ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДРОКСИБЕНЗАМИДА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Hsp90 Российский патент 2012 года по МПК C07D209/44 C07D401/04 C07D413/04 A61K31/4035 A61P35/00 

Изобретение относится к соединениям, которые ингибируют или модулируют активность белка теплового шока Hsp90, к применению соединений при лечении или профилактике болезненных состояний, опосредованных Hsp90, и к новым соединениям, обладающим активностью, ингибирующей или модулирующей Hsp90. Также представлены фармацевтические композиции, содержащие соединения, и новые химические промежуточные соединения.

Предпосылки создания изобретения

В ответ на клеточные стрессы, включая тепловой, токсины, облучение, инфекцию, воспаление и окислители, все клетки продуцируют стандартный набор белков теплового шока (Hsp) (Macario и de Macario 2000). Большинство белков теплового шока действуют как молекулярные шапероны. Шапероны связывают и стабилизируют белки на промежуточных стадиях укладки и дают возможность белкам свернуться до их функциональных состояний. Hsp90 представляет собой наиболее распространенный цитозольный Hsp в нормальных условиях. Существуют две изоформы Hsp90 человека, основная форма Hsp90α и минорная форма Hsp90ß. Hsp90 связывает белки на последней стадии сворачивания и отличается от других Hsp, тем, что большинство его белковых субстратов вовлечены в сигнальную трансдукцию. Hsp90 имеет особый АТФ-связывающий сайт, включая особенность упаковки по Бергерату (Bergerat) бактериальной гиразы, топоизомераз и гистидиновых киназ. Было показано, что АТФ, связанный в N-концевом кармане Hsp90, гидролизуется. Такая АТФ-фазная активность приводит к конформационным изменениям в Hsp90, которые необходимы для того, чтобы сделать возможными конформационные изменения в клиентном белке.

Домен димеризации и второй АТФ-связывающий сайт, который может регулировать АТФ-азную активность, обнаружен вблизи c-конца Hsp90. Димеризация HSP90 представляется критически важной для гидролиза АТФ. Активация Hsp90 дополнительно регулируется через взаимодействия с другими разнообразными шаперонными белками и может быть отделена в комплексе с другими шаперонами, включая Hsp70, Hip, Hop, p23, и p50cdc37. Было продемонстрировано, что ряд других сошаперонных белков связывают HSP90. Появилась упрощенная модель, в которой АТФ-связывание с амино-концевым карманом изменяет конформацию Hsp90 с тем, чтобы сделать возможной ассоциацию с мультишаперонным комплексом. Первый клиентный белок связывается с комплексом Hsp70/Hsp40. Этот комплекс затем ассоциируется с Hsp90 через Hop. Когда ADP заменен АТФ, конформация Hsp90 изменяется, Hop и Hsp70 высвобождаются и обновляется различный набор сошаперонов, включая p50cdc37 и p23. Гидролиз АТФ приводит к высвобождению указанных сошаперонов и клиентного белка из зрелого комплекса. Ансамициновые антибиотики гербимицин, гельданамицин (GA) и 17-аллиламино-17-дезметоксигельданамицин (17-AAG) представляют собой ингибиторы АТФ-связывающего сайта, которые блокируют связывание АТФ и предотвращают преобразование в зрелый комплекс (Grenert et. al., 1997, J. Biol. Chem., 272:23834-23850).

Несмотря на то, что Hsp90 экспрессирован повсеместно, GA имеет более высокую аффинность связывания с Hsp90, полученному из опухолевых клеточных линий по сравнению с нормальными (Kamal et. al., Nature 2003; 425: 407-410). GA также показывает более мощную цитотоксическую активность в опухолевых клетках и обнаружена при более высоких концентрациях в опухолях на моделях ксенотрансплантатных мышей (Brazidec J. Med. Chem. 2004, 47, 3865-3873). Кроме того, АТФ-азная активность Hsp90 повышена в раковых клетках и является указанием на повышенный уровень стресса в данных клетках. Также сообщается, что амплификация гена Hsp90 имеет место на последних стадиях рака (Jolly и Morimoto JNCI Vol.92, No.19, 1564-1572, 2000).

Повышенная генетическая нестабильность, ассоциированная с раковым фенотипом, ведет к повышению продукции ненативных или мутантных белков. Убихитиновый путь также служит для защиты клетки от ненативных или неправильно упакованных белков путем направления таких белков на протесомальную деградацию. Мутантные белки не являются по их природе нативными и, следовательно, имеют возможность обнаруживать структурную нестабильность и повышенную потребность в шаперонной системе. (Giannini et al., Mol Cell. Biol. 2004; 24(13):5667-76).

Существует некоторое количество данных, что Hsp90 найден первоначально в "активированных" мультишаперонных комплексах в опухолевых клетках в противоположность "латентным" комплексам в нормальных клетках. Один компонент мультишаперонного комплекса представляет собой сошаперон cdc37. Cdc37 связывается с Hsp90 в основании АТФ-связывающего сайта и может воздействовать на скорости дезактивации для ингибиторов, связывающихся с Hsp90 в "активированном" состоянии (Roe et. al., Cell 116, (2004), pp.87-98). Клиентный белок, связанный с Hsp90-Hsp70 формой шаперонного комплекса, как предполагается, является более восприимчивым к убихитинированию и направлению в протеосому для деградации. E3-убихитин-лигазы были идентифицированы с мотивами, взаимодействующими с шапероном, и один них (CHIP), как было показано, промотирует убихитинацию и деградацию Hsp90-клиентных белков (Connell et al., 2001, Xu et al., 2002).

Hsp90-клиентные белки

Количество опубликованных Hsp90-клиентных белков к настоящему времени превышает 100. Поскольку многие из его клиентных белков вовлечены в клеточную сигнальную пролиферацию и выживаемость, Hsp90 остается основным предметом, представляющим интерес, в качестве онкологической мишени. Две группы клиентных белков, клеточные сигнальные белковые киназы и факторы транскрипции, в особенности допускают, что регуляция Hsp90 может иметь потенциальное преимущество при противораковой терапии.

Клиентные белки Hsp90 протеинкиназы, участвующие в клеточной пролиферации и выживаемости, включают следующие:

c-Src

Клеточная Src (c-Src) представляет собой рецепторную тирозинкиназу, необходимую для митогенеза, инициируемого множественными рецепторами фактора роста, включая рецепторы, такие как рецептор эпидермиального фактора роста (EGFR), рецептор тромбоцитарного фактора роста (PDGFR), рецептор колониестимулирующего фактора-1 (CSF-IR) и рецептор основного фактора роста фибробластов (bFGFR). C-Src также сверхэкспрессирована и активирована в многочисленных карциномах человека, которые сверхэкспрессируют EGFR и ErbB2. Src также требуется для поддержания нормального костного гомеостаза через его регуляцию остеокластной функции.

p185erbB2

ErbB2 (Her2/neu) представляет собой рецепторную тирозинкиназу, сверхэкспрессированную в разнообразных злокачественных образованиях, включая рак груди, яичника, простаты и желудка. ErbB2 изначально идентифицировали как онкоген, и ингибирование Hsp90 приводит к полиубихитинации и деградации erbB2.

Polo-митотические киназы

Polo-подобные киназы (Plk) являются важными регуляторами продвижения клеточного цикла в M-фазе. Plk вовлечены в сборку митотического веретенного аппарата и в активацию комплексов CDK/циклин. Plk1 регулирует дефосфорилирование тирозина CDK через фосфорилирование и активацию Cdc25C. Активация CDK1, в свою очередь, ведет к образованию веретена и вхождению в M-фазу.

Akt (PKB)

Akt вовлечен в пути, которые регулируют клеточный рост путем стимулирования клеточной пролиферации и подавления апоптоза. Ингибирование Hsp90 под действием ансамицинов приводит к уменьшению периода полужизни Akt через убихитинирование и протесомальное разложение. Связывание cdc37 с Hsp90 также требуется для подавления Akt. После обработки ансамицином раковые клетки задерживаются в G2/M-фазе клеточного цикла на 24 часа после обработки и переходят к апоптозу через 24-48 часов. Нормальные клетки также задерживаются на 24 часа после обработки ансамицином, но не переходят к апоптозу.

c-Raf, B-RAF, Mek

RAS-RAF-MEK-ERK-MAP киназный путь опосредует клеточные ответы на сигналы роста. RAS мутирован в онкогенную форму приблизительно у 15% раковых новообразований человека. Три гена RAF представляют собой серин/треонининовые киназы, которые осуществляют регуляцию путем связывания RAS.

EGFR

Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) участвует в клеточном росте, дифференциации, пролиферации, выживаемости, апоптозе и миграции. Сверхэкспрессия EGFR была обнаружена во многих различных видах рака и активирующие мутации его киназного домена, как представляется, являются патогенными в подмножестве аденокарцином легкого.

Flt3

FMS-подобная тирозинкиназа 3 (FLT3) представляет собой рецепторную тирозинкиназу, участвующую в клеточной пролиферации, дифференциации и апоптозе. Flt3 активация также ведет к активации фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3k) и RAS-каскадах сигнальной трансдукции.

c-Met

c-Met представляет собой рецепторную тирозинкиназу, которая связывает фактор роста гепатоцитов (HGF) и регулирует как клеточную подвижность, так и клеточный рост; c-Met сверхэкспрессирована в опухолях, включая рак щитовидной железы, желудка, поджелудочной железы и толстой кишки. HGF также детектируется вокруг опухолей, включая метастазы печени. Это дает возможность предположить, что c-Met и HGF играют важную роль при инвазии и метастазировании.

Cdkl, Cdk2, Cdk4, Cdk6

Cdkl, Cdk2, Cdk4 и Cdk6 управляют клеточным циклом. Активность CDK регулируется их связыванием со специфическими субъединицами, такими как циклины, факторы ингибирования и сборки. Субстратная специфичность и распределение во времени CDK-активностей определяется их взаимодействием со специфическим циклинами. Cdk4/циклин D и Cdk6/циклин D активны в G1-фазе, Cdk2/циклин E и Cdk2/циклин A в S-фазе, и Cdc2/циклин A и Cdc2/циклин B в G2/M-фазе.

Циклинзависимая киназа типа 4 (CDK4) играет ключевую роль в возможности клеток переходить из G1- в S-фазу клеточного цикла и существенно активироваться во многих раковых новообразованиях человека. Активатор CDK4, циклин Dl, сверхэкспрессирован и CDK4 ингибитор, p16, отсутствует в разнообразных опухолях человека.

Разработаны Cdkl/Cdk2 ингибиторы, которые обратимо блокируют нормальные клетки в Gl/S-фазе или на G2/M-границе. G2/M-задержка обычно менее хорошо переносится клетками и, как следствие, они претерпевают апоптотическую смерть клетки. Поскольку также известно, что Hsp90 воздействует на пути клеточного выживания, этот эффект может быть дополнительно усилен ингибиторами Hsp90.

Wee-1

Протеинкиназа Wee-1 осуществляет подавляющее фосфорилирование CDC2 на тирозине-15 (Tyrl5). Это требуется для активации контрольной точки G2-фазы в ответ на повреждение ДНК.

Hsp90 факторы транскрипций, участвующие в клеточной пролиферации и выживаемости, включают следующие:

Мутантный p53

P53 представляет собой опухолевый супрессорный белок, который вызывает задержку клеточного цикла и индуцирует апоптоз. P53 мутирован в приблизительно половине всех видов рака. Мутантный p53 связывается с Hsp90 и действует как понижающий регулятор в раковых линиях, обработанных ингибиторами Hsp90, в то время как уровни p53 дикого типа остаются незатронутыми.

Прогестероновый рецептор/эстрогенный рецептор/рецептор андрогенного гормона

В отсутствие гормонов, рецепторы прогестерона и андрогенного гормона связываются Hsp90 в неактивную форму. После связывания с их родственными гормонами, рецепторы претерпевают конформационные изменения и диссоциацию из hsp90. Затем связанные лигандом рецепторы способны к димеризации, фосфорилированию и транслокации в ядро. Активированные рецепторы затем связываются с элементами гормонального ответа (HRE) в пределах регуляторных участков генов-мишеней, вовлеченных в поддержание клеточной пролиферации.

Hif-1a

Индуцируемый гипоксией фактор-1a (HIF-1a) представляет собой фактор транскрипции, который контролирует экспрессию генов, которые играют роль в ангиогенезе. HIF-1a экспрессирован в большинстве метастазов и, как известно, ассоциирован с Hsp90. Обработка ансамицином клеточных линий почечной карциномы ведет к убихитинированию и протесомальной деградации HIF-1a.

Ингтбиторы Hsp90 способны воздействовать на большое число мишеней, важных для сигнальной трансдукции при пролиферации опухолевых клеток. Ингибиторы сигнальной трансдукции, которые регулируют активности отдельной мишени, могут не являться такими эффективными благодаря избыточности сигнальных путей и быстрому развитию резистентности. Путем регулирования множественных мишеней, вовлеченных в клеточный сигнальный процесс и клеточную пролиферацию, ингибиторы Hsp90 могут предоставлять преимущество при лечении широкого спектра пролиферативных расстройств.

hERG

В конце 1990-х, ряд лекарственных средств, допущенных Управлением по контролю за продуктами и лекарственными средствами (США), были отозваны из торговли в США, когда было обнаружено, что они приводят к смертным случаям, вызванным дисфункцией сердца. Впоследствии было обнаружено, что побочным эффектом таких лекарственных средств является развитие аритмии, вызываемой блокированием hERG каналов в клетках сердца. hERG-канал представляет собой канал из семейства калиевых ионных каналов, первый представитель которых был идентифицирован в конце 1980-х на мутантной плодовой мушке Drosophila melanogaster (см. Jan, L.Y. and Jan, Y.N. (1990). A Superfamily of Ion Channels. Nature, 345(6277):672). Биофизические свойства hERG калиевого ионного канала описаны Sanguinetti, M.C., Jiang, C, Curran, M.E., and Keating, M.T. (1995). A Mechanistic Link Between an Inherited and an Acquired Cardiac Arrhythmia: HERG encodes the Ikr potassium channel. Cell, 81:299-307, and Trudeau, M.C., Warmke, J. W., Ganetzky, B., and Robertson, G.A. (1995). HERG, a Human Inward Rectifier in the Voltage-Gated Potassium Channel Family. Science, 269:92-95.

Ликвидация hERG, блокирующей активности, остается важным предметом рассмотрения при разработке любого нового лекарственного средства.

Предшествующий уровень техники

В EP 0474403 (Eli Lilly) описан класс производных 4-гидроксибензамида для лечения воспалительного заболевания кишечника.

В EP 0722723 (Eli Lilly) описан класс производных 4-гидроксибензамида для лечения рассеянного склероза.

В EP 0500336 (University of Colorado Foundation) описан класс производных 4-гидроксибензамида для лечения диабета I типа.

В WO 00/59867 (Pharmacor) описаны гидроксифенильные производные для применения в качестве ингибиторов интегразы ВИЧ.

В JP 09194450 (Fujirebio) описаны производные ортогидроксибензамида в качестве фармацевтических промежуточных соединений.

В EP 0486386 описаны замещенные производные бензоилпролина.

В WO 2005/012297 (Janssen) описан пиперидинамид 4-гидрокси-3-фторбензойной кислоты в качестве промежуточного соединения при получении соединений, имеющих модулирующую активность в отношении LTA4-гидролазы.

В WO 2005/000839 (Tanabe) описан морфолинамид 4-гидрокси-3-бромбензойной кислоты в качестве промежуточного соединения при получении ациламинобензофурановых соединений.

Применение производных гидроксибензамида в качестве синтетических промежуточных соединений описано в патенте США 5310951, JP 49010506, WO 01/36351, WO 98/45255 и WO 97/35999.

В EP 0347168 (Ono Pharmaceutical Co.) описаны паразамещенные фениловые эфиры пивалиновой кислоты в качестве ингибиторов эластазы. Одно конкретное соединение, описанное в данном патенте, представляет собой 3-гидрокси-4-[(N-метил-N-фенил)карбамоилфениловый эфир пивалиновой кислоты.

В EP 0353753 (Takeda) описаны соединения амидов замещенной бензойной кислоты, обладающие ингибирующей активностью в отношении глутаматного рецептора.

В патенте США 2005/0037922 (Bayer Cropscience) описаны различные гидроксированные диметиламиды и диэтиламиды бензойной кислоты в качестве средств сохранения сельскохозяйственных культур.

В WO 2005/009940 (Leo Pharma) описаны аминобензофеноновые соединения, которые, как указано, могут быть полезны при лечении воспалительных заболеваний и раковых заболеваний.

В WO 99/29705 (Glycomed et al.) описан класс соединений-гликомиметиков, имеющих ряд возможных применений, включая лечение рака. Одно соединение, специально описанное в WO 99/29705, представляет собой 2-(2-гидроксибензоил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту.

Сущность изобретения

Изобретение относится к соединениям, которые обладают Hsp90-ингибирующей или модулирующей активностью и которые, как предполагается, будут полезны при предотвращении или лечении болезненных состояний, опосредованных Hsp90. Так, например, предполагается, что соединения по изобретению могут быть полезны для облегчения или снижения случаев развития рака.

В первом аспекте, изобретение представляет соединение формулы (I):

или его соли, таутомеры, сольваты и N-оксиды;

где R¹ представляет собой гидроксигруппу или водород;

R² представляет собой гидроксигруппу; метоксигруппу или водород; при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² является гидроксигруппой;

R³ выбирают из атома водорода; галогена; циано; C_1-5 гидрокарбила и C_1-5 гидрокарбилокси; где C_1-5 гидрокарбильный и C_1-5 гидрокарбилокси фрагменты, каждый необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце;

R⁴ выбирают из атома водорода; группы -(Q)_n-R⁷, где n равно 0 или 1, и R⁷ представляет собой ациклическую C_1-5 гидрокарбильную группу или моноциклическую карбоциклическую или гетероциклическую группу, имеющую 3-7 атомов в кольце; галоген; циано; гидрокси; амино; и моно- или ди-C_1-5 гидрокарбиламино, где ациклическая C_1-5 гидрокарбильная группа и моно- и ди-C_1-5 гидрокарбиламинные фрагменты в каждом случае необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце;

или R³ и R⁴ вместе образуют моноциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо из 5-7 атомов в кольце;

R⁵ и R⁶ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют бициклическую гетероциклическую группу, имеющую 8-12 атомов в кольце, из которых до 5 атомов в кольце представляют собой гетероатомы, выбранные из кислорода, азота и серы; где бициклическая гетероциклическая группа необязательно замещена одним или несколькими заместителями R¹⁰;

R⁸ выбирают из атомов водорода и фтора; и

R¹⁰ выбирают из:

галогена;

гидрокси;

трифторметила;

циано;

нитро;

карбокси;

амино;

моно- или ди-C_{1-4 г}идрокарбиламино;

карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце; и

группы R^a-R^b,

где R^a представляет собой связь, O, CO, X¹C(X²), C(X²)X¹, X¹C(X²)X¹, S, SO, SO₂, NR^c, SO₂NR^c или NR^cSO₂; и

R^b выбирают из атома водорода; карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце; и C_1-12 гидрокарбила (такой как C_1-10 гидрокарбил), необязательно замещенного одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, галоген, циано, нитро, карбокси, амино, неароматического моно- или ди-C_1-8 гидрокарбиламино (например, моно- или ди-C_1-4 гидрокарбиламино), и карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце, и где один или несколько атомов углерода C_1-12 гидрокарбильной группы (или C_1-10 гидрокарбильной группы) могут быть необязательно заменены на O, S, SO, SO₂, NR^c, X¹C(X²), C(X²)X¹, X¹C(X²)X¹;

R^c выбирают из R^b, атома водорода и C_{1-4 г}идрокарбила; и

X¹ представляет собой O, S или NR^c и X² представляет собой=O,=S или=NR^c;

но исключая соединение, 2-(2-гидроксибензоил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту.

Изобретение, помимо прочего, также предоставляет:

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения при профилактике или лечении болезненного состояния, опосредованного Hsp90;

применение соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для производства лекарственного средства для профилактики или лечения болезненного состояния, опосредованного Hsp90;

способ профилактики или лечения болезненного состояния, опосредованного Hsp90, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения для облегчения или снижения случаев болезненного состояния, опосредованного Hsp90;

применение соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для производства лекарственного средства для облегчения или снижения случаев болезненного состояния, опосредованного Hsp90;

способ облегчения или снижения случаев болезненного состояния, опосредованного Hsp90, который включает введение субъекту, нуждающегося в этом, соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения при лечении заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего;

применение соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для производства лекарственного средства для лечения заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего;

способ лечения заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего, который включает введение млекопитающему соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, в количестве, эффективном для ингибирования аномального клеточного роста;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения для облегчения или снижения случаев заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего;

применение соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для производства лекарственного средства для облегчения или снижения случаев заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего;

способ для облегчения или снижения случаев заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего, который включает введение млекопитающему соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, в количестве, эффективном для ингибирования аномального клеточного роста;

способ лечения заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего, который включает введение млекопитающему соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb), или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, в количестве, эффективном для ингибирования активности Hsp90;

способ облегчения или снижения случаев заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего, который включает введение млекопитающему соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, в количестве, эффективном для ингибирования активности Hsp90;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения в качестве ингибитора Hsp90;

способ ингибирования Hsp90, который включает контактирование Hsp90 с Hsp90-ингибирующим соединением формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения при модулировании клеточного процесса (например, деления клетки) путем ингибирования активности Hsp90;

способ модулирования клеточного процесса (например, деления клетки) путем ингибирования активности Hsp90 с использованием соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения при профилактике или лечении болезненного состояния, как описано выше;

применение соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для производства лекарственного средства, где лекарственное средство предназначено для любого одного или нескольких из применений, определенных выше;

фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель;

фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель в форме, пригодной для орального введения;

фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель в форме, пригодной для парентерального введения, например, путем внутривенного (i.v.) введения;

фармацевтический композиция, содержащая соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель в форме, пригодной для внутривенного (i.v.) введения путем инъекции или инфузии;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения в медицине;

соединение, как описано выше, для любого из применений и способов, представленных выше, как описано в настоящем описании в других местах;

соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для применения при лечении или профилактике болезненного состояния у пациента, который был обследован и диагностирован как страдающий или находящийся в зоне риска заболевания или состояния, которое должно быть восприимчиво к лечению соединением, обладающим активностью в отношении Hsp90;

применение соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании, для производства лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или состояния у пациента, который был обследован и диагностирован как страдающий или находящийся в зоне риска заболевания или состояния, которое должно быть восприимчиво к лечению соединением, обладающим активностью в отношении Hsp90;

способ диагностики и лечения болезненного состояния, опосредованного Hsp90, который включает (i) обследование пациента для определения, является ли заболевание или состояние, которыми пациент страдает или может страдать, заболеванием или состоянием, которое будет восприимчивым к лечению соединением, обладающим активностью в отношении Hsp90; и (ii) где обнаружено, что заболевание или состояние, которым страдает пациент, таким образом, является восприимчивым, после введения пациенту соединения формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) или любых их подгрупп или примеров, как определено в настоящем описании.

Общие предпочтительные значения и определения

В данном разделе, как во всех других разделах данного описания, пока в контексте не указано иное, ссылки на соединение формулы (I) включают все подгруппы формулы (I), как определено в настоящем описании, включая формулы (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) и (VIIb), и термин 'подгруппы' включает все предпочтительные варианты, варианты осуществления примеры и конкретные соединения, определенные в настоящем описании.

Кроме того, ссылка на соединение формулы (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VIa), (VII), (VIIa) или (VIIb) и их подгрупп включает ионные формы, соли, сольваты, изомеры, таутомеры, N-оксиды, сложные эфиры, пролекарства, изотопы и их защищенные формы, как обсуждается ниже, предпочтительно соли, или таутомеры, или изомеры, или N-оксиды, или их сольваты, и, более предпочтительно, соли, или таутомеры, или N-оксиды, или их сольваты.

Следующие общие предпочтительные значения и определения следует применять к каждому из R¹-R⁸, R¹⁰, R^a, R^b, R^c, X¹ и X² и их различным подгруппам, подопределениям, примерам и вариантам осуществления, пока в контексте не указано иное.

Любые ссылки на формулу (I) в настоящем описании также означают любую подгруппу соединений в пределах формулы (I) и любые предпочтительные значения и их примеры, пока в контексте не указано иное.

Ссылки на "карбоциклические" и "гетероциклические" группы, используемые в настоящем описании, пока в контексте не указано иное, включают как ароматические, так и неароматические кольцевые системы. Так, например, термин "карбоциклические и гетероциклические группы" включает в пределах их объема ароматические, неароматические, ненасыщенные, частично насыщенные и полностью насыщенные карбоциклические и гетероциклические кольцевые системы. Как правило, такие группы могут быть моноциклическими или бициклическими и могут содержать, например, 3-12 атомов в кольце, более конкретно 5-10 атомов в кольце. Примерами моноциклических групп являются группы, содержащие 3, 4, 5, 6, 7, и 8 атомов в кольце, более конкретно от 3 до 7, например от 5 до 7, и предпочтительно 5 или 6 атомов в кольце. Примерами бициклических групп являются такие, которые содержат 8, 9, 10, 11 и 12 атомов в кольце, более конкретно, 9 или 10 атомов в кольце.

Используемый в настоящем описании термин "бициклический", относится к группам, которые имеют два кольца, соединенных вместе таким образом, что по меньшей мере один атом кольца задействован в обоих кольцах. Так, бициклическая группа может представлять собой конденсированное кольцо (два атома в кольце задействованы в обоих кольцах), спироциклическое (один атом кольца задействован в обоих кольцах) или мостиковое кольцо (три или более атома в кольце задействованы в обоих кольцах).

Карбоциклические или гетероциклические группы могут представлять собой арильные или гетероарильные группы, имеющие от 5 до 12 атомов в кольце, более конкретно, от 5 до 10 атомов в кольце. Термин "арил", используемый в настоящем описании, относится к карбоциклической группе, имеющей ароматический характер, и термин "гетероарил" используется в настоящем описании для обозначения гетероциклической группы, имеющей ароматический характер. Термины "арил" и "гетероарил" включают полициклические (например, бициклические) кольцевые системы, где один или несколько колец являются неароматическими, при условии, что по меньшей мере одно кольцо является ароматическим. В таких поликольцевых системах группа может быть присоединена через ароматическое кольцо или через неароматическое кольцо. Арильные или гетероарильные группы могут быть моноциклическими или бициклическими группами и могут являться незамещенными или замещены одним или несколькими заместителями, например одной или несколькими группами R¹⁰, как определено выше.

Термин "неароматическая группа" включает ненасыщенные кольцевые системы, не имеющие ароматического характера, частично насыщенные и полностью насыщенные карбоциклические и гетероциклические кольцевые системы. Термины "ненасыщенный" и "частично насыщенный" относятся к кольцам, где кольцевая структура(ы) содержит атомы, связанные более чем одной валентной связью, то есть кольцо содержит по меньшей мере одну кратную связь, например C=C, C=C или N=C связь. Термины "полностью насыщенный" и "насыщенный" относятся к кольцам, где нет кратных связей между атомами кольца. Насыщенные карбоциклические группы включают циклоалкильные группы, как определено ниже. Частично насыщенные карбоциклические группы включают циклоалкенильные группы, как определено ниже, например, циклопентенил, циклогептенил и циклооктенил. Следующим примером циклоалкенильной группы является циклогексенил.

Примерами гетероарильных групп являются моноциклические и бициклические группы, содержащие от пяти до двенадцати атомов в кольце, и, более конкретно, от пяти до десяти атомов в кольце. Гетероарильная группа может представлять собой, например, пятичленное или шестичленное моноциклическое кольцо или бициклическую структуру, образуемую из конденсированных пяти- и шестичленных колец или двух конденсированных шестичленных колец или, в качестве следующего примера, два конденсированных пятичленных кольца. Каждое кольцо может содержать приблизительно до четырех гетероатомов, обычно выбранных из азота, серы и кислорода. Обычно гетероарильное кольцо содержит до 4 гетероатомов, более конкретно до 3 гетероатомов, еще более конкретно до 2, например одиночный гетероатом. В одном варианте осуществления гетероарильное кольцо содержит по меньшей мере один атом азота кольца. Атомы азота в гетероарильных кольцах могут быть основными, как в случае имидазола или пиридина, или фактически лишенными основных свойств, как в случае индольного или пиррольного азота. Как правило, число основных атомов азота, присутствующих в гетероарильной группе, включая любые аминные заместители кольца, будет составлять менее чем пять.

Примеры пятичленных гетероарильных групп включают, но без ограничения, пиррольные, фурановые, тиофеновые, имидазольные, фуразановые, оксазольные, оксадиазольные, оксатриазольные, изоксазольные, тиазольные, изотиазольные, пиразольные, триазольные и тетразольные группы.

Примеры шестичленных гетероарильных групп включают, но без ограничения, пиридин, пиразин, пиридазин, пиримидин и триазин.

Бициклическая гетероарильная группа может представлять собой, например, группу, выбранную из:

a) бензольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце;

b) пиридинового кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце;

c) пиримидинового кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

d) пиррольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце;

e) пиразольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

f) пиразинового кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

g) имидазольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

h) оксазольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

i) изоксазольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

j) тиазольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

k) изотиазольного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1 или 2 гетероатома в кольце;

l) тиофенового кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце;

m) фураного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце;

n) циклогексильного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце; и

o) циклопентильного кольца, конденсированного с 5- или 6-членным кольцом, содержащим 1, 2 или 3 гетероатома в кольце.

Одна подгруппа бициклических гетероарильных групп состоит из групп (a)-(e) и (g)-(o) выше.

Конкретные примеры бициклических гетероарильных групп, содержащих пятичленное кольцо, конденсированное с другим пятичленным кольцом, включают, но без ограничения, имидазотиазол (например, имидазо[2,1-b]тиазол) и имидазоимидазол (например, имидазо[1,2-a]имидазол).

Конкретные примеры бициклических гетероарильных групп, содержащих шестичленное кольцо, конденсированное с пятичленным кольцом, включают, но без ограничения, бензофурановые, бензотиофеновые, бензимидазольные, бензоксазольные, изобензоксазольные, бензизоксазольные, бензотиазольные, бензоизотиазольные, изобензофурановые, индольные, изоиндольные, индолизиновые, индолиновые, изоиндолиновые, пуриновые (например, аденин, гуанин), индазольные, пиразолопиримидиновые (например, пиразоло[1,5-a]пиримидин), триазолопиримидиновые (например, [1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин), бензодиоксольные и пиразолопиридиновые (например, пиразоло[1,5-a]пиридин) группы.

Конкретные примеры бициклических гетероарильных групп, содержащих два конденсированных шестичленных кольца, включают, но без ограничения, хинолиновые, изохинолиновые, хромановые, тиохромановые, хроменовые, изохроменовые, изохромановые, бензодиоксановые, хинолизиновые, бензоксазиновые, бензодиазиновые, пиридопиридиновые, хиноксалиновые, хиназолиновые, циннолиновые, фталазиновые, нафтиридиновые и птеридиновые группы.

Одна подгруппа гетероарильных групп включает пиридинильные, пирролильные, фурильные, тиенильные, имидазолильные, оксазолильные, оксадиазолильные, оксатриазолильные, изоксазолильные, тиазолильные, изотиазолильные, пиразолильные, пиразинильные, пиридазинильные, пиримидинильные, триазинильные, триазолильные, тетразолильные, хинолинильные, изохинолинильные, бензофурильные, бензотиенильные, хроманильные, тиохроманильные, бензимидазолильные, бензоксазолильные, бензизоксазольные, бензотиазолильные и бензизотиазольные, изобензофурильные, индолильные, изоиндолильные, индолизинильные, индолинильные, изоиндолинильные, пуринильные (например, аденин, гуанин), индазолильные, бензодиоксолильные, хроменильные, изохроменильные, изохроманильные, бензодиоксанильные, хинолизинильные, бензоксазинильные, бензодиазинильные, пиридопиридинильные, хиноксалинильные, хиназолинильные, циннолинильные, фталазинильные, нафтиридинильные и птеридинильные группы.

Примеры полициклических арильных и гетероарильных групп, содержащих ароматическое кольцо и неароматическое кольцо, включают тетрагидронафталиновые, тетрагидроизохинолиновые, тетрагидрохинолиновые, дигидробензотиеновые, дигидробензофурановые, 2,3-дигидробензо[1.4]диоксиновые, бензо[1.3]диоксольные, 4,5,6,7-тетрагидробензофурановые, индолиновые и индановые группы.

Примеры карбоциклических арильных групп включают фенильные, нафтильные, инденильные и тетрагидронафтильные группы.

Примеры неароматических гетероциклических групп включают незамещенные или замещенные (одной или несколькими группами R¹⁰) гетероциклические группы, имеющие от 3 до 12 атомов в кольце, конкретно 4-12 атомов в кольце, и, более конкретно, от 5 до 10 атомов в кольце. Такие группы могут быть моноциклическими или бициклическими, например, и обычно имеют от 1 до 5 гетероатомов в кольце (более конкретно 1, 2, 3 или 4 гетероатомов в кольце), выбранных из азота, кислорода и серы.

Когда сера присутствует, она может, где позволяет природа соседних атомов и групп, существовать как -S-, -S(O)- или -S(O)₂-.

Гетероциклические группы могут содержать, например, фрагменты циклического простого эфира (например, как в тетрагидрофуране и диоксане), фрагменты циклического тиоэфира (например, как в тетрагидротиофене и дитиане), циклические аминные фрагменты (например, как в пирролидине), циклические амидные фрагменты (например, как в пирролидоне), фрагменты циклических тиоамидов, циклических тиоэфиров, циклических эфиров (например, как в бутиролактоне), циклических сульфонов (например, как в сульфолане и сульфолене), циклических сульфоксидов, циклические сульфонамидов и их комбинации (например, морфолин и тиоморфолин и его S-оксид и S,S-диоксид). Далее, примерами гетероциклических групп являются такие, которые содержат циклический фрагмент мочевины (например, как в имидазолидин-2-оне).

В одном подмножестве гетероциклических групп гетероциклические группы содержат фрагменты циклического простого эфира (например, как в тетрагидрофуране и диоксане), фрагменты циклического тиоэфира (например, как в тетрагидротиофене и дитиане), циклические аминные фрагменты (например, как в пирролидине), циклического судьфона (например, как в сульфолане и сульфолене), циклических сульфоксидов, циклических сульфонамидов и их комбинации (например, тиоморфолин).

Примеры моноциклических неароматических гетероциклических групп включают 5-, 6- и 7-членные моноциклические гетероциклические группы. Конкретные примеры включают морфолин, пиперидин (например, 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил и 4-пиперидинил), пирролидин (например, 1-пирролидинил, 2-пирролидинил и 3-пирролидинил), пирролидон, пиран (2H-пиран или 4H-пиран), дигидротиофен, дигидропиран, дигидрофуран, дигидротиазол, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, диоксан, тетрагидропиран (например, 4-тетрагидропиранил), имидазолин, имидазолидинон, оксазолин, тиазолин, 2-пиразолин, пиразолидин, пиперазин и N-алкилпиперазины, такие как N-метилпиперазин. Далее, примеры включают тиоморфолин и его S-оксид и S,S-диоксид (особенно тиоморфолин). Следующие примеры включают азетидин, пиперидон, пиперазон и N-алкилпиперидины, такие как N-метилпиперидин.

Одна предпочтительная подгруппа неароматических гетероциклических групп состоит из насыщенных групп, таких как азетидин, пирролидин, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, тиоморфолин-S,S-диоксид, пиперазин, N-алкилпиперазины и N-алкилпиперидины.

Другая подгруппа неароматических гетероциклических групп состоит из пирролидина, пиперидина, морфолина, тиоморфолина, тиоморфолин-S,S-диоксида, пиперазина и N-алкилпиперазинов, таких как N-метилпиперазин.

Одна особенная подгруппа гетероциклических групп состоит из пирролидина, пиперидина, морфолина и N-алкилпиперазинов (например, N-метилпиперазина) и необязательно тиоморфолина.

Примеры неароматических карбоциклических групп включают циклоалкановые группы, такие как циклогексильные и циклопентильные, циклоалкенильные группы, такие как циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил и циклооктенил, а также циклогексадиенил, циклооктатетраен, тетрагидронафтенил и декалинил.

Предпочтительные неароматические карбоциклические группы представляют собой моноциклические кольца и наиболее предпочтительно насыщенные моноциклические кольца.

Конкретными примерами являются трех-, четырех-, пяти- и шестичленные насыщенные карбоциклические кольца, например, необязательно замещенные циклопентильные и циклогексильные кольца.

Одна подгруппа неароматических карбоциклических групп включает незамещенные или замещенные (одной или несколькими группами R¹⁰) моноциклические группы и особенно насыщенные моноциклические группы, например циклоалкильные группы. Примеры таких циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил; более конкретно циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил, особенно циклогексил.

Далее примеры неароматических циклических групп включают мостиковые кольцевые системы, такие как бициклоалканы и азабициклоалканы, хотя такие мостиковые кольцевые системы являются, как правило, менее предпочтительными. Под "мостиковыми кольцевыми системами" понимаются кольцевые системы, в которых два кольца обобщены более чем двумя атомами; см. например, Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, Wiley Interscience, pages 131-133, 1992. Примеры мостиковых кольцевых систем включают бицикло[2.2.1]гептан, азабицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан, азабицикло[2.2.2]октан, бицикло[3.2.1]октан и азабицикло[3.2.1]октан. Конкретным примером мостиковой кольцевой системы является 1-азабицикло[2.2.2]октан-3-ильная группа.

Если в данном описании приводится ссылка на карбоциклические и гетероциклические группы, карбоциклическое или гетероциклическое кольцо может, пока в контексте не указано иное, являться незамещенным или замещено одним или несколькими группами заместителей R¹⁰, выбранными из галогена, гидрокси, трифторметила, циано, нитро, карбокси, амино, моно- или ди-C_1-4 гидрокарбиламино, карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце; группы R^a-R^b, где R^a представляет собой связь, O, CO, X¹C(X²), C(X²)X¹, X¹C(X²)X¹, S, SO, SO₂, NR^c, SO₂NR^c или NR^cSO₂; и R^b выбирают из атома водорода, карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце, и C_1-12 гидрокарбильной группы (такой как C_1-10 гидрокарбильная группа), необязательно замещенной одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, галогена, циано, нитро, карбокси, амино, неароматического моно- или ди-C_1-8 гидрокарбиламино (например, моно- или ди-C_{1-4 г}идрокарбиламино), карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце, и где один или несколько атомов углерода C_1-12 гидрокарбильной группы (или C_1-10 гидрокарбильной группы) могут быть необязательно заменены O, S, SO, SO₂, NR^c, X¹C(X²), C(X²)X¹ или X¹C(X²)X¹;

R^c выбирают из R^b, атома водорода и C_{1-4 г}идрокарбила; и

X¹ представляет собой O, S или NR^c, и X² представляет собой=O,=S или=NR^c.

Если группа заместителей R¹⁰ содержит или включает карбоциклическую или гетероциклическую группу, указанная карбоциклическая или гетероциклическая группа может быть незамещенной или может быть сама замещена одним или несколькими дополнительными группами заместителей R¹⁰. В одной подгруппе соединений формулы (I) такие дополнительные группы заместителей R¹⁰ могут включать карбоциклические или гетероциклические группы, которые, как правило, сами не являются дополнительно замещенными. В другой подгруппе соединений формулы (I), указанные дополнительные заместители не включают карбоциклические или гетероциклические группы, но, с другой стороны, выбраны из групп, перечисленных выше при определении R¹⁰.

Заместители R¹⁰ могут быть выбраны таким образом, что они содержат не более чем 20 неводородных атомов, например не более чем 15 неводородных атомов, например, не более чем 12, или 11, или 10, или 9, или 8, или 7, или 6, или 5 неводородных атомов.

Если карбоциклические и гетероциклические группы имеют пару заместителей на одних и тех же или соседних атомах в кольце, два заместителя могут быть связаны таким образом, что образуют циклическую группу. Так, две соседних группы R¹⁰, вместе с атомом углерода или гетероатомом, к которому они присоединены, могут образовывать 5-членное гетероарильное кольцо или 5- или 6-членное неароматическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, где указанные гетероарильные и гетероциклические группы содержат до 3 гетероатомов в кольце, выбранных из N, O и S. Например, соседние пары заместителей на соседних атомах углерода кольца могут быть связаны через один или несколько гетероатомов и необязательно замещены алкиленовыми группами с образованием конденсированной окса-, диокса-, аза-, диаза- или оксаазациклоалкильной группы.

Примеры таких связанных замещающих групп включают:

Примеры галогенных заместителей включают фтор, хлор, бром и йод. Фтор и хлор являются особенно предпочтительными.

В определении соединений формулы (I) выше и при применении в дальнейшем, термин "гидрокарбил" является общим обозначением, охватывающим алифатические, алициклические и ароматические группы, имеющие полностью углеродный скелет и состоящие из углерода и атомов водорода, если не указано иначе.

В некоторых случаях, как определено в настоящем описании, один или несколько атомов углерода, составляющих углеродный скелет, могут быть заменены определенными атомами или группами атомов.

Примеры гидрокарбильных групп включают алкильные, циклоалкильные, циклоалкенильные, карбоциклические арильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкилалкильные, циклоалкенилалкильные и карбоциклические аралкильные, аралкенильные и аралкинильные группы. Такие группы могут быть незамещенными или, где указывается, замещены одним или несколькими заместителями, как определено в настоящем описании. Примеры и предпочтительные значения, описанные ниже, применяются к каждой из гидрокарбильных замещающих групп или гидрокарбилсодержащих замещающих групп, описанных в различных определениях заместителей для соединений формулы (I), пока в контексте не указано иное.

Префикс "C_x-y-" (где x и y представляют собой целые числа), используемый в настоящем описании, относится к числу атомов углерода в данной группе. Так, C_1-4 гидрокарбильная группа содержит от 1 до 4 атомов углерода, и C_3-6циклоалкильная группа содержит от 3 до 6 атомов углерода, и так далее.

Термин "ациклический гидрокарбил" (например, как в термине "ациклический C_1-5 гидрокарбил"), используемый в настоящем описании, относится к нециклическим гидрокарбильным группам и, в частности, к алкильным, алкенильным и алкинильным группам, как определено выше.

Термин "моно- или ди-C_{1-5 г}идрокарбиламино", используемый в настоящем описании, относится к монозамещенной или дизамещенной аминогруппе, несущей или одну, или две гидрокарбильных замещающих групп, так что каждая содержит от 1 до 5 атомов углерода.

Предпочтительные неароматические гидрокарбильные группы представляют собой насыщенные группы, такие как алкильные и циклоалкильные группы.

Как правило, в качестве примера, гидрокарбильные группы могут иметь до десяти атомов углерода (и более конкретно до восьми атомов углерода), пока в контексте не указано иное. В пределах подмножества гидрокарбильных групп, имеющих 1-10 атомов углерода, конкретными примерами являются C_1-8 гидрокарбильные группы или C_1-6 гидрокарбильные группы, такие как C_1-4 гидрокарбильные группы (например, C_1-3 гидрокарбильные группы или C_1-2 гидрокарбильные группы или C_2-3 гидрокарбильные группы или C_2-4 гидрокарбильные группы), специфические примеры имеют любую индивидуальную величину или комбинацию величин, выбранных из C₁, C₂, C₃, C₄, C₅, C₆, C₇, C₈, C₉ и C₁₀ гидрокарбильных групп.

