ПРИМЕНЕНИЕ КАННАБИНОИДОВ В КОМБИНАЦИИ С АНТИПСИХОТИЧЕСКИМ ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВОМ Российский патент 2014 года по МПК A61K31/03 A61K36/185 A61K45/06 A61P3/04 A61P25/18 A61P25/08 

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Выражения «психоз» и «психотические расстройства» применяют для описания пациентов, которые теряют контакт с реальностью.

Психоз и психотические расстройства могут давать, в результате, ряд симптомов, в том числе: галлюцинации, когда пациент ощущает вещи, которых нет; бредовые идеи, когда пациент верит тому, что не основано на реальности; проблемы с ясным мышлением и отсутствие осознания, что с ними что-то не в порядке.

Следующий список иллюстрирует ряд болезненных состояний, многие из которых классифицируются в работе "Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fourth Edition, text revision" (DSM-IV-TR), опубликованной American Psychiatric Association 2000: шизофрения; шизофреноподобное расстройство (острый шизофренический эпизод); шизоаффективное расстройство; биполярное расстройство I типа (мания, маниакальное расстройство, маниакально-депрессивный психоз); биполярное расстройство II типа; глубокое депрессивное расстройство с психотическими признаками (психотическая депрессия); бредовые расстройства (паранойя); коллективное психотическое расстройство (коллективное паранойное расстройство); краткое психотическое расстройство (иной и неопределенный реактивный психоз); психотическое расстройство, не определенное по-другому (неопределенный психоз); параноидное расстройство личности; шизоидное расстройство личности и расстройство личности при шизофрении.

Шизофрения представляет собой сложное заболевание, когда пострадавший испытывает затруднения в понимании различия между реальными и нереальными событиями. Пациент, страдающий от шизофрении, также испытывает затруднения в логическом мышлении и реагировании с нормальными эмоциями в социальных и других ситуациях.

Шизофрения может иметь различные типы: кататонический тип, когда пациент страдает от расстройства движения, испытывает ступор, негативность, ригидность, ажитацию, неспособность справлять свои собственные потребности и пониженную чувствительность к болевым раздражителям; параноидный тип, когда пациент страдает от бредовых мыслей о преследовании или грандиозности природы, испытывает чувство тревоги, страх, буйство и желание спорить; и спонтанный тип, когда пациент непоследователен и демонстрирует регрессивное поведение, бредовые идеи, галлюцинации, неуместный смех, периодическую манерность и социальную самоизоляцию.

Пациенты могут также страдать от симптомов одного или большего количества подтипов или могут испытывать ослабление известных симптомов, но некоторые отличительные признаки, например, галлюцинации, могут оставаться.

Шизофреноподобное расстройство (острый шизофренический эпизод) характеризуется наличием некоторых симптомов шизофрении, включающих: бредовые идеи, галлюцинации, неорганизованную речь, неорганизованное или кататоническое поведение и негативные симптомы. Расстройство - в том числе его продромальная, активная и остаточная фазы - длится более 1 месяца, но менее 6 месяцев.

Симптомы шизоаффективного расстройства могут сильно варьироваться от пациента к пациенту. Многие пациенты страдают от проблем с настроением, ежедневной деятельностью или навязчивыми мыслями. Другие симптомы могут включать приподнятое, напыщенное или подавленное настроение; раздражительность и плохо контролируемое самообладание; изменения аппетита, энергии и сна; галлюцинации (в частности, слуховые галлюцинации); иллюзию общения; паранойю; ухудшение в отношении гигиены и неорганизованную или нелогичную речь.

Шизоаффективное расстройство характеризуется циклами нескольких симптомов с последующим улучшением.

Биполярное расстройство I типа (мания, маниакальное расстройство, маниакально-депрессивный психоз) характеризуется колебаниями настроения, которые простираются от плохого (чувства сильной депрессии и отчаяния) до приподнятого (чувства восторга, обозначаемого как "мания") и могут быть смешанными, например, подавленное настроение может комбинироваться с беспокойством и повышенной активностью. Часто встречаются оба случая: депрессивный и маниакальный.

Биполярное расстройство II типа характеризуется гипоманиакальными приступами, а также, по меньшей мере, одним приступом глубокой депрессии. Гипоманиакальные приступы не доходят до предельных степеней мании (т.е. не вызывают социального или профессионального ухудшения и не имеют психотических отличительных признаков). Биполярное расстройство II типа значительно труднее диагностировать, так как гипоманиакальные приступы могут просто возникать как период успешной высокой производительности, и о них сообщается менее часто, чем о депрессии, причиняющей страдание. Психоз может встречаться при маниакальных и глубоких депрессивных приступах, но не при гипомании. Для обоих расстройств имеется ряд признаков, которые указывают картину и течение расстройства, включая "хронические", "скоротечные периодические", "кататонические" и "меланхолические" расстройства.

Глубокое депрессивное расстройство с психотическим признаком (психотическая депрессия) характеризуется тем, что пациент, кроме страдания от депрессивных симптомов, также страдает от галлюцинаций или бредовых идей. Эти пациенты часто становятся параноидными и полагают, что их мысли не являются их собственными, или что другие могут 'слышать' их мысли.

Бредовые расстройства (паранойя) являются формой психоза, когда пациент имеет продолжительные параноидные бредовые идеи, которые не имеют другой физической или медицинской причины. Эти бредовые идеи могут также сопровождаться слуховыми галлюцинациями.

Коллективное психотическое расстройство (коллективное паранойное расстройство) является очень редким состоянием, при котором люди, близкие больному человеку, разделяют его или ее ошибочные убеждения (бредовые идеи). В качестве примера, мужчина с шизофренией может ошибочно полагать, что его дети стараются убить его. У его жены развивается коллективное психотическое расстройство, и она также верит в это. Это расстройство обычно происходит при длительных отношениях и вовлекает двух людей. Однако оно также развивается среди членов группы, например в семьях. Оно затрагивает женщин чаще, чем мужчин.

Короткое психотическое расстройство (иной и неопределенный реактивный психоз) характеризуется тем, что пациенты испытывают острый психотический приступ, длящийся более одного дня, но менее одного месяца, и приступ может (или нет) следовать непосредственно после важного жизненного стресса или беременности (с проявлением послеродовых симптомов). Это заболевание обычно приходит неожиданно, так как отсутствует предупреждение, что человек, по-видимому, заболевает, хотя это расстройство является более общим у людей с имеющимся ранее расстройством личности.

Параноидное расстройство личности характеризуется усложнением когнитивных модулей чувствительности к отказу, обидчивостью, подозрительностью, а также склонностью к искажению происходящих событий. Нейтральные и дружелюбные действия других часто ошибочно толкуются как враждебные или пренебрежительные. Настойчиво и аргументированно утверждаются необоснованные подозрения относительно сексуальной верности партнеров и лояльности вообще, а также мнение, что права одного не признаются. Такие индивидуумы могут обладать чрезмерной самонадеянностью и склонностью к чрезмерному самовызову. Отличительными признаками также являются патологическая ревность, бессознательное агрессивное контрнаступление, потребность контролировать других и сбор обычных или обстоятельных "доказательств" в поддержку своих ревнивых убеждений.

Шизоидное расстройство личности (SPD) характеризуется потерей интереса к социальным отношениям, склонностью к уединенному образу жизни, келейности и эмоциональной холодности. SPD встречается достаточно редко по сравнению с другими расстройствами личности, его распространенность оценивают ниже 1% от общей совокупности.

Расстройство личности при шизофрении характеризуется потребностью в социальной изоляции, странным поведением и мышлением и часто нетрадиционными мнениями, например, убеждением в обладании экстрасенсорными способностями.

Психоз и психотические расстройства обычно лечат с применением класса лекарственных средств, известных как атипичные антипсихотические средства.

Атипичные антипсихотические средства также известны как антипсихотические средства второго или третьего поколения, некоторые из которых одобрены FDA для применения с целью лечения психотических расстройств, в том числе: шизофрении, биполярного расстройства, мании и других показаний.

