ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ С ПРОТИВОСУДОРОЖНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ДЛЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ Российский патент 2012 года по МПК A61K31/515 A61K31/196 A61P25/08 

Изобретение относится к области медицины, а именно к средствам терапии судорожного синдрома, и может быть использовано при оказании неотложной медицинской помощи в качестве противосудорожного средства для терапии судорожного приступа.

Проблема создания эффективных форм противосудорожных средств в настоящее время стоит достаточно остро. Целый ряд перспективных соединений, отличающихся от традиционных антиконвульсантов большей эффективностью, не может быть использован при оказании неотложной помощи вследствие недостаточной стабильности растворов или малого количества активного начала из-за низкой его растворимости. Особую актуальность данная проблема приобретает при необходимости купирования эпилептического статуса и судорожного синдрома токсического генеза.

Как правило, на момент оказания неотложной помощи при эпистатусе его этиологическая причина не известна, и симптоматическое лечение предполагает применение наиболее мощных противосудорожных средств из группы бензодиазепинов (диазепам, лоразепам, мидазолам, клоназепам). При тяжелых отравлениях хлор- и фторорганическими инсектицидами нередко развивается рефрактерность судорожного приступа к терапии бензодиазепинами [1], что обуславливает необходимость применения средств второй очереди - фенитоина и барбитуратов (тиопентал, гексенал, фенобарбитал) [2]. В то же время лекарственные формы лоразепама, клоназепама, фенитоина, фенобарбитала и фосфенитоина для парентерального введения в России до настоящего времени не зарегистрированы. С одной стороны, нерастворимость этих соединений в воде определяет актуальность создания форм для парентерального введения. С другой стороны, недостаточная в ряде случаев эффективность штатных противосудорожных средств заставляет ставить вопрос о повышении их активности путем комбинированного применения с препаратами адъювантной терапии.

Существующие зарубежные образцы лекарственных форм большинства противосудорожных препаратов приготовлены с использованием органических растворителей и в ряде случаев обладают выраженными локальными токсическим эффектами. Возможности такого подхода к растворению ограничены невысокими показателями максимальной концентрации активного вещества в лекарственной форме, а также токсическими эффектами применяемых растворителей.

Помимо использования традиционных подходов (дериватизация исходных соединений, применение органических растворителей, эмульгаторов и сурфактантов), при получении стабильных лекарственных форм противосудорожных препаратов могут найти применение наноразмерные полимерные носители и комплексы включения с циклодекстринами [3]. Создаваемые при использовании этих подходов лекарственные формы могут обладать свойствами регулируемого высвобождения активного вещества.

К числу высокоактивных противосудорожных средств относят производные барбитуровой кислоты, и в частности фенобарбитал. Достоинства фенобарбитала состоят в высокой противосудорожной эффективности при отравлениях антагонистами рецепторов гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК). Препарат обладает длительным действием и достаточно широко применяется в неврологической практике, в особенности при дебюте эпилепсии у детей. Высокую эффективность данный барбитурат проявляет при интоксикации пентилентетразолом, пикротоксином и бикукуллином [2, 4-7].

Вместе с тем, для фенобарбитала и других барбитуратов характерны следующие недостатки:

- выраженное угнетающее действие на структуры головного мозга, высокая вероятность развития нарушений дыхания и кровообращения;

- высокая токсичность;

- небольшая широта терапевтического действия.

Результаты радиолигандных исследований взаимодействия токсикантов с их биомишенями, анализ клинических случаев отравлений и данные экспериментального изучения эффективности противосудорожных средств указывают на то, что при отравлениях судорожными агентами только парентеральное введение противосудорожных препаратов может обеспечить приемлемые показатели защиты [4, 8, 9]. Фенобарбитал используется за рубежом в клинической практике для неотложной терапии судорожного синдрома, поскольку для него разработана и зарегистрирована лекарственная форма для парентерального введения. Основу ее составляет растворимая натриевая соль фенобарбитала, которая отличается относительным быстродействием и высокой скоростью метаболизма.

В России же в настоящее время лекарственная форма фенобарбитала для парентерального введения не зарегистрирована. Данное обстоятельство свидетельствует о наличии у рассматриваемого антиконвульсанта еще одного существенного недостатка, ограничивающего использование его при отравлениях судорожными агентами и при эпилептическом статусе, который заключается в невозможности парентерального введения его при оказании неотложной медицинской помощи по жизненным показаниям.