Термин "алкил" относится к алкильным группам как с прямой, так и разветвленной цепью. Примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, 2-пентил, 3-пентил, 2-метил бутил, 3-метилбутил и н-гексил, и их изомеры. В пределах подмножества алкильных групп, имеющих 1-8 атомов углерода, конкретными примерами являются алкильные группы, такие как C_1-4алкильные группы (например, C_1-3алкильные группы, или C_1-2алкильные группы, или C_2-3алкильные группы, или C_2-4алкильные группы).

Примерами циклоалкильных групп являются такие, которые получены из циклопропана, циклобутана, циклопентана, циклогексана и циклогептана. В пределах подмножества циклоалкильных групп циклоалкильная группа имеет от 3 до 10 атомов углерода, более конкретно 3-8 атомов углерода, частными примерами являются C_3-6циклоалкильные группы.

Примеры алкенильных групп включают, но без ограничения, этенил (винил), 1-пропенил, 2-пропенил (аллил), изопропенил, бутенил, бута-1,4-диенил, пентенил и гексенил. В пределах подгрупп алкенильных групп алкенильная группа имеет от 2 до 10 атомов углерода, более конкретно от 2 до 8 атомов углерода, частными примерами являются C_2-6алкенильные группы, такие как C_2-4алкенильные группы.

Примеры циклоалкенильных групп включают, но без ограничения, циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклопентадиенил и циклогексенил. В пределах подмножества циклоалкенильных групп циклоалкенильные группы имеют от 3 до 10 атомов углерода, более конкретно 3-8 атомов углерода, и частные примеры представляют собой C_3-6циклоалкенильные группы.

Примеры алкинильных групп включают, но без ограничения, этинил и 2-пропинил (пропаргил) группы. В пределах подмножества алкинильные группы имеют от 2 до 10 атомов углерода, более конкретно от 2 до 8 атомов углерода, частными примерами являются C_2-6алкинильные группы, такие как C_2-4алкинильные группы.

Примеры карбоциклических арильных групп включают замещенные и незамещенные фенильные группы.

Примеры циклоалкилалкильных, циклоалкенилалкильных, карбоциклических аралкильных, аралкенильных и аралкинильных групп включают фенетильные, бензильные, стирильные, фенилэтинильные, циклогексилметильные, циклопентилметильные, циклобутилметильные, циклопропилметильные и циклопентенилметильные группы.

Термины C_1-12 гидрокарбил, C_1-10 гидрокарбил и C_1-8 гидрокарбил, используемые в настоящем описании, включают алкильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкильные, циклоалкенильные, фенильные, бензильные и фенилэтильные группы, где предпочтительные значения и примеры каждой из вышеуказанных групп определены выше. В пределах данного определения отдельные гидрокарбильные группы представляют собой алкильные, циклоалкильные, фенильные, бензильные и фенилэтильные (например, 1-фенилэтильные или 2-фенилэтильные)группы, одна подгруппа гидрокарбильных групп состоит из алкильных и циклоалкильных групп и, в частности, C_1-4алкильных и циклоалкильных групп, таких как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, циклопропил и циклобутил.

Термин C_1-4 гидрокарбил, используемый в настоящем описании, включает алкильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкильные и циклоалкенильные группы, где предпочтительные значения и примеры вышеуказанных групп определены выше. В пределах этого определения отдельные C_1-4 гидрокарбильные группы представляют собой алкильные и циклоалкильные группы, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, циклопропил и циклобутил.

Когда присутствует и где утверждается, гидрокарбильная группа может быть необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, алкокси, карбокси, галоген, циано, нитро, амино, моно- или ди-C_{1-4 г}идрокарбиламино, и моноциклических или бициклических карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 (конкретно 3-10 и более конкретно 5-10) атомов в кольце. Предпочтительные заместители включают галоген, такой как фтор. Так, например, замещенная гидрокарбильная группа может быть частично фторированной или перфторированной группой, такой как дифторметил или трифторметил. В одном варианте осуществления предпочтительные заместители включают моноциклические карбоциклические и гетероциклические группы, имеющие 3-7 атомов в кольце, более конкретно 3, 4, 5 или 6 атомов в кольце.

Если указано, один или несколько атомов углерода гидрокарбильной группы могут быть необязательно заменены O, S, SO, SO₂, NR^c, X¹C(X²), C(X²)X¹ или X¹C(X²)X¹ (или их подгруппой), где X¹ и X² определены выше, при условии, что по меньшей мере один атом углерода гидрокарбильной группы остается. Например, 1, 2, 3 или 4 атома углерода гидрокарбильной группы могут быть заменены одним из перечисленных атомов или групп, и заменяющие атомы или группы могут быть одинаковыми или различными. Как правило, число замененных линейных или скелетных атомов углерода соответствует числу линейных или скелетных атомов в группе, замещающей их. Примеры групп, в которых один или несколько атомов углерода гидрокарбильной группы заменены путем замены атома или группы, как определено выше, включают простые эфиры и простые тиоэфиры (C заменен O или S), амиды, эфиры, тиоамиды и тиоэфиры (C-C заменено X¹C(X²) или C(X²)X¹), сульфоны и сульфоксиды (C заменен SO или SO₂), амины (C заменен NR^c). Следующие примеры включают мочевины, карбонаты и карбаматы (C-C-C заменены X¹C(X²)X¹).

Если аминогруппа имеет два гидрокарбильных заместителя, они могут, вместе с атом азота, к которому они присоединены, и необязательно с другим гетероатомом, таким как азот, сера или кислород, быть связаны с образованием циклической структуры из 4-7 атомов в кольце, более конкретно 5-6 атомов в кольце.

Термин "азациклоалкил", используемый в настоящем описании, относится к циклоалкильной группе, в которой один из атомов в кольце углерода был заменен атомом азота. Так, примеры азациклоалкильных групп включают пиперидин и пирролидин. Термин "оксоциклоалкил", используемый в настоящем описании, относится к циклоалкильной группе, в которой один из атомов углерода в кольце заменен атомом кислорода. Так, примеры оксоциклоалкильных групп включают тетрагидрофуран и тетрагидропиран. Аналогичным образом, термины "диазациклоалкил", "диоксоциклоалкил" и "азаоксоциклоалкил" относятся, соответственно, к циклоалкильным группам, в которых два атома в кольце углерода были замещены двумя атомами азота, или двумя атомами кислорода, или одним атомом азота и одним атомом кислорода. Так, в окса-C_4-6циклоалкильной группе, присутствует от 3 до 5 атомов углерода в кольце и атом кислорода в кольце. Например, оксоциклогексильная группа представляет собой тетрагидропиранильную группу.

Определение "R^a-R^b", используемое в настоящем описании, или в отношении заместителей, присутствующих в карбоциклическом или гетероциклическом фрагменте, или в отношении других заместителей, присутствующих в других положениях соединений формулы (I), включает, помимо прочего, соединения, где R^a выбирают из связи, O, CO, OC(O), SC(O), NR^cC(O), OC(S), SC(S), NR^cC(S), OC(NR^c), SC(NR^c), NR^cC(NR^c), C(O)O, C(O)S, C(O)NR^c, C(S)O, C(S)S, C(S)NR^c, C(NR^c)O, C(NR^c)S, C(NR^c)NR^c, OC(O)O, SC(O)O, NR^cC(O)O, OC(S)O, SC(S)O, NR^cC(S)O, OC(NR^c)O, SC(NR^c)O, NR^cC(NR^c)O, OC(O)S, SC(O)S, NR^cC(O)S, OC(S)S, SC(S)S, NR^cC(S)S, OC(NR^c)S, SC(NR^c)S, NR^cC(NR^c)S, OC(O)NR^c, SC(O)NR^c, NR^cC(O)NR^c, OC(S)NR^c, SC(S)NR^c, NR^cC(S)NR^c, OC(NR^c)NR^c, SC(NR^c)NR^c, NR^cC(NR^c)NR^c, S, SO, SO₂, NR^c, SO₂NR^c и NR^cSO₂, где R^c определен выше.

Фрагмент R^b может представлять собой водород или он может представлять собой группу, выбранную из карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих от 3 до 12 атомов в кольце (конкретно 3-10 и более конкретно от 5 до 10), и C_1-8 гидрокарбильной группы, необязательно замещенной, как определено выше. Примеры гидрокарбильных, карбоциклических и гетероциклических групп описаны выше.

Когда R^a представляет собой O и R^b представляет собой C_1-10 гидрокарбильную группу, R^a и R^b вместе образуют гидрокарбилокси группу. Предпочтительные гидрокарбилокси группы включают насыщенную гидрокарбилокси, такую как алкокси (например, C_1-6алкокси, более конкретно C_1-4алкокси, такую как этокси и метокси, особенно метокси), циклоалкокси (например, C_3-6циклоалкокси, такую как циклопропилокси, циклобутилокси, циклопентилокси и циклогексилокси) и циклоалкилалкокси (например, C_3-6циклоалкил-C_1-2алкокси, такую как циклопропилметокси).

Гидрокарбилоксигруппы могут быть замещены различными заместителями, как определено в настоящем описании. Например, алкоксигруппы могут быть замещены галогеном (например, как в дифторметокси и трифторметокси), гидрокси (например, как в гидроксиэтокси), C_1-2алкокси (например, как в метоксиэтокси), гидрокси-C_1-2алкильной (как в гидроксиэтоксиэтокси) или циклической группой (например, циклоалкильной группой или неароматической гетероциклической группой, как определено выше). Примерами алкоксигрупп, несущих неароматическую гетероциклическую группу в качестве заместителя, являются такие, где гетероциклическая группа является насыщенным циклическим амином, таким как морфолин, пиперидин, пирролидин, пиперазин, C_1-4алкилпиперазины, C_3-7циклоалкилпиперазины, тетрагидропиран или тетрагидрофуран; и алкоксигруппа представляет собой C_1-4алкоксигруппу, более конкретно C_1-3алкоксигруппу, такую как метокси, этокси или н-пропокси.

Алкоксигруппы могут быть замещены моноциклической группой, такой как пирролидин, пиперидин, морфолин и пиперазин, и их N-замещенные производные, такие как N-бензил, N-C_1-4ацил и N-C_1-4алкоксикарбонил. Отдельные примеры включают пирролидинoэтокси, пиперидиноэтокси и пиперазиноэтокси.

Когда R^a представляет собой связь и R^b представляет собой C_{1-10 г}идрокарбильную группу, примеры гидрокарбильных групп R^a-R^b определены выше. Гидрокарбильные группы могут быть насыщенными группами, такими как циклоалкил и алкил, и конкретные примеры таких групп включают метил, этил и циклопропил. Гидрокарбильные (например, алкильные) группы могут быть замещены различными группами и атомами, как определено в настоящем описании. Примеры замещенных алкильных групп включают алкильные группы, замещенные одним или несколькими атомами галогена, такими как фтор и хлор (конкретные примеры включают бромэтил, хлорэтил и трифторметил) или гидрокси (например, гидроксиметил и гидроксиэтил), C_1-10ацилокси (например, ацетоксиметил и бензилоксиметил), амино и моно- и диалкиламино (например, аминоэтил, метиламиноэтил, диметиламинометил, диметиламиноэтил и трет-бутиламинометил), алкокси (например, C_1-2алкокси, такую как метокси, как в метоксиэтиле) и циклические группы, такие как циклоалкильные группы, арильные группы, гетероарильные группы и неароматические гетероциклические группы, как определено выше.

Конкретными примерами алкильных групп, замещенных циклической группой, являются такие, где циклическая группа представляет собой насыщенный циклический амин, такой как морфолин, пиперидин, пирролидин, пиперазин, C_1-4алкилпиперазины, C_3-7циклоалкилпиперазины, тетрагидропиран или тетрагидрофуран; и алкильная группа представляет собой C_1-4алкильную группу, более конкретно C_1-3алкильную группу, такую как метил, этил или н-пропил. Специфические примеры алкильных групп, замещенных циклической группой, включают пирролидинoметил, пирролидинoпропил, морфолинометил, морфолиноэтил, морфолинопропил, пиперидинилметил, пиперазинометил и их N-замещенные формы, как определено выше.

Конкретные примеры алкильных групп, замещенных арильными группами и гетероарильными группами, включают бензильные и пиридинилметильные группы.

Когда R^a представляет собой SO₂NR^c, R^b может представлять собой, например, водород или необязательно замещенную C_{1-8 г}идрокарбильную группу, или карбоциклическую или гетероциклическую группу. Примеры R^a-R^b, где R^a представляет собой SO₂NR^c, включают аминосульфонильные, C_1-4алкиламиносульфонильные и ди-C_1-4алкиламиносульфонильные группы, и сульфонамиды, образуемые из циклической аминогруппы, такой как пиперидин, морфолин, пирролидин или необязательно N-замещенного пиперазина, такого как N-метилпиперазин.

Примеры групп R^a-R^b, где R^a представляет собой SO₂, включают алкилсульфонильные, гетероарилсульфонильные и арилсульфонильные группы, особенно моноциклические арильные и гетероарильные сульфонильные группы. Конкретные примеры включают метилсульфонил, фенилсульфонил и толуолсульфонил.

Когда R^a представляет собой NR^c, R^b может представлять собой, например, водород или необязательно замещенную C_1-10 гидрокарбильную группу, или карбоциклическую или гетероциклическую группу. Примеры R^a-R^b, где R^a представляет собой NR^c, включают амино, C_1-4алкиламино (например, метиламино, этиламино, пропиламино, изопропиламино, трет-бутиламино), ди-C_1-4алкиламино (например, диметиламино и диэтиламино) и циклоалкиламино (например, циклопропиламино, циклопентиламино и циклогексиламино).

Конкретные варианты осуществления и предпочтительные значения для R ¹ -R ¹⁰

R ¹ и R ²

R¹ представляет собой гидроксигруппу или водород; и R² представляет собой гидроксигруппу, метокси или водород; при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² является гидроксигруппой.

Предпочтительно, R¹ представляет собой гидроксигруппу или водород; и R² представляет собой гидроксигруппу или водород; при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² является гидроксигруппой.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой гидроксигруппу и R² представляет собой атом водорода или метокси, предпочтительно атом водорода.

В другом варианте осуществления R¹ представляет собой атом водорода и R² является гидроксигруппой. В следующем варианте осуществления R¹ представляет собой гидроксигруппу и R² представляет собой гидроксигруппу или метокси.

В предпочтительном варианте осуществления R¹ и R² оба представляют собой гидроксигруппу.

R ⁸

R⁸ выбирают из атома водорода и фтора. Предпочтительно R⁸ представляет собой атом водорода.

R ³

R³ выбирают из атома водорода, галогена, циано, C_1-5 гидрокарбила и C_1-5 гидрокарбилокси; где C_1-5 гидрокарбил и C_1-5 гидрокарбилокси фрагменты, каждый необязательно, замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце.

В одной подгруппе соединений R³ выбирают из атома водорода, галогена, циано, C_1-5 гидрокарбила и C_1-5 гидрокарбилокси; где C_1-5 гидрокарбильные фрагменты в каждом случае необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси и амино.

В другой подгруппе соединений R³ выбирают из галогена (например, хлора или брома), C_1-5алкила и C_3-4циклоалкила.

Более конкретно, R³ выбирают из атома водорода, хлора, C_1-5 гидрокарбила и C_1-5 гидрокарбилокси.

Отдельные группы R³ включают атом водорода, C_1-5алкильные, C_2-5алкенильные и C_3-4циклоалкильные группы, предпочтительно вторичные алкильные и алкенильные группы, такие как изопропил, втор-бутил, трет-бутил, 1,2-диметилаллил и 1,2-диметилпропил; или циклоалкильные группы, такие как циклопропил.

Следующая подгруппа заместителей R³ состоит из C_1-5алкильных, C_2-5алкенильных и C_3-4циклоалкильных групп, предпочтительно вторичных алкильных и алкенильных групп, таких как изопропил, втор-бутил, 1,2-диметилаллил и 1,2-диметилпропил; или циклоалкильных групп, таких как циклопропил.

Когда только один из R¹ и R² представляет собой гидроксигруппу, R³ может быть отличным от водорода.

В одном особенном варианте осуществления R¹ и R² оба представляют собой гидрокси и R³ представляет собой атом водорода.

В следующем конкретном варианте осуществления R³ выбирают из изопропила и трет-бутила.

В одном общем варианте осуществления R³ отличен от галогена.

В другом общем варианте осуществления R³ может быть отличен от фтора.

В следующем общем варианте осуществления R³ может быть отличен от фтора или метокси.

R ⁴

В одном варианте осуществления R⁴ выбирают из атома водорода; группы -(O)_n-R⁷, где n равно 0 или 1 и R⁷ представляет собой ациклическую C_1-5 гидрокарбильную группу или моноциклическую карбоциклическую или гетероциклическую группу, имеющую 3-7 атомов в кольце; галогена; циано; гидрокси; амино и моно- или ди-C_{1-5 г}идрокарбиламино, где ациклическая C_1-5 гидрокарбильная группа и моно- и ди-C_1-5 гидрокарбиламино фрагменты в каждом случае необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галоген, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильная и гетероарильная группы имеют 5-12 атомов в кольце.

В одной подгруппе соединений, R⁴ выбирают из атома водорода; группы -(O)_n-R⁷, где n равно 0 или 1 и R⁷ представляет собой ациклическую C_{1-6 г}идрокарбильную группу или моноциклическую карбоциклическую или гетероциклическую группу, имеющую 3-7 атомов в кольце; галоген; циано; гидрокси; амино; и моно- или ди-C_1-5 гидрокарбиламино, где C_1-5 гидрокарбильный фрагмент в каждом случае необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси и аминогруппы.

В пределах данной подгруппы, R⁴ более конкретно выбирают из водорода, метокси, галогена (например, фтора или хлора), циано; гидрокси, амино и C_3-6циклоалкила.

Более конкретно, R⁴ может быть выбран из подгруппы R^4a, где подгруппа R^4a состоит из атома водорода, метокси, фтора и хлора.

Предпочтительно R⁴ представляет собой атом водорода.

В другом варианте осуществления R³ и R⁴ вместе образуют карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, имеющее 5-7 атомов в кольце. Карбоциклические и гетероциклические группы могут быть любыми из групп, перечисленных выше в разделе «Общие предпочтительные значения и определения», и одна конкретная группа представляет собой группу, в которой R³ и R⁴ вместе с фенильным кольцом образуют дигидробензофурановую группу.

Конкретные примеры фенильного кольца, содержащего фрагменты R¹, R², R³ и R⁴, представлены в таблице 1. Место присоединения к карбонильной группе указано посредством звездочки.

Таблица 1

В одном варианте осуществления фенильный фрагмент выбирают из групп A1-A21.

В другом варианте осуществления фенильный фрагмент выбирают из групп A1-A18.

Предпочтительные фенильные фрагменты включают группы A5, A7, All, A13, A14, A15, A16, A17 и A18.

Особенно предпочтительные фенильные фрагменты представляют собой A5, A7, A13, A14 и A17.

Особенно предпочтительные фенильные фрагменты представляют собой A1 и A13.

Один особенно предпочтительный фенильный фрагмент представляет собой группу A13.

R ⁵ и R ⁶

R⁵ и R⁶ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют бициклическую гетероциклическую группу, имеющую до 12 атомов в кольце, из которых до 5 атомов в кольце представляют собой гетероатомы, выбранные из кислорода, азота и серы. Бициклические группы могут быть любыми из групп, перечисленных выше в разделе «Общие предпочтительные значения и определения» или перечисленных ниже в разделе «Особенные и предпочтительные подгруппы», и такие группы могут быть незамещены или замещены одним или несколькими заместителями R¹⁰, как определено выше.

Бициклическая гетероциклическая группа обычно представляет собой конденсированную циклическую бициклическую группу или спироциклическую группу и более конкретно представляет собой конденсированную циклическую бициклическую группу. Конкретные конденсированные кольцевые системы, представляющие интерес в контексте изобретения, представляют собой 5.6- и 6.6-конденсированные кольцевые системы. В бициклических гетероциклических группах, одно из колец может представлять собой гетероциклическое кольцо, и другое может представлять собой карбоциклическое кольцо, или оба кольца могут быть гетероциклическими.

В одой подгруппе соединений одно их колец бициклической гетероциклической группы является неароматическим, и другое является ароматическим. Предпочтительно, атом азота группы NR⁵R⁶ образует часть неароматического кольца. Конкретными примерами таких групп являются дигидроиндольные, дигидроизоиндольные, тетрагидрохинолиновые и тетрагидроизохинолиновые группы.

Более конкретными примерами таких групп являются дигидроиндольные, дигидроизоиндольные, тетрагидрохинолиновые и тетрагидроизохинолиновые группы, но в которых тетрагидроизохинолиновая группа не несет замещающих групп в ее неароматическом кольце.

Бициклические гетероциклические кольца необязательно замещены одним или несколькими группами заместителей R¹⁰, как определено выше.

В одном варианте осуществления бициклическое гетероциклическое кольцо замещено 1, 2 или 3 группами заместителей R¹⁰, как определено выше.

В другом варианте осуществления бициклическое гетероциклическое кольцо замещено 1 или 2 группами заместителей R¹⁰, как определено выше.

Группа заместителей или группы R¹⁰ могут быть присоединены или к одному, или к обоим из двух колец, образующих бициклическую гетероциклическую группу. В одном варианте осуществления кольцо, содержащее атом азота группы NR⁵R⁶, не имеет каких-либо заместителей R¹⁰. В другом варианте осуществления кольцо, содержащее атом азота группы NR⁵R⁶, имеет заместитель R¹⁰, но этот заместитель отличен от группы карбоновой кислоты.

В одой подгруппе соединений бициклическая гетероциклическая группа является незамещенной или замещена одним, двумя или тремя (предпочтительно одним или двумя) заместителями, выбранными из группы R¹⁰, состоящий из галогена, гидрокси, амино и группы R^a-R^b, где R^a выбирают из связи, O, CO, C(O)O, C(O)NR^c, NR^cC(O), NR^cC(O)O, NR^c. SO, SO₂, SONR^c и SO₂NR^c; и R^b выбирают из атома водорода; карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих 5 или 6 атомов в кольце; и C_1-10 гидрокарбила (например, C_1-8 гидрокарбила, такого как C_1-8алкил или C_3-7циклоалкил), необязательно замещенного одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, амино, неароматического моно- или ди-C_1-8 гидрокарбиламино, (например, моно- или ди-C_1-4 гидрокарбиламино), карбокси, и карбоциклических и гетероциклических групп, имеющих 3-7 атомов в кольце, и в которых один или несколько атомов углерода в C_1-8 гидрокарбильной группе могут быть необязательно заменены O, S, C(O)O, C(O)NR^c или NR^c.

В пределах данной подгруппы соединений и ее подгрупп, предпочтительных значений и примеров, где утверждается, что один или несколько атомов углерода в C_1-8 гидрокарбильной группе могут быть необязательно заменены O, S, C(O)O, C(O)NR^c или NR^c, сложные эфирные и амидные группы могут быть ориентированы в том и другом направлении, пока не указано иное.

В вышеуказанных подгруппах, когда R^b представляет собой карбоциклическую или гетероциклическую группу, карбоциклическая или гетероциклическая группа может быть замещена одним или несколькими заместителями R¹⁰, как определено выше. Например, когда R^b представляет собой карбоциклическую или гетероциклическую группу, карбоциклическая или гетероциклическая группа может быть замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из CO₂R¹⁴, где R¹⁴ представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

C_1-4алкила, необязательно замещенного гидрокси или C_1-2алкокси;

C_1-4алкокси, необязательно замещенного гидрокси или C_1-2алкокси; или

группы [sol], CH₂[sol], C(O)[sol], OCH₂CH₂[sol] или OCH₂CH₂CH₂[sol], где [sol] является таким, как определено ниже.

В более конкретной подгруппе бициклическая гетероциклическая группа является незамещенной или замещена одним, двумя или тремя (предпочтительно одним или двумя) заместителями, выбранными из группы R^10b, состоящей из галогена, OH, NH₂, CH₂OH, CH₂NH₂, O-C_1-6алкила, NH-C_1-6алкила, арила, гетероарила, C_3-7циклоалкила, гетероциклила, O-гетероарила, O-C_3-7циклоалкила, O-гетероциклоалкила, C(=O)C_1-6алкила, C(=O)OC_1-6алкила, C(=O)NH₂, C(=O)NHC_1-6алкила, C(=О)N(C_1-6алкил)₂, NH(C_1-6алкил), N(C_1-6алкил)₂, NC(=О)C_1-6алкила, C₆-арила, OC₆арила, C(=O)C₆арила, C(=O)OC₆арила, C(=О)NH₂, C(=O)NHC₆арила, C(=O)N(C₆арил)₂, NH(C₆арил), N(C₆арил)₂, NC(=O)C₆арила, C_5-6 гетероциклила, OC_5-6 гетероциклила, C(=O)C_5-6 гетероциклила, C(=O)OC_5-6 гетероциклила, C(=O)NHC_5-6 гетероциклила, C(=О)N(C_5-6 гетероциклил)₂, NH(C_5-6 гетероциклил), N(C_5-6 гетероциклил)₂, NC(=О)C_5-6 гетероциклила, C(=О)NHC_1-6алкила, C_5-6арила, S(=О)C_1-6алкила, S(=О)N-C_1-6алкила и SO₂N-C_1-6алкила; и группы [sol], CH₂[sol] или OCH₂CH₂[sol], где [sol] выбирают из следующих групп:

В другой подгруппе соединений бициклическое кольцо является незамещенным или замещено 1, 2 или 3 (например, 1 или 2, например, 1) группами R^10c, где R^10c представляет собой группу [sol], CH₂[sol] или OCH₂CH₂[sol], где [sol] выбирают из следующих групп:

и где (i) R^10c необязательно дополнительно выбирают из группы OCH₂CH₂CH₂[sol] и/или (ii) [sol] дополнительно выбирают из NHR¹¹, где R¹¹ представляет собой COR¹² или R¹², и R¹² представляет собой C_1-4алкил, арил или арил-C_1-4алкил.

В другой подгруппе соединений бициклическое кольцо является незамещенным или замещено одним или двумя заместителями R^10сс, где R^10cc выбирают из:

галогена;

CO₂R¹⁴, где R¹⁴ представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

C_1-4алкила, необязательно замещенного гидрокси или C_1-2алкокси;

C_1-4алкокси, необязательно замещенного гидрокси или C_1-2алкокси; или

группы [sol], CH₂[sol], C(O)[sol], OCH₂CH₂[sol] или OCH₂CH₂CH₂[sol], где [sol] выбирают из следующих групп:

где X⁴ представляет собой NH или O, m равно 0 или 1, n равно 1, 2 или 3, R¹¹ представляет собой атом водорода, COR¹², C(O)OR¹² или R¹²; R¹² представляет собой C_1-6алкил, C_3-6циклоалкил, арил, арил-C_1-6алкил или CH₂R¹⁵; и R¹⁵ выбирают из атома водорода, C_1-6алкила, C_3-6циклоалкила, гидрокси-C_1-6алкила, пиперидина, N-C_1-6алкилпиперазина, пиперазина, морфолина, COR¹³ или C(O)OR¹³; и R¹³ представляет собой C_1-6алкил.

В следующей подгруппе соединений бициклическое кольцо является незамещенным или замещено одним или двумя заместителями R^10ccc, где R^10ccc выбирают из:

группы [sol] или CH₂[sol], где [sol] выбирают из следующих групп:

где X⁴ представляет собой NH или O, m равно 0 или 1, n равно 1, 2 или 3, R¹¹ представляет собой атом водорода, COR¹², C(O)OR¹² или R¹²; R¹² представляет собой C_1-6алкил, C_3-6циклоалкил, арил, арил-C_1-6алкил или CH₂R¹⁵; и R¹⁵ выбирают из атома водорода, C_1-6алкила, C_3-6циклоалкила, гидрокси-C_1-6алкила, пиперидина, N-C_1-6алкилпиперазина, пиперазина, морфолина, COR¹³ или C(O)OR¹³; и R¹³ представляет собой C_1-6алкил.

В другой подгруппе соединений, где R^10b, или R^10c , или R^10cc представляет собой группу [sol], CH₂[sol], OCH₂CH₂[sol] или OCH₂CH₂CH₂[sol], и [sol] содержит первичную или вторичную аминогруппу, причем первичная или вторичная аминогруппа может быть преобразована в производное с образованием ацильного производного, такого как амид, карбамат или мочевина. Например, аминогруппа может быть преобразована в производное для образования карбамата, такого как C_1-4алкоксикарбониламиногруппа, или бензилоксикарбониламиногруппа.

В одной подгруппе соединений R⁵ и R⁶, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную дигидроизоиндольную группу, где необязательные заместители выбирают из групп R¹⁰, R^10a, R^10b, R^10c и R^10cc, и их подгрупп и примеров, как определено выше.

Конкретные примеры группы NR⁵R⁶ показаны в таблице 2. Точка присоединения к карбонильной группе показана звездочкой.

Таблица 2

Один ряд предпочтительных групп NR⁵R⁶ состоит из или включает группы B8 и B30.

Другая предпочтительная группа NR⁵R⁶ представляет собой группу B8.

Следующий ряд предпочтительных групп NR⁵R⁶ состоит из групп B8, B35, B36, B37, B38, B39, B40, B41, B42, B43, B45, B46, B48, B53, B54, B55, B55, B57, B58, B59, B60, B61 и B62.

Следующий ряд предпочтительных групп NR⁵R⁶ состоит из групп B8, B35, B36, B37, B38, B39, B40, B41, B42, B43, B45, B46, B48, B53, B54, B55, B56, B57, B58, B59, B60, B61 и B62.

Другой ряд предпочтительных групп состоит из B8, B35, B36, B37, B38, B39, B40, B41, B42, B43, B45, B46, B48, B53, B54, B55, B56, B57, B58, B59, B60, B61, B62, B71, B72, B74, B75, B76, B77, B78, B79, B80, B81, B82, B83, B85, B86, B87, B93, B94, B95, B97, B98, B99, B100 и B10l.

Следующий ряд подгрупп NR⁵R⁶ состоит из B43, B46, B48, B76, B82, B89, B91 и B96. В пределах указанной подгруппы более предпочтительными являются группы B43, B46, B48, B76, B82, B89 и B91, где B76, B82 и B89 являются особенно предпочтительными.

Особенные и предпочтительные подгруппы

Одна подгруппа новых соединений по изобретению может быть представлена общей формулой (II):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R^3a выбирают из атома водорода, галогена, циано, C_1-5 гидрокарбила и C_1-5 гидрокарбилокси; где C_1-5 гидрокарбил и C_1-5 гидрокарбилокси фрагменты, каждый необязательно, замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце;

R⁴ выбирают из атома водорода; группы -(O)_n-R⁷, где n равно 0 или 1 и R⁷ представляет собой ациклическую C_{1-5 г}идрокарбильную группу или моноциклическую карбоциклическую или гетероциклическую группу, имеющую 3-7 атомов в кольце; галогена; циано; гидрокси; амино и моно- или ди-C_{1-5 г}идрокарбиламино, где ациклическая C_{1-5 г}идрокарбильная группа и моно- и ди-C_{1-5 г}идрокарбиламино фрагменты в каждом случае необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце;

или R^3a и R⁴ вместе образуют моноциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, имеющее 5-7 атомов в кольце; R⁵ и R⁶ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют бициклическую группу, имеющую до 12 атомов в кольце (например, 8-12 атомов в кольце или 9-10 атомов в кольце), из которых до 5 атомов в кольце представляют собой гетероатомы, выбранные из кислорода, азота и серы; и R⁸ выбирают из атомов водорода и фтора.

Другая подгруппа новых соединений по изобретению может быть представлена формулой (III):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R^3b выбирают из атома водорода, галогена, циано, C_1-5 гидрокарбилокси C_1-5 гидрокарбилокси; где C_1-5 гидрокарбильный и C_1-5 гидрокарбилокси фрагменты, каждый необязательно, замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце;

R⁴ выбирают из атома водорода; группы -(O)_n-R⁷, где n равно 0 или 1 и R⁷ представляет собой ациклическую C_1-5 гидрокарбильную группу или моноциклическую карбоциклическую или гетероциклическую группу, имеющую 3-7 атомов в кольце; галогена; циано; гидрокси; амино и моно- или ди- C_1-5 гидрокарбиламино, где ациклическая C_1-5 гидрокарбильная группа и моно- и ди- C_1-5 гидрокарбиламино фрагменты в каждом случае необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильных и гетероарильных групп, имеющих от 5 до 12 атомов в кольце;

или R^3b и R⁴ вместе образуют моноциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, имеющее 5-7 атомов в кольце; R⁵ и R⁶ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют бициклическую группу, имеющую от 5 до 12 атомов в кольце (например, 8-12 атомов в кольце или 9-10 атомов в кольце), из которых до 5 атомов в кольце представляют собой гетероатомы, выбранные из кислорода, азота и серы; и

R⁸ выбирают из атома водорода и фтора.

Следующая подгруппа новых соединений по изобретению может быть представлена формулой (IV):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R^2a выбирают из гидрокси и метокси (и предпочтительно представляет собой гидрокси);

R^3c выбирают из атома водорода, галогена, циано, C_1-5 гидрокарбила и C_1-5 гидрокарбилокси; где C_1-5 гидрокарбил и C_1-5 гидрокарбилокси фрагменты, каждый необязательно, замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, и арильными и гетероарильными группами, имеющими от 5 до 12 атомов в кольце;

R⁴ выбирают из атома водорода; группы -(O)_n-R⁷, где n равно 0 или 1 и R⁷ представляет собой ациклическую C_1-5 гидрокарбильную группу или моноциклическую карбоциклическую или гетероциклическую группу, имеющую 3-7 атомов в кольце; галоген; циано; гидрокси; амино и моно- или ди-C_1-5 гидрокарбиламино, где ациклическая C_1-5 гидрокарбильная группа и моно- и ди-C_1-5 гидрокарбиламино фрагменты в каждом случае необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси, амино, моно- и ди-C_1-2алкиламино, арильных и гетероарильных групп, имеющих 5-12 атомов в кольце;

или R^3c и R⁴ вместе образуют моноциклическое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, имеющее 5-7 атомов в кольце;

R⁵ и R⁶ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют бициклическую группу, имеющую до 12 атомов в кольце (например, 8-12 атомов в кольце или 9-10 атомов в кольце), из которых до 5 атомов в кольце представляют собой гетероатомы, выбранные из кислорода, азота и серы; и

R⁸ выбирают из атома водорода и фтора.

В пределах формул (II), (III) и (IV) частные подгруппы соединений представляют собой такие, где NR⁵R⁶ образует бициклическое кольцо, содержащее до 10 атомов в кольце (например, 9 или 10 атомов в кольце, предпочтительно 9 атомов в кольце), из которых до 5 атомов в кольце представляют собой гетероатомы, выбранные из O, N и S, моноциклическое или бициклическое кольцо необязательно замещено до трех замещающих групп R¹⁰, R^10a, R^10b, R^10c и R^10cc, как определено выше, более конкретно до двух заместителей, например до одного заместителя.

Более конкретными заместителями для бициклической гетероциклической группы NR⁵R⁶ являются заместители, образующие часть подгруппы R^10d, которая состоит из членов подгруппы R^10с и фтора, хлора, брома, трифторметила, дифторметокси, трифторметокси, циано, метила, этила, циклопропила, гидрокси, метилсульфонила, амино, метиламино, диметиламино, метокси, этокси, гидроксиметила, гидроксиэтила, этоксикарбонила, метоксикарбонила, аминокарбонила, оксо, метоксиметила, карбокси, фенила, C_1-2алкоксикарбонила, аминокарбонила, ацетила, метилсульфонила и пиридинила. В пределах данной подгруппы один ряд заместителей включает метил, этил, хлор, фтор, гидрокси, метилсульфонил, амино, метиламино, диметиламино, циано, метокси, этокси, гидроксиметил, циклопропил, гидроксиэтил, этоксикарбонил, метоксикарбонил, аминокарбонил, оксо, метоксиметил и ацетил.

Например, NR⁵R⁶ может образовывать 5,6- или 6,6-конденсированное бициклическое кольцо из 9 или десяти атомов в кольце, из которых 1-3 являются гетероатомами, причем бициклическое кольцо необязательно замещено одним или несколькими заместителями R¹⁰ или R^10a, или R^10b, или R^10c, или R^10cc, или R^10d, и их подгруппами и примерами, как определено выше.

В пределах данной подгруппы примерами конденсированных бициклических колец являются такие, в которых неароматическое кольцо, такое как пирролидиновое, пиперидиновое, пиперазиновое или морфолиновое кольцо, конденсировано с 6-членным арильным или гетероарильным кольцом, таким как бензольное или пиридиновое кольцо, и в которых атом азота, присутствующий в неароматическом кольце, связан с карбонильной группой в формулах (II), (III) или (IV).

Конкретные конденсированные бициклические кольца включают дигидроиндол, дигидроизоиндол, тетрагидрохинолин и тетрагидроизохинолин, и их аза-аналоги, в которых один или два углеродных атома в кольце ароматического кольца заменены азотом.

Одна подгруппа бициклических гетероциклических групп, образуемых NR⁵R⁶, состоит из дигидроизоиндола, необязательно замещенного одним или несколькими (например, 1, 2 или 3) необязательными заместителями, выбранными из групп R¹⁰, R^10a, R^10b и R^10c или R^10cc и/или R^10d, и их подгрупп и примеров, как определено выше.

Предпочтительными соединениями являются такие, в которых группа R^3a или R^3b, или R^3c выбрана из атома водорода, галогена и C_1-5алкила; где C_1-5алкильный фрагмент в каждом случае необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси и амино.

Более предпочтительно, группа R^3a, или R^3b, или R^3c представляет собой атом водорода или C_3-5алкильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, галогена, C_1-2алкокси и амино. В частности, группа R^3a, или R^3b, или R^3c выбрана из атома водорода и изопропильных, втор-бутильных, трет-бутильных и 1,2-диметилпропильных групп.

Другая подгруппа соединений по изобретению представлена формулой (V):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R¹ представляет собой атом водорода или гидрокси; R^2a представляет собой гидрокси- или метоксигруппу; при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R^2a представляет собой гидроксигруппу; R^3d выбирают из этильных и вторичных и третичных алкильных групп, имеющих 3-6 атомов углерода; R^4a выбирают из атома водорода, фтора, хлора и метокси; и R⁵, R⁶ и R⁸ определены выше; при условии, что когда R¹ и R², оба представляют собой гидрокси, то R^3d может быть дополнительно выбран из атома водорода.

В одном варианте осуществления, когда R¹ и R², оба представляют собой гидрокси, R^3d является атомом водорода.

В другом варианте осуществления R^3d представляет собой этильную или вторичную, или третичную алкильную группу. Особенно предпочтительные алкильные группы R^3d представляют собой этил, изопропил и трет-бутил, и, в частности, изопропил.

В пределах формул (II)-(V) предпочтительные группы NR⁵R⁶ представляют собой дигидроизоиндольные группы, которые могут быть незамещенными или незамещены одним, двумя или тремя группами R¹⁰, R^10a или R^10b, или R^10c, или R^10cc, или R^10d и их подгруппами и примерами, как определено выше, но в одном особенном варианте осуществления являются незамещенными.

Другая предпочтительная подгруппа соединений может быть представлена формулой (VI):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R¹ представляет собой гидроксигруппу или водород; R^2a представляет собой гидроксигруппу или метокси (предпочтительно гидрокси), при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R^2a представляет собой гидроксигруппу, кольцо B представляет собой ароматическое кольцо, содержащее до двух (предпочтительно 0 или 1) гетероатомов азота в кольце; T представляет собой группу (CHR¹⁰)_j, и Q представляет собой группу (CHR¹⁰)_k, где j и k, каждый, равны 0, 1, 2 или 3, при условии, что сумма j и k равна 2 или 3; n равно 0, 1, 2 или 3, и R³, R^4a, R⁸ и R¹⁰ являются такими, как определено выше.

Другая предпочтительная подгруппа соединений может быть представлена формулой (VIa):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R¹ представляет собой гидроксигруппу или водород; R^2a представляет собой гидроксигруппу или метокси (предпочтительно гидрокси), при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R^2a представляет собой гидроксигруппу, кольцо B является ароматическим кольцом, содержащим до двух (предпочтительно 0 или 1) гетероатомов азота в кольце; T представляет собой группу (CHR^10b)_j, и Q представляет собой группу (CH R^10b)_k, где j и k, каждый, равны 0, 1, 2 или 3, при условии, что сумма j и k равна 2 или 3; n равно 0, 1, 2 или 3, и R³, R^4a, R⁸ и R^10b являются такими, как определено выше.

В одной подгруппе соединений в пределах формулы (VI) или формулы (VIa), R¹ представляет собой атом водорода.

В другой подгруппе соединений в пределах формулы (VI) или формулы (VIa), R¹ является гидроксигруппой.

В формуле (VI), примеры бициклической группы:

включают группы C1-C6 ниже

Предпочтительными группами являются группы C1, C5 и C6.

В группах C1-C6, фрагмент R¹⁰ может представлять собой группу R¹⁰, как определено выше, или могут представлять собой группу R^10b, R^10c, R^10cc или R^10ccс, как определено в настоящем описании. В каждом случае n предпочтительно равно 1, 2 или 3, и, более предпочтительно, равно 1 или 2, например, 1.

В данном случае предпочтительная группа представляет собой группу C1.

В пределах формулы (VI) одна особая группа соединений может быть представлена формулой (VII):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R¹, R^2a, R³ R^4a, R⁸ и R^10b являются такими, как определено выше, и n равно 0, 1, 2 или 3 (более предпочтительно 0, 1 или 2, например, 0 или 1), и, при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R^2a является гидроксигруппой.

В пределах формул (VI) и (VII) заместитель R³ предпочтительно представляет собой группу R^3d, как определено выше, и/или заместитель R^10b или отсутствует (n=0), или выбран из групп R^10c и R^10b, и их подгрупп и примеров, как определено выше. Предпочтительно, R¹ и R^2a, оба являются гидроксигруппой.

Одна отдельная группа соединений по изобретению в пределах формулы (VII) представлена формулой (VIIa):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R³ выбирают из атома водорода, галогена, C_1-5алкильных, C_2-5алкенильных и C_3-4циклоалкильных групп; R^4a выбирают из атома водорода, фтора, хлора и метокси; R⁸ представляет собой атом водорода или фтора; n равно 0, 1, 2 или 3; и R¹⁰ является таким, как определено выше.

В пределах формулы (VIIa) R¹⁰ может быть выбран из, например, одной, двух или трех групп R^10a, или R^10b, или R^10c, или R^10cc, или R^10d и их подгрупп и примеров, как определено выше.

Одна предпочтительная группа соединений по изобретению в пределах формулы (VII) представлена формулой (VIIb):

или их солями, таутомерами, сольватами и N-оксидами;

где R³ выбирают из атома водорода, галогена, C_1-5алкильных, C₂-₅алкенильных и C_3-4циклоалкильных групп; R^4a выбирают из атома водорода, фтора, хлора и метокси; R⁸ представляет собой атом водорода или фтора; n равно 0, 1, 2 или 3; и R^10cc выбирают из:

галогена;

CO₂R¹⁴, где R¹⁴ представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

C_1-4алкила, необязательно замещенного гидрокси или C_1-2алкокси;

C_1-4алкокси, необязательно замещенного гидрокси или C_1-2алкокси; или

групп [sol], CH₂[sol], C(O)[sol], OCH₂CH₂[sol] или OCH₂CH₂CH₂[sol], где [sol] выбирают из следующих групп:

где X⁴ представляет собой NH или O, m равно 0 или 1, n равно 1, 2 или 3, R¹¹ представляет собой атом водорода, COR¹², C(O)OR¹² или R¹²; R¹² представляет собой C_1-6алкил, C_3-6циклоалкил, арил, арил-C_1-6алкил или CH₂R¹⁵; и R¹⁵ выбирают из атома водорода, C_1-6алкила, C_3-6циклоалкила, гидрокси-C_1-6алкила, пиперидина, N-C_1-6алкилпиперазина, пиперазина, морфолина, COR¹³ или C(O)OR¹³; и R¹³ представляет собой C_1-6алкил.

