ПРОИЗВОДНЫЕ 4-ИЗОПРОПИЛФЕНИЛГЛЮЦИТА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ SGLT1 Российский патент 2014 года по МПК C07D309/10 C07D405/12 A61K31/351 A61P3/10 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к производным 4-изопропилфенилглюцита, которые проявляют специфическую ингибирующую активность в отношении натрийзависимого транспортера глюкозы 1 (далее по тексту для удобства сокращенно именуемого «SGLT1»), принимающего участие в абсорбции глюкозы и галактозы в тонком кишечнике.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Уровни глюкозы в крови используются в качестве биомаркера метаболического синдрома, и у людей определяют наличие диабета, если уровень глюкозы в крови натощак превышает 126 мг/дл. Кроме того, даже если уровень глюкозы в крови натощак находится в нормальном диапазоне, у некоторых людей уровни глюкозы через 2 часа после приема пищи находятся в диапазоне от 140 до 200 мг/дл, и у этих людей диагностируют плохую переносимость глюкозы (или постпрандиальную гипергликемию). Современные эпидемиологические исследования позволили установить, что ухудшенная переносимость глюкозы увеличивает опасность сердечно-сосудистых расстройств (см. NPL 1 и NPL 2). Кроме того, сообщалось, что лечебная физкультура и/или медикаментозное лечение не только препятствует превращению плохой переносимости глюкозы в диабет II типа, но также в значительной степени препятствует началу гипертензии (см. NPL 3).

Ввиду вышеизложенного подавление постпрандиальной гипергликемии имеет важное значение для противодействия наступлению диабета и/или метаболического синдрома и, соответственно, существует возрастающая потребность в лекарственных средствах, применяемых для регулирования постпрандиальной гипергликемии.

В качестве средств, препятствующих развитию постпрандиальной гипергликемии, обычно широко применялись ингибиторы α-глюкозидазы, которые ингибируют гидролазы сахаров и тем самым замедляют абсорбцию сахара из тонкого кишечника. Помимо этих средств, для борьбы с постпрандиальной гипергликемией были разработаны другие средства с новым механизмом действия.

На эпителии тонкого кишечника млекопитающих интенсивно экспрессируется натрийзависимый транспортер глюкозы 1 (SGLT1). Известно, что активность SGLT1 зависит от натрия и что он участвует в активном транспорте глюкозы или галактозы в тонком кишечнике. На основании этих данных были разработаны производные пиразола, которые ингибируют активность SGLT1, тем самым подавляя абсорбцию глюкозы из пищи, и которые могут применяться для профилактики или лечения постпрандиальной гипергликемии (см. PTL1-PTL6). С другой стороны, натрийзависимый транспортер глюкозы 2 (SGLT2) с высокой интенсивностью экспрессируется в почках, и глюкоза, отфильтрованная клубочками, повторно абсорбируется с участием SGLT2 (см. NPL 4). Кроме того, сообщалось, что при ингибировании активности SGLT2 облегчается выделение сахара в мочу, что вызывает гипогликемическое действие (см. NPL 5). Ингибиторы SGLT2 характеризуются тем, что они обладают отличным гипогликемическим действием, понижая временно повысившийся уровень глюкозы в крови, но в отличие от ингибиторов SGLT1 их эффективность при регулировании постпрандиальной гипергликемии является низкой. Кроме того, сообщалось о производных C-фенилглюцита, которые одновременно ингибируют не только активность SGLT1, но и активность SGLT2 (см. PTL 7).

С другой стороны, в случае лекарственных средств, которые требуется вводить непрерывно, в том числе средств для подавления постпрандиальной гипергликемии, важно иметь широкую область безопасности между терапевтической дозой и дозой, вызывающей побочные эффекты или токсическое действие. В частности, в случае препаратов, склонных оставаться в организме, трудно контролировать их дозировку, необходимую для лечения, так, чтобы не развивались эффекты, связанные с избытком лекарственного средства, в результате накопления остатков лекарственного средства в организме, что приводит к неожиданному проявлению токсичности или возникновению побочных эффектов. Например, известно, что катионные лекарственные средства, в молекулах которых содержится гидрофильная группа (например, третичный амин) и гидрофобная группа (например, ароматический цикл), связываются с фосфолипидами за счет гидрофобного взаимодействия, поглощаются лизосомами и в результате накапливаются во всех тканях тела. В качестве типового примера было показано, что хлорохин вызывает ретинопатию, в то время как пергексилин является источником невропатических проблем, поскольку он вызывает изменения в легких и мозжечке (см. NPL 6).

Таким образом, желательно, чтобы лекарственные средства быстро выводились из организма после того, как они оказали свое действие. В частности, желательно, чтобы средства для борьбы с постпрандиальной гипергликемией, которые необходимо вводить постоянно, не вызывали проблемы накопления в организме.

Список упомянутых источников

Патентная литература

[PTL 1] международная публикация № WO 2002/098893

[PTL 2] международная публикация № WO 2004/014932

[PTL 3] международная публикация № WO 2004/018491

[PTL 4] международная публикация № WO 2004/019958

[PTL 5] международная публикация № WO 2005/121161

[PTL 6] международная публикация № WO 2004/050122

[PTL 7] международная публикация № WO 2007/136116

Непатентная литература

[NPL 1] Pan XR, et al. Diabets Care, vol. 20, p. 537, 1997

[NPL 2] M Tominaga, et al. Diabets Care, vol. 22, p. 920, 1999

[NPL 3] J.-L. Chiasson, et al. Lancent, vol. 359, p. 2072, 2002

[NPL 4] E.M. Wright, Am. J. Physiol. Renal. Physiol., vol. 280, p. F10, 2001

[NPL 5] G. Toggenburger, et al. Biochem. Biophys. Acta., vol. 688, p. 557, 1982

[NPL 6] Folia Pharmacol. Jpn. vol. 113, p. 19, 1999

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Техническая задача

Цель настоящего изобретения заключалась в разработке соединений или их солей, обладающих ингибирующим действием в отношении SGLT1, которые имеют широкую область безопасности между терапевтическими дозами и дозами, вызывающими токсическое действие или побочные эффекты, а также фармацевтических композиций, включающих указанные соединения или соли.

Решение проблемы

Было обнаружено, что производные C-фенилглюцита, раскрытые в PTL 7, склонны оставаться в почках, не подвергаясь выведению. На основе этого факта авторы настоящего изобретения приложили значительные и интенсивные усилия для исследования соединений, которым не свойственна проблема накопления в организме. В результате, авторы изобретения неожиданно обнаружили, что производные 4-изопропилфенилглюцита, представленные приведенной ниже формулой (I), которые образуются, в частности, путем введения изопропильной группы в бензольный цикл, непосредственно присоединенный к остатку сахара, и введения бутеноильной группы с аминогруппой в другое бензольное кольцо, не склонны накапливаться в почках. Этот результат привел к созданию настоящего изобретения.

Ниже по тексту будут приведены варианты осуществления производных 4-изопропилфенилглюцита по настоящему изобретению (далее по тексту именуемых «соединениями по настоящему изобретению»).

(1) Производные 4-изопропилфенилглюцита, представленные приведенной ниже формулой (I) или их фармацевтически приемлемые соли:

Схема 1

где

R¹ означает атом водорода или C_1-4алкильную группу,

R² означает атом водорода или метильную группу,

R³ означает «С_1-4алкильную группу, замещенную аминогруппой(ами) или ди-C_1-4алкиламиногруппой(ами)» или пиперидильную группу, и

R⁴ означает атом водорода или, в качестве альтернативы, R³ и R⁴, совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперидиногруппу или пиперазинильную группу, которая может быть замещена C_1-4алкильной группой(ами) или диметиламиногруппой(ами).

(2) Производное 4-изопропилфенилглюцита, выбранное из следующей группы, или его фармацевтически приемлемая соль:

Схема 2

(3) Производное 4-изопропилфенилглюцита, выбранное из следующей группы, или его фармацевтически приемлемая соль:

Схема 3

(4) Фармацевтическая композиция, которая включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из (1)-(3) или его фармацевтически приемлемую соль.

(5) Ингибитор активности натрийзависимого транспортера 1 глюкозы (SGLT1), который включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из (1)-(3) или его фармацевтически приемлемую соль.

(6) Средство для борьбы с постпрандиальной гипергликемией, которое включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из (1)-(3) или его фармацевтически приемлемую соль.

(7) Профилактическое или терапевтическое средство для лечения диабета, которое включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из (1)-(3) или его фармацевтически приемлемую соль.

(8) Применение производного 4-изопропилфенилглюцита по любому из (1)-(3) или его фармацевтически приемлемой соли для производства профилактического или терапевтического средства для лечения диабета.

(9) Способ профилактики или лечения диабета, который включает введение млекопитающему терапевтически эффективного количества производного 4-изопропилфенилглюцита по любому из (1)-(3) или его фармацевтически приемлемой соли.

Полезные эффекты изобретения

Настоящее изобретение представляет возможность получения производных 4-изопропилфенилглюцита, которые не склонны к накоплению в организме и которые ингибируют активность SGLT1.

ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Использованные в настоящей заявке термины и фразы определяются следующим образом.

Термин «C_1-4алкильная группа» служит для обозначения линейной или разветвленной алкильной группы, содержащей 1-4 атома углерода. Примеры включают метильную группу, этильную группу, н-пропильную группу, изопропильную группу, н-бутильную группу, изобутильную группу и трет-бутильную группу.

Термин «ди-C_1-4алкиламиногруппа» служит для обозначения аминогруппы, замещенной двумя C_1-4алкильными группами. Примеры включают диметиламиногруппу и диэтиламиногруппу.

Кроме того, термин «фармацевтически приемлемая соль» служит для обозначения, например, соли со щелочным металлом, щелочноземельным металлом, аммонием или алкиламмонием, или же соли с минеральной кислотой или органической кислотой. Примеры включают соли натрия, соли калия, соли кальция, соли аммония, соли алюминия, соли триэтиламмония, соли муравьиной кислоты, соли уксусной кислоты, соли пропионовой кислоты, соли масляной кислоты, соли гексановой кислоты, соли октановой кислоты, соли трифторуксусной кислоты, соли малеиновой кислоты, соли винной кислоты, соли лимонной кислоты, соли стеариновой кислоты, соли янтарной кислоты, соли этилянтарной кислоты, соли лактобионовой кислоты, соли глюконовой кислоты, соли глюкуроновой кислоты, соли глюкогептановой кислоты, соли глутаровой кислоты, соли пимелиновой кислоты, соли пробковой кислоты, соли азелаиновой кислоты, соли себациновой кислоты, соли 1,9-нонандикарбоновой кислоты, соли додекандиовой кислоты, соли тридекандиовой кислоты, соли тетрадекандиовой кислоты, соли пентадекандиовой кислоты, соли гексадекандиовой кислоты, соли гептадекандиовой кислоты, соли бензойной кислоты, соли 2-гидроксибензойной кислоты, соли метансульфоновой кислоты, соли этансульфоновой кислоты, соли этандисульфоновой кислоты, соли 2-гидроксиэтансульфоновой кислоты, соли бензолсульфоновой кислоты, соли п-толуолсульфоновой кислоты, соли 1,5-нафталиндисульфоновой кислоты, соли лаурилсерной кислоты, соли молочной кислоты, соли гиппуровой кислоты, соли фумаровой кислоты, соли малоновой кислоты, соли транс-коричной кислоты, соли яблочной кислоты, соли аспарагиновой кислоты, соли глутаминовой кислоты, соли адипиновой кислоты, соли цистеина, соли N-ацетилцистеина, соли хлористоводородной кислоты, соли бромистоводородной кислоты, соли фосфорной кислоты, соли серной кислоты, соли йодистоводородной кислоты, соли никотиновой кислоты, соли щавелевой кислоты, соли пикриновой кислоты, соли роданистоводородной кислоты, соли ундекановой кислоты, соли с полимерами акриловой кислоты и соли с карбоксивиниловыми полимерами.

Фраза «средство для борьбы с постпрандиальной гипергликемией» служит для обозначения лекарственного средства, которое подавляет постпрандиальную гипергликемию и, тем самым, препятствует началу заболеваний, связанных с постпрандиальной гипергликемией (например, диабета, метаболического синдрома), или лечит эти заболевания. В настоящем описании термин «постпрандиальная гипергликемия» служит для обозначения состояния, при котором имеет место аномальное повышение уровней глюкозы в крови после приема пищи, более конкретно, состояние, при котором уровень глюкозы в крови через 2 часа после приема пищи превышает 140 мг/дл.

Далее по тексту будет описана применимость соединений по настоящему изобретению (для ознакомления с подробностями, см. приведенные ниже тестовые примеры).

Соединения по настоящему изобретению обладают сильным ингибирующим действием на SGLT1 и, кроме того, определенным, хотя и слабым, ингибирующим действием на SGLT2. Кроме того, соединения по настоящему изобретению обладают гипогликемическим действием такой же силы, как и соединения, раскрытые в WO2007/136116. Кроме того, соединения, раскрытые в WO2007/136116, имеют тенденцию накапливаться в почках, не подвергаясь выведению даже через 7 дней после перорального приема в количестве 1 мг/кг, в то время, как соединения по настоящему изобретению демонстрируют характерную особенность, которая заключается в том, что даже после приема в течение 3 последовательных дней в дозировке 3 мг/кг они, неожиданно, не обнаруживаются в почках уже на 2-й день после окончания введения.

Таким образом, соединения по настоящему изобретению не склонны к накоплению в организме, и существует меньшая вероятность того, что они вызовут побочные эффекты и токсичность в результате непрерывного введения, и, следовательно, эти соединения обладают отличными с практической точки зрения свойствами в качестве фармацевтических композиций.

Если соединения по настоящему изобретению входят в состав фармацевтических композиций, то в соответствии с необходимостью, можно выбрать различные типы дозированных форм, например, твердые формы и растворы. В этом случае в состав композиций может быть включен также фармацевтически приемлемый носитель(и). Примеры такого носителя включают широко применяемые эксципиенты, наполнители, связующие вещества, дезинтегрирующие средства, покрытия, покрытия с содержанием сахара, регуляторы pH, солюбилизаторы, а также водные или неводные растворители. Соединения по настоящему изобретению и указанные носители могут входить в состав таблеток, пилюль, капсул, гранул, порошков, растворов, эмульсий, суспензий или других дозированных форм.

Например, соединения по настоящему изобретению можно включать в состав таблеток для перорального приема путем смешивания их с эксципиентами, таблетирования и других способов, которые традиционно применяются для изготовления твердых препаратов.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно включать в состав лекарственных форм в сочетании, например, с α-, β- или γ-циклодекстрином или метилированным циклодекстрином, для улучшения их растворимости.

Дозировка соединений по настоящему изобретению будет меняться в зависимости от заболевания или симптома, подвергаемого лечению, массы тела, возраста пациента, его пола, пути введения и т.д. Дневная дозировка для взрослых составляет от 0,1 до 1000 мг/кг массы тела, предпочтительно от 0,1 до 200 мг/кг массы тела и более предпочтительно от 0,1 до 10 мг/кг массы тела, при введении в виде одной дозы или нескольких отдельных доз.

В качестве предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения могут быть названы следующие соединения, получение которых описано в разделе примеров.