Вместе с тем известно, что в случае монотерапии фенобарбиталом, с одной стороны, не гарантируется обеспечение необходимой защиты при отравлении некоторыми хлорорганическим инсектицидами [2], а с другой стороны, сохраняется вероятность развития негативных побочных эффектов, свойственных барбитуратам. Для усиления лечебного эффекта антиконвульсанта и увеличения широты терапевтического действия (ШТД) рекомендуется использовать его в комплексе с нестероидными противовоспалительными средствами (НПВС) [10]. Сочетанное применение барбитуратов и официнальных НПВС позволяет повысить противосудорожную эффективность производных барбитуровой кислоты и существенно снизить их эффективную дозу, что, в свою очередь, способствует увеличению широты терапевтического действия препаратов.

Так, для преодоления недостатков, характерных для монотерапии барбитуратами, при терапии судорожного синдрома предложено использовать средство, предусматривающее сочетанное назначение антиконвульсанта класса барбитуратов (фенобарбитал, гексобарбитал, тиопентал-натрий, этаминал, барбамил) и НПВС (пелекоксиб, нимесулид, кеторолак) в терапевтических дозах [10].

Практическому использованию указанного средства при отравлениях судорожными агентами препятствует то, что в данном случае при сочетанном назначении фенобарбитала и НПВС предусматривается раздельное их введение, поскольку комбинированные препараты, содержащие оба эти компонента в единой лекарственной форме, отсутствуют. Не регламентирован также путь введения составляющих указанного средства и, по всей видимости, он определяется как пероральный, поскольку в настоящее время в России антиконвульсанты класса барбитуратов и НПВС (целекоксиб, нимесулид) доступны только в форме таблеток.

Указанные существенные недостатки свидетельствуют о невозможности использования рассматриваемого средства при неотложной терапии отравлений судорожными агентами и эпилептическом статусе.

В качестве прототипа принят фенобарбитал натрия в лекарственной форме раствора для инъекций, так как в таком виде он широко применяется в клинической практике и наиболее близок к заявленному изобретению по составу, способу введения, показаниям для применения и достигаемому противосудорожному эффекту.

Средство-прототип по составу представляет собой водный раствор натриевой соли фенобарбитала (в концентрации 130 мг/мл), содержащий в качестве стабилизаторов этанол (10%), бензиловый спирт (1,5%) и пропиленгликоль (67,8%).

Целью изобретения явилось изыскание комплексного противосудорожного средства на основе фенобарбитала и нестероидного противовоспалительного средства, отличающегося высокой защитной противосудорожной эффективностью при неотложной терапии отравлений судорожными агентами, стабильностью при хранении, низкой токсичностью, большой терапевтической широтой, продолжительным действием и минимально выраженным местно-раздражающим действием при парентеральном введении.

Указанная цель достигается путем создания фармацевтической композиции, предназначенной для парентерального введения, в состав которой в отличие от средства-прототипа помимо фенобарбитала, стабилизаторов и растворителя дополнительно включены НПВС и агент, обеспечивающий пролонгированное высвобождение активных веществ и уменьшение раздражающего воздействия в месте инъекции.

Рекомендуемые НПВС представляют собой производные антраниловой кислоты - фенаматы.

Фенобарбитал и фенаматы используют в виде натриевых солей.

В качестве фенаматов используют соединения из группы: мефенамат натрия (MФNa) или толфенамат натрия (TФNa).

В качестве стабилизаторов, которые введены в состав заявляемой фармацевтической композиции для обеспечения высокой ее стабильности при хранении, используют 1,2-пропиленгликоль и этанол.

В качестве агента, обеспечивающего пролонгированное высвобождение активных веществ и уменьшение раздражающего воздействия в месте инъекции, используют гидроксипропил-β-циклодекстрин.

В качестве растворителя используют дистиллированную воду для инъекций.

Заявляемая фармацевтическая композиция выполнена в лекарственной форме для парентерального введения и включает компоненты в следующих количествах:

фенобарбитал натрия 233 мг фенамат в виде:   мефенамата натрия 31,0 мг или   толфенамата натрия 33,5 мг 1,2-пропиленгликоль 400 мг этанол 100 мг гидроксипропил-β-циклодекстрин 200 мг дистиллированная вода для инъекций до 1 мл

При этом активные вещества (фенобарбитал натрия и фенамат) назначают в строго определенном молярном соотношении, а именно: 23:5.

Заявляемая фармацевтическая композиция является лечебной и предназначена для введения после поступления токсиканта в организм.

