СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭТИОНАМИДА Российский патент 2010 года по МПК G01N33/15 G01N21/33 A61K31/498 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств.

Действующая система контроля качества лекарственных средств требует от фармацевтической науки постоянного повышения эффективности имеющихся методов анализа.

Среди современных методов фармацевтического анализа важное место занимают оптические методы контроля, которые широко применяются как для целей количественного определения, так и для контроля чистоты и идентификации лекарственных средств.

Известны различные способы определения этионамида (2-этилпиридин-4-карботиоамид), применяемого в качестве противотуберкулезного средства.

Известен способ ацидиметрического определения этионамида, заключающийся в приготовлении раствора этионамида в ледяной уксусной кислоте с последующим титрованием 0,1 М раствором хлорной кислоты до зеленовато-желтой окраски с индикатором кристаллическим фиолетовым (ФС 42-0173197501 «Этионамид», С.7). Также известен способ спектрофотометрического определения таблеток этионамида (Этид 250 мг) путем приготовления растворов испытуемого вещества и рабочего стандартного образца (РСО) этионамида с использованием метанола в качестве растворителя и раствора сравнения с последующим их спектрофотометрированием при длине волны 290 нм и расчетом результатов по РСО этионамида (ФС 42-9120-02 С.12).

Наиболее близким и принятым нами за прототип является способ стандартизации детского противотуберкулезного сиропа, содержащего этионамид, путем приготовления растворов испытуемого вещества и рабочего стандартного образца (РСО) этионамида с использованием 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной в качестве растворителя и раствора сравнения с последующим их спектрофотометрированием в области 315-325 нм и расчетом результатов по РСО этионамида (И.Я.Куль, А.Ю.Саенко, И.С.Олымская. Стандартизация детского противотуберкулезного сиропа, содержащего этионамид // Сборник научных трудов «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции», Пятигорск, 2007. - В.62 - С.311-313). Данный способ разработан только для количественного определения этионамида в сиропе в присутствии пиридоксина гидрохлорида.

Рекомендованный нормативной документацией титриметрический метод количественного определения этионамида высокотоксичен, малочувствителен, трудоемок. Использование спектрофотометрического метода для анализа субстанции этионамида затруднено из-за отсутствия государственных стандартных образцов на данный препарат. Выпуск таких стандартных образцов является дорогостоящим, так как они находят применение только в фармацевтическом анализе. Поэтому способ определения с использованием государственных стандартных образцов будет не доступным для многих лабораторий.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение воспроизводимости результатов определения, уменьшение стоимости, трудоемкости и погрешности анализа.

Технический результат достигается путем приготовления раствора определяемого вещества и стандартного образца сравнения с последующим их спектрофотометрированием и расчетом результатов.

Новым в достижении технического результата является то, что в качестве аналитической длины волны используют 318 нм. Использование 318 нм в качестве аналитической волны позволяет уменьшить погрешность анализа, что подтверждает сравнение погрешностей определения А=0,34% для предложенного способа и А=2,57% для близкого аналога, следовательно, преложенный способ позволяет уменьшить погрешность анализа по сравнению с прототипом. Кроме этого повышается воспроизводимость результатов определения, что подтверждает сравнение дисперсий двух выборочных совокупностей при помощи F - распределения при f₁=f₂=10, р=99% для предложенного способа и близкого аналога. Установлено, что F_экс.=10,6 при F_табл.=8,47, следовательно, предложенный способ обладает более высокой воспроизводимостью.

Также новым в достижении технического результата является то, что в качестве стандартного образца используют диметиловый желтый и вводят в формулу расчета результатов коэффициент пересчета. За счет использования стандартного образца диметилового желтого, являющегося менее дорогостоящим (в 10 раз меньше) по сравнению с рабочим стандартным образцом этионамида, достигается снижение стоимости анализа.

Изучаемое вещество изменяет спектр поглощения в зависимости от рН среды. Исходя из экспериментальных данных и свойств этионамида, авторы доказали, что оптимальным растворителем для их спектрофотометрического определения является 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Оптимальный растворитель обеспечивает стабилизацию испытуемого раствора, что повышает воспроизводимость результатов определения и уменьшает погрешность анализа. В данном растворителе УФ-спектр поглощения этионамида характеризуется максимумом поглощения при 277 нм и плечом на участке 308-322 нм.

В качестве аналитической длины волны авторы выбрали длину 318 нм. При данной длине волны наблюдается минимальная погрешность измерения величины оптической плотности, так как данная длина волны входит в область плеча спектра поглощения этионамида и является максимумом поглощения для предложенного авторами стандартного образца сравнения диметилового желтого в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной.

Исходя из установленной авторами зависимости, согласно которой в качестве образцов сравнения могут применяться вещества, для которых интервал между аналитической длиной волны и максимумом (или минимумом поглощения) этого образца сравнения не превышает половины полуширины его полосы поглощения, в качестве стандартного образца сравнения в предлагаемом способе авторы используют диметиловый желтый. Оптимальные области поглощения диметилового желтого в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной, в которых его можно использовать в качестве образца сравнения составляют 291-334 нм, 488-550 нм. Диметиловый желтый выпускаются серийно промышленностью категории чда, на него имеется ГОСТ (ГОСТ 4679-51), регламентирующий его качество. Раствор диметилового желтого в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты устойчив при хранении длительное время. Использование диметилового желтого в предлагаемом способе приводит к уменьшению погрешности анализа.

Сопоставительный анализ с прототипом показывает, что заявляемое техническое решение отличается тем, что в качестве аналитической используют длину волны 318 нм, а в качестве образца сравнения используют диметиловый желтый и вводят в формулу расчета результатов коэффициент пересчета, что соответствует критерию изобретения «новизна».

Новая совокупность признаков обеспечивает повышение воспроизводимости результатов определения, уменьшение погрешности анализа, а также позволяет снизить стоимость анализа и исключить возможность использования токсичных реактивов, унифицировать методику анализа, что соответствует критерию «промышленная применимость».

При анализе известных решений было выявлено, что в них отсутствуют сведения о влиянии отличительных признаков на достижение поставленного технического решения, следовательно, изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Способ осуществляют следующим образом. Готовят раствор образца сравнения диметилового желтого для анализа этионамида. Для этого точную массу диметилового желтого (0,0500 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объём раствора этим же растворителем до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают. Затем проводят количественное определение этионамида в субстанции. Для этого точную массу препарата (0,0500 г) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 20 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объем раствора этим же растворителем до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты и перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 318 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора образца сравнения диметилового желтого на спектрофотометре при длине волны 318 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм относительно 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Расчет результатов количественного определения этионамида проводят по формуле:

,

где D_x и D_вос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно;

а_х и а_вос - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно;

V₁ и V₂ - объёмы приготовленного раствора определяемого вещества;

V₃ - объём аликвоты определяемого вещества;

и - объёмы приготовленного раствора образца сравнения;

- объём аликвоты образца сравнения;

100 - коэффициент для пересчета в проценты;

W - влажность, %;

К_пер - коэффициент пересчета.

Коэффициент пересчета находят из выражения:

,

где Е_вос - удельный показатель поглощения образца сравнения диметилового желтого при аналитической длине волны;

Е_ос - удельный показатель поглощения рабочего образца сравнения определяемого (исследуемого) вещества при аналитической длине волны (определяется при разработке методики).

К_пер - по диметиловому желтому в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоте равен 0,181;

Содержание этионамида должно быть не менее 98,5% в пересчете на сухое веществ согласно нормативного документа.

Предлагаемый способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. Готовят растворы определяемого вещества и образца сравнения вышеописанным способом. Измеряют на спектрофотометре оптические плотности приготовленных растворов. Далее ведут расчет результатов по формуле, используя коэффициент пересчета.

При определении этионамида по диметиловому желтому получили следующие результаты:

Д_х=0,4486; Д_вос=0,4145; а_х=0,04960; а_вос=0,04995; влажность 0,06%; X=99,57%. Результаты опытов статистически обработаны: При n=10; ; S²=0,2242; S=0,4735; ; ΔХ=0,34; Е%=0,34; S_r=0,005.

Данные примеры подтверждают, что содержание этионамида соответствует требованиям нормативного документа.

Предлагаемый способ с использованием образца сравнения диметилового желтого является оптимальным и для количественного определения этионамида в таблетках этионамида, а также позволяет с достаточной точностью провести контроль теста «растворения» таблеток этионамида.

Способ количественного определения этионамида в лекарственной форме отличается от способа количественного определения этионамида в субстанции только приготовлением испытуемого раствора.

Пример 2. Для количественного определения этионамида в таблетках этионамида по 0,25 г берут точную массу порошка растертых таблеток (0,1000 г), помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 20 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объём раствора этим же растворителем до метки и перемешивают. Раствор фильтруют, первые 10-15 мл фильтрата отбрасывают и 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки, перемешивают.

Содержание этионамида в таблетках этионамида по 0,25 г должно быть 0,2375-0,2625 г, считая на среднюю массу одной таблетки.

При анализе таблеток этионамида по 0,25 г по диметиловому желтому получены результаты:

Д_х=0,4776; Д_вос=0,5145; а_х=0,1001; а_вос=0,04995; Р_ср=0,4802; Х=0,2510 г.

Таким образом, содержание этионамида в таблетках соответствует требованиям нормативного документа.

Пример 3. Для контроля теста «растворения» таблеток этионамида за основу брали унифицированную методику (ГФХI изд, С.159-160). В качестве среды растворения использовали 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, время растворения - 35 минут, объём среды растворения - 1000 мл, скорость вращения - 100 об/мин, температура (37±1)°С.

При анализе таблеток этионамида по 0,25 г в корзинку помещают одну таблетку, через 45 минут вращения отбирают пробу. Раствор фильтруют, 20 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты и перемешивают.

Согласно (ГФХI изд, С. 159-160) в среду растворения должно перейти не менее 75% действующего вещества от содержания в лекарственной форме.

При анализе таблеток этионамида по 0,25 г высвобождение вещества составило: 84,58%, 82,99%, 82,35%, 83,40%о, 84,19%, 80,38%, 82,11%, 79,81%, 81,98%, 81,33%. для десяти таблеток соответственно.

Таким образом, предлагаемый способ определения этионамида с использованием образца сравнения диметилового желтого позволяет повысить воспроизводимость анализа, уменьшить погрешность анализа, снизить его стоимость, исключить использование токсичных реактивов и унифицировать методики анализа.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств. Предложен способ количественного определения этионамида, заключающийся в том, что готовят растворы определяемого вещества и образца сравнения. В качестве растворителя для приготовления испытуемых растворов используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты. В качестве образца сравнения используют диметиловый желтый. Измеряют оптическую плотность раствора определяемого вещества и образца сравнения диметилового желтого на спектрофотометре при длине волны 318 нм. Расчет результатов проводят по формуле, вводя в нее коэффициент пересчета. Способ позволяет повысить воспроизводимость результатов определения, уменьшить стоимость, трудоемкость, погрешность анализа.

Способ количественного определения этионамида путем спектрометрирования определяемого вещества и стандартного образца сразнения, отличающийся тем, что
спектрофотометрирование проводят при длине волны 318 нм, в качестве образца сравнения используют диметиловый желтый и расчет проводят по следующей формуле:

где D_x и D_вос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно;
а_х и а_вос - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно;
V₁ и V₂ - объемы приготовленного раствора определяемого вещества;
V₃ - объем аликвоты определяемого вещества;
и - объемы приготовленного раствора образца сравнения;
V₃′ - объем аликвоты образца сравнения;
100 - коэффициент для пересчета в проценты;
W - влажность, %;
К_пер - коэффициент пересчета;
коэффициент пересчета находят из выражения: Е
,
где Е_вос - удельный показатель поглощения образца сравнения диметилового желтого при аналитической длине волны;
Е_ос - удельный показатель поглощения рабочего образца сравнения определяемого (исследуемого) вещества при аналитической длине волны (определяется при разработке методики);
К_пер по диметиловому желтому в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоте равен - 0,181.