В следующем варианте осуществления соединение может представлять собой аза- или диаза-аналог соединений формулы (VI), (VII) и (VIIa), как определено выше, где один или два атома углерода бензольного кольца, присоединенного к пятичленному кольцу, заменены атомом азота.

Например, группа:

в соединении формулы (VIIa) может быть заменена:

В каждой из формул (VI), (VIa), (VII), (VIIa) и (VIIb) и их подгруппах, как определено выше, n предпочтительно равно 1, 2 или 3, и более предпочтительно равно 1 или 2. В одном варианте осуществления n равно 1.

Конкретные соединения по изобретению включают:

(5-хлор-2-гидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)-(2,3-дигидроиндол-1-ил)метанон;

(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)-(3,4-дигидро-2H-хинолин-1-ил)метанон;

(3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-(4-гидрокси-3-изопропилфенил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)-(l,4-диокса-8-азаспиро[4.5]дек-8-ил)метанон;

(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)пирроло[3,2-b]пиридин-1-илметанон;

8-(3-трет-бутил-4-гидроксибензоил)-2-метил-2,8-диазаспиро[4.5]декан-1-он;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(4-гидрокси-3-изопропилфенил)метанон;

(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)-(3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(5-этил-2,4-дигидроксифенил)метанон;

(5-циклопропил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(5-втор-бутил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидроксифенил)метанон;

(5-хлор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

[5-(3-аминопропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(5-бром-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-трифторметилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(3-втор-бутил-4-гидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(5-трет-бутил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(5-хлор-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2-гидрокси-5-изопропил-4-метоксифенил)метанон;

(4,7-дифтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-фтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(3-фтор-2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2-фтор-4,6-дигидрокси-3-изопропилфенил)метанон;

гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(4-фтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона;

(5-хлор-6-метокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-метоксиэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гепт-5-ил)метанон;

(3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(5-амино-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-метокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

метиловый эфир 2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты;

2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновая кислота;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

трет-бутиловый эфир {3-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-илокси]пропил}карбаминовой кислоты;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-изопропиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

N-{2-[2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-илокси]этил}-2-морфолин-4-илацетамид;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-пиперазин-1-илфенил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-диметиламино-2-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламино-1-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

[5-(2-аминоэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-морфолин-4-илпиперидин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-изопропилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперазин-1-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

трет-бутиловый эфир 4-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-иламино]пиперидин-1-карбоновой кислоты;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(пиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-диметиламинометил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[2-(2,2-диметилпропиламино)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;

[5-(2-циклопентиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперидин-1-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидроксипиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(5-хлор-2,4-дигидроксифенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(5-хлор-6-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(5-хлор-2,4-дигидроксифенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-7-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

и их соли, сольваты, N-оксиды и таутомеры.

Предпочтительные индивидуальные соединения формулы (I) представляют собой:

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперазин-1-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-диметиламинометил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;

или их соли, сольваты, N-оксиды и таутомеры.

Особенно предпочтительная группа индивидуальных соединений состоит из:

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона;

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона и

(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона;

или их солей, сольватов или таутомеров.

Для устранения сомнений следует понимать, что каждая общая и конкретное значение, вариант осуществления и пример группы R¹ могут быть объединены с каждым общим и конкретным значением, вариантом осуществления и примером групп R², и/или R³, и/или R⁴, и/или R⁴, и/или R⁵, и/или R⁶, и/или R¹⁰, и/или Q, и/или T, и/или их подгруппами, как определено выше, и что все такие комбинации охватываются настоящим изобретением.

Различные функциональные группы и заместители, составляющие соединения формулы (I), как правило, выбирают таким образом, чтобы молекулярная масса соединения формулы (I) не превышала 1000. Более конкретно, молекулярная масса соединения составляет менее чем 750, например менее чем 700, или менее чем 650, или менее чем 600, или менее чем 550. Более предпочтительно, молекулярная масса составляет менее чем 525 и, например, 500 или менее.

Соли, сольваты, таутомеры, изомеры, N-оксиды, сложные эфиры, пролекарства и изотопы

Ссылка на соединение формулы (I) и ее подгруппы также включает ионные формы, соли, сольваты, изомеры, таутомеры, N-оксиды, сложные эфиры, пролекарства, изотопы и их защищенные формы, например, как обсуждается ниже; предпочтительно их соли, или таутомеры, или изомеры, или N-оксиды. или сольваты; и более предпочтительно, их соли или таутомеры или N-оксиды или сольваты.

Многие соединения формулы (I) могут существовать в форме солей, например солей присоединения кислоты или, в определенных случаях, солей органических и неорганических оснований, таких как фенолятные, карбоксилатные, сульфонатные и фосфатные соли. Все такие соли входят в объем настоящего изобретения, и ссылки на соединения формулы (I) включают солевые формы соединений.

Соли по настоящему изобретению могут быть синтезированы из исходного соединения, которое содержит основной или кислотный фрагмент, традиционными химическими способами, такими как способы, описанные в Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, P. Heinrich Stahl (Editor), Camille G. Wermuth (Editor), ISBN: 3-90639-026-8, Hardcover, 388 pages, August 2002. Как правило, такие соли могут быть получены реакцией указанных соединений в форме свободной кислоты или основания с соответствующим основанием или кислотой в воде или в органическом растворителе, или в смеси двух; обычно используются неводные среды, такие как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил.

Соли присоединения кислоты могут быть образованы с широким диапазоном кислот, как неорганических, так и органических. Примеры солей присоединения кислоты включают соли, образованные с кислотой, выбранной из группы, состоящей из уксусной, 2,2-дихлоруксусной, адипиновой, альгиновой, аскорбиновой (например, L-аскорбиновой), L-аспарагиновой, бензолсульфоновой, бензойной, 4-ацетамидобензойной, бутановой, (+)-камфорной, камфорсульфоновой, (+)-(lS)-камфор-10-сульфоновой, каприновой, капроновой, каприловой, коричной, лимонной, цикламовой, додецилсерной, этан-1,2-дисульфоновой, этансульфоновой, 2-гидроксиэтансульфоновой, муравьиной, фумаровой, галактаровой, гентизиновой, глюкогептоновой, D-глюконовой, глюкуроновой (например, D-глюкуроновой), глутаминовой (например, L-глутаминовой), альфа-оксоглутаровой, гликолевой, гиппуровой, бромистоводородной, хлористоводородной, йодистоводородной, изетионовой, (+)-L-молочной, (±)-DL-молочной, лактобионовой, малеиновой, яблочной, (-)-L-яблочной, малоновой, (±)-DL-миндальной, метансульфоновой, нафталин-2-сульфоновой, нафталин-1,5-дисульфоновой, 1-гидрокси-2-нафтойной, никотиновой, азотной, олеиновой, оротовой, щавелевой, пальмитиновой, памовой, фосфорной, пропионовой, L-пироглутаминовой, салициловой, 4-аминосалициловой, себациновой, стеариновой, янтарной, серной, танниновой, (+)-L-винной, тиоциановой, паратолуолсульфоновой, ундециленовой и валериановой кислоты, а также ацилированными аминокислотами и катионообменными смолами.

Если соединение является анионным или имеет функциональную группу, которая может быть анионной (например, -COOH может быть -COO^-), то соль может быть получена с приемлемым катионом. Примеры приемлемых неорганических катионов включают, но без ограничения ими, ионы щелочного металла, такие как Na⁺и K⁺, катионы щелочноземельного металла, такие как Ca²⁺и Mg²⁺, и другие катионы, такие как Al³⁺. Примеры пригодных органических катионов включают, но без ограничения ими, ион аммония (то есть NH₄ ⁺) и ионы замещенного аммония (например, NH₃R⁺, NH₂R₂ ⁺, NHR₃ ⁺, NR₄ ⁺). Примерами некоторых пригодных замещенных ионов аммония являются такие, которые получены из: этиламина, диэтиламина, дициклогексиламина, триэтиламина, бутиламина, этилендиамина, этаноламина, диэтаноламина, пиперазина, бензиламина, фенилбензиламина, холина, меглюмина, и трометамина, а также аминокислот, таких как лизин и аргинин. Примером обычного четвертичного иона аммония является N(CH₃)₄ ⁺.

Если соединения формулы (I) содержат функцию амина, они могут образовывать четвертичные аммониевые соли, например, реакцией с алкилирующим реагентом, согласно способам, хорошо известным специалисту в данной области. Такие четвертичные аммониевые соединения входят в объем формулы (I).

Солевые формы соединений по изобретению обычно представляют собой фармацевтически приемлемые соли, и примеры фармацевтически приемлемых солей обсуждены Berge et al., 1977, в "Pharmaceutically Acceptable Salts," J. Pharm. ScL, Vol.66, pp. 1-19. Однако соли, которые не являются фармацевтически приемлемыми, также могут быть получены в качестве промежуточных форм, которые затем могут быть преобразованы в фармацевтически приемлемые соли. Такие формы фармацевтически неприемлемых солей, которые могут быть полезны, например, при очистке или разделении соединений по изобретению, также составляют часть настоящего изобретения.

Соединения формулы (I), содержащие функцию амина, также могут образовывать N-оксиды. В данном случае ссылка на соединение формулы (I), которое содержит функцию амина, также включает N-оксид.

Если соединение содержит несколько функций амина, один или более чем один атом азота может быть окислен с образованием N-оксида. Конкретными примерами N-оксидов являются N-оксиды третичного амина или атом азота азотсодержащего гетероцикла.

N-Оксиды могут быть получены обработкой соответствующего амина окисляющим агентом, таким как пероксид водорода или перкислота (например, пероксикарбоновая кислота), см., например, Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, Wiley Interscience, pages. В частности, N-оксиды могут быть получены по методике L.W. Deady (Syn. Comm. 1977, 7, 509-514), в которой аминное соединение вводится в реакцию с метахлорпероксибензойной кислотой (MCPBA), например в инертном растворителе, таком как дихлорметан.

Соединения формулы (I) могут существовать в виде различных геометрических изомерных и таутомерных форм, и ссылки на соединения формулы (I) включают все такие формы. Для устранения сомнений, если соединение может существовать в одной из нескольких геометрических изомерных или таутомерных форм и только одна специально описана или показана, все другие, тем не менее, охватываются формулой (I).

Примеры таутомерных форм включают, например, кето-, енольные и енолятные формы, как, например, в следующих таутомерных парах: кетон/енол (проиллюстрировано ниже), имин/енамин, амид/иминоспирт, амидин/амидин, нитрозо/оксим, тиокетон/ентиол и нитро/ацинитро.

Если соединения формулы (I) содержат один или несколько хиральных центров и могут существовать в форме двух или более оптических изомеров, ссылки на соединения формулы (I) включают все их оптические изомерные формы (например, энантиомеры, эпимеры и диастереомеры), или в виде индивидуальных оптических изомеров, или смесей (например, рацемических смесей) двух или более оптических изомеров, пока в контексте не указано иное.

Оптические изомеры могут быть охарактеризованы и идентифицированы по их оптической активности (то есть как + и - изомеры, или d и l изомеры) или они могут быть охарактеризованы в терминах их абсолютной стереохимии с использованием "R/S" номенклатуры, предложенной Канном, Ингольдом и Прелогом (Cahn, Ingold, Prelog), см. Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, John Wiley & Sons, New York, 1992, pages 109-114, см. также Cahn, Ingold & Prelog, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 1966, 5, 385-415.

Оптические изомеры могут быть разделены рядом методов, включая хиральную хроматографию (хроматографию на хиральной подложке), и такие методы хорошо известны специалистам в данной области. В качестве альтернативы хиральной хроматографии, оптические изомеры могут быть разделены путем образования диастереомерных солей с хиральными кислотами, такими как (+)-винная кислота, (-)-пироглутаминовая кислота, (-)-дитолуоил-L-винная кислота, (+)-миндальная кислота, (-)-яблочная кислота и (-)-камфорсульфоновая, разделения диастереомеров путем дробной кристаллизации и последующей диссоциации солей, что дает индивидуальный энантиомер свободного основания.

Если соединения формулы (I) существуют в виде двух или более оптических изомерных форм, один энантиомер в паре энантиомеров может проявлять преимущества по сравнению с другим энантиомером, например, в терминах биологической активности. Так, в определенных обстоятельствах, может быть желательно использовать в качестве терапевтического агента только один из пары энантиомеров или только один из множества диастереомеров. Соответственно, изобретение предоставляет композиции, содержащие соединение формулы (I), имеющее один или несколько хиральных центров, где по меньшей мере 55% (например, по меньшей мере 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95%) соединения формулы (I) присутствует в виде отдельного оптического изомера (например, энантиомера или диастереомера). В одном общем варианте осуществления 99% или более (например, по существу все) от общего количества соединения формулы (I) может присутствовать в виде отдельного оптического изомера (например, энантиомера или диастереомера).

Соединения по изобретению включают соединения с одним или несколькими изотопными замещениями, и ссылка на отдельный элемент включает, в пределах его объема, все изотопы элемента. Например, ссылка на водород включает, в пределах ее объема, ¹H, ²H (D) и ³H (T). Аналогично, ссылки на углерод и кислород включают, в пределах их объема, соответственно ¹²C, ¹³C и ¹⁴C; и ¹⁶O и ¹⁸O.

Изотопы могут быть радиоактивными или нерадиоактивными. В одном варианте осуществления изобретения соединения не содержат радиоактивных изотопов. Такие соединения являются предпочтительными для терапевтического применения. В другом варианте осуществления, однако, соединение может содержать один или несколько радиоизотопов. Соединения, содержащие такие радиоизотопы, могут быть использованы в диагностических целях.

Сложные эфиры, такие как эфиры карбоновой кислоты и сложные ацилоксиэфиры соединений формулы (I), несущие группу карбоновой кислоты или гидроксильную группу, также охватываются формулой (I). Примерами сложных эфиров являются соединения, содержащие группы -C(=O)OR, где R представляет собой сложноэфирный заместитель, например, C_1-7алкильную группу, C_3-20 гетероциклильную группу или C_5-20арильную группу, предпочтительно C_1-7алкильную группу. Конкретные примеры эфирных групп включают, но без ограничения, -C(=O)OCH₃, -C(=O)OCH₂CH₃, -C(=O)OC(CH₃)₃ и -C(=O)OPh. Примеры ацилоксигрупп (обратный эфир) представлены формулой -OC(=O)R, где R представляет собой заместитель ацилоксигруппы, например C_1-7алкильную группу, C_3-20 гетероциклильную группу или C_5-20арильную группу, предпочтительно C_1-7алкильную группу. Конкретные примеры ацилоксигрупп включают, но без ограничения, -OC(=O)CH₃ (ацетокси), -OC(=O)CH₂CH₃, -OC(=O)C(CH₃)₃, -OC(=O)Ph и -OCC=O)CH₂Ph.

В одном общем варианте осуществления формула (I) и ее подформулы, подгруппы, предпочтительные значения и примеры не включают сложные эфиры, такие как эфиры карбоновой кислоты и ацилоксиэфиры.

В одном особенном варианте осуществления формула (I) и ее подформулы, подгруппы, предпочтительные значения и примеры не включают сложные эфиры гидроксисоединений, где R² является гидроксигруппой и эфир образован гидроксигруппой R².

Также охватываемыми формулой (I) являются любые полиморфные формы соединений, сольватов (например, гидратов), комплексов соединений (например, комплексы включения или клатраты с соединениями, такими как циклодекстрины, или комплексы с металлами) и пролекарства соединений. Под "пролекарством" понимается, например, любое соединение, которое превращается in vivo в биологически активное соединение формулы (I).

Например, некоторые пролекарства представляют собой сложные эфиры активного соединения (например, физиологически приемлемый метаболически лабильный сложный эфир). В ходе метаболизма эфирная группа (-C(=O)OR) расщепляется с образованием активного лекарственного средства. Такие сложные эфиры могут быть получены этерификацией, например, любой из карбокислотных групп (-C(=O)OH) в исходном соединении, с предварительной, где необходимо, защитой любых других реакционно-способных групп, присутствующих в исходном соединении, с последующим, если необходимо, снятием защиты.

Примеры таких метаболически лабильных сложных эфиров включают эфиры формулы -C(=O)OR, где R представляет собой:

C_1-7алкил

(например, -Me, -Et, -nPr, -iPr, -nBu, -sBu, -iBu, -tBu);

C_1-7аминоалкил

(например, аминоэтил; 2-(N,N-диэтиламино)этил; 2-(4-морфолино)этил); и

ацилокси-C_1-7алкил

(например, ацилоксиметил;

ацилоксиэтил;

пивалоилилоксиметил;

ацетоксиметил;

1-ацетоксиэтил;

1-(1-метокси-1-метил)этилкарбоксилоксиэтил;

1-(бензоилокси)этил; изопропоксикарбонилоксиметил;

1-изопропоксикарбонилоксиэтил;

циклогексилкарбонилоксиметил;

1-циклогексилкарбонилоксиэтил;

циклогексилоксикарбонилоксиметил;

1-циклогексилоксикарбонилоксиэтил;

(4-тетрагидропиранилокси)карбонилоксиметил;

1-(4-тетрагидропиранилокси)карбонилоксиэтил;

(4-тетрагидропиранил)карбонилоксиметил и

1-(4-тетрагидропиранил)карбонилоксиэтил).

Кроме того, некоторые пролекарства активируются ферментами с образованием активного соединения или соединения, которое в следующей химической реакции образует активное соединение (например, как в ADEPT, GDEPT, LIDEPT и т.д.). Например, пролекарство может представлять собой производное сахара или другого гликозидного конъюгата или может представлять собой производное сложного эфира аминокислоты.

Биологическая активность

Соединения формулы (I) и ее подгрупп являются ингибиторами Hsp90 и, следовательно, как ожидается, будут полезны при лечении широкого спектра пролиферативных расстройств. Примеры таких пролиферативных расстройств включают, но без ограничения перечисленным, карциному, например, карциному мочевого пузыря, груди, толстой кишки (например, колоректальные карциномы, такие как аденокарцинома толстой кишки и аденома толстой кишки), почки, эпидермиса, печени, легкого, например, аденокарциному, мелкоклеточный рак легкого и немелкоклеточную карциному легкого, пищевода, желчного пузыря, яичника, поджелудочной железы, например, экзокринную панкреатическую карциному, желудка, шейки матки, щитовидной железы, простаты, желудочно-кишечной системы, например, желудочно-кишечные стромальные опухоли, или кожи, например, плоскоклеточную карциному; гемопоэтическую опухоль лимфоидного происхождения, например лейкемии, острые лимфоцитарные лейкемии, хроническую лимфоцитарную лейкемию, B-клеточную лимфому (такую как диффузная крупно-В-клеточная лимфома), T-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточную лимфому или лимфому Буркета (Burkett); гемопоэтическую опухоль миелоидного происхождения, например, острую и хроническую миелогенные лейкемии, иматиниб-чувствительные и -резистентные хронические миелогенные лейкемии, миелодисплазический синдром, бортезомиб-чувствительную и резистентную множественную миелому, миелопролиферативное заболевание или промиелоцитную лейкемию; фолликулярный рак щитовидной железы; опухоль мезенхимного происхождения, например фибросаркому или хабдомиосаркому; опухоли центральной или периферической нервной системы, например, астроцитомы, нейробластомы, глиомы или невриномы; меланомы; семиномы; тератокарциномы; остеосаркомы; пигментную ксеродерму; кератоакантому или саркому Капоши.

Раковые заболевания могут представлять собой раковые заболевания, которые являются чувствительными к ингибированию Hsp90 и такие раковые заболевания могут быть определены способом, указанным в разделе, озаглавленном "Способы диагностики".

Одна группа раковых заболеваний включает рак груди человека (например, первичные опухоли груди, неузловатый рак груди, инвазивная аденокарцинома протоков груди, неэндометриоидный рак груди) и лимфомы покровных клеток. Кроме того, другие раковые заболевания представляют собой колоректальные и эндометриальные раковые заболевания.

Другая подгруппа раковых заболеваний включает гемопоэтические опухоли лимфоидного происхождения, например, лейкемию, хроническую лимфоцитарную лейкемию, лимфому клетки мантийной ткани и B-клеточную лимфому (такую как диффузная крупно-В-клеточная лимфома) и необязательно дополнительно включает хроническую миелогенную лейкемию и множественную миелому.

Предпочтительная подгруппа раковых заболеваний состоит из ErbB2-положительного рака груди, простаты, легкого и желудка; хронической миелоидной лейкемии; рака простаты, зависимого от рецептора андрогенного гормона; Flt3-зависимой острой миелоидной лейкемии; меланомы, ассоциированной с мутацией Braf; множественной миеломы; велкад-резистентной множественной миеломы; и желудочно-кишечных стромальных опухолей (GIST).

Из них особенно предпочтительными раковыми заболеваниями являются множественные миеломы и велкад-резистентные типы опухолей, как определено выше.

Ингтбиторы Hsp90 могут также применяться для лечения других состояний, таких как вирусные инфекции, паразитическое заболевание, аутоиммунные заболевания, нейродегенеративные расстройства, воспаление, диабет типа I и II и заболевания сердца.

Ингибиторы Hsp90 могут также иметь клиническое преимущество при трансплантации и иммуносупрессии. Ингибиторы Hsp90 также могут иметь клиническое преимущество при ранее описанных заболеваниях, когда применяются в комбинации с существующими или новыми терапевтическими агентами.

Основываясь на активностях Hsp90-клиентных белков и экспериментальном доказательстве, указанные далее расстройства могут быть особенно чувствительными к лечению ингибиторами Hsp90.

ErbB2-положительный рак груди, простаты, легкого и желудка

Сверхэкспрессия ErbB2 (HER-2) имеет место в приблизительно 30% видов рака груди и понижающей регуляции ErbB2-рецептора под действием клеток, герцептин-активированных к таксолу. Сверхэкспрессия ErbB2 сопряжена с неблагоприятным прогнозом и лекарственной устойчивостью (Tsugawa et. al., 1993, Oncology 1993; 50: 418).

Мутантный EGFR при раке легкого

Соматические мутации в киназном домене рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), включая делеции L858R и exon 19, лежат в основе быстроты реакции на гефитиниб и эрлотиниб при немелкоклеточном раке легкого (NSCLC). Приобретенная устойчивость к этим тирозинкиназным ингибиторам в некоторых случаях опосредована второй мутацией, T790М. Ансамициновые антибиотики, такие как гельдамицин, сильно ингибируют белок теплового шока 90 (Hsp90), промотируя убихитин-опосредованную деградацию онкогенных киназ, которые требуют шаперона для правильной конформационной укладки. Воздействие на EGFR-мутантные клеточные линии гельдамицина индуцирует заметное снижение концентрации фосфо-Akt и циклина Dl, а также апоптоз. Эти данные допускают, что мутационная активация EGFR ассоциирована с зависимостью от Hsp90 для стабильности и что ингибирование Hsp90 может представлять собой новую стратегию для лечения EGFR-мутантных NSCLC.

Хроническая миелоидная лейкемия

Абберрантный BCR-AbI белок создается через хромосомальную транслокацию и приводит к конститутивноактивному AbI-киназному домену. Эта транслокационное событие, как было показано, является причиной CML. P210BcrAbl является известным клиентным белком для Hsp90. Обработка BCR-AbI клеточной линии K562 ингибитором hsp90 вызывает апоптоз. Bcr-Abl-ингибитор Gleevec^®, также индуцирует апоптоз в K562-клетках; однако Gleevec^®-резистентные K562 клетки по-прежнему сохраняют чувствительность к ингибиторам Hsp90 (Gorre et al. 2002, Blood 100: 3041-3044).

Рак простаты, опосредованный рецептором андрогенного гормона

Андроген-рецепторная киназа представляет собой Hsp90-клиентный белок. Обычно гормонозамещающая терапия применяется, если хирургическое вмешательство не устраняет рак. В конечном счете, через мутацию в рецепторе, рак становится резистентным к аналогу гормона. Hsp90-регуляция рецептора должна оставаться по-прежнему работоспособной после мутации.

То же самое должно быть отнесено к эстрогензависимым ракам груди.

Flt3-зависимая острая миелоидная лейкемия (AML)

Внутреннее удваивание тирозинкиназного рецептора Flt3 ведет к его существенной конститутивной активации и онкогенезу. Эти внутренние удвоения наблюдаются в 20% всех описанных случаев AML и являются симптомом неблагоприятного прогноза. Как многие подобные активации ABL-киназы в CML, это представляет собой другой пример отдельного генетического повреждения, приводящего к усилению злокачественности. Ингтбиторы Hsp90, как предсказывается, создают клиническое преимущество для таких пациентов, так как Flt3 представляет собой Hsp90-клиентный белок (Bali et al., 2004 Cancer Res. 64(10):3645-52).

Меланома, ассоциированная с мутацией Braf

Braf кодирует серин/треонинкиназу, которая мутирована в 70% всех меланом. 80% из них представляют собой одиночную V599E точечную мутацию, что предоставляет повышенную киназную активность для BRAF. Эта мутация также преобразует клетки NIH3T3 (Bignell et al., 2002 Nature. 417(6892):949-54).

Множественная миелома

Ингибитор Hsp90 17-AAG сильно ингибирует пролиферацию бортезомиб-резистентных клеточных линий множественной миеломы. Уровни на поверхности клетки IGF-IR и IL-6R также понижены в обработанных 17-AAG клетках MM-I (Mitsiades et al., Blood 107:1092-1100, 2006). Аутокринная стимуляция клеток множественной миеломы, так же как паракринная стимуляция стромальных клеток костного мозга действием IL-6, также ослабляется через понижающую регуляцию Hsp90-клиентной IKK.

Велкад-резистентная множественная миелома

Соединения по настоящему изобретению могут быть полезны для лечения велкад-резистентных типов опухоли, включая лечение пациентов с лимфомой мантийных клеток второй линии, вялой неходжкинской лимфомой, бронхоальвеолярной карциномой IIIB и IV стадии, прогрессирующим немелкоклеточным раком легкого, раками груди, простаты и яичников и неходжкинской лимфомой.

Желудочно-кишечные стромальные опухоли (GIST)

Заболевание GIST представляет собой, в частности, заболевание, зависимое от активации или сверхэкспрессии фактора роста (например, c-kit).

Другие состояния или расстройства, для которых ингибитор Hsp90 может предоставлять клиническое преимущество, включают, но без ограничения:

Нейродегенеративные расстройства

Болезнь Хантингтона (Huntington) (HD) является прогрессирующим нейродегенеративным расстройством, которое не имеет эффективного лечения. Ингибирование Hsp90 гельдамицином (GA) и результирующая повышающая регуляция Hsp являются эффективными в предотвращении белковой агрегации при хорее Хаттингтона в нейрональных клетках. (Sittler et al., 2001, Human Molecular Genetics, Vol.10, No. 12, 1307-1315). Повышающая регуляция HSP также может предоставлять клиническое преимущество при других заболеваниях с ошибочным сворачиванием белка, например болезни Крейцфельда-Якоба(CJD) и Альцгеймера.

Воспалительное заболевание, включая ревматоидный артрит, астму, хроническое обструктивное заболевание легких и воспалительное заболевание кишечника

Как было показано, гельдамицин (GA) высвобождает HSF-1 из Hsp90, что ведет к активации и ядерной транслокации HSF-1. HSF-1 впоследствии действует как фактор транскрипции, индуцируя HSP90 и Hsp70. Индукция Hsp70 участвует в снижении воспаления в индуцируемой модели отека на мышах (Ianaro et al., 2004 Human Molecular Genetics, 2001, Vol.10, No. 12 1307-1315). Кроме того, обработка гельдамицином ингибирует активацию IkappaB-киназы (IKK) под действием TNF-α или PMA. IkBa является регулятором Nf-kB и Ap-1. (Broemer et al., 2004). Ap-I и Nf-kB представляют собой основной фактор транскрипции, ведущий к продукции провоспалительных цитокинов (Yeo et al., 2004 Biochem Biophys Res Commun. 30; 320(3):816-24). Стабильность транскриптов провоспалительного цитокина также регулируется через ингибирование p38Map-киназы (Wax et al., 2003. Rheumatism Vol.48. No. 2, pp. 541-550).

Заболевание, связанное с ангиогенезом, включая, но без ограничения: опухолевый ангиогенез, псориаз, ревматоидный артрит и диабетическую ретинопатию

Индукция ангиогенеза регулируется Hsp90-клиентными белками eNOS и Akt в эндотелиальных клетках (Sun и Liao, 2004 Arterioscler Thromb Vase Biol. 24(12):2238-44). Подавление индуцируемого гипоксией фактора (HIF)-1a также может повреждать рост, ангиогенез и созревание сосудов желудочных опухолей на моделях мышей. (Stoeltzing et. al., 2004 J Natl Cancer Inst; 96:946-956).

Диабет типа I и типа II

Ингибирование Hsp90 оказывает сильное действие на передачу сигналов Akt, также как e-nos. Они представляют собой два ключевых регулятора в индуцируемом высокой концентрацией глюкозы апоптозе эндотелиальных клеток при диабете I типа (Lin et al., 2005 J Cell Biochem. 1; 94(1): 194-201) и развитие гипертонии в диабет II-го типа (Kobayashi et. al., 2004 Hypertension, 44(6):956-62).

Иммуносупрессия и трансплантация

Ингибирование Hsp90, как было показано, оказывает понижающее регулирование на Lck, T-клеточную специфическую тирозинкиназу, требующуюся для T-клеточной активации (Yorgin et al., 2000 J. Immunol. 15; 164(6):2915-23).

Заболевание сердца

Ишемия миокарда представляет собой наиболее обычную причину смерти в западном мире. Hsp, и в особенности Hsp70 (индуцируемый лечением радициколом), демонстрируют кардиозащитную активность на кардиомиоциты крыс (Griffin et al., 2004). Ингибирование Hsp90 приводит к высвобождению HSF-1 из шаперонного комплекса и его последующей активации Hsp-генов. Ингибирование Hsp90 также ведет к понижающей регуляции HIF-1, который участвует в патогенезе ишемической болезни сердца и удара.

Инфекционное заболевание

Вирусная NS2/3-протеаза гепатита C представляет собой Hsp90-клиентный белок и для вирусного процессинга и репликации требуется активность Hsp90 (Whitney et al., 2001, Proc. Natl.Acad. Sci USA, 20;98(24):13931-5).

Заболевание, вызываемое паразитом

Гельдамицин (GA) проявлял антималярийную активность к гену-ортологу Hsp90 из Plasmodium falciparum. Рост Plasmodium ингибируется гельдамицином при IC₅₀, подобно наблюдаемой для хлорохина. GA также был эффективен против хлорохин-устойчивых штаммов Plasmodium falciparum (Kamar et al., 2003, Malar. J. 15; 2(l):30).

Биологическая активность соединений по изобретению, например в качестве ингибиторов Hsp90, может быть измерена с использованием анализов, изложенных в примерах ниже, например, в экспериментах по калориметрии изотермического титрования (ITC), описанных в примере 80 и анализах антипролиферативной активности, описанных в примере 81. Уровень активности, проявляемый данным соединением в ITC-анализе, может быть определен в терминах величины Kd, и предпочтительные соединения по настоящему изобретению представляют собой соединения, имеющие величину K_d менее 1 микромоль, более предпочтительно менее 0,1 микромоль. В анализах антипролиферативной активности уровень активности, проявляемый данным соединением в анализе, может быть определен в терминах величины IC₅₀, и предпочтительные соединения по настоящему изобретению представляют собой соединения, имеющие величину IC₅₀ менее 1 микромоль, более предпочтительно менее 0,1 микромоль.

Также было обнаружено, что многие соединения формулы (I) имеют низкую hERG-активность и существенное различие между Hsp90-подавляющей активностью и hERG-активностью.

Предпочтительные соединения формулы (I) имеют значение величин IC₅₀ в отношении hERG, которые больше в 30 раз, или больше в 40 раз, или больше в 50 раз величин IC₅₀ соединений в анализах клеточной пролиферации. Предпочтительные соединения формулы (I) имеют значения величин IC₅₀ в отношении hERG, которые больше чем 5 мкМ, особенно больше чем 10 мкМ, и более предпочтительно более чем 15 мкМ. Некоторые соединения по изобретению имеют значения величин IC₅₀ в отношении hERG, которые больше чем 50 мкМ.

Соединения по изобретению обладают благоприятными свойствами по распределению в организме (ADME) и, в частности, более хорошее распределение в опухоли.

Способы получения соединений формулы (I)

В данном разделе, как во всех других разделах настоящего описания, пока в контексте не указано иное, ссылки на формулу (I) также включают все ее подгруппы и примеры, как определено выше. Если производится ссылка на группу R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ или любую другую группу "R", определение группы является таким, как описано выше и как описано в следующих разделах настоящего описания, пока в контексте не указано иное.

Соединения формулы (I) могут быть получены согласно синтетическим способам, хорошо известным специалисту в данной области. Например, соединения формулы (I) могут быть получены взаимодействием соединения формулы (X):

или его активированной и/или защищенной формы, с амином формулы HNR⁵R⁶ в условиях, пригодных для образования амидной связи, и последующим, если необходимо, удалением любых защитных групп и необязательно преобразованием одного соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I).

Амины формулы HNR⁵R⁶ являются или коммерчески доступными, или могут быть получены с применением способов, хорошо известных специалисту в данной области; см., например, Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, 119, Wiley Interscience, New York; Fiesers' Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-17, John Wiley, edited by Mary Fieser (ISBN: 0-471-58283-2); и Organic Syntheses, Volumes 1-8, John Wiley, edited by Jeremiah P. Freeman (ISBN: 0-471-31192-8).

Карбоновая кислота (X) может быть преобразована в амид формулы (I) сначала через образование хлорангидрида путем обработки карбоновой кислоты тионилхлоридом или взаимодействием с оксалилхлоридом в присутствии каталитического количества диметилформамида, или взаимодействием калиевой соли кислоты с оксалилхлоридом. Хлорангидрид затем может быть введен в реакцию с амином HNR⁵R⁶ в присутствии инертного основания, такого как триэтиламин. Реакция может быть проведена при комнатной температуре в полярном растворителе, таком как диоксан.

В качестве альтернативы для вышеописанного хлорангидридного способа карбоновая кислота (X) может быть преобразована в амид (I) путем взаимодействия с амином HNR⁵R⁶ в присутствии реагентов типа амидосочетания, обычно используемого при образовании пептидных связей. Примеры таких реагентов включают 1,3-дициклогексилкарбодиимид (DCC) (Sheehan et al., J. Amer. Chem Soc. 1955, 77, 1067), 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимид (обoзначаемый в настоящем описании или как EDC, или EDAC, но также известный в данной области как EDCI и WSCDI) (Sheehan et al., J. Org. Chem., 1961, 26, 2525), реагенты сочетания урониевого типа, такие как гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HATU) и реагенты сочетания фосфониевого типа, такие как гексафторфосфат 1-бензотриазолилокситрис(пирролидин)фосфония (PyBOP) (Castro et al., Tetrahedron Letters, 1990, 31, 205). Реагенты сочетания, на основе карбодиимида, успешно используются в комбинации с 1-гидрокси-7-азабензотриазолом (HOAt) (L. A. Carpino, J. Amer. Chem. Soc., 1993, 115, 4397) или 1-гидроксибензотриазолом (HOBt) (Konig et al., Chem. Ber., 103, 708, 2024-2034). Предпочтительные реагенты сочетания включают EDC (EDAC) и DCC в комбинации с HOAt или HOBt.

Реакцию сочетания обычно проводят в неводном, апротонном растворителе, таком как ацетонитрил, диоксан, диметилсульфоксид, метиленхлорид, диметилформамид или N-метилпирролидин или в водном растворителе, необязательно вместе с одним или несколькими смешивающимися сорастворителями. Реакция может быть проведена при комнатной температуре или, если исходные реагенты менее реакционноспособны (например, в случае электронодефицитных анилинов, несущих электроноакцепторные группы, такие как сульфонамидогруппы), при соответственно повышенной температуре. Реакция может быть проведена в присутствии инертного основания, например третичного амина, такого как триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин.

Иллюстративные пути к соединениям формулы (I) описаны более детально ниже.

Соединения формулы (I), в которых бензоильный фрагмент является производным 2-гидрокси-5-замещенной бензойной кислоты, могут быть получены через последовательность реакций, показанных на схеме 1.

Исходное вещество для синтетического пути, показанного на схеме 1, представляет собой 5-хлор-2-гидроксибензойную кислоту, которая может быть коммерчески доступной. Преобразование в хлорангидрид осуществляют нагреванием с тионилхлоридом. Хлорангидрид может быть применен, или in situ и введен в реакцию с различными аминами, или может быть выделен в виде стабильного белого твердого вещества. Другие простые 2-гидрокси-5-замещенные бензойные кислоты могут быть использованы в данной методике для синтеза других амидов 2-гидрокси-5-замещенных бензойных кислот.

Схема 1: Амиды 5-хлор-2-гидроксибензойной кислоты

Соединения формулы (I) также могут быть получены согласно способу, показанному на схеме 2. Исходное вещество для синтетического пути, показанного на схеме 2, представляет собой 4-этиланизол, который может быть коммерчески доступным. Преобразование в карбоновую кислоту может быть осуществлено путем литиирования при низкой температуре с последующим гашением полученного аниона твердым диоксидом углерода. Карбоновая кислота может быть подвергнута реакции сочетания с различными аминами с использованием стандартных реагентов типа амидосочетания, обычно используемого при образовании пептидных связей, как описано выше.

Снятие защиты простого метилового эфира может быть проведено с использованием трибромида бора (например, способом, описанным в Synthesis, 1991, 469), что дает соединение формулы (I). Способ, проиллюстрированный на схеме 2, может быть применен для получения других простых 2-гидрокси-5-замещенных бензойных кислот, которые затем могут быть подвергнуты реакции сочетания с соответствующим амином, что дает соединения формулы (I). Способ сочетания промежуточных кислот с аминами, анилинами или аминогетероциклическими соединениями, с последующим удалением любых защитных групп, является непосредственно направленным к цели и пригоден для синтеза больших комбинаторных библиотек молекул, которые могут быть полезны для настоящего изобретения. Примеры комбинаторных библиотек описаны в Solid-Phase Synthesis and Combinatorial Technologies by Pierfausto Seneci. Wiley-Interscience, New York, 2000, xii+637 pp. ISBN 0471331953).

Схема 2

Соединения формулы (I) также могут быть получены согласно способам, описанным на схеме 3. Исходное вещество, 3-трет-бутил-4-гидроксибензойная кислота (X=трет-бутил), является коммерчески доступным и может быть подвергнуто реакции сочетания с использованием реагентов амидосочетания (как подчеркивалось выше) с широким диапазоном аминов формулы HNR⁵R⁶, что приводит к соединениям по изобретению. Другое исходное вещество, представленное на схеме 3, 3-изопропил-4-гидроксибензойная кислота (X=изопропил), может быть получено модификацией описанной в литературе методики с использованием четыреххлористого углерода и медного порошка в реакции типа Фриделя-Крафтса, в которой представители промежуточных соединений подвергаются гидролизу до карбоновой кислоты (J. Chem. Soc., Chem. Commun. 1985, 1134). Способ Фриделя-Крафтса может быть применен для получения других простых 2-гидрокси-3-замещенных бензойных кислот.

Схема 3: Амиды 3-алкил-4-гидроксибензойной кислоты

Соединения формулы (I) также могут быть получены согласно способу, представленному на схеме 4. Амиды 2,4-дигидрокси-5-изопропилбензойной кислоты могут быть получены амидосочетанием с использованием реагентов сочетания (как указано выше) из защищенного простого дибензилэфирного промежуточного соединения, показанного на схеме, с последующим каталитическим гидрированием с использованием газообразного водорода и палладия на углероде. Промежуточное соединение бензойной кислоты, как таковое, получают ацилированием по Фриделю-Крафтсу метилового эфира 2,4-дигидроксибензойной кислоты (из коммерческих источников) с применением описанной в литературе методики (J. Ind. Chem. Soc., 1953, 30, 269). Как правило, ацилирование фенола по Фриделю-Крафтсу проводят обработкой фенола ацилирующим агентом (таким как хлорангидрид или ангидрид кислоты) в присутствии кислоты Льюиса в качестве катализатора (такой как трифторид бора или хлорид алюминия) или при комнатной температуре, или при более высоких температурах (60-120ºC). Бензильная защита фенольных групп, реакция Виттига кетона с олефином и гидролиз сложного эфира (омыление) могут быть проведены в стандартных условиях, хорошо известных специалистам в области органического синтеза (см., например, Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, 119, Wiley Interscience, New York; Fiesers' Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-17, John Wiley, edited by Mary Fieser (ISBN: 0-471-58283-2); и Organic Syntheses, Volumes 1-8, John Wiley, edited by Jeremiah P. Freeman (ISBN: 0-471-31192-8). Например, реакция Виттига может быть проведена в инертном полярном растворителе (таком как тетрагидрофуран) и может включать обработку альдегида или кетона фосфорными илидами, которые могут быть получены реакцией фосфониевой соли с основанием (таким как бутиллитий или трет-бутоксид калия). Гидролиз сложного эфира до карбоновой кислоты обычно проводят обработкой водным гидроксидом щелочного металла, таким как гидроксид натрия. Реакция омыления может быть проведена с использованием органического сорастворителя, такого как спирт (например, метанол) и реакционную смесь обычно нагревают до некритической температуры, например приблизительно до 50-60ºC.

Следует понимать, что другие 2,4-дигидрокси-5-замещенные бензойные кислоты могут быть получены с применением данной методики для синтеза различных примеров соединений формулы 1, не приведенных в настоящем описании в качестве примера специально.

На схеме 4, как альтернатива для применения реагента Виттига MePPH₃Br для образования олефина (XXVI), кетон (XXV) может быть подвергнут взаимодействию с метилмагнийбромидом в стандартных условиях реакции Гриньяра, что дает промежуточное гидроксисоединение, которое затем дегидратируют до олефина по реакции с подходящим реагентом, таким как ацетат натрия и уксусная кислота.

Промежуточное соединение, 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойная кислота (XXVII) и его предшественники, соединения (XXV) и (XXVI), показанные на схеме 4, как предполагается, являются новыми и, таким образом, каждое из соединений составляет следующий аспект изобретения.

Амиды 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (XXVIII), как предполагается, также являются новыми и составляют следующий аспект изобретения.

Схема 4: Амиды 2,4-дигидрокси-5-изопропилбензойной кислоты

Промежуточное соединение, 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойная кислота (XXVII), на схеме 4, может быть получена с применением разнообразных способов, хорошо известных специалисту в данной области. Например, соединение (XXVII) может быть получено синтетическим путем, представленным на схеме 4A.