Возможность достижения цели изобретения подтверждается результатами проведенных исследований, представленными в следующих примерах.

Пример 1. Получение заявляемой фармацевтической композиции в лекарственной форме для парентерального введения

Для получения лекарственной формы заявляемой фармацевтической композиции объемом 10 мл выполняют следующий алгоритм действий: навески фенобарбитала натрия (2,33 г) и применяемого фенамата в виде мефенамата натрия (0,310 г) или толфенамата натрия (0,335 г) помещают в мерную колбу объемом 10 мл, добавляют 1,2-пропиленгликоль (4,0 г), этанол (1,0 г), гидроксипропил-β-циклодекстрин (2,0 г), затем объем раствора в колбе доводят до 10 мл путем добавления дистиллированной воды для инъекций.

При этом фенобарбитал натрия и натриевые соли фенаматов используют в форме субстанций производства фирмы Sigma (США).

Как видно, процесс получения лекарственной формы заявляемой фармацевтической композиции для парентерального введения отличается простотой, а при его проведении используют субстанции известных химических веществ, выпуск которых может быть легко освоен отечественной промышленностью.

В дальнейшем в примерах показаны результаты экспериментального изучения следующих противосудорожных средств:

- средство-прототип (фенобарбитал натрия в виде официнальной лекарственной формы для парентерального введения Luminal Sodium® Injection 130 mg/ml, Baxter Healthcare);

- заявляемая фармацевтическая композиция, включающая в качестве фенамата мефенамат натрия (MФNa);

- заявляемая фармацевтическая композиция, включающая в качестве фенамата толфенамат натрия (TФNa).

Пример 2. Оценка стабильности лекарственной формы заявляемой фармацевтической композиции

При разработке лекарственной формы заявляемой фармацевтической композиции ориентировались на достижение максимальной концентрации активных веществ, входящих в ее состав, а также ее высокой стабильности при хранении.

Стабильность разработанной лекарственной формы заявляемой фармацевтической композиции при хранении оценивали путем определения экспериментального срока годности на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре [11].

Расчет экспериментального срока годности проводили по формуле:

где С - экспериментальный срок годности, лет;

С_экс - экспериментальный срок хранения, сут;

А - коэффициент, принятый равным 2;

t_xp - температура хранения, 20°С;

t_экс - температура экспериментального хранения, 70°C.

Для получения необходимых для проведения расчета данных подготовленные для исследований растворы заявляемой фармацевтической композиции заливали в ампулы и запаивали, после чего помещали в термостат и выдерживали при температуре 70°C до момента появления хлопьев, мути, осадка кристаллов или изменения цвета раствора. Периодичность контроля состояния раствора составляла 6 сут.

При появлении у находящихся в термостате ампул визуально видимых признаков непригодности для дальнейшего использования (хлопья, муть, появление кристаллов или изменение цвета раствора) данные ампулы изымали и регистрировали их экспериментальный срок хранения. Затем определяли средний экспериментальный срок хранения партий лекарственных форм заявляемой фармацевтической композиции, содержащих MФNa или TФNa, который составил 46,8±1,3 сут или 50,7±1,2 сут соответственно.

Экспериментально установленный срок годности лекарственных форм заявляемой фармацевтической композиции, содержащих MФNa или TФNa, составил соответственно 4,1±0,1 лет или 4,4±0,1 лет.

При изучении стабильности разработанных лекарственных форм заявляемой фармацевтической композиции проводили также измерение концентраций активных веществ, входящих в ее состав (фенобарбитал натрия, мефенамат натрия, толфенамат натрия), и оценивали их динамику в условиях хранения при повышенной температуре.

Результаты исследований, представленные на фиг.1, позволили сделать вывод, что в течение всего срока наблюдения концентрации всех активных веществ практически не изменялись, что также свидетельствует о стабильности полученных лекарственных форм заявляемой фармацевтической композиции.

Кроме того, для демонстрации стабильности лекарственных форм заявляемой фармацевтической композиции проводили сравнение противосудорожной эффективности растворов, приготовленных ex tempore или взятых после хранения в течение 2 лет по методике «ускоренного старения», в опытах на крысах при внутримышечном введении их через 5 мин после отравления пентилентетразолом в дозе 1 ЛД₉₉.

Экспериментально установлено, что в случаях использования растворов, как приготовленных ex tempore, так и взятых после хранения, значимых различий в противосудорожной эффективности не наблюдается. Данные, приведенные в таблице 1, свидетельствуют о незначительном снижении эффективности заявляемой фармацевтической композиции в случае использования ее после хранения.