Схема 4

Способы получения соединений формулы (I) по настоящему изобретению будут более подробно описаны ниже по тексту в форме ряда примеров, но они не ограничены описанными ниже конкретными случаями.

Методика получения 1

Соединения формулы (I) по настоящему изобретению можно синтезировать следующим образом.

На приведенной ниже схеме, X означает ацетильную группу или C_1-4алкильную группу, R⁵ означает группу R³ или группу R³, в которой аминогруппа защищена трет-бутилкарбонатом (Boc), и другие символы соответствуют данным выше определениям.

Схема 5

(1) Стадия 1 (Реакция Хека)

Соединение (II) и олефинкарбоновую кислоту (III) можно ввести в реакцию Хека в присутствии палладиевого катализатора, фосфинового лиганда и подходящего основания с получением соединения (IV). Примеры палладиевого катализатора, применяемого в этой реакции, включают ацетат палладия, тетракис(трифенилфосфин)палладий, дибензилиденацетонпалладий, хлорид бис(трифенилфосфин)палладия, хлорид бис(трициклогексилфосфин)палладия и палладий на активированном угле. Примеры фосфинового лиганда включают трифенилфосфин и три-O-толилфосфин. Кроме того, примеры подходящего основания включают триэтиламин, N-этил-N,N-диизопропиламин, карбонат калия, карбонат кальция, карбонат цезия и трет-бутоксид калия. Примеры растворителя, подходящего для применения в описываемой реакции, включают ацетонитрил, толуол и тетрагидрофуран. Температура проведения реакции меняется от 0°C до температуры кипения, или же вместо этого можно применять микроволновое излучение.

(2) Стадия 2 (введение амидной группы)

Соединение (IV) можно ввести в реакцию конденсации с амином (R⁵R⁴NH), происходящую за счет дегидратации, с получением соединения (V). Примеры растворителя, который является предпочтительным для применения в этой реакции, включают хлороформ, дихлорметан и N,N-диметилформамид. Примеры дегидратирующего конденсирующего агента, предпочтительного для проведения указанной реакции, включают N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), гидрохлорид N-этил-N'-3-диметиламинопропилкарбодиимида (EDC·HCl), 1,1'-карбонилдимидазол (CDI) и EDC·HCl/1-гидроксибензотриазола моногидрат (HOBt·H₂O). Температура проведения реакции в этом случае находится в пределах от 0°C до 60°C.

Стадия 3 (снятие защиты)

Группу Boc в соединении (V) можно удалить в кислой среде и ацетильные группы (Ac) можно удалить в основной среде с получением соединения (I). Группу Boc удаляют обработкой хлористоводородной кислотой или трифторуксусной кислотой в присутствии растворителя (например, дихлорметана, хлороформа, диоксана) или без него. Для удаления ацетильной группы можно применять такое основание, как метоксид натрия, гидроксид натрия, гидроксид лития, карбонат калия, карбонат цезия или триэтиламин. Примеры предпочтительного растворителя для этой реакции включают метанол, этанол и водный метанол. Температура проведения указанной реакции меняется в пределах от 0°C до 60°C.

Методика получения 2

Соединение (I) по настоящему изобретению можно также синтезировать другим путем, который показан ниже. На помещенной далее схеме символы соответствуют данным выше определениям.

Схема 6

(4) Стадия 4 (реакция Хека)

Можно применять соединение (II) и олефинкарбоновую кислоту (VI), вводя их в реакцию Хека, показанную на стадии 1 методики получения 1, с образованием соединения (VII).

(5) Стадия 5 (введение амидной группы)

Можно использовать соединение (VII) и амин (VIII), конденсируя их с дегидратацией, как показано на стадии (2) методики получения 1, с образованием соединения (V)

(6) Стадия 6 (снятие защиты)

Полученное выше соединение (V) можно превратить в соединение (I) путем снятия защиты, как показано на стадии 3 методики получения 1.

Методика получения 3

Методика получения промежуточного соединения (II)

Ниже показана методика получения промежуточного соединения (II), которое необходимо для получения соединения (I) по настоящему изобретению.

На приведенной схеме, X¹ означает бензильную группу или C_1-4алкильную группу, X² означает триметилсилильную группу или C_1-4алкильную группу, и остальные символы соответствуют данным выше определениям.

Схема 7

(7) Стадия 7 (сочетание)

Соединение (IX) можно обработать металлорганическим реагентом (например, н-бутиллитием, втор-бутиллитием, трет-бутиллитием) с получением ариллития. К этому соединению можно добавить глюконолактон (X) с образованием соединения (XI). Примеры растворителя, который подходит для проведения этой реакции, включают тетрагидрофуран, диэтиловый эфир и толуол. Температура проведения реакции находится в пределах от -80°C до комнатной температуры, предпочтительно от -78°C до -25°C.

(8) Стадия 8 (кислый гидролиз)

Одновременно с удалением силильных групп из соединения (XI) в метаноле в присутствии кислоты в 1-е положение остатка сахара может быть введена метильная группа с получением простого метилового эфира (XII). Примеры кислоты, которая применяется в этой реакции, включают хлористоводородную кислоту, серную кислоту, метансульфоновую кислоту, моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты, п-толуолсульфонат пиридиния, гидрофторид пиридина и н-Bu₄NF. Хотя температура проведения реакции должна меняться в зависимости от типа применяемой кислоты, она находится в пределах от 0°C до 100°C, предпочтительно от 25°C до 80°C.

(9) Стадия 9 (ацетилирование)

Гидроксильные группы в соединении (XII) можно защитить ацетильными группами с получением соединения (XIII). Соединение (XII) можно ввести в реакцию, например, с уксусным ангидридом или ацетилхлоридом, в растворителе в присутствии подходящего основания, с получением соединения (XIII). Примеры растворителя, который подходит для применения в этой реакции, включают хлороформ, дихлорметан, диоксан, этилацетат, тетрагидрофуран и N,N-диметилформамид. Примеры оснований, которые предпочтительны для проведения данной реакции, включают триэтиламин, коллидин и пиридин. В качестве катализатора реакции можно использовать 4-диметиламинопиридин. Температура проведения реакции предпочтительно находится в диапазоне от 0°C до комнатной температуры.

(10) Стадия 10 (восстановление)

Соединение (XIII) можно ввести в реакцию с Et₃SiH, i-Pr₃SiH, t-BuMe₂SiH или Ph₂SiHCl в присутствии кислоты Льюиса с получением соединения (XIV). Примеры кислот Льюиса, которые подходят для применения в этой реакции, включают BF₃·Et₂O, CF₃COOH, InCl₃, TiCl₄, TMSOTf, п-толуолсульфоновую кислоту и метансульфоновую кислоту. Примеры растворителя включают хлороформ, дихлорметан, толуол, тетрагидрофуран, ацетонитрил или их смеси, причем предпочтительными являются смеси растворителей, содержащие ацетонитрил, например, ацетонитрил/хлороформ, ацетонитрил/дихлорметан, ацетонитрил/тетрагидрофуран, ацетонитрил/тетрагидрофуран/толуол и т.д. В этом случае температура реакции находится в пределах от -60°C до 25°C, предпочтительно от -30°C до 25°C.

(11) Стадия 11 (снятие защиты)

В случае если X¹ в соединении (XIV) является бензильной группой, дебензилирование можно осуществить путем каталитического гидрирования в атмосфере водорода с использованием такого катализатора, как палладий на активированном угле, гидроксид палладия или платина-палладий на активированном угле. Из перечисленного в качестве катализатора предпочтительными являются палладий на активированном угле или гидроксид палладия. Примеры растворителей, подходящих для применения в этой реакции, включают метанол, этанол, изопропанол, этилацетат, уксусную кислоту и смеси этих растворителей. Температура проведения реакции находится в пределах от комнатной температуры до температуры кипения с обратным холодильником, причем комнатная температура является предпочтительной.

(12) Стадия 12 (бромирование)

Соединение (XIV) или соединение, полученное на описанной выше стадии 11, можно ввести в реакцию с бромом, N-бромсукцинимидом, бромистым водородом и т.п. в растворителе, с получением соединения (XV). Примеры растворителя, который подходит для использования в этой реакции, включают хлороформ, дихлорметан, уксусную кислоту, метанол и N,N-диметилформамид. Температура проведения этой реакции находится в пределах от 0°C до комнатной температуры.

(13) Стадия 13 (снятие защиты)

Ацетильные группы в соединении (XV) можно удалить при действии основания с получением соединения (XVI). Примеры оснований, которые подходят для проведения данной реакции, включают метоксид натрия, гидроксид натрия, гидроксид лития, карбонат калия, карбонат цезия и триэтиламин. Примеры растворителей, подходящих для этой реакции, включают метанол, этанол и водный метанол. Температура проведения реакции находится в пределах от 0°C до 60°C.

(14) Стадия 14 (силилирование)

Гидроксильные группы в соединении (XVI) можно защитить силильными группами (например, триметилсилильными группами) с получением соединения (XVII). Соединение (XVI) можно ввести в реакцию с триметилсилилхлоридом, триэтилсилилхлоридом, трет-бутилдиметилсилилхлоридом или подобными соединениями в растворителе в присутствии подходящего основания с получением соединения (XVII). Примеры растворителя, подходящего для применения в этой реакции, включают хлороформ, дихлорметан, диоксан, этилацетат, тетрагидрофуран и N,N-диметилформамид. Примеры основания, предпочтительного для проведения реакции, включают триэтиламин, коллидин и пиридин. Температура проведения реакции находится в пределах от 0°C до комнатной температуры.

(15) Стадия 15 (сочетание)

Соединение (XVII) можно обработать металлорганическими соединениями (например, н-бутиллитием, втор-бутилитием, трет-бутилитием) с получением ариллитиевого соединения. К этому соединению можно добавить альдегид (XVIII) с получением соединения (XIX). Примеры растворителя, подходящего для проведения этой реакции, включают тетрагидрофуран, диэтиловый эфир и толуол. Температура проведения реакции находится в диапазоне от -80°C до комнатной температуры, предпочтительно от -78°C до -25°C.

(16) Стадия 16 (кислый гидролиз)

Полученное выше соединение (XIX) можно превратить в соединение (XX) реакцией кислого гидролиза, показанной для стадии 8 методики получения 3.

(17) Стадия 17 (ацетилирование)

Полученное выше соединение (XX) можно превратить в соединение (XXI) реакцией ацетилирования, показанной для стадии 9 методики получения 3.

(18) Стадия 18 (восстановление)

Полученное выше соединение (XXI) можно превратить в промежуточное соединение (II) реакцией восстановления, показанной для стадии 10 методики получения 3.

Методика получения 4

Методика получения промежуточного соединения (II)

Промежуточное соединение (II) можно также синтезировать другим путем, который показан ниже. В этой методике стадии 19-21 могут быть проведены в одном реакционном сосуде для сокращения количества стадий. Символы на приведенной ниже схеме соответствуют данным выше определениям.

Схема 8

(19) Стадия 19 (сочетание)

Соединение (XXII) можно обработать металлоорганическим реагентом (например, н-бутилитием, втор-бутилитием, трет-бутиллитием) с получением ариллитиевого соединения. К этому соединению можно добавить глюконолактон (X) с получением соединения (XXIII). Примеры растворителя, подходящего для применения в этой реакции, включают тетрагидрофуран, диэтиловый эфир и толуол. Температура реакции меняется в пределах от -80°C до комнатной температуры, предпочтительно от -78°C до -25°C.

(20) Стадия 20 (силилирование)

После проведения описанной выше стадии 19, гидроксильную группу в 1-м положении соединения (XXIII) можно защитить силильной группой (например, триметилсилильной группой). Реакционную смесь, полученную на стадии 19, можно ввести в реакцию с триметилсилилхлоридом с получением соединения (XXIV). Растворитель, который подходит для применения в этой реакции, и предпочтительная температура проведения реакции те же самые, что и для стадии 19.

(21) Стадия 21 (сочетание)

После проведения описанной выше стадии 20, полученное соединение (XXIV) можно обработать металлоорганическим реагентом (например, н-бутилитием, втор-бутилитием, трет-бутиллитием) с получением ариллитиевого соединения. К этому соединению можно добавить альдегид (XVIII) с получением соединения (XXV). Растворитель, который подходит для этой реакции, является таким же, как и для стадии 19.

(22) Стадия 22 (кислый гидролиз)

Полученное выше соединение (XXV) можно превратить в соединение (XXVI) реакцией кислого гидролиза, которая показана для стадии 8 методики получения 3.

(23) Стадия 23 (ацетилирование)

Полученное выше соединение (XXVI) можно превратить в соединение (XXVII) реакцией ацетилирования, которая показана для стадии 9 методики получения 3.

(24) Стадия 24 (восстановление)

Полученное выше соединение (XXVII) можно превратить в соединение (XXVIII) реакцией восстановления, которая показана для стадии 10 методики получения 3.

(25) Стадия 25 (ацетилирование или алкилирование)

Гидроксильную группу в соединении (XXVIII) можно защитить ацетильной группой или алкилировать (например, метилировать) с получением промежуточного соединения (II). Соединение (XXVIII) можно ввести во взаимодействие, например, с уксусным ангидридом или ацетилхлоридом в растворителе в присутствии подходящего основания с получением промежуточного соединения (II). Примеры растворителей, подходящих для использования в этой реакции, включают хлороформ, дихлорметан, диоксан, этилацетат, тетрагидрофуран и N,N-диметилформамид. Примеры оснований, предпочтительных для осуществления этой реакции, включают триэтиламин, коллидин и пиридин. В качестве катализатора может применяться 4-диметиламинопиридин и т.п. Температура проведения реакции предпочтительно находится в пределах от 0°C до комнатной температуры. В качестве альтернативы, соединение (XXVIII) можно ввести во взаимодействие с метилиодидом, этилиодидом, 2-йодпропаном или подобными реагентами, в растворителе, в присутствии подходящего основания с получением промежуточного соединения (II). Примеры растворителей, которые подходят для проведения этой реакции, включают хлороформ, дихлорметан, тетрагидрофуран, N,N-диметилформамид и ацетон. Примеры оснований, предпочтительных для осуществления реакции, включают карбонат калия и карбонат цезия.

ПРИМЕРЫ

Далее по тексту настоящее изобретение будет описано более подробно с привлечением следующих справочных примеров, примеров и тестовых примеров, но не следует считать, что настоящее изобретение ограничено этими примерами.

Справочный пример 1: Получение промежуточного соединения (A)

Схема 9

(1) Справочный пример 1-1: Соединение (A1)

Схема 10

К раствору 3-изопропилфенола (25,0 г, 0,184 моль) в уксусной кислоте (200 мл) добавляли суспензию иодата калия (7,88 г, 0,0368 моль) в воде (75 мл) и йод (18,7 г, 0,0736 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. После добавления диэтилового эфира (400 мл) и воды (300 мл) отделяли органический слой. Органический слой промывали водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли и затем высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=95:5), получая соединение (A1) (27,6 г, 57%) в виде бесцветного масла.

¹H ЯМР (200 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,16-1,25 (м, 6H), 2,64-2,98 (м, 1H), 5,21 (с, 1H), 6,57 (дд, J=8,13, 2,20 Гц, 1H), 6,88 (д, J=2,20 Гц, 1H), 7,54 (д, J=8,13 Гц, 1H).

(2) Справочный пример 1-2: Соединение (A2)

Схема 11

К суспензии соединения (A1) (26,5 г, 0,101 моль) и карбоната калия (20,9 г, 0,152 моль) в ацетонитриле добавляли бензилбромид (14,4 мл, 0,121 моль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, после чего добавляли метанол (1,0 мл) и перемешивали в течение еще 30 минут. Нерастворимые вещества отделяли фильтрованием и фильтрат концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=95:5), получая соединение (A2) (30,2 г, 85%) в виде бесцветного масла.

¹H ЯМР (200 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,21 (д, J=7,03 Гц, 6H), 2,84 (септет, J=7,03 Гц, 1H), 5,14 (с, 2H), 6,62 (дд, J=8,35, 2,20 Гц, 1H), 6,74 (д, J=2,20 Гц, 1H), 7,23-7,58 (м, 5H), 7,68 (д, J=8,35 Гц, 1H).

(3) Справочный пример 1-3: Соединение (A3)

Схема 12

К раствору соединения (A2) (30,2 г, 85,7 ммоль) в ТГФ (450 мл) по каплям добавляли 2,6М раствор н-бутиллития в гексане (33 мл, 85,7 ммоль) при -78°C в атмосфере азота и перемешивали при этой температуре в течение 15 минут. Затем по каплям в течение 15 минут добавляли раствор 2,3,4,6-тетра-O-триметилсилил-D-глюконо-1,5-лактона (40,0 г, 85,7 ммоль) в ТГФ (230 мл) и перемешивали при этой температуре в течение 20 минут. К полученной реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (150 мл) и воду (100 мл). Температуру полученной смеси повышали до комнатной и затем дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении.

Полученный остаток растворяли в растворе, метансульфоновой кислоты (2,9 г) в метаноле (840 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 14,5 часов. После нейтрализации триэтиламином (2,5 мл) реакционную смесь концентрировали.

Полученный остаток (46,4 г) растворяли в пиридине (125 мл) и охлаждали до 4°C. К этому раствору добавляли уксусный ангидрид (75 мл) и 4-диметиламинопиридин (102 мг, 0,835 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 19 часов. После добавления ледяной воды (500 мл) смесь дважды экстрагировали этилацетатом (500 мл). Объединенные органические соли промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли и затем высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего средства фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении, получая неочищенное соединение (53 г).

К раствору этого неочищенного соединения в хлороформе (250 мл) и ацетонитриле (250 мл) при 4°C добавляли Et₃SiH (13,7 мл, 85,7 ммоль) и BF₃·Et₂O (10,9 мл, 85,7 ммоль) в атмосфере азота, и перемешивали при этой температуре в течение 1,5 часов. Реакционную смесь перемешивали с насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали хлороформом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=5:1→2:1), получая соединение (A3) (19,1 г, 40%; 4 стадии) в виде светло-желтого аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,21 (д, J=6,99 Гц, 6H), 1,78 (с, 3H), 2,01 (с, 6H), 2,05 (с, 3H), 2,86 (септет, J=6,99 Гц, 1H), 3,80 (ддд, J=9,95, 4,59, 2,25 Гц, 1H), 4,06-4,13 (м, 1H), 4,19-4,27 (м, 1H), 4,96 (д, J=9,95 Гц, 1H), 5,10 (с, 2H), 5,16-5,25 (м, 1H), 5,33 (т, J=9,17 Гц, 1H), 5,40-5,49 (м, 1H), 6,79 (д, J=1,40 Гц, 1H), 6,85 (дд, J=7,93, 1,40 Гц, 1H), 7,26-7,52 (м, 6H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 579[M+Na]⁺.

(4) Справочный пример 1-4: соединение (A4)

Схема 13

К раствору соединения (A3) (19,1 г, 34,3 ммоль) в метаноле (200 мл) добавляли 10% палладий на активированном угле (1,8 г) и перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 2 часов. После фильтрования реакционной смеси через целит растворитель отгоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=2:1→1:1), получая соединение (A4) (12,3 г, 77%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,20 (д, J=6,89 Гц, 6H), 1,83 (с, 3H), 2,01 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,82 (септет, J=6,89 Гц, 1H), 3,87 (ддд, J=9,60, 3,85, 2,25 Гц, 1H), 4,14-4,21 (м, 1H), 4,27-4,36 (м, 1H), 4,59 (д, J=9,33 Гц, 1H), 5,23-5,39 (м, 3H), 6,70 (дд, J=7,93, 1,71 Гц, 1H), 6,77 (д, J=1,71 Гц, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,91 (д, J=7,93 Гц, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 489[M+Na]⁺.

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 501[M+Cl]^-.

(5) Справочный пример 1-5: соединение (A5)

Схема 14

К раствору соединения (A4) (12,3 г, 26,3 ммоль) в уксусной кислоте (120 мл), по каплям при комнатной температуре добавляли бром (4,2 г, 26,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 часов и добавляли к ней ледяную воду (150 мл). Эту смесь дважды экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, 10% водным раствором тиосульфата натрия и насыщенным раствором соли, и затем высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 2-пропаноле (20 мл), к которому затем по каплям добавляли гексан (50 мл). Смесь перемешивали при 4°C в течение 1 ч, и образовавшийся осадок отделяли фильтрованием, получая соединение (A5) (9,8 г, 68%) в виде бесцветного порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,12-1,26 (м, 6H), 1,89 (с, 3H), 2,01 (с, 3H), 2,07 (с, 3H), 2,13 (с, 3H), 3,22 (септет, J=6,74 Гц, 1H), 3,87 (ддд, J=9,48, 3,73, 2,18 Гц, 1H), 4,14-4,22 (м, 1H), 4,28-4,36 (м, 1H), 4,53 (д, J=9,33 Гц, 1H), 5,16-5,39 (м, 3H), 6,82 (с, 1H), 7,14 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 567[M+Na]⁺, 569[M+2+Na]⁺.

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 579[M+Cl]^-, 581[M+2+Cl]^-.

(6) Справочный пример 1-6: соединение (A6)

Схема 15

К раствору соединения (A5) (12,2 г, 22,3 ммоль), в метаноле (120 мл), добавляли триэтиламин (24 мл) и воду (24 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов и затем перемешивали при 50°C в течение 10 часов, после чего отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток растворяли в N,N-диметилформамиде (106 мл), и к раствору добавляли триэтиламин (18,6 мл, 134 ммоль) и триметилхлорсилан (14,3 мл, 112 ммоль) при 4°C в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при 4°C в течение 1 часа, после чего добавляли ледяную воду (150 мл). Эту смесь три раза экстрагировали толуолом и объединенные органические слои промывали водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении, получая соединение (A6) (17,4 г) в виде масла. Это соединение использовали в следующей стадии без очистки.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 0,28 (с, 9H), 0,08 (с, 9H), 0,19 (с, 9H), 0,20 (с, 9H), 0,29 (с, 9H), 1,16 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,21 (д, J=6,84 Гц, 3H), 3,17-3,37 (м, 1H), 3,41-3,56 (м, 3H), 3,62-3,72 (м, 1H), 3,76-3,86 (м, 1H), 4,46 (д, J=8,24 Гц, 1H), 6,64 (с, 1H), 7,47 (с, 1H).

(7) Справочный пример 1-7: соединение (A7)

Схема 16

К раствору соединения (A6) (13,4 г, 15,9 ммоль) в ТГФ (140 мл), по каплям в течение 10 минут при -78°C в атмосфере азота добавляли 2,6М раствор н-бутиллития в гексане (7,7 мл, 20,0 ммоль), и перемешивали при этой температуре в течение 5 минут. Затем по каплям в течение 15 минут добавляли раствор 4-бром-2-метилбензальдегида (3,2 г, 15,9 ммоль) в ТГФ (24 мл) и перемешивали при этой температуре в течение 45 минут. К полученной реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл) и воду (100 мл). Температуру смеси повышали до комнатной и затем дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток растворяли в растворе метансульфоновой кислоты (0,9 г) в метаноле (200 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч. После нейтрализации триэтиламина реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол=10:1→8:1), получая соединение (A7) (5,75 г, 73%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,01 и 1,04 (каждый д, J=6,88 Гц, 3H), 1,18 и 1,19 (каждый д, J=6,88 Гц, 3H), 2,24 и 2,26 (каждый с, 3H), 2,95-3,07 (м, 1Н) 3,35-3,69 (м, 5H), 3,78-3,87 (м, 1H), 4,37-4,50 (м, 1H), 5,59 (с, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,98-7,10 (м, 2H), 7,24-7,30 (м, 1H), 7,33 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 479[M-OH]⁺, 481[M+2-OH]⁺.

(8) Справочный пример 1-8: промежуточное соединение (A)

Схема 17

Соединение (A7) (5,7 г, 11,5 ммоль) растворяли в пиридине (34 мл). К этому раствору добавляли уксусный ангидрид (17 мл) и 4-диметиламинопиридин (10 мг) и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. После добавления ледяной воды (500 мл) смесь дважды экстрагировали этилацетатом (500 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении, получая неочищенное соединение (8,5 г).

К раствору этого неочищенного соединения (8,5 г) в хлороформе (80 мл) и ацетонитриле (80 мл) при 4°C в атмосфере азота добавляли Et₃SiH (2,7 мл, 17,0 ммоль) и BF₃·Et₂O (2,2 мл, 17,0 ммоль). Температуру реакционной смеси повышали до комнатной и затем перемешивали при этой же температуре в течение 0,5 часа. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали хлороформом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток кристаллизовали из смеси 4:1 гексан:этилацетат и полученный осадок отделяли фильтрованием, получая промежуточное соединение (A) (5,3 г, 68%) в виде бесцветного порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,12 (д, J=6,68 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,68 Гц, 3H), 1,76 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,93 (септет, J=6,68 Гц, 1H), 3,76 (ддд, J=9,87, 4,51, 2,25 Гц, 1H), 3,87 (с, 2H), 4,06 (дд, J=12,51, 2,25 Гц, 1H), 4,27 (дд, J=12,51, 4,51 Гц, 1H), 4,49 (д, J=9,64 Гц, 1H), 5,10-5,33 (м, 3H), 6,59 (д, J=8,39 Гц, 1H), 6,97 (с, 1H), 7,00 (с, 1H), 7,20 (дд, J=8,39, 2,49 Гц, 1H), 7,34 (д, J=2,49 Гц, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 713[M+Na]⁺, 715[M+2+Na]⁺.

В качестве альтернативы, промежуточное соединение (A) можно также синтезировать, как описано в приведенных ниже справочных примерах 1-9, 1-10 и 1-11.

(9) Справочный пример 1-9: соединение (A8)

Схема 18

К раствору 3-изопропилфенола (160 г, 1,18 моль) в уксусной кислоте (1,6 л) по каплям в течение 32 минут при охлаждении льдом, так чтобы внутренняя температура не превышала 19°C, добавляли раствор брома (469 г, 2,94 моль) в уксусной кислоте (320 мл), после чего перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После добавления толуола (1,6 л) добавляли 10% водный раствор сульфита натрия (1,0 л) по каплям при охлаждении льдом, так чтобы внутренняя температура не превышала 20°C. Органический слой отделяли и дважды промывали 10% водным раствором сульфита натрия (1,0 л) и 10% водным раствором хлорида натрия (1,0 л), после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении, получая соединение (A8) (342 г, 99%) в виде светло-желтого масла.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,21 (д, J=6,84 Гц, 6H), 3,25 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 5,40 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 7,61 (с, 1H).

(10) Справочный пример 1-10: соединение (A9)

Схема 19

К раствору соединения (A8) (512 г, 1,74 моль) в хлороформе (1,74 л) добавляли диизопропилэтиламин (364 мл, 2,09 моль) и охлаждали полученную смесь льдом. По каплям в течение 60 минут добавляли хлорметилметиловый эфир (159 мл, 2,09 моль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали льдом и добавляли к ней 1М водный раствор гидроксида натрия (1,5 л). Органический слой отделяли и промывали 1М водным раствором гидроксида натрия (1,5 л) и водой (1,5 л), после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушающего вещества фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали перегонкой при пониженном давлении (0,93-1,5 гПа, 122-137°C), получая соединение (A9) (548 г, 96%) в виде светло-желтого масла.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,22 (д, J=6,84 Гц, 6H), 3,28 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 3,52 (с, 3H), 5,23 (с, 2H), 7,06 (с, 1H), 7,69 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 339[M+H]⁺, 341[M+2+H]⁺.

(11) Справочный пример 1-11: промежуточное соединение (A)

К раствору соединения (A9) (210 г, 0,621 моль) в ТГФ (3,1 л) по каплям в течение 20 минут при температуре от -86°C до -74°C в атмосфере аргона добавляли 2,76М раствор н-бутилития в гексане (236 мл, 0,652 моль), и перемешивали при этой температуре в течение 35 минут. Затем по каплям в течение 38 минут добавляли раствор 2,3,4,6-тетра-O-триметилсилил-D-глюконо-1,5-лактона (305 г, 0,652 моль) в ТГФ (890 мл), и перемешивали при той же температуре в течение 50 минут. Затем по каплям в течение 4 минут добавляли триметилхлорсилан (82,8 мл, 0,652 ммоль) и перемешивали при той же температуре в течение 3 часов. Затем по каплям в течение 23 минут добавляли 2,76М раствор н-бутиллития в гексане (326 мл, 0,901 моль) и перемешивали при той же температуре в течение 40 минут. На завершающей стадии по каплям в течение 43 минут добавляли раствор 4-бром-2-метилбензальдегида (136 г, 0,683 ммоль) в ТГФ (890 мл) и перемешивали при той же температуре в течение 35 минут. Реакционную смесь разбавляли водой (3,1 л) и повышали температуру смеси до комнатной. После добавления толуола (3,1 л) органический слой отделяли и отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток (633 г) растворяли в метаноле (3,1 л) и добавляли к раствору метансульфоновую кислоту (4,03 мл, 0,0621 моль), после чего нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, нейтрализовали триэтиламином (17,3 мл, 0,124 моль) и затем концентрировали. Концентрированный продукт (413 г) растворяли в толуоле (1,1 л) и три раза промывали водой (1,65 л). Органический слой разбавляли толуолом (0,55 л) и экстрагировали 1М водным раствором гидроксида натрия (0,55 л). Водный слой промывали толуолом (1,65 л) и подкисляли добавлением 2М водного раствора хлористоводородной кислоты (0,43 л). Полученный водный слой экстрагировали толуолом (1,1 л). Органический слой промывали 10% водным раствором хлорида натрия (1,1 л), после чего отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток (273 г) растворяли в ТГФ (1,01 л). К этому раствору добавляли диизопропилэтиламин (776 мл, 4,53 моль), уксусный ангидрид (381 мл, 4,03 моль) и 4-диметиламинопиридин (615 мг, 5,04 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 21 часа. Полученную реакционную смесь охлаждали льдом и добавляли к ней воду (1,0 л) и толуол (1,0 л). Органический слой отделяли и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1,0 л), после чего отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток (390 г) растворяли в ацетонитриле (3,85 л). К этому раствору добавляли воду (9,07 мл, 0,504 моль) и t-BuMe₂SiH (334 мл, 2,02 моль) и охлаждали полученную смесь льдом, после чего по каплям в течение 30 минут добавляли TMSOTf (392 мл, 2,17 моль). После перемешивания при той же температуре в течение 1 часа по каплям в течение 10 минут добавляли уксусный ангидрид (95,2 мл, 1,01 моль) и перемешивали при той же температуре в течение еще 15 минут. К полученной реакционной смеси добавляли толуол (3,85 мл) и 3% водный раствор бикарбоната натрия (1,92 л). Органический слой отделяли и промывали 3% водным раствором бикарбоната натрия (1,92 л) и 10% водным раствором хлорида натрия (1,92 л), после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения высушивающего вещества фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении и полученный остаток кристаллизовали из 2-пропанола (1,42 л). Полученный осадок выделяли фильтрованием, получая промежуточное соединение (A) (201 г, 47%; 4 стадии) в виде бесцветного порошка.

Справочный пример 2: Получение промежуточного соединения (B)

Схема 20

(1) Справочный пример 2-1: Соединение (B1)

Схема 21

К суспензии соединения (A1) (27,4 г, 0,104 моль) и карбоната калия (21,7 г, 0,156 моль) в ацетонитриле (200 мл), добавляли метилиодид (9,8 мл, 0,156 моль) и перемешивали при 40°C в течение 2,5 часов. Затем добавляли дополнительную порцию метилиодида (3,5 мл, 0,052 моль) и перемешивали при той же температуре в течение 1 часа. Нерастворимые продукты отделяли фильтрованием и фильтрат разбавляли этилацетатом. Органический слой промывали водой, 10% водным раствором тиосульфата натрия и насыщенным раствором соли, после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан→гексан:этилацетат=95:5), получая соединение (B1) (24,5 г, 85%) в виде светло-желтого масла.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,24 (д, J=6,84 Гц, 6H), 2,87 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 3,88 (с, 3H), 6,58-6,65 (м, 1H), 6,70 (д, J=1,87 Гц, 1H), 7,65 (д, J=8,08 Гц, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 277[M+H]⁺.

(2) Справочный пример 2-2: Соединение (B2)

Схема 22

К раствору соединения (B1) (24,5 г, 88,6 ммоль) в ТГФ (100 мл) при -78°C по каплям в атмосфере азота добавляли 2,6М раствор н-бутилития в гексане (34 мл, 88,6 ммоль) и перемешивали при этой температуре в течение 5 минут. Затем по каплям в течение 25 минут добавляли раствор 2,3,4,6-тетра-O-триметилсилил-D-глюконо-1,5-лактона (37,6 г, 80,5 ммоль) в ТГФ (60 мл) и перемешивали при той же температуре в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляли воду со льдом, температуру смеси повышали до комнатной и затем экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток растворяли в растворе метансульфоновой кислоты (1,55 г, 16,1 ммоль) в метаноле (380 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После нейтрализации триэтиламином (11,2 мл, 80,5 ммоль) концентрировали реакционную смесь.

Полученный остаток (30,2 г) растворяли в пиридине (100 мл). К этому раствору добавляли уксусный ангидрид (100 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. После добавления ледяной воды (400 мл) смесь дважды экстрагировали этилацетатом (200 мл). Объединенные органические слои промывали 1М водным раствором хлористоводородной кислоты, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан→гексан:этилацетат=6:4), получая соединение (B2) (32,8 г, 80%; 3 стадии) в виде светло-желтого масла.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,23 (д, J=6,92 Гц, 6H), 1,84 (с, 3H), 1,97 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,10 (с, 3H), 2,87 (септет, J=6,92 Гц, 1H), 3,32 (с, 3H), 3,87 (с, 3H), 4,04 (ддд, J=10,18, 4,74, 2,41 Гц, 1H), 4,17-4,23 (м, 1H), 4,28-4,36 (м, 1H), 5,25 (дд, J=10,18, 9,40 Гц, 1H), 5,36 (д, J=10,18 Гц, 1H), 5,60 (дд, J=10,18, 9,40 Гц, 1H), 6,74 (д, J=1,55 Гц, 1H), 6,79 (дд, J=8,08, 1,55 Гц, 1H), 7,26-7,33 (м, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 533[M+Na]⁺.

(3) Справочный пример 2-3: Соединение (B3)

Схема 23

К раствору соединения (B2) (32,8 г, 64,0 ммоль) в хлороформе (150 мл) и ацетонитриле (150 мл) при 4°C в атмосфере азота добавляли Et₃SiH (21 мл, 128 ммоль) и BF₃·Et₂O (49 мл, 385 ммоль) и перемешивали при этой температуре в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали хлороформом. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом натрия. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=2:1), получая соединение (B3) (22,9 г, 74%) в виде светло-желтой смолы.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,22 (д, J=6,99 Гц, 6H), 1,77 (с, 3H), 2,01 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,07 (с, 3H), 2,87 (септет, J=6,96 Гц, 1H), 3,80-3,87 (м, 1H), 3,84 (с, 3H), 4,09-4,16 (м, 1H), 4,22-4,29 (м, 1H), 4,88-4,95 (м, 1H), 5,18-5,27 (м, 1H), 5,32-5,38 (м, 2H), 6,71 (д, J=1,55 Гц, 1H), 6,83 (дд, J=7,93, 1,55 Гц, 1H), 7,23-7,30 (м, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 503[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 515[M+Cl]^-.

(4) Справочный пример 2-4: Соединение (B4)

Схема 24

Воспроизводя методику, аналогичную описанной в справочном примере 1-5, за исключением того, что соединение (A4) заменяли соединением (B3), получали соединение (B4) (25,5 г, 96%) в виде светло-желтого аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,20 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,23 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,80 (с, 3H), 2,01 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,09 (с, 3H), 3,31 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 3,77-3,82 (м, 1H), 3,83 (с, 3H), 4,10-4,17 (м, 1H), 4,22-4,30 (м, 1H), 4,83 (д, J=9,48 Гц, 1H), 5,17-5,38 (м, 3H), 6,75 (с, 1H), 7,49 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 581[M+Na]⁺, 583[M+2+Na]⁺.

(5) Справочный пример 2-5: Соединение (B5)

Схема 25

Воспроизводя методику, аналогичную описанной в справочном примере 1-6, за исключением того, что соединение (A5) заменяли соединением (B4), получали соединение (B5) (30,3 г) в виде коричневого масла. Полученное вещество использовали в следующей стадии без очистки.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: -0,32 (с, 9H), 0,09 (с, 9H), 0,18 (с, 9H), 0,20 (с, 9H), 1,19 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,23 (д, J=6,84 Гц, 3H), 3,26-3,44 (м, 3H), 3,52-3,58 (м, 2H), 3,65-3,75 (м, 3H), 3,76-3,83 (м, 1H), 3,80 (с, 3H), 4,60 (д, J=8,55 Гц, 1H), 6,72 (с, 1H), 7,51 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 701[M+Na]⁺, 703[M+2+Na]⁺.

(6) Справочный пример 2-6: Соединение (B6)

Схема 26

Воспроизводя методику, аналогичную описанной в справочном примере 1-7, за исключением того, что соединение (A6) заменяли соединением (B5), получали соединение (B6) (14,7 г, 60%) в виде коричневого аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,23 и 1,25 (каждый д, J=6,84 Гц, 6H), 1,80 (с, 2H), 2,27 и 2,29 (каждый с, 3H), 2,30-2,58 (м, 2H), 2,82-3,06 (м, 2H), 3,34 и 3,35 (каждый с, 3H), 3,38-3,86 (м, 6H), 4,56-4,73 (м, 1H), 5,53 (д, J=3,11 Гц, 1H), 6,75-7,35 (м, 5H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 493[M-OH]⁺, 495[M+2-OH]⁺.

(7) Справочный пример 2-7: промежуточное соединение (B)

Схема 27

Воспроизводя методику, аналогичную описанной в справочном примере 1-8, за исключением того, что соединение (A7) заменяли соединением (B6), получали промежуточное соединение (B) (14,2 г, 88%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,11 (д, J=6,68 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,68 Гц, 3H), 1,75 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,90 (септет, J=6,68 Гц, 1H), 3,71-3,90 (м, 3H), 3,86 (с, 3H), 3,85-3,87 (м, 1H), 4,05-4,15 (м, 1H), 4,19-4,28 (м, 1H), 4,77-4,85 (м, 1H), 5,11-5,23 (м, 1H), 5,26-5,37 (м, 2H), 6,54 (д, J=8,24 Гц, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 7,17 (дд, J=8,24, 2,64 Гц, 1H), 7,32 (д, J=2,64 Гц, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 685[M+Na]⁺, 687[M+2+Na]⁺.

Справочный пример 3: Получение промежуточного соединения (C)

Схема 28

Воспроизводя методики, аналогичные описанным в справочных примерах 1-7 и 1-8, за исключением того, что соединение (A6) заменяли соединением (B5) и 4-бром-2-метилбензальдегид заменяли 4-бромбензальдегидом, получали соединение (C) (2,26 г) в виде светло-желтого аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,04 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,09 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,76 (с, 3H), 2,01 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,91-3,06 (м, 1H), 3,80-3,88 (м, 4H), 3,91 (д, J=5,13 Гц, 2H), 4,06-4,18 (м, 1H), 4,20-4,31 (м, 1H), 4,82-4,93 (м, 1H), 5,15-5,43 (м, 3H), 6,77 (с, 1H), 6,92 (д, J=8,55 Гц, 2H), 7,11 (с, 1H), 7,36 (д, J=8,55 Гц, 2H).

Справочный пример 4: Получение промежуточного соединения (D)

Схема 29

(1) Справочный пример 4-1: Соединение (D1)

Схема 30

К раствору 2,2-диметил-3-бутеновой кислоты (J. Org. Chem., vol. 65, p.8402, 2000) (5,42 г, 47,5 ммоль) в хлороформе (250 мл) в атмосфере азота добавляли оксалилхлорид (4,43 мл, 49,9 ммоль) и N,N-диметилформамид (3 капли) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Затем реакционную смесь охлаждали льдом и добавляли к ней триэтиламин (19,9 мл, 143 ммоль) и гидрохлорид метилового эфира α-аминоизомасляной кислоты (10,9 г, 71,2 ммоль), после чего перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Полученную реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали хлороформом. Органический слой промывали 3М водным раствором хлористоводородной кислоты, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан→гексан:этилацетат=4:1), получая соединение (D1) (9,38 г, 93%) в виде бесцветного порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,27 (с, 6H), 1,51 (с, 6H), 3,73 (с, 3H), 5,17-5,32 (м, 2H), 6,02 (дд, J=17,56, 10,57 Гц, 1H), 6,25 (ушир.с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 214[M+H]⁺.

(2) Справочный пример 4-2: Промежуточное соединение (D)

Схема 31

К раствору соединения (D1) (9,38 г, 43,9 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли 4М водный раствор гидроксида натрия (16,5 мл, 66,0 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток растворяли в воде и нейтрализовали 3М водным раствором хлористоводородной кислоты. Образовавшуюся смесь экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении, получая промежуточное соединение (D) (8,19 г, 94%) в виде бесцветного порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,29 (с, 6H), 1,54 (с, 6H), 5,16-5,36 (м, 2H), 6,01 (дд, J=17,49, 10,65 Гц, 1H), 6,14 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 200[M+H]⁺, 222[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 198[M-H]^-.

Справочный пример 5: Получение промежуточного соединения (E)

Схема 32

В атмосфере аргона при 120°C и действии микроволнового излучения в течение 20 минут перемешивали суспензию промежуточного соединения (A) (5,0 г, 7,23 ммоль), промежуточного соединения (D) (2,59 г, 13,0 ммоль), ацетата палладия(II) (328 мг, 1,45 ммоль), три-O-толилфосфина (880 мг, 2,89 ммоль) и триэтиламина (3,0 мл, 9,00 ммоль) в ацетонитриле (24 мл). Реакционную смесь фильтровали через целит и промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат=1:1→этилацетат), получая промежуточное соединение (E) (4,59 г, 78%) в виде светло-желтого порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,16,1,18 (каждый д, J=6,84 Гц, каждый 3H), 1,40 (с, 6H), 1,54-1,58 (м, 6H), 1,76 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,36 (с, 3H), 2,98-3,10 (м, 1H), 3,71-3,79 (м, 1H), 3,94 (с, 2H), 4,01-4,08 (м, 1H), 4,24 (дд, J=12,43, 4,51 Гц, 1H), 4,47 (д, J=9,17 Гц, 1H), 5,07-5,32 (м, 3H), 6,31 (д, J=16,32 Гц, 1H), 6,35 (с, 1H), 6,55 (д, J=16,32 Гц, 1H), 6,77 (д, J=7,62 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 6,99 (с, 1H), 7,12-7,18 (м, 1H), 7,26 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 810[M+H]⁺, 832[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 808[M-H]^-.

Справочный пример 6: Получение промежуточного соединения (F)

Схема 33

Воспроизводя методику, описанную в справочном примере 5, за исключением того, что промежуточное соединение (A) заменяли промежуточным соединением (B), получали промежуточное соединение (F) (2,03 г, 87%) в виде желтого порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,17, 1,14 (каждый д, J=6,99 Гц, 3H), 1,38 (с, 6H), 1,55 (с, 6H), 1,76 (с, 3H), 1,98 (с, 3H), 2,04 (с, 6H), 2,30 (с, 3H), 2,94-3,03 (м, 1H), 3,76-3,83 (м, 1H), 3,84-3,95 (м, 4H), 4,06-4,15 (м, 1H), 4,16-4,25 (м, 1H), 4,81 (д, J=9,79 Гц, 1H), 5,12-5,20 (м, 1H), 5,23-5,35 (м, 2H), 6,29 (с, 1H), 6,31 (д, J=16,32 Гц, 1H), 6,52 (д, J=16,32 Гц, 1H), 6,67 (д, J=8,08 Гц, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,94 (с, 1H), 7,06-7,14 (м, 1H), 7,24 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 782[M+H]⁺, 804[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 780[M-H]^-.

Справочный пример 7: Получение промежуточного соединения (G)

Схема 34

Воспроизводя методику, описанную в справочном примере 5, за исключением того, что промежуточное соединение (A) заменяли промежуточным соединением (C), получали промежуточное соединение (G) (854 мг, 60%) в виде светло-желтого аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,08 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,12 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,38 (с, 6H), 1,53 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 2,00 (с, 3H), 2,05 (с, 6H), 3,06 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 3,78-3,83 (м, 1H), 3,84 (с, 3H), 3,97 (с, 2H), 4,07-4,18 (м, 1H), 4,17-4,27 (м, 1H), 4,87 (дд, J=6,76, 2,88 Гц, 1H), 5,16-5,25 (м, 1H), 5,27-5,40 (м, 2H), 6,18-6,33 (м, 2H), 6,54 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,77 (с, 1H), 7,03 (д, J=8,08 Гц, 2H), 7,10 (с, 1H), 7,29 (д, J=8,08 Гц, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 768[M+H]⁺, 790[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 766[M-H]^-.

Справочный пример 8: Получение промежуточного соединения (H)

Схема 35

В атмосфере аргона нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 3 часов суспензию промежуточного соединения (A) (216 г, 0,312 моль), 2,2-диметил-3-бутеновой кислоты (53,4 г, 0,467 моль), ацетата палладия(II) (3,50 г, 15,6 ммоль), три-O-толилфосфина (9,48 г, 31,2 ммоль) и триэтиламина (86,9 мл, 0,623 ммоль) в ацетонитриле (623 мл). Полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли хлороформом (300 мл) и метанолом (100 мл) и затем фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток растворяли в этилацетате (1,32 л). Этот раствор промывали 1М водным раствором хлористоводородной кислоты (0,96 л) и 10% водным раствором хлорида натрия (1,2 л) и после этого высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием фильтрат еще раз разбавляли этилацетатом (1,2 л), после чего добавляли изопропиламин (28,2 мл, 0,327 моль). Эту смесь перемешивали в течение 1 часа на ледяной бане. Выпавший осадок отделяли фильтрованием, получая соль изопропиламина и промежуточного соединения (H). Эту соль растворяли в этилацетате (1,2 л), добавляли 1М водный раствор хлористоводородной кислоты (500 мл) и перемешивали в течение 30 минут. Органический слой отделяли и промывали 10% водным раствором хлорида натрия (500 мл), после чего высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении, получая промежуточное соединение (H) (207 г, 88%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,13 (д, J=6,80 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,80 Гц, 3H), 1,43 (с, 6H), 1,76 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,98 (септет, J=6,80 Гц, 1H), 3,70-3,80 (м, 1H), 3,91 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,43, 2,18 Гц, 1H), 4,28 (дд, J=12,43, 4,35 Гц, 1H), 4,43-4,50 (м, 1H), 5,11-5,20 (м, 1H), 5,22-5,33 (м, 2H), 6,33-6,49 (м, 2H), 6,68 (д, J=7,93 Гц, 1H), 6,96 (с, 1H), 6,99 (с, 1H), 7,06-7,14 (м, 1H), 7,23 (д, J=1,40 Гц, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 747[M+Na]⁺.

Справочный пример 9: Получение промежуточного соединения (I)

Схема 36

2-аминоизомасляную кислоту (150 г, 1,45 моль) растворяли в воде (2,2 л) и добавляли к раствору карбонат натрия (465 г, 4,39 моль). Реакционную смесь охлаждали льдом и затем по каплям в течение 45 минут добавляли к ней раствор бензилхлорформиата (227 мл, 1,60 моль) в 1,4-диоксане (0,63 л), так чтобы внутренняя температура смеси не превышала 10°C. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре к реакционной смеси добавляли воду (3,5 л) и толуол (1,0 л). Отделяли водный слой, к которому затем по каплям добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту (700 мл) до достижения pH 1. Добавляли этилацетат (1,0 л) и перемешивали в течение 1 часа. Органический слой отделяли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении.

Полученный остаток (338 г) растворяли в хлороформе (1,7 л). К этому раствору порциями при охлаждении льдом добавляли N,N'-карбонилдиимидазол (CDI) (253 г, 1,56 моль), так, чтобы внутренняя температура не превышала 20°C. После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 минут реакционную смесь вновь охлаждали льдом и по каплям в течение 25 минут добавляли к ней 1,2-диамино-2-метилпропан (138 г, 1,56 моль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре добавляли 10% водный раствор карбоната калия (1,7 л). Органический слой отделяли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток (417 г) растворяли в ТГФ (2,0 л). К этому раствору добавляли Boc₂O (355 г, 1,63 моль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Затем к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (1,0 л) и органический слой отделяли и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении.

Полученный остаток (549 г) растворяли в метаноле (2,75 л). К этому раствору добавляли 10% гидроксид палладия (27,5 г) и перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После фильтрования реакционной смеси через целит растворитель отгоняли при пониженном давлении и полученный остаток кристаллизовали из смеси гептан:этилацетат 2:1 (1,75 л). Полученный осадок отделяли фильтрованием, получая промежуточное соединение (I) (193 г, 53%; 4 стадии) в виде бесцветного порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,27 (с, 6H), 1,37 (с, 6H), 1,43 (с, 9H), 1,53 (ушир.с, 2H), 3,39 (д, J=6,53 Гц, 2H), 4,78 (ушир.с, 1H), 8,04 (ушир.с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 274[M+H]⁺, 296[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 308[M+Cl]^-.

Пример 1-1

Схема 37

К раствору промежуточного соединения (E) (200 мг, 0,25 ммоль), моногидрата 1-гидроксибензотриазола (HOBt·H₂O) (57 мг, 0,37 ммоль) и N,N-диметилэтилендиамина (65 мг, 0,74 ммоль) в N,N-диметилформамиде (3,0 мл) добавляли гидрохлорид N-этил-N'-3-диметиламинопропилкарбодиимида (EDC·HCl) (71 мг, 0,37 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов. Полученную реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ→хлороформ:метанол=9:1), получая соединение (1-1) (132 мг, 61%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,13, 1,15 (каждый д, J=6,92 Гц, каждый 3H), 1,38 (с, 6H), 1,53 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,23 (с, 6H), 2,31 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,41 (т, J=5,67 Гц, 2H), 2,90-3,03 (м, 1H), 3,25-3,34 (м, 2H), 3,71-3,80 (м, 1H), 3,92 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,59, 2,18 Гц, 1H), 4,23-4,32 (м, 1H), 4,44-4,52 (м, 1H), 5,11-5,20 (м, 1H), 5,22-5,33 (м, 2H), 6,33 (д, J=16,63 Гц, 1H), 6,41 (ушир.с, 1H), 6,51 (д, J=16,63 Гц, 1H), 6,68 (д, J=7,77 Гц, 1H), 6,77 (ушир.с, 1H), 7,00 (с, 2H), 7,12 (д, J=7,77 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 880[M+H]⁺, 902[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 914[M+Cl]^-.

Пример 1-2

Схема 38

К раствору соединения (1-1) (127 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (2,0 мл) добавляли метоксид натрия (4,88 М/MeOH, 10 мкл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Для нейтрализации реакционной смеси добавляли небольшое количество сухого льда и отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле NH-типа (хлороформ:метанол=9:1→6:4), получая соединение (1-2) (77 мг, 80%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,10 (д, J=6,92 Гц, 6H), 1,36 (с, 6H), 1,45 (с, 6H), 2,23 (с, 6H), 2,31 (с, 3H), 2,40 (т, J=6,88 Гц, 2H), 2,87-2,96 (м, 1H), 3,28 (т, J=6,88 Гц, 2H), 3,34-3,41 (м, 2H), 3,43-3,50 (м, 1H), 3,51-3,57 (м, 1H), 3,67 (дд, J=12,15, 2,52 Гц, 1H), 3,84 (д, J=11,46 Гц, 1H), 3,89 (с, 2H), 4,47 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,39 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,50 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,75 (д, J=8,25 Гц, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 7,11 (д, J=8,25 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 670[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 668[M-H]^-, 704[M+Cl]^-;

Данные элементного анализа: вычислено для C₃₇H₅₅N₃O₈·1,4H₂O: C 63,94; H 8,38; N 6,05; найдено: C 64,13; H 8,39; N 5,88.

Пример 2-1

Схема 39

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что N,N-диметилэтилендиамин заменяли пиперазином, получая соединение (2-1) (103 мг, 47%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,14, 1,16 (каждый д, J=6,99 Гц, каждый 3H), 1,38 (с, 6H), 1,61 (с, 6H), 1,71 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,79-2,87 (м, 4H), 2,87-2,99 (м, 1H), 3,56-3,66 (м, 4H), 3,75-3,94 (м, 3H), 4,12-4,20 (м, 1H), 4,25-4,34 (м, 1H), 4,44-4,52 (м, 1H), 5,23-5,32 (м, 3H), 6,30 (д, J=16,32 Гц, 1H), 6,48 (д, J=16,32 Гц, 1H), 6,53 (с, 1H), 6,68 (д, J=7,77 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 7,05-7,12 (м, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 836[M+H]⁺, 858[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 834[M-H]^-, 870[M+Cl]^-.

Пример 2-2

Схема 40

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (2-1), получая соединение (2-2) (52 мг, 66%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,10 (д, J=6,42 Гц, 6H), 1,36 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 2,31 (с, 3H), 2,70 (ушир.с, 4H), 2,90-2,95 (м, 1H), 3,36-3,39 (м, 2H), 3,43-3,61 (м, 7H), 3,65-3,69 (м, 1H), 3,84 (д, J=11,92 Гц, 1H), 3,88 (с, 2H), 4,46 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,38 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,47 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,76 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 7,10 (д, J=7,79 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 668[M+H]⁺, 690[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 666[M-H]^-, 702[M+Cl]^-.

Пример 3-1

Схема 41

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что N,N-диметилэтилендиамин заменяли 1-метилпиперазином, получая соединение (3-1) (135 мг, 61%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,13, 1,15 (каждый д, J=6,84 Гц, каждый 3H), 1,37 (с, 6H), 1,60 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,33-2,41 (м, 7H), 2,88-3,04 (м, 1H), 3,60-3,70 (м, 4H), 3,72-3,80 (м, 1H), 3,92 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,59, 2,33 Гц, 1H), 4,27 (дд, J=12,59, 4,51 Гц, 1H), 4,43-4,54 (м, 1H), 5,10-5,20 (м, 1H), 5,22-5,32 (м, 2H), 6,31 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,49 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,68 (д, J=8,08 Гц, 1H), 6,86 (с, 1H), 7,00 (с, 2H), 7,08-7,14 (м, 1H), 7,24 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 892[M+H]⁺, 914[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 926[M+Cl]^-.

Пример 3-2

Схема 42

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (3-1), получая соединение (3-2) (79 мг, 79%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,10 (д, J=6,88 Гц, 6H), 1,37 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 2,16 (с, 3H), 2,22-2,38 (м, 7H), 2,87-2,96 (м, 1H), 3,35-3,41 (м, 2H), 3,42-3,51 (м, 2H), 3,51-3,56 (м, 1H), 3,56-3,71 (м, 5H), 3,84 (д, J=12,38 Гц, 1H), 3,88 (с, 2H), 4,47 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,38 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,46 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,75 (д, J=8,25 Гц, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 7,09 (д, J=8,25 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 682[M+H]⁺, 704[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 680[M-H]^-, 716[M+Cl]^-.

Пример 4-1

Схема 43

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что N,N-диметилэтилендиамин заменяли 1-этилпиперазином, получая соединение (4-1A) (87,9 мг, 38%) в виде бесцветной смолы и соединение (4-1B) (42,9 мг, 19%) в виде бесцветной смолы.

Соединение (4-1A)

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,07 (т, J=7,23 Гц, 3H), 1,12-1,16 (м, 6H), 1,37 (с, 6H), 1,61 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,34-2,44 (м, 9H), 2,90-3,05 (м, 1H), 3,60-3,72 (м, 4H), 3,72-3,80 (м, 1H), 3,92 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,36, 1,94 Гц, 1H), 4,27 (дд, J=12,36, 4,43 Гц, 1H), 4,48 (д, J=9,79 Гц, 1H), 5,15 (т, J=9,79 Гц, 1H), 5,22-5,31 (м, 2H), 6,31 (д, J=16,2 Гц, 1H), 6,49 (д, J=16,2 Гц, 1H), 6,68 (д, J=8,08 Гц, 1H), 6,86-6,93 (м, 1H), 7,00 (с, 2H), 7,11 (д, J=8,08 Гц, 1H), 7,24 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 907[M+H]⁺, 929[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 941[M+Cl]^-.

Соединение (4-1B)

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,03-1,19 (м, 9H), 1,37 (с, 6H), 1,62 (с, 6H), 1,71 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,12 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,33-2,46 (м, 6H), 2,93 (септет, J=6,76 Гц, 1H), 3,58-3,71 (м, 4H), 3,73-3,91 (м, 3H), 4,12-4,21 (м, 1H), 4,24-4,34 (м, 1H), 4,48 (д, J=9,17 Гц, 1H), 5,21-5,34 (м, 3H), 6,30 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,48 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,53 (с, 1H), 6,68 (д, J=7,93 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 6,99 (с, 1H), 7,08 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 865[M+H]⁺, 887[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 899[M+Cl]^-.

Пример 4-2

Схема 44

К соединению (4-1A) (87,9 мг, 0,0973 ммоль) и соединению (4-1B) (42,9 мг, 0,0486 ммоль) добавляли смесь триэтиламин/вода/метанол (1/1/5, 5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и отгоняли растворитель при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ→хлороформ:метанол=8:2), получая соединение (4-2) (79,2 мг, 78%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 0,98 (т, J=7,23 Гц, 3H), 1,10 (д, J=6,88 Гц, 6H), 1,36 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 2,23-2,42 (м, 9H), 2,85-2,99 (м, 1H), 3,35-3,41 (м, 2H), 3,42-3,48 (м, 1H), 3,50-3,56 (м, 1H), 3,55-3,71 (м, 5H), 3,81-3,90 (м, 3H), 4,47 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,39 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,46 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,71-6,77 (м, 1H), 6,80 (с, 1H), 6,98 (с, 1H), 7,09 (д, J=7,79 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 696[M+H]⁺, 718[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 694[M-H]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₃₉H₅₇N₃O₈·1,2H₂O: C 65,3; H 8,34; N 5,86; найдено: C 65,3; H 8,36; N 5,68.

Пример 5-1

Схема 45

К раствору промежуточного соединения (E) (205 мг, 0,253 ммоль), HOBt·H₂O (68 мг, 0,506 ммоль) и 4-диметиламинопиперидина (65 мг, 0,506 ммоль) в N,N-диметилформамиде (2,0 мл) добавляли EDC·HCl (97 мг, 0,506 ммоль) и перемешивали при 70°C в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором соли (20 мл) и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ→хлороформ:метанол=3:1), получая соединение (5-1) (80 мг, 34%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,13 (д, J=6,76 Гц, 3H), 1,15 (д, J=6,76 Гц, 3H), 1,30-1,49 (м, 2H), 1,38 (с, 6H), 1,61 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,84 (д, J=12,75 Гц, 2H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,27 (с, 6H), 2,30 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,81 (т, J=12,28 Гц, 2H), 2,97 (септет, J=6,76 Гц, 1H), 3,76 (ддд, J=10,03, 4,66, 2,25 Гц, 1H), 3,92 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,43, 2,25 Гц, 1H), 4,28 (дд, J=12,43, 4,66 Гц, 1H), 4,33-4,53 (м, 3H), 5,10-5,34 (м, 3H), 6,31 (д, J=15,00 Гц, 1H), 6,50 (д, J=15,00 Гц, 1H), 6,68 (д, J=8,08 Гц, 1H), 6,97-7,04 (м, 2H), 7,11 (д, J=8,08 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 920[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 954[M+Cl]^-.

Пример 5-2

Схема 46

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (5-1), получая соединение (5-2) (33 мг, 53%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,08 (д, J=6,42 Гц, 6H), 1,21-1,32 (м, 2H), 1,35 (с, 6H), 1,43 (с, 6H), 1,73 (ушир.с, 2H), 2,16 (с, 6H), 2,28 (с, 3H), 2,28-2,37 (м, 1H), 2,89 (септет, J=6,42 Гц, 1H), 3,31-3,33 (м, 2H), 3,44 (т, J=8,71 Гц, 1H), 3,48-3,56 (м, 1H), 3,66 (дд, J=11,92, 2,75 Гц, 1H), 3,83 (д, J=11,92 Гц, 1H), 3,86 (с, 2H), 4,45 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,35-6,41 (м, 1H), 6,43-6,47 (м, 1H), 6,72 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,78 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 7,08 (д, J=7,79 Гц, 1H), 7,21 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 710[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 708[M-H]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₄₀H₅₉N₃O₈·1,5H₂O: C 65,19; H 8,50; N 5,70; найдено: C 64,81; H 8,46; N 5,61.

