ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ СРЕДСТВА С БЕНЗОФЕНАНТРИДИНОВОЙ СТРУКТУРОЙ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ПРЕПАРАТЫ Российский патент 2013 года по МПК A61K31/473 A61K31/661 A61K31/728 C07D221/10 C07F9/10 C08B37/08 A61P35/00 

Настоящее изобретение относится к применению бензофенантридиновых алкалоидов и их солей для получения лекарственных средств для лечения опухолей.

Изобретение также относится к новым солям упомянутых алкалоидов и содержащим их композициям.

Уровень техники

Первой целью онкологии является полное уничтожение опухоли любыми средствами, даже если это вызывает серьезные побочные эффекты; девиз primum non nocere («не навреди») не используется как руководство при лечении опухолей, однако предпочтительно заменен на primum succerere («торопись помочь»).

Онкологическое лечение обычно включает радикальные операции, нацеленную радиотерапию, включая фотодинамическую терапию, большие дозы лекарств для химиотерапии, радиотерапию и лечение с помощью цитокинов (IL2) и моноклональных антител. Несмотря на большое, постоянно возрастающее количество доступных способов лечения, процент успеха с точки зрения выздоровления до сих пор неудовлетворительный, особенно в случае химиотерапии, из-за появления устойчивости к лекарствам.

При солидных опухолях химиотерапия быстро уменьшает массу опухоли, но не полностью; из-за малого количества чрезвычайно резистентных клеток опухоль может оставаться активной и потом развиваться, часто с фатальным исходом. Эти клетки недавно получили название стволовых опухолевых клеток, которые обладают значительным потенциалом к пролиферации и приспособляемости. Упомянутые клетки составляют приблизительно 5% массы опухоли и являются резистентными ко всем известным в данный момент средствам химиотерапии. Существование стволовых опухолевых клеток впервые было показано для миелоидной лейкемии (Bonnet D, Dick JE. Nature Medicine, 3, 730-737 (1997)) и впоследствии установлено для опухолей груди и мозга (Al-Hajj M, et al., Natl Acad. Sci., USA, 100. 3983-3988, 2003 Sing SK, et al., 432, 396-401, Nature 2004).

Недавно стволовые клетки были выделены из меланом, опухолей толстой кишки и легочных срезов (Ricci-Vitali, Nature 445, 111-115 (2007); Fang D., Cancer Res., 65, 9328-9337 2005, Eramo, Cell Death and Differentiation, advance online publication Nov 30. 2007 Doi: 10.1038/sj.cdd.4402283).

Эти клетки, как сказано выше, не контролируются обычным лечением и регенерируют опухоль. Следовательно, есть насущная необходимость в разработке соединений, способных подавлять стволовые клетки опухоли, возможно путем индукции процессов апоптоза.

Описание изобретения

В настоящий момент известно, что бензофенантридиновые алкалоиды, особенно сангвинарин, хелеритрин, хелидонин и их соли лютеовой, фосфатидной или гиалуроновой кислот оказывают антипролиферативный эффект на полирезистентные стволовые клетки опухоли.

В частности, соли лютеовой кислоты обеспечивают сильное цитотоксическое действие в отношении раковых клеток и такое же сильное антиангиогенное, противовоспалительное и обезболивающее действие.

Таким образом, первый объект изобретения относится к применению бензофенантридиновых алкалоидов и их солей для получения лекарственных средств для лечения опухолей.

Второй объект изобретения предусматривает новые соли бензофенантридиновых алкалоидов и фосфатидной или гиалуроновой кислот. Упомянутые соли особенно полезны для нацеленного местного или системного введения.

В дополнительном аспекте изобретение предусматривает комплексы бензофенантридиновых или изохинолиновых алкалоидов с альбумином человека в форме наночастиц и суспензий, содержащих упомянутые комплексы, которые можно вводить внутривенно или перорально. Наночастицы селективно достигают опухоли, где они оказывают цитотоксическое и антиангиогенное действие, уменьшающее массу опухоли. Этот препарат особенно полезен для лечения солидных опухолей и более обычных форм лейкемии.