Таким образом, экспериментально установлено, что заявляемая фармацевтическая композиция в лекарственной форме для парентерального введения отличается стабильностью при хранении, достаточной для практического применения ее в качестве лекарственного препарата [12, 13].

Пример 3. Исследование токсичности фенобарбитала натрия при монотерапии или введении его в составе заявляемой фармацевтической композиции

Токсичность фенобарбитала натрия при монотерапии или введении его в составе заявляемой фармацевтической композиции оценивали путем определения среднетоксической (по эффекту развития бокового положения) и среднелетальной доз.

Среднеэффективные дозы препаратов определяли методом пробит-анализа (по Финни) с использованием персонального компьютера и пакета прикладных программ STATISTICA+ 2005 для Windows. Для определения среднеэффективных доз препаратов использовали не менее 6 точек (доз) по 6 животных на точку. В каждой группе рассчитывали средние значения и ошибку среднего. Достоверность различий средних значений контролируемых показателей в экспериментальных группах оценивали по t-критерию Стъюдента.

Эксперименты выполнены на белых крысах-самцах массой тела 180-220 г. В эксперименте формировали 3 группы животных по 36 особей в каждой.

Животным первой группы внутримышечно вводили фенобарбитал натрия (средство-прототип).

Животным второй и третьей экспериментальных групп внутримышечно вводили заявляемую фармацевтическую композицию, содержащую MФNa или TФNa.

Из представленных на фиг.2 результатов следует, что при введении фенобарбитала натрия в составе заявляемой фармацевтической композиции среднетоксические дозы барбитурата были наибольшими и превышали данный показатель средства-прототипа соответственно в 1,7 и 2,0 раза (различия достоверны при p<0,05).

Также заявляемая фармацевтическая композиция, включающая MФNa или TФNa, характеризовалась более высокими значениями среднелетальных доз, которые достоверно отличались от показателя средства-прототипа (p<0,05).

Снижение токсичности заявляемой фармацевтической композиции обусловлено влиянием на ГАМК_А-рецепторы входящих в ее состав фенаматов (мефенамата натрия или толфенамата натрия).

Пример 4. Определение широты терапевтического действия, фактора безопасности и среднеэффективных доз (по предупреждению гибели при отравлении коразолом) средства-прототипа и заявляемой фармацевтической композиции в экспериментах на крысах

В качестве критериев безопасного применения противосудорожных средств использовали следующие показатели: широта терапевтического действия (ШТД, отношение среднелетальной дозы к среднеэффективной) и фактор безопасности (ФБ, отношение среднелетальной дозы к среднетоксической).

В экспериментах, выполненных на белых крысах-самцах массой тела 180-220 г, условия проведения которых описаны в примере 3, осуществляли определение среднелетальных, среднетоксических и среднеэффективных доз исследуемых противосудорожных средств.

Экспериментально установленные характеристики эффективности (среднеэффективные дозы по предупреждению гибели при отравлении крыс коразолом в дозе 1 ЛД₉₉ (ЕД₅₀)) и токсичности (среднетоксические (ТД₅₀) и среднелетальные (ЛД₅₀) дозы), а также расчетные показатели безопасности (ШТД и ФБ) средства-прототипа и заявляемой фармацевтической композиции при внутримышечном введении крысам приведены в таблице 2.

Установлено, что заявляемая фармацевтическая композиция имеет более высокие показатели безопасного применения (ШТД и ФБ) по сравнению со средством-прототипом.

Широта терапевтического действия заявляемой фармацевтической композиции, содержащей MФNa или TФNa, превышает указанный показатель средства-прототипа в 1,8 и 2,3 раза соответственно.

По значению показателя фактора безопасности заявляемая фармацевтическая композиция с MФNa или TФNa превосходит средство-прототип в 2,6 и 3,4 раза соответственно.

Пример 5. Изучение депримирующего действия фенобарбитала натрия при монотерапии или введении его в составе заявляемой фармацевтической композиции

Известно, что применение фенобарбитала в высоких дозах может сопровождаться побочными реакциями, которые связаны с его выраженным седативно-гипнотическим действием, угнетением дыхательной и сердечно-сосудистой систем. Наиболее ранним признаком развития депримирующего эффекта барбитурата может быть нарушение воспроизведения условных рефлексов у животных.