Пример 6-1

Схема 47

К раствору промежуточного соединения (E) (680 мг, 0,746 ммоль) в хлороформе (5,0 мл) добавляли CDI (182 мг, 1,12 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли 1,2-диамино-2-метилпропан (79 мг, 0,895 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Полученную реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и дважды экстрагировали хлороформом. Объединенные органические слои высушивали над безводным сульфатом натрия. После отделения осушителя фильтрованием отгоняли растворитель при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ→хлороформ:метанол=85:15), получая соединение (6-1) (140 мг, 21%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,11-1,17 (м, 6H), 1,11 (с, 6H), 1,39 (с, 6H), 1,53 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,31 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,89-3,05 (м, 1H), 3,14 (д, J=5,91 Гц, 2H), 3,76 (ддд, J=9,71, 4,51, 2,10 Гц, 1H), 3,93 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,51, 2,10 Гц, 1H), 4,27 (дд, J=12,51, 4,51 Гц, 1H), 4,49 (д, J=7,46 Гц, 1H), 5,11-5,20 (м, 1H), 5,23-5,31 (м, 2H), 6,26 (с, 1H), 6,29-6,38 (м, 1H), 6,48-6,57 (м, 1H), 6,69 (д, J=7,93 Гц, 1H), 6,97-7,03 (м, 3H), 7,12 (д, J=7,93 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 880[M+H]⁺.

Пример 6-2

Схема 48

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (6-1), получая соединение (6-2) (104 мг, 98%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,02 (с, 6H), 1,05-1,10 (м, 6H), 1,35 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 2,29 (с, 3H), 2,85-2,93 (м, 1H), 3,09 (с, 2H), 3,34-3,39 (м, 2H), 3,42-3,47 (м, 1H), 3,52 (т, J=9,40 Гц, 1H), 3,63-3,69 (м, 1H), 3,80-3,85 (м, 1H), 3,86 (с, 2H), 4,46 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,35-6,41 (м, 1H), 6,44-6,51 (м, 1H), 6,73 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,78 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 7,06-7,10 (м, 1H), 7,23 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 670[M+H]⁺, 692[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 668[M-H]^-, 704[M+Cl]^-.

В качестве альтернативы, соединение (6-2) можно также синтезировать, как описано в приведенных ниже примерах 6-3 и 6-4.

Пример 6-3

Схема 49

К раствору промежуточного соединения (H) (205 г, 0,273 моль), промежуточного соединения (I) (97,0 г, 0,355 моль), HOBt·H₂O (62,7 г, 0,410 моль) и триэтиламина (114 мл, 0,819 моль) в N,N-диметилформамиде (1,98 л), добавляли EDC·HCl (78,5 г, 0,410 моль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 11 часов. К этой реакционной смеси добавляли толуол (1,0 л) и 10% водный раствор хлорида натрия (2,0 л) и отделяли органический слой. Водный слой экстрагировали толуолом (1,0 л), объединенные органические слои промывали 5% водным раствором хлорида натрия (1,0 л) и высушивали над безводным сульфатом магния. После отделения осушителя фильтрованием растворитель отгоняли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 2-пропаноле (300 мл) при 50°C и по каплям добавляли к раствору гептан (2,7 л). Смесь перемешивали в течение 1 часа, охлаждая льдом, и образовавшийся осадок отделяли фильтрованием, получая соединение (6-3) (221 г, 83%) в виде бесцветного порошка.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,13 (д, J=6,88 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,88 Гц, 3H), 1,26 (с, 6H), 1,39 (с, 6H), 1,44 (с, 9H), 1,55 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,30 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,97 (септет, J=6,88 Гц, 1H), 3,41 (д, J=5,60 Гц, 2H), 3,72-3,80 (м, 1H), 3,92 (с, 2H), 4,05 (дд, J=12,43, 2,02 Гц, 1H), 4,28 (дд, J=12,43, 4,51 Гц, 1H), 4,45-4,52 (м, 1H), 4,65 (с, 1H), 5,11-5,19 (м, 1H), 5,22-5,33 (м, 2H), 6,29-6,39 (м, 1H), 6,46-6,57 (м, 2H), 6,69 (д, J=8,00 Гц, 1H), 6,96-7,03 (м, 2H), 7,11 (дд, J=8,00, 1,63 Гц, 1H), 7,24-7,26 (м, 1H), 7,59 (ушир.с, 1H).

Пример 6-4

К раствору соединения (6-3) (220 г, 0,225 моль) в хлороформе (3,0 л) при комнатной температуре по каплям в течение 10 минут добавляли трифторуксусную кислоту (297 мл, 3,88 моль) и перемешивали при этой температуре в течение 20 часов. Реакционную смесь разбавляли толуолом (3,0 л) и концентрировали. Концентрированный продукт растворяли в этилацетате (3,0 л) и промывали 10% водным раствором карбоната натрия (1,2 л) и насыщенным раствором соли (1,0 л), после чего отгоняли растворитель при пониженном давлении.

Полученный остаток (240 г) растворяли в метаноле (1,5 л) и охлаждали льдом, после чего добавляли триэтиламин (0,3 л) и воду (0,3 л). После перемешивания при комнатной температуре в течение 13 часов добавляли дополнительную порцию метанола (1,5 л), триэтиламина (0,3 л) и воды (0,3 л) и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. Реакционную смесь концентрировали и выпаривали совместно с метанолом. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле NH-типа (этилацетат:этанол:вода=15:2:1 → 10:2:1), получая соединение (6-2) (129 г, 86%; 2 стадии) в виде бесцветного аморфного вещества.

Пример 7-1

Схема 50

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-1, за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F), получая соединение (7-1) (112 мг, 74%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,12, 1,14 (каждый д, J=6,84 Гц, каждый 3H), 1,37 (с, 6H), 1,51 (с, 6H), 1,76 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,23 (с, 6H), 2,32 (с, 3H), 2,41 (т, J=6,22 Гц, 2H), 2,86-2,99 (м, 1H), 3,25-3,33 (м, 2H), 3,76-3,90 (м, 6H), 4,07-4,15 (м, 1H), 4,18-4,26 (м, 1H), 4,76-4,85 (м, 1H), 5,13-5,22 (м, 1H), 5,26-5,36 (м, 2H), 6,31 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,37 (с, 1H), 6,50 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,61-6,67 (м, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,99 (с, 1H), 7,06-7,12 (м, 1H), 7,24 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 852[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 886[M+Cl]^-.

Пример 7-2

Схема 51

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (7-1), получая соединение (7-2) (69 мг, 78%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,13, 1,15 (каждый д, J=6,84 Гц, каждый 3H), 1,36 (с, 6H), 1,45 (с, 6H), 2,21 (с, 6H), 2,32 (с, 3H), 2,39 (т, J=6,88 Гц, 2H), 2,93-3,02 (м, 1H), 3,24-3,39 (м, 4H), 3,42-3,48 (м, 1H), 3,49-3,54 (м, 1H), 3,58-3,65 (м, 1H), 3,80-3,87 (м, 4H), 3,91 (с, 2H), 4,61 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,39 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,50 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,73 (д, J=7,80 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 7,08 (с, 1H), 7,10 (д, J=7,80 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 684[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 682[M-H]^-, 718[M+Cl]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₃₈H₅₇N₃O₈·1,7H₂O: C 63,88; H 8,52; N 5,88; найдено: C 63,84; H 8,41; N 5,75.

Пример 8-1

Схема 52

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-1, за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли N-трет-бутоксикарбонилэтилендиамином, получая соединение (8-1) (145 мг, 89%) в виде бесцветного аморфного вещества.

МС ESI/APCI Двойной положительный: 924[M+H]⁺, 946[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 958[M+Cl]^-.

Пример 8-2

Схема 53

К раствору соединения (8-1) в хлороформе (3,0 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (600 мкл) и перемешивали при комнатной температуре 3 часа. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ:метанол=95:5→60:40), получая соединение (8-2) (68 мг, 55%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,14, 1,16 (каждый д, J=6,37 Гц, каждый 3H), 1,32 (с, 6H), 1,42 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,98 (с, 3H), 2,03 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,32 (с, 3H), 2,90-3,02 (м, 1H), 3,22-3,34 (м, 2H), 3,48-3,57 (м, 2H), 3,76-3,96 (м, 6H), 4,07-4,14 (м, 1H), 4,17-4,25 (м, 1H), 4,79-4,87 (м, 1H), 5,12-5,22 (м, 1H), 5,24-5,36 (м, 2H), 6,32 (с, 1H), 6,40 (д, J=16,63 Гц, 1H), 6,51 (д, J=16,63 Гц, 1H), 6,65 (д, J=8,55 Гц, 1H), 6,82 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 7,07-7,13 (м, 1H), 7,28-7,31 (м, 1H), 8,04 (ушир.с, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 824[M+H]⁺, 846[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 858[M+Cl]^-.

Пример 8-3

Схема 54

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-2, за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (8-2), получая соединение (8-3) (22 мг, 44%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,13, 1,15 (каждый д, J=6,84 Гц, каждый 3H), 1,36 (с, 6H), 1,45 (с, 6H), 2,32 (с, 3H), 2,63-2,71 (м, 2H), 2,94-3,03 (м, 1H), 3,23 (т, J=5,96 Гц, 2H), 3,28-3,39 (м, 4H), 3,43-3,48 (м, 1H), 3,48-3,54 (м, 1H), 3,62 (дд, J=12,15, 5,73 Гц, 1H), 3,79-3,88 (м, 2H), 3,92 (с, 2H), 4,61 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,40 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,50 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,74 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 7,07 (с, 1H), 7,11 (д, J=7,79 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 656[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 654[M-H]^-, 690[M+Cl]^-.

Пример 9-1

Схема 55

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-1, за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли пиперазином, получая соединение (9-1) (42 мг, 38%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,12, 1,14 (каждый д, J=6,99 Гц, каждый 3H), 1,37 (с, 6H), 1,58 (с, 6H), 1,76 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,32 (с, 3H), 2,79-2,86 (м, 4H), 2,88-2,99 (м, 1H), 3,57-3,64 (м, 4H), 3,76-3,95 (м, 6H), 4,07-4,14 (м, 1H), 4,18-4,26 (м, 1H), 4,77-4,84 (м, 1H), 5,13-5,22 (м, 1H), 5,26-5,37 (м, 2H), 6,29 (д, J=16,16 Гц, 1H), 6,49 (д, J=16,16 Гц, 1H), 6,64 (д, J=7,93 Гц, 1H), 6,77-6,83 (м, 2H), 6,99 (с, 1H), 7,05-7,11 (м, 1H), 7,22 (ушир.с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 850[M+H]⁺, 872[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 884[M+Cl]^-.

Пример 9-2

Схема 56

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-2, за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (9-1), получая соединение (9-2) (27 мг, 94%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,14, 1,16 (каждый д, J=6,42 Гц, каждый 3H), 1,36 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 2,32 (с, 3H), 2,69 (ушир.с, 4H), 2,95-3,03 (м, 1H), 3,28-3,38 (м, 2H), 3,42-3,52 (м, 2H), 3,53-3,65 (м, 5H), 3,80-3,84 (м, 1H), 3,84 (с, 3H), 3,92 (с, 2H), 4,61 (д, J=9,17 Гц, 1H), 6,39 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,47 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,74 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 7,06 (с, 1H), 7,10 (д, J=7,79 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 682[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 680[M-H]^-, 716[M+Cl]^-.

Пример 10-1

Схема 57

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-1, за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли N-метилпиперазином, получая неочищенное соединение (10-1) (100 мг) в виде бесцветного аморфного вещества. Полученный продукт использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,12 (д, J=8,5 Гц, 3H), 1,15 (д, J=8,5 Гц, 3H), 1,36 (с, 6H), 1,56 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 6H), 2,30 (с, 3H), 2,32 (с, 3H), 2,38-2,50 (м, 4H), 2,85-3,02 (м, 1H), 3,61-3,74 (м, 4H), 3,76-3,84 (м, 1H), 3,81-3,96 (м, 1H), 3,86 (с, 3H), 4,07-4,15 (м, 1H), 4,18-4,27 (м, 1H), 4,75-4,88 (м, 1H), 5,11-5,24 (м, 1H), 5,26-5,37 (м, 2H), 6,22-6,38 (м, 1H), 6,43-6,54 (м, 1H), 6,59-6,70 (м, 2H), 6,81 (с, 1H), 6,96-7,02 (м, 1H), 7,04-7,12 (м, 1H), 7,20-7,26 (м, 1H).

Пример 10-2

Схема 58

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-2, за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (10-1), получая соединение (10-2) (8,0 мг, 9%; 2 стадии) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,09-1,16 (м, 6H), 1,35 (с, 6H), 1,42 (с, 6H), 2,12-2,16 (м, 3H), 2,23-2,33 (ушир.с, 4H), 2,30 (с, 3H), 2,92-3,01 (м, 1H), 3,28 (с, 2H), 3,30-3,38 (м, 1H), 3,41-3,51 (м, 2H), 3,55-3,66 (м, 5H), 3,78-3,86 (м, 4H), 3,90 (с, 2H), 4,59 (д, J=9,17 Гц, 1H), 6,33-6,39 (м, 1H), 6,42-6,47 (м, 1H), 6,72 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,90 (с, 1H), 7,04-7,11 (м, 2H), 7,19-7,24 (м, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 696[M+H]⁺, 718[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 694[M-H]^-, 730[M+Cl]^-.

Пример 11-1

Схема 59

Воспроизводили методику, описанную в примере 1-1, за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли 1-этилпиперазином, получая соединение (11-1) (200 мг, 89%) в виде светло-желтого аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,07 (т, J=7,23 Гц, 3H), 1,11 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,36 (с, 6H), 1,59 (с, 6H), 1,76 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,32 (с, 3H), 2,36-2,44 (м, 6H), 2,93 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 3,61-3,71 (м, 4H), 3,77-3,84 (м, 1H), 3,83-3,94 (м, 5H), 4,05-4,16 (м, 1H), 4,18-4,27 (м, 1H), 4,76-4,86 (м, 1H), 5,14-5,23 (м, 1H), 5,25-5,37 (м, 2H), 6,29 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,48 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,64 (д, J=7,62 Гц, 1H), 6,77-6,86 (м, 2H), 6,99 (с, 1H), 7,08 (д, J=7,62 Гц, 1H), 7,22 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 879[M+H]⁺, 901[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 913[M+Cl]^-.

Пример 11-2

Схема 60

Воспроизводили методику примера 4-2 за исключением того, что соединения (4-1A) и (4-1B) заменяли соединением (11-1), получая соединение (11-2) (118 мг, 73%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 0,97 (т, J=7,11 Гц, 3H), 1,10-1,19 (м, 6H), 1,37 (с, 6H), 1,45 (с, 6H), 2,26-2,42 (м, 9H), 2,97 (септет, J=6,76 Гц, 1H), 3,32-3,40 (м, 2H), 3,43-3,48 (м, 1H), 3,48-3,55 (м, 1H), 3,55-3,72 (м, 5H), 3,79-3,89 (м, 4H), 3,91 (с, 2H), 4,61 (д, J=9,17 Гц, 1H), 6,39 (д, J=16,5 Гц, 1H), 6,46 (д, J=16,5 Гц, 1H), 6,73 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 7,04-7,14 (м, 2H), 7,23 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 710[M+H]⁺, 732[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 744[M+Cl]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₄₀H₅₉N₃O₈·1,5H₂O: C 65,2; H 8,48; N 5,70; найдено: C 65,1; H 8,38; N 5,64.

Пример 12-1

Схема 61

Воспроизводили методику, описанную в примере 5-1, за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F), получая соединение (12-1) (55 мг, 40%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,12, 1,14 (каждый д, J=6,92 Гц, каждый 3H), 1,28-1,47 (м, 8H), 1,60 (с, 6H), 1,73-1,89 (м, 5H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,04 (с, 3,H), 2,22-2,35 (м, 10H), 2,73-2,99 (м, 3H), 3,76-3,84 (м, 1H), 3,84-3,90 (м, 5H), 4,07-4,15 (м, 1H), 4,18-4,26 (м, 1H), 4,34-4,50 (м, 2H), 4,75-4,86 (м, 1H), 5,13-5,23 (м, 1H), 5,26-5,39 (м, 2H), 6,30 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,48 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,63 (д, J=8,39 Гц, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,94-7,01 (м, 2H), 7,04-7,11 (м, 1H), 7,23 (с, 1H.

МС ESI/APCI Двойной положительный: 892[M+H]⁺, 914[M+Na]⁺;

Пример 12-2

Схема 62

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (12-1), получая соединение (12-2) (55 мг, 82%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,13, 1,15 (каждый д, J=6,84 Гц, каждый 3H), 1,24-1,33 (м, 2H), 1,37 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 1,75 (ушир.с, 2H), 2,17 (с, 6H), 2,30-2,39 (м, 4H), 2,93-3,01 (м, 1H), 3,28-3,38 (м, 5H), 3,43-3,47 (м, 1H), 3,47-3,53 (м, 1H), 3,62 (дд, J=12,15, 5,73 Гц, 1H), 3,80-3,86 (м, 3H), 3,91 (с, 2H), 4,48 (ушир.с, 2H), 4,61 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,40 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,47 (д, J=16,05 Гц, 1H), 6,73 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 7,06-7,11 (м, 2H), 7,23 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 724[M+H]⁺, 746[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 722[M-H]^-, 758[M+Cl]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₄₁H₆₁N₃O₈·2,5H₂O: C 64,04; H 8,65; N 5,46; найдено: C 64,01; H 8,38; N 5,49.

Пример 13-1

Схема 63

Воспроизводили методику примера 6-1 за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F), получая соединение (13-1) (1,98 г, 99%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,10 (с, 6H), 1,12 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,36 (с, 6H), 1,56 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 6H), 2,30 (с, 3H), 2,85-3,02 (м, 1H), 3,13 (д, J=5,91 Гц, 2H), 3,76-3,84 (м, 1H), 3,81-3,96 (м, 1H), 3,86 (с, 3H), 4,07-4,15 (м, 1H), 4,18-4,27 (м, 1H), 4,75-4,88 (м, 1H), 5,11-5,24 (м, 1H), 5,26-5,37 (м, 2H), 6,22-6,38 (м, 1H), 6,43-6,54 (м, 1H), 6,59-6,70 (м, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,96-7,02 (м, 2H), 7,04-7,12 (м, 1H), 7,20-7,26 (м, 1H).

Пример 13-2

Схема 64

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (13-1), получая соединение (13-2) (1,0 г, 65%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,01 (с, 6H), 1,09-1,15 (м, 6H), 1,35 (с, 6H), 1,43 (с, 6H), 2,31 (с, 3H), 2,91-3,00 (м, 1H), 3,08 (с, 2H), 3,27-3,36 (м, 5H), 3,41-3,46 (м, 1H), 3,47-3,52 (м, 1H), 3,60 (дд, J=11,92, 5,96 Гц, 1H), 3,80-3,84 (м, 4H), 3,90 (с, 2H), 4,59 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,36-6,41 (м, 1H), 6,45-6,50 (м, 1H), 6,71 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,90 (с, 1H), 7,06 (с, 1H), 7,07-7,10 (м, 1H), 7,20-7,25 (м, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 684[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 682[M-H]^-, 718[M+Cl]^-.

Пример 14-1

Схема 65

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (F) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли 4-амино-1-трет-бутоксикарбонилпиперидином, получая соединение (14-1) (200 мг, количественный выход) в виде светло-желтого масла.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,11 (д, J=6,99 Гц, 3H), 1,14 (д, J=6,99 Гц, 3H), 1,25-1,33 (м, 2H), 1,36 (с, 6H), 1,45 (с, 9H), 1,48 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 1,79-1,93 (м, 2H), 1,99 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,32 (с, 3H), 2,90-2,98 (м, 3H), 3,75-4,00 (м, 9H), 4,07-4,15 (м, 1H), 4,18-4,27 (м, 1H), 4,79-4,86 (м, 1H), 5,19 (д, J=10,10 Гц, 1H), 5,26-5,35 (м, 2H), 6,09 (с, 1H), 6,26 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,50 (д, J=16,48 Гц, 1H), 6,65 (д, J=8,32 Гц, 1H), 6,74-6,83 (м, 2H), 6,99 (с, 1H), 7,08 (дд, J=8,32, 2,72 Гц, 1H), 7,22 (д, J=2,72 Гц, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 965[M+H]⁺, 987[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 999[M+Cl]^-.

Пример 14-2

Схема 66

К раствору соединения (14-1) (185 мг, 0,192 ммоль) в хлороформе (2 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (450 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и отгоняли растворитель при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли смесь триэтиламин/вода/метанол (1/1/5, 4 мл) и перемешивали реакционную смесь в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель отгоняли при пониженном давлении и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ→хлороформ:метанол=8:2), получая соединение (14-2) (103 мг, 77%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,14 (д, J=5,50 Гц, 3H), 1,15 (д, J=5,50 Гц, 3H), 1,27-1,35 (м, 2H), 1,37 (с, 6H), 1,45 (с, 6H), 1,78 (д, J=11,46 Гц, 2H), 2,33 (с, 3H), 2,56-2,68 (м, 2H), 2,95-3,03 (м, 3H), 3,33-3,37 (м, 2H), 3,43-3,48 (м, 1H), 3,49-3,53 (м, 1H), 3,57-3,66 (м, 1H), 3,68-3,75 (м, 1H), 3,81-3,84 (м, 1H), 3,85 (с, 3H), 3,92 (с, 2H), 4,61 (д, J=9,17 Гц, 1H), 6,34-6,43 (м, 1H), 6,45-6,56 (м, 1H), 6,74 (д, J=7,79 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 7,04-7,16 (м, 2H), 7,26 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 696[M+H]⁺, 718[M+Na]⁺.

Пример 15-1

Схема 67

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (G), получая соединение (15-1) (103 мг, 94%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,05 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,10 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,38 (с, 6H), 1,49 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 2,00 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,46 (с, 6H), 2,64-2,78 (м, 2H), 3,04 (септет, J=6,84 Гц, 1H), 3,38-3,49 (м, 2H), 3,78-3,83 (м, 1H), 3,85 (с, 3H), 3,87-4,04 (м, 2H), 4,08-4,18 (м, 1H), 4,18-4,30 (м, 1H), 4,87 (д, J=9,48 Гц, 1H), 5,16-5,27 (м, 1H), 5,28-5,44 (м, 2H), 6,35 (с, 1H), 6,40-6,57 (м, 2H), 6,77 (с, 1H), 7,01 (д, J=8,24 Гц, 2H), 7,13 (с, 1H), 7,32 (д, J=8,24 Гц, 2H), 7,40 (с, 1H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 839[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 873[M+Cl]^-.

Пример 15-2

Схема 68

Воспроизводили методику примера 4-2 за исключением того, что соединения (4-1A) и (4-1B) заменяли соединением (15-1), получая соединение (15-2) (62,1 мг, 75%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,07 (д, J=6,76 Гц, 3H), 1,09 (д, J=6,76 Гц, 3H), 1,36 (с, 6H), 1,44 (с, 6H), 2,23 (с, 6H), 2,41 (т, J=6,88 Гц, 2H), 3,10 (септет, J=6,76 Гц, 1H), 3,26-3,30 (м, 2H), 3,35-3,45 (м, 2H), 3,45-3,52 (м, 1H), 3,54-3,60 (м, 1H), 3,62-3,69 (м, 1H), 3,79-3,89 (м, 4H), 3,99 (с, 2H), 4,65 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,39 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,52 (д, J=16,51 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 7,07 (д, J=8,25 Гц, 2H), 7,23 (с, 1H), 7,31 (д, J=8,25 Гц, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 670[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 704[M+Cl]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₃₇H₅₅N₃O₈·1,0H₂O: C 64,6; H 8,36; N 6,11; найдено: C 64,5; H 8,31; N 6,02.

Пример 16-1

Схема 69

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (G) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли пиперазином, получая соединение (16-1) (90 мг, 55%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,06 (д, J=6,6 Гц, 3H), 1,11 (д, J=6,6 Гц, 3H), 1,35 (с, 6H), 1,77 (с, 6H), 2,00 (с, 3H), 2,04 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,25 (ушир.с, 2H), 2,78-2,88 (м, 4H), 2,96-3,12 (м, 1H), 3,55-3,65 (м, 4H), 3,78-3,88 (м, 1H), 3,85 (с, 3H), 3,88-4,04 (м, 2H), 4,09-4,18 (м, 1H), 4,20-4,30 (м, 1H), 4,88 (д, J=9,48 Гц, 1H), 5,15-5,27 (м, 1H), 5,28-5,44 (м, 2H), 6,22-6,33 (м, 1H), 6,41-6,55 (м, 1H), 6,72-6,85 (м, 2H), 6,96-7,06 (м, 2H), 7,14 (с, 1H), 7,23-7,32 (м, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 836[M+H]⁺.

Пример 16-2

Схема 70

Воспроизводили методику примера 1-2 за исключением того, что соединение (1-1) заменяли соединением (16-1), получая соединение (16-2) (52 мг, 70%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,06 (д, J=6,80 Гц, 3H), 1,07 (д, J=6,80 Гц, 3H), 1,34 (с, 6H), 1,42 (с, 6H), 2,67 (ушир.с, 4H), 3,04-3,12 (м, 1H), 3,27-3,30 (м, 2H), 3,33-3,38 (м, 2H), 3,43-3,49 (м, 1H), 3,50-3,61 (м, 3H), 3,61-3,66 (м, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,83 (д, J=11,92 Гц, 1H), 3,92-4,00 (м, 2H), 4,63 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,33-6,39 (м, 1H), 6,44-6,49 (м, 1H), 6,86 (с, 1H), 7,06 (д, J=8,25 Гц, 2H), 7,21 (с, 1H), 7,27 (д, J=8,25 Гц, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 668[M+H]⁺, 690[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 666[M-H]^-, 702[M+Cl]^-.

Пример 17-1

Схема 71

Воспроизводили методику примера 1-1 за исключением того, что промежуточное соединение (E) заменяли промежуточным соединением (G) и N,N-диметилэтилендиамин заменяли 1-метилпиперазином, получая соединение (17-1) (187 мг, 95%) в виде аморфного бесцветного вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ м.д.: 1,05 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,10 (д, J=6,84 Гц, 3H), 1,36 (с, 6H), 1,59 (с, 6H), 1,77 (с, 3H), 2,00 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 2,06 (с, 3H), 2,26 (с, 3H), 2,32-2,40 (м, 4H), 2,96-3,12 (м, 1H), 3,59-3,71 (м, 4H), 3,79-3,84 (м, 1H), 3,85 (с, 3H), 3,90-4,05 (м, 2H), 4,10-4,16 (м, 1H), 4,21-4,28 (м, 1H), 4,87 (д, J=9,64 Гц, 1H), 5,16-5,27 (м, 1H), 5,29-5,44 (м, 2H), 6,28 (д, J=16,4 Гц, 1H), 6,49 (д, J=16,4 Гц, 1H), 6,77 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 7,01 (д, J=8,08 Гц, 2H), 7,13 (с, 1H), 7,25-7,32 (м, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 850[M+H]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 884[M+Cl]^-.

Пример 17-2

Схема 72

Воспроизводили методику примера 4-2 за исключением того, что соединения (4-1A) и (4-1B) заменяли соединением (17-1), получая соединение (17-2) (127 мг, 84%) в виде бесцветного аморфного вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, метанол-d₄) δ м.д.: 1,05 (д, J=6,65 Гц, 3H), 1,07 (д, J=6,65 Гц, 3H), 1,36 (с, 6H), 1,45 (с, 6H), 2,14 (с, 3H), 2,23-2,40 (м, 4H), 3,06-3,16 (м, 1H), 3,34-3,42 (м, 2H), 3,46-3,52 (м, 1H), 3,51-3,73 (м, 6H), 3,79-3,91 (м, 4H), 3,98 (с, 2H), 4,65 (д, J=9,63 Гц, 1H), 6,38 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,48 (д, J=16,1 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 7,08 (д, J=8,25 Гц, 2H), 7,23 (с, 1H), 7,29 (д, J=8,25 Гц, 2H).

МС ESI/APCI Двойной положительный: 682[M+H]⁺, 704[M+Na]⁺;

МС ESI/APCI Двойной отрицательный: 716[M+Cl]^-.

Данные элементного анализа: вычислено для C₃₈H₅₅N₃O₈·1,6H₂O: C 64,2; H 8,25; N 5,91; найдено: C 64,3; H 8,08; N 5,89.

Тестовый пример 1

(1) Получение клеток CHO-K1, устойчиво экспрессирующих человеческий SGLT1

Клетки CHO-K1 трансфицировали плазмидным вектором, экспрессирующим человеческий белок SGLT1, используя липофектамин 2000 (Invitrogen). Полученные клетки культивировали в присутствии 500 мкг/мл генетицина для отбора устойчивых линий, после чего осуществляли скрининг в описанной ниже системе, используя способность к поглощению сахара, как индикатор получения клеток, экспрессирующих SGLT1.

(2) Получение клеток CHO-K1, устойчиво экспрессирующих человеческий SGLT2

Методика A (описана в WO2007/136116): Плазмидный вектор, экспрессирующий человеческий белок SGLT2, модифицированный таким образом, чтобы к карбоксиконцу итогового остатка была присоединена последовательность LeuGluSerArgGlyProVal, трансфицировали в клетки CHO-K1, используя липофектамин 2000 (Invitrogen). Клетки культивировали в присутствии 500 мкг/мл гигромицина B для отбора устойчивых линий, после чего осуществляли скрининг в описанной ниже системе, используя способность к поглощению сахара, как индикатор получения клеток, экспрессирующих SGLT2. Результаты, полученные для этих клеток с устойчивой экспрессией, показаны в таблице 1 в столбце «Методика A».

Методика B: Клетки CHO-K1 трансфицировали плазмидным вектором, экспрессирующим человеческий белок SGLT2, используя липофектамин LTX (Invitrogen). Клетки культивировали в присутствии 1000 мкг/мл генетицина для отбора устойчивых линий, после чего осуществляли скрининг в описанной ниже системе, используя способность к поглощению сахара, как индикатор получения клеток, экспрессирующих SGLT2. Результаты, полученные для этих клеток с устойчивой экспрессией, показаны в таблице 1 в столбце «Методика B».

(3) Тест на ингибирование натрийзависимого поглощения сахара в клетках с устойчивой экспрессией

Полученные выше клетки с устойчивой экспрессией использовали в описанном ниже тесте.

Буфер для предварительной обработки (140 мМ хлорид холина, 2 мМ KCl, 1 мМ CaCl₂, 1 мМ MgCl₂, 10 мМ HEPES/5 мМ Tris, pH 7,4) добавляли в объеме 200 мкл к клеткам, устойчиво экспрессирующим SGLT1, или в объеме 2 мл к клеткам, устойчиво экспрессирующим SGLT2, полученным по методике A, и в объеме 200 мкл к клеткам, устойчиво экспрессирующим SGLT2, полученным по методике B, после чего инкубировали в течение 20 минут. Буфер для предварительной обработки удаляли и заменяли буфером для исследования поглощения, содержащим тестируемое соединение (1мМ метил α-D-глюкопиранозид (содержащий [¹⁴C]метил α-D-глюкопиранозид), 140 мМ NaCl, 2 мМ KCl, 1 мМ CaCl₂, 1мМ MgCl₂, 10 мМ HEPES/5 мМ Tris, pH 7,4) в объеме 75 мкл для клеток SGLT1 и SGLT2, полученных по методике B, или 200 мкл для клеток SGLT2, полученных по методике A. Реакцию поглощения проводили при 37°C в течение 30 минут (SGLT1) или 60 минут (SGLT2). После завершения реакции клетки дважды промывали буфером для промывания (10 мМ метил α-D-глюкопиранозид, 140 мМ хлорид холина, 2 мМ KCl, 1 мМ CaCl₂, 1 мМ MgCl₂, 10 мМ HEPES/5 мМ Tris, pH 7,4) в объеме 200 мкл для клеток SGLT1 и SGLT2, полученных по методике B, или 2 мл для клеток SGLT2, полученных по методике A, и затем растворяли в 0,25М растворе NaOH (75 мкл для SGLT1 и SGLT2, полученных по методике B, или 400 мкл для SGLT2, полученных по методике A). Добавляли жидкий сцинтиллятор (Perkin Elmer) и хорошо перемешивали каждый образец, после чего измеряли радиоактивность, используя анализатор β-излучения. В случае контрольной группы готовили буфер для измерения поглощения, не содержащий тестируемого соединения. Кроме того, для измерения поглощения в отсутствие тестируемого соединения также готовили другой буфер, содержащий хлорид холина вместо NaCl.

Для определения значений IC₅₀ использовали заранее приготовленные растворы с 6-ю подходящими концентрациями и рассчитывали концентрации, необходимые для 50% уменьшения количества поглощенного сахара (значения IC₅₀), по отношению к поглощению сахара в контрольной группе (100%). Полученные результаты исследования показаны в таблице 1.

Таблица 1 Пример IC₅₀ для hSGLT1 (нМ) IC₅₀ для hSGLT2 (нМ) методика A IC₅₀ для hSGLT2 (нМ) методика B 1-2 35 2688 74 2-2 30 971 28 3-2 35 1723 81 4-2 46 1643 76 5-2 42 802 30 6-2 27 3111 64 7-2 46 11099 - 8-3 50 15721 476 9-2 34 7234 200 10-2 55 14889 281 11-2 59 9754 546 12-2 70 4948 113 13-2 54 14781 322 14-2 72 2387 82 15-2 29 1276 20 16-2 38 1020 17 17-2 42 979 26

Данные таблицы 1 показывают, что соединения по настоящему изобретению оказывают сильное ингибирующее действие на SGLT1 и также обладают определенным, хотя и слабым, ингибирующим действием на SGLT2.

Тестовый пример 2

Тест на подтверждение гипогликемического действия в стрептозоцин-индуцированной модели диабета у крыс

(1) Создание крысиной модели диабета

Крысам SD/IGS в возрасте 7 недель (самцы, Charles River Laboratories Japan Inc.) не давали пищи в течение 16 часов и затем вводили стрептозотоцин (STZ) в количестве 50 мг/кг через хвостовую вену с использованием любой анестезии, получая крысиную модель диабета. Аналогично, другой группе крыс SD/IGS в возрасте 7 недель вводили 1,25 ммоль/л лимонной кислоты в физиологическом растворе (1 мл/кг) через хвостовую вену с использованием любой анестезии, получая нормальных контрольных крыс. Через неделю после инъекции STZ или 1,25 ммоль/л лимонной кислоты в физиологическом растворе проводили тест на переносимость глюкозы при пероральном введении.

(2) Тест на переносимость глюкозы при пероральном введении (OGTT)

После того, как крысам с диабетом не давали пищи в течение примерно 16 часов, каждой крысе из группы, получавшей тестируемое соединение, вводили его перорально (1 мг/кг) в виде раствора в 0,5% водной натрий-карбоксиметилцеллюлозе (CMC), в то время как контрольной группе давали перорально только 0,5% водный раствор CMC. Использовались соединения 10, 11 и 33, раскрытые в WO 07/136116, а также соединения 1-2, 5-2, 6-2, 13-2 и 15-2 по настоящему изобретению. Сразу же после введения препаратов перорально вводили раствор глюкозы (2 г/кг) и отбирали в общей сложности 6 образцов крови: перед введением препарата (0 часов) и через 0,25, 0,5, 1, 1,5 и 2 часа после перорального введения.

Образцы крови отбирали через хвостовую вену каждой крысы без анестезии, используя трубку для отбора крови, покрытую гепарином, и центрифугировали для отделения плазмы. Количественно определяли концентрации глюкозы в плазме, проводя измерения с помощью Glucose CII-Test Wako (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Japan). Для определения интенсивности гипогликемического действия в каждой группе из каждого измеренного уровня глюкозы вплоть до одного часа после перорального введения вычитали уровень глюкозы в крови до введения препарата и полученные значения исследовали методом трапеций для вычисления приращения площади под кривой для глюкозы (ΔAUC), которую выражали в виде уменьшения ΔAUC относительно контрольной группы.

Полученные результаты показаны в таблицах 2 и 3.

Тестовый пример 3

(1) Изменение концентраций соединений, раскрытых в WO 07/136116, в почках в течение одной недели после перорального введения

Крысам SD/IGS в возрасте 7 недель (самцы, не голодавшие, Charles River Laboratories Japan Inc.) перорально вводили соединения 10 или 33 (1 мг/кг) или соединение 11 (0,3 мг/кг) в 0,5% водном растворе CMC. Через 24, 72 и 168 часов после введения соединений у крыс под любой анестезией полностью отбирали кровь через посткавальную вену и после того как убеждались в их смерти, удаляли почки. После промывания поверхности тканей физиологическим солевым раствором определяли массу каждого органа и гомогенизировали в 4 объемах очищенной воды при охлаждении льдом. К каждому гомогенату для удаления белков добавляли смесь ацетонитрила с метанолом, содержащую вещество, являющееся внутренним стандартом, и затем исследовали супернатант с помощью ЖХ-МС/МС (Applied Biosystems API3000). Ионы определяемых лекарственных веществ, генерируемые при ионизации электрораспылением в режиме положительной ионизации, определяли с помощью селективного мониторинга реакции. Площади пиков на полученной ионной хроматограмме анализировали по методике внутреннего стандарта для вычисления концентрации лекарственного средства в гомогенате.

Внутренним стандартным веществом для соединений 10 и 33 являлся (1S)-1,5-ангидро-1-[5-(4-этоксибензил)-2-метокси-4-метилфенил]-1-тио-D-глюцит, этил-D₅, в то время как внутренним стандартом для соединения 11 являлось соединение 11 (трисгидроксиметил-D₆; -C(CD₂OH)₃).

Полученные экспериментальные результаты показаны в таблице 2.

(2) Концентрация соединений по настоящему изобретению в почках после многократного перорального введения в течение 3 дней

Крысам SD/IGS в возрасте 7 недель (самцы, не голодавшие, Charles River Laboratories Japan Inc.) перорально один раз в день в течение 3 дней подряд вводили соединения 1-2, 5-2, 6-2, 13-2 или 15-2 по настоящему изобретению (3 мг/кг) в 0,5% водном растворе CMC. Через 48 часов после последнего введения препаратов у крыс под изофлурановой анестезией полностью отбирали кровь через посткавальную вену и после того как убеждались в их смерти, удаляли почки. После промывания поверхности тканей физиологическим солевым раствором определяли массу каждого органа и гомогенизировали в 4 объемах очищенной воды, при охлаждении льдом. Концентрацию лекарственного средства в каждом гомогенате определяли тем же способом, который был описан в тестовом примере 3(1) с помощью ЖХ-МС/МС, используя соединение 11 в качестве внутреннего стандарта.

Полученные экспериментальные результаты приведены в таблице 3.

Таблица 2 Результаты теста на переносимость сахара и концентрации в почках для соединений известного уровня техники Номер соединения в WO 07/136116 % ингибирования в OGTT^$ у крыс STZ
ΔAUC_0-1ч(мг/дл) при 1 мг/кг/перорально Концентрация соединений в почках после однократного перорального введения в дозировке 1 мг/кг самцам крыс Sprague-Dawley     через 1 день (нг/г) через 3 дня (нг/г) через 7 дней (нг/г) соединение 10 69 167±36,3 124±21,2 53,8±7,61 соединение 11 68 63,5±20,1* 67,3±3,15* 48,7±18,3* соединение 33 81^# 29,8±6,79 25,5±8,68 16,2±3,11 *Приведенные данные отображают среднее значение ± S.D. при пероральном введении соединения 11 в дозировке 0,3 мг/кг.
^$Уменьшение концентрации глюкозы AUC_0-1ч у крыс с диабетом, индуцированным стрептозотоцином (STZ), по сравнению с контролем, после перорального введения 1 мг/кг.
#OGTT при использовании крыс Sprague-Dawley.

Ниже приведены формулы соединений 10, 11 и 33, раскрытых в WO 2007/136116.

Схема 73

Таблица 3 Данные тестов на переносимость сахара и концентрации в почках для соединений по настоящему изобретению Пример № % ингибирования в OGTT* у крыс STZ
ΔAUC_0-1ч(мг/дл)
при 1 мг/кг/перорально Концентрация соединений в почках после 3 дней непрерывного перорального введения в дозировке 3 мг/кг самцам крыс Sprague-Dawley Спустя 2 дня (нг/г) 1-2 74 BLQ^# 5-2 66 BLQ 6-2 64 BLQ 13-2 54 BLQ 15-2 62 BLQ *Уменьшение концентрации глюкозы AUC_0-1ч у крыс с диабетом, индуцированным стрептозотоцином (STZ), по сравнению с контролем, после перорального введения 1 мг/кг.
^#BLQ означает меньше нижнего предела количественного обнаружения (5 нг/г).

Соединения, раскрытые в WO2007/136116, демонстрируют сильное гипогликемическое действие в тесте на переносимость глюкозы после перорального введения в количестве 1 мг/кг. Однако на 1, 3 и 7 дни после перорального введения этих соединений в дозировке 1 мг/кг их концентрация в почках уменьшается незначительно, т.е. соединения склонны оставаться в почках, не подвергаясь выведению даже через 7 дней (таблица 2).

С другой стороны, было обнаружено, что соединения по настоящему изобретению обладают сильным гипогликемическим действием, как и в случае описанных выше соединений известного уровня техники. Кроме того, соединения по настоящему изобретению продемонстрировали характерную особенность, заключающуюся в том, что даже после введения в течение 3 дней подряд в дозировке 3 мг/кг они неожиданно не обнаруживались в почках уже через 2 дня (таблица 3).

Возможная причина этого различия заключается в том, что соединения по настоящему изобретению с меньшей вероятностью подвергаются абсорбции в тонком кишечнике, и абсорбированные соединения также будут выводиться из организма, не оставаясь в почках.

Таким образом, соединения по настоящему изобретению не склонны оставаться в организме и при постоянном введении с меньшей вероятностью приведут к побочным эффектам и токсичности, и поэтому они, по-видимому, обладают практически идеальным свойствами в качестве фармацевтических композиций.

Промышленная применимость

Настоящее изобретение дает возможность получения средств для борьбы с постпрандиальной гипергликемией, которые обладают сильной ингибиторной активностью в отношении SGLT1 и не склонны накапливаться в организме. Кроме того, настоящее изобретение способствует улучшению здоровья человека и содействует успешному развитию фармацевтической промышленности, внося вклад в лечение и профилактику заболеваний, вызванных постпрандиальной гипергликемией, для борьбы с которыми эффективно ингибирование активности SGLT1.

Изобретение относится к производным 4-изопропилфенилглюцита, которые не склонны накапливаться в организме и которые ингибируют активность SGLT1, подавляя постпрандиальную гипергликемию (или ухудшенную переносимость глюкозы) за счет ингибирования абсорбции глюкозы в тонком кишечнике, вследствие чего соединения по настоящему изобретению могут, например, замедлять наступление диабета или метаболического синдрома или лечить эти заболевания. Указанные производные 4-изопропилфенилглюцита представлены следующей формулой (I)

где R¹ означает атом водорода или С_1-4алкильную группу, R² означает атом водорода или метильную группу, R³ означает «С_1-4алкильную группу, замещенную аминогруппой(ами) или ди-С_1-4алкиламиногруппой(ами)» или пиперидильную группу, и R⁴ означает атом водорода или, в качестве альтернативы, R³ и R⁴, совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперидиногруппу или пиперазинильную группу, которые могут быть замещены С_1-4алкильной группой(ами) или диметиламиногруппой(ами) или являются фармацевтически приемлемыми солями указанных соединений. 7 н.п. ф-лы, 3 табл., 17 пр.

1. Производное 4-изопропилфенилглюцита, представленное приведенной ниже формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль:

где
R¹ означает атом водорода или С_1-4алкильную группу,
R² означает атом водорода или метильную группу,
R³ означает «С_1-4алкильную группу, замещенную аминогруппой(ами) или ди-С_1-4алкиламиногруппой(ами)» или пиперидильную группу, и
R⁴ означает атом водорода или, в качестве альтернативы, R³ и R⁴, совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперидиногруппу или пиперазинильную группу, которые могут быть замещены С_1-4алкильной группой(ами) или диметиламиногруппой(ами).

2. Производное 4-изопропилфенилглюцита, выбранное из следующей группы, или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Производное 4-изопропилфенилглюцита, выбранное из следующей группы, или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Фармацевтическая композиция, имеющая ингибирующую активность в отношении натрийзависимого транспортера глюкозы 1 (SGLT1), которая включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из пп.1-3 или его фармацевтически приемлемую соль.

5. Ингибитор активности натрийзависимого транспортера 1 глюкозы (SGLT1), который включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из пп.1-3 или его фармацевтически приемлемую соль.

6. Средство для борьбы с постпрандиальной гипергликемией, которое включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из пп.1-3 или его фармацевтически приемлемую соль.

7. Профилактическое или терапевтическое средство для лечения диабета, которое включает в качестве активного ингредиента производное 4-изопропилфенилглюцита по любому из пп.1-3 или его фармацевтически приемлемую соль.