Фосфатидные кислоты содержат остатки жирных кислот, которые могут быть одинаковыми или разными, с насыщенными или ненасыщенными неразветвленными цепями, содержащими 12-22 атомов углерода.

Предпочтительны дипальмитоил- и дистеароилфосфатидные кислоты, которые существенно увеличивают пероральную и местную биодоступность.

Особенно предпочтительна соль сангвинарина с фосфатидной кислотой.

Соли по изобретению способны индуцировать апоптоз стволовых опухолевых клеток в субмикромолярных концентрациях.

In vitro показано, что соль сангвинарина и лютеовой кислоты обладает сильным ингибирующим действием по отношению к меланоме и стволовым клеткам толстой кишки в концентрации 200 нг/мл. Ее поведение по отношению к другим онкологическим стволовым клеткам идентично. Эти алкалоиды могут, следовательно, рассматриваться как противоопухолевые средства нового поколения, способные эффективно лечить опухоли человека. Для опухолей толстой кишки, печени, поджелудочной железы и шейки матки наиболее подходящей формой является соль с лютеовой кислотой, диспергированная в подходящем носителе, тогда как для лечения кожных опухолей, таких как меланома, можно успешно вводить соль фосфатидной кислоты местно непосредственно на область, затронутую опухолью.

Комплексы с альбумином подходят для введения с помощью локо-регионарных инъекций в дозе намного ниже, чем токсичная доза, и в течение очень длительных периодов; селективность к стволовым клеткам опухоли в сравнении с нормальными клетками и сильный антиангиогенный эффект приводят к быстрому уменьшению и возможному уничтожению опухоли.

Более подходящей для перорального и наружного введения является соль сангвинарина и лютеовой кислоты. Показано, что упомянутая соль особенно эффективна при лечении ротоглоточной полости, опухолей головы и шеи, меланомы и опухоли шейки матки, в большей степени, чем алкалоиды, не связанные с кислотой, к тому же она воздействует на любые вирусы, связанные с опухолью.

Также полезны соли гиалуроновой кислоты, увеличивающие потребление алкалоида клеткой и позволяющие уничтожить опухоль.

Препараты получают в ходе хорошо известных процессов, таких как описанные в «Remington's Pharmaceutical Handbook», Mack Publishing Co., N.Y., USA, вместе с подходящими эксципиентами.

Примеры, приведенные ниже, иллюстрируют подробности изобретения.

Пример I - Получение соли лютеовой кислоты и сангвинарина

3,68 г хлорида сангвинарина растворяют в 100 мл этанола, при перемешивании добавляют 3,6 г лютеоата калия, смесь реагирует в течение 3 ч. Образовавшийся хлорид калия отфильтровывают, а раствор концентрируют до малого объема. Получают 5,6 г соли.

Пример II - Получение соли сангвинарина и 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфо-rac-(1-глицерина)

3,7 г хлорида сангвинарина растворяют в 50 мл метанола; в этот раствор при перемешивании добавляют 7,5 г натриевой соли 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфо-rac-(1-глицерин)-1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфо-rac-(1-глицерина) и смесь оставляют на 2 часа при перемешивании. Итоговый раствор разбавляют равным объемом метиленхлорида и смесь оставляют на 0,5 часа при перемешивании. Осажденный хлорид натрия отфильтровывают и фильтрат концентрируют до сухого состояния под вакуумом при температуре не выше 35°C. Получают 10 г твердого бурого вещества, имеющего точку плавления 70°C.

Пример III - Получение наночастиц альбумина с сангвинарином

1 г сангвинарина растворяют в 15 мл диоксана при комнатной температуре и добавляют к раствору 5 г альбумина человека в 300 мл солевого раствора. Смесь оставляют при перемешивании в стерильной обстановке на 4 ч. Итоговый непрозрачный раствор подвергают воздействию ультразвука в течение 1 минуты. Физический вид и цвет суспензии изменяется. Раствор высушивают сублимацией без добавления эксципиентов.