При исследовании депримирующего действия фенобарбитала натрия на условно-мотивационную деятельность животных использовали метод двигательного пищевого рефлекса, который позволяет провести оценку влияния нейротропных агентов на воспроизведение пищедобывательного навыка, сформированного в результате тренировок.

В качестве модели обучения, основанной на пищевом подкреплении, использовали условно-рефлекторную двигательную пищедобывательную реакцию (УДПР), выработку которой проводили в экспериментальной камере, имеющей стартовое, центральное и целевое отделения. В ходе эксперимента у животных формировали условно-рефлекторную реакцию побежки к полке, расположенной в целевой камере. Навык считали выработанным, если животное в течение двух дней подряд совершало 8 правильных побежек из 10, средняя продолжительность которых составляла 2-5 сек.

Эксперименты выполнены на белых крысах-самцах массой тела 180-220 г с выработанным пищедобывательным навыком. В эксперименте формировали 3 группы животных по 6 особей в каждой.

Животным первой группы внутримышечно вводили средство-прототип в дозе 70 мг/кг. Фенобарбитал натрия в указанной дозе вызывает начальные признаки угнетения центральной нервной системы (ЦНС) [10].

Животным второй и третьей групп внутримышечно вводили заявляемую фармацевтическую композицию, содержащую фенобарбитал натрия в дозе 70 мг/кг, а также MФNa или TФNa в дозе 9,5 мг/кг или 10,0 мг/кг соответственно.

Тестирование подопытных животных проводили непосредственно перед введением противосудорожных средств, а также после их введения: через 15 и 30 мин, а затем через 1, 2, 3, 4 и 6 ч. По результатам трех побежек определяли среднее время. Невыполнение животным теста после трех попыток засчитывали как срыв задания.

Результаты исследований, представленные в таблице 3, позволили установить, что введение средства-прототипа подопытным животным в дозе 70 мг/кг приводило к замедлению выполнения ими теста. Тем не менее, несмотря на атаксию и некоторую заторможенность, выработанный условный рефлекс побежки к целевой полке сохранялся. Срыв выполнения условного рефлекса регистрировали у 17-50% животных в зависимости от срока наблюдения.

Промежуток времени от момента введения средства-прототипа (фенобарбитала натрия) до регистрации его максимального влияния на условно-рефлекторную деятельность животных составил 15-120 мин. В случае введения фенобарбитала натрия в составе заявляемой фармацевтической композиции, содержащей MФNa или TФNa, максимальное влияние на условно-рефлекторную деятельность у крыс наблюдали через 120-180 мин.

Таким образом, установлено, что при монотерапии фенобарбиталом натрия депримирующий эффект был наиболее выражен. После введения фенобарбитала натрия в составе заявляемой фармацевтической композиции выявляли снижение выраженности и замедление развития токсического эффекта, который проявлялся на 90 мин позже, чем у средства-прототипа.

Пример 6. Исследование специфической противосудорожной активности средства-прототипа и заявляемой фармацевтической композиции на моделях отравления крыс коразолом, тиосемикарбазидом, пикротоксином, фосфаколом, аминостигмином и стрихнином в дозе 1 ЛД₉₉

Эксперименты выполнены на белых крысах-самцах массой тела 180-220 г. Моделирование интоксикации судорожными ядами проводили путем их внутримышечного введения подопытным животным в дозе 1 ЛД₉₉. Противосудорожные средства вводили через 5 мин после отравления.

Были сформированы 6 экспериментальных групп по 6 особей в каждой для изучения противосудорожной активности средства-прототипа и 12 экспериментальных групп по 6 особей в каждой для изучения противосудорожной активности заявляемой фармацевтической композиции с MФNa или TФNa. Животным всех групп внутримышечно вводили токсикант, после чего через 5 мин также внутримышечно вводили противосудорожное средство. Средство-прототип вводили в дозе 52,5 мг/кг. В составе заявляемой фармацевтической композиции фенобарбитал натрия вводили в дозе 52,5 мг/кг, TФNa в дозе 7,7 мг/кг, MФNa в дозе 7,1 мг/кг.

Критериями специфической противосудорожной активности исследуемых антиконвульсантов служили время развития судорог и гибели, а также частота гибели подопытных животных за период наблюдения. Достоверность различий средних значений контролируемых показателей в экспериментальных группах оценивали по t-критерию Стъюдента.

