяли площадь незажившей поверхности раны планиметрическим методом путем перенесения контуров раны на миллиметровую бумагу и рассчитывали площадь репарации как разность между исходной площадью раны 95 мм² и площадью незажившей поверхности у опытных и контрольных крыс. Эффект препарата рассчитывали по конечной формуле: [(S_к-S_о)/(95-S_к)]×100%, где S_к и So - соответственно площади незажившей раневой поверхности в контрольной и опытной группах. Оценивали также степень сокращения срока полного заживления ран под влиянием комплексного экстракта по формуле: [(Т_к-Т_о)/Т_к]×100%, где Т_к и Т_о - время заживления ран в контрольной и опытной группах соответственно. Помимо этого, проводили визуальную оценку состояния тканей вокруг раны, регистрируя наличие отека, гиперемии, гнойных процессов, наличие и сроки отторжения струпа.

Как свидетельствуют данные, сокращение площади ран у животных всех групп в течение 3-х суток после их нанесения происходит достаточно интенсивно: средняя площадь ран (S) сокращается с 95 мм² до 68,0-72,4 мм². В дальнейшем скорость уменьшения S у контрольных (нелеченных) животных резко уменьшается и в течение 2-5 суток значение S убывает незначительно. Нанесение на раны заявляемого средства значительно ускоряет ранозаживление, статистически достоверно уменьшая площадь раневой поверхности сравнительно с нелеченными крысами в течение всего периода наблюдения. Стимуляция репарации под влиянием комплексного экстракта наиболее выражено проявляется на 2-5 дни лечения. Максимальный ранозаживляющий эффект заявляемого состава развивается (на 6-и сутки) и составляет 87,2%. В дальнейшем различие между площадью у леченых и контрольных крыс уменьшается, сохраняясь в пределах 9-25% на протяжении всего периода лечения. Полная репарация ран у контрольных нелеченных крыс наблюдается лишь на 14-16 сутки, тогда как у животных опытных групп - к 10-12 суткам. Таким образом, срок заживления ран под влиянием заявляемого препарата сокращается примерно на 25%.

Таким образом, предлагаемый комплексный экстракт обладает повышенной фармакологической активностью и может применяться как самостоятельное средство для лечения различных воспалительных заболеваний (см. таблицу).

Противомикробные свойства комплексного экстракта Разведения полученного экстракта Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Proteus vulgaris Чистый не упаренный экстракт + + + 1:2 + + + 1:10 + + + 1:20 + + +

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию противовоспалительного, противомикробного, а также улучшающего микроциркуляцию и репаративные процессы в тканях средства и способу его получения. 70% спиртовая настойка содержит ромашку (цветки), шиповник (плоды), фенхель (плоды), календулу (цветки), тмин (плоды), сосну (почки), тысячелистник (траву), мяту (листья), солодку (корень), полынь горькую (траву), чабрец (траву), зверобой (траву) и чистотел (траву). Способ получения заключается в следующем. Измельченное растительное сырье заливают 70% этиловым спиртом при соотношении сырье-экстрагент 1:5, экстрагируют методом настаивания при постоянном перемешивании в течение 3 дней, сливают, фильтруют, упаривают под вакуумом 20-25% сухого остатка. 2 з.п. ф-лы, 2 пр., 1 табл.

1. Средство, обладающее противовоспалительным, антибактериальным, регенерирующим и улучшающим микроциркуляцию тканей действием, характеризующееся тем, что представляет собой 70% спиртовую настойку растительного сырья, при этом в качестве сырья она содержит ромашку (цветки), шиповник (плоды), фенхель (плоды), календулу (цветки), тмин (плоды), сосну (почки), тысячелистник (траву), мяту (листья), солодку (корень), полынь горькую (траву), чабрец (траву), зверобой (траву), чистотел (траву) при следующих соотношениях компонентов, мас.%:
ромашка (цветки) 5-10 календула (цветки) 5-10 тмин (плоды) 5-10 сосна (почки) 5-10 тысячелистник (трава) 5-10 мята (листья) 5-10 шиповник (плоды) 5-10 фенхель (плоды) 5-10 солодка (корень) 5-10 полынь (трава) 5-10 чабрец (трава) 5-10 зверобой (трава) 5-10 чистотел (трава) 5-10 70% этиловый спирт остальное

2. Способ получения средства по п.1, характеризующийся тем, что растительное сырьё настаивают на этиловом спирте 70% при соотношении 1:5 в течение 3 дней и постоянном перемешивании с последующем фильтрованием и упариванием под вакуумом до 20-25% сухого остатка, при этом в качестве сырья используют ромашку (цветки), шиповник (плоды), фенхель (плоды), календулу (цветки), тмин (плоды), сосну (почки), тысячелистник (траву), мяту (листья), солодку (корень), полынь горькую (траву), чабрец (траву), зверобой (траву), чистотел (траву) при следующих соотношениях компонентов, мас.%:
ромашка (цветки) 5-10 календула (цветки) 5-10 тмин (плоды) 5-10 сосна (почки) 5-10 тысячелистник (трава) 5-10 мята (листья) 5-10 шиповник (плоды) 5-10 фенхель (плоды) 5-10 солодка (корень) 5-10 полынь (трава) 5-10 чабрец (трава) 5-10 зверобой (трава) 5-10 чистотел (трава) 5-10 70% этиловый спирт остальное