Пример IV

В соответствии с процедурами примера III получают раствор сангвинарина и высушивают его сублимацией в стерильных условиях в контейнере, который содержит 10 мг сангвинарина после завершения процесса.

Лиофилизат используют при локо-регионарном лечении опухоли ротоглоточной полости.

Пример V - Однограммовые жевательные таблетки для лечения опухолей головы и шеи

Лютеоат сангвинарина 10,00 мг Соевый лецитин 30,00 мг Безводная лимонная кислота 10,00 мг Лактоза 240,00 мг Маннит 550,00 мг Метилцеллюлоза 40,00 мг Пальмитоилстеарат 50,00 мг Ягодный ароматизатор 40,00 мг Аммония глицирризинат 0,5 мг Тальк 10,00 мг

Пример VI - Мягкие желатиновые капсулы для лечения опухоли шейки матки

Сангвинарина лютеоат 10,00 мг Соевый лецитин 50,00 мг Пчелиный воск 50,00 мг Аммония глицирризинат 10,00 мг Растительное масло в достаточном количестве до 800,00 мг

Пример VII - Мягкие желатиновые капсулы для лечения опухоли шейки матки

Сангвинарина лютеоат 10,00 мг Соевый лецитин 50,00 мг Пчелиный воск 50,00 мг Натрия сукцинил-глицирретат 10,00 мг Растительное масло в достаточном количестве до 800,00 мг

Пример VIII - Эмульсия масло-в-воде соли фосфатидиновой кислоты и сангвинарина для местного лечения меланомы

Соль дипальмитоилфосфатидной кислоты и сангвинарина 0,40 г Пропиленгликоль 10,00 г Изопропилмиристат 5,00 г Цетиловый спирт 5,00 г Полисорбат 80 3,00 г Карбомер 0,40 г Метилпарагидроксибензоат 0,10 г Пропилпарагидроксибензоат 0,05 г Очищенная вода в достаточном количестве до 100 г

Предложены: применение солей бензофенантридиновых алкалоидов для получения лекарственных средств для лечения опухолей, где алкалоид находится в форме соли лютеовой, гиалуроновой или фосфатидной кислоты, соль бензофенантридиновых алкалоидов с фосфатидной кислотой или гиалуроновой кислотой и фармацевтическая композиция для лечения опухолей на ее основе. Показано повышение цитотоксической активности солей сангвинарина по изобретению по меньшей мере в два раза во всех исследованных линиях опухолевых клеток по отношению к хлоридной соли. Предполагается, что оно обусловлено их повышенным поглощением клетками опухоли. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 8 пр.

1. Применение солей бензофенантридиновых алкалоидов для получения лекарственных средств для лечения опухолей, где алкалоид находится в форме соли лютеовой, гиалуроновой или фосфатидной кислоты.

2. Применение по п.1, где бензофенантридиновые алкалоиды выбраны из сангвинарина, хелеритрина, хелидонина.

3. Применение по п.2, где алкалоид является сангвинарином.

4. Применение по п.1 лютеоата сангвинарина.

5. Применение по п.1 соли сангвинарина и фосфатидной кислоты.

6. Соль бензофенантридиновых алкалоидов с фосфатидной кислотой или гиалуроновой кислотой.

7. Соль по п.6 с фосфатидной кислотой.

8. Соль по п.7, где фосфатидная кислота является дипальмитоил- или дистеароилфосфатидной кислотой.

9. Соль по п.7 или 8, где бензофенантридиновый алкалоид представляет собой сангвинарин.

10. Соль по п.7 или 8 в качестве антимеланомного средства.

11. Соль по п.9 в качестве антимеланомного средства.

12. Фармацевтическая композиция для лечения опухолей, содержащая соль по пп.6-11 в качестве активного ингредиента.