Судорожную активность оценивали по методу, основанному на оценке проявлений судорог в баллах [14]. Поскольку судорожные реакции после введения токсикантов у животных характеризовались выраженным полиморфизмом, то для облегчения регистрации показателей проявления судорожной активности в 1 и 2 балла объединяли и обозначали как «судороги 1-2 степени». К данной группе признаков относили миоклонические вздрагивания головы или туловища, тризм жевательных мышц, клонические судороги передних конечностей, мелкий тремор. Судорожную активность в 3-4 балла, проявлениями которой считали подъем на задние конечности, крупный тремор и клонические судороги с вовлечением мышц всего тела, обозначали как «судороги 3-4 степени» или «тяжелые судороги» [14].

Результаты исследований, представленные в таблицах 4, 5, 6, показали, что при отравлениях всеми изученными модельными токсикантами заявляемая фармацевтическая композиция с TФNa или MФNa превосходит средство-прототип по противосудорожной активности.

Было показано, что средство-прототип оказывало более выраженный защитный эффект при отравлении ГАМК-негативными соединениями (коразол, тиосемикарбазид, стрихнин), в то время как при интоксикации холинергическими средствами (фосфакол, аминостигмин) применение средства-прототипа не позволяло предотвратить гибель большинства животных в группе.

Лечебное применение заявляемой фармацевтической композиции с MФNa приводило к более позднему развитию судорог, снижению их интенсивности и частоты развития. Регистрировали достоверные (p<0,05) отличия от средства-прототипа по времени развития судорог 1-2 и 3-4 степени и по времени гибели животных во всех экспериментальных группах. Отмечали уменьшение частоты летальности при отравлении как ГАМК-негативными соединениями (коразол, пикротоксин, тиосемикарбазид, стрихнин) до 0-50%, так и холинергическими препаратами (фосфакол, аминостигмин) до 50-67%.

Наибольший противосудорожный и защитный эффект был достигнут в случае применения заявляемой фармацевтической композиции с TФNa.

Лечебное введение данного противосудорожного средства обеспечивало выживание всех животных в группе при отравлении коразолом, пикротоксином или стрихнином в дозе 1 ЛД₉₉.

Значительное снижение частоты гибели наблюдали при отравлении тиосемикарбазидом (с 50±22% при использовании средства-прототипа до 17±17%). Во всех экспериментальных группах регистрировали достоверное увеличение времени развития признаков интоксикации (р<0,05, по сравнению со средством-прототипом), а также отмечали снижение частоты развития тяжелых судорог.

Влияние рассматриваемого противосудорожного средства на проявления интоксикации антихолинэстеразными препаратами (фосфакол, аминостигмин) было недостаточно выраженным для осуществления полного защитного эффекта. Вместе с тем, по сравнению со средством-прототипом частота гибели в этих группах снижалась с 67-83% до 17-33%.

Пример 7. Оценка продолжительности действия средства-прототипа и заявляемой фармацевтической композиции в экспериментах на крысах

Моделирование интоксикации достигали подкожным введением подопытным животным пентилентетразола в дозе 125 мг/кг (1 ЛД₉₉).

Для оценки продолжительности защитного действия исследуемых противосудорожных средств определяли их активность при профилактическом введении в различные сроки до отравления пентилентетразолом. Учитывая, что противосудорожная активность фенобарбитала натрия в этих условиях существенно выше, чем при его лечебном применении, для данной серии экспериментов была выбрана такая доза барбитурата, при которой препарат не оказывал выраженного защитного эффекта в случае лечебного применения.

В экспериментах, выполненных на белых крысах-самцах массой тела 180-220 г, были сформированы 30 экспериментальных групп по 6 особей в каждой.

Животным 1-10 групп вводили средство-прототип (фенобарбитал натрия в дозе 5,25 мг/кг).

Животным 11-20 групп вводили заявляемую фармацевтическую композицию (фенобарбитал натрия в дозе 5,25 мг/кг и мефенамат натрия в дозе 0,71 мг/кг).

Животным 21-30 групп вводили заявляемую фармацевтическую композицию (фенобарбитал натрия в дозе 5,25 мг/кг и толфенамат натрия в дозе 0,77 мг/кг).