Атипичные антипсихотические средства представляют собой гетерогенную группу несвязанных ничем других лекарственных средств, которые по существу сгруппированы благодаря тому факту, что они работают отличным от других типичных антипсихотических средств образом. Многие, но не все атипичные антипсихотические средства, работают, действуя на системы серотониновых и допаминовых рецепторов в головном мозге.

Примеры атипичных антипсихотических лекарственных средств включают, но не ограничены этим: арипипразол, рисперидон, палиперидон, зипразидон, оланзапин, кветиапин, клозапин, сулпирид, амисулприд, илоперидон, карипразин, азенапин.

Арипипразол представляет собой антипсихотическое средство третьего поколения. Арипипразол обладает активностью агониста в отношении серотониновых рецепторов и допаминовых рецепторов и действует как агонист или частичный агонист в отношении серотониновых рецепторов 5-HT1A и как агонист или частичный агонист в отношении допаминовых рецепторов D.sub.2. Арипипразол представляет собой стабилизатор системы допамин-серотонин.

Лечение антипсихотическими средствами редко применяют на детях, хотя в последнее время оба препарата, рисперидон и арипипразол, получили одобрение FDA на их применение при лечении шизофрении и мании или смешанных приступов биполярного расстройства у детей и подростков.

Лечащие врачи наиболее часто предпочитают класс атипичных антипсихотических лекарственных средств для лечения психотических расстройств, например, шизофрении, и их применение медленно вытесняет применение типичных антипсихотических средств, таких как флуфеназин, галоперидол и хлорпромазин.

Одной характеристикой атипичных антипсихотических средств является пониженная склонность этих лекарственных средств вызывать экстрапирамидальные побочные эффекты без повышения пролактина.

Побочные эффекты, о которых сообщается для данного класса лекарственных средств, известных как атипичные антипсихотические средства, варьируются от лекарства к лекарству.

Лекарственные средства оланзапин и рисперидон противопоказаны для пожилых пациентов со слабоумием из-за повышенного риска удара.

Известно также, что атипичные антипсихотические средства могут вызывать аномальные сдвиги в характере сна и, как таковые, дают чрезмерную усталость и слабость.

Другие побочные эффекты включают позднюю дискинезию (непроизвольное подергивание и лицевое гримасничанье) и дистонию (непроизвольные сокращения мышц). Кроме того, некоторые атипичные антипсихотические средства могут вызывать серьезные метаболические расстройства, аналогичные расстройствам, вызываемым типичными антипсихотическими средствами.

Такие метаболические расстройства включают гипергликемию и диабет.

Также имеется много сообщений, что антипсихотические лекарственные средства дают массу побочных эффектов, связанных с метаболизмом.

Среди метаболически-зависимых побочных эффектов, о которых сообщают пациенты, принимающие антипсихотические лекарственные средства, имеются, например, увеличение массы, резистентность к инсулину, диабет типа 1 и 2, гиперлипидемия, гиперпролактинемия и сердечно-сосудистое заболевание.

Очевидно, имеется значительная потребность в эффективном лечении, которое способно предотвращать или лечить психоз или психотические расстройства, не давая побочных эффектов. В частности, очень важным является снижение инцидентности метаболически-связанных побочных эффектов, так как эти заболевания и состояния могут так сильно подрывать здоровье, что пациент может прекратить их прием, чтобы облегчить побочные эффекты.

Имеется ряд документов, которые сфокусированы на использовании для этой цели антагонистов CB1 в комбинации с антипсихотическими средствами.

В WO2006/097605 и US 2008/0015186 описывается применение антагониста каннабиноидного рецептора (CB1) на основе пиразола, а именно, римонабанта, с антипсихотическими средствами, такими как рисперидон, для противодействия проблемам с весом, ожирением и метаболическими расстройствами, связанными с применением таких антипсихотических средств. Другими словами, оба лекарственных препарата независимо выполняют свою естественную функцию.

WO2007/136571 касается применения антагонистов CB1 и обратных агонистов в комбинации с антипсихотическими агентами.

В WO03/087037 раскрыт способ лечения мании, включающий применение модулятора рецептора CB1 в комбинации с антипсихотическим агентом.

В US2007/0105914 описано применение модуляторов рецепторов CB1 в комбинации с общеизвестными антипсихотическими лекарственными средствами.

В WO2005/063761 описаны азабициклические гетероциклы как модуляторы каннабиноидных рецепторов и предполагается, что эти соединения можно применять в комбинации с антипсихотическими агентами.

В WO2005/020992 предлагается противодействие проблеме увеличения массы, связанного со многими атипичными антипсихотическими средствами, посредством совместного введения антагониста CB1.

В общем и целом эти документы являются спекулятивными по природе, предлагая комбинации многих различных синтетических соединений при малом обосновании или при отсутствии оного. Однако никто специально не исследовал использование фитоканнабиноидов в комбинации с антипсихотическими средствами.

В WO 2006/054057 раскрыто применение фитоканнабиноида THCV для лечения симптомов заболевания, связанного с каннабиноидным рецептором CB1, на основании неожиданного открытия, что он является нейтральным CB1-антагонистом (в противоположность THC, который, будучи структурно аналогичным, является CB1-агонистом). Предлагается использовать его для лечения, например, ожирения и шизофрении, не делается предложений по его применению в комбинации с другими лекарственными средствами.

Каннабиноиды представляют собой группу химических веществ, которые, как известно, активируют каннабиноидные рецепторы в клетках. Эти химические вещества, которые обнаружены в растениях каннабис, также продуцируются эндогенно в организме человека и других животных. Эти вещества называются эндоканнабиноиды. Синтетические каннабиноиды представляют собой химические вещества со структурами, аналогичными растительным каннабиноидам или эндоканнабиноидам, и, конечно, возможно получать также синтетические версии этих растительных каннабиноидов или эндоканнабиноидов.

Каннабиноиды обладают характеристиками циклических молекул, демонстрируя особые свойства, такие как способность легко проходить гематоэнцефалический барьер, слабая токсичность и мало побочных эффектов.

Растительные каннабиноиды или фитоканнабиноиды также можно выделить, чтобы они представляли собой "по существу чистые" соединения. Эти выделенные каннабиноиды по существу не содержат других встречающихся в природе соединений, например, других несущественных каннабиноидов и таких молекул, как терпены.

По существу чистые соединения имеют степень чистоты, по меньшей мере, до 95% от общей массы. Предполагается, что некоторые по существу чистые каннабиноиды (синтетические или выделенные) являются нейрозащитными агентами либо посредством прямого антагонизма к рецепторам NMDA, либо посредством снижения притока ионов кальция в клетку другими средствами, например, связыванием с каннабиноидными рецепторами.

Однако настоящее мнение таково: обычно полагают, что каннабис и, как подразумевается, фитоканнабиноиды могут быть ответственны за развитие психологических заболеваний у потребителей (в особенности, у подростков). Это обусловлено, главным образом, состоянием, известным как конопляный психоз. Использование каннабиса связано с психозом несколькими стадиями, рассмотренными экспертами. В Шведском исследовании 1987 года заявлена связь между потреблением каннабиса и шизофренией. Позже в Dunedin Multidisciplinary Health and Development Study было опубликовано исследование, показывающее повышенный риск психоза у потребителей каннабиса с определенной генетической предрасположенностью, составляющих 25% народонаселения. В 2007 исследование, опубликованное в The Lancet, и социологическое исследование экспертов по психическому здоровью показали, что увеличивающееся число профессионалов в области медицинского здоровья убеждены, что потребление каннабиса повышает восприимчивость к психическим заболеваниям, являясь причиной 14% случаев психоза в Соединенном Королевстве.

Вероятно, что связь между потреблением каннабиса и психозом является следствием высокой концентрации психоактивного каннабиноида тетрагидроканнабинола (THC), который обнаружен в каннабисе в большинстве мест развлечений.