Схема 4A

Как показано на схеме 4A, 5-бром-2,4-дигидроксибензойную кислоту подвергают бензилированию с использованием бензилбромида в присутствии основания, такого как карбонат калия, что дает бензиловый эфир бис-бензилоксибромбензойной кислоты (XXX). Эфир (XXX) затем подвергают взаимодействию с изопренилтрифторборатом калия в присутствии соединения палладия (0) или палладия (II) и основанием, что дает изопропенилбисбензиловый эфир (XXXI). Соединение палладия может представлять собой соединение палладия(O), такое как Pd(PPh₃)₄, или соединение палладия(II), такое как [1,1'-бис-(дифенилфосфин)ферроцен]дихлорпалладий(II). Основание может представлять собой органическое основание, такое как н-бутиламин, или неорганическое основание, такое как карбонат металла, например карбонат цезия. Реакцию с изопренилтрифторборатом калия обычно проводят при температуре кипения с обратным холодильником в течение продолжительного времени, например 15 часов или более. Полученный изопропенилбисбензилоксиэфир (XXXI) затем подвергают гидролизу, что дает карбоновую кислоту (XXVII), с использованием, например, гидроксида щелочного металла, такого как гидроксид лития, обычно при нагревании до температуры, не являющейся критически высокой.

Соединения формулы (I) также могут быть получены путем, проиллюстрированным на схеме 5. Амиды 4-гидрокси-3-(l',2'-диметилпропил)бензойной кислоты могут быть получены амидосочетанием с использованием стандартных реагентов сочетания (как указано выше) из алкилзамещенной кислоты. Сама по себе олефиновая кислота может быть получена перегруппировкой Кляйзена предшествующего простого эфира, как показано на схеме, путем термической перегруппировки в анизол, затем омылением, что в этом случае может давать более одного изомера олефина; основной изомер показан на схеме. Такие реакции Кляйзена хорошо известны в литературе, см., например, J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1 1981. 897. Сам по себе простой эфир может быть получен путем простого алкилирования коммерчески доступного этилового эфира 4-гидроксибензойной кислоты. Реакции алкилирования и омыления являются простыми модификациями, которые могут быть проведены в различных условиях (см., например, Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, 119, Wiley Interscience, New York; Fiesers' Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-17, John Wiley, edited by Mary Fieser (ISBN: 0-471-58283-2); и Organic Syntheses, Volumes 1-8, John Wiley, edited by Jeremiah P. Freeman (ISBN: 0-471-31192-8)). Следует понимать, что другие 4-гидрокси-3-замещенные бензойные кислоты могут быть получены с применением данной методики для синтеза различных примеров соединений формулы 1, не приведенных в настоящем описании в качестве примера специально.

Схема 5: Амиды 4-гидрокси-3-(l',2'-диметилпропил)бензойной кислоты

Соединения формулы (I) также могут быть получены согласно способу, представленному на схеме 6. 2,4-Дигидрокси-5-бромбензойная кислота, используемая в качестве исходного вещества, является коммерчески доступной. Простые стадии защиты и снятия защиты приводят к предшественнику бензойной кислоты (см., например Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, 119, Wiley Interscience, New York; Fiesers' Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-17, John Wiley, edited by Mary Fieser (ISBN: 0-471-58283-2); и Organic Syntheses, Volumes 1-8, John Wiley, edited by Jeremiah P. Freeman (ISBN: 0-471-31192-8), который может быть использован в реакциях амидосочетания с разнообразными аминами (как указано выше). Указанные промежуточные амиды могут быть подвергнуты реакциям кросс-сочетания по Сузуки для получения алкилзамещенных соединений. Широкий диапазон условий сочетания по Сузуки описан в литературе, и условия, используемые в данном случае, взяты из J. Am. Chem. Soc. 2003, 11148. Реакция сочетания по Сузуки также является широко используемой при синтезе алкиларильных и ариларильных соединений. Реакцию Сузуки обычно проводят в присутствии палладиевого катализатора, такого как бис(три-трет-бутилфосфин)палладий, и основания (например, карбоната, такого как карбонат калия). Реакцию можно проводить в системе водного растворителя, например, водного этанола, и реакционную смесь обычно подвергают нагреванию, например, до температуры более 100ºC. Множество боронатов, пригодных для использования при получении соединений по изобретению, являются коммерчески доступными, например, из Boron Molecular Limited of Noble Park, Australia, или из Combi-Blocks Inc, of San Diego, USA. Если боронаты не являются коммерчески доступными, они могут быть получены способами, известными в данной области, например, как описано в обзоре N. Miyaura and A. Suzuki, Chem. Rev. 1995, 95, 2457. Так, боронаты могут быть получены взаимодействием соответствующего бромсоединения с алкиллитием, таким как бутиллитий, и последующей реакцией с бороновым эфиром. Полученное производное сложного боронового эфира, при необходимости, может быть гидролизовано, что дает соответствующую бороновую кислоту. Конечные продукты последовательности реакций, проиллюстрированной на схеме 6, получают каталитическим гидрированием (как указано выше) для удаления бензильных защитных групп и для восстановления олефина, образуемого в реакции Сузуки, до алкильного заместителя. Следует понимать, что другие 2,4-дигидрокси-5-замещенные бензойные кислоты могут быть получены с применением данной методики для синтеза различных примеров соединений формулы I, не приведенных в настоящем описании в качестве примера специально.

Схема 6: Амиды 2,4-дигидрокси-5-(алкил)бензойной кислоты

Соединения формулы (I), где группа NR⁵R⁶ необязательно замещена изоиндолиновой группой, например, как в соединениях формул (VII) и (VIIa), могут быть получены способами, проиллюстрированными на схеме 7, или аналогичными способами.

Схема 7

Как показано на схеме 7, необязательно замещенный 1,2-диметилбензол (XI) нагревают с N-бромсукцинимидом в присутствии дибензоилпероксида, что дает дибромсоединение (XII). Реакцию обычно проводят в четыреххлористом углероде при нагревании при кипении с обратным холодильником. Дибромсоединение (XII) затем подвергают взаимодействию с соединением PG-NH₂, где PG представляет собой защитную группу, такую как тозил или параметоксибензил, в присутствии основания, такого как гидрид металла (например, гидрид натрия), если PG представляет собой тозильную группу; или карбонат щелочного металла (например, карбоната натрия), если PG представляет собой параметоксибензил. Защитная группа PG затем может быть удалена, что дает амин (XIV). Так, например, тозильная группа может быть удалена путем нагревания со смесью фенола, бромистоводородной кислоты и пропановой кислоты, тогда как параметоксибензильная группа может быть удалена стандартным образом с использованием трифторуксусной кислоты и анизола. Амин (XIV) затем подвергают реакции сочетания с карбоновой кислотой формулы (X), как описано выше.

При варьировании последовательности реакций схемы 7 одна или несколько функциональных групп R^10b, присутствующих в защищенном изоиндолине (XIII) или изоиндолиновом соединении со снятой защитой (XIV), могут быть преобразованы в другие группы R^10b. Например, если группа R^10b в соединении (XIV) представляет собой нитрогруппу, она может быть восстановлена, что дает соответствующую аминогруппу, например, путем каталитического гидрирования в присутствии катализатора, палладия на углероде. В следующем примере, когда R^10b в соединении (XIII) представляет собой сложную эфирную группу (например, CO₂Me), она может быть гидролизована, что приводит к карбоновой кислоте, которая затем может быть подвергнута взаимодействию с амином, таким как морфолин, что дает соответствующий амид. Позже могут быть проведены дополнительные взаимные преобразования функциональных групп (например, восстановление амида до соответствующего аминометильного соединения алюмогидридом лития) перед удалением защитной группы PG.

Альтернативный синтез изоиндолинового соединения (XIV) показан на схеме 8.

Схема 8

Исходное вещество для схемы 8 представляет собой ортодиэфир (XV), который подвергают гидролизу до соответствующей дикарбоновой кислоты (XVI) с использованием гидроксида щелочного металла, такого как гидроксид калия, перед проведением циклизации до фталевого ангидрида (XVII) взаимодействием с уксусным ангидридом. Фталевый ангидрид (XVII) может быть преобразован в соответствующий фталимид (XVIII) взаимодействием с формамидом при повышенной температуре (например, приблизительно 210ºC). Фталимид (XVIII) может быть затем восстановлен до изоиндолина (XIV) с использованием приемлемого восстанавливающего реагента, такого как боран в тетрагидрофуране (ТГФ).

Соединения формулы (VIIb), как определено выше, могут быть получены взаимодействием соединения формулы (XIX) или его защищенного производного с соединением формулы (XX):

где n, R³, R^4a, R⁸ и R^10cc являются такими, как определено выше, в условиях образования амида, как описано выше и в примерах.

Многие соединения формулы (XX) являются новыми и, как таковые, образуют другой аспект изобретения. Так, в следующем аспекте, изобретение предоставляет соединение формулы (XX), но исключая любые и все соединения, известные как таковые в предшествующем уровне техники.

В пределах формулы (XX), отдельные промежуточные соединения по изобретению могут быть представлены формулой (XXI):

где n равно 0 или 1; M представляет собой N или CHOH и R²⁵ представляет собой атом водорода или метил; при условии, что, когда n равно 0 и R²⁵ представляет собой метил, то M представляет собой CHOH.

Отдельные промежуточные соединения в пределах формулы (XXI) представляют собой соединения (XXII), (XXIII) и (XXIV) ниже.

Промежуточные соединения формулы (XXI) могут быть получены способами, хорошо известными специалисту в данной области или аналогичными способами. Например, промежуточное соединение XXII может быть получено обменом галогена на литий в соответствующем N-защищенном 5-бромизоиндолине, гашением 1-метил-4-пиперидоном и последующим снятием защиты. Промежуточное соединение XXII может быть получено палладиевым сочетанием по Бухвальду (Buchwald) 4-BOC-пиперазина и соответствующего N-защищенного 5-бромизоиндолина, с последующим снятием защиты. Один способ получения промежуточного соединения XXIV включает образование амида Вайнреба (Weinreb) из соответствующим образом N-защищенной изоиндол-5-карбоновой кислоты, восстановление до альдегида с последующим восстановительным аминированием и последующим снятием защиты.

После получения, если позволяют группы заместителей, одно соединение формулы (I) или его защищенная форма может быть преобразовано в другое соединение формулы (I).

Например, когда R¹ и R², оба представляют собой защищенные гидроксигруппы (например, бензилоксигруппы), и R³ представляет собой бром, атом брома может быть заменен трифторметилом путем взаимодействия с трифторацетатной солью (например, трифторацетатом натрия) и йодидом меди (I) в полярном растворителе, таком как диметилформамид (ДМФА). По другой методике соединения формулы (I), где R⁸ представляет собой фтор, могут быть получены из соединений формулы (I), где R⁸ представляет собой атом водорода, электрофильным фторированием. Электрофильное фторирование может быть проведено с использованием фторирующего реагента, такого как бис(тетрафторборат) 1-(хлорметил)-4-фтор-1,4-диазониабицикло[2,2,2]октана или подобных N-фтордиазониевых соединений.

По следующей методике соединения формулы (I), где R¹ и R², оба представляют собой гидроксигруппы, могут быть подвергнуты монометилированию, что дает соединение, где одна из R¹ и R² представляет собой метоксигруппу, взаимодействием с одним эквивалентом метилирующего реагента, такого как диметилсульфат. Реакцию метилирования обычно проводят в полярном растворителе, таком как ацетонитрил, в присутствии основания, например, карбоната щелочного металла, такого как карбонат калия. Аналогичные реакции метилирования также могут быть проведены на промежуточных соединениях, содержащих две фенольных гидроксигруппы.

Многие методики, описанные ниже и применяемые в данном синтезе, хорошо известны специалистам в данной области, а также примеры алкилирования, ацилирования, взаимных преобразований функциональных групп; реагенты и условия проведения таких преобразований могут быть найдены, например, в Advanced Organic Chemistry, by Jerry March, 4 ^th Edition, 119, Wiley Interscience, New York; Fiesers' Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-17, John Wiley, edited by Mary Fieser (ISBN: 0-471-58283-2); и Organic Syntheses, Volumes 1-8, John Wiley, edited by Jeremiah P. Freeman (ISBN: 0-471-31192-8).

Следует понимать, что модификации описанных путей, а также конкретные примеры и способы получения, приведенные ниже, дают возможность синтеза многочисленных дополнительных примеров соединений, заявленных в формуле 1. Например, могут быть получены альтернативные исходные вещества для бензойной кислоты с различными или дополнительными замещающими фрагментами.

В многочисленных реакциях, описанных выше, может быть необходимо защитить одну или несколько групп для предотвращения прохождения реакции в нежелательном положении молекулы. Примеры защитных групп, способов защиты и снятия защиты для функциональных групп, могут быть найдены в Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green and P. Wuts; 3rd Edition; John Wiley and Sons, 1999).

Гидроксигруппа может быть защищена, например, в виде простого эфира (-OR) или сложного эфира (-OC(=O)R), например, таких как простой трет-бутиловый эфир; простой бензиловый, бензгидриловый (дифенилметиловый) или тритиловый (трифенилметиловый) эфир; простой триметилсилиловый или трет-бутилдиметилсилиловый эфир; или ацетиловый эфир (-OC(=O)CH₃, -OAc). Когда гидроксигруппа представляет собой фенольную гидроксигруппу, например в соединениях формулы (I), где R¹ и/или R² представляют собой гидрокси, предпочтительной защитной группой является бензильная группа.

Альдегидная или кетонная группа может быть защищена, например, в виде ацеталя (R-CH(OR)₂) или кеталя (R₂C(OR)₂), соответственно, в которых карбонильная группа (>C=O) преобразована в диэфир (>C(OR)₂), путем реакции, например, с первичным спиртом. Альдегидная или кетонная группа легко регенерируется гидролизом с использованием большого избытка воды в присутствии кислоты. Аминогруппа может быть защищена, например, в виде амида (-NRCO-R) или уретана (-NRCO-OR), например, как: метиламид (-NHCO-CH₃); бензилоксиамид (-NHCO-OCH₂C₆H_5. -NH-Cbz); как трет-бутоксиамид (-NHCO-OC(CH₃)₃, -NH-Boc); 2-бифенил-2-пропоксиамид (-NHCO-OC(CH₃)₂C₆H₄C₆H₅, -NH-Bpoc), как 9-флуоренилметоксиамид (-NH-Fmoc), как 6-нитровератрилоксиамид (-NH-Nvoc), как 2-триметилсилилэтилоксиамид (-NH-Teoc), как 2,2,2-трихлорэтилоксиамид (-NH-Troc), как аллилоксиамид (-NH-Alloc) или как 2-(фенилсульфонил)этилоксиамид (-NH-Psec). Другие защитные группы для аминов, такие как циклические амины и гетероциклические N-H группы, включают толуолсульфонильные (тозильные) и метансульфонильные (мезил/метилсульфонильные) группы и бензильные группы, такие как параметоксибензильная (PMB) группа. Карбокислотная группа может быть защищена в виде сложного эфира, например, как: сложный C_1-7алкиловый эфир (например, метиловый эфир; трет-бутиловый эфир); сложный C_{1-7 г}алогеналкиловый эфир (например, C_{1-7 т}ригалогеналкиловый эфир); сложный три-C_1-7алкилсилил-C_1-7алкиловый эфир; или сложный C_5-2Oарил-C_1-7алкиловый эфир (например, бензиловый эфир; нитробензиловый эфир); или в виде амида, например метиламида. Тиольная группа может быть защищена, например, в виде тиоэфира (-SR), например, как: простой бензиловый тиоэфир; простой ацетамидометиловый тиоэфир (-S-CH₂NHC(=O)CH₃).

Способы очистки

Соединения могут быть выделены и очищены рядом способов, хорошо известных специалистам в данной области, и примеры таких способов включают хроматографические методы, такие как колоночная хроматография (например, флэш-хроматография) и ВЭЖХ. Препаративная ЖХ-МС является стандартным и эффективным методом, используемым для очистки малых органических молекул, таких как описанные в настоящем описании соединения. Методы жидкостной хроматографии (ЖХ) и масс-спектрометрии (МС) могут изменяться для обеспечения лучшего разделения неочищенных веществ и улучшенного определения образцов методом масс-спектроскопии. Оптимизация метода препаративной градиентной жидкостной хроматографии включает изменение колонок, летучих элюентов, модификаторов и градиентов. В данной области хорошо известны способы оптимизации препаративных методов ЖХ-МС и последующего их применения для очистки соединений. Такие методы описаны Rosentreter U, Huber U.; Optimal fraction collecting in preparative LC/MS; J. Comb. Chem.; 2004; 6(2), 159-64 and Leister W, Strauss K, Wisnoski D, Zhao Z, Lindsley C, Development of a custom high-throughput preparative liquid chromatography/mass spectrometer platform for the preparative purification and analytical analysis of compound libraries; J. Comb. Chem.; 2003; 5(3); 322-9.

Альтернативно, методы на основе препаративной жидкостной хроматографии с нормальной фазой могут быть использованы вместо обратнофазных методов. Большинство препаративных систем ЖХ-МС используют жидкостную хроматографию с обратной фазой и летучие кислотные модификаторы, так как такой подход очень эффективен для очистки малых молекул и используемые элюенты совместимы с масс-спектрометрией электрораспылением с положительными ионами. Применение других хроматографических решений, например жидкостной хроматографии с нормальной фазой, альтернативно забуференной подвижной фазы, основных модификаторов и т.д., как указано в аналитических способах, описанных выше, могут быть альтернативно использованы для очистки соединений.

Фармацевтические композиции

В то время как активное соединение может вводиться одно, предпочтительно, чтобы оно присутствовало в фармацевтической композиции (например, препарат), содержащий по меньшей мере одно активное соединение по изобретению вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, адъювантами, эксципиентами, разбавителями, наполнителями, буферами, стабилизаторами, консервантами, лубрикантами или другими веществами, хорошо известными специалистам в данной области, и необязательно другими терапевтическими или профилактическими агентами; например, агентами, которые уменьшают или смягчают некоторые побочные эффекты, ассоциированные с химиотерапией. Конкретные примеры таких агентов включают противорвотные агенты и агенты, которые предотвращают или уменьшают продолжительность нейтропении, ассоциированной с химиотерапией, и предотвращают осложнения, которые возникают из-за пониженных уровней красных кровяных клеток или белых кровяных клеток; например эритропоэтин (EPO), гранулоцито/макрофаго-колониестимулирующий фактор (GM-CSF) и гранулоцит-колониестимулирующий фактор (G-CSF).

Таким образом, настоящее изобретение далее представляет фармацевтические композиции, как определено выше, и способы получения фармацевтических композиций, включающие смешение по меньшей мере одного активного соединения, как определено выше, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами, буферами, адъювантами, стабилизаторами или другими веществами, как описано выше.

Термин "фармацевтически приемлемый", используемый в настоящем описании, относится к соединениям, веществам, композициям и/или дозированным формам, которые в пределах озвученного медицинского диагноза пригодны для применения в контакте с тканями пациента (например, человека) без избыточной токсичности, раздражения, аллергического ответа или другой проблемы или осложнения, что соответствует приемлемому соотношению польза/риск. Каждый, носитель, эксципиент и т.д. должен также быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими компонентами композиции. Согласно этому, в следующем аспекте, изобретение предоставляет соединения формулы (I) и ее подгрупп, как определено выше, в форме фармацевтических композиций.

Фармацевтические композиции могут быть в любой форме, пригодной для перорального, парентерального, местного, интраназального, глазного, ушного, ректального, интравагинального или чрескожного введения. Если композиции предназначаются для парентерального введения, они могут быть составлены в композиции для внутривенного, внутримышечного, интраперитонеального, подкожного введения или для прямой доставки в целевой орган или ткань путем инъекции, инфузии или другими способами доставки. Доставка может осуществляться путем болюсной инъекции, краткосрочной инфузией или продолжительной инфузией и может осуществляться путем пассивной доставки или путем использования приемлемого инфузионного насоса.

Фармацевтические препараты, адаптированные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекции, которые могут содержать антиоксидаты, буферы, бактериостатики, сорастворители, органические смеси растворителей, циклодекстриновые комплексные агенты, эмульгирующие агенты (для образования и стабилизации эмульсионных препаратов), липосомные компоненты для образования липосом, гелеобразующие полимеры для образования полимерных гелей, защитные средства для лиофилизации и комбинации агентов для, помимо прочего, стабилизации активного компонента в растворимой форме и приведения препарата к изотоничности с кровью предполагаемого реципиента. Фармацевтические препараты для парентерального введения также могут находиться в форме водных и неводных стерильных суспензий, которые могут включать суспендирующие агенты и загущающие агенты (R.G. Strickly, Solubilizing Excipients in oral and injectable formulations, Pharmaceutical Research, Vol. 21(2) 2004, p. 201-230).

Молекула лекарственного средства, которая является ионизуемой, может быть растворена до желаемой концентрации путем регулировки pH, если pK_a лекарственного средства достаточно отклоняется от величины pH препарата. Приемлемый диапазон pH составляет 2-12 для внутривенного и внутримышечного введения, но подкожный диапазон pH составляет 2,7-9,0. pH раствора регулируется или путем солевой формы лекарственного средства, сильными кислотами/основаниями, такими как хлористоводородная кислота или гидроксид натрия, или растворами буферов, которые включают, но без ограничения, буферирующие растворы, полученные из глицина, цитрата, ацетата, малеата, сукцината, гиститдина, фосфата, трис(гидроксиметил)аминометана (TRIS) или карбоната.

Комбинация водного раствора и водорастворимого органического растворителя/поверхностно-активного вещества (то есть coрастворителя) часто используется в инъецируемых препаратах. Водорастворимые органические растворители и поверхностно-активные вещества, используемые в инъецируемых рецептурах, включают, но без ограничения, пропиленгликоль, этанол, полиэтиленгликоль 300, полиэтиленгликоль 400, глицерин, диметилацетамид (DMA), N-метил-2-пирролидон (NMP; Pharmasolve), диметилсульфоксид (ДМСО), Солютол HS 15,

Кремофор EL, Кремофор RH 60 и полисорбат 80. Такие препараты обычно могут быть, но не всегда, разведены перед инъекцией.

Пропиленгликоль, PEG 300, этанол, Кремофор EL, Кремофор RH 60 и полисорбат 80 представляют собой органические полностью смешивающиеся с водой растворители и поверхностно-активные вещества, используемые в коммерчески доступных инъецируемых препаратах и могут быть использованы в комбинации, каждый, друг с другом. Полученные органические препараты обычно разводят по меньшей мере двукратно перед болюсной i.v. инфузией или инфузией i.v.

Альтернативно, повышенная растворимость в воде может быть достигнута через образование молекулярного комплекса с циклодекстринами.

Липосомы представляют собой закрытые сферические везикулы, образованные из внешних липидных двухслойных мембран и внутреннего водного центра с общим диаметром <100 мкм. В зависимости от уровня гидрофобности умеренно гидрофобные лекарственные средства могут быть переведены в растворимую форму через липосомы, если лекарственное средство инкапсулируется или интеркалируется в липосому. Гидрофобные лекарственные средства также могут быть солюбилизированы через липосомы, если молекула лекарственного средства становится компонентом липидной двухслойной мембраны, и в этом случае, гидрофобное лекарственное средство растворяется в липидной части липидного бислоя. Конкретный липосомный препарат содержит воду с фософолипидом при концентрации 5-20 мг/мл, придающий изотоничность агент, буфер с pH 5-8 и необязательно холестерин.

Препараты могут быть предоставлены в контейнерах с одной дозой или с множеством доз, например запаянных ампулах и пузырьках, и могут храниться в высушенном вымораживанием (лиофиолизированном) состоянии, требуя только добавления стерильного жидкого носителя, например воды для инъекции, непосредственно перед применением.

Фармацевтический препарат может быть получен путем лиофилизации соединения формулы (I) или его кислотно-аддитивных солей. Лиофилизация относится к методу сушки композиции вымораживанием. Сушка вымораживанием и лиофилизация, следовательно, использованы в настоящем описании как синонимы. Конкретный способ солюбилизации соединения состоит в том, что полученную композицию очищают, стерильно фильтруют и стерильно переносят в контейнеры, пригодные для лиофилизации (например, пузырьки). В случае пузырьков их частично закрывают лиофильными пробками. Препарат может быть охлажден до замерзания и подвергнут лиофилизации в стандартных условиях, затем герметически закупорен с получением стабильного, сухого лиофильного препарата. Композиция, как правило, имеет низкое остаточное содержание воды, например менее чем 5%, например менее чем 1% по массе, на основе массы лиофилизата.

Композиция для лиофилизации может содержать другие эксципиенты, например загущающие агенты, диспергирующие агенты, буферы, антиоксиданты, консерванты и регуляторы тоничности. Конкретные буферы включают фосфат, ацетат, цитрат и глицин. Примеры антиоксидантов включают аскорбиновую кислоту, бисульфит натрия, метабисульфит натрия, монотиоглицерин, тиомочевину, бутилированный гидрокситолуол, бутилированный гидроксианизол и соли этилендиаминтетрауксусной кислоты. Консерванты могут включать бензойную кислоту и ее соли, сорбиновую кислоту и ее соли, алкиловые эфиры парагидроксибензойной кислоты, фенол, хлорбутанол, бензиловый спирт, тимерозал, бензалконийхлорид и цетилпиридинийхлорид. Буферы, приведенные выше, так же как декстроза и хлорид натрия, могут быть использованы для регулировки тоничности, если необходимо.

Агенты для придания объема обычно используются в технологии лиофилизации для облегчения процесса и/или предоставления объема, и/или механической целостности лиофилизату. Агент для придания объема означает неограниченно водорастворимый, твердый гранулированный разбавитель, который, когда вместе лиофилизируется с соединением или его солью, обеспечивает физическую стабильность лиофилизата, более оптимальный процесс сушки вымораживанием и быстрое и полное восстановление влагосодержания. Агент для придания объема также может быть использован для того, чтобы сделать раствор изотоничным.

Водорастворимым агентом для придания объема может являться любой из фармацевтически приемлемых инертных твердых веществ, обычно используемых для лиофилизации. Такие агенты для придания объема включают, например, сахара, такие как глюкоза, мальтоза, сахароза и лактоза; полиспирты, такие как сорбит или маннит; аминокислоты, такие как глицин; полимеры, такие как поливинилпирролидин; полисахариды, такие как декстран.

Отношение массы агента для придания объема к массе активного соединения обычно находится в пределах диапазона приблизительно от 1 до приблизительно 5, например приблизительно от 1 до приблизительно 3, например в диапазоне приблизительно 1-2.

Альтернативно, они могут быть предоставлены в форме раствора, который может быть концентрирован и запаян в подходящую ампулу. Стерилизация дозированных форм может быть проведена путем фильтрования или путем нагревания в автоклаве ампул и их содержимого на соответствующих стадиях процесса получения препарата. Поставляемый препарат может требовать, перед доставки, дальнейшего разведения или приготовления, например разведения в подходящих стерильных инфузионных пакетах.

Приготовленные инъецируемые растворы и суспензии для немедленного введения могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток. В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения фармацевтическая композиция находится в форме, пригодной для внутривенного (i.v.) введения, например путем инъекции или инфузии.

В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция находится в форме, пригодной для подкожного (s.c.) введения.

Фармацевтические дозированные формы, приемлемые для орального введения, включают таблетки, капсулы, каплеты, пилюли, лепешки, сиропы, растворы, порошки, гранулы, эликсиры и суспензии, подъязычные таблетки, пластинки или пластыри и защечные пластыри.

Фармацевтические композиции, содержащие соединения формулы (I), могут быть сформулированы согласно известным методикам, см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, USA.

Таким образом, таблетированные композиции могут содержать единичную дозу активного соединения вместе с инертным разбавителем или носителем, таким как сахар или сахарный спирт, например лактозой, сахарозой, сорбитом или маннитом; и/или полученным не из сахара разбавителем, таким как карбонат натрия, фосфат кальция, карбонат кальция, или целлюлозой или ее производным, таким как метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, и крахмалами, такими как кукурузный крахмал. Таблетки также могут содержать такие стандартные компоненты, как связующие и гранулирующие агенты, такие как поливинилпирролидон, дезинтегрирующие агенты (например, способные к набуханию поперечно-сшитые полимеры, такие как поперечно-сшитая карбоксиметилцеллюлоза), лубриканты (например, стеараты), консерванты (например, парабены), антиоксиданты (например, BHT), буферирующие агенты (например, фосфатные или цитратные буферы) и вспенивающие агенты, такие как цитрат/бикарбонатные смеси. Такие эксципиенты хорошо известны и нет необходимости обсуждать их детально.

Капсулированные препараты могут быть в виде твердых желатиновых или мягких желатиновых капсул и могут содержать активный компонент в твердой, полутвердой или жидкой форме. Желатиновые капсулы могут быть приготовлены из животного желатина или синтетического или их эквивалентов растительного происхождения.

Твердые дозированные формы (например, таблетки, капсулы и т.д.) могут быть покрытыми или непокрытыми, но, как правило, имеют покрытие, например покрытие из защитной пленки (например, воск или лак) или покрытие, контролирующее высвобождение. Покрытие (например, полимер типа Eudragit™) может быть оформлено для высвобождения активного компонента в желательном месте в пределах желудочно-кишечного тракта. Таким образом, покрытие может быть выбрано таким образом, чтобы разлагаться в определенных условиях pH в пределах желудочно-кишечного тракта, таким образом, селективно высвобождая соединение в желудке, или в подвздошной кишке, или двенадцатиперстной кишке.

Вместо или в добавление к покрытию, лекарственное средство может быть предоставлено в твердой матрице, включающей агент, контролирующий высвобождение, например агент, задерживающий высвобождение, который может быть адаптирован для селективного высвобождения соединения в условиях переменной кислотности или щелочности в желудочно-кишечном тракте. Альтернативно, материал матрицы или покрытия, замедляющего высвобождение, может принимать форму легко разрушаемого полимера (например, полимера малеинового ангидрида), который, по существу, непрерывно разлагается по мере того, как дозированная форма проходит через желудочно-кишечный тракт. В качестве следующей альтернативы активное соединение может быть составлено в систему доставки, которая обеспечивает осмотический контроль высвобождения соединения. Препараты осмотического высвобождения и другого отсроченного или замедленного высвобождения могут быть приготовлены согласно способам, хорошо известным специалистам в данной области.

Фармацевтические препараты могут быть представлены пациенту в "пакетах пациента", содержащих полный курс лечения в одной упаковке, обычно блистерной упаковке. Пакеты пациента имеют преимущество по сравнению с традиционными рецептами, где фармацевт выделяет пациенту порцию фармацевтического препарата из объемного комплекта, в том, что пациент всегда имеет доступ к рекламному вкладышу, содержащемуся в пакете пациента, обычно отсутствующему в рецептах для пациента. Включение рекламного вкладыша, как было показано, улучшает соблюдение пациентом указаний лечащего врача.

Композиции для местного применения включают мази, кремы, спреи, пластыри, гели, жидкие капли и вкладки (например, внутриглазные вкладки). Такие композиции могут быть сформулированы согласно известным способам.

Композиции для парентерального введения обычно предоставляются как стерильные водные или масляные растворы или тонкие суспензии, или могут быть предоставлены в высокодисперсной форме стерильного порошка для незапланированного приготовления инъекции со стерильной водой.

Примеры препаратов для ректального или интравагинального введения включают пессарии и суппозитории, которые могут быть, например, приготовлены из профилированного формованного или воскового материала, содержащего активное соединение.

Композиции для введения путем ингаляции могут иметь форму ингалируемых порошковых композиций или жидкостей или порошковых спреев, и могут быть введены в стандартной форме с использованием устройств порошковой ингаляции или устройств аэрозольного дозирования. Такие устройства хорошо известны. Для введения путем ингаляции, порошковые препараты, как правило, содержат активное соединение вместе с инертным твердым порошкообразным разбавителем, таким как лактоза.

Соединения формулы (I) будут обычно предоставлены в единичной дозированной форме и, как таковые, будут содержать соединение, достаточное для предоставления желаемого уровня биологической активности. Например, препарат может содержать от 1 нанограмма до 2 граммов активного компонента, например от 1 нанограмма до 2 миллиграммов активного компонента. В пределах указанного диапазона конкретные поддиапазоны для соединения составляют от 0,1 миллиграммов до 2 граммов активного компонента (более конкретно от 10 миллиграммов до 1 грамма, например от 50 миллиграммов до 500 миллиграммов) или от 1 микрограмма до 20 миллиграммов (например от 1 микрограмма до 10 миллиграммов, например, от 0,1 миллиграммов до 2 миллиграммов активного компонента).

Для пероральных композиций, единичная дозированная форма может содержать от 1 миллиграмма до 2 граммов, более конкретно от 10 миллиграммов до 1 грамма, например от 50 миллиграммов до 1 грамма, например от 100 миллиграммов до 1 грамма активного соединения.

Активное соединение будет вводиться пациенту, нуждающемуся в этом (например, человеку или животному), в количестве, достаточном для достижения желаемого терапевтического эффекта.

Способы лечения

Предполагается, что соединения формулы (I) и подгрупп, как определено выше, могут быть полезны при профилактике или лечении ряда болезненных состояний, опосредованных Hsp90-клиентных белков. Примеры таких заболеваний и состояний приведены выше.

Обычно соединения вводят субъекту, нуждающемуся в таком введении, например, человеку или животному, предпочтительно человеку.

Соединения обычно вводят в количествах, которые являются терапевтически или профилактически полезными и которые, как правило, являются нетоксичными. Однако в определенных ситуациях (например, в случае заболеваний, угрожающих жизни), преимущества введения соединения формулы (I) могут перевешивать вред от любых токсических эффектов или побочных эффектов, в таком случае может считаться желательным вводить соединения в количествах, которые ассоциируются с уровнем токсичности.

Соединения могут быть введены в течение продолжительного срока для поддержания благоприятного терапевтического действия или могут вводиться только в течение короткого времени. Альтернативно, они могут быть введены пульсирующим или непрерывным образом.

Конкретная дневная доза соединения формулы (I) может находиться в диапазоне от 100 пикограммов до 100 миллиграммов на килограмм массы тела, более конкретно от 5 нанограммов до 25 миллиграммов на килограмм массы тела, и наиболее конкретно от 10 нанограммов до 15 миллиграммов на килограмм (например, от 10 нанограммов до 10 миллиграммов, и более конкретно от 1 микрограмма на килограмм до 20 миллиграммов на килограмм, например, от 1 микрограмма до 10 миллиграммов на килограмм) на килограмм массы тела, хотя при необходимости могут быть введены более высокие или меньшие дозы. Соединение может вводиться ежедневно или повторяющимся образом, например каждые 2 или 3, или 4, или 5, или 6, или 7, или 10, или 14, или 21, или 28 дней.

В одном особенном графике дозирования пациент будет получать инфузию соединения в течение периодов в один час ежедневно в течение до десяти дней, в частности до пяти дней в течение одной недели, и лечение будет повторено после желаемого интервала времени, такого как от двух до четырех недель, в частности каждые три недели.

Более конкретно, пациент может получать инфузию соединения в течение периодов в один час ежедневно в течение 5 дней и лечение будет повторяться каждые три недели.

В другом особенном графике дозирования пациент получает инфузию в течение от 30 минут до 1 часа, затем сохраняются инфузии переменной продолжительности, например от 1 до 5 часов, например 3 часа.

В следующем особенном графике дозирования пациент получает непрерывную инфузию в течение периода от 12 часов до 5 дней, в частности непрерывную инфузию от 24 часов до 72 часов.

В конечном счете, однако, количество введенного соединения и тип применяемой композиции будут соотноситься с природой заболевания или физиологического состояния, которое подвергается лечению, и будут находиться на усмотрении лечащего врача.

Соединения, как определено выше, могут быть введены как отдельный терапевтический агент или они могут быть введены в комбинированной терапии с одним из нескольких других соединений для лечения конкретного болезненного состояния, например неопластического заболевания, такого как рак, как определено выше.

Примеры других терапевтических агентов или лечений, которые могут быть осуществлены совместно (или одновременно, или в различные интервалы времени) с соединениями формулы (I), включают, но без ограничения:

Ингибиторы топоизомеразы I;

Антиметаболиты;

Тубулин-ориентированные агенты;

ДНК-связывающиеся и ингибиторы топоизомеразы II;

Алкилирующие агенты;

Моноклональные антитела;

Антигормональные препараты;

Ингибиторы сигнальной трансдукции;

Протеосомные ингибиторы;

ДНК метилтрансферазы;

Цитокины и ретиноиды

Хроматин-ориентированные терапии, например, модуляторы HDAC или HAT;

Радиотерапию.

Для случая ингибиторов Hsp90, объединенных с другими терапиями, два или несколько методов лечения могут быть назначены в индивидуально изменяющемся графике дозирования и различными путями.

Если соединение вводят в комбинированной терапии с одним, двумя, тремя, четырьмя или более другими терапевтическими агентами (предпочтительно одним или двумя, более предпочтительно одним), соединения могут вводиться одновременно или последовательно. При последовательном введении они могут быть введены в близко расположенных интервалах времени (например, в течение периода 5-10 минут) или в более длительных интервалах (например, спустя 1, 2, 3, 4 или более часов, или спустя даже более продолжительные периоды, если требуется), точный режим дозирования будет соответствовать свойствам терапевтического агента(ов).

Соединения по изобретению также могут вводиться в сочетании с нехимиотерапевтическими терапиями, такими как радиотерапия, фотодинамическая терапия, генная терапия; хирургическим вмешательством и контролируемыми диетами.

Для применения в комбинированной терапии с другим химиотерапевтическим агентом соединение и один, два, три, четыре или более других терапевтических агентов могут быть, например, сформулированы вместе в дозированной форме, содержащей два, три, четыре или более терапевтических агентов. Альтернативно, индивидуальные терапевтические агенты могут быть сформулированы отдельно и предоставлены вместе в форме набора, необязательно с инструкциями для их применения.

Специалисту в данной области обычно известны, согласно его или ее общим знаниям, режимы дозирования и комбинированные терапии для применения.

Способы диагностики

Перед введением соединения, пациент может быть обследован для определения того, является ли заболевание или состояние, которым пациент страдает или может страдать, которое восприимчиво к лечению соединением, обладающим активностью в отношении Hsp90.

Например, биологический образец, взятый у пациента, может быть проанализирован для определения того, является ли состояние или заболевание, такое как рак, которым пациент страдает или может страдать, таким, которое характеризуется генетической аномалией или аномальной экспрессией белка, которая ведет к мутации или сверхактивации Hsp90-клиентного белка. Примеры таких аномальностей, которые приводят к активации Hsp90-клиентных белков, включают Bcr-ABL транслокацию, Flt-3 внутреннюю дупликацию и мутацию Braf или сверхэкспрессию ErbB2.

Таким образом, пациент может быть подвергнут диагностическому тесту для обнаружения маркера, характерного для повышающей регуляции. Термин «диагноз» включает обследование. Термин «маркер» включает генетические маркеры, включающие, например, измерение состава ДНК для идентификации мутаций Braf, BCR-abl и Flt3 или других поврежденных клиентных белков. Термин «маркер» также включает белки, такие как ErbB2, включая уровни или концентрации белка или некоторых фрагментов или продукта деградации и, для ферментов, ферментативную активность. Белок (например, фосфорилированный или нет) и мРНК-уровни вышеуказанных белков могут также быть оценены для характеристики изменения активности. Например, уровень фосфорилированного AKT может представлять собой индикатор чувствительности к ингибиторам HSP90.

Диагностические тесты обычно проводят на биологическом образце, выбранном из, например, образцов опухолевой биопсии, образцов крови (выделение и обогащение опухолевых клеток отсева), биопсии стула, мокроты, хромосомного анализа, плевральной жидкости, перитонеальной жидкости, буккальных соскобов или биопсии, или из мочи.

Процесс скрининга, как правило, включает прямое секвенирование, олигонуклеотидный анализ или анализ белкового микрочипа, протеомический анализ методом масс-спектрометрии или определение с использованием специфических антител.

Способы идентификации и анализа мутаций и активации белков хорошо известны специалистам в данной области. Способы скринирования могут включать, но без ограничения, стандартные способы, такие как обратнотраскриптазная-полимеразная цепная реакция (RT-PCR), гибридизация in situ или иммуноблоттинг.

В скрининге методом RT-PCR уровень мРНК в опухоли оценивают путем создания копии кДНК для мРНК, с последующей амплификацией кДНК посредством PCR. Способы PCR-амплификации, выбора праймеров и условий амплификации, известны специалистам в данной области. Манипуляции с нуклеиновой кислотой и PCR проводят стандартными способами, как описано, например, Ausubel, F.M. et al., eds. в Current Protocols in Molecular Biology, 2004, John Wiley & Sons Inc., or Innis, M.A. et-al., eds. PCR Protocols: a guide to methods and applications, 1990, Academic Press, San Diego. Reactions and manipulations involving nucleic acid techniques are also described in Sambrook et al., 2001, 3rd Ed, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Альтернативно, может быть использован коммерчески доступный набор для RT-PCR (например, Roche Molecular Biochemicals) или методология, которая описана в патентах США 4666828; 4683202; 4801531; 5192659, 5272057, 5882864 и 6218529 и включена здесь посредством ссылки.

Примером метода гибридизации in situ для оценки экспрессии мРНК является флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) (см. Angerer, 1987 Meth. Enzymol., 152: 649).

Как правило, гибридизация in situ включает следующие основные стадии: (1) иммобилизацию анализируемой ткани; (2) предварительную гибридизационную обработку образца для усиления доступности целевой нуклеиновой кислоты и для уменьшения неспецифического связывания; (3) гибридизации смеси нуклеиновых кислот с нуклеиновой кислотой в биологической структуре или ткани; (4) постгибридизационные промывки для удаления фрагментов нуклеиновой кислоты, не связанной в гибридизации, и (5) определение гибридизованных фрагментов нуклеиновой кислоты. Пробы, используемые в таких применениях, обычно являются мечеными, например, радиоизотопами или флуоресцентными репортерами. Предпочтительные пробы являются достаточно длинными, например, приблизительно от 50, 100, или 200 нуклеотидов приблизительно до 1000 или более нуклеотидов, для обеспечения возможности специфической гибридизации с целевой нуклеиновой кислотой(ами) в жестких условиях. Также существуют коммерчески доступные FISH-пробы для цитогенетического определения хромосомных перегруппировок, которые могут быть применены для обнаружения Flt3 и Bcr-Abl транслокаций в популяциях лейкемических клеток. Стандартные способы проведения FISH описаны Ausubel, F.M. et al., eds. в Current Protocols in Molecular Biology, 2004, John Wiley & Sons Inc и Fluorescence In situ Hybridization: Technical Overview by John M. S. Bartlett in Molecular Diagnosis of Cancer, Methods and Protocols, 2nd ed.; ISBN: 1-59259-760-2; March 2004, pps. 077-088; Series: Methods in Molecular Medicine.

Описаны способы анализа экспрессии гена (DePrimo et al., BMC Cancer 2003. 3:3). Кратко, протокол осуществляется следующим образом: двухнитевую кДНК синтезируют из общей РНК с использованием (dT)24-олигомера для примирования синтеза первой нити кДНК, с последующим синтезом второй нити кДНК с рандомизированными гексамерными праймерами. Двухнитевую кДНК используют как модель для in vitro транскрипции cРНК с использованием биотинилированных рибонуклеотидов. cРНК химически фрагментируют согласно описанным протоколам (Affymetrix, Santa Clara, CA, USA) и затем гибридизуют в течение ночи с использованием Human Genome Arrays.

Альтернативно, белковые продукты, экспрессированные из мРНК, могут быть исследованы методами иммуногистохимии опухолевых образцов, твердофазного иммуноанализа с микротитровальными планшетами, вестерн-блоттинга, двумерного электрофореза на SDS-полиакриламидном геле, ELISA, проточной цитометрией и другими способами, известными в данной области для определения специфических белков. Способы определения должны включать применение сайт-специфических антител. Специалисту в данной области будет понятно, что все такие хорошо известные методы определения "филадельфийской хромосомы" свидетельствуют о BCR-ABL транслокации.

Следовательно, все указанные методики также могут быть применены для идентификации опухолей, особенно пригодных для лечения соединениями по изобретению.

