СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДРОТАВЕРИНА Российский патент 2014 года по МПК A61K31/15 G01N21/00 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств.

Действующая система контроля качества лекарственных средств требует от фармацевтической науки постоянного повышения эффективности имеющихся методов анализа.

Среди современных методов фармацевтического анализа важное место занимают оптические методы контроля, которые широко применяются как для целей количественного определения, так и для контроля чистоты и идентификации лекарственных средств.

Известны различные способы определения дротаверина [1(3,4-диэтоксибензилиден)-6,7-диэтокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина

гидрохлорид], применяемого в качестве спазмолитического средства.

Известен способ ацидиметрического определения дротаверина, заключающийся в приготовлении раствора дротаверина в ледяной уксусной кислоте, прибавлением раствора ртути окисной ацетата с последующим титрованием 0,1 М раствором хлорной кислоты до зеленой окраски с индикатором кристаллическим фиолетовым (ФС 42-0097022600 «Дротаверина гидрохлорид», С.12). Рекомендованный нормативной документацией титриметрический метод количественного определения дротаверина гидрохлорида высокотоксичен, малочувствителен, трудоемок.

Наиболее близким является способ определения раствора дротаверина гидрохлорида в ампулах путем приготовления растворов испытуемого вещества с последующим проведением реакции с феноловым красным с использованием в качестве растворителя буферного раствора аммиачно-ацетатного с рН 9, с последующим его спектрофотометрированием при длине волны 560 нм и расчетом результатов по калибровочному графику (Карибьянц М.А., Мажитова М.В., Рыжкова А.В., Бисенова А.Б. Определение дротаверина по реакции с феноловым красным // Естественные науки. - 2010. - №3 (32). - С.161-166.). В этой работе предложен спектрофотометрический метод определения дротаверина по калибровочному графику, поэтому анализ и градуировка в этом способе проводятся в разных опытах, что приводит к повышению погрешности анализа. В работе показана возможность количественного определения дротаверина с феноловым красным в диапазоне концентраций дротаверина от 0,498 мг/мл до 2,49 мг/мл. Данный метод ведет как к повышению затрат времени (построение калибровочного графика), так и повышенному расходу реактивов и растворителей.

Использование спектрофотометрического метода для анализа субстанции дротаверина гидрохлорида затруднено из-за отсутствия государственных стандартных образцов на данный препарат. Выпуск таких стандартных образцов является дорогостоящим, так как они находят применение только в фармацевтическом анализе. Поэтому способ определения с использованием государственных стандартных образцов будет не доступным для многих лабораторий.

В предлагаемом способе авторы используют в качестве растворителя 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, чувствительность определения в 50 раз выше, чем в прототипе, показана возможность количественного определения дротаверина в концентрации 0,017 мг/мл (0,000017 г/мл), в качестве аналитической используют длину волны 353 нм. Использование в качестве растворителя 0,1М раствора хлористоводородной кислоты и 353 нм в качестве аналитической длины позволяет уменьшить погрешность анализа, что подтверждает сравнение погрешностей определения Е=0,28% для предложенного способа и Е=4,78% для близкого аналога, следовательно, предложенный способ позволяет уменьшить погрешность анализа по сравнению с прототипом. Кроме этого, повышается воспроизводимость результатов определения, что подтверждает сравнение дисперсий двух выборочных совокупностей при помощи F - распределения при f₁=f₂=10, p=99% для предложенного способа и близкого аналога. Установлено F_экс=15,4 при F_табл.=8,47, следовательно, предложенный способ обладает более высокой воспроизводимостью.

Использование дихромата калия в качестве стандартного образца в предлагаемом способе приводит к уменьшению погрешности и стоимости анализа. Важную роль в анализе по внешним образцам сравнения играет конкретное значение коэффициента пересчета, позволяющее сделать пересчет на исследуемое вещество. Точность определения коэффициента пересчета существенно влияет на достижение технического результата. Проведенные авторами экспериментальные исследования доказали, что значение коэффициента пересчета 0,434 приводит к получению воспроизводимых и точных результатов, что обусловливает ошибку определения 0,28%. Значение коэффициента пересчета обязательно указывается в расчетной формуле.

Коэффициент пересчета находят из выражения

$$K_{пер}=\frac{E_{вос}}{E{}_{ос}}$$

где E_вос - удельный показатель поглощения образца сравнения дихромата калия при аналитической длине волны;

E_ос - удельный показатель поглощения рабочего образца сравнения определяемого (исследуемого) вещества при аналитической длине волны (определяется при разработке методики).

Предложенный авторами способ позволяет проводить анализ как в таблетках, так и в субстанции, т.е. является унифицированным.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение воспроизводимости результатов определения, уменьшение погрешности анализа, унифицирование методики анализа, снижение стоимости анализа.

Технический результат достигается путем приготовления раствора определяемого вещества и стандартного образца сравнения с последующим их спектрофотометрированием и расчетом результатов.