Несмотря на сильное предубеждение против каннабиса, заявитель полагает, что имеется существенное заслуживающее доверие доказательство в поддержку использования определенных лекарственных препаратов на основе фитканнабиноидов в комбинации с атипичными антипсихотическими лекарствами. Разумное объяснение этого приведено ниже.

Обнаружено, что некоторые растительные каннабиноиды являются эффективными агентами при лечении психоза или психотического расстройства. Например, заявитель продемонстрировал в своей совместно рассматриваемой патентной заявке WO 2005/000830 применение соединений типа каннабихромена (CBC) и производных при лечении расстройств настроения. Расстройства настроения, подлежащие лечению, берут из следующей группы: болезненная или клиническая депрессия, униполярное расстройство настроения, биполярное расстройство настроения, синдромальная депрессия, расстройство панического типа и состояние тревоги.

Кроме того, заявитель также описывает в своей совместно рассматриваемой заявке PCT/GB2007/0020216 применение соединений типа каннабигерола (CBG) (в том числе, каннабигеролпропильного аналога (CBGV)) и их производных при лечении расстройств настроения. Аналогично, расстройства настроения, подлежащие лечению, берут из следующей группы: болезненная или клиническая депрессия, униполярное расстройство настроения, биполярное расстройство настроения, синдромальная депрессия, расстройство панического типа и состояние тревоги.

Кроме доказательства в поддержку применения специфических каннабиноидов для лечения психотических расстройств имеется также заслуживающее доверия доказательство в поддержку применения специфических каннабиноидов для лечения ряда заболеваний или состояний, таких как, например, удар, диабет и другие метаболические расстройства, где противопоказано применение атипичных антипсихотических лекарственных средств.

Таким образом, наряду с тем, что можно использовать отдельные каннабиноиды в комбинации с атипичными антипсихотическими средствами, предпочтительным подходом может быть использование комбинаций каннабиноидов, которые могут (или нет) присутствовать в виде экстракта растений каннабис. В зависимости от выбранного экстракта может быть желательно селективное удаление из экстракта всех или части THC или THCA.

КРАТКОЕ СОДЕРЖАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно первому аспекту, настоящее изобретение касается применения одного или более фитоканнабиноидов с одним или большим количеством антипсихотических лекарственных средств в производстве фармацевтического препарата для применения с целью профилактики или лечения психоза или психотического расстройства, когда один или более фитоканнабиноидов вводят отдельно, последовательно или одновременно с одним или большим количеством антипсихотических лекарственных средств.

Предпочтительно, если один или более фитоканнабиноидов выбраны из группы: каннабидиол (CBD), каннабидиоловая кислота (CBDA), тетрагидроканнабидиварин (THCV), тетрагидроканнабидивариновая кислота (THCVA), каннабихромен (CBC), каннабихроменовая кислота (CBCA), каннабигерол (CBG) и каннабигероловая кислота (CBGA).

Предпочтительно присутствие множества фитоканнабиноидов в виде экстракта растений каннабис, из которого, в зависимости от состава экстракта, могут быть селективно удалены все или часть THC или THCA.

Более предпочтительно, если каннабиноидный экстракт, по меньшей мере, из одного растения каннабис представляет собой ботаническое лекарственное вещество.

Предпочтительно, если каннабиноидный экстракт, по меньшей мере, из одного растения каннабис получают экстракцией сверхкритическим или субкритическим CO₂.

По-другому, каннабиноидный экстракт, по меньшей мере, из одного растения каннабис получают посредством контакта растительного материала с нагретым газом при температуре выше 100°C, достаточной для испарения одного или более каннабиноидов в растительном материале с образованием пара, и конденсации пара с образованием экстракта.

По-другому, один или более каннабиноидов, включая фитоканнабиноиды, может присутствовать по существу в чистом или выделенном виде.

"По существу чистый" препарт каннабиноида определяют как препарат, имеющий хроматографическую чистоту (требуемого каннабиноида) выше 90%, более предпочтительно выше 95%, более предпочтительно выше 96%, более предпочтительно выше 97%, более предпочтительно выше 98%, более предпочтительно выше 99% и наиболее предпочтительно выше 99,5%, определяемую нормированием площади ВЭЖХ-профиля.

Предпочтительно, чтобы используемый в изобретении по существу чистый каннабиноид по существу не содержал никаких других природных или синтетических каннабиноидов, в том числе каннабиноидов, которые встречаются в растениях каннабис. В данном контексте выражение "по существу не содержит" можно применять в том смысле, что методом ВЭЖХ не определяются другие каннабиноиды, кроме целевого каннабиноида.

По существу чистые каннабиноиды можно получить из ботанического лекарственного вещества. Методика создана заявителем и описана в его патенте GB2393721, выданном Соединенным Королевством.

В другом аспекте настоящего изобретения каннабиноид представляет собой синтетическую форму.

Понятно, что ссылки на каннабиноиды, особенно в отношении терапевтического применения, также включают фармацевтически приемлемые соли каннабиноидов. Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к солям или сложным эфирам, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксических оснований или кислот, в том числе неорганических оснований или кислот и органических оснований или кислот, как должно быть хорошо известно специалистам в данной области. В данной области известно много подходящих неорганических и органических оснований.

Область изобретения также распространяется на производные каннабиноидов, которые сохраняют требуемую активность. Производные, которые сохраняют по существу такую же активность, как исходный материал, или, что более предпочтительно, демонстрируют улучшенную активность, можно получить согласно стандартным принципам медицинской химии, которые хорошо известны в данной области. Такие производные могут демонстрировать меньшую степень активности, чем исходный материал, до тех пор, пока они сохраняют достаточную активность, чтобы быть терапевтически эффективными. Производные могут демонстрировать улучшения других свойств, которые желательны для фармацевтически активных агентов, такие как, например, улучшенная растворимость, пониженная токсичность, улучшенное поглощение и др.

Предпочтительно готовить каннабиноид, комбинированный с антипсихотическим лекарственным средством, в виде фармацевтической композиции, дополнительно содержащей один или более фармацевтически приемлемых носителей, наполнителей или разбавителей.

Изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие каннабиноиды или их фармацевтически приемлемые соли или производные в комбинации с антипсихотическими лекарственными средствами, приготовленными в виде фармацевтически дозированных форм, вместе с подходящими фармацевтически приемлемыми носителями, такими как разбавители, наполнители, соли, буферы, стабилизаторы, солюбилизаторы и др.

Дозированная форма может содержать другие фармацевтически приемлемые наполнители для модификации условий, например, pH, осмолярности, вкуса, вязкости, стерильности, липофильности, растворимости и др. Выбор разбавителей, носителей или наполнителей зависит от требуемой дозированной формы, которая, в свою очередь, может зависеть от предполагаемого способа введения пациенту.

Подходящие дозированные формы включают, но не ограничены этим, твердые дозированные формы, например, таблетки, капсулы, порошки, диспергируемые гранулы, облатки и суппозитории, в том числе препараты с длительным высвобождением и замедленным высвобождением. Порошки и таблетки обычно содержат примерно от 5% до примерно 70% активного ингредиента. Подходящие твердые носители и наполнители широко известны в данной области и включают, например, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу и др. Таблетки, порошки, облатки и капсулы - все являются подходящими дозированными формами для перорального приема.

Жидкие дозированные формы включают растворы, суспензии и эмульсии. Жидкие формы препаратов можно вводить посредством внутривенной, внутримозговой, внутрибрюшинной, парентеральной или внутримышечной инъекции или вливания.

Стерильные препараты для инъекций могут включать стерильный раствор или суспензию активного агента в нетоксическом, фармацевтически приемлемом разбавителе или растворителе. Жидкие дозированные формы также включают растворы или спреи для интраназального, буккального или подъязычного введения. Аэрозольные препараты, подходящие для ингаляции, могут включать растворы и твердые вещества в виде порошков, которые можно объединить с фармацевтически приемлемым носителем, например, сжатым инертным газом.