ПРИМЕРЫ

Изобретение будет далее проиллюстрировано, но, не ограничиваясь этим, ссылкой на конкретные варианты осуществления, описанные в следующих примерах.

В примерах могут быть использованы следующие сокращения:

AcOH уксусная кислота,

BOC трет-бутилоксикарбонил,

Bn бензил,

CDI 1,1-карбонилдиимидазол,

DMAW90 Смесь растворителей: DCM:MeOH:AcOH:H₂O (90: 18:3:2),

DMAW120 Смесь растворителей: DCM:MeOH:AcOH:H₂O (120:18:3:2),

DMAW240 Смесь растворителей: DCM:MeOH:AcOH:H₂O (240:20:3:2),

DCM метиленхлорид,

ДМФА диметилформамид,

ДМСО диметилсульфоксид,

EDC 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимид,

Et₃N триэтиламин,

EtOAc этилацетат,

Et₂O диэтиловый эфир,

ч час(ы),

HOAt 1-гидроксиазабензотриазол,

HOBt 1-гидроксибензотриазол,

MeCN ацетонитрил,

MeOH метанол,

мин минуты,

P.E. петролейный эфир,

к.т. комнатная температура,

SiO₂ оксид кремния,

TBTU тетрафторборат N,N,N',N'-тетраметил-O-(бензотриазол-1-ил)урония,

ТГФ тетрагидрофуран.

Спектры протонного магнитного резонанса (¹H-ЯМР) были измерены на приборе Bruker AV400, функционирующем при 400,13 МГц в ДМСО-d₆ или MeOH-d₄ (где указано) при 27ºC, если не указаны иные условия, и приведены в следующем виде: химический сдвиг δ/м.д. (число протонов, мультиплетность обозначена как с=синглет, д=дублет, т=триплет, кв.=квартет, м=мультиплет, ушир.=уширенный). В качестве внутреннего стандарта использовали остаточный протонный растворитель.

В примерах полученные соединения были охарактеризованы методами жидкостной хроматографии и масс-спектроскопии с использованием систем и рабочих условий, указанных ниже. Если присутствовали атомы с различными изотопами и приведена отдельная масса, масса, приведенная для соединения, представляет собой моноизотопную массу (то есть ³⁵Cl; ⁷⁹Br и т.д.). Использовали различные системы, как описано ниже, и они снабжались оборудованием и были подготовлены для проведения в близко подобных условиях функционирования. Используемые условия функционирования также описаны ниже.

Описание систем:

Система 1 (аналитическая система):

Система ВЭЖХ: Waters 2795;

Детектор масс-спектрографа: Micromass Platforma LC;

Детектор PDA: Waters 2996 PDA;

Система 2 (препаративная и аналитическая система):

Система ВЭЖХ: система Waters Fractionlynx;

Детектор масс-спектрометра: Waters ZQ;

PDA Детектор: Waters 2996 PDA;

Система 3 (препаративная и аналитическая система):

Система ВЭЖХ: система Agilent 1100;

Детектор масс-спектрометра: LC/MSD;

UV-Детектор: Agilent MWD;

Условия функционирования:

Кислотные аналитические условия:

Элюент A: H₂O (0,1% муравьиная кислота);

Элюент B: CH₃CN (0,1% муравьиная кислота);

Градиент: 5-95% элюента B в течение 3,5 минут (в течение 15 минут w/колонка 2);

Поток: 0,8 мл/мин;

Колонка 1: Phenomenex Synergi 4µ MAX-RP 8OA, 2,0×50 мм;

Колонка 2: Phenomenex Synergi 4µ MAX-RP 8OA, 2,0×150 мм;

Щелочные аналитические условия:

Элюент A: H₂O (10 мМ NH₄HCO₃ буфер, доведенный до pH=9,2 NH₄OH);

Элюент B: CH₃CN;

Градиент: 5-95% элюент B в течение 3,5 минут;

Поток: 0,8 мл/мин;

Колонка: Phenomenex Gemini 5µ 2,0×50 мм;

Масс-спектроскопические условия (Waters Systems):

Напряжение на капилляре: 3,6 кВ (3,40 кВ на ES-отрицательном);

Вольтаж конуса: 25В;

Температура испарителя: 120ºC;

Диапазон сканирования: 125-800 amu;

Режим ионизации: Электрораспыление положительных ионов, отрицательных ионов или положительных и отрицательных ионов;

Масс-спектроскопические условия (Agilent Systemss):

Напряжение на капилляре: 4000 В (3500В на ES-отрицательном);

Фрагментатор/коэффициент передачи: 150/1;

Высушивающий газ (температура/скорость потока): 350ºC/13,0 л/мин;

Давление в распылителе: 50 psi (фунт на кв.дюйм);

Диапазон сканирования: 125-800 amu;

Режим ионизации: электрораспыление положительных ионов или отрицательных ионов.

Исходные вещества для каждого из примеров являлись коммерчески доступными, пока не указано иное.

A. Общие синтетические способы

В следующих общих способах указанные объемы могут варьировать согласно масштабу реакции, что будет очевидно специалисту в данной области.

Способ A1

Амидосочетание (хлорангидридный способ)

Смесь карбоновой кислоты (1 эквивалент) и тионилхлорида (1,5 эквивалента) в бензоле (или толуоле) перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 часов. По каплям добавляли избыток амина к горячему раствору и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Альтернативно, хлорангидрид кислоты может быть выделен упариванием и затем повторным растворением в смеси метиленхлорид:триэтиламин 9:1; затем добавляли амин и смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 1-18 часов. В другом случае смесь разбавляли этилацетатом и экстрагировали последовательно водой, насыщенным водным бикарбонатом натрия и 2М хлористоводородной кислотой. Органический слой упаривали досуха в вакууме и чистые продукты получали или растиранием в этилацетате, или колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесями этилацетата в петролейном эфире), или в некоторых случаях препаративной ВЭЖХ/МС.

Способ А2

Амидосочетание (способ с EDC, HOBt)

Перемешиваемый раствор кислоты (1 эквивалент) в метиленхлориде (10 мл) обрабатывали последовательно гидрохлоридом N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,2 эквивалента), 1-гидроксибензотриазолом (1,2 эквивалента) и амин (1,5 эквивалента) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь промывали последовательно 2М хлористоводородной кислотой и 2М гидроксидом натрия, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало продукты. Продукты получали или чистыми или их очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесями этилацетата в петролейном эфире или метанола в этилацетате, соответственно).

Способ A3

Диалкилирование простого анизолового или бензилового эфира (способ с BBr ₃ )

Перемешиваемый раствор простого анизолового или бензилового эфира (1 эквивалент) в метиленхлориде при 0ºC обрабатывали по каплям 1М раствором трибромида бора в метиленхлориде (1,5 эквивалента на удаляемую группу) и смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакцию гасили добавлением воды и насыщенного водного бикарбоната натрия, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме. Чистые продукты получали или путем растирания в диэтиловом эфире или этилацетате или колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесями этилацетата в петролейном эфире).

Способ А4

Амидосочетание (способ с EDC, HOAt)

Перемешиваемый раствор кислоты (1 эквивалент) в диметилформамиде (5 мл) обрабатывали последовательно гидрохлоридом N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,2 эквивалента), 1-гидрокси-7-азабензотриазолом (1,2 эквивалента) и амином (1,5 эквивалента) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ДМФА упаривали, неочищенный остаток растворяли в EtOAc и промывали последовательно насыщенным бикарбонатом натрия, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме. Продукты получали или чистыми, или очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюирование смесями этилацетата в петролейном эфире или метанола в этилацетате, соответственно).

Способ A5

Гидрирование

Перемешиваемый раствор защищенного производного (1 эквивалент) и каталитического количества 10% палладия на углероде (конкретно 30-50 мг) в этаноле (5-10 мл), метаноле (5-10 мл) или смеси метанол/DCM (3 мл/3 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 2-16 часов. Катализатор удаляли фильтрованием, промывали метанолом (5 мл) и растворитель удаляли в вакууме, что приводило к продуктам. Иногда требовалась очистка флэш-хроматографией, при элюировании обычно проводят простым эфиром.

Способ A6

Сочетание по Сузуки

Арилбромид (1 эквивалент, конкретно 0,5 ммоль), бороновую кислоту или винилпроизводное трифторбората калия (1,2 эквивалента) и карбонат цезия (3 эквивалента) растворяли в ТГФ (10 мл) в атмосфере азота. Добавляли дихлорид 1,1'-бис(дифенилфосфин)ферроцен]палладия(II) (0,1 эквивалент), затем воду (1 мл). Смесь начинала темнеть, пока не становилась черной. Затем смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в атмосфере азота до завершения реакции (8-45 часов). Смесь охлаждали, разбавляли DCM и добавляли сульфат магния. Смесь фильтровали и растворитель упаривали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией в смесях петролейный эфир/простой эфир, и что обычно приводило к продукту с хорошим выходом (~60-80%).

Способ A7

Моно-O-метилирование резорцина

Диметилсульфат (1 эквивалент) добавляли к перемешиваемому раствору резорцина (1 эквивалент) и карбоната калия (2,2 эквивалента) в ацетонитриле (10 мл на ммоль субстрата) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме, остаток распределяли между метиленхлоридом и водой, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме. Чистые продукты получали или после колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесями петролейный эфир и этилацетат) или препаративной ВЭЖХ/МС.

Способ A8

Электрофильное ароматическое фторирование

Бис-тетрафторборат 1-(хлорметил)-4-фтор-1,4-диазониабицикло[2,2,2]октана (1 эквивалент) добавляли к раствору субстрата (1 эквивалент) в ацетонитриле (15 мл на ммоль субстрата) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой отделяли и упаривали досуха в вакууме. Чистые продукты получали или после колоночной хроматографии на силикагеле (элюирование смесями петролейного эфира и этилацетата) или препаративной ВЭЖХ/МС.

B. Синтез промежуточных соединений карбоновой кислоты

Получение B1

4-гидрокси-3-изопропилбензойная кислота

Четыреххлористый углерод (28 мл, 0,26 моль), и порошок меди (1,0 г) добавляли к перемешиваемому раствору 2-изопропилфенола (27,2 г, 0,2 моль) в 50% водном гидроксиде натрия (120 мл), и смесь выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением концентрированной хлористоводородной кислоты и экстрагировали этилацетатом. Органический слой экстрагировали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, и водный слой подкисляли до pH 2 или ниже очень аккуратным добавлением концентрированной хлористоводородной кислоты. Раствор экстрагировали этилацетатом, органический слой промывали водой, отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало 4-гидрокси-3-изопропилбензойную кислоту (12,5 г, 35%) в виде ярко-красного твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,36 (1H, ушир.с), 10,13 (1H, ушир.с), 7,73 (1H, д), 7,63 (1H, дд), 6,85 (1H, д), 3,22 (1H, м), 1,19 (6H, д). МС: [M-H]⁺179.

Альтернативно, если необходимо, неочищенный продукт может быть очищен с использованием трехстадийной методики, включающей дибензилирование [согласно условиям, описанным ниже в получении B5 для синтеза метил 5-ацетил-2,4-бис-бензилоксибензоата (BnBr, K₂CO₃, MeCN, кипячение с обратным холодильником)], колоночную хроматографию на силикагеле для удаления глубоко окрашенных примесей (элюирование 3-5% этилацетатом в петролейном эфире) и каталитическое гидрирование [согласно способу A5, описанному выше (10% Pd/C, EtOH, H₂)], что приводит к 4-гидрокси-3-изопропилбензойной кислоте в виде бесцветного твердого вещества.

Получение B2

5-Этил-2-метоксибензойная кислота

н-Бутиллитий (2,5М в гексане, 38,5 мл, 100,0 ммоль) добавляли по каплям в атмосфере азота к перемешиваемому раствору 4-этиланизола (11,7 г, 86,0 ммоль) и N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамина (10 мл, 88,0 ммоль) в безводном диэтиловом эфире (100 мл), смесь перемешивали, выдерживая при 30ºC в течение 16 часов. Смесь охлаждали и медленно выливали в смесь избытка твердого диоксида углерода в безводном диэтиловом эфире. После нагревания до комнатной температуры смесь подщелачивали добавлением 2М гидроксида натрия, водный слой отделяли и подкисляли до pH 2 или ниже добавлением концентрированной хлористоводородной кислоты. Смесь экстрагировали диэтиловым эфиром, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало 5-этил-2-метоксибензойную кислоту (5,7 г, 37%) в виде бледно-желтого масла. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,50 (1H, ушир.с), 7,48 (1H, д), 7,33 (1H, дд), 7,03 (1H, д), 2,56 (2H, кв.), 1,17 (3H, кв.). МС: [M+H]⁺181.

Получение B3

2,4-Бис-бензилокси-5-хлорбензойная кислота

l-(2,4-Бис-бензилокси-5-хлор-фенил)этанон [полученный, как описано в WO 2004/0500087] (1,10 г, 3,0 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору гидроксида натрия (1,20 г, 30,0 ммоль) в воде (10 мл) и диоксане (10 мл). По каплям добавляли бром (1,44 г, 9,0 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Диоксан удаляли упариванием в вакууме и смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 2М хлористоводородной кислоты. Смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой отделяли, растворитель удаляли в вакууме, что давало 2,4-бис-бензилокси-5-хлорбензойную кислоту (900 мг, 81%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,58 (1H, ушир.с), 7,77 (1H, с), 7,55-7,30 (10H, м), 7,11 (1H, с), 5,31 (2H, с), 5,27 (2H, с). МС: [M+H]⁺369.

Получение B4

3-(1,2-Диметилаллил)-4-гидроксибензойная кислота

Этил 4-гидроксибензоат (1,66 г, 10,0 ммоль) и безводный карбонат калия (2,07 г, 15,0 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) обрабатывали 3-метил-2-бутенилхлоридом (1,35 мл, 12,0 ммоль), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения растворитель удаляли в вакууме и смесь распределяли между метиленхлоридом и водой. Органические фракции отделяли, и растворитель удаляли в вакууме, что давало этил 4-(3-метилбут-2-енилокси)бензоат (2,23 г, 95%) в виде бледно-желтой жидкости, которую использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,89 (2H, д), 7,04 (2H, д), 5,44 (1H, т), 4,62 (2H, д), 4,28 (2H, кв.), 1,77 (3H, с), 1,73 (3H, с), 1,31 (3H, т). МС: [M+H]⁺235.

Этил 4-(3-метилбут-2-енилокси)бензоат (2,23 г, 9,53 ммоль) растворяли в анизоле (8 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 дней. Растворитель удаляли в вакууме и остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле. Элюирование смесью 20% этилацетата в петролейном эфире приводило к этил 3-(l,2-диметилаллил)-4-гидроксибензоату (600 мг, 27%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,32 (1H, ушир.с), 7,67 (1H, дд), 7,62 (1H, с), 6,90 (1H, д), 4,90 (1H, с), 4,85 (1H, с), 4,25 (2H, кв.), 3,75 (1H, кв.), 1,61 (3H, с), 1,30 (3H, т), 1,26 (3H, д). МС: [M+H]⁺235.

Этил 3-(l,2-диметилаллил)-4-гидроксибензоат (600 мг, 2,56 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), добавляли раствор гидроксида калия (560 мг, 10,0 ммоль) в воде (10 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения метанол удаляли в вакууме и раствор подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 2М хлористоводородной кислоты. Раствор экстрагировали метиленхлоридом, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало 3-(l,2-диметилаллил)-4-гидроксибензойную кислоту (270 мг, 51%) в виде бесцветной смолы. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,38 (1H, ушир.с), 10,22 (1H, ушир.с), 7,63 (2H, м), 6,88 (1H, д), 4,90 (1H, с), 4,87 (1H, с), 3,75 (1H, кв.), 1,60 (3H, с), 1,28 (3H, д). МС: [M-H]⁺205.

Получение B5

2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилбензойная кислота

Уксусный ангидрид (3,06 г, 30,0 ммоль) добавляли к метил 2,4-дигидроксибензоату (5,04 г, 30,0 ммоль) в диэтилэфирате трифторида бора (7,6 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов и затем давали охладиться до комнатной температуры. Добавляли воду (80 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученное желтое твердое вещество отделяли фильтрованием и отсасывали на фильтре в вакууме по возможности досуха. Твердое вещество растворяли в метиленхлориде и промывали водой, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало метил 5-ацетил-2,4-дигидроксибензоат в виде ярко-желтого твердого вещества (2,62 г, 42%), которое использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,58 (1H, с), 11,22 (1H, с), 8,33 (1H, с), 6,45 (1H, с), 3,90 (3H, с), 2,62 (3H, с). МС: [M+H]⁺211.

Метил 5-ацетил-2,4-дигидроксибензоат (2,62 г, 12,48 ммоль) растворяли в ацетонитриле (40 мл), добавляли безводный карбонат калия (4,93 г, 35,7 ммоль), перемешиваемую смесь обрабатывали бензилбромидом (5,09 г, 29,75 ммоль) и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения растворитель удаляли в вакууме и смесь распределяли между водой и метиленхлоридом. Органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало метил 5-ацетил-2,4-бис-бензилоксибензоат (3,48 г, 71%) в виде бесцветного твердого вещества, которое сушили при 50ºC в вакуумной печи и использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 8,21 (1H, с), 7,55 (4H, м), 7,43 (4H, м), 7,37 (2H, м), 7,04 (1H, с), 5,38 (4H, с), 3,79 (3H, с), 2,48 (3H, с). МС: [M+H]⁺391.

Перемешиваемую суспензию метилтрифенилфосфонийбромида (1,96 г, 5,5 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (20 мл) при 0ºC в атмосфере азота по каплям обрабатывали н-бутиллитием (1,6М в гексане, 3,5 мл, 5,5 ммоль) и полученный ярко-желтый раствор перемешивали при 0ºC в течение 30 минут. По каплям добавляли раствор метил 5-ацетил-2,4-бис-бензилоксибензоата (1,95 г, 5,00 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (20 мл), полученной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Добавляли метанол (10 мл) и растворитель удаляли в вакууме. Остаток распределяли между метиленхлоридом и водой, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало коричневую смолу, которую очищали колоночной хроматографией на силикагеле. Элюирование 7% этилацетатом в петролейном эфире приводило к метил 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензоату в виде бесцветного твердого вещества (700 мг, 36%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,59 (1H, с), 7,52 (2H, д), 7,64-7,32 (8H, м), 6,97 (1H, с), 5,28 (2H, с), 5,22 (2H, с), 5,09 (1H, с), 5,04 (1H, с), 3,76 (3H, с), 2,02 (3H, с). МС: [M+H]⁺389.

Метил 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензоат (700 мг, 1,80 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), добавляли раствор гидроксида калия (286 мг, 5,1 ммоль) в воде (4 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения растворитель удаляли в вакууме и смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 2М хлористоводородной кислоты. Смесь экстрагировали метиленхлоридом, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойную кислоту (600 мг, 89%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,52 (2H, д), 7,47-7,29 (9H, м), 6,82 (1H, с), 5,20 (2H, с), 5,17 (2H, с), 5,06 (1H, с), 5,04 (1H, с), 2,03 (3H, с). МС: [M+H]⁺375.

Получение B6

2,4-Бис-бензилокси-5-бромбензойная кислота

2,4-дигидрокси-5-бромбензойную кислоту (5,16 г, 22,15 ммоль) растворяли в ДМФА (40 мл) и последовательно добавляли карбонат калия (12,2 г) и бензилбромид (8 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов в атмосфере азота. Затем добавляли водный раствор гидроксида калия (2 г) в воде (25 мл), затем добавляли метанол (50 мл) и смесь нагревали при кипении с обратным холодильником при интенсивном перемешивании в течение 24 часов. Затем смеси давали охладиться, выливали в HCl (250 мл), затем экстрагировали эфиром и затем DCM. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния и растворитель упаривали в вакууме. Полученное твердое вещество промывали петролейным эфиром, затем Et₂O (3×50 мл) с получением чистого продукта (5,2 г, 56%). ¹H-ЯМР (MeOH-d₄) 8,06 (1H, с), 7,51-7,30 (10H, м), 6,85 (1H, с), 5,22 (2H, с), 5,20 (2H, с). МС: [M+H]⁺413.

Получение B7

Синтез (Z)-4-бензилокси-3-(1-метилпропенил)бензойной кислоты

Метил 3-бром-4-гидроксибензоат [полученный, как описано в Tetrahedron, 2003, 59, 9173] (3,47 г, 15,0 ммоль) растворяли в ацетонитриле (50 мл), добавляли безводный карбонат калия (3,11 г, 22,5 ммоль), перемешиваемую смесь обрабатывали бензилбромидом (3,08 г, 18,0 ммоль) и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 5 часов. После охлаждения растворитель удаляли в вакууме и смесь распределяли между водой и метиленхлоридом. Органический слой отделяли, растворитель удаляли в вакууме и остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле. Элюирование системой 10% этилацетат в петролейном эфире приводило к метил 4-бензилокси-3-бромбензоату (3,6 г, 75%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 8,12 (1H, д), 7,96 (1H, дд), 7,51 (2H, м), 7,43 (2H, т), 7,35 (2H, м), 5,32 (2H, с), 3,84 (3H, с).

Метил 4-бензилокси-3-бромбензоат (1,61 г, 5,0 ммоль), карбонат цезия (4,89 г, 15,0 ммоль), (E)-2-бутен-2-илбороновую кислоту (600 мг, 6,0 ммоль) и [1,1'-бис(дифенилфосфин)ферроценил]палладий(II)хлорид (204 мг, 0,25 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (100 мл), добавляли воду (10 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения в атмосфере азота в течение 16 часов. После охлаждения растворитель удаляли в вакууме и смесь распределяли между метиленхлоридом и водой. Органический слой отделяли, растворитель удаляли в вакууме и остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле. Элюирование системой 5% этилацетат в петролейном эфире приводило к метил (Z)-4-бензилокси-3-(1-метилпропенил)бензоату (600 мг, 41%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,88 (1H, дд), 7,59 (1H, д), 7,40 (4H, м), 7,34 (1H, м), 7,23 (1H, д), 5,57 (1H, кв.), 5,21 (2H, с), 3,82 (3H, с), 1,94 (3H, с), 1,38 (3H, д).

Метил (Z)-4-бензилокси-3-(1-метилпропенил)бензоат (592 мг, 2,0 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), добавляли раствор гидроксида калия (336 мг, 6,0 ммоль) в воде (7 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения растворитель удаляли в вакууме и смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 2М хлористоводородной кислоты. Смесь экстрагировали метиленхлоридом, органический слой отделяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало (Z)-4-бензилокси-3-(1-метилпропенил)бензойную кислоту (460 мг, 82%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,85 (1H, дд), 7,57 (1H, д), 7,40 (4H, м), 7,34 (1H, м), 7,18 (1H, д), 5,57 (1H, кв.), 5,21 (2H, с), 1,96 (3H, с), 1,40 (3H, д). МС: [M+H]⁺283.

Получение B8

Синтез 2,4-бис-бензилокси-5-трет-бутилбензойной кислоты

1-(2,4-Бис-бензилокси-5-трет-бутилфенил)этанон [полученный, как описано в WO 2004/072051] (2,02 г, 5,2 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (30 мл), добавляли раствор гидроксида натрия (2,08 г, 52,0 ммоль) в воде (30 мл), смесь перемешивали и добавляли по каплям бром (0,8 мл, 15,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. 1,4-Диоксан удаляли в вакууме и смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 2М хлористоводородной кислоты. Смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой отделяли, растворитель удаляли в вакууме и остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле. Элюирование системой 30% этилацетат в петролейном эфире приводило к 2,4-бис-бензилокси-5-трет-бутилбензойной кислоте (1,6 г, 79%) в виде бледно-желтого масла. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,18 (1H, ушир.с), 7,69 (1H, с), 7,52 (4H, т), 7,45-7,33 (6H, м), 6,93 (1H, с), 5,24 (2H, с), 5,23 (2H, с), 1,32 (9H, с). МС: [M+H]⁺391.

Получение B9

Синтез 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (альтернативный синтез)

Стадия 1: Синтез бензилового эфира 2,4-бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты.

В сосуд объемом 10 л с рубашкой, снабженный закрытым фланцем, содержащим мешалку, термометр и капельную воронку, помещали ацетон (2,5 л), затем помещали 5-бром-2,4-дигидроксибензойную кислоту (100 г, 0,43 моль) и карбонат калия (356 г, 2,58 моль). К перемешиваемой смеси при температуре окружающей среды добавляли бензилбромид (185 мл, 1,55 моль) при скорости ~20 мл/мин. Смесь нагревали при 60ºC в течение 18 часов и затем доводили до 45ºC. Добавляли воду (1,5 л) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Смесь экстрагировали EtOAc (2×1 л) и объединенные органические фракции упаривали в вакууме. К остатку добавляли Et₂O (200 мл) и петролейный эфир (1 л), смесь перемешивали в течение 30 мин, образующееся твердое вещество отделяли фильтрованием и сушили в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение (197,2 г), в виде белого твердого вещества.

Стадия 2: Синтез изопропенилтрифторбората калия.

К раствору 2-бромпропена (20 мл, 225 ммоль) в безводном ТГФ (250 мл), при перемешивании в атмосфере N₂ при -78ºC, добавляли в течение более 30 мин n-BuLi (2,5М в гексане) (100 мл, 250 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. К смеси при -78ºC медленно добавляли триэтилборат (58 мл, 340 ммоль) со скоростью, поддерживающей температуру реакционной смеси не превышающей -65ºC. Полученный раствор затем перемешивали при -78ºC в течение 30 мин, давали медленно нагреться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение еще 90 мин. К смеси добавляли гидрофторид калия (105 г, 1,35 моль), затем воду (250 мл). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 14 часов и затем упаривали досуха.

Методику повторяли, как описано выше, и после упаривания досуха два остатка объединяли для дальнейшей обработки.

К объединенным остаткам добавляли ацетон (800 мл), смесь перемешивали в течение 1 часа и затем фильтровали. Собранное твердое вещество промывали ацетоном (200 мл), и объединенные фильтраты упаривали в вакууме, что давало твердое вещество. Полученное твердое вещество растирали с Et₂O (250 мл) и затем сушили в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение (28,2 г), в виде белого твердого вещества.

Стадия 3: Синтез бензилового эфира 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты

К смеси бензилового эфира 2,4-бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты (42,9 г, 85,7 ммоль), изопропенилтрифторбората калия (14,0 г, 95,2 ммоль) и карбоната цезия (83,8 г, 257,1 ммоль) в ТГФ (800 мл) добавляли Pd(PPh₃)₄ (2,0 г), затем воду (150 мл). Смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 72 часов, затем давали охладиться до температуры окружающей среды. Смесь упаривали в вакууме для удаления ТГФ и затем распределяли между водой (500 мл) и EtOAc (300 мл). Органическую фракцию промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение (40,9 г) в виде коричневого масла.

Стадия 3A

Альтернативный синтез бензилового эфира 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты

Смесь бензилового эфира 2,4-бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты (10,0 г, 20 ммоль), изопропенилтрифторбората калия (4,0 г, 27,2 ммоль) и н-бутиламина (6,0 мл, 60 ммоль) в смеси 2-пропанол/вода (2:1, 200 мл) продували N₂ в течение 5 минут. К полученной смеси добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфин)ферроцен]дихлорпалладий(II) (816 мг, 1,09 ммоль) и смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 20 часов. Смеси давали охладиться до температуры окружающей среды, затем разбавляли водой (400 мл) и экстрагировали EtOAc (2×300 мл). Объединенные органические экстракты промывали 1М водным HCl, насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали через слой целита и фильтрат упаривали в вакууме, что приводило к указанному в заголовке соединению (11,1 г) в виде коричневой смолы.

Стадия 4: Синтез 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты

К раствору бензилового эфира 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (40,8 г, 87,9 ммоль) в смеси ТГФ-MeOH-вода (3:1:1, всего 300 мл) добавляли гидроксид лития (8,42 г, 352 ммоль). Смесь нагревали при 50ºC в течение 16 часов, давали охладиться до температуры окружающей среды и затем разбавляли водой (300 мл). Смесь доводили до pH 1 с использованием концентрированной HCl (~30 мл) и затем экстрагировали EtOAc (2×200 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали в вакууме. Твердый остаток суспендировали в смеси петролейный эфир-MeOH (9:1, суммарно 300 мл), суспензию перемешивали в течение 1 часа при температуре окружающей среды и твердое вещество выделяли фильтрованием. Твердое вещество сушили в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение (26,8 г), в виде не совсем белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) 12,30 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,53 (д, J=7,0 Гц, 2H), 7,47-7,31 (м, 8H), 6,94 (с, 1H), 5,23 (д, J=14,0 Гц, 4H), 5,08 (д, J=9,0 Гц, 2H), 2,04 (с, 3H).

Получение B10

2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилбензойная кислота

Стадия 1

Получение 1-(2,4-Бис-бензилoфенил)этанона

Загрузка веществ:

№ Соединение Количество Эквиваленты 1. 1,3-Дигидроксиацетофенон 50 г 1 2. Бензилбромид 97 мл 3 3. Ацетонитрил 750 мл 15 объемов 4. Карбонат калия 115 г 3

1,3-Дигидроксиацетофенон (50 г) помещали в 2 л одногорлую RB-колбу, снабженную обратным холодильником и предохранительной трубкой. Добавляли ацетонитрил (750 мл), карбонат калия (115 г) и бензилбромид (97 мл), и смесь нагревали при кипении с обратным холодильником (90ºC) в течение 16 часов. По завершении, ацетонитрил удаляли при пониженном давлении. К реакционной смеси добавляли воду (200 мл), которую затем экстрагировали этилацетатом (500 мл). Органический слой отделяли и сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, что приводило к остатку, который промывали н-гексаном (600 мл), что давало продукт.

Количество полученного продукта: 105,1 г Выход: 96,24% Агрегатное состояние: Твердое Цвет: Коричневый

Стадия 2

Получение 2,4-Бис-бензилокси-1-изопропенилбензола

Загрузка веществ:

№ Соединение Количество Эквиваленты 1. Соединение стадии 1 20 г 1 2. n-BuLi (1,6 м) 92,6 мл 2,3 3. Метилтрифенилфосфониййодид 53,4 г 2,2 4. ТГФ 200 мл 10 объемов

Метилтрифенилфосфониййодид (53,4 г) и ТГФ (100 мл) помещали в 1-литровую трехгорлую RB-колбу, снабженную капельной воронкой и подводом для азота, и смесь охлаждали до 0ºC. н-BuLi (92,6 мл) добавляли по каплям к реакционной смеси в течение 15 мин при 0ºC. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при 0ºC и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси по каплям добавляли 1-(2,4-Бис-бензилоксифенил)этанон (20 г) в ТГФ (100 мл) в течение 10 мин при 0ºC, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Прохождение реакции контролировали ТСХ (10% EtOAc/н-гексан, R_f продукта 0,9). По завершении к реакционной смеси добавляли метанол (~100 мл) и растворитель удаляли при пониженном давлении, что приводило к остатку. К остатку добавляли н-гексан (1 л), кипятили с обратным холодильником (75ºC) в течение 30 мин, перед фильтрованием смесь пропускали через слой целита и промывали слой н-гексаном (500 мл). Растворитель удаляли при пониженном давлении, что давало остаток, который затем очищали колоночной хроматографией (SiO₂, 2% EtOAc/н-гексан).

Количество полученного продукта: 12,5 г Выход: 63,13% Агрегатное состояние: Жидкость Цвет: Бесцветный

Стадия 3

4-Изопропилбензол-1,3-диол

Загрузка веществ:

№ Соединение Количество Эквиваленты 1. 2,4-Бис-бензилокси-1-изопропенилбензол 12,5 г 1 2. Этанол 125 мл 10 объемов 3. 20% гидроксид палладия 2 г  

К смеси 2,4-бис-бензилокси-1-изопропенилбензола (12,5 г) в этаноле (125 мл) в 500 мл колбе для гидрирования добавляли 20% гидроксид палладия (2 г). Реакционную смесь гидрировали при 80 фунт/кв.дюйм в течение 36 часов. Прохождение реакции контролировали TСХ (10% EtOAc/н-гексан, R_f продукта 0,1). По завершении, реакционную смесь фильтровали через слой целита и слой промывали этанолом (300 мл). Растворитель удаляли при пониженном давлении, что давало неочищенный продукт, который использовали без очистки на следующей стадии.

Количество полученного продукта: 5,8 г (неочищенный) Агрегатное состояние: Твердое Цвет: Бесцветный

Стадия 4

1-(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)этанон

Загрузка веществ:

№ Соединение Количество Эквиваленты 1. 4-Изопропилбензол-1,3-диол 5,8 г 1 2. Эфират трифторида бора 28,7 мл 6 3. Уксусная кислота 4,55 мл 2

4-Изопропилбензол-1,3-диол (5,8 г) и эфират трифторида бора (28,7 мл) помещали в 250 мл одногорлую RB-колбу, снабженную обратным холодильником и подводом азота, перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли уксусную кислоту (4,55 мл) и перемешивали при 90ºC в течение 16 часов. По завершении к реакционной смеси добавляли 10% ацетат натрия (300 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (300 мл), промывали насыщенным бикарбонатом натрия (100 мл) и органический слой сушили над сульфатом натрия. Реакцию контролировали ТСХ (10% EtOAc/н-гексан, R_f продукта 0,5). Растворитель удаляли при пониженном давлении, что давало остаток, который затем очищали колоночной хроматографией (SiO₂, 10% EtOAc/н-гексан).

Количество полученного продукта: 3,2 г Выход: 43,24% Агрегатное состояние: Твердое Цвет: Бесцветный

Стадия 5

l-(2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилфенил)этанон

Загрузка веществ:

№ Соединение Количество Эквиваленты 1. 1-(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)этанон 3,2 г 1 2. Бензилбромид 5,89 мл 3 3. Карбонат калия 6,82 г 3 4. Ацетонитрил 60 мл 20 объемов

К смеси 1-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)этанона (3,2 г), ацетонитрила (60 мл) и карбоната калия (10,6 г) в 250 мл одногорлой RB-колбе, снабженной обратным холодильником и предохранительной трубкой, добавляли бензилбромид (9,1 мл). Реакционную смесь кипятили (90ºC) в течение 16 часов. Прохождение реакции контролировали ТСХ (10% EtOAc/н-гексан, R_f продукта 0,5). По завершении ацетонитрил удаляли при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли воду (100 мл), и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, что давало остаток, к которому добавляли н-гексан (150 мл), что приводило к продукту.

Количество полученного продукта 5,1 г Выход 83,6% Агрегатное состояние Твердое Цвет Бесцветный

Стадия 6

2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилбензойная кислота

Загрузка веществ:

№ Соединение Количество 1. 1-(2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилфенил)этанон 7 г 2. Гипобромид натрия 13 г в 100 мл воды 3. Диоксан 100 мл

Методика:

Смесь смеси 1-(2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилфенил)этанона (7 г) в диоксане (100 мл) в 500 мл одногорлой RB-колбе, снабженной предохранительной трубкой, охлаждали до 10ºC и добавляли гипобромид натрия [13 г в воде (100 мл)]. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Прохождение реакции контролировали ТСХ (30% EtOAc/н-гексан, R_f продукта 0,5). По завершении к реакционной смеси, которую охлаждали до 0ºC, добавляли бисульфит натрия (7 г). Реакционную смесь затем подкисляли HCl (~10 мл) до pH-2, экстрагировали этилацетатом (100 мл) и промывали водой (25 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, и растворитель удаляли при пониженном давлении, что давало остаток, который затем очищали колоночной хроматографией (SiO₂, 10% EtOAc/н-гексан).

Количество полученного продукта 3,4 г Выход 48,3% Агрегатное состояние Твердое Цвет Бесцветный

C. Синтез изоиндолиновых промежуточных соединений

Получение C1

Синтез 4,7-дифторизоиндолина

Смесь l,4-дифтор-2,3-диметилбензола (4,26 г, 30,0 ммоль), N-бромсукцинимида (10,68 г, 60,0 ммоль) и дибензоилпероксида (75 мас.% в воде, 120 мг) в тетрахлориде углерода (50 мл) перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали, твердые вещества промывали тетрахлоридом углерода (10 мл), органические экстракты объединяли и растворитель удаляли в вакууме, что давало 2,3-бис-бромметил-1,4-дифторбензол (9,0 г, 100%) в виде бледно-желтой жидкости, которая отверждалась при стоянии. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,36 (2H, дд), 4,78 (4H, с).

Раствор 4-толуолсульфонамида (2,44 г, 14,28 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляли по каплям к интенсивно перемешиваемой суспензии гидрида натрия (1,2 г, 60 мас.% в минеральном масле, 30,0 ммоль) в безводном N,N-диметилформамиде (60 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, при 110ºC в течение 1 часа, затем охлаждали до 60ºC и по каплям добавляли раствор 2,3-бис-бромметил-1,4-дифторбензола (4,28 г, 14,28 ммоль) в N,N-диметилформамиде (30 мл). Смесь перемешивали при 60ºC в течение 1 часа и затем при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток распределяли между метиленхлоридом и 1М хлористоводородной кислотой. Органический слой отделяли, промывали 5% водным раствором карбоната калия, органические слои отделяли и растворитель удаляли в вакууме. Остаток промывали диэтиловым эфиром, фильтровали и твердое вещество отсасывали на фильтре досуха при пониженном давлении, что давало 4,7-дифтор-2-(толуол-4-сульфонил)изоиндолин (2,46 г, 56%) в виде бледно-желто-коричневого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,82 (2H, д), 7,43 (2H, д), 7,15 (2H, дд), 4,66 (4H, с), 2,36 (3H, с). МС: [M+H]⁺310.

Смесь 4,7-дифтор-2-(толуол-4-сульфонил)изоиндолина (2,36 г, 7,64 ммоль), фенола (2,36 г, 25,11 ммоль), 48% бромистого водорода в воде (20 мл) и пропионовой кислоты (4 мл) перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 6 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду (50 мл) и смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (2×100 мл). Водный слой подщелачивали добавлением 2М гидроксида натрия и экстрагировали диэтиловым эфиром (3×100 мл). Объединенные экстракты упаривали досуха в вакууме, что давало 4,7-дифторизоиндолин (586 мг, 50%) в виде коричневого масла, которое отверждалось при стоянии. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,06 (2H, дд), 4,12 (4H, с). МС: [M+H]⁺156.

Получение C2

Синтез гидробромида 5-гидроксиизоиндолина

Раствор диметил 4-метоксифталата (36,75 г, 0,16 моль) в метаноле (100 мл) обрабатывали раствором гидроксида калия (28,0 г, 0,5 моль) в воде (50 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры метанол удаляли в вакууме и смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 5М хлористоводородной кислоты. Твердое вещество отфильтровали, промывали водой и отсасывали на фильтре досуха при пониженном давлении в течение ночи, что давало 4-метоксифталевую кислоту (31,8 г, 99%) в виде не совсем белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,90 (2H, ушир.с), 7,74 (1H, д), 7,12-7,05 (2H, м), 3,84 (3H, с). МС: [M+H]⁺197.

Уксусный ангидрид (40 мл) добавляли к смеси 4-метоксифталевой кислоты (30,8 г, 0,16 моль) в безводном тетрагидрофуране (150 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли в вакууме, что давало 4-метоксифталевый ангидрид (27,8 г, 99%) в виде не совсем белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 8,02 (1H, д), 7,59 (1H, д), 7,49 (1H, дд), 3,97 (3H, с). МС: [M+H]⁺179.

Смесь 4-метоксифталевого ангидрида (27,8 г, 0,16 моль) и формамида (175 мл) перемешивали и выдерживали при 210ºC в течение 5 часов, затем давали охладиться до комнатной температуры в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывали, промывали последовательно водой (100 мл), 50% водным ацетоном (50 мл) и диэтиловым эфиром (200 мл) и отсасывали на фильтре досуха при пониженном давлении, что давало 4-метоксифталимид (21,3 г, 77%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,15 (1H, ушир.с), 7,74 (1H, д), 7,33-7,28 (2H, м), 3,92 (3H, с).

Перемешиваемый раствор 4-метоксифталимида (21,3 г, 0,12 моль) в безводном тетрагидрофуране (425 мл) при 0ºC обрабатывали по каплям раствором борана в тетрагидрофуране (1М, 340 мл, 0,34 моль), полученную смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь охлаждали до 0ºC, по каплям добавляли метанол (150 мл), затем добавляли 5М хлористоводородную кислоту (150 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры органический растворитель удаляли в вакууме, смесь разбавляли водой (750 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (3×750 мл). Водный слой подщелачивали до pH 12 или выше добавлением 5М гидроксида натрия, экстрагировали метиленхлоридом (3×750 мл) и объединенные экстракты упаривали досуха в вакууме, что давало 5-метоксиизоиндолин (8,34 г, 47%) в виде коричневого масла. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,13 (1H, д), 6,84 (1H, д), 6,74 (1H, дд), 4,05 (2H, с), 4,01 (2H, с), 3,73 (3H, с). МС: [M+H]⁺150.

5-Метоксиизоиндолин (8,34 г, 55,97 ммоль) в 48% водной бромистоводородной кислоте (100 мл) перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли в вакууме, что давало гидробромид 5-гидроксиизоиндолина (11,32 г, 93%) в виде желто-коричневого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,63 (1H, ушир.с), 9,32 (2H, ушир.с), 7,18 (1H, д), 6,79 (1H, д), 6,76 (1H, дд), 4,42 (2H, т), 4,38 (2H, т). МС: [M+H]⁺136.

Получение C3

Синтез 5-хлор-2,3-дигидро-1H-изоиндола

Смесь 3,4-диметилхлорбензола (10 г, 71,1 ммоль), N-бромсукцинимида (25 г,142,2 ммоль) и бензоилпероксида (0,147 г, 0,6 ммоль) кипятили с обратным холодильником в 80 мл четыреххлористого углерода в течение 18 часов. После охлаждения нерастворимое вещество отфильтровывали и промывали небольшим количеством четыреххлористого углерода. Фильтрат и промывки объединяли и концентрировали при пониженном давлении с получением 20 г продукта l,2-бис-бромметил-4-хлорбензола в виде бледно-желтого масла как основного компонента.

К суспензии 60% гидрида натрия (3,0 г, 0,125 ммоль) в минеральном масле в 80 мл безводного ДМФА (100 мл) по каплям добавляли раствор паратолуолсульфонамида (5,6 г, 32,60 ммоль) в 30 мл ДМФА в течение 1 часа при интенсивном перемешивании при комнатной температуре. После добавления смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре и еще 1 час нагревали при 90ºC. К полученной смеси добавляли по каплям раствор l,2-бис-бромметил-4-хлорбензола (4 г, 14,18 ммоль) в 20 мл безводного ДМФА при 60ºC, затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Конечную смесь выливали на лед, и полученный осадок выделяли фильтрованием. Осадок промывали хлористоводородной кислотой, 5% карбонатом натрия и насыщенным раствором соли, затем сушили (MgSO4), фильтровали и упаривали, что давало 2,8 г 5-Хлор-2-(толуол-4-сульфонил)-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде бледно-желтого твердого вещества. МС: [M+H]⁺308.