Животным всех экспериментальных групп токсикант вводили по схеме:

Экспериментальная группа животных Срок введения пентилентетразола 1, 11, 21 Одновременно с противосудорожным средством 2, 12, 22 Через 15 мин 3, 13, 23 Через 30 мин 4, 14, 24 Через 60 мин 5, 15, 25 Через 120 мин 6, 16, 26 Через 180 мин 7, 17, 27 Через 240 мин 8, 18, 28 Через 360 мин 9, 19, 29 Через 420 мин 10, 20, 30 Через 480 мин

Экспериментально установлено (фиг.3), что заявляемая фармацевтическая композиция имеет наибольшую продолжительность эффективного противосудорожного действия. Максимальный уровень противосудорожного эффекта, характеризующийся в зависимости от используемого фенамата 73% или 83% выживаемостью подопытных животных, наблюдается через 2 ч после введения. Затем через 2 ч противосудорожная эффективность снижается до 50% выживаемости животных и остается на данном достаточно высоком уровне в течение 2 ч. Таким образом, введение заявляемой фармацевтической композиции обеспечивает эффективную защиту в течение 6 ч.

В то же время максимальный противосудорожный эффект фенобарбитала натрия, обеспечивающий 50% выживаемость животных, наблюдается через 1 ч после введения. Через 2 ч после введения эффективность препарата снижается до 33% выживаемости животных и в дальнейшем средство-прототип практически не проявляет защитную активность.

Полученные результаты свидетельствуют о развитии более продолжительного терапевтического эффекта фенобарбитала натрия при его введении в комплексе с гидроксипропил-β-циклодекстрином.

Пример 8. Исследование местно-раздражающего действия средства-прототипа и заявляемой фармацевтической композиции

Эксперименты по исследованию выраженности местного раздражающего действия средства-прототипа и заявляемой фармацевтической композиции проведены на нелинейных крысах-самцах массой тела 180-220 г.

В эксперименте формировали 3 группы животных по 6 особей в каждой.

Животным первой группы внутримышечно (в мышцы голени) вводили средство-прототип (фенобарбитал натрия) в объеме 0,2 мл на животное.

Животным второй и третьей экспериментальных групп внутримышечно вводили заявляемую фармацевтическую композицию в рекомендуемой для парентерального введения лекарственной форме, содержащую MФNa или TФNa, в объеме 0,2 мл на животное.

Критерием оценки местного раздражающего действия служила длина окружности голени (как признак отека). Длину окружности регистрировали до начала эксперимента (фоновые показатели) и через 3, 7, 14 сут после введения противосудорожных средств.

Динамика длины окружности голени подопытных животных на фоне введения антиконвульсантов представлена в таблице 7. Как видно, введение противосудорожных средств вызывало увеличение длины окружности голени крыс. Наименее выраженным местно-раздражающим действием обладала заявляемая фармацевтическая композиция, содержащая как MФNa, так и TФNa.

Заявляемое изобретение удовлетворяет критерию «новизна», так как впервые при неотложной терапии отравлений судорожными агентами различных групп предложено использовать фармацевтическую композицию, предусматривающую комплексное воздействие фенобарбитала натрия, НПВС из числа фенаматов и гидроксипропил-β-циклодекстрина, отличающуюся высокой специфической защитной эффективностью, стабильностью при хранении, низкой токсичностью, большой терапевтической широтой, продолжительным действием и минимально выраженным депримирующим и местно-раздражающим действием при парентеральном введении.

Заявляемое изобретение удовлетворяет критерию «изобретательский уровень», так как из доступных источников информации не является очевидной целесообразность включения в состав заявляемой фармацевтической композиции фенобарбитала натрия, нестероидного противовоспалительного средства из числа фенаматов и гидроксипропил-β-циклодекстрина, оптимальное их содержание и соотношение, а также возможность повышения при этом защитной противосудорожной эффективности барбитурата и снижения его токсичности.

Соответствие критерию «пригодность для применения» доказывается результатами многочисленных исследований, из которых видно, что заявляемая фармацевтическая композиция в лекарственной форме для парентерального введения отличается высокой специфической защитной эффективностью, низкой токсичностью, минимально выраженным депримирующим и местно-раздражающим действием, а также высокой стабильностью при хранении, достаточной для практического применения ее в качестве средства неотложной терапии при отравлениях судорожными агентами. Приготовление лекарственной формы предлагаемой фармацевтической композиции отличается простотой и предусматривает использование субстанций известных химических веществ, выпуск которых может быть легко освоен отечественной промышленностью.

Список литературы

1. Roberts D.M, Dissanayake W., Sheriff R., Eddleston M. Refractory status epilepticus following self-poisoning with the organochlorine pesticide endosulfan / Journal of Clinical Neuroscience. - 2004. - Vol.11, Iss 7. - P.760-762.