Включены также дозированные формы для трансдермального введения, в том числе кремы, лосьоны, аэрозоли и/или эмульсии. Эти дозированные формы можно включать в куски матрицы для трансдермального введения или резервуары, которые широко известны в данной области.

Фармацевтические препараты можно легко получить в виде стандартной дозированной формы согласно стандартным методикам получения фармацевтических препаратов. Количество активного соединения на стандартную дозу можно варьировать в соответствии с природой активного соединения и предполагаемым режимом дозирования. Обычно это количество составляет от 0,1 до 5000 мг на стандартную дозу.

Предпочтительно, если одно или более антипсихотических лекарственных средств представляют собой атипичные антипсихотические лекарственные средства.

Более предпочтительно, если атипичное антипсихотическое лекарственное средство выбрано из следующей группы: арипипразол, рисперидон, палиперидон, зипразидон, оланзапин, кветиапин, клозапин, сулпирид, амисулприд, илоперидон, карипразин, асенапин.

Более предпочтительным атипичным антипсихотическим лекарственным средством является арипипразол, который может быть в виде своей фармацевтически приемлемой соли, подходящих сольватов (гидрата, этанолата и др.), метаболитов, безводных кристаллов и др., показанных в WO2004/060374.

Арипипразол, также называемый 7-{4-[4-(2,3-дихлорфенил)-1-пиперазинил]бутокси}-3,4-дигидро-2(1H)-хинолиноном, представляет собой карбостирильное соединение и пригоден для лечения шизофрении (EP 0367141, патент США № 5006528). Арипипразол известен также, как 7-{4-[4-(2,3-дихлорфенил)-1-пиперазинил]бутокси}-3,4-дигидрокарбостирил, Abilify, OPC-14597, OPC-31 и BMS-337039. Арипипразол обладает активностью агониста рецептора 5-HT1A и известен как соединение, пригодное для лечения некоторых типов депрессии и рефрактерных депрессий, например, эндогенной депрессии, глубокой депрессии, меланхолии и подобной (WO 02/060423, патентная заявка США 2002/0173513A1). Арипипразол обладает активностью агониста на серотониновых рецепторах и допаминовых рецепторах и действует как агонист или частичный агонист относительно серотонинового рецептора HT1A и как агонист или частичный агонист относительно допаминового рецептора D.sub.2. Арипипразол является стабилизатором системы допамин-серотонин. Метаболиты арипипразола включены в область настоящего изобретения. Один такой метаболит арипипразола называется дегидроарипипразол. Предпочтительные метаболиты арипипразола, включенные в настоящее изобретение, обозначаются следующим образом: OPC-14857, DM-1458, DM-1451, DM-1452, DM-1454 и DCPP.

Арипипразол и метаболиты арипипразола, предполагаемые для использования в настоящем изобретении, могут представлять собой любую форму, например, свободные основания, полиморфизм любого типа кристаллов, гидрат, соли (аддитивные соли кислот и др.) и подобное. Среди этих форм предпочтительной является форма безводных кристаллов арипипразола B. Что касается способа получения безводных кристаллов арипипразола B, их получают, например, нагреванием гидрата арипипразола A, подробности которого показаны в WO2004/060374.

Дозировку лекарственного средства, используемого в настоящем изобретении, устанавливают, принимая во внимание свойства каждого составляющего лекарственного вещества, предполагаемого для составления комбинации, свойства лекарственной комбинации и симптомы пациента.

Арипипразол или метаболит, такой как дегидроарипипразол, DM-1458, DM-1451, DM-1452, DM-1454 или DCPP, обычно применяют в количестве примерно от 0,1 до 100 мг/один раз в день (или примерно от 0,05 до примерно 50 мг/дважды в день) и более предпочтительно в количестве примерно от 1 до 30 мг/один раз в день (или примерно от 0,5 до примерно 15 мг/дважды в день).

Обычно массовое соотношение каннабиноидов к антипсихотическому лекарственному средству устанавливают, принимая во внимание свойства каждого составляющего лекарственного средства, предполагаемого для составлениия комбинации, свойства лекарственной комбинации и симптомы пациента. Предпочтительно, если массовое соотношение составляет величину в диапазоне: примерно 1 масс. доля каннабиноида примерно к 0,01 - 500 масс. долям антипсихотического средства; более предпочтительно 1 масс. доля каннабиноида примерно к 0,1-100 масс. долям антипсихотического средства.

Более предпочтительно, если каннабиноид представляет собой фитоканнабиноид, который может присутствовать как синтезированное соединение, выделенное соединение или экстракт, содержащий один или более других фитоканнабиноидов и других растительных составных компонентов, при варьируемых количествах. Из экстракта могут быть селективно удалены индивидуальные каннабиноиды, такие как THC, целиком или частично.

Примеры подходящих фитоканнабиноидных экстрактов проиллюстрированы ниже в таблице 1.

Компоненты растительных экстрактов THCV и CBD, используемых в следующих примерах, описаны ниже в таблице 1.

Таблица 1:
Компоненты типичных растительных экстрактов THCV и CBD   THCV-обогащенный экстракт
(% масс/ масс экстракта) CBD-обогащенный экстракт
(% масс/ масс экстракта) Основной/вспомогательный каннабиноид:   Содержание THC NMT 20% 2,0-6,5 Содержание CBD   57,0-72,0 Содержание THCV NLT 50% - Другие каннабиноиды:     Каннабигерол   0,8-6,5 Каннабихромен   3,0-6,5 Тетрагидроканнабиноевая кислота     Каннабидиварин   1,0-2,0 Каннабидиоловая кислота   <2,0 Терпены:     Монотерпены   0,4 Ди/три-терпены   0,4 Сесквитерпены   2,0

Предпочтительно, если психоз или психотическое расстройство, подлежащее лечению, выбрано из следующей группы: шизофрения, шизофреноподобное расстройство (острый шизофренический эпизод), шизоаффективное расстройство, биполярное расстройство I типа (мания, маниакальное расстройство, маниакально-депрессивный психоз), биполярное расстройство II типа, глубокое депрессивное расстройство с психотическими признаками (психотическая депрессия), бредовые расстройства (паранойя), коллективное психотическое расстройство (коллективное паранойное расстройство), кратковременное психотическое расстройство (другой и неопределенный реактивный психоз), психотическое расстройство, не определяемое по-другому (неопределенный психоз), параноидное расстройство личности, шизоидное расстройство личности и расстройство личности при шизофрении.

Согласно второму аспекту, настоящее изобретение касается применения одного или более фитоканнабиноидов с одним или большим количеством антипсихотических лекарственных средств для получения лекарственного средства для применения с целью профилактики или лечения психоза или психотического расстройства у детей и подростков, где один или более фитоканнабиноидов вводят отдельно, последовательно или одновременно с одним или большим количеством антипсихотических лекарственных средств.

Согласно третьему аспекту, настоящее изобретение касается способа лечения или профилактики психоза или психотического расстройства, который включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества комбинации одного или более фитоканнабиноидов с одним или большим количеством антипсихотических лекарственных средств.

Субъект может быть взрослым, ребенком или подростком.

Согласно четвертому аспекту, настоящее изобретение касается фармацевтического препарата для применения при профилактике или лечении психоза или психотического расстройства, который содержит один или более фитоканнабиноидов и один или более антипсихотических лекарственных средств для введения отдельно, последовательно или одновременно.