1,0 г 2-(паратолуолсульфонил)-5-хлоризоиндолина и 1,0 г фенола добавляли к смеси 8 мл 48% бромистоводородной кислоты и 1,4 мл пропионовой кислоты, затем смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 6 часов. Конечную реакционную смесь разбавляли 10 мл воды и экстрагировали дважды 50 мл этилацетата. Водный слой подщелачивали водным раствором гидроксида натрия и экстрагировали этилацетатом три раза. Экстракт концентрировали и неочищенный продукт разбавляли смесью 4 н. HCl/диоксан и перемешивали в течение 15 минут перед упариванием HCl, затем трехкратного повторно упаривали с толуолом, что давало 0,3 г гидрохлорида 5-хлор-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде черного твердого вещества. МС: [M+H]⁺153-15

Получение C4

Синтез 5-хлор-6-метокси-2,3-дигидро-1H-изоиндола

Смесь 1-хлор-2-метокси-4,5-диметилбензола (3 г, 17,6 ммоль), N-бромсукцинимида (6,3 г, 35,3 ммоль) и бензоилпероксида (0,100 г, 0,41 ммоль) в четыреххлористом углероде (40 мл) нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 18 часов. После охлаждения нерастворимое вещество удаляли фильтрованием, промывали небольшим количеством четыреххлористого углерода и упаривали фильтрат, что давало l,2-бис-бромметил-4-хлор-5-метоксибензол в виде маслянистого продукта как основного компонента. МС: [M+H]⁺329.

Раствор 4-метоксибензиламина (2,4 г, 17,6 ммоль) в ацетоне (110 мл) добавляли по каплям к смеси l,2-бис-бромметил-4-хлор-5-метоксибензола (предположительно теоретическое количество, 17,6 ммоль) и Na₂CО₃ (12 г, 114 ммоль) в смеси ацетон/вода (10 мл:12,5 мл), затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество растворяли в этилацетате и экстрагировали 2 н. HCl. Водный слой нейтрализовали карбонатом натрия, экстрагировали этилацетатом (2 раза), сушили (MgSO₄) и упаривали в вакууме, что давало 5-хлор-6-метокси-2-(4-метоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол (0,8 г, 2,6 ммоль) в виде коричневой смолы. МС: [M+H]⁺304

Раствор 5-хлор-6-метокси-2-(4-метоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндола (600 мг) и анизола (0,3 мл) в трифторуксусной кислоте (6 мл) нагревали при 180ºC (50 Вт) в течение 40 минут в микроволновом синтезаторе CEM для тестовых экспериментов. Реакционную смесь упаривали и повторно упаривали с толуолом. Неочищенное вещество распределяли между DCM и водой, водный слой промывали DCM (3 раза), затем упаривали и повторно упаривали с толуолом, что давало 5-хлор-6-метокси-2,3-дигидро-1H-изоиндол (256 мг) в виде зеленых кристаллов. МС: [M+H]⁺184

Получение C5

Синтез трифторацетата 2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-иламина

Раствор 4-нитро-o-ксилола (15,1 г; 0,1 моль) в четыреххлористом углероде (150 мл) обрабатывали N-бромсукцинимидом (36 г; 0,2 моль), затем бензоилпероксидом (1 г), затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Реакции давали охладиться до температуры окружающей среды, фильтровали и фильтрат упаривали, что давало 32 г неочищенного l,2-бис-бромметил-4-нитробензола в виде подвижного масла. Неочищенный продукт растворяли в бензоле (200 мл), затем обрабатывали по каплям в течение 30 минут раствором 2,4-диметоксибензиламина (15 мл) и триэтиламина (27,85 мл) в бензоле (100 мл), затем нагревали при 80ºC в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали, промывали водой, затем насыщенным бикарбонатом натрия. Органические фракции экстрагировали 2М HCl (2×150 мл), затем объединенные водные экстракты подщелачивали 2М NaOH и экстрагировали EtOAc (2 раза). Объединенный слой EtOAc сушили (MgSO₄), упаривали, затем очищали колоночной флэш-хроматографией при элюировании системами EtOAc/петролейный эфир (1:3-1:2-1:1). Фракции, содержащие продукт, объединяли и упаривали, что давало 10,15 г 2-(2,4-диметоксибензил)-5-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде коричневого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 8,12 (2H, м), 7,50 (1H, д), 7,25 (1H, д), 6,55 (1H, д), 6,52 (1H, дд), 3,93 (4H, с), 3,80 (3H, с), 3,78 (2H, с), 3,75 (3H, с).

2-(2,4-диметоксибензил)-5-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндол (13 г) в TFA (18 мл) обрабатывали анизолом (6 мл), затем нагревали в микроволновом синтезаторе CEM при 120ºC (30 Вт) в течение 20 минут (проводили в периодическом режиме, 6 раз). Реакционную смесь упаривали в вакууме, и остаток распределяли между DCM и водой. Водный слой отделяли, промывали DCM (×3), затем упаривали и повторно упаривали со смесью толуол/MeOH (×3), что давало 9,8 г соли трифторуксусной кислоты 5-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде бежевого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,85 (2H, ушир.с), 8,32 (1H, д), 8,25 (1H, дд), 7,70 (1H, д), 4,68 (2H, с), 4,65 (2H, с).

Смесь соли трифторуксусной кислотой 5-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндола (9,8 г) и 10% палладия на углероде (1 г) в метаноле (75 мл) гидрировали при комнатной температуре и давлении в течение 16 часов. Реакцию фильтровали через целит™, фильтрат упаривали и повторно упаривали с толуолом, что давало 8,76 г монотрифторацетатной соли 2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-иламина в виде темно-коричневого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,45 (2H, ушир.с), 7,05 (1H, д), 6,60 (2H, м), 5,35 (2H, ушир.с), 4,40 (2H, с), 4,30 (2H, с).

Получение C6

Синтез дитрифторацетата 5-морфолин-4-илметил-2,3-дигидро-1H-изоиндола

Стадии 1 и 2 проводили способом, аналогично описанному в получении C5 с использованием метил 3,4-диметилбензоата в качестве исходного вещества.

Смесь метилового эфира 2-(2,4-диметоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (4,65 г; 14,2 ммоль) и моногидрата гидроксида лития (660 мг; 1,1 эквив.) в смеси 4:1:1 ТГФ-MeOH-H₂O (60 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавляли 170 мг основания и перемешивание продолжали в течение 7 часов. Реакционную смесь упаривали, затем повторно упаривали со смесью MeOH/толуол (2 раза). Смесь неочищенной литиевой соли 2-(2,4-диметоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (1,5 г; 4,7 ммоль), морфолина (820 мкл; 2 эквив.), EDAC (1,1 г; 1,2 эквив.) и HOBt (760 мг; 1,2 эквив.) в ДМФА (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между EtOAc и насыщенным NaHCO₃, отделяли слой EtOAc, промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией (2%, затем 5% MeOH/DCM в качестве элюента) давала 1,1 г [2-(2,4-диметоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил]морфолин-4-илметанона в виде красно-коричневой смолы. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,30-7,18 (4H, м), 6,56 (1H, д), 6,52 (1H, дд), 3,85 (4H, с), 3,78 (5H, м), 3,73 (3H, с).

Раствор [2-(2,4-диметоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил]-морфолин-4-илметанона (1,05 г; 2,75 ммоль) в сухом ТГФ (20 мл) в атмосфере азота обрабатывали 1М раствором алюмогидрида лития, затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакцию гасили осторожным добавлением насыщенного раствора сульфата натрия, затем разбавляли EtOAc (40 мл), фильтровали через целит™ и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией (2%, затем 5% MeOH/DCM в качестве элюента) давала 340 мг 2-(2,4-диметоксибензил)-5-морфолин-4-илметил-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде бледно-коричневой смолы.

Смесь 2-(2,4-диметоксибензил)-5-морфолин-4-илметил-2,3-дигидро-1H-изоиндола (340 мг) и анизола (350 мкл) в трифторуксусной кислоте (1,5 мл) нагревали при 130ºC в микроволновом синтезаторе CEM в течение 1 часа, затем упаривали и повторно упаривали с толуолом. Остаток распределяли между DCM и водой. Водный слой отделяли, промывали DCM (×3), затем упаривали и повторно упаривали со смесью толуол/MeOH (×3), что давало 422 мг дитрифторацетата 5-морфолин-4-илметил-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде коричневой смолы. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,30 (1H, ушир.с), 9,60 (2H, ушир.с), 7,55-7,45 (3H, м), 4,45 (4H, с), 4,45-4,30 (2H, м), 4,20-3,88 (2H, м), 3,70-3,55 (2H, м), 3,30-3,00 (4H, м).

Получение C7

Синтез трифторацетата этил 2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоксилата

Раствор метилового эфира 2-(2,4-диметоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (215 мг) и анизола (200 мкл) в 1 мл TFA нагревали при 140ºC в течение 30 минут в микроволновом синтезаторе CEM для тестовых экспериментов. Реакционную смесь распределяли между водой и DCM, водный слой отделяли, промывали DCM, затем упаривали и повторно упаривали со смесью толуол/MeOH (×2), что давало 105 мг указанного в заголовке соединения. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,70 (2H, ушир.с), 8,02 (1H, с), 8,98 (1H, д), 7,57 (1H, д), 4,60 (2H, с), 4,56 (2H, с), 3,89 (3H, с).

Получение C8

4-гидрокси-2-(4-метоксибензил)изоиндол-1,3-дион

Смесь 3-гидроксифталевого ангидрида (543 мг, 3,31 ммоль), 4-метоксибензиламина (0,43 мл, 3,31 ммоль) и уксусной кислоты (3 мл) нагревали при 100ºC в течение 4 часов. Смеси давали охладиться и разбавляли водой (20 мл). Белое твердое вещество выделяли фильтрованием, тщательно промывали водой и сушили, что давало указанное в заголовке соединение (760 мг, 81%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,03 (1H, с), 7,61 (1H, дд), 7,28 (1H, д), 7,23-7,19 (3H, м), 6,89-6,86 (2H, м), 4,63 (2H, с), 3,71 (3H, с). МС: [M-H⁺] 282.

Получение C9

4-гидрокси-2-(2,4-диметоксибензил)изоиндол-1,3-дион

Смесь 3-гидроксифталевого ангидрида (1,24 г, 7,6 ммоль), 2,4-диметоксибензиламина (1,14 мл, 7,6 ммоль) и уксусной кислоты (5 мл) нагревали при 80ºC в течение 24 часов. Смеси давали охладиться и разбавляли водой (20 мл). Белое твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали тщательно водой и сушили, что давало указанное в заголовке соединение (1,73 г, 73%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,00 (1H, с), 7,62 (1H, дд), 7,29 (1H, д), 7,21 (1H, д), 6,90 (1H, д), 6,56 (1H, д), 6,43 (1H, дд), 4,59 (2H, с), 3,79 (3H, с), 3,72 (3H, с). МС: [M-H⁺] 282.

Получение C10

2-(4-Метоксибензил)-4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]изоиндол-1,3-дион

1-(2-Бромэтокси)-2-метоксиэтан (107 мг, 0,58 ммоль) добавляли к суспензии 4-гидрокси-2-(4-метоксибензил)изоиндол-1,3-диона (150 мг, 0,53 ммоль) и карбоната калия (200 мг, 1,4 ммоль) в ДМФА (2 мл). Спустя 3,5 час, добавляли каталитическое количество йодида калия. Спустя еще 17 часов смесь нагревали до 60ºC. Спустя 3 часа добавляли дополнительное количество 1-(2-бромэтокси)-2-метоксиэтана (20 мг, 0,11 ммоль) и смесь выдерживали при 60ºC в течение еще 20 часов. Смесь концентрировали в вакууме, затем остаток растворяли в этилацетате и промывали раствором карбонатом калия и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили (MgSO₄) и концентрировали, что давало указанное в заголовке соединение в виде желтого масла (149 мг, 73%). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,71 (1H, т), 7,43-7,40 (2H, м), 7,31-7,27 (2H, м), 6,87-6,83 (2H, м), 4,71 (2H, с), 4,37-4,34 (2H, м), 3,92-3,89 (2H, м), 3,77-3,74 (5H, м), 3,55-3,53 (2H, м), 3,33 (3H, с). МС: [M+H]⁺386.

Получение C11

2-(2,4-Диметоксибензил)-4-(2-диметиламиноэтокси)изоиндол-1,3-дион

Смесь 2-(2,4-диметоксибензил)-4-гидроксиизоиндол-1,3-диона (317 мг, 1,01 ммоль), гидрохлорида 2-диметиламиноэтилхлорида (160 мг, 1,11 ммоль) и карбоната калия (350 мг, 2,5 ммоль) в ДМФА (4 мл) нагревали при 60ºC в течение 18 часов. Смесь концентрировали в вакууме, растворяли в этилацетате и экстрагировали дважды 1 н. хлористоводородной кислотой. Водные экстракты подщелачивали твердым карбонатом калия и экстрагировали этилацетатом (2 раза). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и концентрировали, что давало указанное в заголовке соединение (236 мг, 61%) в виде не совсем белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,73 (1H, т), 7,44-7,40 (2H, м), 7,02 (1H, д), 6,51 (1H, д), 6,42 (1H, дд), 4,72 (2H, с), 4,33 (2H, т), 3,80 (3H, с), 3,76 (3H, с), 2,87 (2H, т), 2,40 (6H, с). МС: [M+H]⁺385.

Получение C12

2-(2,4-Диметоксибензил-4-(3-морфолин-4-илпропокси)изоиндол-1,3-дион

Смесь 2-(2,4-диметоксибензил)-4-гидроксиизоиндол-1,3-диона (313 мг, 1,00 ммоль), 4-(3-хлорпропил)морфолина (160 мг, 1,11 ммоль) и карбоната калия (350 мг, 2,5 ммоль) в ДМФА (5 мл) нагревали при 60ºC в течение 18 часов. Смесь разбавляли этилацетатом и экстрагировали дважды 1 н. хлористоводородной кислотой. Водные экстракты подщелачивали твердым карбонатом калия и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и концентрировали, что приводило к желтому твердому веществу, которое перекристаллизовывали из смеси метанол/петролейный эфир, затем этилацетат/хлорформ/петролейный эфир, что давало указанное в заголовке соединение (298 мг, 68%) в виде не совсем белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,72 (1H, т), 7,41 (1H, д), 7,39 (1H, д), 7,02 (1H, д), 6,51 (1H, д), 6,43 (1H, дд), 4,72 (2H, с), 4,27 (2H, т), 3,81 (3H, с), 3,76 (3H, с), 3,68 (4H, т), 2,61 (2H, т), 2,50 (4H, м), 2,05 (2H, квин.). МС: [M+H]⁺441.

Получение C13

2-(4-Метоксибензил)-4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-2,3-дигидро-1H-изоиндол

2-(4-Метоксибензил)-4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]изоиндол-1,3-дион (149 мг, 0,38 ммоль) обрабатывали 1М раствором алюмогидрида лития в ТГФ (5 мл, 5 ммоль). Смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 4 часов, при 60ºC в течение 1 часа, затем при комнатной температуре в течение еще 18 часов. Затем смесь охлаждали на льду и гасили, добавляя по каплям воду (0,2 мл), раствор 2 н. гидроксида натрия (0,4 мл) и воду (0,4 мл). Добавляли сульфат магния, затем этилацетат и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Твердые вещества удаляли фильтрованием, тщательно промывая этилацетатом. Концентрирование фильтрата давало остаток, который адсорбировали на SCX-картридже и промывали смесью 5% метанол/метиленхлорид, затем элюировали 10% 1М аммиаком в смеси метанол/метиленхлорид, что давало указанное в заголовке соединение (134 мг, 97%). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,43-7,39 (2H, м), 7,27 (1H, т), 6,99-6,96 (2H, м), 6,90 (1H, д), 6,88 (1H, д), 4,33 (2H, с), 4,28 (2H, с), 4,23 (2H, с), 4,18-4,15 (2H, м), 3,85-3,79 (5H, м), 3,67-3,64 (2H, м), 3,54-3,51 (2H, м), 3,33 (3H, с). МС: [M+H]⁺358.

Получение C14

2-(2,4-Диметоксибензил)-4-(2-диметиламиноэтокси)-2,3-дигидро-1H-изоиндол

2-(2,4-Диметоксибензил)-4-(2-диметиламиноэтокси)изоиндол-1,3-дион (201 мг, 0,52 ммоль) обрабатывали 1М раствором алюмогидрида лития в ТГФ (5 мл, 5 ммоль). Спустя 7,5 часов при комнатной температуре добавляли дополнительную порцию раствора алюмогидрида лития (5 мл, 5 ммоль) и смесь выдерживали в течение еще 18 часов. Затем смесь охлаждали на льду и гасили добавлением по каплям воды (0,4 мл), 2 н. раствора гидроксида натрия (0,8 мл) и воды (0,8 мл). Добавляли сульфат магния, затем этилацетат и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Твердые вещества удаляли фильтрованием, тщательно промывая этилацетатом. Концентрирование фильтрата давало указанное в заголовке соединение (192 мг, 103%) в виде коричневого масла, которое затем использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,24 (1H, д), 7,16 (1H, т), 6,82-6,78 (2H, м), 6,55 (1H, д), 6,51 (1H, дд), 4,12 (2H, т), 3,92 (4H, с), 3,86 (2H, с), 3,82 (3H, с), 3,80 (3H, с), 2,76 (2H, т), 2,33 (6H, с). МС: [M+H]⁺357.

Получение C15

2-(2,4-Диметоксибензил)-4-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидро-1H-изоиндол

2-(2,4-Диметоксибензил)-4-(3-морфолин-4-илпропокси)изоиндол-1,3-дион (298 мг, 0,68 ммоль) обрабатывали 1М раствором алюмогидрида лития в ТГФ (5 мл, 5 ммоль) и выдерживали при комнатной температуре в течение 21 часа. Смесь нагревали до 75ºC в течение 1 часа, затем охлаждали на льду и гасили добавлением по каплям воды (0,2 мл), 2 н. раствора гидроксида натрия (0,4 мл) и воды (0,4 мл). Добавляли сульфат магния, затем этилацетат и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Твердые вещества удаляли фильтрованием, тщательно промывая этилацетатом. Концентрироваие фильтрата давало неочищенный продукт, который очищали флэш-хроматографией на силикагеле, при элюировании 5% метанолом в DCM. Это приводило к указанному в заголовке соединению (233 мг, 83%) в виде красного масла. ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,24 (1H, д), 7,15 (1H, т), 6,80 (1H, д), 6,78 (1H, д), 6,56 (1H, д), 6,52 (1H, дд), 4,05 (2H, т), 3,94 (2H, с), 3,88 (2H, с), 3,87 (2H, с), 3,83 (3H, с), 3,80 (3H, с), 3,70-3,68 (4H, м), 2,54-2,50 (2H, м), 2,49-2,47 (4H, м), 2,00-1,93 (2H, м). МС: [M+H]⁺413.

Получение C16

4-[2-(2-Метоксиэтокси)этокси]-2,3-дигидро-1H-изоиндол

Раствор 2-(4-метоксибензил)-4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-2,3-дигидро-1H-изоиндола (45 мг, 0,13 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (2 мл) обрабатывали α-хлорэтилхлорформиатом (0,1 мл, 0,93 ммоль). Спустя 17 часов добавляли метанол (5 мл) и смесь перемешивали в течение 3 часов. Растворители удаляли в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение в виде зеленовато-черного твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,36 (1H, т), 6,98 (2H, д), 4,60 (2H, с), 4,57 (2H, с), 4,23-4,21 (2H, м), 3,85-3,83 (2H, м), 3,69-3,67 (2H, м), 3,57-3,54 (2H, м), 3,36 (3H, с). МС: [M+H]⁺238.

Получение C17

[2-(2,3-Дигидро-1H-изоиндол-4-илокси)этил]диметиламин

Раствор 2-(2,4-диметоксибензил)-4-(2-диметиламиноэтокси)-2,3-дигидро-1H-изоиндола (170 мг, 0,48 ммоль) в трифторуксусной кислоте (0,5 мл) и анизоле (0,5 мл) нагревали до 150ºC микроволновым облучением в течение 10 минут. Смесь разбавляли этилацетатом и экстрагировали дважды водой. Объединенные водные экстракты концентрировали, что давало указанное в заголовке соединение в виде пурпурного масла (240 мг, включая остаточные TFA и/или воду). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,42 (1H, т), 7,07 (1H, д), 7,04 (1H, д), 4,64 (4H, ушир.с), 4,47-4,44 (2H, м), 3,65-3,63 (2H, м), 3,01 (6H, с). МС: [M+H]⁺207.

Получение C18

4-(3-Морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидро-1H-изоиндол

Раствор 2-(2,4-диметоксибензил)-4-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидро-1H-изоиндола (233 мг, 0,56 ммоль) в трифторуксусной кислоте (1,0 мл) и анизоле (0,5 мл) нагревали до 150ºC при микроволновом облучении в течение 10 минут. Смесь разбавляли диэтиловым эфиром и экстрагировали дважды водой. Объединенные водные экстракты концентрировали, что приводило к маслу, которое растворяли в метаноле и концентрировали в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение в виде коричневого масла (348 мг, включая остаточные TFA и/или воду). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,40 (1H, т), 7,03 (1H, д), 6,99 (1H, д), 4,63 (2H, с), 4,59 (2H, с), 4,21 (2H, т), 4,14-4,04 (2H, м), 3,85-3,73 (2H, м), 3,61-3,52 (2H, м), 3,41-3,36 (2H, м), 3,25-3,13 (2H, м), 2,32-2,25 (2H, м). МС: [M+H]⁺263.

Получение C19

Синтез трифторацетата 4-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола

Получен по аналогичной методике для 5-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндола (описан в получении C5). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,73 (2H, ушир.с), 7,60 (1H, д), 7,45 (1H, д), 7,35 (1H, т), 4,65 (2H, с), 4,55 (2H, с).

Получение C20

Синтез 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола

Смесь 4-бромфталевого ангидрида (25 г) в формамиде (75 мл) нагревали при 200ºC в течение 16 часов, затем давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой (200 мл), фильтровали, остаток на фильтре промывали водой, затем диэтиловым эфиром и отсасывали на фильтре досуха, что давало 20,85 г светло-горчичного твердого вещества.

280 мл 1М комплекса боран-ТГФ добавляли по каплям к перемешиваемому раствору 4-бромфталимида (20,85 г; 92,2 ммоль) в безводном ТГФ (200 мл) при 0ºC, затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Реакцию охлаждали до 0ºC, затем аккуратно обрабатывали метанолом (100 мл), затем 2М HCl (100 мл), затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали и легкокипящие вещества выпаривали. Водный слой разбавляли водой (100 мл), экстрагировали DCM (×3). Водный слой подщелачивали 2М NaOH, затем экстрагировали DCM (×3). Объединенные DCM экстракты сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали, что давало 6,99 г 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола в виде темно-коричневого вязкого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,45 (1H, с), 7,36 (1H, д), 7,20 (1H, д), 4,05 (4H, с).

Получение C21

Синтез трифторацетата метилового эфира 2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты

В метиловом эфире 2-(2,4-диметоксибензил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (получение C6, продукт стадии 2) удаляли защитную функцию по аналогичной методике для 5-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндола (описано в получении C5), что давало указанное в заголовке соединение. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,70 (2H, ушир.с), 8,00 (1H, с), 7,95 (1H, д), 7,57 (1H, д), 4,60 (4H, с), 2,88 (3H, с).

D. Синтез бензилированных резорциновых промежуточных соединений

Получение D1

Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-метоксиэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

(2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон (A2 из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензойной кислоты (получение B10) и 5-гидроксиизоиндолина) (100 мг, 0,2 ммоль), 1-хлор-2-метоксиэтан (23,6 мг, 0,25 ммоль) и K₂CO₃ (34,5 мг, 0,25 ммоль) объединяли в ДМФА (4 мл) и перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Дополнительно добавляли 0,25 ммоль 1-хлор-2-метоксиэтана и K₂CO₃, затем нагревали при 90ºC в течение 16 часов. Реакцию охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EtOAc, затем фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме, затем очищали колоночной флэш-хроматографией, при элюировании от 100% петролейного эфира до 100% этилацетата, что давало 115 мг указанного в заголовке соединения, в виде бесцветного геля. МС: [M+H]⁺552

Получение D2

Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (100 мг, 0,2 ммоль), 4-(3-хлорпропил)морфолина (82 мг, 0,5 ммоль) и K₂CO₃ (104 мг, 0,75 ммоль) в ДМФА (5 мл) нагревали при 90ºC в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме и очищали колоночной флэш-хроматографией, при элюировании смесями 0-100% петролейный эфир/EtOAc, затем 0-10% MeOH/EtOAc, что давало указанное в заголовке соединение в виде бесцветного геля (90,1 мг). МС: [M+H]+621.

Получение D3

Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (100 мг, 0,2 ммоль), гидрохлорида 2-диметиламиноэтилхлорида (72 мг, 0,5 ммоль) и K₂CO₃ (173 мг, 1,25 ммоль) в ДМФА (5 мл) нагревали при 90ºC в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и фильтровали. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме и очищали колоночной флэш-хроматографией, при элюировании 100% DCM, затем 90% DMAW 90, что давало указанное в заголовке соединение в виде не совсем белого геля (79 мг). МС: [M+H]⁺565.

Получение D4

Синтез 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоилхлорида

2,4-Бис-бензилокси-5-изопропилбензойную кислоту (получение B10) (0,2 г, 0,53 ммоль) растворяли в DCM (10 мл) и обрабатывали оксалилхлоридом (1,5 г, 12 ммоль) и каталитическим количеством ДМФА. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов и затем растворитель удаляли в вакууме. Неочищенное вещество растворяли в толуоле и упаривали. Неочищенный 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоилхлорид получали в виде масла (200 мг).

Получение D5

Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон

Раствор 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензойной кислоты (505 мг; 1,3 ммоль) (получение B5), трифторацетат 5-нитроизоиндолина (360 мг; 1 эквив.), EDAC (300 мг; 1,2 эквив.), HOBt (210 мг; 1,2 эквив.) и NEt₃ (270 мкл; 1,5 эквив.) в ДМФА (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между EtOAc и 2М HCl, отделяли слой EtOAc, промывали насыщенным NaHCO₃, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией (1:4, затем 1:2, затем 1:1 EtOAc/петролейный эфир в качестве элюента) давала 460 мг (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-нитро-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона. МС: [M+H]⁺523.

Раствор (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-нитро-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон (460 мг; 0,88 ммоль) в этаноле (25 мл) обрабатывали дигидратом хлорида олова(II) (1 г; 5 эквив.), затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение ночи, затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между EtOAc и насыщенным NaHCO₃, отделяли слой EtOAc, сушили (MgSO₄) и упаривали, что давало 380 мг (5-амино-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)метанона.

Смесь (5-амино-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)метанона (100 мг; 0,2 ммоль), бис(2-хлорэтилового)эфира (30 мкл; 1,1 эквив.), основания Хунигса (Hunigs) (125 мкл; 3,5 эквив.) и тетрабутиламмониййодида (10 мг) в NMP (1 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе CEM при 150ºC в течение 30 минут. Дополнительно добавляли 30 мкл основания Хунигса (Hunigs) и 125 мкл бис(2-хлорэтилового)эфира и нагревание повторяли в течение такого же времени. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NH₄Cl, отделяли слой EtOAc, промывали более насыщенным раствором NH₄Cl, затем насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией (1:2, затем 1:1, затем 2:1 EtOAc/петролейный эфир в качестве элюента) давала 60 мг (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона. МС: [M+H]⁺563.

Получение D6

Синтез 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты

Раствор метилового эфира 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (390 мг) в метаноле (10 мл) и 2М NaOH (10 мл) нагревали при 50ºC в течение 48 часов, затем упаривали. Остаток подкисляли 2М HCl, твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали водой и отсасывали на фильтре досуха, что давало 255 мг 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты в виде белого твердого вещества. [M+H]⁺520.

ПРИМЕРЫ

Соединения, представленные в таблице ниже, были получены согласно способам, описанным выше.

Номер пр. Соединение Химическое название Способ Данные ЯМР Масс-спектр 1 (5-Хлор-2-гидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A1. Из 5-хлор-2-гидроксибензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (MeOH-d₄) 7,20-7,42 (6H, м), 6,92 (1H, д), 4,94 (2H, с), 4,74 (2H, с) МС: [M+H]⁺274 2 (3-трет-Бутил-4-гидроксифенил)-(2,3-дигидроиндол-1-ил)метанон A2. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и индолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,56 (2H, ушир.м), 7,40 (1H, с), 7,33 (1H, д), 7,26 (1H, д), 7,13 (1H, т), 6,98 (1H, т), 6,85 (1H, д), 4,07 (2H, т), 3,08 (2H, т), 1,38 (9H, с) МС: [M+H]⁺296 3 (3-трет-Бутил-4-гидроксифенил)-(3,4-дигидро-2H-хинолин-1-ил)метанон A2. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и 1,2,3,4-тетрагидрохинолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 11,05 (1H, ушир.с), 8,17 (1H, д), 8,04 (2H, м), 7,88 (1H, д), 7,67 (1H, т), 7,54 (1H, т), 7,09 (1H, д), 3,39 (1H, м), 3,28 (1H, м), 1,40 (9H, с), 1,07 (3H, м), 0,84 (1H, м) МС: [M+H]⁺310 4 (3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-(4-гидрокси-3-изопропилфенил)метанон A2. Из 3-изопропил-4-гидроксибензойной кислоты и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,77 (1H, ушир.с), 7,24 (1H, д), 7,17 (4H, с), 7,18 (1H, дд), 6,84 (1H, д), 4,68 (2H, с), 3,70 (2H, ушир.с), 3,23 (1H, м), 2,87 (2H, м), 1,18 (6H, д) МС: [M+H]⁺296 5 (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон A2 и A5. Из 2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (B9) и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,03 (1H, с), 9,63 (1H, с), 7,29 (4H, ушир.м), 7,03 (1H, с), 6,40 (1H, с), 4,77 (4H, ушир.с), 3,09 (1H, м), 1,14 (6H, д) МС: [M+H]⁺298 6 3-трет-Бутил-4-гидроксифенил)-(l,4-диокса-8-азаспиро[4.5]дек-8-ил)метанон A4. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и этиленкеталя 4-пиперидона ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,82 (1H, с), 7,22 (1H, с), 7,13 (1H, дд), 6,82 (1H, д), 3,91 (4H, с), 3,52 (4H, ушир.м), 1,63 (4H, ушир.м), 1,37 (9H, с) МС: [M+H]⁺320 7 (3-трет-Бутил-4-гидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A4. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,82 (1H, с), 7,41 (1H, с), 7,38 (2H, дд), 7,29 (3H, ушир.м), 6,82 (1H, д), 4,82 (4H, ушир.м), 1,37 (9H, с) МС: [M+H]⁺296 8 (3-трет-Бутил-4-гидроксифенил)пирроло[3,2-b]пиридин-1-илметанон A4. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и 1H-пирроло[3,2-b]пиридина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 8,57 (1H, дд), 8,43 (1H, д), 7,89 (1H, дд), 7,63 (1H, с), 7,56 (1H, дд), 7,35 (1H, м), 7,09 (1H, д), 6,84 (1H, дд), 1,37 (9H, с) МС: [M+H]⁺295 9 8-(3-трет-Бутил-4-гидроксибензоил)-2-метил-2,8-диазаспиро[4.5]декан-1-он A4. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и гидрохлорида 4-спиро[3-(N-метил-2-пирролидинон]пиперидина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,82 (1H, с), 7,22 (1H, с), 7,13 (1H, дд), 6,82 (1H, д), 3,98 (2H, ушир.м), 3,34 (2H, с), 3,13 (2H, м), 2,71 (3H, с), 1,92 (2H, т), 1,60 (2H, м), 1,43 (2H, м), 1,37 (9H, с) МС: [M+H]⁺345 10 (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(4-гидрокси-3-изопропилфенил)метанон A4. Из 3-изопропил-4-гидроксибензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,82 (1H, с), 7,4 (2H, с), 7,38 (1H, дд), 7,30 (3H, м), 6,82 (1H, д), 4,82 (4H, дд), 3,23 (1H, м), 1,23 (6H, с) МС: [M+H]⁺282 11 (3-трет-Бутил-4-гидроксифенил)-(3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)метанон A4. Из 3-трет-бутил-4-гидроксибензойной кислоты и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,22 (1H, с), 7,13 (5H, м), 6,82 (1H, д), 4,70 (2H, с), 3,75 (2H, ушир.с), 2,85 (2H, т), 1,37 (9H, с) [M+H]⁺310 12 (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(5-этил-2,4-дигидроксифенил)метанон A2, A6 и A5. Из 2,4-Бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты, изоиндолина и винилтрифторбората калия ¹Н ЯМР (MeOH-d₄) 7,30 (4H, с), 7,15 (1H, с), 6,38 (1H, с), 4,91 (4H, с), 2,58 (2H, кв.), 1,18 (3H, т) МС: [M+H]⁺284 13 (5-Циклопропил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2, A6 и A5. Из 2,4-Бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты, изоиндолина и циклопропанбороновой кислоты ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,40-7,23 (4H, м), 6,73 (1H, с), 6,40 (1H, с), 4,75 (4H, ушир.с), 1,92 (1H, м), 0,78 (2H, м), 0,53 (2H, м) МС: [M+H]⁺296 14 (5-втор-Бутил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2, A6 и A5. Из 2,4-Бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты, изоиндолина и 2-бутен-2-илбороновой кислоты ¹Н ЯМР (MeOH-d₄) 7,30 (4H, с), 7,15 (1H, с), 6,39 (1H, с), 4,92 (4H, с), 3,00 (1H, кв.), 1,63 (2H, м), 1,18 (3H, т), 0,88 (3H, т) МС: [M+H]⁺312 15 (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(3-этокси-4-гидроксифенил)метанон Способ A4. Из 3-этокси-4-гидроксибензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,45 (1H, ушир.с), 7,30 (3H, д), 7,18 (1H, д), 7,08 (1H, дд), 6,85 (1H, д), 4,85 (4H, с), 4,10 (2H, кв.), 1,38 (3H, т) МС: [M+H]⁺284 16 (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидроксифенил)метанон A2 и A5. Из 2,4-Бис-бензилокси-5-бромбензойной кислоты и изоиндолин ¹Н ЯМР (MeOH-d₄) 7,30 (5H, м), 7,15 (1H, с), 6,42 (1H, с), 6,38 (1H, с), 4,92 (4H, с) МС: [M+H]⁺256

ПРИМЕР 17

Синтез (5-хлор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона

Раствор 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензойной кислоты (получение B10) (0,451 г, 1,2 ммоль), EDC (0,276 мг, 1,44 ммоль), HOAt (0,196 мг, 1,44 ммоль), триэтиламина (0,5 мл, 3,6 ммоль) и 5-хлор-2,3-дигидро-1H-изоиндола (0,187 г, 1,2 ммоль) (получение C3) в ДМФА (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, затем упаривали в вакууме. Неочищенное вещество растворяли в этилацетате и экстрагировали дважды насыщенным NaHCO₃, органические фракции промывали водой три раза, затем упаривали в вакууме, что давало 0,5 г 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-хлор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона. МС: [M+H]⁺512

Трихлорид бора (1М в DCM) добавляли по каплям к раствору 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-хлор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (0,5 г, 0,97 ммоль) в сухом DCM (10 мл) при 0ºC в атмосфере азота, затем перемешивали в течение при 0ºC в течение 1 часа, нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 3 часов. Реакцию гасили льдом, распределяли между DCM и водой. DCM слой сушили (MgSO₄), упаривали в вакууме, затем очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле при элюировании 80% петролейным эфиром в EtOAc, что давало 0,1 г (5-хлор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона в виде белого твердого вещества. МС: [M+H]⁺332. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,0 (1H, с) 9,60 (1H, с), 7,45 (1H, ушир.с), 7,33 (2H, ушир.с), 7,0 (1H, с), 6,4 (1H, с), 4,80 (4H, ушир.с), 3,10 (1H, м), 1,15 (6H, д).

ПРИМЕР 18

Синтез гидрохлорида [5-(3-аминопропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона.

Раствор трет-бутилового эфира {3-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-илокси]пропил}карбаминовой кислоты (пример 46) (1 г) в EtOAc (10 мл) обрабатывали насыщенным раствором HCl в EtOAC (20 мл), затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь упаривали и повторно упаривали с этанолом (3 раза). Указанное в заголовке соединение выделяли в виде кремовой пены (840 мг). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,05 (1H, ушир.с), 9,60 (1H, с), 7,88 (3H, ушир.с), 7,30-7,18 (1H, м), 7,05(1H, с), 7,00-6,85 (2H, м), 6,42 (1H, с), 4,75 (2H, ушир.с) 4,70 (2H, ушир.с), 4,05 (2H, т), 3,10 (1H, м), 3,00-2,95 (2H, м), 2,00 (2H, тт), 1,15 (6H, д). МС: [M+H]⁺371.

ПРИМЕР 19

(5-Бром-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон

Раствор 5-бром-2,4-дигидроксибензойной кислоты (520 мг, 2,33 ммоль) в ДМФА (5 мл) обрабатывали гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (471 мг, 2,45 ммоль), затем HOBt (362 мг, 2,68 ммоль). Через 25 мин добавляли 2,3-дигидро-1H-изоиндол (0,5 мл, 2,63 ммоль), затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Растворитель удаляли в вакууме, затем остаток растворяли в этилацетате и промывали 1 н. хлористоводородной кислотой, насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, затем сушили (MgSO₄) и концентрировали. Остаток растирали в метаноле, что давало указанное в заголовке соединение в виде серого твердого вещества (328 мг, 44%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,45 (1H, с), 10,32 (1H, с), 7,36 (1H, ушир.с), 7,35 (1H, с), 7,28 (3H, ушир.с), 6,59 (1H, с), 4,77 (2H, ушир.с), 4,71 (2H, ушир.с). МС: [M+H]⁺332/334.

ПРИМЕР 20

(1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-трифторметилфенил)метанон

20A. (2,4-Бис-бензилокси-5-бромфенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон

Согласно общему способу A2, 2,4-бис-бензилокси-5-бромбензойная кислота (1,02 г, 2,47 ммоль) давала остаток, который очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент 0-20% этилацетат/петролейный эфир), что давало указанное в заголовке соединение в виде белого кристаллического твердого вещества (501 мг, 39%). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,52 (1H, с), 7,49-7,46 (2H, м), 7,42-7,37 (2H, м), 7,34 (т, 2H), 7,30-7,24 (4H, м), 7,23-7,20 (3H, м), 7,16 (1H, д), 6,94 (1H, с), 5,24 (2H, с), 5,16 (2H, с), 4,86 (2H, с), 4,60 (2H, с). МС: [M+H]⁺514/516.

20B. (2,4-Бис-бензилокси-5-трифторметилфенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-бромфенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (491 мг, 0,95 ммоль), трифторацетата натрия (649 мг, 4,8 ммоль) и йодида меди(I) (364 мг, 1,91 ммоль) сушили в вакууме (0,04 мбар) в течение 6 часов. Колбу заполняли азотом, добавляли ДМФА (5 мл) и смесь нагревали при 150ºC в течение 17 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли DCM (100 мл) и фильтровали через целит, промывая DCM. Фильтрат концентрировали досуха, и остаток частично очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент 0-20% этилацетат/петролейный эфир). Наиболее чистую фракцию перекристаллизовывали из метанола, что давало указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (140 мг, 29%). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,60 (1H, с), 7,48-7,44 (2H, м), 7,40 (2H, т), 7,37-7,21 (м, 9H), 7,17 (1H, д), 7,02 (1H, с), 5,29 (2H, с), 5,24 (2H, с), 4,88 (2H, с), 4,62 (2H, с). МС: [M+H]⁺504.

20C. (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-трифторметилфенил)метанон

Раствор (2,4-бис-бензилокси-5-трифторметилфенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (140 мг, 0,28 ммоль) в метаноле (5 мл) гидрировали при атмосферном давлении на 10% палладии на углероде (34 мг) в течение 4 часов. Дополнительно добавляли порцию катализатора (31 мг) и гидрирование продолжали в течение еще 1,5 часов. Смесь фильтровали через целит при элюировании метанолом, затем фильтрат концентрировали в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (91 мг, количественный). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,79 (1H, с), 10,70 (1H, с), 7,40-7,35 (2H, м), 7,31-7,35 (3H, м), 6,61 (1H, с), 4,79 (2H, ушир.с), 4,68 (2H, ушир.с). МС: [M+H]⁺324.

ПРИМЕР 21

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил-{4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон

Раствор 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (96 мг, 0,26 ммоль) и ДМФА (1 капля, катализатор) в DCM (3 мл) охлаждали на льду, затем обрабатывали оксалилхлоридом (112 мкл, 1,28 ммоль). Спустя 2 часа смесь концентрировали в вакууме, затем азеотропно перегоняли с толуолом. Полученный хлорангидрид растворяли в DCM (4 мл) и добавляли к раствору 4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-2,3-дигидро-1H-изоиндола (0,26 ммоль, предположительно количественный выход на предшествующей стадии (дебензилирование в получении C16)) и триэтиламина (0,20 мл, 1,4 ммоль) в DCM (1 мл). Спустя 2 часа смесь разбавляли этилацетатом и промывали 1 н. хлористоводородной кислотой, насыщенным раствором соли, раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили (MgSO₄) и концентрировали, что давало черный остаток. Его частично очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент 20-33% этилацетат/петролейный эфир), что давало загрязненный образец промежуточного соединения (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-{4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона.

Раствор (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-{4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона в метаноле (5 мл) гидрировали при атмосферном давлении на 10% палладии на углероде (12 мг) в течение 3 часов. Дополнительно добавляли порцию катализатора (12 мг) и гидрирование продолжали в течение еще 7 часов. Смесь фильтровали через целит при элюировании метанолом, затем фильтрат концентрировали в вакууме, что давало остаток, который очищали препаративной ВЭЖХ (основной способ). Это приводило к указанному в заголовке соединению, в виде белого твердого вещества (17 мг, 16% на две стадии). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,25 (1H, т), 7,17 (1H, с), 6,95-6,82 (2H, м), 6,37 (1H, с), 4,89 (2H, ушир.с), 4,83 (перекрывается с H₂O, ушир.с), 4,16 (2H, ушир.с), 3,82 (2H, ушир.с), 3,66 (2H, ушир.с), 3,52 (2H, ушир.с), 3,39-3,28 (перекрывается с MeOH, м), 3,20 (1H, септ.), 1,21 (6H, д). МС: [M+H]⁺416.

ПРИМЕР 22

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

Раствор 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (189 мг, 0,50 ммоль) и ДМФА (1 капля, катализатор) в DCM (5 мл) охлаждали на льду, затем обрабатывали оксалилхлоридом (112 мкл, 1,28 ммоль). Спустя 2 часа смесь концентрировали в вакууме, затем азеотропно отгоняли с толуолом. Полученный хлорангидрид растворяли в DCM (5 мл) и добавляли к раствору [2-(2,3-дигидро-1H-изоиндол-4-илокси)этил]диметиламина (0,48 ммоль, предположительно количественный выход на предшествующей стадии (C 17)) и триэтиламин (0,50 мл, 3,6 ммоль) в DCM (3 мл). Спустя 16 часов, смесь разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным раствором карбоната калия и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили (MgSO₄) и концентрировали, что давало остаток, который частично очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент, 5-10% метанол/DCM, затем 10% 2М метанольный аммиак/DCM), что давало загрязненный образец промежуточного соединения (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона.

