СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2014 года по МПК A61K35/10 A61P29/00 

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается способа получения биологически активных веществ и средств на их основе, обладающих противовоспалительным действием.

В качестве противовоспалительных средств широко используются синтетические препараты, но все они могут вызывать побочные эффекты в виде нефротоксичности, ототоксичности, нейротоксичности и аллергических реакций.

Средства растительного происхождения содержат широкий спектр биологически активных веществ и не имеют противопоказаний и побочных эффектов.

Известны противовоспалительные средства и способы их получения из растительного сырья: листьев какалии (Патент №2206333), надземной части панцерины шерстистой (Патент №2372934, Патент №2160599), листьев лопуха войлочного (Патент №2171680), травы горца птичьего (Патент №2064300), листьев и стеблей лабазника (Патент №2210380), листьев ивы (Патент №2189828), листьев и стеблей крапивы (Патент №2376025). Данные противовоспалительные средства являются близкими в области применения, но отличаются по способу получения, который включает в себя следующие стадии подготовки сырья: сушка, измельчение, многоступенчатая экстракция, фильтрация, упаривание. Конечным результатом являются спиртовые или водно-спиртовые вытяжки (настойки) и поэтому эти средства имеют ряд противопоказаний:

алкоголизм и другие состояния, при которых противопоказан прием этилового спирта. Среди других недостатков можно отметить следующее: невысокая концентрация активных веществ и, следовательно, недостаточно высокая активность препаратов. Перечень липидных препаратов, обладающих противовоспалительным действием, ограничен, представители этого класса не лишены недостатков - они обладают недостаточно высокой противовоспалительной активностью, следовательно, расширение арсенала противовоспалительных средств и повышение активности препаратов этого класса является актуальной задачей.

По технической сущности наиболее близок к предлагаемому способу получения средства, обладающего противовоспалительным действием, из верхового торфа является способ получения биологически активных веществ из лечебной грязи, заключающийся в обработке илово-сульфидной грязи в кавитационном насосе в присутствии щелочи, с последующим выделением комплекса водорастворимых и липидных биологически

активных веществ, обладающих повышенным содержанием антиоксидантов (Пат РФ №2449801).

Задача изобретения - повышение антиоксидантной и противовоспалительной активности средства из верхового торфа за счет увеличения выхода экстрактивных биологически активных веществ.

Указанный технический результат получают благодаря тому, что после сушки верхового торфа до 15-20% влажности его измельчают в присутствии щелочи и окислителя - перкарбоната натрия в шаровых мельницах планетарного, вибрационного, виброцентробежного, роликового типов, обеспечивающих ускорение воздействующих тел, например шаров, 300 м/с². Время пребывания сырья в зоне обработки составляет 3-5 минут. Механическую обработку проводят в воздушной среде. Диспергирование торфа в воздушной среде и в присутствии щелочи и окислителя приводит к гидролитическому окислению, способствующему разрушению межмолекулярных связей в надмолекулярных гумусовых структурах, высвобождению липидных молекул и образованию дополнительного числа гидроксильных групп. Способ позволяет повысить выход липидного экстракта, его антиоксидантную и противововоспалительную активность.

В таблице 1 приведены экспериментальные данные по извлечению из верхового торфа механохимическим способом липидных биологически активных веществ, повышения их выхода и биологической активности.

Пример 1. Верховой торф, предварительно измельченный до 1 мм и высушенный до влажности 15-20% мас., помещают в мельницу планетарного типа АГО и добавляют в твердом виде 3% мас. щелочи и 3% мас. перкарбоната натрия. Время механообработки в воздушной среде составляет 1 мин. После этого торф заливается спирт-хлороформом (1:1) в соотношении осадок: растворитель - 1:2. Время экстракции составляет 10 мин. Полученный экстракт упаривают, удаляя растворитель, и получают концентрат липидных биологически активных веществ. Выход липидов составляет 47,3 г/кг, что в 2,2 раза выше, чем без применения механохимического способа (пример 8 в таблице 1), количество антиоксидантов (АО) равняется 0,29 моль/кг.

Пример 2. Верховой торф, предварительно измельченный до 1 мм и высушенный до влажности 15-20% мас., помещают в мельницу планетарного типа АГО и добавляют в твердом виде 3% мас. щелочи и 5% мас. перкарбоната натрия. Время механообработки в воздушной среде составляет 1 мин. После этого торф заливается спирт-хлороформом (1:1) в соотношении осадок:растворитель - 1:2. Время экстракции составляет 10 мин. Полученный экстракт упаривают, удаляя растворитель, и получают концентрат липидных биологически активных веществ. Выход липидов составляет 49,9 г/кг, количество АО равняется 0,37 моль/кг.

Пример 3. Верховой торф, предварительно измельченный до 1 мм и высушенный до влажности 15-20% мас., помещают в мельницу планетарного типа АГО и добавляют в твердом виде 5% мас. щелочи и 5% мас. перкарбоната натрия. Время механообработки в воздушной среде составляет 1 мин. После этого торф заливается спирт-хлороформом (1:1) в соотношении осадок: растворитель - 1:2. Время экстракции составляет 10 мин. Полученный экстракт упаривают, удаляя растворитель, и получают концентрат липидных биологически активных веществ. Выход липидов составляет 59,0 г/кг, количество АО равняется 0,46 моль/кг. При этих условиях наблюдается максимальный выход липидов, отличающихся повышенным содержанием антиоксидантов.

Увеличение времени механической обработки до 3-5 минут (примеры №4 - №7, таблица 1) приводит к ухудшению результатов, как по выходам липидов, так и по антиоксидантной активности. Это связано с тем, что при длительной механообработке может происходить деструкция липидных молекул.

Противовоспалительное действие концентрата липидных биологически активных веществ, выделенных из верхового торфа, исследовали на беспородных крысах. Острое асептическое воспаление у беспородных крыс самцов массой 200-250 г вызывали введением под плантарный апоневроз правой задней лапки 0,1 мл 1% раствора каррагенина (Winter C.A. и др. 1962). Эксперимент проведен на 56 беспородных крысах самцах. Животных содержали на обычном пищевом рационе в условиях вивария (по 8 животных в каждой экспериментальной группе). Исследуемые препараты вводили в дозе 10 мг/кг на 1% крахмальной слизи внутрижелудочно за час до инъекции флогогена. Объем отечной конечности измеряли онкометрически через 3 и 4 ч после введения раздражителя. Об интенсивности воспаления судили по массе отека через 3,5 часа, процент прироста отека рассчитывали по формуле (Creenv и др. 1971):

Масса больной конечности - Масса здоровой конечности * 100%

Масса здоровой конечности

Введение крысам 1% раствора каррагенина приводило к развитию острого воспаления, прирост массы отека при этом составлял 69%. В результате проведенных исследований все изученные препараты обладали противовоспалительной активностью. Степень угнетения каррагенинового отека достигала 31-41% по сравнению с нелечеными животными (табл.2). Более выраженной противовоспалительной активностью обладали липиды торфа, полученные по способу, приведенному в примере №3 (табл.1).

Таким образом, терапия острого асептического воспаления, вызванного у крыс введением 1% раствора каррагенина, липидами торфа была достоверно успешной благодаря повышению их антиоксидантной активности. Целевой продукт, полученный по предлагаемому способу, обладает значительной противовоспалительной активностью.

Таблица 1
Экспериментальные данные по выходу и антиоксидантной активности липидов из верхового торфа, полученных механохимическим способом № Время обработки, мин Добавки, % мас. Содержание липидов, г/кг Содержание антиоксидантов, моль/кг NaOH перкарбонат 1 1 3 3 47,5 0,29 2 1 3 5 49,9 0,37 3 1 5 5 59,0 0,46 4 3 3 5 35,1 0,29 5 3 5 5 37,0 0,35 6 5 3 3 32,0 0.36 7 5 5 5 32,8 0,34 8 0 0 0 21,5 0,21 9(пр) 5 5 Отс. 8,8 0,35

Таблица 2
Противовоспалительная активность липидов верхового торфа Пример Уменьшение массы отека, % 1 35,2 2 38,3 3 40,8 8 31,7 9 32,2

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего противовоспалительным действием. Способ получения средства, обладающего противовоспалительным действием, включает обработку верхового торфа щелочью и экстракцию смесью спирт-хлороформ, при этом верховой торф, предварительно измельченный и высушенный и перед экстракцией обрабатывают в мельнице планетарного типа АГО в присутствии щелочи в твердом виде и перкарбоната натрия в течение 1 мин. Вышеописанный способ позволяет повысить антиоксидантную и противовоспалительную активность средства из верхового торфа за счет увеличения выхода экстрактивных биологически активных веществ. 3 пр.

Способ получения средства, обладающего противовоспалительным действием, включающий обработку природного материала щелочью и экстракцию смесью спирт-хлороформ, отличающееся тем, что верховой торф, предварительно измельченный и высушенный до влажности 15-20% мас., перед экстракцией обрабатывают в мельнице планетарного типа АГО в присутствии 3-5% мас. щелочи в твердом виде и 3-5% мас. перкарбоната натрия в течение 1 мин.