Некоторые аспекты данного изобретения дополнительно описаны со ссылкой на следующие далее примеры и данные, в которых:

на фиг.1 проиллюстрирован режим дозирования в эксперименте по условно-рефлекторному избеганию с использованием каннабиноида CBD с атипичным антипсихотическим средством арипипразолом APZ;

на фиг.2 проиллюстрирован режим дозирования в эксперименте по условно-рефлекторному избеганию с использованием каннабиноида THCV с атипичным антипсихотическим средством арипипразолом;

на фиг.3 проиллюстрированы эффекты THCV, APZ и комбинации THCV и APZ при индивидуально субэффективных дозах;

на фиг.4 проиллюстрированы эффекты THCV, APZ и комбинации THCV и APZ при индивидуально эффективных дозах;

на фиг.5 проиллюстрирован режим дозирования, применяемый при исследовании каталепсии и птоза верхнего века с использованием CBD и THCV, соответственно;

на фиг.6a проиллюстрировано действие арипипразола самого по себе;

на фиг.6b проиллюстрирован эффект комбинации с CBD;

на фиг.6c проиллюстрирован эффект комбинации с THCV;

на фиг.7 проиллюстрирован эффект комбинации арипипразола и CBD на арипипразол-индуцированный птоз верхнего века; и

на фиг.8 проиллюстрирован эффект комбинации арипипразола и THCV на арипипразол-индуцированный птоз верхнего века.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Кроме данных, представленных в WO 2005/000830 и PCT/GB2007/0020216, которые указывают, что некоторые каннабиноиды сами по себе действуют как антипсихотические средства, здесь представлено дополнительное доказательство в поддержку утверждения, что применение одного или более каннабиноидов в комбинации с атипичным антипсихотическим лекарственным средством, вероятно, является более полезным, чем само атипичное антипсихотическое средство.

В примерах 1 и 2 описано применение комбинации каннабиноидов тетрагидроканнабиварина (THCV) и каннабидиола (CBD) на модели мышей с ожирением, индуцированным диетой, с целью демонстрации метаболических эффектов каннабиноидов при вовлечении потенциальных преимуществ в противодействии некоторым обычным побочным эффектам, являющимся результатом применения атипичных антипсихотических средств.

В примере 3 описано, в какой степени каннабиноид CBD является агонистом PPARγ, и приведено дополнительное доказательство потенциальных преимуществ в противодействии некоторым обычным побочным эффектам, являющимся результатом применения атипичных антипсихотических средств, посредством демонстрации того факта, что PPARγ-лиганды оказывают благотворные эффекты на диабет типа 2 и сердечно-сосудистую систему.

Примеры 4-5 представляют результаты, полученные из in vivo фармакологических исследований:

в примере 4 проводят исследование реакции условно-рефлекторного избегания, которая представляет животную модель эффективности, и проверяют комбинации арипипразола с THCV;

в примере 5 проводят исследование каталептогеничности, которая представляет животную модель экстрапирамидальных побочных эффектов, и проверяют комбинации арипипраза с CBD (5a) и THCV (5b).

Пример 1

Предпринимают строгое исследование с введением одной дозы, где мышам с ожирением, индуцированным диетой, вводят дозу:

- чистый THCV (0,3 мг/кг)+CBD BDS (CBD при 0,3 мг/кг); или

- чистый THCV (3,0 мг/кг)+CBD BDS (CBD при 3,0 мг/кг).

Мыши с ожирением, индуцированным диетой, представляют стандартную модель, используемую для оценки агентов, вероятно, воздействующих на метаболические симптомы, включающие ожирение, диабет типа 1 или 2 и дислипидемию.

Исследовали CB₁-антагонисты в качестве потенциальных агентов против ожирения, и римонабант был лицензирован. Римонабант демонстрирует эффекты против ожирения на людях и моделях грызунов. Хотя на моделях грызунов он снижает потребление пищи в течение первых нескольких дней, долгосрочный эффект против ожирения, по-видимому, больше относится к увеличению расхода энергии, возможно, опосредованному повышенным высвобождением адипонектина из жировой ткани.

THCV и CBD представляют собой природные продукты с существенной активностью в отношении рецептора CB₁. Описанный здесь пример предназначен для исследования эффектов против ожирения и побочных метаболических эффектов посредством определения потребления пищи и изменения массы тела после одной дозы комбинации каннабиноидов.

Животным вводят дозу непосредственно перед выключением света и определяют потребление пищи за 2, 4 и 24 час.

Результаты:

Отсутствует различие эффекта на массу тела после разовой дозы у исследуемых животных, которым вводили комбинацию THCV и CBD, по сравнению с контрольными животными после разовой дозы (данные не показаны).

Однако имеется снижение количества пищи, потребляемой за 24 час., у животных, обработанных комбинацией THCV и CBD, как показано ниже в таблице 2.

Таблица 2:
Потребление пищи   Потребление пищи (г/животное)   2 час. 4 час. 24 час. Контроль 0,5 1,0 4,3 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 0,5 0,8 3,8 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 0,25 0,7 3,3

Как можно видеть из представленных выше результатов, разовая доза комбинации THCV и CBD дает снижение потребления за 4 час. после введения. Это уменьшение еще наблюдается в течение 24 час. после введения дозы. Это снижение потребления пищи более заметно в группе, принимающей более высокую дозу.

Пример 2:

Проводят 28-дневное исследование с постоянным введением дозы, где мышам с ожирением, вызванным диетой, ежедневно в 9:00 вводят перорально через зонд:

- чистый THCV (0,3 мг/кг)+CBD BDS (CBD при 0,3 мг/кг) или

- чистый THCV (3,0 мг/кг)+CBD BDS (CBD при 3,0 мг/кг).

Животным дают акклиматизироваться в течение дней исследования 1-2 и начинают введение дозы в день 3.

Проводят определения с целью получения следующих данных:

- потребление пищи и воды (ежедневное);

- масса тела (дважды в неделю);

- 24-часовое потребление энергии (дни 3 и 10);

- тест на толерантность к пероральной глюкозе (OGTT, количество глюкозы 3 г/кг) у мышей, голодавших в течение 5 час. (дни 7 и 21);

- тепловая реакция на смешанную пищу (день 17);

- состав тела (% жира в теле) по методу Dexascan у мышей под анестезией (день 28);

- определение длины от носа до ануса (день 28)

- отбор образца крови у накормленных мышей для определения глюкозы, лактата, инсулина, триглицеридов, холестерина, HDL-холестерина (день 28);

- отбор образца крови у голодных мышей для определения глюкозы, свободных жирных кислот, инсулина и адипонектина (день 30) и

- уровни лекарств и эндоканнабиноидов через 2-3 часа после введения дозы (день 30).

Полезно знать, являются ли эффекты против ожирения потерей жировой массы (желательно) или пропорциональной потерей жировой ткани и ткани, содержащей мало жира (нежелательно). Эти данные получают посредством определений по методу Dexascan и определения концентрации лептина в плазме, которая, как известно, коррелирует с массой жировой ткани.

Потребление энергии определяют методом непрямой калориметрии по двум причинам, чтобы видеть, имеется ли развитие толерантности или индуктивности. Кроме 24-часового уровня степени метаболизма определяют тепловую реакцию на смешанную пищу. Исследования на римонабанте показали позитивную регуляцию мРНК адипонектина в жировой ткани. Теперь этот цитокин рассматривают как важный компонент контрольной системы энергетического баланса. Кроме того, адипонектин-нокаутные мыши являются тучными и инсулин-резистентными, и введение рекомбинантного адипонектина мышам с ожирением, индуцированным генетически и диетой, снижает жировую массу и улучшает действие инсулина. Таким образом, адипонектин может быть медиатором процессов расходования энергии.

Потеря жира организма и повышение расхода энергии улучшают чувствительность к инсулину. Ее определяют по концентрациям глюкозы и инсулина у голодавших в течение 5 час. мышей и посредством определения толерантности к глюкозе.

Также определяют потенциальные эффекты на липиды плазмы.

Результаты:

Таблица 3:
Потребление энергии за 24 часа   Потребление энергии (кДж/час./
животное), площадь под кривой Контроль 210 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 290 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 310 Таблица 4:
Потребление энергии на кг за 24 часа   Потребление энергии (кДж/час./кг),
площадь под кривой Контроль 4250 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 5750 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 6500

Обе комбинации THCV+CBD, с низкой и высокой дозой, увеличивают потребление энергии животными за 24 часа после введения дозы.