Раствор (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона в метаноле (5 мл) гидрировали при атмосферном давлении на 10% палладии на углероде (40 мг) в течение 22 часов. Смесь фильтровали через целит при элюировании метанолом, затем фильтрат концентрировали в вакууме, что приводило к остатку, который очищали препаративной ВЭЖХ (кислотный способ). Это приводило к формиатной соли указанного в заголовке соединения, в виде белого твердого вещества (9 мг, 5% на две стадии). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 8,52 (0,7H, с), 7,29 (1H, т), 7,17 (1H, с), 6,98-6,86 (2H, м включая 6,90 (1H, д)), 6,37 (1H, с), 4,89 (2H, ушир.с), 4,87 (2H, ушир.с), 4,28 (2H, ушир.с), 3,29-3,5 (3H, м включая 3,20 (1H, септ.)), 2,81-2,51 (6H, ушир.д), 1,21 (6H, д). МС: [M+H]⁺385.

ПРИМЕР 23

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

Раствор 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (210 мг, 0,56 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,25 мл, 1,4 ммоль) в DCM (5 мл) обрабатывали гексафторфосфатом бромтриспирролидинoфосфония (PyBrOP) (287 мг, 0,62 ммоль). Спустя 1 час, добавляли раствор 4-(3-морфолин-4-илпропокси)-2,3-дигидро-1H-изоиндола (0,56 ммоль, предположительно количественный выход на предшествующей стадии (C18)) в DCM (5 мл). Спустя 4 часа смесь разбавляли этилацетатом и промывали водой, 1н раствором гидроксида натрия и насыщенным раствором соли. Органическую фазу сушили (MgSO₄) и концентрировали, что давало остаток, который адсорбировали на SCX-колонке. Колонку промывали смесью 10% метанол/DCM, затем продукт элюировали 25% 2М метанольным аммиаком/DCM), что давало загрязненный образец промежуточного соединения (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон.

Раствор (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона в метаноле (5 мл) гидрировали при атмосферном давлении на 10% палладии на углероде (45 мг) в течение 4 часов. Смесь фильтровали через целит при элюировании метанолом, затем фильтрат концентрировали в вакууме, что давало остаток, который очищали препаративной ВЭЖХ (щелочной способ). Это приводило к указанному в заголовке соединению в виде белого твердого вещества (16 мг, 6% на две стадии). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,24 (1H, т), 7,18 (1H, с), 6,89 (1H, д), 6,84 (1H, д), 6,37 (1H, с), 4,87 (2H, ушир.с), 4,78 (2H, ушир.с), 4,11-4,04 (2H, м), 3,72-3,66 (4H, м), 3,21 (1H, септ.), 2,60-2,42 (6H, м), 2,05-1,92 (2H, м), 1,21 (6H, д). МС: [M+H]⁺441.

ПРИМЕРЫ 24-47

Соединения примеров 24-47 получали, следуя описанным выше способам.

Номер пр. Соединение Химическое название Способ Данные ЯМР Масс-спектр 24 (3-втор-Бутил-4-гидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A5. Из (Z)-4-бензилокси-3-(1-метилпропенил)бензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,73 (1H, ушир.с), 7,37 (1H, д), 7,32 (1H, дд), 7,30 (4H, ушир.с), 6,86 (1H, д), 4,87 (2H, с), 4,82 (2H, с), 3,03 (1H, м), 1,63 (1H, м), 1,57 (1H, м), 1,19 (3H, д), 0,82 (3H, т) [M+H]⁺296 25 (5-трет-Бутил-2,4-дигидроксифенил-2,4-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-трет-бутилбензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,34 (2H, м), 7,29 (2H, м), 7,10 (1H, с), 6,33 (1H, с), 4,83 (4H, с), 1,35 (9H, с) МС: [M+H]⁺312 26 (5-Хлор-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A3. Из 2,4-бис-бензилокси-5-хлорбензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,42 (1H, с), 10,33 (1H, с), 7,38 (2H, м), 7,30 (2H, м), 7,24 (1H, с), 6,60 (1H, с), 4,78 (2H, ушир.с), 4,72 (2H, ушир.с) МС: [M+H]⁺290 27 (1,3-Дигидроизоиндол-2-ил)-(2-гидрокси-5-изопропил-4-метоксифенил)метанон A2, A5 и A7. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты и изоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,21 (1H, ушир.с), 7,33 (2H, ушир.с), 7,28 (2H, ушир.с), 7,13 (1H, с), 6,50 (1H, с), 4,80 (4H, ушир.с), 3,79 (3H, с), 3,15 (1H, м), 1,14 (6H, д) МС: [M+H]⁺312 28 (4,7-дифтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты и 4,7-дифторизоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,97 (1H, ушир.с), 9,66 (1H, ушир.с), 7,22 (2H, дд), 7,03 (1H, с), 6,42 (1H, с), 4,84 (4H, ушир.с), 3,10 (1H, м), 1,13 (6H, д) МС: [M+H]⁺334 29 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-фтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты и 5-фтор-изоиндолина [патент США 5026856] ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,02 (1H, ушир.с), 9,58 (1H, с), 7,37 (1H, ушир.м), 7,20 (1H, ушир.м), 7,12 (1H, тд), 7,04 (1H, с), 6,41 (1H, с), 4,78 (2H, ушир.с), 4,75 (2H, ушир.с), 3,11 (1H, м), 1,16 (6H, д) МС: [M+H]⁺316 30 (1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(3-фтор-2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон A8. Из (1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 12,23 (1H, ушир.с), 7,39 (1H, м), 7,35-7,25 (3H, м), 6,84 (1H, д), 5,53 (1H, с), 4-74 (2H, с), 4,59 (2H, с), 2,52 (1H, м), 1,11 (3H, д), 0,84 (3H, д); ¹⁹F ЯМР (ДМСО-d₆) 19,3 МС: [M+H]⁺316 31 (1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2-фтор-4,6-дигидрокси-3-изопропилфенил)метанон A8. Из (1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 12,03 (1H, ушир.с), 7,40-7,35 (2H, м), 7,33-7,28 (2H, м), 6,53 (1H, ушир.д), 5,53 (1H, с), 5, 07 (1H, ушир.д), 4,98 (1H, ушир.д), 4,79 (2H, с), 2,90 (1H, м), 1,03 (6H, м); ¹⁹F ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 24,9 МС: [M+H]⁺316 32 гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(4-фтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензойной кислоты (B10) и 4-фтор-2,3-дигидро-1Н-изоиндола ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,35 (2H, м), 7,20 (1H, м), 7,1 (1H, т), 7,0 (1H, с), 6,4 (1H, с), 4,80 (4H, ушир.с), 1,20 (6H, с) МС: [M+H]⁺316 33 (5-хлор-6-метокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензойной кислоты (B10) и 5-хлор-6-метокси-2,3-дигидро-1H-изоиндола ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,32 (1H, с), 7,17 (1H, с), 7,05 (1H, с), 6,37 (1H, с), 4,89 (2H, с), 3,89 (3H, с), 3,36 (3H, м), 1,23 (6H, д) МС: [M+H]⁺362 34 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-метоксиэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон A5. Из (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-метоксиэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,02 (1H, с), 9,60 (1H, с), 7,22 (1H, ушир.с), 7,03 (1H, с), 6,90 (1H, ушир.с), 6,85 (1H, д), 6,4 (1H, с), 4,74 (4H, ушир.д), 4,08 (2H, ушир.с), 3,65 (2H, т), 3, 18-3,03 (1H, м), 1,15 (6H, с), 3,30 (3H, с) МС: [M+H]⁺372 35 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон A5. Из (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,02 (1H, с), 9,60 (1H, с), 7,22 (1H, ушир.с), 7,03 (1H, с), 6,90 (1H, ушир.с), 6,85 (1H, д), 6,4 (1H, с), 4,74 (4H, ушир.д), 4,08 (2H, ушир.с), 3,55 (4H, ушир.с), 3, 18-3,03 (1H, м), 2,40 (2H, с), 2,38 (4H, ушир.с), 1,85 (2H, т), 1,15 (6H, с) МС: [M+H]⁺441 36 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон A5. Из (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,02 (1H, с), 9,60 (1H, с), 7,22 (1H, ушир.с), 7,03 (1H, с), 6,90 (1H, ушир.с), 6,85 (1H, д), 6,40 (1H, с), 4,74 (4H, ушир.д), 4,08 (2H, ушир.с), 3,18-3,03 (1H, м), 2,71 (2H, ушир.с), 2,30 (6H, с), 1,15 (6H, с) МС: [M+H]⁺385 37 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гепт-5-ил)метанон A2 и А5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,64 (1H, с), 7,02 (1H, с), 6,31 (1H, с), 4,65 (2H, с), 3,78 (2H, дд), 3,31 (2H, с), 3,07 (1H, м), 1,77 (2H, м), 1,10 (6H, м) МС: [M+H]⁺278 38 (3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон A2 и А5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолина ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,19 (1H, с), 7,14-7,09 (1H, ушир.с), 7,02 (1H, с), 6,37 (1H, с), 4,75 (2H, с), 3,80 (2H, т), 3,24-3,15 (1H, м), 2,95 (2H, т), 1,19 (6H, д) МС: [M+H]⁺312 39 (5-амино-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и TFA-соли 5-нитроизоиндолина (C5, но опуская стадию гидрирования) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,05 (1H, с), 6,95-6,85 (1H, м), 6,60-6,50 (2H, м), 6,25 (1H, с), 4,6-4,5 (4H, м), 3,10 (1H, H), 1,10 (6H, д) МС: [M+H]+313 40 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-метокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и 5-метоксиизоиндолина ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,05 (1H, с), 9,60 (1H, с), 7,30-7,15 (1H, м), 7,05 (1H, с), 7,00-6,85 (1H, м), 6,82 (1H, д), 6,40 (1H, с), 4,75 (2H, с) 4,70 (2H, с), 3,75 (3H, с), 3,10 (1H, м), 1,13 (6H, д) МС: [M+H]+328 41 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A5. Из (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (D5) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,60 (1H, ушир.с), 7,30-7,15 (1H, м), 7,05 (1H, с), 7,00-6,90 (2H, м), 6,40 (1H, с), 4,75 (2H, с)4,70 (2H, с), 3,75 (4H, м), 3,15-3,05 (5H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺383 42 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как в примере 41, но с использованием гидрохлорида бис(2-хлорэтил)метиламина на стадии 2 ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,30-7,15 (1H, м), 7,05 (1H, с), 6,95-6,85 (2H, м), 6,40 (1H, с), 4-70 (2H, ушир.с) 4,65 (2H, ушир.с), 3,15-3,05 (5H, м), 2,45 (4H, м), 2,20 (4H, с), 1,85 (3H, с), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺396 43 Метиловый эфир 2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты A2 и А5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и TFA-соли метилового эфира 2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-карбоновой кислоты (получение C21) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,05 (1H,ушир.с), 9,60 (1H, с), 8,00-7,92 (1H, м), 7,90 (1H, с), 7,55-7,42 (1H, м), 7,05 (1H, д), 6,40 (1H, с), 4,85 (4H, ушир.с) 3,85 (3H, с), 3,10 (1H, м), 1,13 (6H, д) МС: [M+H]⁺356 44 2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-карбоновая кислота A5. Из 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 12,90 (1H, ушир.с), 10,05 (1H, ушир.с), 9,60 (1H, с), 8,00-7,92 (1H, м), 7,90 (1H, д), 7,55-7,40 (1H, м), 7,05 (1H, д), 6,45 (1H, с), 4,85 (4H, ушир.с) 3,10 (1H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺342 45 гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона A2 и А5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и дитрифторацетата 5-морфолин-4-илметил-2,3-дигидро-1Н-изоиндола (C6) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 11,03 (1H, ушир.с), 10,05 (1H, ушир.с), 9,78 (1H, ушир.с), 7,60-7,38 (3H, м), 7,05 (1H, с), 6,45 (1H, с), 4,80 (4H, м), 4,33 (2H, д), 3,95-3,85 (2H, м), 3,32-3,22 (2H, м), 3,28-3,00 (5H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]+397 46 трет-бутиловый эфир {3-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-илокси]пропил}карбаминовой кислоты Как в примере 34, A2 (из бензилокси-5-изопропилбензойной кислоты (получение B5) и 5-гидроксиизоиндолина), алкилирование с использованием 3-(BOC-амино)пропилбромида, затем A5 ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,05 (1H, ушир.с), 9,60 (1H, с), 7,30-7,15 (1H, м), 7,05 (1H, с), 6,98-6,80 (3H, м), 6,40 (1 H, с), 4,75 (2H, ушир.с) 4,70 (2H, ушир.с), 3,95 (2H, с), 3, 15-3,05 (3H, м), 1,80 (2H, тт), 1,37 (9H, с), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺471 47 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и дитрифторацетата 5-морфолин-4-илметил-2,3-дигидро-1Н-изоиндола (C6), побочный продукт из примера 45 ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,05 (1H, с), 9,60 (1H, с), 7,25-7,08 (3H, м), 7,05 (1H, с), 6,40 (1H, с), 4,75 (4H, м), 3,10 (1H, м), 2,30 (1H, с), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺312

ПРИМЕР 48

Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-изопропиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

К суспензии гидрохлорида [5-(3-аминоэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона (пример 57) (250 мг, 0,702 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл) добавляли ацетон (62 мкл, 0,842 ммоль), триацетоксиборгидрид натрия (178 мг, 0,842 ммоль) и уксусную кислоту (48 мкл, 0,842 ммоль), затем нагревали при 60ºC в течение 24 часов. К реакционной смеси дополнительно добавляли ацетон (52 мкл, 0,702 ммоль), триацетоксиборгидрид натрия (149 мг, 0,702 ммоль), уксусную кислоту (40 мкл, 0,702 ммоль) и нагревали при 60ºC в течение еще 2 часов. Реакционную смесь затем фильтровали и маточный раствор очищали флэш-хроматографией [Biotage SP4: 25 м, скорость потока 25 мл/мин, градиент 20%-100% DMAW 90 в DCM), что давало (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-изопропиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон в виде светло-коричневого вязкого масла (140 мг, 50%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d6) 10,05 (1H, ушир.с); 9,60 (1H, ушир.с); 7,23 (1H, ушир.с); 7,05 (1H, с); 6,93 (1H, ушир.с); 6,85 (1H, ушир.д); 6,40 (1H, с); 4,70 (4H, ушир.м); 4,00 (2H, т); 3,10 (1H, м); 2,90 (2H, т); 2,80 (1H, м); 1,15 (6H, д); 1,00 (6H, д). МС: [M+H]⁺399.

ПРИМЕР 49

Синтез N-{2-[2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-илокси]этил}-2-морфолин-4-илацетамида

К раствору гидрохлорида [5-(3-аминоэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанона (100 мг, 0,255 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли EDC (59 мг, 0,306 ммоль), HOBt (41 мг, 0,306 ммоль), морфолин-4-илуксусную кислоту (37 мг, 0,255 ммоль) и триэтиламин (43 мкл, 0,306 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение одного часа. К реакционной смеси дополнительно добавляли EDC (20 мг, 0,104 ммоль), HOBt (14 мг, 0,104 ммоль), морфолин-4-илуксусную кислоту (12 мг, 0,083 ммоль) и триэтиламин (14 мкл, 0,100 ммоль) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение еще 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией [Biotage SP4: 25S, скорость потока 25 мл/мин, градиент от 20% DMAW 90 в DCM до 100% DMAW 90], затем препаративной ВЭЖХ, что давало N-{2-[2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-илокси]этил}-2-морфолин-4-илацетамид в виде бесцветного вязкого масла (40 мг, 33%). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,20 (1H, ушир.с); 7,18 (1H, с); 6,90 (2H, ушир.м); 6,40 (1H, с); 4,10 (2H, т); 3,73 (4H, м); 3,63 (2H, т); 3,20 (1H, м); 3,18 (2H, с); 2,60 (4H, м); 1,25 (6H, д). МС: [M+H]⁺484.

ПРИМЕР 50

Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

50A. Синтез трет-бутилового эфира 5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты

Смесь 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола (1,26 г; 6,4 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (1,53 г; 1,1 эквив.) и 4-диметиламинопиридина (каталитическое количество) в ДМФА (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали. Остаток распределяли между EtOAc и насыщенным раствором соли, отделяли слой EtOAc, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией с использованием Biotage SP4 (4OS, 40 мл/мин), при элюировании 0%-5% MeOH/DCM, давала 695 мг трет-бутилового эфира 5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты в виде коричневой смолы. ¹H-ЯМР (ДМСО-d6) 7,55 (1H, д), 7,48 (1H, д), 7,30 (1H, дд), 4,63-4,51 (4H, м), 1,46 (9H, с).

50B. Синтез трет-бутилового эфира 5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты

0,69 мл н-Бутиллития (2,5М раствор в гексане) добавляли по каплям к перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира 5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты (429 мг; 1,44 ммоль) в безводном ТГФ (10 мл) при -78ºC в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 50 минут, затем добавляли 1-метил-4-пиперидон (212 мкл; 1,2 эквив.) и перемешивали при -78ºC в течение еще 60 минут, затем нагревали до комнатной температуры. Реакцию гасили насыщенным раствором хлорида аммония, затем экстрагировали EtOAc. Слой EtOAc промывали насыщенным NaHCO₃, насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией на SiO₂, при градиентном элюировании от 0% до 10% 2М метанольного аммиака в DCM, давало 111 мг трет-бутилового эфира 5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты в виде бесцветного масла.

50C. Синтез 4-(2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-1-метилпиперидин-4-ола

Раствор трет-бутилового эфира 5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты (107 мг; 0,32 ммоль) в ТГФ (4 мл) обрабатывали концентрированной хлористоводородной кислотой (1,5 мл), затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов, затем упаривали и повторно упаривали с толуолом, что давало дигидрохлорид 4-(2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-1-метилпиперидин-4-ола в виде коричневой смолы.

50D. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-инметанона

Раствор 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (145 мг; 1,2 эквив.) в DCM (5 мл) обрабатывали EDC (80 мг; 1,3 эквив.) и HOAt (66 мг; 1,5 эквив.), затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Полученный раствор затем добавляли к смеси дигидрохлорида 4-(2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-1-метилпиперидин-4-ола (112 мг; 0,32 ммоль) и триэтиламина (90 мкл; 2 эквив.) в ТГФ (5 мл) и ДМФА (2 мл), затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой, 1н NaOH и насыщенным раствором соли, отделяли слой EtOAc, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией на SiO₂, при градиентным элюировании от 0% до 5% 2М метанольного аммиака в DCM, приводила к 104 мг (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона в виде желтого стекловидного вещества.

50E. Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Гидрирование (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (как описано в способе A5) приводило к 72 мг указанного в заголовке соединения, в виде кремового твердого вещества. ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,35 (2H, м), 7,18 (1H, ушир.м) 7,08 (1H, с), 6,25 (1H, с), 4,78 (4H, м), 3,10 (1H, м), 2,65 (2H, м), 2,45 (2H, м), 2,25 (3H, с), 2,00 (2H, м), 1,65 (2H, м), 1,10 (6H, д). МС: [M+H]⁺411.

ПРИМЕР 51

Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона

51A. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона

Раствор бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (2,85 г; 7,6 ммоль), 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола (1,5 г; 1 эквив.), EDC (1,75 г; 1,2 эквив.) и HOBt (1,25 г; 1,2 эквив.) в ДМФА (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали. Остаток растворяли в EtOAc, промывали 2М HCl, затем насыщенным NaHCO₃, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка с использованием Biotage SP4 (4OS, 40 мл/мин), при элюировании системами 1:4-1:3-1:2 EtOAc/петролейный эфир, давала 2,45 г (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона в виде светло-коричневого твердого вещества.

51B. (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон

Раствор (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (200 мг; 0,36 ммоль) и 1-метил-4-(пиперидин-4-ил)пиперазина (80 мг; 1,2 эквив.) в толуоле (5 мл) обрабатывали (2-бифенил)ди-трет-бутилфосфином (6 мг; 5 мол.%), трис(дибензилиден)палладием(0) (10 мг; 2,5 моль%) и трет-бутоксидом натрия (50 мг; 1,4 эквив.), затем нагревали при 120ºC в течение 30 минут в микроволновом синтезаторе CEM для тестовых экспериментов. Реакционную смесь разбавляли DCM, промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage SP4 - 25S, 25 мл/мин) при элюировании DMAW 240-120-90 с последующим упариванием содержащих продукт фракций давала 105 мг (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона в виде уксуснокислой соли.

51C. Гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона

Раствор соли с уксусной кислотой (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона в метаноле (10 мл) обрабатывали 10% палладием на углероде (влажный), гидрировали при комнатной температуре и давлении в течение ночи, затем фильтровали и упаривали. Неочищенное соединение очищали колоночной флэш-хроматографией (Biotage SP4 - 25S, 25 мл/мин), при элюировании DMAW 240-120-90-60. Фракции, содержащие продукт, упаривали, обрабатывали насыщенным HCl в EtOAc, затем упаривали, повторно упаривали с метанолом и сушили в высоком вакууме при 60ºC в течение ночи. Гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанона был выделен в виде кремового твердого вещества (62 мг). ¹H-ЯМР (ДМСО-d6) 12,40-12,00 (2H, ушир.м), 9,75-9,55 (1H, ушир.м), 7,45-7,05 (3H, м), 7,03 (1H, с), 6,45 (1H, с), 4,70-4,55 (4H, м), 3,85-3,65 (6H, м), 3,60-3,40 (5H, м), 3,15-3,05 (1H, м), 3,0-2,78 (5H, м), 2,30-2,20 (2H, м), 2,05-1,90 (2H, м), 1,15 (6H, д). МС: [M+H]⁺479.

ПРИМЕР 52

Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-пиперазин-1-илфенил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

52A. Синтез трет-бутилового эфира 4-{4-[2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил]фенил}пиперазин-1-карбоновой кислоты

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (240 мг, 0,43 ммоль), трет-бутил 4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]пиперазинкарбоксилата (210 мг, 1,25 эквив.), бис(три-трет-бутилфосфин)палладия(0) (12,5 мг, 2,5 моль%) и карбоната калия (350 мг, 6 эквив.) в смеси толуол/вода/этанол (1 мл:1 мл:4 мл) нагревали при 135ºC в течение 30 минут в микроволновом синтезаторе CEM для тестовых экспериментов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали насыщенным NaHCO₃, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очищали колоночной флэш-хроматографией (Biotage SP4 - 25S, 25 мл/мин), при элюировании 1:3, затем 1:1 EtOAc/петролейный эфир. Упаривание фракций, содержащих продукт, давало 85 мг трет-бутилового эфира 4-{4-[2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил]фенил}пиперазин-1-карбоновой кислоты. МС: [M+H]⁺736.

52B. Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-пиперазин-1-илфенил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Гидрирование трет-бутилового эфира 4-{4-[2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил]фенил]пиперазин-1-карбоновой кислоты (как описано в способе A5), с последующим снятием защиты BOC (как описано в примере 70) приводило к 10 мг указанного в заголовке соединения, в виде гидрохлоридной соли после колоночной флэш-хроматографии (Biotage SP4, 25S), при элюировании DMAW 240-120-90, и упаривания из смеси насыщенная HCl/EtOAc. ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,63 (2H, д), 7,55 (2H, м) 7,45-7,30 (1H, м), 7,25 (1H, с), 7,20 (2H, д), 5,03 (4H, м), 3,55 (4H, м), 3,47 (4H, м), 3,23 (1H, м), 1,25 (6H, д). МС: [M+H]⁺458.

ПРИМЕР 53

Синтез 2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-диметиламино-5-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона и дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламино-1-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

53A. Синтез метилового эфира 5-бром-2,4-диметоксибензойной кислоты

Раствор 5-бром-2,4-дигидроксибензойной кислоты (24,9 г, 107 ммоль) в ацетоне (355 мл), обрабатывали метилйодидом (39,9 мл, 640 ммоль) и K₂CO₃ (88 г, 640 ммоль), затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Соли отфильтровывали и промывали ацетоном. Фильтрат упаривали досуха и продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (100% DCM) с получением метилового эфира 5-бром-2,4-диметоксибензойной кислоты в виде бесцветного твердого вещества (28 г). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,98 (1H, с), 6,74 (1H, с), 3,99 (3H, с), 3,94 (3H, с), 3,85 (3H, с). МС: [M+H]⁺275/277.

53B. Синтез метилового эфира 5-изопропенил-2,4-диметоксибензойной кислоты

К изопропилидентрифторборату калия (4,87 г, 32,7 ммоль) и метиловому эфиру 5-бром-2,4-диметоксибензойной кислоты (7,5 г, 27,3 ммоль) в ТГФ (195 мл) добавляли Cs₂CO₃ (26,6 г, 81,8 ммоль) в воде (39 мл). Реакционную смесь дегазировали и добавляли Pd(PPh₃)₄ (1,58 г, 1,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение трех дней, затем гасили добавлением воды и экстрагировали EtOAc (×2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали до получения оранжевого твердого вещества. Продукт повторно суспендировали в EtOAc и осадок фильтровали. Фильтрат упаривали досуха с получением метилового эфира 5-изопропенил-2,4-диметоксибензойной кислоты (6,2 г). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,68 (1H, с), 6,66 (1H, с), 5,10-5,08 (1H, м), 5,02-5,00 (1H, м), 3,93 (3H, с), 3,92 (3H, с), 3,84 (3H, с), 2,08-2,06 (3H, м). МС: [M+H]⁺237.

53C. Синтез метилового эфира 5-изопропил-2,4-диметоксибензойной кислоты

Раствор метилового эфира 5-изопропенил-2,4-диметоксибензойной кислоты (6,0 г, 25,4 ммоль) в MeOH (85 мл) встряхивали с 10% Pd/C в атмосфере H₂ при комнатной температуре в течение 3 часов. Катализатор отфильтровывали через бумажный фильтр GF/A, но небольшое количество тонкого порошка проходило через фильтр. Фильтрат пропускали через тонкий слой силикагеля и упаривали досуха с получением бесцветного твердого вещества. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (DCM:петролейный эфир, градиентное элюирование) с получением бесцветного твердого метилового эфира 5-изопропил-2,4-диметоксибензойной кислоты (5,5 г). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,68 (1H, с), 6,64 (1H, с), 3,94 (3H, с), 3,91 (3H, с), 3,84 (3H, с), 3,23 (1H, септ.), 1,20 (6H, д). МС: [M+H]⁺239.

53D. Синтез 5-изопропил-2,4-диметоксибензойной кислоты

Метиловый эфир 5-изопропил-2,4-диметоксибензойной кислоты (5,5 г, 23,1 ммоль) и NaOH (1,38 г, 34,6 ммоль) в ТГФ (46 мл) и воду (46 мл) нагревали при 50ºC в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли водой и EtOAc. Водный слой нейтрализовали HCl (1 н. водн.). Продукт экстрагировали EtOAc (×3) и объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли и сушили над MgSO₄. Продукт фильтровали и упаривали досуха с получением 5-изопропил-2,4-диметоксибензойной кислоты в виде бледно-персикового твердого вещества (4,7 г). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,1 (1H, ушир.с), 7,62 (1H, с), 6,71 (1H, с), 3,95 (3H, с), 3,91 (3H, с), 3,19 (1H, септ.), 1,18 (6H, д). МС: [M+H]⁺225.

53E. Синтез (5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-[5-изопропил-2,4-диметоксифенил)метанона

К смеси 5-изопропил-2,4-диметоксибензойной кислоты (2,45 г, 10,9 ммоль), HOBt (1,61 г, 11,9 ммоль) и EDC (1,85 г, 11,9 ммоль) в безводном ДМФА (33 мл) в атмосфере N₂ добавляли 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндол (1,97 г, 9,95 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили разбавлением NaOH (1М, водн.) и экстрагировали продукт EtOAc (×2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли и сушили над MgSO₄. Продукт фильтровали и упаривали досуха с получением коричневого масла. Продукт очищали колоночной флэш-хроматографией с использованием градиентного элюирования (эфир/петролейный эфир) с получением (5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(5-изопропил-2,4-диметоксифенил)метанона в виде бежевого твердого вещества (3 г). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,60-7,13 (3H, м), 7,14 (1H, с), 6,71 (1H, с), 4,89 (2H, д), 4,64 (2H, д), 3,93 (3H, с), 3,90 (3H, с), 3,27 (1H, септ.), 1,20 (6H, д). МС: [M+H]⁺404/406.

53F. Синтез 5-изопропил-2,4-диметоксифенил)-(5-винил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона

К (5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(5-изопропил-2,4-диметоксифенил)метанону (2,2 г, 5,44 ммоль) и 2-винил-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолану (1,2 мл, 6,53 ммоль) в MeOH (25 мл) и толуоле (25 мл) добавляли Na₂CO₃ в воде (25 мл). Реакционную смесь дегазировали, добавляли Pd(PPh₃)₄ (0,38 г, 0,05 ммоль), затем нагревали при 80ºC в течение ночи. Реакцию останавливали добавлением воды и экстрагирования EtOAc (×3). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли и сушили над MgSO₄. Продукт фильтровали и упаривали досуха, затем очищали колоночной флэш-хроматографией, при градиентном элюировании (эфир:петролейный эфир) с получением 5-изопропил-2,4-диметоксифенил)-(5-винил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона в виде желтого масла (1,6 г). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,47-7,15 (3H, м), 7,15 (1H, с), 6,82-6,72 (1H, м), 6,71 (1H, с), 5,79 (1H, дд), 5,24 (1H, дд), 4,90 (2H, д), 4,64 (2H, д), 3,93 (3H, с), 3,91 (3H, с), 3,27 (1H, септ.), 1,23 (6H, д). МС: [M+H]⁺352.

53G. Синтез (5-изопропил-2,4-диметоксифенил-(5-оксиранил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона

К (5-изопропил-2,4-диметоксифенил)-(5-винил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанону (0,80 г, 2,28 ммоль) в DCM (22 мл) добавляли mCPBA (0,61 г, 2,73 ммоль) при 0ºC. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение часа. Реакционную смесь разбавляли NaOH (1М, водн.) и экстрагировали продукт EtOAc. EtOAc-слой промывали повторно NaOH. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и сушили над MgSO₄. Продукт фильтровали и упаривали досуха с получением неочищенного (5-изопропил-2,4-диметоксифенил)-(5-оксиранил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона в виде бледно-желтого масла. МС: [M+H]⁺368.

53H. Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил-[5-(1-диметиламино-2-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (соединение 121H-i) и (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламино-1-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (соединение 121H-ii)

(5-Изопропил-2,4-диметоксифенил)-(5-оксиранил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон (120 мг, неочищенный) растворяли в растворе диметиламина в EtOH (20 мл, ~33%, 5,6М) и нагревали при 60ºC в течение ночи. Реакционную смесь упаривали досуха, и продукт подвергали грубой очистке колоночной флэш-хроматографией MeOH:DCM (1:5) с получением загрязненного вещества, которое использовали без дальнейшей очистки. К смеси [5-(1-диметиламино-2-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(5-изопропил-2,4-диметоксифенил)метанона и [5-(2-диметиламино-1-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(5-изопропил-2,4-диметоксифенил)метанона (~100 мг) добавляли DCM (5 мл) и затем трибромид бора (3 экв.) в атмосфере N₂. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре до завершения реакции. Реакцию гасили льдом и разбавляли водой и EtOAc. Водный слой экстрагировали EtOAc (×2). Объединенные органические фракции промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgSO₄, фильтровали и упаривали досуха, что давало желтый остаток, который очищали препаративной ВЭЖХ с получением двух резорциновых изомеров.

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-диметиламино-2-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон (соединение 121H-i). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,42-7,30 (3H, м), 7,19 (1H, с), 6,39 (1H, с), 4,98-4,87 (4H, м), 4,03-3,97 (1H, м), 3,94-3,86 (1H, м), 3,68 (1H, ушир.с), 3,22 (1H, септ.), 2,40 (6H, с), 1,23 (6H, д). МС: [M+H]⁺384.

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламино-1-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон (соединение 121H-ii). ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,39-7,25 (3H, м), 7,18 (1H, с), 6,38 (1H, с), 6,94-6,88 (5H, м), 3,22 (1H, септ.), 2,77-2,68 (1H, м), 2,61-2,51 (1H, м), 2,42 (6H, с), 1,23 (6H, д). МС: [M+H]⁺384.

ПРИМЕР 54

Синтез гидрохлорида (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

54A. Синтез трет-бутилового эфира 4-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбонил]пиперазин-1-карбоновой кислоты

Раствор 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (получение D6) (0,5 г, 0,96 ммоль), EDC (0,22 г, 1,15 ммоль), HOBT (0,196 г, 1,15 ммоль) и BOC-пиперазина (0,117 мл, 1,06 ммоль) в ДМФА (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов, затем упаривали в вакууме. Неочищенное вещество растворяли в этилацетате и экстрагировали дважды насыщенным NaHCO₃. Органические фракции промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали, затем упаривали в вакууме и очищали колоночной флэш-хроматографией (80% EtOAc-петролейный эфир в качестве элюента), что давало 0,5 г трет-бутилового эфира 4-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбонил]пиперазин-1-карбоновой кислоты. МС: [M+H]⁺688.

54B. Синтез гидрохлорида (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Гидрирование по способу A5 давало (0,2 г, 0,30 ммоль) трет-бутилового эфира 4-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбонил]пиперазин-1-карбоновой кислоты [использовали неочищенным], который растворяли в EtOAc, затем обрабатывали насыщенным EtOAc/HCl, перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3 часов, реакционную смесь разбавляли эфиром, фильтровали твердое вещество, что давало 0,19 г гидрохлорида (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона. ¹H-ЯМР (Me-d₃-0D) 7,50-7,42 (3H, м), 7,18 (1H, с), 6,39 (1H, с), 5,00-4,95 (4H, ушир.с), 3,92-3,79 (4H, ушир.с), 3,35-3,28 (4H, ушир.с), 3,26-3,15 (1H, м), 1,23 (6H, д). МС: [M+H]⁺410.

ПРИМЕР 55

Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

55A. Синтез метоксиметиламида 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты

Раствор 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (получение D6) (1,76 г, 3,39 ммоль), EDC (0,78 г, 4,06 ммоль), HOBT (0,55 г, 4,06 ммоль), Et₃N (1 мл, 6,78 ммоль) и гидрохлорида N,O-диметилгидроксиламина (0,36 г, 3,72 ммоль) в ДМФА (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов, затем упаривали в вакууме. Неочищенное вещество растворяли в этилацетате и экстрагировали дважды насыщенным NaHCO₃. Органические фракции промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали, затем упаривали, что давало 1,84 г метоксиметиламида 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты. МС: [M+H]⁺563.

55B. Синтез 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбальдегид

Раствор метоксиметиламида 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбоновой кислоты (0,226 г, 0,4 ммоль) в ТГФ (5 мл) охлаждали до 0ºC, обрабатывали 1М LiAlH₄/ТГФ (0,3 мл, 0,3 ммоль), перемешивали 1 час, дополнительно добавляли LiAlH₄ (0,05 мл), затем перемешивали в течение 30 минут. Реакцию гасили насыщенным раствором KHSO₄, экстрагировали EtOAc, сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали, что давало 0,2 г 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбальдегида. МС: [M+H]⁺504.

55C. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

К раствору 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-карбальдегида (0,316 г, 0,63 ммоль) и н-метилпиперазина (63 мг, 0,63 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) добавляли AcOH (38 мг, 0,63 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (0,28 г, 1,33 ммоль), затем перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 часов. Реакцию гасили водой, слои разделяли и водный слой промывали CH₂Cl₂. Органические фракции объединяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали, что давало 0,32 г (2,4-бис-бензилокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона. МС: [M+H]⁺588.

55D. Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Гидрирование проводили с применением способа A5, но с добавлением K₂CO₃ (2 эквив.) в MeOH/H₂O [9:1]. После упаривания метанола реакционную смесь разбавляли водой, нейтрализовали, используя 1М HCl, и экстрагировали CH₂Cl₂ (×2). Органические фракции сушили (MgSO₄), фильтровали и упаривали в вакууме, затем очищали препаративной ВЭЖХ, что давало 21 мг (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона. МС: [M+H]⁺410. ¹H-ЯМР (Me-d₃-OD) 7,37-7,23 (3H, ушир.с), 7,19 (1H, с), 6,39 (1H, с), 4,94-4,87 (4H, ушир.с), 3,57 (2H, с), 3,27-3,16 (1H, м), 2,67-2,39 (8H, м), 2,31 (3H, с), 1,23 (6H, д).

ПРИМЕР 56

Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

56A. Синтез гидробромида 4-гидроксиизоиндолина

Суспензию диметил 3-метоксифталата (69,45 г, 0,31 моль) [получена как в J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 1989, 391] в воде (300 мл) обрабатывали гидроксидом калия (43,7 г, 0,78 моль), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры метанол, выделяющийся в течение реакции, удаляли в вакууме, смесь подкисляли до pH 2 или ниже добавлением 5М хлористоводородной кислоты и аккуратно упаривали в вакууме для инициирования кристаллизации. Твердое вещество отфильтровывали, промывали небольшим количеством ледяной воды, отсасывали на фильтре досуха при пониженном давлении и сушили в вакуумной печи при 50ºC в течение ночи, что давало 3-метоксифталевую кислоту (51,0 г, 84%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 13,05 (2H, ушир.с), 7,48 (2H, м), 7,33 (1H, м), 3,82 (3H, с). МС: [M+H]⁺197.

Уксусный ангидрид (70 мл) добавляли к смеси 3-метоксифталевой кислоты (51,0 г, 0,26 моль) в безводном тетрагидрофуране (250 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли в вакууме и полученное твердое вещество сушили в вакуумной печи при 50ºC в течение ночи, что давало 3-метоксифталевый ангидрид (45,9 г, 99%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,97 (1H, дд), 7,63 (1H, д), 7,60 (1H, д), 4,02 (3H, с). МС: [M+H]⁺179.

Смесь 3-метоксифталевого ангидрида (24,0 г, 134,8 ммоль) и формамида (120 мл) перемешивали и выдерживали при 210ºC в течение 5 часов, затем давали охладиться до комнатной температуры в течение ночи. Добавляли воду (100 мл), и твердое вещество отфильтровывали при пониженном давлении. Неочищенный продукт промывали последовательно 50% водным ацетоном (50 мл), диэтиловым эфиром (200 мл) и отсасывали на фильтре досуха при пониженном давлении, что давало 3-метоксифталимид (8,95 г, 37%) в виде не совсем белого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,08 (1H, ушир.с), 7,78 (1H, дд), 7,45 (1H, д), 7,36 (1H, д), 3,93 (3H, с). МС: [M+H]⁺178.

Перемешиваемый раствор 3-метоксифталимида (8,95 г, 50,56 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (200 мл) при 0ºC обрабатывали по каплям раствором борана в тетрагидрофуране (1М, 150 мл, 0,15 моль) и полученную смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь охлаждали до 0ºC, по каплям добавляли метанол (60 мл), затем 5М хлористоводородную кислоту (60 мл), смесь перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры органический растворитель удаляли в вакууме, смесь разбавляли водой (250 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (3×250 мл). Водный слой подщелачивали до pH 12 или выше добавлением 5М гидроксида натрия, экстрагировали метиленхлоридом (3×250 мл) и объединенные экстракты упаривали досуха в вакууме, что давало 4-метоксиизоиндолин (4,44 г, 59%) в виде зеленого масла, которое использовали без дальнейшей очистки. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,18 (1H, 1), 6,83 (1H, д), 6,78 (1H, д), 4,07 (2H, с), 4,02 (2H, с), 3,78 (3H, с). МС: [M+H]⁺150.

4-Метоксиизоиндолин (4,4 г, 29,53 ммоль) в 48% водной бромистоводородной кислоте (50 мл) перемешивали и выдерживали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли в вакууме, что давало гидробромид 4-гидроксиизоиндолина (5,0 г, 78%) в виде бледно-оранжевого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,95 (1H, ушир.с), 9,37 (2H, ушир.с), 7,19 (1H, т), 6,84 (1H, д), 6,80 (1H, д), 4,48 (2H, т), 4,40 (2H, т). МС: [M+H]⁺136.

56B. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(4-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона

Смесь 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (8,1 г, 21,65 ммоль), гидробромида 4-гидроксиизоиндолина (4,91 г, 22,73 ммоль), гидрохлорида N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (5,0 г, 25,98 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (3,5 г, 25,98 ммоль) и триэтиламина (6 мл, 43,3 ммоль) в N,N-диметилформамиде (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток обрабатывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (200 мл). Смесь фильтровали, твердое вещество обильно промывали водой, отсасывали на фильтре досуха при пониженном давлении и сушили в вакуумной печи при 50ºC в течение ночи, что давало (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(4-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон (10,25 г, 96%) в виде бледно-желто-коричневого твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) (смесь амидных ротамеров) 9,68 и 9,60 (1H, 2×ушир.с), 7,45-7,25 (10H, м), 7,20-7,00 (3H, м), 6,82 и 6,72 (1H, 2×д), 6,68 (1H, м), 5,23 и 5,22 (2H, 2×с), 5,18 (2H, с), 5,11 (1H, с), 5,09 (1H, с), 4,77 и 6,67 (2H, 2×с), 4,53 и 4,44 (2H, 2×с), 2,04 (3H, с). МС: [M+H]⁺492.

56C. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(4-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (2 г; 4,07 ммоль), 4-(3-хлорпропил)морфолина (1,66 г; 2,5 эквив.) и карбоната цезия (8,3 г; 6,25 эквив.) в ДМФА нагревали при 90ºC в течение ночи, затем упаривали. Остаток растворяли в EtOAc, промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и упаривали. Очистка неочищенного вещества на Biotage SP4 (4OS, 40 мл/мин), с использованием градиентного элюирования от 0% до 10% MeOH/EtOAc, давала 1,8 г (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона в виде бледно-желтой смолы. МС: [M+H]⁺619.

56D. Синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

Гидрирование (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (как описано в способе A5), с последующей обработкой насыщенным HCl/EtOAc и растиранием в горячем ацетоне давало 890 мг указанного в заголовке соединения (гидрохлоридная соль) в виде кремового твердого вещества. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 10,78 (1H, ушир.с), 10,05 (1H, ушир.с), 9,55 (1H, ушир.с), 7,30 (1H, т), 7,08 (1H, с) 6,98-6,90 (2H, м), 6,45 (1H, с), 4,80 (2H, с), 4,75 (2H, с), 4,15 (2H, т), 3,95 (2H, ушир.м), 2,80 (2H, ушир.м), 3,50-3,35 (2H, ушир.м), 3,25 (2H, ушир.м), 3,18-3,02 (3H, ушир.м), 2,20 (2H, ушир.м), 1,15 (6H, д). МС: [M+H]⁺441.

ПРИМЕРЫ 57-74

Следующие соединения получали по описанным выше способам.

