СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ САРКОПТОИДОЗОВ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2013 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к усовершенствованному методу диагностики саркоптоидозов животных. Способ заключается в добавлении в соскоб кожи, взятый с животных, зараженных саркоптоидозами, 0,1% раствора генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида. При этом методе ускоряется выход клещей и увеличивается их количество в исследуемом материале.

Под названием «чесоточные клещи» обычно объединяются клещи-паразиты человека, домашних и диких животных, паразитирующие внутри или на их коже и вызывающие длительное заболевание - чесотку. Чесоточные клещи относятся к типу членистоногих, к классу паукообразных и к отряду клещей.

Саркоптоидозы в большинстве случаев протекают в хронической форме, что является причиной отсутствия лечения и профилактических мероприятий. Однако данные инвазии наносят значительный экономический ущерб, который складывается из снижения продуктивности животных, ухудшения качества шкуры, затрат на проведение лечебно-профилактических мероприятий (Токарев А.Н., 2008).

Спектр клинических признаков при болезнях, вызываемых паразитическими клещами, широк: от зуда и локальных поражений кожи до интоксикации и угнетения центральной нервной системы.

Интенсивное развитие животноводческих хозяйств и создание крупных комплексов со всей необходимостью ставят вопрос о разработке методов ранней диагностики саркоптоидозов. Это сделает возможным своевременное выявление и изолирование больных животных, что предотвратит широкое распространение больных животных и позволит точно установить диагноз.

Многие исследователи рекомендуют после взятия соскоба с пораженных мест животных залить материал 10% раствором едкого натра на 12 часов до размягчения и частичного растворения корок. Этот процесс можно ускорить подогреванием в течение 10-20 минут. После того как корки размягчатся, их по кусочкам переносят на покровные стекла, размягчают иглами и исследуют под микроскопом (Дубинин В.Б., 1954; Эвранова В.Г., 1988; Кербабаев Э.Б., 2000; Рогозина И.Е., 2004).

При всей простоте этого метода исследования, который может быть применен в любой лаборатории, он не всегда дает надежный ответ о наличии или отсутствии паразитов в собранном материале. Поэтому рядом авторов были предложены некоторые его усовершенствования, имеющие целью добиться в процессе обработки соскоба наибольшей концентрации паразитов.

Приселкова A.M. (1949), Храпай Н.Н. (2000) рекомендуют для исследования саркоптоидозов в соскоб добавить несколько капель керосина. Под действием керосина корки и чешуйки размягчаются и просветляются, а клещи хорошо заметны при просмотре препаратов.

Гизатуллина Ф.Г. (1998), Токарев А.Н. (2010) для подтверждения диагноза на хориоптоз и демодекоз содержимое, полученное в результате взятия соскоба, рекомендует фиксировать в 50% глицерине и исследовать под микроскопом.

Скосырских Л.Н. (1993) предлагает для постановки диагноза на демодекоз крупного рогатого скота добавлять в соскоб несколько капель подсолнечного масла или воды.

Шустрова М.В. (1990) предлагает заливать соскоб кожи для обнаружения отодектоза плотоядных гуммиарабиковой смесью Фора-Берлезе.

Другая серия усовершенствования метода исследования соскоба предусматривает возможность осаждения паразитов на дне сосуда или, наоборот, концентрации их на поверхностной пленке растворов в центрифужной пробирке.

Так, Вайда (1938) рекомендует залить соскоб в пробирках водой, прогреть их в водяной бане при температуре 50-60°С в течение 15-20 минут, после чего добавить три части глицерина и отстаивать полученную смесь в течение часа или центрифугировать в течение 15 минут. Основная масса клещей при этом всплывает на поверхность жидкости, откуда паразиты собираются петлей и исследуются.

Шик Г.З. (1947) предложил метод осаждения чесоточных клещей на дно центрифужной пробирки. Собранный соскоб размельчается скальпелем и помещается в центрифужную пробирку, заливается 10% раствором едкого натра и подогревается несколько раз в течение 15-20 минут на пламени спиртовки. После каждого подогревания содержимое пробирки перемешивается. После достаточного растворения корок пробирки центрифугируются в течение 10-15 минут, жидкость сливают, а осадок исследуют под микроскопом.

Для обнаружения живых клещей соскоб помещают в чашку Петри, немного подогревают до 25-30°С и просматривают на черном фоне (Дубинин В.Б., 1954; Эвранова В.Г., 1988).

Таким образом, авторы предлагают различные методики для обнаружения чесоточных клещей. Почти все методики связаны с ожиданием выхода клещей, что связано с затратой рабочего времени. Следовательно, изыскание новых средств диагностики саркоптоидозов является актуальной проблемой.

Задача изобретения - разработка способа диагностики саркоптоидозов животных для определения паразитологической ситуации и своевременного проведения необходимых лечебно-профилактических мероприятий.

Технический результат - усовершенствованный метод диагностики чесоточных клещей.

Технический результат достигается заявляемым способом, сущность которого заключается в применении нескольких капель 0,1% генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида на соскоб кожи от различных видов животных.