Таблица 5:
Потребление энергии за 3 часа   Потребление энергии (кДж/час./животное),
площадь под кривой Контроль 14,0 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 21,5 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 25,0 Таблица 6:
Потребление энергии на кг за 3 часа   Потребление энергии
(кДж/час./кг),
площадь под кривой Контроль 400

THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 510 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 500

Обе комбинации THCV+CBD, с низкой и высокой дозой, существенно увеличивают потребление энергии животными за 3 час. после введения дозы.

Таблица 7:
Увеличение массы тела   Увеличение массы тела (г) Контроль 8,5 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 9,5 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 9,0

Ни одна из комбинаций THCV+CBD, с низкой или высокой дозой, не снижает величину прироста массы тела по сравнению с контрольной группой.

Таблица 8:
Потребление пищи в пересчете на животное   Потребление пищи
(г/животное) Контроль 3,9 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 3,5 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 3,6

Кумулятивное потребление пищи обычно увеличивается за 28-дневный период введения доз во всех группах. Комбинация THCV+CBD при меньшей дозе дает наименьшее потребление.

Таблица 9:
Тест на толерантность к глюкозе   Толерантность к глюкозе
([глюкоза в крови]/животное)   День 7 День 23 Контроль 12 8 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 13 11 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 18 16

Таблица 10:
Тест на толерантность к глюкозе (площадь под кривой)   Толерантность к глюкозе
(OGTT AUC 0-120)   День 7 День 23 Контроль 2250 1950 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 2400 2200 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 2600 2500

Ни одна из комбинаций THCV + CBD не повышает толерантность к глюкозе исследуемых животных.

Таблица 11:
Инсулин в плазме за 30 мин до введения дозы   Инсулин плазмы
([инсулин в крови] пмоль/л)   День 7 День 23 Контроль 9000 13000 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 7500 11000 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 12500 8500

Уровни инсулина в плазме улучшаются при введении комбинации THCV+CBD с более высокой дозой.

Таблица 12:
Уровни глюкозы у сытых животных   Уровни глюкозы
([глюкоза в крови]
ммоль/л)/л Контроль 6,0 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 10,0 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 9,5

Таблица 13:
Уровни глюкозы у голодных животных   Уровни глюкозы
([глюкоза в крови]
ммоль /л) Контроль 6,0 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 6,8 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 7,0

Концентрации глюкозы в крови у сытых и голодных животных повышаются в обеих исследовательских группах по сравнению с контролем.

Таблица 14:
Общее содержание жира в теле   Жир в теле   (г) (%) Контроль 33 62,0 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 33 61,5 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 31 60,0

Количество жира в теле у животных, обработанных комбинацией THCV+CBD, имеет тенденцию частично снижаться при более высокой дозе. Следует отметить, что эффект может маскироваться при увеличенном потреблении пищи.

Таблица 15:
Длина от носа до ануса   Длина (мм) Контроль 92,3 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 92,5 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 91,7

Таблица 16:
Уровни триглицеридов   Уровни триглицеридов
([триглицериды в крови]
ммоль/л) Контроль 0,42 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 0,55 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 0,62

Уровень триглицеридов слегка повышается при обеих дозах THCV+CBD, низкой и высокой.

Таблица 17:
Уровни общего холестерина   Уровни холестерина
([холестерин в крови]
ммоль/л) Контроль 5,5 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 7,2 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 4,1

Как можно видеть выше, общая концентрация холестерина в крови сильно снижается при высокой дозе в комбинации THCV+CBD.

Таблица 18:
Уровни HDL холестерина   Уровни HDL холестерина
([холестерин HDL в крови], ммоль/л Контроль 2,00 THCV+CBD (оба 0,3 мг/кг) 3,25 THCV+CBD (оба 3,0 мг/кг) 3,00

В приведенной выше таблице продемонстрировано, как значительно повышается концентрация HDL холестерина в крови при обеих дозах, низкой и высокой, в комбинации THCV+CBD.

Выводы:

- чистый THCV+CBD BDS понижает процентное содержание жира в теле;

- чистый THCV+CBD BDS значительно уменьшает потребление энергии (низкая и высокая доза);

- чистый THCV+CBD BDS продуцирует значительное понижение уровней общего холестерина (высокая доза);

- чистый THCV+CBD BDS продуцирует значительное повышение уровней HDL холестерина (низкая и высокая дозы).

Пример 3:

В описанном ниже примере исследуют, действуют ли каннабиноиды, каннабидиол (CBD) и тетрагидроканнабиварин (THCV) через активированный пролифератором пероксисом гамма-рецептор (PPARγ), который, как известно, активируется A⁹-тетрагидроканнабинолом.

Агонисты PPARγ-изоформы улучшают чувствительность к инсулину и часто применяются при терапии диабета типа 2.

Кроме того, показано, что агонисты PPARγ имеют позитивные сердечно-сосудистые эффекты, которые включают in vitro доказательство повышенной доступности оксида азота (NO) и in vivo понижение кровяного давления и ослабление атеросклероза.

Некоторые из целебных эффектов PPARγ-лигандов являются результатом противовоспалительного действия активации PPARγ, в том числе ингибирования провоспалительных цитокинов, повышения уровня противовоспалительных цитокинов и ингибирования экспрессии индуцируемой синтазой оксида азота (iNOS). Следовательно, полагают, что использование PPARγ-лигандов может быть полезной альтернативой при фармацевтической терапии метаболического синдрома или заболеваний и состояний, связанных с повышенным риском метаболического синдрома, и, следовательно, может противодействовать побочным эффектам, связанным с использованием атипичных антипсихотических лекарственных средств.

Проводят in vitro исследования сосудов на выделенной аорте крысы посредством проволочной миографии. Активацию PPARγ исследуют, применяя анализы репортерного гена, исследование конкурентного связывания PPARγ и исследование адипогенеза.

Оба THCV и CBD растворяют в этаноле до концентрации маточника 10 мМ и далее производят разбавления, используя дистиллированную воду.

Результаты

Зависимые от времени эффекты CBD и THCV в аорте

CBD (10 мкМ) вызывает значительную, зависимую от времени релаксацию крысиной аорты по сравнению с контролем во всех временных точках на протяжении 2 час. (2 часа, релаксация: носитель 19,7±2,4% по сравнению с CBD 69,7±4,0%, n=13, P<0,001). Через 2 часа, остаточная релаксация (сосудорасширяющий эффект CBD минус сосудорасширяющий эффект носителя и времени) составляет 50,1±3,3% релаксации.

CBD не оказывает воздействия на базальное напряжение во времени (2 часа, носитель -0,02±0,01 г по сравнению с CBD -0,03±0,01 г, n=7).

В предварительно сокращенной аорте THCV (10 мкМ) не оказывает воздействия на тонус до 105 мин и через 120 мин, вазорелаксация под действием THCV составляет 28,7±4,6% релаксации (n=10) по сравнению с 15,1±4,6% (P<0,01) в контрольных артериях.

В присутствии антагониста PPARγ рецептора GW9662 (1 мкМ) остаточный сосудорасширяющий эффект CBD значительно уменьшается через 1 час. инкубации. Сосудорасширяющий эффект CBD аналогичен в лишенной эндотелия и контрольной аорте. Аналогично, в присутствии ингибитора синтазы оксида азота L-NAME (300 мкМ) остаточный сосудорасширяющий эффект CBD не отличается от эффекта, наблюдаемого в контрольных условиях.

Антагонист рецептора CB₁ AM251 (1 мкМ) не оказывает значительного воздействия на зависимые от времени сосудистые реакции на CBD. Антагонист рецептора CB₂ SR144528 (1 мкМ) значительно ингибирует остаточные сосудорасширяющие эффекты CBD в интервале от 45 до 90 мин. Артерии, предварительно обработанные PTX (200 нг.мл^-1, 2 час.) или капсаицином (10 мкМ, 1 час.), не имеют воздействия на сосудистую реакцию на CBD во времени.

