СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2013 года по МПК G09B23/28 A61K35/24 A61P35/00 

Изобретение относится к медицине, точнее к онкологии, и может быть использовано в эксперименте на перевивных опухолях для повышения неспецифической противоопухолевой резистентности и достижения выраженного противоопухолевого эффекта в отсутствие лекарственной и лучевой терапии.

Известен способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте (Шихлярова А.И. О неспецифическом адаптационно-трофическом влиянии малых доз адреналина. Дисс. … канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1985. 156 с.). В известном способе получено противоопухолевое действие малых доз адреналина при его подкожном введении крысам с перевивными и канцероген-индуцированными опухолями. Таким образом, была показана возможность повышения неспецифической противоопухолевой резистентности организма с помощью малых доз биологически активного вещества, относящегося к группе гуморальных факторов нейроэндокринной системы.

Позже был предложен способ лечения злокачественных опухолей в эксперименте, основанный на использовании гетерологичного ликвора как высокоактивной биологической жидкости (Гаркави Л.Х., Шихлярова А.И. Перспективы использования малых доз ликвора: эксперименты на моделях опухолевого роста и старения // Перспективы развития научных исследований в предстоящем столетии. Ростов н/Д, 2001, с.302-308). В известном способе было показано противоопухолевое действие ликвора, полученного у здоровых белых беспородных крыс при разведении его физиологическим раствором в 10 раз и введении эндолюмбально крысам-опухоленосителям, а также ликвора, полученного у животных, излеченных от злокачественного процесса с помощью неспецифических воздействий, при разведении его физиологическим раствором в 10⁴ раз (2 раза в 100 раз) и введении внутривенно крысам с крупными опухолями.

При этом как для первого, так и для второго из описанных выше способов, принципиальное значение имело значительное разведение биологически активного вещества и достижение с помощью введения такого вещества и в таком количестве антистрессорного влияния на организм в целом, то есть развитие антистрессорных общих неспецифических адаптационных реакций высоких уровней реактивности (Гаркави Л.Х., Уколова М.А., Квакина Е.Б., 1975, диплом на открытие №158; Гаркави Л.Х., 2008, диплом на открытие №367), в первую очередь - адаптационных реакций спокойной и повышенной активации.

Возник вопрос: сохраняется ли подобное свойство разведенного ликвора при введении его от человека с опухолевым процессом животному с растущей опухолью, т.е. сохраняются ли информационные свойства ликвора, во-первых, при введении его животному другого вида и, во-вторых, при наличии онкологической патологии у донора.

Целью изобретения явилось получение противоопухолевого эффекта при введении животным-опухоленосителям разведенного ликвора больных, ранее имевших опухоли головного мозга.

Поставленная цель достигается тем, что животным, половозрелым самцам и самкам белых беспородных крыс с перевивной саркомой 45, при достижении опухолями размеров 0,7-1,3 см³ в подключичную вену вводят гомеопатическое средство, полученное путем двукратного последовательного разведения физиологическим раствором до 1:10⁴ ликвора больных опухолями головного мозга после радикальной операции без развития рецидивов на момент получения ликвора, в объеме 0,3-0,4 мл в зависимости от веса животного 2 раза в неделю на протяжении 3-х недель.

«Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте» является новым, так как он неизвестен в онкологии при экспериментальном исследовании лечения злокачественных новообразований животных с помощью ликвора больных, имевших ранее опухоли головного мозга.

Новизна изобретения заключается, во-первых, в использовании ликвора человека для лечения экспериментальных животных-опухоленосителей; во-вторых, в использовании ликвора доноров, страдавших злокачественными опухолями мозга, после радикальной операции, то есть после хирургического удаления этих опухолей в пределах неизмененных тканей.

Изобретение «Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте» является промышленно применимым, так как может быть использован в здравоохранении, в научно-исследовательских онкологических институтах, при экспериментальных и клинических исследованиях возможностей применения человеческого ликвора в комплексном противоопухолевом лечении, а также в качестве экспериментального основания для новых перспективных направлений исследований - изучения возможности использования ликвора животных, а также ликвора людей с удаленными опухолями (более доступного, чем ликвор здоровых людей) для лечения онкологических больных.

«Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте» осуществляется следующим образом:

У пациентов, прооперированных по поводу опухолей мозга (астроцитома, менингиома, глиома и др.), и без развития рецидивов в дальнейшем, при проведении лечебных и диагностических процедур получают небольшое количество ликвора (0,5 мл). Каждую новую порцию ликвора используют в течение 5 дней. Ликвор хранят в холодильнике (не в морозильной камере). Воздействие у белых беспородных крыс с саркомой 45 начинают при достижении опухолями размеров 0,7-1,3 см³. Разведенный ликвор вводят в подключичную вену животного в объеме 0,3 мл (при весе 150-170 г) или 0,4 мл (при весе более 170 г) 2 раза в неделю с интервалом в 3-4 дня. Непосредственно перед введением ликвор разводят физиологическим раствором 1:10⁴ в два приема, каждый раз 1:100. Продолжительность курса гетероликворотерапии - 3 недели.

На рисунке 1 представлены данные о динамике размеров перевивной саркомы 45 у белых беспородных лабораторных крыс (объем групп - 6-8 животных) под влиянием разведенного и неразведенного ликвора, полученного у пациентов отделения нейрохирургии Ростовского научно-исследовательского онкологического института. В рассматриваемом эксперименте влияние разведенного ликвора проявилось уже через сутки после первого введения. Было отмечено уменьшение размеров опухоли, в среднем на 23% (р<0,05; на 10-40% у разных животных рассматриваемой группы) по сравнению с исходными значениями, тогда как в двух других группах объем саркомы 45 увеличился в среднем более чем на четверть (р<0,05; рис.1А). В дальнейшем на некоторых этапах исследованного периода (3 недели) объем опухолей животных, получавших разведенный ликвор, был в 1,5-2 раза меньше соответствующих значений в контроле и в группе с введением неразведенного ликвора (р<0,05; рис.1В).

При этом имели место различия в состоянии пациентов, ликвор которых был использован в рассматриваемом эксперименте. Очевидно, эти различия обусловили и различную динамику размеров опухоли. Сначала - первые два введения - применяли ликвор, взятый у пациентки, у которой после удаления менингиомы и проведения 6-ти курсов интратекальной химиотерапии в течение 3-х лет не было отмечено рецидивов заболевания. Такое воздействие способствовало значительному торможению роста опухоли и даже частичной ее регрессии у некоторых животных (рис.1В, этапы 1 и 2).

Затем использовали ликвор пациентов, которые на момент взятия ликвора имели рецидив заболевания, соответственно, анапластической астроцитомы и менингиомы. Введение разведенного ликвора таких больных сопровождалось значительным ускорением темпов увеличения размеров саркомы 45 и быстрым приближением объема опухоли к значениям данного показателя у животных контрольной группы (рис.1В, этапы 3-5).

О важном значении состояния больных - доноров ликвора для результата воздействия у животных-опухоленосителей свидетельствуют и данные эксперимента, в ходе которого был получен наиболее значительный противоопухолевый эффект (рис.2).

С помощью гетероликворотерапии удалось добиться снижения среднего размера опухоли в 4,4 раза по сравнению со значением данного показателя у животных контрольной группы (р<0,01). В рассматриваемом исследовании на всех этапах эксперимента использовали ликвор всегда одной и той же пациентки, прооперированной по поводу анапластической астроцитомы, без признаков рецидива, без выраженного общемозгового синдрома. Так же, как и в предыдущих экспериментах, введение ликвора в гомеопатическом разведении уже в течение первых суток изменило динамику развития опухолей - в основной группе размеры саркомы 45 были в 2 раза меньше, чем в контроле (р<0,05, рис.2). В дальнейшем у 3-х из 8-и животных была отмечена полная регрессия опухоли, а у 4-х крыс - торможение ее роста на 68% (р<0,05). Только в одном случае не было получено эффекта - у животного, отличавшегося наиболее быстрым развитием опухоли, размеры которой уже перед началом курса воздействий достигли 2 см³.

