СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ КАРДИОПАТИИ Российский патент 2014 года по МПК G09B23/28 A61K31/194 A61P9/00 A61P43/00 

Данное изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии и может быть использовано для профилактики экспериментальной кардиопатии у животных.

Кардиопатия, cardiopathia (от греч. cardia - сердце и pathos - страдание, поражение) - термин, применяемый по отношению к таким изменениям сердца, которые представляют собой длительное или стойкое патологическое состояние, являющееся следствием предшествовавших дегенеративных или воспалительных процессов.

В связи с актуальностью проблемы кардиопатии возникла необходимость разработки способов ее профилактики и лечения на основе существующих экспериментальных моделей.

Известны способы профилактики хронической токсической кардиопатии:

1. Патент РФ на изобретение №2424579 C1, «Способ профилактики хронической токсической кардиопатии у экспериментальных животных» Албегова Ж.К., Брин В.Б., Закс Т.В., Кабисов О.Т., Гаглоева Э.М., опубликован 20.07.2011, заявка №2010110935/14 от 22.03.2010 г. МПК G09B 23/28, A61K 33/00, A61P 9/00, заключающийся в том, что у экспериментальных животных моделируют хроническую молибденовую интоксикацию ежедневным введением раствора молибдата аммония через зонд в желудок в дозе 50 мг/кг в пересчете на металл, в котором на единицу раствора, равную 1 мл, приходится 50 мг молибдена. Одновременно животным через день в течение двух месяцев вводят природный сорбент ирлит-1 в виде 6% взвеси через зонд в желудок в количестве 2,5% массы тела.

Недостатком данного аналога является его специфическая применимость лишь при токсической кардиопатии без положительного эффекта при других видах кардиопатии.

2. Патент РФ на изобретение №2412489 С1 «Способ профилактики хронической токсической кардиопатии у экспериментальных животных», Албегова Ж.К., Брин В.Б., Кабисов О.Т., Закс Т.В., опубликован 20.02.2011, заявка №2009132915/14 от 01.09.2009 г. МПК G09B 23/28, заключающийся в том что экспериментальным животным через день вводят нанокомпозитный углеродный модифицированный сорбент в виде 6% взвеси через зонд в желудок в количестве 2,5% массы тела одновременно с ежедневным введением через зонд в желудок 0,1 мл раствора хлорида никеля, содержащего 2,5 мг никеля, на каждые 100 г массы тела животного в течение месяца.

Недостатком данного способа является его узкая направленность лишь на профилактику токсической формы кардиопатии, что не дает возможности его применения при других видах кардиопатии.

3. Патент РФ на изобретение №2410766 C1 «Способ профилактики хронической токсической кардиопатии у экспериментальных животных» Албегова Ж.К., Брин В.Б., Кабисов О.Т., Закс Т.В., опубликован 27.01.2011, заявка №2009132914/14 от 01.09.2009. МПК G09B 23/28, A61K 33/00, A61P 9/00, заключающийся в том, что животным через зонд в желудок вводят природный сорбент ирлит-1 в виде 6% взвеси в количестве 2,5% массы тела через день. Сорбент вводят одновременно с ежедневным введением раствора хлорида никеля через зонд в желудок в дозе 2,5 мг/100 г в течение месяца.

Недостатками аналога является то, что он не универсален при всех видах кардиопатии, а эффективен лишь при токсической кардиопатии.

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи, заключающейся в разработке способа профилактики экспериментальной кардиопатии.

Решение этой задачи обеспечивает расширение возможностей профилактики экспериментальной кардиопатии у животных.

Поставленная задача достигается тем, что животным в течение 60 дней ежедневно через зонд в желудок вводят янтарную кислоту в дозе 1,5 ммоль/кг на фоне однократного введения в первый день равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно.

Предлагаемый способ отличается тем, что для профилактики кардиопатии используется янтарная кислота, которая обладает выраженным антигипоксическим, метаболическим и антиоксидантным действием. Введение янтарной кислоты осуществляют через зонд в желудок в дозе 1,5 ммоль/кг на протяжении 60 дней старым крысам-самцам (возраст 18-24 мес, масса 350-380 г) на фоне предварительного моделирования кардиопатии путем однократного введения в первый день равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций (внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно).

Янтарная кислота оказывает стимулирующее и укрепляющее воздействие на иммунную систему, обладает цитопротекторным антитоксическим действием, улучшает энергетический обмен. Заявленный способ является эффективным, экономически выгодным и легко воспроизводимым.

По имеющимся у автора сведениям совокупность существенных признаков, характеризующих сущность заявляемого изобретения, не известна, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «новизна».

Животным в течение 60 дней ежедневно через зонд в желудок вводят янтарную кислоту в дозе 1,5 ммоль/кг на фоне однократного введения в первый день равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно, что обеспечивает расширение возможностей профилактики экспериментальной кардиопатии у животных и позволяет сделать вывод о соответствии критерию «изобретательский уровень».

Совокупность существенных признаков, характеризующих сущность изобретения, в принципе может быть многократно использована в медицине с получением результата, заключающегося в эффективном и легко воспроизводимом способе профилактики экспериментальной кардиопатии у животных, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «промышленная применимость».

Данный способ осуществляется следующим образом.

Для профилактики экспериментальной кардиопатии вводят янтарную кислоту интрагастрально через зонд в дозе 1,5 ммоль/кг на протяжении 60 дней старым крысам-самцам (возраст 18-24 мес, масса 350-380 г) на фоне предварительного моделирования кардиопатии путем однократного введения в первый день равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно.

У контрольных и опытных животных под тиопенталовым наркозом исследуются гемодинамические показатели инвазивным способом.

Животные исследуются под наркозом в сроки: 60 дней эксперимента, после чего забиваются. Образцы тканей фиксируются в 10% нейтральном формалине с последующим приготовлением парафиновых срезов толщиной 5-6 микрон. Срезы окрашиваются гематоксилином и эозином конго-красным. Изучение срезов проводится в проходящем свете при помощи микроскопа Микмед-1 под увеличением ×80, ×200, ×600.

Сущность заявляемого способа подтверждается функционально и морфологически, где на фигурах отображено:

Фиг.1. Миокард. Окраска гематоксилин-эозин. Увеличение ×200.

1. Участки исчезновения поперечной исчерченности кардиомиоцитов с фокусами оксифилии на фоне дистрофических изменений.

2. Отмечаются участки гиперемии, плазматического пропитывания и отека.

Фиг.2. Миокард, окраска гематоксилин-эозин, увеличение ×200.

1. Восстановление структуры кардиомиоцитов, отдельные периваскулярные лимфогистиоцитарные клеточные скопления с наличием в отдельных инфильтратах плазмоцитов, эпителиоидных клеток и гистиоцитов.

2. Имеют место признаки очаговой реваскуляризации стромы, способствующие постановлению гемодинамики и циркуляции тканевой жидкости.

При анализе гемодинамических изменений в группах крыс, подвергнутых терапии янтарной кислотой выявлены изменения относительно группы модели экспериментальной кардиопатии. Отмечена тенденция (табл.1) к повышению среднего артериального давления (САД), сердечного индекса (СИ), ударного индекса (УИ) и к снижению удельного периферического сосудистого сопротивления (УПСС).

Таблица 1 Изменения основных показателей гемодинамики при экспериментальной кардиопатии Группа Показатель САД Сердечный индекс Ударный индекс УПСС ЧСС Интактная M±m 109,9±1,609 44,65±0,7334 0,116±0,0017 1,954±0,04364 385±5,424 Модель M±m 109,1±1,457 36,83±1,361* 0,0986±0,005* 2,399±0,112 376,9±11,03 Янтарная кислота M±m 111,4±2,686 42,77±1,282 0,113±0,004 2,09±0,062 367,3±5,348 Модель + Янтарная кислота M±m 113,6±2,5 40,93±1,059* 0,1121±0,001* 2,065±0,053* 374,8±4,67

Примечание: * - достоверные изменения (p<0,05).

Пример №1

Проведены серии опытов из 4-х групп:

1-я группа (20 крыс-самцов линии «Вистар») - интактная.

2-я группа (20 крыс-самцов линии «Вистар») - модель экспериментальной кардиопатии - старым крысам-самцам (возраст 18-24 мес, масса тела 350-380 г) однократно проводились инъекции равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций.

3-я группа (20 крыс-самцов линии «Вистар») контроля препарата - интактным крысам вводится янтарная кислота интрагастрально через зонд в дозе 1,5 ммоль/кг на протяжении 60 дней.

4-я группа (20 крыс-самцов линии «Вистар») экспериментальной профилактики - вводится янтарная кислота интрагастрально через зонд в дозе 1,5 ммоль/кг на протяжении 60 дней старым крысам-самцам (возраст 18-24 мес, масса 350-380 г) на фоне однократного введения равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно.

Морфологическому исследованию на предмет выявления кардиопатии подвергнут миокард, кровеносные сосуды.

В результате проведенных исследований получены морфологические доказательства (фиг.1, фиг.2) эффективности применения янтарной кислоты для профилактики экспериментальной кардиопатии.

При морфологическом исследовании миокарда животных группы экспериментальной кардиопатии отмечаются (фиг.1) участки исчезновения поперечной исчерченности кардиомиоцитов с фокусами оксифилии (1) на фоне дистрофических изменений. Отмечаются участки гиперемии, плазматического пропитывания и отека (2).

На фоне проведенной профилактики янтарной кислотой в миокарде (фиг.2) наблюдается восстановление структуры кардиомиоцитов, отдельные периваскулярные лимфогистиоцитарные клеточные скопления с наличием в отдельных инфильтратах плазмоцитов, эпителиоидных клеток и гистиоцитов (1). Имеют место признаки очаговой реваскуляризации стромы (2), способствующие восстановлению гемодинамики и циркуляции тканевой жидкости.

Исходя из полученных результатов исследования обосновывается использование янтарной кислоты для профилактики экспериментальной кардиопатии.

Изобретение относится к экспериментальной биологии, медицине и может быть использовано для изучения вопросов профилактики кардиопатии. Для этого в первый день эксперимента моделируют кардиопатию однократным подкожным введением крысам равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда. Введение осуществляют из расчета по 0,2 мл смеси в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа. Профилактику кардиопатии проводят путем ежедневного введения животным в течение 60 дней через зонд в желудок янтарной кислоты в дозе 1,5 ммоль/кг. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ профилактики экспериментальной кардиопатии, отличающийся тем, что животным в течение 60 дней ежедневно через зонд в желудок вводят янтарную кислоту в дозе 1,5 ммоль/кг на фоне однократного введения в первый день равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно.