КОНТРАСТИРУЮЩИЙ АГЕНТ ДЛЯ МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОПУХОЛИ Российский патент 2013 года по МПК A61K49/10 A61K49/18 A61K9/08 

Настоящее изобретение относится к медицине, а более конкретно - к контрастирующим агентам для магнитно-резонансной диагностики (МРД) опухолей.

МРД - метод онкологической диагностики с помощью магнитно-резонансной томографии широко используется в современной медицине и основан на различии свойств опухолевой и нормальной ткани. При проведении МРД оператор, манипулируя параметрами магнитных полей, а также параметрами и последовательностями радиочастотных импульсов томографа, может получить набор двумерных изображений (томограмм), анализ которых позволяет выявить аномальную зону органа или ткани, в которой можно предположить наличие опухолевого процесса.

Однако для целого ряда онкологических заболеваний контраст магнитно-резонансного изображения опухоли на фоне окружающих нормальных тканей оказывается невысоким, что затрудняет обнаружение аномальных зон и, соответственно, диагностику опухолей. Кроме того, такой метод затруднен при поиске опухолевых узлов во всем организме пациента или значительной его части ("whole-body imaging"), например, когда локализация опухоли неизвестна или предполагается наличие множественных опухолевых узлов. В этих случаях проводят магнитно-резонансную томографию с контрастирующими агентами - веществами, которые при системном, например, внутривенном введении их пациенту селективно накапливаются в опухоли и за счет этого при магнитно-резонансной томографии оказывают влияние на яркость магнитно-резонансного изображения в соответствии с локальной концентрацией вещества в ткани или органе, то есть усиливают контраст изображения.

Большинство современных контрастирующих агентов создается на основе хелатных комплексов парамагнитных ионов - гадолиния и марганца. Известны также контрастирующие агенты на основе фталоцианинов. В частности, описан водорастворимый тетра-4(5)-сульфофталоцианин марганца, полученный конденсацией 4-сульфофталевой кислоты с солью марганца, как потенциальный контрастирующий агент для магнитно-резонансной диагностики опухолей. [S.K. Saini, A. Jena, J. Dey, А.К. Sharma, and R. Singh. M11PCS4: A new MRI contrast enhancing agent for tumor localisation in mice. Magnetic Resonance Imaging, Vol.13, N 7, pp.985-990, 1995]. Недостаток этого контрастирующего агента состоит в неоптимальном для пользователей времени проведения МРД, поскольку максимальный эффект усиления контраста магнитно-резонансной томограммы при использовании этого контрастирующего агента достигается примерно через сутки после введения. Это усложняет и удорожает процедуру диагностики для врача и пациента, поскольку требует длительного (более 1 суток) нахождения пациента в медицинском учреждении (при высоком содержании ионов гадолиния или марганца пациент должен находиться под контролем врача).

В предлагаемом изобретении ставится задача создания контрастирующих агентов для усиления контраста изображения опухолей при магнитно-резонансной диагностике, обеспечивающих удобное для пользователей время ее проведения.

Указанная задача решается тем, что в качестве контрастирующего агента при магнитно-резонансной диагностике опухолей предлагается водный раствор натриевых солей смеси сульфокислот фталоциашша марганца или гадолиния, представляющих собой смесь сульфокислот различной степени сульфирования (ди-, три- и тетра-) средняя степень замещения n≈2,5-3, содержащих сульфогруппы как в положении 3, так и в положении 4 фталоцианинового макрокольца. Натриевые соли сульфокислот фталоцианина марганца и гадолиния

где R=H или SO₃Na, M=Mn или Gd, Х=CH₃COO, n=2.5-3.

Задача решается так же и тем, что упомянутые соединения получают металлированием соответствующих безметальных сульфокислот солями металлов, а исходные безметальные сульфокислоты получают сульфированием незамещенного безметального фталоцианина хлорсульфоновой кислотой в трихлорбензоле (патент РФ №2181736, C09B 47/24, 2002 г.)

Сущность предлагаемого изобретения поясняется Фиг.1, 2. На Фиг.1 приведены томограммы крысы "Wistar" с интракраниально инокулированной глиомой С6, полученные при использовании предлагаемого контрастирующего агента на основе водного раствора натриевой соли сульфокислоты фталоцианина марганца (SO₃Na)nPcMnOAc в дозе 70 мг/кг с использованием импульсной последовательности

MDEFT (Modified Driven Equilibrium Fourier Transform) с параметрами TR/TI=6000/1500

мс (TI - время инверсии):

А: до введения контрастирующего агента.

Б: спустя 1,5 часа после введения контрастирующего агента.

В: спустя 4 часа после введения контрастирующего агента.

На Фиг.2 приведены томограммы, полученные аналогично для водного раствора натриевой соли сульфокислоты фталоцианина гадолиния (SO₃Na)₃PcGdOAc в дозе 120 мг/кг.

А: до введения контрастирующего агента.

Б: спустя 1,5 часа после введения контрастирующего агента.

В: спустя 2,5 часа после введения контрастирующего агента.

Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение субстанции натриевой соли сульфокислоты фталоцианина марганца ацетата (SO₃Na)₃PcMnOAc.

К раствору 0,2 г натриевой соли сульфокислоты безметального фталоцианина (n≈3) в 5 мл диметилсульфоксида добавляют раствор 0,065 г ацетата марганца тетрагидрата в 1 мл диметилсульфоксида. Смесь перемешивают 20 мин при 45-50°C, фильтруют. К раствору добавляют хлороформ, выпавший осадок отфильтровывают, промывают последовательно хлороформом, смесью изопропанола с хлороформом (1:1), горячим ацетоном и горячим изопропанолом, сушат, получают 0,2 г (89%) (SC₃Na)₃PcMnOAc. λ_макс, нм (lg, ε): в диметилсульфоксиде - 721 (5,02); в воде - 718 (4,70). Найдено %: С 43,44, 43,39; Н 2,73, 2,73; N 11,93, 12,15; S 10,07, 9,97. C₃₄H₁₆MnN₈Na₃O₁₁S₃ - Вычислено %: С 43,79; Н 1,73; N 12,01; S 10,31.

Пример 2. Получение субстанции натриевой соли сульфокислоты фталоцианина гадолиния (SO₃Na)PcGdOAc.

К раствору 0,33 г натриевой соли сульфокислоты безметального фталоцианина (n≈3) в 15 мл диметилсульфоксида, нагретому до 75°C добавляют раствор 0,16 г ацетата гадолиния гидрата в 1 мл диметилсульфоксида. Смесь перемешивают в течение 40 мин при 75-80°C, фильтруют. К раствору добавляют хлороформ, выпавший осадок отфильтровывают, промывают последовательно хлороформом и смесью метанола с хлороформом, сушат, получают 0,4 г (94%) (SO₃Na)PcGdOAc. λ_макс., нм (lg, ε): в диметилсульфоксиде - 683 (5,12); в воде - 682 (4,79). Найдено %: С 34,72, 34,66; Н 2,79, 2,75; N 8,24, 8,40; S 8,77, 8,59. C₃₄H₁₆GdN₈Na₃O₁₁S₃·7 H₂O. Вычислено %: С 35,17; Н 2,60; N 9,65; S 8,28.

Пример 3. МРТ-исследования крыс "Wistar" с глиомой С6 при использовании в качестве контрастирующего агента водного раствора (SO₃Na)₃PcMnOAc.

МРТ-исследования крыс "Wistar" с глиомой С6 проводили на томографе "BRUKER Biospec 70/30" (Bruker, Германия) с индукцией 7 Тл, с использованием импульсной последовательности MDEFT (Modified Driven Equilibrium Fourier Transform) с параметрами TR/TI=6000/1500 мс (TI - время инверсии). В качестве контрастирующего агента применяли водный раствор (SO₃)Na)₃PcMnOAc в концентрации 10 мг/мл. Раствор фильтровали с использованием пшрицевой фильтрующей системы Millipore SW1NNEX-25 (Millipore, США), оснащенной мембранами Pall с размером пор 0,22 мкм, и вводили в хвостовую вену в дозе 70 мг/кг

Для исследований использовали группу из 3 крыс "Wistar" с глиомой С6, инокулированной интракраниально за 7 дней до начала исследования. Для обездвиживания животных применяли газовую анестезию с использованием препарата «Форан». Томограммы регистрировали до введения предлагаемого контрастирующего агента и через 1-1,5, 3-4 и 24 часа после его введения. По яркости изображения опухоли и прилегающей нормальной ткани оценивали значения контраста магнитно-резонансного изображения в различные моменты времени

Из приведенных на Фиг.1 томограмм видно, что использование предлагаемого контрастирующего агента приводит к значительному повышению яркости изображения опухоли, вследствие чего заметно повышается контраст изображения. До введения контрастирующего агента зона глиомы на томограмме выглядит менее яркой, чем прилегающая ткань мозга, а после его введения глиома имеет высокую яркость на фоне темной прилегающей нормальной ткани, причем четко выявляются внутренние компартменты опухоли, граница, зоны роста, что обеспечивает возможность качественной диагностики опухолевого процесса. Наиболее высокий контраст достигается ориентировочно через 1,5 часа после введения контрастирующего агента.

Пример 4. МРТ-исследования крыс "Wistar" с глиомой С6 при использовании в качестве контрастирующего агента водного раствора (SO₃Na)₃PcGdOAc.

Исследования с крысами на томографе проводили как в примере 3. Томограммы регистрировали до введения предлагаемого контрастирующего агента и через 1-1,5, 2-2,5 и 24 часа после введения его в хвостовую вену в дозе 120 мг/кг.

На Фиг.2 приведены томограммы одной из крыс, из которых видно, что использование предлагаемого контрастирующего агента приводит к значительному повышению яркости изображения опухоли, вследствие чего заметно повышается контраст изображения. Наиболее высокий контраст достигается ориентировочно через 1,5 часа после введения контрастирующего агента.

Таким образом, предлагаемый контрастирующий агент обеспечивает усиление контраста изображения при удобном для пользователя времени проведения МРД.

Изобретение относится к контрастирующему агенту для магнитно-резонансной диагностики опухолей в виде водного раствора. Агент представляет собой натриевые соли металлического комплекса сульфозамещенного фталоцианина в виде смеси сульфокислот марганцевого или гадолиниевого комплексов различной степени сульфирования (ди, три и тетра) со средней степенью замещения n=2.5-3, содержащих сульфогруппы как в положении 3, так и в положении 4 фталоцианинового макрокольца и имеющих следующую формулу:

В указанной формуле R=H или SO₃Na, М=Мn или Gd, Х=СН₃СОО. Изобретение обеспечивает усиление контраста изображения опухолей при магнитно-резонансной диагностике. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 пр.

1. Контрастирующий агент для магнитно-резонансной диагностики опухолей в виде водного раствора натриевой соли металлического комплекса сульфозамещенного фталоцианина, отличающийся тем, что он представляет собой смесь сульфокислот марганцевого или гадолиниевого комплексов различной степени сульфирования (ди, три и тетра) со средней степенью замещения n=2,5-3, содержащих сульфогруппы как в положении 3, так и в положении 4 фталоцианинового макрокольца

где R=H или SO₃Na, М=Mn или Gd, X=CH₃COO, n=2,5-3.

2. Контрастирующий агент по п.1, отличающийся тем, что входящие в его состав натриевые соли металлических комплексов сульфозамещенного фталоцианина получены металлированием солями металлов соответствующего сульфозамещенного безметального фталоцианина, продукта сульфирования незамещенного безметального фталоцианина хлорсульфоновой кислотой в трихлорбензоле.