Материалы и методы. Брали соскобы кожи от крыс, экспериментально зараженных Notoedres notoedres, от кроликов, зараженных Psoroptes cuniculi, от крупного рогатого скота, зараженных P. bovis, от кошек спонтанно инвазированных Otodectes cynotis. От каждого вида животных брали по шесть соскобов и помещали в чашки Петри. В две из них добавляли двойное количество 10% едкого натра, а в две другие - 0,1% генцианвиолет в концентрате диметилсульфоксида. Содержимое перемешивали и исследовали под малым увеличением микроскопа. Определяли время выхода клещей из соскоба. Для контроля за эффективностью диагностики использовали витальный метод (термостат).

Результаты исследования времени выхода клещей из соскобов кожи представлены в таблице.

№ п/п Препарат Время появления клещей (мин) Количество обнаруженных клещей Соскоб кожи крыс, зараженных Notoedres notoedres 1 10% едкого натра 11±2,8 2±1,4 2 патентуемый метод 0,45±0,18 7,5±2,1 3 термостат 20,5±0,7 3,5±2,1 Соскоб кожи кроликов, зараженных Psoroptes cuniculi 4 10% едкого натра 21±1,4 5±1,4 5 патентуемый метод 0,87±0,17 7,5±0,7 6 термостат 16,5±4,9 4,5±0,7 Соскоб кожи кр. рог. скота, зараженных Psoroptes bovis 7 10% едкого натра 18±1,1 4±0,21 8 патентуемый метод 0,92±0,1 7±0,9 9 термостат 18,3±2,1 4±1,1 Соскоб кожи кошек, зараженных Otodectes cynotis 10 10% едкого натра 7±1,2 2±2,1 11 патентуемый метод 0,12±0,1 4,5±1,3 12 термостат 12,4±2,1 1±1,2 Соскоб кожи свиней, зараженных Sarcoptes suis 13 10% едкого натра 11,2±2,3 6±3,1 14 патентуемый метод 0,91±0,5 7±1,5 15 термостат 23,4±1,1 4,5±0,9

Из таблицы видно, что клещи N. notoedres из соскобов кожи в присутствии 10% едкого натра выходили в количестве 2±1,4 экземпляров из пробы на 11±2,8 минуту. При добавлении 0,1% генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида время выхода клещей составило 0,45±0,18 минут и было обнаружено 7,5±2,1 экземпляров клещей.

Клещи Psoroptes cuniculi в присутствии 10% едкого натра выходили на 21±1,4 минуту, количество обнаруженных клещей при этом было 5±1,4 экземпляров. При исследовании соскоба витальным методом обнаружили клещей через 16,5±4,9 минут. Патентуемый метод позволил обнаружить в соскобах 7,5±0,7 клещей, а время выхода составило при этом 0,87±0,17 минут.

Аналогичные результаты получили при исследовании соскоба кожи от крупного рогатого скота, зараженного Psoroptes bovis. Клещи выходили из корочек патентуемым методом на 0,92±0,1 минуту, а при других методах значительно позднее.

При исследовании соскоба кожи от кошек, зараженных Otodectes cynotis, установлено, что клещи появлялись 0,12±0,1 минуту. В пробах, где применяли другие методы, клещи выходили намного позднее.

Литература

1. Дубинин, В.Б. Чесоточные клещи / В.Б.Дубинин // изд-во «Советская наука». - М., 1954. - 172 с.

2. Кербабаев Э.Б. Арахноэнтомозы сельскохозяйственных животных / Э.Б.Кербабаев, Ф.И.Василевич, Т.С.Катаева и др. // Учебное пособие для вузов. - М., 2000. - 136 с.

3. Приселкова Д.О. Патогенез и диагностика чесотки / Д.О.Приселкова // Ветеринария. - №12. - 1949. - С.12-15.

4. Рогозина И.Е. Лечение собак при отодектозе / И.Е.Рогозина, В.И.Роменский, А.Н.Шинкаренко и др. // Тез. докл. 55-й научной конференции ФГОУ ВПО «Костромская ГСХА», Кострома, 2004, т.2., с.156-157.

5. Токарев А.Н. Изучение активности «Инсектоакарицида - Д» / А.Н.Токарев // Мат. науч.-практич. конф. «Вклад молодых ученых в отраслевую науку с учетом современных тенденций развития АПК». - М., 2008. - С.265-266.

6. Храпай Н.Н. Клинико-морфологическая характеристика демодекоза собак. / Н.Н.Храпай // Мат. Всеросс. науч.-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины. - Омск, 2000. - С.389-392.

7. Шик Г.З. К методике лабораторного исследования материала на наличие чесоточных клещей / Г.З.Шик // Ветеринария. - №7. - 1947. - С.18-19.

8. Шустрова М.В. Некоторые вопросы эпизоотологии отодектоза плотоядных и меры борьбы с этой инвазией / М.В.Шустрова // Шестое Всесоюзное акарологическое совещание. Ашхабад. - 1990. - С.46-47.

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает взятие соскоба с пораженных участков кожи животных, при этом в исследуемый материал добавляют 0,1% раствор генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида. Затем содержимое перемешивают и исследуют под микроскопом для обнаружения клещей. Способ позволяет быстро обнаружить клещей и быстро и точно диагностировать саркоптоидоз. 1 табл., 1 пр.

Способ диагностики саркоптоидозов, включающий взятие соскоба с пораженных участков кожи животных, отличающийся тем, что в исследуемый материал добавляют 0,1%-ный раствор генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида, после чего содержимое перемешивают и исследуют под микроскопом для обнаружения клещей.