2. Гладких В.Д., Елькин А.И., Назаров В.Б. Токсикология блокаторов ГАМК-зависимых хлор-ионных каналов нейрональных мембран. - М.: ВУ РХБЗ, 2004. - 251 с.

3. Brewster М.Е. Cyclodextrins as pharmaceutical solubilizers / М.E. Brewster, T. Loftsson // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2007. - Vol.59. - P.645-666.

4. Головко А.И., Головко С.И., Зефиров С.И., Софронов Г.А. Токсикология ГАМК-литиков. - СПб.: Нива, 1996. - 144 с.

5. Головко А.И., Софронов Г.А. Влияние предварительного введения фенобарбитала на токсичность ГАМК-литиков у мышей // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1993. - №5. - С.491-492.

6. Al-Hader A., Hasan М., Hasan L. The compara effects of propofol, thiopental and diazepam, administered intravenously and pentylenetetrazol seizure threshold in the rabbit // Life Sci. - 1992. - Vol.51, №10. - P. 779-786.

7. Hasan М., Hasan L., al-Hader A. et al. A comparison of the anticonvulsant effects of propofol and thiopentale against pentylenetetrazol-induced convulsions in the rat // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. - 1991. - Vol.18, №10. - P. 691-695.

8. Гладких В.Д., Колосова Н.А. Особенности проявления токсического действия экзо, цис-5,6-дихлор-2,2-дициан 3,3-бис(трифторметил)-бицикло/2,2,1/гептана при многократном поступлении в организм / Токсикол. вестник. - 2000. - №3. - С.16-20.

9. Гладких В.Д., Колосова Н.А., Лошадкин Н.А. Эффекты совместного действия «бициклогептана» с другими физиологически активными веществами / Токсикол. вестник. - 1995. - №6. - С.12-16.

10. RU 2314828 C1, 20.01.2008.

11. Временная инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре. И-42-2-82. Введена в действие Приказом Министерства здравоохранения СССР и Министерства медицинской промышленности 18 апреля 1983 года №430/224. - М., 1983. - 10 с.

12. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Изд-во «Новая Волна», 2005. - 1200 с.

13. Обращение лекарственных средств / Официальный сайт ФГУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения», www.regmed.ru. - Раздел «Реестр зарегистрированных ЛС и ТКФС». - По состоянию на 17.07.2008.

14. Крыжановский Г.Н. Общая патофизиология нервной системы. - М., 1997. - С.352.

Изобретение относится к фармацевтической композиции, обладающей противосудорожной активностью, на основе фенобарбитала и нестероидного противовоспалительного средства (фенамата), взятых в молярном соотношении 23:5. Фармацевтическая композиция выполнена в виде лекарственной формы для парентерального введения и включает 233 мг фенобарбитала натрия, 31,0 мг мефенамата натрия или 33,5 мг толфенамата натрия, 400 мг 1,2-пропиленгликоля и 100 мг этанола в качестве стабилизаторов и 200 мг гидроксипропил-β-циклодекстрина в качестве агента, обеспечивающего пролонгированное высвобождение и уменьшение раздражения, и дистиллированную воду для инъекций. Противосудорожная композиция обладает высокой защитной противосудорожной эффективностью при неотложной терапии отравлений судорожными агентами, стабильностью при хранении, низкой токсичностью, большой терапевтической широтой, продолжительным действием и минимально выраженным местно-раздражающим действием при парентеральном введении. 3 ил., 7 табл., 8 пр.

Фармацевтическая композиция с противосудорожной активностью, выполненная в лекарственной форме для парентерального введения, включающая антиконвульсант класса барбитуратов в виде водного раствора фенобарбитала натрия и стабилизаторы в виде этанола и 1,2-пропиленгликоля, отличающаяся тем, что дополнительно включает нестероидное противовоспалительное средство, в качестве которого содержит фенамат в виде мефенамата натрия или толфенамата натрия, а также агент, обеспечивающий пролонгированное высвобождение активных веществ и уменьшение раздражающего воздействия в месте инъекции, в качестве которого содержит гидроксипропил-β-циклодекстрина, а входящие в ее состав компоненты включает в следующих количествах:
фенобарбитал натрия 233 мг фенамат в виде:   мефенамата натрия 31,0 мг или толфенамата натрия 33,5 мг 1,2-пропиленгликоль 400 мг этанол 100 мг гидроксипропил-β-циклодекстрин 200 мг дистиллированная вода для инъекций до 1 мл,