Если артерия сокращена посредством сильного калиевого буфера, то отсутствует отличие сосудорасширяющего эффекта CBD по сравнению с контролем. В противоположность этому, в сосудах, где тонус индуцирован посредством U46619 в буфере, не содержащем кальция, сосудорасширяющий эффект CBD значительно притуплен по сравнению с контролем.

Эффективность и максимальная сократительная реакция на повторное введение кальция в не содержащий кальция концентрированный калиевый раствор Кребса-Хензелайта значительно снижается зависимым от концентрации образом в присутствии CBD от 1 мкМ до 30 мкМ. Блокатор кальциевых каналов верапамил вызывает значительную вазорелаксацию предварительно сокращенных сосудов как CBD, хотя при более быстром начале.

Эффекты постоянной CBD-обработки крыс на сосудистые реакции в выделенных артериях

Животных обрабатывают в течение 2 недель либо носителем, либо CBD и проводят исследования артериальной функции.

В мезентериальных сосудах с низкой резистентностью максимальные сократительные реакции на метоксамин значительно ниже у CBD-обработанных животных, чем у животных, обработанных носителем (R_max 1,56±0,13 г против CBD 2,20±0,13 г, увеличение напряжения, n=7, P<0,001). CBD-обработка вызывает дополнительное снижение эффективности метоксамина (pEC₅₀ носитель 5,94±0,08 против CBD 5,79±0,10, P<0,05).

Максимальная реакция на метоксамин также значительно выше у животных, обработанных носителем (2,32±0,20 г увеличение напряжения, n=6) по сравнению с CBD-обработанными животными (1,63±0,21 г увеличение напряжения, n=7, P<0,001).

Повторная обработка посредством CBD не влияет на вазорелаксирующие реакции на ацетилхолин в мезентериальных артериях с низкой резистентностью. Однако в аорте CBD-обработка значительно снижает эффективность ацетилхолина (pEC₅₀, контроль 6,17±0,31 против CBD-обработки 5,37±0,40, n=6, P<0,01).

Исследования транскрипционной трансактивации

Для определения, стимулирует ли CBD PPARγ, проводят исследования трансактивации в гомологических клетках, кратковременно избыточно экспрессирующих PPARγ и RXRγ в комбинации с люциферазным репортерным геном (3xPPRE TK luc).

В этих исследованиях синтетический PPARγ-агонист розиглитазон (10 мкМ) значительно стимулирует транскрипционную активность PPARγ по сравнению с клетками, обработанными носителем, трансфицированными всей ДНК (относительная люциферазная активность 148±7 по сравнению с 319±7 (на нг.мл^-1 белка), P<0,01).

Аналогично, CBD также значительно стимулирует транскрипционную активность PPARγ по сравнению с необработанными клетками при 10 мкМ (относительная люциферазная активность 305+18, P<0,01) и 20 нМ (относительная люциферазная активность 470±37, P<0,01) зависимым от концентрации образом.

THCV не оказывает воздействия на транскрипционную активность PPARγ ни при каких исследованных концентрациях.

Индуцирование дифференциации адипоцитов

Клетки 3T3L1 культивируют до слияния и затем обрабатывают в течение 8 дней либо CBD, либо розиглитазоном.

Клетки фиксируют и окрашивают посредством Oil Red O для идентификации капелек жира, присутствие которых указывает дифференциацию фибробластов в адипоциты. Необработанные клетки демонстрируют некоторые признаки дифференциации, но большинство клеток сохраняют свою веретенообразную форму при небольшом окрашивании посредством Oil Red О. Розиглитазон индуцирует дифференциацию клеток 3T3 L1 в адипоциты, о чем свидетельствует большая степень окрашивания Oil Red О, указывающая на аккумуляцию капелек жира в цитоплазме.

В присутствии CBD признаки аккумуляции капелек жира видны при всех исследованных концентрациях зависимым от концентрации образом.

Выводы

Эти данные представляют строгое доказательство того, что CBD является PPARγ-агонистом, и предлагают новые способы, посредством которых можно вызвать эффекты CBD. В свете выяснившегося факта, что PPARγ-лиганды оказывают полезные воздействия при диабете типа 2, заболеваниях сердечно-сосудистой системы и потенциально при других широко разнообразных расстройствах, в том числе при раке, желудочных воспалительных нарушениях и многих кожных заболеваниях, эти данные обеспечивают доказательство того, что каннабиноиды, среди прочего, могут быть полезны для профилактики метаболических симптомов, связанных с использованием антипсихотических лекарственных средств.

Пример 4

Методология

Оценивают поведение - условно-рефлекторное избегание, используя две автоматические челночные коробки (ширина 46 x глубина 19,5 × высота 20 см, BIO MEDICA, Ltd), каждая из которых помещена в звукоизолирующую камеру. Каждое испытание включает 10-секундный предупредительный звук (звук 105 dB) в качестве условного стимула (CS) с последующим 10-сек. воздействием током на ноги (1 мА) в качестве безусловного стимула (US) и 15-75 сек. (в среднем 45 сек.) интервалом между испытаниями. US прекращают, когда животное перепрыгивает через ограждение из одного отсека в другой, или через пороговый промежуток времени 10 сек. Каждую крысу помещают в один из отсеков челночной коробки и позволяют свободно исследовать его в течение 1 мин до первого испытания. Во время тренировочной сессии регистрируют три типа реакции:

- если пересечение происходит в ответ только на CS, регистрируют CAR;

- если пересечение происходит в течение периода, когда имеется US, регистрируют реакцию избегания;

- если крысы не реагируют, регистрируют неспособность избегания (EF).

Животные

Вид/линия: крыса/Wistar.

Поставщик: Japan SLC, Inc.

Пол: самцы.

Возраст (на момент начала тренировочной сессии): 6 недель.

Если животное успешно достигает степени избегания более 75% (15 CAR/20 испытаний) для 3 последовательных тренировочных сессий, его определяют как имеющее хорошо тренированную CAR и используют для оценки эффектов соединений на следующий день.

Режим дозирования для CBD проиллюстрирован на фиг.1 и для THCV проиллюстрирован на фиг.2 (носитель 1: 5% гуммиарабик; носитель 2: EtOH: хремофор: физиологический раствор = 1:1:18).

CBD и THCV синтезируют и используют в этом примере.

Результаты

Пример 4

i) Эффект арипопразола APZ(7,5 мг/кг перорально) и THCV (60 мг/кг внутрибрюшинно) при субэффективных уровнях доз (при использовании одного препарата).

Результаты проиллюстрированы на фиг.3, которая представляет собой гистограмму, демонстрирующую следующие эффекты:

Носитель 1 и носитель 2;

- APZ и носитель 2;

- THCV и носитель 1 и

- APZ и THCV.

Неожиданно детектируют эффект комбинации.

*p<0,05, **p<0,01 (по сравнению с группой, принимающей комбинацию) по двустороннему тесту Даннета, n=9-10.

Носитель 1: 5% гуммиарабик.

Носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18

ii) Эффект арипопразола APZ (15 мг/кг перорально) и THCV (60 мг/кг внутрибрюшинно) при эффективных уровнях доз (когда APZ используется сам по себе)

Результаты проиллюстрированы на фиг.4, которая представляет собой гистограмму, демонстрирующую следующие эффекты:

- носитель 1 и носитель 2;

- APZ и носитель 2;

- THCV и носитель 1 и

- концентрации APZ и THCV.

Снова наблюдают эффект комбинации при этих дозах на CAR.

*p<0,05, **p<0,01 (по сравнению с группой, принимающей комбинацию) по двустороннему тесту Даннета, n=12.

#p<0,05 (по сравнению с группой: носитель 1+2) по двустороннему тесту Даннета.