Номер пр. Соединение Химическое название Способ Данные ЯМР Масс-спектр 57 [5-(2-Аминоэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон Как для примера 34, A2 (из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (получение B5) и 5-гидроксиизоиндолина), алкилирование с использованием 3-(BOC-амино)этилтозилата, затем A5. Конечное снятие защиты BOC действием насыщенного HCl/EtOAc (пример 18) ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 8,55 (1Н, с), 7,30-7,20 (1H, м), 7,15 (1H, с), 7,05-6,95 (2H, м), 6,40 (1 H, с), 4,95-4,80 (4H, м)4,25 (2H, т), 3,35 (2H, т), 3,25-3,15 (1H, м), 1,25 (6H, д) МС: [M+H]⁺357 58 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон Выделяли как побочный продукт синтеза в примере 57 ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,20 (1H, с), 7,15-7,05 (1H, м), 6,80-6,70 (2H, м), 6,40 (1H, с), 4,95-4,80 (4H, м), 3,25-3,15 (1H, м), 1,25 (6H, д) МС: [M+H]⁺314 59 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон Как в примере 51, с использованием N-(2-гидроксиэтил)пиперазина в реакции Бухвальда (Buchwald) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,40 (1H, ушир.с), 9,65 (1H, ушир.с), 7,40-7,15 (1H, м), 7,05 (1H, с), 7,05-6,90 (2H, м), 6,45 (1H, с), 4,80-4,60 (4H, м), 3,85-3,70 (4H, м), 3,65-3,55 (2H, м), 3,25-3,05 (7H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺426 60 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-морфолин-4-илпиперидин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как в примере 51, с использованием 4-морфолинопиперидина в реакции Бухвальда (Buchwald) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 11,10 (1H, ушир.с), 9,65 (1H, ушир.с), 7,30-7,05 (3H, м), 7,03 (1H, с), 6,45 (1H, с), 4,80-4,65 (4H, м), 4,0-3,95 (2H, м), 3,90-3,75 (4H, м), 3,50-3,40 (2H, м), 3,40-3,30 (1H, м), 3,15-3,03 (3H, м), 2,90-2,75 (2H, м), 2,25-2,15 (2H, м), 1,95-1,80 (2H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺466 61 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как в примере 51, с использованием 4-амино-1-метилпиперидина в реакции Бухвальда (Buchwald) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,60 (1H, ушир.с), 9,65 (1H, ушир.с), 7,20 (1H, м), 7,03 (1H, с), 6,95-6,80 (2H, м), 6,45 (1H, с), 4,80-4,65 (4H, м), 3,45 (2H, м), 3,25 (1H, м), 3,10 (1H, м), 3,00 (2H, м), 2,70 (3H, д), 2, 15-2,05 (2H, м), 1,90-1,75 (2H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺410 62 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-изопропилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как в примере 51, с использованием изопропилпиперазина в реакции Бухвальда (Buchwald) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,70 (1H, ушир.с), 9,65 (1H, ушир.с), 7,25-7,10 (1H, м), 7,05 (1H, с), 7,00-6,90 (2H, м), 6,45 (1H, с), 4,80-4,60 (4H, м), 3,80 (2H, м), 3,55-3,40 (3H, м), 3,23-3,05 (5H, м), 1,33 (6H, д), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺424 63 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперазин-1-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон Как в примере 51, с использованием Boc-пиперазина в реакции Бухвальда (Buchwald). Снятие защиты Boc действием насыщенного HCl/диоксан (пример 18) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 9,70 (1H, ушир.с), 9,25 (2H, ушир.с), 7,23 (1H, ушир.м), 7,05 (1H, с), 7,00-6,90 (2H, м), 6,45 (1H, с), 4,80-4,60 (4H, м), 3,35 (4H, м), 3,20 (4H, м), 3,10 (1H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺382 64 трет-Бутиловый эфир 4-[2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-иламино]пиперидин-1-карбоновой кислоты Как в примере 51, с использованием 1-Boc-4-аминопиперидина в реакции Бухвальда (Buchwald) ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,20 (1Н, с), 7,05 (1H, м), 6,65-6,55 (2H, м), 6,35 (1H, с), 4,85-4,75 (4H, м), 4,05 (2H, м), 3,50 (1H, м), 3,20 (1H, м), 3,00 (2H, м), 2,00 (2H, м), 1,5 (9H, с), 1,30 (2H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺496 65 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Снятие защиты BOC с использованием смеси насыщенный HCl/EtOAc (пример 18) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,05 (1H, с), 7,00 (1H, м), 6,55-6,45 (2H, м), 6,40 (1 H, с), 4,70-4,60 (4H, м), 3,25 (1H, м), 3,10 (1H, м), 2,95 (2H, м), 2,45 (2H, м), 1,85 (2H, м), 1,75 (3H, с), 1,20 (2H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺396 66 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как в примере 51, с использованием (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(4-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (получение: A2 с использованием 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты и 4-бром-1,3-дигидро-1Н-изоиндолина) и N-метилпиперазина в реакции Бухвальда (Buchwald) ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,35-7,18 (2Н, м), 7,1 0-6,95 (2Н, м), 6,95-6,85 (2Н, м), 6,40 (1H, с), 4,95-4,85 (4H, м), 3,25 (1H, м), 3,20-3, 05 (4H, м), 3,05-2,80 (4H, м), 2,60 (3H, м), 2,00 (3H, с), 1,25 (6H, д) МС: [M+H]⁺396 67 (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(пиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как в примере 65, с использованием 1-Boc-4-аминопиперидина в реакции Бухвальда (Buchwald), с последующим снятием защиты Boc с использованием смеси насыщенный HCl/EtOAc (пример 18) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 7,05 (1H, с), 7,00 (1H, м), 6,55-6,45 (2H, м), 6,40 (1H, с)_; 4,70-4,60 (4H, м), 3,25 (1H, м), 3,10 (1H, м), 2,95 (2H, м), 2,45 (2H, м), 1,85 (2H, м), 1,75 (3H, с), 1,20 (2H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺396 68 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-диметиламинометил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон A2 и A5. Из 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (B5), и (2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-илметил)диметиламина (получение A1)) ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,26-7,12 (3H, м), 7,07 (1H, с), 6,27 (1H, с), 4,85-4,77 (4H, ушир.с), 3,40 (2H, с), 3,15-3,05 (1H, м), 2,15 (6H, с), 1,11 (6H, д) МС: [M+H]⁺355 69 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон A2 и A5. Из 2-(2,4-бис-бензилокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-карбоновой кислоты (D6) и N-метилпиперазина ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,60-7,38 (3H, м), 7,19 (1H, с), 6,39 (1H, с), 4,96 (4H, м), 3,85-3,71 (2H, ушир.с), 3,54-3,4 (2H, ушир.с), 3,26-3,15 (1H, м), 2,59-2,39 (4H, ушир.д), 2,34 (3H, с), 1,23 (6H, д) МС: [M+H]⁺424 70 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[2-(2,2-диметилпропиламино)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон Как для синтеза (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-изопропиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона, за исключением использования триметилацетальдегида вместо ацетона. Очищали препаративной ВЭЖХ ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,28 (1H, ушир.с); 7,20 (1H, с); 7,00 (2H, ушир.м); 6,40 (1H, с); 4,35 (2H, т); 3,50 (2H, т); 3,20 (1H, м); 3,00 (2H, с); 1,23 (6H, д); 1,10 (9H, с) МС: [M+H]⁺427 71 [5-(2-Циклопентиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон Как для синтеза (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-изопропиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона, за исключением использования циклопентанона вместо ацетона. Очищали препаративной ВЭЖХ ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,05 (1H, ушир.с); 9,60 (1H, ушир.с); 7,23 (1H, ушир.с); 7,05 (1H, с); 6,95 (1H, ушир.с); 6,88 (1H, ушир.д); 6,40 (1H, с); 4,72 (4H, ушир.м); 4,02 (2H, т); 3,10 (2H, м); 2,93 (2H, т); 1,78 (2H, м); 1,63 (2H, м); 1,48 (2H, м); 1,35 (2H, м); 1,15 (6H, д) МС: [M+H]⁺425 72 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперидин-1-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон Как для синтеза (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (пример 56) за исключением использования пиперидина вместо N-метилпиперазина ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,35-7,24 (3H, м), 7,19 (1H, с), 6,39 (1H, с), 4,94-4,49 (4H, ушир.с), 3,54 (2H, с), 3,27-3,18 (1H, м), 2,51-2,41 (4H, ушир.с), 1,66-1, 58 (4H ушир.м), 1,53-1,42 (2H, ушир.с), 1,23 (6H, д) МС: [M+H]⁺395 73 (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидроксипиперидин-дигидроизоиндол-2-ил]метанон Как для синтеза (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (пример 50), за исключением использования N-бензилоксикарбонилпиперидин-4-она на стадии 2 ¹Н ЯМР (Me-d₃-OD) 7,47 (2Н, м), 7,30 (1Н, ушир.м), 7,20 (1H, с), 6,40 (1H, с), 4,90 (4H, д), 3,22 (1H, м), 3,15 (2H, м), 2,95 (2H, м), 2,05 (2H, м), 1,75 (2H, м), 1,25 (6H, д) МС: [M+H]⁺397 74 (5-хлор-6-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон Выделяли как побочный продукт при получении в примере 33 ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) 10,00 (1H, с), 9,58 (1H, с), 7,48-7,38 (1H, м), 7,02 (1H, с), 7,97-6,85 (1H, м), 6,40 (1H, с), 4,68 (4H, ушир.с), 3,10 (1H, м), 1,15 (6H, д) МС: [M+H]+348

ПРИМЕР 75

(5-Хлор-2,4-дигидроксифенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

75A. трет-Бутиловый эфир 5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты

трет-Бутиловый эфир 5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты (2,97 г, 10 ммоль) азеотропно сушили выпариванием с толуолом. Добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (228 мг, 0,25 ммоль), 2-(ди-трет-бутилфосфин)бифенил (149 мг, 0,50 ммоль) и трет-бутоксид натрия (1,34 г, 13,9 ммоль) и колбу продували азотом. Добавляли толуол (25 мл), затем N-метилпиперазин (1,33 мл, 12 ммоль) и смесь нагревали до 80ºC в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли эфиром, фильтровали через целит и концентрировали, что давало остаток, который очищали флэш-хроматографией на силикагеле (2М метанольный аммиак в метиленхлориде, градиент 1%-3%). Это приводило к указанному в заголовке соединению, в виде коричневого твердого вещества (1,45 г, 46%). ¹H-ЯМР (MeOH-d₄) 7,15 (1H, м), 6,94-6,88 (2H, м), 4,60-4,54 (4H, м), 3,20-3,17 (4H, м), 2,63-2,60 (4H, м), 2,34 (3H, с), 1,52 (9H, с). МС: [M+H]⁺318.

75B. Дигидрохлорид 5-(4-метилпиперазин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндола

трет-Бутиловый эфир 5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-карбоновой кислоты (247 мг, 0,78 ммоль) обрабатывали 4М HCl в диоксане (4 мл, 4 ммоль) в течение 24 часов. Концентрирование в вакууме количественно приводило к указанному в заголовке соединению, которое использовали непосредственно в реакции сочетания. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,13 (1H, ушир.с), 9,99 (2H, ушир.с), 7,27 (1H, д), 7,02-7,00 (2H, м), 4,43-4,37 (4H, м), 3,82-3,75 (2H, м), 3,49-3,43 (2H, м), 3,15-3,10 (4H, м), 2,79-2,78 (3H, с), 1,52 (9H, с). МС: [M+H]⁺218.

75C. (5-Хлор-2,4-дигидроксифенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

Раствор 5-хлор-2,4-дигидроксибензойной кислоты (176 мг, 0,93 ммоль) в ДМФА (5 мл) обрабатывали гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (179 мг, 0,93 ммоль), затем HOBt (126 мг, 0,93 ммоль). Через 45 мин. добавляли раствор активированной кислоты к смеси дигидрохлорида 5-(4-метилпиперазин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндола (290 мг, 0,78 ммоль) и триэтиламина (0,28 мл, 2 ммоль), затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель удаляли в вакууме, затем остаток распределяли между этилацетатом и водой (×3). Каждый экстракт промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, затем сушили (MgSO₄), объединяли и концентрировали. Оставалось некоторое количество нерастворимого вещества и его растворяли в 1 н. хлористоводородной кислоте и метаноле, затем объединяли с органическими экстрактами. pH доводили до 14 твердым гидроксидом натрия и смеси давали стоять в течение ночи. pH доводили до 7 1 н. хлористоводородной кислотой и полученный осадок отфильтровывали, затем очищали препаративной ВЭЖХ, что давало указанное в заголовке соединение в виде красного твердого вещества. Его превращали в хлористоводородную соль обработкой 4М HCl в диоксане, концентрированием в вакууме и растиранием в эфире, что давало коричневое твердое вещество (91 мг, 27%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,10 (1H, ушир.с), 10,50 (1H, ушир.с), 7,26-7,15 (2H, м), 7,02-6,93 (2H, м), 6,69 (1H, с), 4,72-4,61 (4H, м), 3,78-3,72 (2H, м), 3,45 (2H, ушир.с), 3,12 (4H, ушир.с), 2,78 (3H, с). МС: [M+H]⁺386/388.

ПРИМЕР 76

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон

76A. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона

Сочетание 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойной кислоты (5,0 г, 13,4 ммоль) (получение B9) и 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола (получение C20) проводили согласно способу A4, с использованием CH₂Cl₂ в качестве реакционного растворителя, что давало указанное в заголовке соединение (8,34 г) в виде бежевого твердого вещества.

76B. Синтез (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

К смеси (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-бром-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (8,30 г, 15,0 ммоль), 2-(ди-трет-бутилфосфин)бифенила (223 мг, 0,75 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия (344 мг, 0,38 ммоль), трет-бутоксида натрия (2,17 г, 22,5 ммоль) и 1-метилпиперазина (2,16 мл, 19,5 ммоль) в атмосфере N₂ добавляли безводный толуол (100 мл). Смесь доводили до 80ºC и нагревали при этой температуре в течение 16 часов. Смеси давали охладиться до температуры окружающей среды, разбавляли эфиром (150 мл) и фильтровали через слой целита, промывали эфиром. Фильтрат упаривали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией с использованием в качестве элюента CH₂Cl₂-DMAW 120 (1:0-0:1), что давало указанное в заголовке соединение (9,39 г) в виде красной смолы.

76C. (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона (8,61 г, 15,0 ммоль) и 10% Pd/C (1,0 г) в метаноле (200 мл) интенсивно перемешивали в атмосфере водорода (~1 атм) в течение 18 часов при температуре окружающей среды. Смесь фильтровали через слой целита и упаривали в вакууме, что давало пурпурное масло. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией с использованием в качестве элюента DMAW 120, что давало указанное в заголовке соединение в виде его ацетатной соли.

Полученную соль растворяли в MeOH (30 мл) и к раствору добавляли насыщенный HCl в EtOAc (20 мл). Полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 часов и образовавшееся твердое вещество выделяли фильтрованием и сушили в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение в виде его гидрохлоридной соли (2,64 г) как белое твердое вещество.

ПРИМЕР 77

(5-Хлор-2,4-дигидроксифенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

Раствор 5-хлор-2,4-дигидроксибензойной кислоты (176 мг, 0,93 ммоль) в ДМФА (5 мл) обрабатывали гидрохлоридом 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (179 мг, 0,93 ммоль), затем HOBt (126 мг, 0,93 ммоль). Через 45 минут добавляли раствор активированной кислоты к смеси дигидрохлорида 5-(4-метилпиперазин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндола (290 мг, 0,78 ммоль) и триэтиламина (0,28 мл, 2 ммоль), затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель удаляли в вакууме, затем остаток распределяли между этилацетатом и водой (×3). Каждый экстракт промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, затем сушили (MgSO₄), объединяли и концентрировали.

Оставалось некоторое количество нерастворимого вещества, и его растворяли в 1 н. хлористоводородной кислоте и метаноле, затем объединяли с органическими экстрактами; pH доводили до 14 твердым гидроксидом натрия и смеси давали стоять в течение ночи; pH доводили до 7 1 н. хлористоводородной кислотой и полученный осадок отфильтровывали, затем очищали препаративной ВЭЖХ, что давало указанное в заголовке соединение в виде красного твердого вещества. Полученное соединение преобразовывали в его гидрохлоридную соль обработкой 4М HCl в диоксане, концентрировали в вакууме и растирали в эфире, что давало коричневое твердое вещество (91 мг, 27%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,10 (1H, ушир.с), 10,50 (1H, ушир.с), 7,26-7,15 (2H, м), 7,02-6,93 (2H, м), 6,69 (1H, с), 4,72-4,61 (4H, м), 3,78-3,72 (2H, м), 3,45 (2H, ушир.с), 3,12 (4H, ушир.с), 2,78 (3H, с). МС: [M+H]⁺386/388.

ПРИМЕР 78

Альтернативный синтез (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона

78A. 5-Бром-2-тритил-2,3-дигидро-1H-изоиндол

Тритилхлорид (2,30 г, 8,23 ммоль) добавляли к раствору 5-бром-2,3-дигидро-1H-изоиндола (1,64 г, 8,23 ммоль) и триэтиламина (1,4 мл, 9,9 ммоль) в метиленхлориде (20 мл). Спустя 18 часов растворитель удаляли в вакууме, остаток растворяли в этилацетате и промывали водой (×2) и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и концентрировали. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией на силикагеле, при элюировании системой 1% триэтиламин/10% этилацетат/петролейный эфир, что давало 5-бром-2-тритил-2,3-дигидро-1H-изоиндол в виде красновато-коричневого твердого вещества (3,10 г, 85%). ¹H-ЯМР (CDCl₃) 7,91-7,84 (1H, м), 7,57 (6H, д), 7,45-7,41 (1H, м), 7,33-7,14 (9H, м), 6,95 (1H, д), 3,90 (2H, с), 3,86 (2H, с). МС: Ph₃C⁺243.

78B. 1-Метил-4-(2-тритил-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)пиперидин-4-ол

В атмосфере азота раствор 5-бром-2-тритил-2,3-дигидро-1H-изоиндола (2,03 г, 4,6 ммоль) в ТГФ (20 мл) охлаждали до -78ºC. Добавляли раствор н-бутиллития (2,5М в гексане, 2,0 мл, 5 ммоль) в течение 5 минут, затем через 10 минут по каплям добавляли 1-метил-4-пиперидон. Спустя еще час охлаждающую баню удаляли и реакцию гасили раствором бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали этилацетатом, затем органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиентное элюирование 2М метанольным аммиаком в метиленхлориде, 0%-5%) что давало 1-метил-4-(2-тритил-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)пиперидин-4-ол в виде розовой пены (1,25 г, 57%). ¹H-ЯМР (MeOH-d₄) 7,56 (6H, дд), 7,28 (6H, т), 7,25-7,21 (2H, м), 7,15 (3H, т), 7,03 (1H, д), 3,92 (2H, с), 3,91 (2H, с), 2,70 (2H, д), 2,53 (2H, тд), 2,33 (3H, с), 2,06 (2H, тд), 1,70 (2H, д). МС: [M+H]⁺475.

78C. Дигидрохлорид 4-(2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-1-метилпиперидин-4-ола

Смесь 1-метил-4-(2-тритил-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)пиперидин-4-ола (1,42 г, 3,0 ммоль), 5 н. хлористоводородной кислоты (5 мл) и метанола (10 мл) помещали в атмосферу азота, затем нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 80 минут. После охлаждения смесь концентрировали в вакууме для удаления метанола, разбавляли водой и промывали этилацетатом (×2). Водную фазу концентрировали досуха, что давало с количественным выходом указанное в заголовке соединение в виде черного твердого вещества. ¹H-ЯМР (MeOH-d₄) 7,62 (1H, с), 7,57 (1H, д), 7,45 (1H, д), 4,64 (2H, с), 4,63 (2H, с), 3,49-3,46 (4H, м), 2,95 (3H, с), 2,40-2,32 (2H, м), 1,97 (2H, дд).

78D. (2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-метанон

2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилбензойная кислота (1,65 г, 4,4 ммоль), гидрохлорид 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида (843 мг, 4,4 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (595 мг, 4,4 ммоль) растворяли в ДМФА (20 мл). Через 35 минут раствор добавляли к суспензии дигидрохлорида 4-(2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-1-метилпиперидин-4-ола (1,22 г, 4,0 ммоль) и триэтиламина (1,4 мл, 10 ммоль в ДМФА (5 мл)). Смесь перемешивали в течение 3 часов, затем концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате и промывали смесью воды (доведенной до pH 14 2 н. раствором гидроксида натрия) и насыщенного солевого раствора. Водную фазу экстрагировали еще дважды этилацетатом, затем объединенные органические экстракты промывали раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, сушили (MgSO₄) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (градиентное элюирование 2М метанольным аммиаком в метиленхлориде, 2%-10%), что давало указанное в заголовке соединение в виде коричневой пены (1,62 г, 69%). ¹H-ЯМР (метанол-d₄) 7,51-7,14 (14H, м), 6,85 (0,5H, с), 6,84 (0,5H, с), 5,16 (2H, с), 5,15 (2H, с), 5,10-5,08 (1H, м), 5,07-5,05 (1H, м), 4,87 (1H, с), 4,86 (1H, с), 4,61 (2H, ушир.с), 2,78-2,70 (2H, м), 2,57 (1H, тд), 2,54 (1H, тд), 2,36 (1,5H, с), 2,34 (1,5H, с), 2,16-2,05 (5H, м включая 2,09 (3H, с)), 1,78-1,70 (2H, м). МС: [M+H]⁺589.

78E. (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

(2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон (пример 50F) (1,62 г, 2,75 ммоль) растворяли в метаноле (50 мл) и гидрировали при 50ºC на 10% палладии на углероде с использованием аппарата для гидрирования с контролем концентрации водорода, в условиях свободного поступления водорода. Концентрирование приводило к указанному в заголовке соединению (1,14 г, 100%) в виде желтого твердого вещества, для которого данные ЯМР и масс-спектрометрии соответствовали указанным в примере 50E.

ПРИМЕР 79

(2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-7-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

79A. Гидробромид 7-метил-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ол

Используя способ получения C2, диметиловый эфир 5-метокси-3-метилфталевой кислоты (полученный по Tarn и Coles, Synthesis 1988, 383) гидролизовали до 5-метокси-3-метилфталевой кислоты. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 12,95 (2H, ушир.с), 7,15 (1H, д), 7,04 (1H, д), 3,80 (3H, с), 2,29 (3H, с). МС: [M-H]⁺209.

5-Метокси-3-метилфталевую кислоту преобразовывали в 5-метокси-3-метилфталевый ангидрид. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 7,40 (1H, д), 7,34-7,33 (1H, м), 3,94 (3H, с), 2,58 (3H, с).

5-Метокси-3-метилфталевый ангидрид использовали с получением 6-метокси-4-метилизоиндол-1,3-диона. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 11,05 (1H, ушир.с), 7,13 (1H, д), 7,10 (1H, д), 3,88 (3H, с), 2,55 (3H, с).

Восстановление 6-метокси-4-метилизоиндол-1,3-диона согласно способу получения C2 приводило к 6-метокси-4-метилизоиндолу. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 6,64 (1H, с), 6,57 (1H, с), 4,05 (2H, с), 3,96 (2H, с), 3,70 (3H, с), 2,16 (3H, с). МС: [M+H]⁺164.

6-Метокси-4-метилизоиндол деметилировали, что давало указанное в заголовке соединение в виде его гидробромидной соли. ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,52 (1H, ушир.с), 9,29 (2H, ушир.с), 6,59 (1H, с), 6,56 (1H, с), 4,41 (2H, т), 4,34 (2H, т), 2,17 (3H, с).

79B. (2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-гидрокси-7-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон

2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилбензойную кислоту (248 мг, 0,66 ммоль), гидрохлорид 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида (127 мг, 0,66 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (89 мг, 0,66 ммоль) растворяли в ДМФА (5 мл). Через 20 минут добавляли гидробромид 7-метил-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ола (152 мг, 0,66 ммоль) и триэтиламин (0,14 мл, 0,99 ммоль). Спустя еще 3,5 часа смесь концентрировали в вакууме и остаток обрабатывали 1 н. хлористоводородной кислотой и этилацетатом. Водную фазу удаляли, добавляли насыщенный раствор соли и указанное в заголовке соединение выделяли фильтрованием в виде серого твердого вещества (168 мг, 57%). ¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) 9,30 (0,47H, с), 9,24 (0,53H, с), 7,48-7,25 (10H, м), 7,09 (0,47H, с), 7,08 (0,53H, с), 6,99 (0,47H, с), 6,98 (0,53H, с), 6,56 (0,47H, с), 6,50 (0,53H, с), 6,48 (0,47H, с), 6,44 (0,53H, с), 5,24 (0,47H, с), 5,22 (0,53. с), 5,18 (2H, с), 5,10-5,07 (2H, м), 4,70 (0,47H, с), 4,61 (0,53H, с), 4,46 (0,47H, с), 4,36 (0,53H, с), 2,17 (1,41H, с), 2,04 (3H, с), 1,99 (1,59H, с). МС: [M+H]⁺506.

79C. (2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-7-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

Смесь (2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-(5-гидрокси-7-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона (164 мг, 0,32 ммоль), карбоната калия (112 мг, 0,81 ммоль) и гидрохлорида 2-(диметиламино)этилхлорида (93 мг, 0,64 ммоль) в ДМФА (5 мл) нагревали при 60ºC в течение 17 часов, затем при 90ºC в течение 6 часов. Добавляли дополнительно порции карбоната калия (112 мг, 0,81 ммоль) и гидрохлорида 2-(диметиламино)этилхлорида (93 мг, 0,64 ммоль) и смесь выдерживали при 60ºC в течение 72 часов и, наконец, еще 24 часа при 90ºC. Смесь концентрировали в вакууме, затем остаток распределяли между этилацетатом и 0,5 н. водным гидроксидом натрия. Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (×2), сушили (MgSO₄) и концентрировали, что приводило к остатку, который очищали препаративной ВЭЖХ (кислотный способ), что давало указанное в заголовке соединение в виде формиатной соли (37 мг, 20%). ¹H-ЯМР (MeOH-d₄) 8,51 (1H, ушир.с), 7,43-7,27 (7H_, м), 7,24-7,20 (3H, м), 7,17 (0,5H, с), 7,16 (0,5H, с), 6,85 (0,5H, с), 6,84 (0,5H, с), 6,81 (0,5H, с), 6,77 (0,5H, с), 6,74 (0,5H, с), 6,62 (0,5H, с), 5,16 (1H, с), 5,14 (3H, с), 5,09 (1H, м), 5,06 (1H, м), 4,83 (1H, с), 4,74 (1H, с), 4,60 (1H, с), 4,48 (1H, с), 4,28 (1H, т), 4,23 (1H, т), 3,41 (1H, т), 3,37 (1H, т), 2,84 (3H, с), 2,81 (3H, с), 2,27 (1,5H, с), 2,09 (3H, с), 2,07 (1,5H, с). МС: [M+H]⁺577.

79D. (2,4-Дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-7-метил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон

(2,4-Бис-бензилокси-5-изопропенилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон (37 мг, 0,06 ммоль) гидрировали в метаноле при 50ºC на 10% палладии на углероде с использованием аппарата для гидрирования с контролем концентрации водорода, в условиях свободного поступления водорода. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ (щелочной способ), что давало указанное в заголовке соединение в виде не совсем белого твердого вещества (9 мг, 35%). ¹H-ЯМР (MeOH-d₄) 7,18 (1H, с), 6,77-6,65 (2H, ушир.м), 6,37 (1H, с), 4,85 (вода перекрывает сигнал CH₂), 4,77 (2H, с), 4,08 (2H, т), 3,20 (1H, септ.), 2,81 (2H, т), 2,39 (6H, с), 2,22 (3H, ушир.с), 1,21 (6H, д). МС: [M+H]⁺399.

Биологическая активность

ПРИМЕР 80

Калориметрия изотермического титрования

Способность соединений по изобретению связываться с Hsp90-белками человека определяли с применением калориметрии изотермического титрования.

Эксперименты по калориметрии изотермического титрования (ITC) проводили на калориметре для титрования VP-ITC (Microcal Inc., Northampton, MA, USA). Клонирование, экспрессию и очистку N-концевого домена Hsp90α человека проводили согласно опубликованным способам (Jez, J.M. et al., Chem Biol. 2003 Apr;10(4):361-8). Раствор N-концевого домена Hsp90α человека и раствор соединения получали в буфере, содержащим 25 мМ Tris, 100 мМ NaCl, 1 мМ MgCl₂, 1 мМ TCEP, 5% ДМСО, pH 7,4. Все растворы фильтровали и дегазировали перед проведением титрования. Изменение энтальпии, возникающие от каждой инъекции лиганда, получали через интегрирование калориметрического сигнала. Данные анализировали с использованием Origin 7.0 (Microcal Software Inc., Northampton, MA). Теплоту разбавления оценивали, используя конечные инъекции для каждого индивидуального титрования, и вычитали перед аппроксимацией данных. Применяли различные ITC-экспериментальные форматы для того, чтобы получить константы диссоциации соединения (Kd) в широком диапазоне аффинностей. Для слабо связывающихся соединений применяли способ ITC низкой С-величины (Turnbull W.B. и Daranas A.H. J. Am. Chem. Soc. 2003 Dec 3; 125(48):14859-66), в котором белок присутствовал в концентрации 10-20 мкМ в калориметрической ячейке и концентрация соединения составляла 1-20 мМ в шприце для инъекции. В этом типе эксперимента параметр стехиометрии (N) фиксировали как 1 для совместимости данных. Для констант Kd в диапазоне 20-0,004 мкМ эксперимент изменяли таким образом, чтобы связывающая концентрация сайта, разделенная на Kd (C-величина), составляла от 5 до 1000. Для большинства таких экспериментов концентрация белка в калориметрической ячейке находилась в диапазоне 4-100 мкМ и концентрация лиганда в шприце для инъекции варьировала в диапазоне 50-1500 мкМ. В редких случаях, где растворимость соединения была ограниченной, раствор соединения помещали в калориметрическую ячейку и титровали белком из шприца для инъекций, при поддержании C-величины от 5 до 1000. Для получения констант Kd<4 мМ использовали конкурентные ITC-эксперименты путем проведения титрования в присутствии более слабо связывающегося конкурентного соединения согласно способу, описанному в Sigurskjold B.W. Anal Biochem. 2000 Jan 15; 277(2):260-6.

Были протестированы соединения примеров 5, 10, 11, 12, 13, 14, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 27, 28, 29, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74 и 75 и было найдено, что они имеют K_d величины менее 1 микромоль.

Соединения примеров 5, 10, 12, 13, 14, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 27, 28, 29, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 48, 49, 50, 51, 53, 54, 55, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74 и 75 имели K_d величины менее 0,1 микромоль, и большинство этих соединений имели K_d величины менее 0,01 микромоль.

ПРИМЕР 81

Антипролиферативная активность

Антипролиферативные активности соединений по изобретению могут быть определены путем измерения способности соединений к ингибированию клеточного роста в ряде клеточных линий, таких как клеточная линия HCT116 рака толстой кишки человека. Ингибирование клеточного роста измеряли с использованием пробы Alamar Blue (Nociari, M.M, Shalev, A., Benias, P., Russo, C. Journal of Immunological Methods 1998, 213, 157-167). Способ основан на способности жизнеспособных клеток к восстановлению ресазурина до его флуоресцентного продукта резоруфина. Для каждого анализа пролиферации клетки помещали в 96-луночный планшет и оставляли для адаптации на 16 часов перед добавлением ингибирующих соединений в течение следующих 72 часов. По завершении периода инкубации добавляли 10% (объемн./объемн.) Alamar Blue и инкубировали в течение следующих 6 часов перед детектированием флуоресцентного продукта при 535 нм возбуждения/59O нм испускания. В случае анализа непролиферирующих клеток, клетки сохраняли при конфлюентности в течение 96 часов перед добавлением ингибирующих соединений в течение следующих 72 часов. Число жизнеспособных клеток определяли путем исследования Alamar Blue, как описано выше. Клеточные линии могут быть получены из ECACC (Европейская коллекция клеточных культур).

Соединения примеров 5, 12, 13, 14, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 28, 29, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 45, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 74 и 75 были протестированы и было найдено, что они имеют IC₅₀ величины менее 1 микромоль в отношении клеточной линии HCT116.

Фармацевтические препараты

ПРИМЕР 82

(i) Препарат в виде таблетки

Композицию таблетки, содержащую соединение формулы (I), получали путем смешения 50 мг соединения с 197 мг лактозы (BP) в качестве разбавителя и 3 мг стеарата магния в качестве лубриканта и прессования с получением таблетки известным способом.

(ii) Препарат в виде капсулы

Препарат в виде капсулы получали путем смешения 100 мг соединения формулы (I) со 100 мг лактозы и помещения полученной смеси в стандартные матовые жесткие желатиновые капсулы.

(iii) Препарат в виде инъекции I

Парентеральную композицию для введения путем инъекцией получали путем растворения соединения формулы (I) (например, в форме соли) в воде, содержащей 10% пропиленгликоля, что давало концентрацию активного соединения 1,5% по массе. Раствор затем стерилизовали фильтрованием, помещали в ампулу и запаивали.

(iv) Препарат для инъекции II

Парентеральную композицию для инъекции получали путем растворения в воде соединения формулы (I) (например, в форме соли) (2 мг/мл) и маннита (50 мг/мл), стерильного фильтрования раствора и помещения в запаиваемые 1 мл пузырьки или ампулы.

(v) Препарат для инъекции III

Препарат для внутривенной (i.v.) доставки путем инъекции или инфузии может быть получен путем растворения соединения формулы (I) (например, в форме соли) в воде при концентрации 20 мг/мл. Пузырек затем запаивали и стерилизовали в автоклаве.

(vi) Препарат для инъекции IV

Препарат для внутривенной (i.v.) доставки путем инъекции или инфузии может быть получен путем растворения соединения формулы (I) (например, в форме соли) в воде, содержащей буфер (например, 0,2M ацетат при pH 4,6) при концентрации 20 мг/мл. Пробирку затем запаивали и стерилизовали в автоклаве.

(vii) Препарат для подкожной инъекции

Композицию для подкожного введения готовили путем смешения соединения формулы (I) с кукурузным маслом фармацевтической чистоты, что давало концентрацию 5 мг/мл. Композицию стерилизовали и помещали в приемлемый контейнер.

(viii) Лиофилизированный препарат

Аликвоты соединения формулы (I) в виде препарата помещали в 50 мл пробирки и лиофилизировали. В течение лиофилизации, композиции вымораживали с применением одностадийного протокола вымораживания при (-45ºC). Температуру повышали до -10ºC для отжига, затем снижали для вымораживания до -45ºC, с последующей первичной сушкой при+25ºC в течение приблизительно 3400 минут, и последующей вторичной сушкой с увеличенным количеством стадий, при температуре ниже 50ºC. Давление в течение первичной и вторичной сушки удерживали при 80 миллитор.

Эквиваленты

Вышеуказанные примеры предоставлены с целью иллюстрации изобретения и не должны обсуждаться как налагающие любое ограничение на объем изобретения. Будет очевидно, что многочисленные модификации и изменения могут быть произведены в конкретных вариантах осуществления изобретения, описанных выше и проиллюстрированных в примерах, не отходя от принципов, лежащих в основе изобретения. Все такие модификации и изменения предназначаются для включения в объем настоящего изобретения.

Изобретение относится к новым соединениям формулы (VI):

или его фармацевтически приемлемым солям; где n равно 0, 1, 2 или 3; R¹ означает-ОН, Н; R^2a означает ОН, -СН₃, при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R^2a является -OH; R³ означает Cl, Br, циклопропил, разветвленный C_3-5алкил; R^4a означает Н; R⁸ означает Н; где фрагмент:

может быть одной из групп В8, В35, В36, В37, В38, В39, В40, В41, В42, В43, В45, В46, В48, В54, В56, В58, В59, В61, В62, В71, В72, В74, В75, В76, В77, В78, В79, В80, В81, В82, В84, В86, В87, В88, В89, В90, В91, В93, В94, В95, В96, В97, В98, В99, В100 и В101, где значения раскрыты в пункте 1 формулы. Соединения обладают Hsp90 ингибирующей активностью, что позволяет использовать их для лечения заболеваний, возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающих. 8 н. и 18 з.п. ф-лы, 8 схем, 2 табл. 82 пр.

1. Соединение формулы (VI):

или его фармацевтически приемлемая соль;
где n равно 0, 1, 2 или 3;
R¹ представляет собой гидроксигруппу или водород;
R^2a представляет собой гидроксигруппу или метоксигруппу, при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R^2a является гидроксигруппой;
R³ выбирают из хлора, брома, циклопропила и разветвленного С_3-5алкила;
R^4a представляет собой водород;
R⁸ представляет собой водород; и
где фрагмент:

может быть одной из групп В8, В35, В36, В37, В38, В39, В40, В41, В42, В43, В45, В46, В48, В54, В56, В58, В59, В61, В62, В71, В72, В74, В75, В76, В77, В78, В79, В80, В81, В82, В84, В86, В87, В88, В89, В90, В91, В93, В94, В95, В96, В97, В98, В99, В100 и В101, представленных в таблице ниже:
     

         
         

2. Соединение по п.1, где R¹ и R^2a оба представляют собой гидроксигруппу.

3. Соединение по п.2, где R³ представляет собой изопропил или трет-бутил.

4. Соединение по п.1, которое представляет собой:
(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(4-гидрокси-3-изопропилфенил)метанон;
(5-циклопропил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(5-втор-бутил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(5-хлор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
[5-(3-аминопропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
(5-бром-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(5-трет-бутил-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(5-хлор-2,4-дигидроксифенил)-(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2-гидрокси-5-изопропил-4-метоксифенил)метанон;
(4,7-дифтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-фтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
гидрохлорид(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(4-фтор-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанона;
(5-хлор-6-метокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-метоксиэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(3-морфолин-4-илпропокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(5-амино-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил) метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-метокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
метиловый эфир 2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-карбоновой кислоты;
2-(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-карбоновую кислоту;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-морфолин-4-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-изопропиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
N-{2-[(2,4-дигидрокси-5-изопропилбензоил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-илокси]этил}-2-морфолин-4-илацетамид;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1 -ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил} метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-пиперазин-1-илфенил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-диметиламино-2-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламино-1-гидроксиэтил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
гидрохлорид (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанона;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-морфолин-4-ил-пиперидин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-изопропилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперазин-1-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(пиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[4-(пиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-диметиламинометил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-{5-[2-(2,2-диметилпропиламино)этокси]-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}метанон;
[5-(2-циклопентиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперидин-1-илметил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидроксипиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(5-хлор-6-гидрокси-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(5-хлор-2,4-дигидроксифенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
или его фармацевтически приемлемые соли.

5. Соединение по п.4, которое представляет собой;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(2-диметиламиноэтокси)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-пиперазин-1-ил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон или
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-(5-диметиламинометил-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)метанон;
или его фармацевтически приемлемые соли.

6. Соединение по п.5, которое представляет собой:
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-гидрокси-1-метилпиперидин-4-ил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон или
(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(1-метилпиперидин-4-иламино)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон;
или его фармацевтически приемлемая соль.

7. Соединение по п.6, представляющее собой (2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-[5-(4-метилпиперазин-1-илметил)-1,3-дигидроизоиндол-2-ил]метанон.

8. Соединение по любому из пп.1-7 в форме фармацевтически приемлемой соли.

9. Фармацевтическая композиция, обладающая Hsp90 ингибирующей активностью, содержащая соединение по любому из пп.1-8 и фармацевтически приемлемый носитель.

10. Соединение по любому из пп.1-8 для применения при профилактике или лечении болезненного состояния, опосредованного активностью Hsp90.

11. Соединение по любому из пп.1-8 для применения при лечении заболевания или состояния, включающих или возникающих из-за аномального клеточного роста у млекопитающего.

12. Соединение по любому из пп.1-8 для применения при лечении пролиферативного расстройства.

13. Соединение по п.12, где пролиферативное заболевание представляет собой рак.

14. Соединение по п.13, где пролиферативное заболевание выбрано из карциномы мочевого пузыря, груди, толстой кишки, почки, эпидермиса, печени, легкого, пищевода, желчного пузыря, яичника, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, простаты, желудочно-кишечной системы или кожи; гемопоэтической опухоли лимфоидного происхождения; гемопоэтической опухоли миелоидного происхождения; фолликулярного рака щитовидной железы; опухоли мезенхимного происхождения; опухоли центральной или периферической нервной системы; меланомы; семиномы; тератокарциномы; остеосаркомы; пигментной ксеродермы; кератоакантомы или саркомы Капоши.

15. Соединение по п.13, где рак выбран из колоректальных карцином, аденокарциномы толстой кишки, аденомы толстой кишки, аденокарциномы, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточной карциномы легкого, экзокринной панкреатической карциномы, желудочно-кишечных стромальных опухолей, плоскоклеточной карциномы, лейкемии, острой лимфоцитарной лейкемии, хронической лимфоцитарной лейкемии, В-клеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы, лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы, волосатоклеточной лимфомы, лимфомы Буркета, острой и хронической миелогенных лейкемий, иматиниб-чувствительных и резистентных хронических миелогенных лейкемий, миелодисплазического синдрома, бортезомиб-чувствительной и резистентной множественной миеломы, миелопролиферативного заболевания, промиелоцитной лейкемии, фибросаркомы, хабдомиосаркомы, астроцитомы, нейробластомы, глиомы или невриномы.

16. Соединение по п.13, где рак представляет собой рак груди человека, выбранный из первичных опухолей груди, неузловатого рака груди, инвазивной аденокарциномы протоков груди, неэндометриоидного рака груди; или лимфому покровных клеток.

17. Соединение по п.13, где рак выбран из лейкемии, хронической лимфоцитарной лейкемии, лимфомы клетки мантийной ткани, В-клеточной лимфомы и необязательно дополнительно выбран из хронической миелогенной лейкемии и множественной миеломы.

18. Соединение по п.13, где рак выбран из ErbB2-положительного рака груди, простаты, легкого и желудка; хронической миелоидной лейкемии; рака простаты, зависимого от рецептора андрогенного гормона; Flt3-зависимой острой миелоидной лейкемии; меланомы, ассоциированной с мутацией Braf; множественной миеломы; велкад-резистентной множественной миеломы; и желудочно-кишечных стромальных опухолей (GIST).

19. Соединение по п.13, где рак выбран из множественных миелом и велкад-резистентные типов опухолей.

20. Применение соединения по любому из пп.1-8 при производстве лекарственного средства для лечения заболеваний, состояний или расстройств, как определено по любому из пп.10-19.

21. Способ получения соединения формулы (VI), как определено в любом из пп.1-8, который включает взаимодействие соединения формулы (X):

или его активированной и/или защищенной формы с амином формулы HNR⁵R⁶, где HNR⁵R⁶ имеет структуру:

в условиях, пригодных для образования амидной связи,
где R¹, R³, и R⁸ имеют значения, определенные в п.1, R² представляет собой R^2a, как определено в п.1, R⁴ представляет собой R^4a, как определено в п.1,
и R¹⁰, Т и Q в соединении соответствуют R¹⁰, Т и Q в любом из фрагментов , как определено в п.1.

22. Соединение, которое представляет собой 2,4-бис-бензилокси-5-изопропенилбензойную кислоту.

23. Соединение, которое представлено формулой (XXI):

где n равно 0 или 1; М представляет собой атом азота или СНОН, и R²⁵ представляет собой водород или метил; при условии, что если n равно 0 и R²⁵ представляет собой метил, то М представляет собой СНОН.

24. Соединение по п.23, которое выбирают из формул (XXI), (XXII) и (XXIV):

25. Способ получения соединения формулы (VI), как определено в п, 1, который включает взаимодействие соединения формулы (X):

с соединением формулы

в условиях, пригодных для образования амидной связи, и последующее, в случае необходимости, удаление защитных групп,
где R¹, R^2a, R³, R^4a и R⁸ имеют значения, определенные в п.1,
и R^10b в соединении соответствует R¹⁰ в любом из фрагментов , как определено в п.1.

26. Способ получения соединения формулы (VI), как определено в п.2 или любом зависимом от него пункте, который включает взаимодействие соединения формулы (XIX) или его защищенного производного с соединением формулы (XX):

в условиях, пригодных для образования амидной связи, и последующее, в случае необходимости, удаление защитных групп,
где R³, R^4a и R⁸ имеют значения, определенные в п.1, и R^10cc в соединении соответствует R¹⁰ в любом из фрагментов , как определено в п.1.