Новым в достижении технического результата является то, что в качестве растворителя для приготовления определяемого раствора используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, концентрация испытуемого раствора составляет 0,000017 г/мл, в качестве стандартного образца сравнения используют дихромат калия, измеряют оптическую плотность растворов при длине волны 353 нм, в формулу расчета результатов вводят значение коэффициента пересчета 0,434.

Изучаемое вещество изменяет спектр поглощения в зависимости от рН среды. Исходя из экспериментальных данных и свойств дротаверина гидрохлорида, авторы доказали, что оптимальным растворителем для их спектрофотометрического определения является 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Оптимальный растворитель обеспечивает стабилизацию испытуемого раствора, что повышает воспроизводимость результатов определения и уменьшает погрешность анализа.

Спектр поглощения дротаверина гидрохлорида в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты характеризуется одной полосой поглощения с максимумами поглощения при длинах волн 241±2 нм, 302±2 нм и 353±2 нм и тремя минимумами при 223±2 нм, 262±2 и 322±2 нм. Изучение стабильности растворов в течение суток показало, что при всех значениях рН изменение оптических свойств дротаверина не происходит. В качестве оптимального растворителя нами выбран 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, так как в этом растворителе подавляются кислотные свойства лекарственного вещества, и он находится в виде соли, построенной по типу аммония.

Исходя из установленной авторами зависимости, согласно которой в качестве образцов сравнения могут применяться вещества, для которых интервал между аналитической длиной волны и максимумом (или минимумом поглощения) этого образца сравнения не превышает половины полуширины его полосы поглощения, в качестве стандартного образца сравнения в предлагаемом способе авторы используют калия дихромат. Оптимальная область поглощения калия дихромата в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной, в которых его можно использовать в качестве образца сравнения, составляет 340,5-359,5 нм. Калия дихромат выпускается серийно промышленностью категории xч, на него имеется ГОСТ 4220-75, регламентирующий его качество.

Раствор калия дихромата в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты устойчив при хранении длительное время. Использование калия дихромата, являющегося менее дорогостоящим образцом сравнения (в 10 раз меньше стоимость) по сравнению с рабочим стандартным образцом дротаверина, приводит к уменьшению стоимости анализа. Использование дихромата калия в предлагаемом способе приводит к уменьшению погрешности анализа.

Сопоставительный анализ с прототипом показывает, что заявляемое техническое решение отличается тем, что в качестве растворителя для приготовления определяемого раствора используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, концентрация испытуемого раствора составляет 0,000017 г/мл, в качестве стандартного образца сравнения используют дихромат калия, измеряют оптическую плотность растворов при длине волны 353 нм, в формулу расчета результатов вводят значение коэффициента пересчета 0,434, что соответствует критерию изобретения «новизна».

Новая совокупность признаков обеспечивает повышение воспроизводимости результатов определения, уменьшение погрешности анализа, позволяет снизить стоимость анализа, унифицировать методики анализа, что соответствует критерию «промышленная применимость».

При анализе известных решений было выявлено, что в них отсутствуют сведения о влиянии отличительных признаков на достижение поставленного технического решения, следовательно, изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Способ осуществляют следующим образом. Готовят раствор образца сравнения калия дихромата для анализа дротаверина. Для этого точную массу калия дихромата (0,1 г) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 20 мл воды, доводят объем раствора этим же растворителем до метки и перемешивают.1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора 0,1М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают.

Затем проводят количественное определение дротаверина гидрохлорида в субстанции. Для этого точную массу препарата (0,17 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл воды, доводят объем раствора этим же растворителем до метки и перемешивают.1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора до метки 0,1М раствором хлористоводородной кислоты и перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 353 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора образца сравнения калия дихромата на спектрофотометре при длине волны 353 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм относительно 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Расчет результатов количественного определения дротаверина проводят по формуле

$$X\%=\frac{D_x\cdot a_{вос}\cdot V_1\cdot V_2\cdot V_3^{/}\cdot \mathrm{0,434}\cdot 100\cdot 100}{D_{вос}\cdot a_x\cdot V3\cdot V_1^{/}\cdot V_2^{/}(100-W)}$$ ,

где D_x и D_вос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно;

a _x и a_вoc - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно;

V₁ и V₂ - объемы приготовленного раствора определяемого вещества;

V₃ - объем аликвоты определяемого вещества;

$$V_1^{/}$$ и $$V_2^{/}$$ - объемы приготовленного раствора образца сравнения;

$$V_3^{/}$$ - объем аликвоты образца сравнения;

100 - коэффициент для пересчета в проценты;

W - влажность, %;

0,434 - коэффициент пересчета по калию дихромату в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты.

Содержание дротаверина гидрохлорида должно быть не менее 98,0% и не более 101% в пересчете на сухое веществ, согласно нормативного документа.

Предлагаемый способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. Готовят растворы определяемого вещества и образца сравнения вышеописанным способом. Измеряют на спектрофотометре оптические плотности приготовленных растворов. Далее ведут расчет результатов по формуле, используя коэффициент пересчета.