Гистологическое исследование позволило получить представление о процессах в ткани опухоли животных при эффективной гетероликворотерапии. У крыс-опухоленосителей контрольной группы микрокартина ткани саркомы 45 характеризовалась высокой плотностью расположения опухолевых клеток и многочисленностью фигур митоза, в том числе, атипичных (рис.3).

При торможении роста опухоли (рис.4А, В) плотность расположения опухолевых клеток и содержание в них фигур митоза были в 2-3 раза меньше, чем в контрольной группе, а инфильтрация иммунокомпетентными клетками - в 5 раз интенсивней (р<0,05-0,01).

В этих случаях участки неповрежденной ткани саркомы 45 чередовались с зонами дистрофически измененных и некротизированных опухолевых клеток с участками замещения соединительной тканью (рис.4А). Инфильтрирующие элементы были представлены, в основном, лимфоцитами и плазматическими клетками (рис.4В).

При регрессии саркомы 45 под влиянием гетероликворотерапии были отмечены выраженные признаки повреждения ткани опухоли (дистрофические изменения клеток, некроз) и обширные участки ее замещения соединительной тканью с обильной инфильтрацией, особенно, по периферии (рис.5А, В).

В этих случаях инфильтрирующие элементы были более многочисленными и разнообразными по составу по сравнению с картиной, наблюдавшейся при торможении роста опухоли. Они были представлены не только лимфоцитами и плазмоцитами, но и макрофагами, а также тканевыми базофилами в состоянии частичной дегрануляции (рис.5В).

Необходимо подчеркнуть, что во всех рассматриваемых экспериментах противоопухолевое действие гетероликворотерапии сопровождалось развитием антистрессорных адаптационных реакций организма тренировки, спокойной и повышенной активации (Гаркави Л.Х., Уколова М.А., Квакина Е.Б. Закономерность развития качественно отличающихся общих неспецифических адаптационных реакций организма / Диплом на открытие №158 Комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий // Открытия в СССР. М., 1975, №3, с.56-61). При этом все случаи регрессии саркомы 45 сопровождались развитием стойкой реакции повышенной активации.

Технико-экономическая эффективность «Способа лечения злокачественных новообразований в эксперименте» заключается в торможении роста и регрессии экспериментальных опухолей животных, сопровождающемся развитием стойких адаптационных реакций спокойной и повышенной активации, при внутривенном введении им гомеопатических доз ликвора, полученного у больных опухолями головного мозга после удаления опухоли в пределах неизмененных тканей без развития рецидивов на момент получения ликвора.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано в эксперименте на перевивных опухолях для получения противоопухолевого эффекта в отсутствии лучевой и лекарственной терапии. Способ включает использование гомеопатического средства, полученного путем двукратного последовательного разведения физиологическим раствором до 1:10⁴ гетерологического ликвора больных опухолями головного мозга после радикальной операции без развития рецидивов на момент получения ликвора. Это средство вводят половозрелым беспородным крысам с перевивной саркомой 45 при достижении опухолями размеров 0,7-1,3 см³ в подключичную вену в объеме 0,3-0,4 мл в зависимости от веса животного. Введение осуществляют 2 раза на протяжении 3-х недель. Способ обеспечивает противоопухолевый эффект, являясь экспериментальным основанием для изучения использования ликвора другой видовой принадлежности в онкологии. 5 ил.

Способ лечения злокачественных новообразований в эксперименте, включающий системное воздействие на организм-опухоленоситель с помощью гомеопатического средства, полученного путем двукратного последовательного разведения физиологическим раствором до 1:10⁴ гетерологического ликвора организма, прежде имевшего злокачественную опухоль, отличающийся тем, что для получения гомеопатического средства используют ликвор больных опухолями головного мозга после радикальной операции без развития рецидивов на момент получения ликвора, и это средство вводят половозрелым беспородным крысам с перевивной саркомой 45, при достижении опухолями размеров 0,7-1,3 см³ в подключичную вену в объеме 0,3-0,4 мл в зависимости от веса животного 2 раза на протяжении 3-х недель.