Носитель 1: 5% гуммиарабик.

Носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18

Пример 5

Эффект CBD и THCV на каталепсию (5a) и птоз верхнего века (5b)

Методология

Животные

Вид/линия: крыса/Wistar.

Поставщик: Japan SLC, Inc.

Пол: самцы.

Возраст (на день исследования): 6-7 недель.

Животных подвергают исследованию по протоколу, как проиллюстрировано на фиг.5.

Носитель 1: 5% гуммиарабик.

Носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18.

Крыс подвергают голоданию с 18 час. дня, предшествующего эксперименту, до умерщвления. Крыс взвешивают и вводят перорально (PO) арипипразол. Затем крысам вводят посредством внутрибрюшинной инъекции (IP) каннабиноиды (CBD и THCV) через 1 час после введения арипипразола. Наблюдают каталепсию и птоз верхнего века через 2, 4, 6 и 8 час. после введения арипипразола. Для определения каталепсии проводят наблюдения три раза в каждый временной момент наблюдения. Животных принудительно подвешивают так, чтобы их правая передняя лапа находилась на верхнем краю стальной банки (диаметр: 6 см, высота: 10 см). Если животные остаются в неестественном вертикальном положении в течение 30 сек. или дольше, их оценивают как положительных респондеров для каталепсии.

Определение птоза верхнего века проводят следующим образом. Каждое животное берут индивидуально из своей клетки и помещают на руку экспериментатора для наблюдения глаз. Количественный показатель птоза определяют, как описано ниже, и оценки для двух глаз складывают, получая общую оценку (максимальная оценка 8):

0: норма;

1: слабый птоз (верхнее веко закрывает 1/4 глаза);

2: умеренный птоз (верхнее веко закрывает 1/2 глаза);

3: сильный птоз (верхнее веко закрывает 3/4 глаза);

4: полный птоз (верхнее веко закрывает глаз целиком).

Результаты

Пример 5a

Результаты при разных дозах показаны графически на фиг.6a/6b (APZ/CBD) и фиг.6a/6c (APZ/THCV).

При сравнении фиг.6a с фиг.6b ясно, что CBD (120 мг/кг, внутрибрюшинно) значительно снижает арипипразол-индуцированную каталепсию у крыс (всего, p=0,0286; 8 час., p=0,0339 по обобщенным оценочным уравнениям), т.е. детектируют комбинированный эффект.

n=8,

носитель 1: 5% гуммиарабик,

носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18

Аналогично, при сравнении фиг.6a с фиг.6c ясно, что THCV (60 мг/кг, внутрибрюшинно) значительно уменьшает арипипразол-индуцированную каталепсию у крыс (всего, p=0,0073; 8 час., p=0,0060 по обобщенным оценочным уравнениям), т.е. детектируют комбинированный эффект.

n=8,

носитель 1: 5% гуммиарабик,

носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18.

CBD и THCV синтезируют и используют в этом примере.

Пример 5b

Результаты опять показаны графически на фиг.7 (CBD) и 8 (THCV).

Из фиг.7 ясно, что CBD (120 мг/кг, внутрибрюшинно) значительно уменьшает арипипразол-индуцированный птоз верхнего века у крыс (лекарство (CBD), p<0,01; взаимодействие, p<0,01, 2-факторный ANOVA), т.е. детектируют комбинированный эффект.

**p<0,01 по ранговому суммарному критерию Вилкоксона с корректировкой Бонферрони, n=8,

носитель 1: 5% гуммиарабик,

носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18.

Аналогично, из фиг.8 ясно, что THCV (60 мг/кг, внутрибрюшинно) значительно уменьшает арипипразол-индуцированный птоз верхнего века у крыс (лекарство (THCV), p<0,01; взаимодействие, p<0,01, 2-факторный ANOVA), т.е. детектируют комбинированный эффект.

*p<0,05 по ранговому суммарному критерию Вилкоксона с корректировкой Бонферрони, n=8,

носитель 1: 5% гуммиарабик,

носитель 2: EtOH:хремофор:физиологический раствор=1:1:18.

CBD и THCV синтезируют и используют в этом примере.

Эти примеры вместе с сообщаемым ранее доказательством демонстрируют, что применение ряда различных фитоканнабиноидов в комбинации с антипсихотическими лекарственными средствами может быть более полезным лечением, чем применение антипсихотического лекарства самого по себе, так как они могут давать возможность уменьшения или ликвидации нежелательных побочных эффектов антипсихотических лекарственных средств и, кроме того, могут обеспечить дополнительные антипсихотические эффекты.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой комбинацию из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, выбранным из дегидроарипипразола, ОРС-14857, DM-1458, DM-1451, DM-1452, DM-1454 или DCPP, для применения в предупреждении или лечении психоза или психотического расстройства, в котором THCV или CBD вводят раздельно, последовательно или одновременно с арипипразолом. Изобретение обеспечивает уменьшение или устранение нежелательных побочных эффектов арипипразола или метаболита арипипразола, таких как тревога, каталепсия и птоз. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 5 пр., 18 табл., 8 ил.

1. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, выбранным из дегидроарипипразола, ОРС-14857, DM-1458, DM-1451, DM-1452, DM-1454 или DCPP, для применения в предупреждении или лечении психоза или психотического расстройства, в котором THCV или CBD вводят раздельно, последовательно или одновременно с арипипразолом или метаболитом арипипразола, таким образом, чтобы уменьшить или устранить нежелательные побочные эффекты арипипразола или метаболита арипипразола, при этом нежелательные побочные эффекты, которые снижаются или удаляются, выбирают из группы, состоящей из тревоги, каталепсии и птоза.

2. Комбинация из THCV с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, в котором THCV вместе с субэффективной дозой арипипразола (по сравнению с его использованием в одиночку) обеспечивает комбинированный антипсихотический эффект.

3. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где THCV или CBD присутствуют в виде экстракта конопли, из которого в зависимости от состава экстракта селективно удален весь или часть ТНС или ТНСА.

4. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где THCV или CBD присутствуют в виде ботанического лекарственного вещества.

5. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.4, в которой ботаническое лекарственное вещество включает в себя все фитоканнабиноиды, естественно встречающиеся в растениях.

6. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где THCV или CBD находятся в по существу чистой форме.

7. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где THCV или CBD находятся в изолированной форме.

8. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где THCV или CBD находятся в синтетической форме.

9. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где из комбинации THCV или CBD с арипипразолом получают фармацевтическую композицию, дополнительно содержащую один или более фармацевтически приемлемых носителей, наполнителей или разбавителей.

10. Комбинация из THCV или CBD с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для применения в лечении по п.1, где психоз или психотическое расстройство, подлежащее лечению, взято из следующей группы: шизофрения, шизофреноподобное расстройство (острый шизофренический эпизод), шизоаффективное расстройство, биполярное расстройство I типа (мания, маниакальное расстройство, маниакально-депрессивный психоз), биполярное расстройство II типа, глубокое депрессивное расстройство с психотическими признаками (психотическая депрессия), бредовые расстройства (паранойя), коллективное психотическое расстройство (коллективное паранойное расстройство), кратковременное психотическое расстройство (другой и неопределенный реактивный психоз), психотическое расстройство, не определенное по-другому (неопределенный психоз), параноидное расстройство личности, шизоидное расстройство личности и расстройство личности при шизофрении.

11. Фармацевтическая композиция для применения при профилактике или лечении психоза или психотического расстройства, которая включает в себя THCV или CBD в комбинации с арипипразолом или метаболитом арипипразола, для введения раздельно, последовательно или одновременно таким образом, чтобы уменьшить или устранить нежелательные побочные эффекты арипипразола или метаболита арипипразола и/или обеспечить дополнительные антипсихотические эффекты, где нежелательные побочные эффекты, которые снижаются или удаляются, выбирают из группы, состоящей из тревоги, каталепсии и птоза.