При определении дротаверина гидрохлорида по калию дихромату получили следующие результаты:

Д_x=0,4299; Д_вос=0,4378; а_x=0,1747; а_вос=0,1022; влажность=0,05%; Х=99,77%. Результаты опытов статистически обработаны:

При n=10; $$\overline{X}=\mathrm{99,97}$$ ; S²=0,1519; S=0,3898; $$S_{\overline{x}}=\mathrm{0,1233}$$ ; ΔX=0,2786; E%=0,279; S_r=0,004.

Данные примеры подтверждают, что содержание дротаверина гидрохлорида соответствует требованиям нормативного документа.

Предлагаемый способ с использованием образца сравнения калия дихромата является оптимальным и для количественного определения дротаверина гидрохлорида в таблетках.

Способ количественного определения дротаверина гидрохлорида в лекарственной форме отличается от способа количественного определения дротаверина гидрохлорида в субстанции только приготовлением испытуемого раствора.

Пример 2. Для количественного определения дротаверина гидрохлорида в таблетках по 0,04 г берут точную массу порошка растертых таблеток (0,15 г), помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, растворяют в 20 мл воды, доводят объем раствора этим же растворителем до метки и перемешивают. Раствор фильтруют, первые 10-15 мл фильтрата отбрасывают и 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора 0,1М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают.

Содержание дротаверина гидрохлорида в таблетках по 0,04 г должно быть 0,038-0,042 г, считая на среднюю массу одной таблетки.

При анализе таблеток дротаверина гидрохлорида по 0,04 г по калия дихромату получены результаты

Д_x=0,5036; Д_вос=0,3872; а_x=0,1456; а_вос=0,0956; Р_ср=0,1368; Х=0,0404 г.

Таким образом, содержание дротаверина в таблетках соответствует требованиям нормативного документа.

Пример 3. Для определения однородности дозирования таблеток дротаверина в таблетках по 0,04 г одну таблетку помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и растворяют в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, доводят этой кислотой до метки, перемешивают и фильтруют. 5 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 353 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора внешнего образца сравнения дихромата калия.

Допустимые нормы отклонения от номинала не более 15% для десяти проанализированных таблеток.

При анализе десяти таблеток дротаверина по 0,04 г получили максимальное отклонение от номинального содержания +6,35 и -8,49%.

Пример 4. Для контроля теста «растворения» таблеток дротаверина за основу брали унифицированную методику (ГФХ1 изд, с.159-160). В качестве среды растворения использовали 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, время растворения - 30 минут, объем среды растворения - 1000 мл, скорость вращения - 100 об/мин, температура (37±1)°С.

При анализе таблеток дротаверина по 0,04 г в корзинку помещают одну таблетку, через 30 минут вращения отбирают пробу. Раствор фильтруют, 20 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты и перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 353 нм в кюветах с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора образца сравнения дихромата калия.

Согласно (ГФХ1 изд, с.159-160) в среду растворения должно перейти не менее 75% действующего вещества от содержания в лекарственной форме.

При анализе таблеток дротаверина по 0,04 г высвобождение вещества составило: 91,17%, 93,14%, 92,11%, 93,09%, 93,16%, 91,35%, 91,18%, 91,73%, 92,25%, 92,23% для десяти таблеток соответственно.

Предлагаемый способ определения дротаверина гидрохлорида с использованием образца сравнения калия дихромата позволяет повысить воспроизводимость анализа, уменьшить погрешность анализа, снизить его стоимость, унифицировать методики анализа.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств. Способ касается определения дротаверина гидрохлорида путем спектрофотометрирования определяемого вещества и стандартного образца сравнения, причем в качестве растворителя для приготовления определяемого раствора используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, концентрация испытуемого раствора составляет 0,000017 г/мл, в качестве образца сравнения используют калия дихромат, в формулу расчета результатов вводят значение коэффициента пересчета 0,434 и проводят расчет по формуле. Способ позволяет повысить воспроизводимость результатов определения, уменьшить стоимость, трудоемкость, погрешность анализа, унифицировать методику анализа. 4 пр.

Способ определения дротаверина гидрохлорида путем спектрофотометрирования определяемого вещества и стандартного образца сравнения, отличающийся тем, что в качестве растворителя для приготовления определяемого раствора используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, концентрация испытуемого раствора составляет 0,000017 г/мл, в качестве образца сравнения используют калия дихромат, в формулу расчета результатов вводят значение коэффициента пересчета 0,434 и проводят расчет по следующей формуле:
,
где D_x и D_вос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно;
a _x и a _вос - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно;
V₁ и V₂ -объемы приготовленного раствора определяемого вещества;
V₃ - объем аликвоты определяемого вещества;
$$V_1^{\text{'}}$$ и $$V_2^{\text{'}}$$ - объемы приготовленного раствора образца сравнения;
$$V_3^{\text{'}}$$ - объем аликвоты образца сравнения;
100 - коэффициент для пересчета в проценты;
W - влажность, %;
0,434 - коэффициент пересчета по калию дихромату в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты.