Родственные заявки
Данная заявка заявляет о приоритете временной заявки США, серийный No61/203509, поданной 22 декабря 2008 года (на рассмотрении), содержание которой включено в настоящий документ в виде ссылки.
Область техники
Это изобретение относится к способам лечения гематологических злокачественных заболеваний. В частности, изобретение обеспечивает способы лечения гематологических злокачественных заболеваний путем введения ингибиторов Аврора киназы в сочетании с анти-CD20 антителами.
Уровень техники
По данным Американского общества рака, в 2004 году диагноз рака был впервые поставлен приблизительно 1,4 миллиона американцев, и около 560000 больных скончались от заболевания. Хотя прогресс медицины улучшил уровень выживания при раковых заболеваниях, существует постоянная потребность в новых и более эффективных способах лечения.
Рак характеризуется неконтролируемым размножением клеток. Митоз - это стадия клеточного цикла, в ходе которой ряд сложных событий обеспечивает точность разделения хромосом на две дочерние клетки. Некоторые способы лечения рака, используемые в настоящее время, включая применение таксанов и алкалоидов барвинка, действуют таким образом, чтобы препятствовать митотическому механизму. Митотическая последовательность в значительной степени регулируется посредством протеолиза и событиями фосфорилирования, которые опосредованы митотическими киназами. Члены семейства Аврора киназы (например, Аврора А, Аврора В, Аврора С) регулируют митотическую прогрессию через модуляцию разделения центросомы, динамику веретена деления, контрольную точку сборки веретена деления, хромосомное выравнивание / сегрегацию и цитокинез (Dutertre et al, Oncogene, 21:6175 (2002); Berdnik et al, Curr. Biol., 12:640 (2002)). Избыточная экспрессия и/или амплификация Аврора киназы связана с онкогенезом при некоторых типах опухолей, в том числе опухолей толстого кишечника и молочной железы (Wamer et al, Mol. Cancer Ther., 2:589 (2003); Bischoff et al., EMBO, 17:3062 (1998); Sen et al, Cancer Res., 94:1320 (2002)). Более того, ингибирование Аврора киназы в опухолевых клетках приводит к остановке митоза и к апоптозу, что дает возможность предположить, что эти киназы являются важными мишенями в лечении рака (Manfredi et al., PNAS., 104:4106 (2007); Ditchfield, J. Cell Biol., 161:267 (2003); Harrington et al, Nature Med., 1 (2004)). Учитывая центральную роль митоза в прогрессии практически всех злокачественных новообразований, предполагается, что ингибиторы Аврора киназы будут иметь применение при широком диапазоне опухолей у людей.
CD20 (также известный как Вр35) является антигеном, ограничивающим дифференциацию В-лимфоцитов, который экспрессируется в период раннего развития предшественников В-клеток и сохраняется до дифференциации клеток плазмы. CD20 является мишенью, применимой для В-клеточной лимфомы, поскольку этот антиген экспрессируется в очень высокой концентрации на поверхности злокачественных В-клеток, т.е. нестихающая пролиферация В-клеток может привести к развитию В-клеточной лимфомы. Администрация Пищевых Продуктов и Лекарственных Средств одобрила терапевтическое использование анти-CD20 антител, ритуксимаба (Ритуксан®) для применения при рецидивирующей и ранее пролеченной низкодифференцированной неходжкинской лимфоме (НХЛ). Ритуксимаб действует путем связывания с антигеном CD20 на В-клетках, что приводит к лизису В-клеток с помощью механизма, который вовлекает комплемент-зависимую цитотоксичность (КЗЦ) и антитело-зависимую клеточно опосредованную цитотоксичность (АЗКЦ).
Однако наряду с тем, что была зарегистрирована эффективность анти-CD20 антител и, в частности, ритуксимаба для лечения В-клеточных лимфом, таких, как, например, неходжкинская лимфома, пролеченные пациенты были часто подвержены рецидиву заболевания. Таким образом, было бы целесообразно, иметь возможность разработать более эффективные схемы лечения. Комбинированные схемы лечения могут быть полезны для пациентов, страдающих от опухолей, связанных с В-клетками, или от других гематологических злокачественных заболеваний, а также, потенциально, могут даже уменьшить уровень рецидивов или преодолеть устойчивость к отдельным противораковым средствам, которая иногда наблюдается у этих пациентов. Кроме того, комбинации противоопухолевых лекарственных средств могут иметь аддитивные или даже синергические терапевтические эффекты.
Существует, таким образом, потребность в новых схемах лечения рака, включая комбинированную терапию.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение предлагает новую комбинированную терапию для лечения злокачественных гематологических заболеваний. В частности, настоящее изобретение обеспечивает метод лечения пациента, страдающего от гематологического злокачественного заболевания, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с антителами анти-CD20 (например, до или после).
Термины, используемые в настоящем документе, согласуются со следующими определенными значениями, если не указаны иные.
Используемый здесь термин "Аврора киназа" относится к любому представителю семейства, родственному серин/треонин киназам, участвующим в митотической прогрессии. Множество клеточных белков, которые играют роль в делении клеток, являются субстратами для фосфорилирования ферментами Аврора киназы, включая, без ограничений, гистон НЗ, р53, CENP-A, регуляторную легкую цепь миозина II, протеинфосфатазу-1, ТРХ-2, INCENP, сурвивин, топоизомеразу II-альфа, виментин, MBD-3, MgcRacGAP, десмин, Ajuba, XIEg5 (в шпорцевых лягушках), NdclOp (в почкующихся дрожжах) и D-TACC (у дрозофилы). Ферменты Аврора киназы также сами являются субстратами для аутофосфорилирования, например, Thr288. Если не указано иное, термин «Аврора киназа» предназначен для обозначения любого белка Аврора киназы от любого вида, включая, без ограничений, Аврора А, Аврора В и Аврора С, предпочтительно Аврора А или В. Предпочтительно Аврора киназа является Аврора киназой человека.
Термин "Аврора киназный ингибитор" или "ингибитор Аврора киназы" используется для обозначения соединения, которое способно взаимодействовать с Аврора киназой и ингибировать ее ферментативную активность. Ингибирование ферментативной активности Аврора киназы означает снижение способности Аврора киназы фосфорилировать пептидный или белковый субстрат. В различных вариантах, такое снижение активности Аврора киназы, составляет, по крайней мере, приблизительно 50%, по крайней мере, приблизительно 75%, по крайней мере, приблизительно 90%, по крайней мере, приблизительно 95% или, по крайней мере, приблизительно 99%. В различных вариантах концентрация ингибитора Аврора киназы, необходимая для снижения ферментативной активности Аврора киназы, составляет менее 1 мкм, меньше чем примерно 500 им, меньше чем примерно 100 нм или менее 50 нм.
В некоторых вариантах такое ингибирование является селективным, т.е. ингибитор Аврора киназы снижает способность Аврора киназы фосфорилировать пептидный или белковый субстрат в концентрации, которая ниже, чем концентрация ингибитора, необходимая для продуцирования другого, неродственного биологического эффекта, например, снижение ферментативной активности различных киназ. В некоторых вариантах ингибитор Аврора киназы также снижает ферментативную активность другой киназы, желательно одной из тех, которые вовлечены в рак.
Термин "приблизительно" используется здесь в значении примерно, в районе, грубо говоря или около. Когда термин " приблизительно" используется в сочетании с числовым диапазоном, он изменяет этот диапазон, расширяя его границы выше и ниже сформулированных числовых значений. В общем, термин "приблизительно" используется здесь для изменения числового значения выше и ниже заявленного значения путем отклонения в пределах 10%.
Используемый здесь термин "содержит" означает "включает, но не ограничивается".
"CD20" антиген представляет собой негликозилированный фосфопротеин массой 35 кДа, обнаруженный на поверхность более 90% В-клеток из периферической крови или из лимфоидных органов. CD20 экспрессируется в период раннего развития предшественников В-клеток и сохраняется до дифференциации клеток плазмы. CD20 присутствует как в нормальных В-клетках, так и в злокачественных В-клетках. Другие названия CD20, встречающиеся в литературе, включают «В-лимфоцит ограничивающий антиген» и «Вр35».
CD20 антиген описан, например, в работе dark et al. PNAS (USA) 82:1766 (1985).
Термин "антитело" используется здесь в широком смысле этого слова и особенно охватывает интактные моноклональные антитела, поликлональные антитела, гуманизированные антитела, человеческие антитела, химерные антитела, мультиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела), сформированные не менее чем из двух интактных антител и фрагментов антител, до тех пор, пока они проявляют требуемую биологическую активность. Антитела могут быть произведены любым специалистом в данной области с использованием общепринятых методов.
Термин "моноклональное антитело", используемый здесь, относится к антителу, полученному от популяции главным образом однородных антител, то есть отдельные антитела, составляющие популяцию идентичны, за исключением возможных естественных мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела, направленные против единственного месторасположения антигена, являются высокоспецифичными. Кроме того, в отличие от традиционных (поликлональных) препаратов антител, которые обычно включают в себя различные антитела, направленные против различных детерминантов (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одного детерминанта на антигене. В дополнение к специфичности моноклональные антитела имеют то преимущество, что они синтезируются гибридомной культурой, без примесей других иммуноглобулинов.
"Моноклональный модификатор" указывает на характеристику антитела, как полученного от существенно однородной популяции антител, и этот термин не должен толковаться, как требующий производства антител каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела, которые будут использоваться согласно настоящему изобретению, могут быть получены способом гибридомы, впервые описанным Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), или могут быть произведены с помощью способов рекомбинантной ДНК (см., например, патент США No4816567). "Моноклональные антитела" также могут быть выделены из библиотек фаговых антител с использованием техник, описанных, например, в работе Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) and Marks et al, J. MoL Biol., 222:581-597 (1991). Моноклональные антитела, здесь, в частности, включают, но не ограничиваются, "химерные" или "гуманизированные» формы.
Термины "алифатический" или "алифатическая группа", используемые здесь, означают замещенный или незамещенный, с прямой цепью, разветвленный или циклический С1-12углеводород, который является полностью насыщенным или который содержит один или более единиц ненасыщенности, но который не является ароматическим. Например, подходящие алифатические группы включают замещенные или незамещенные линейные, разветвленные или циклические группы алкила, алкенила, алкинила и их гибриды, такие как (циклоалкил)алкил, (циклоалкенил)алкил или (циклоалкил)алкенил.
Термины "алкил", "алкенил" и "алкинил", используемые самостоятельно или как часть более крупного фрагмента, относятся к алифатической группе с прямой и разветвленной цепью, имеющей от 1 до 12 атомов углерода. Для целей настоящего изобретения термин "алкил" будет использоваться, когда атом углерода, прикрепляющий алифатическую группу к остальной части молекулы, является насыщенным атомом углерода. Тем не менее, алкильная группа может включать в себя ненасыщенность в других атомах углерода. Таким образом, алкильные группы включают, без ограничения, метил, этил, пропил, аллил, пропаргил, бутил, пентил и гексил.
Для целей настоящего изобретения термин "алкенил" будет использоваться, когда атом углерода, прикрепляющий алифатическую группу к остальной части молекулы, образует часть двойных углерод-углеродных связей. Алкениловые группы включают, без ограничений, винил, 1-пропенил, 1-бутенил, 1-пентенил и 1-гексенил.
Для целей настоящего изобретения термин "алкинил" будет использоваться, когда атом углерода, прикрепляющий алифатическую группу к остальной части молекулы, образует часть тройных углерод-углеродных связей. Алкиниловые группы включают, без ограничений, этинил, 1-пропинил, 1-бутинил, 1-пентинил, и 1-гексинил.
Термин "циклоалифатический", используемый самостоятельно или как часть более крупного фрагмента, относится к насыщенной или частично ненасыщенной циклической алифатической кольцевой системе, имеющей от 3 до 14 членов, где алифатическая кольцевая система факультативно замещена. В некоторых вариантах циклоалифатическим является моноциклический углеводород, имеющий 3-8 или 3-6 кольцевых атомов углерода. Неограничивающие примеры включают: циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил, циклогептенил, циклооктил, циклооктенил и циклооктадиенил. В некоторых вариантах циклоалифатический представляет собой соединенный мостом или сплавленный бициклический углеводород, имеющий 6-12, 6-10 или 6-8 кольцевых атомов углерода, где любое отдельное кольцо в бициклических кольцевых системах имеет 3-8 членов.
В некоторых вариантах два смежных заместителя на циклоалифатическом кольце, взятые вместе с атомами промежуточного кольца, образуют факультативно замещенное сконденсированное 5-6-членное ароматическое или 3-8-членное неароматическое кольцо, имеющее 0-3 кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из О, N и S. Таким образом, термин "циклоалифатический" включает в себя алифатические кольца, которые сливаются в одно или несколько колец арила, гетероарила или гетероциклила. Неограничивающие примеры включают инданил, 5,6,7,8-тетрагидрохиноксалинил, декагидронафтил или тетрагидронафтил, где радикал или точка присоединения находится на алифатическом кольце. Термин "циклоалифатический" может быть использован наравне с терминами "карбоцикл", "карбоциклил", "карбоцикло" или "карбоциклический".
Термины "арил" и "ар-", используемые самостоятельно или как часть более крупного фрагмента, например, "аралкил", "аралкокси" или "арилоксиалкил", относятся к ароматическим углеводородам от С6 до С14, включающим от одного до трех колец, каждое из которых факультативно замещено. Предпочтительно, арильная группа представляет собой С6-10 арильную группу. Арильные группы включают, без ограничений, фенил, нафтил и антраценил. В некоторых вариантах два смежных заместителя на арильном кольце, взятые вместе с атомами промежуточного кольца, образуют факультативно замещенное сконденсированное 5-6-членное ароматическое или 4-8-членное неароматическое кольцо, имеющее 0-3 кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из О, N и S. Таким образом, термин "арил", как используется здесь, включает в себя группы, в которых ароматическое кольцо сливается с одним или несколькими гетероарильными циклоалифатическими или гетероциклильными, кольцами, где радикал или точка крепления находится на ароматическом кольце. Неограничивающие примеры таких сплавленных (сконденсированных) кольцевых систем включают индолил, изоиндолил, бензотиенил, бензофуранил, дибензофуранил, индазолил, бензимидазолил, бензтиазолил, хинолил, изохинолил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, карбазолил, акридинил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, флуоренил, инданил, фенантридинил, тетрагидронафтил, индолинил, феноксазинил, бензодиоксанил и бензодиоксолил. Арильная группа может быть моно-, би-, три- или полициклической, предпочтительно моно-, би- или трициклической, более предпочтительно моно- или бициклической. Термин "арил" может использоваться наравне с терминами "арильная группа", "арильный фрагмент" и "арильное кольцо".
"Аралкильная" или "арилалкильная" группа включает арильную группу, ковалентно связанную с алкильной группой, каждая из которых независимо является факультативно замещенной. Предпочтительно, аралкильная группа представляет собой С6-10арил (C1-6)алкил, С6-10арил(С1-4)алкил или С6-10арил (С1-3) алкил, включая, без ограничений, бензил, фенэтил и нафтилметил.
Термины "гетероарил" и "гетероар-", используемые самостоятельно или как часть более крупного фрагмента, например, гетероаралкил или "гетероаралкокси", относятся к группам, обладающим от 5 до 14 кольцевых атомов, предпочтительно 5, 6, 9 или 10 кольцевых атомов; обладающим 6, 10 или 14 электронами общими в циклической матрице, и имеющие, помимо атомов углерода, от одного до четырех гетероатомов. Термин "гетероатом" относится к азоту, кислороду или сере и включает любую окисленную форму азота или серы и любую кватернизованную форму основного азота. Гетероарильные группы включают, без ограничений, тиенил, фуранил, пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, индолизинил, пуринил, нафтиридинил и птеридинил. В некоторых вариантах два смежных заместителя на гетероариле, взятые вместе с атомами промежуточного кольца, образуют факультативно замещенное сконденсированное 5-6-членное ароматическое или 4-8-членное неароматическое кольцо, имеющее 0-3 кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из О, N и S. Таким образом, термины "гетероарил" и "гетероар-", как используются здесь, также включают группы, в которых гетероароматическое кольцо сливается с одним или несколькими арильными, циклоалифатическими или гетероциклильными кольцами, где радикал или точка присоединения находится на гетероароматическом кольце. Неограничивающие примеры включают индолил, изоиндолил, бензотиенил, бензофуранил, дибензофуранил, индазолил, бензимидазолил, бензтиазолил, хинолил, изохинолил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, 4Н-хинолизинил, карбазолил, акридинил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил и пиридо [2,3-b]-1,4-оксазин-3(4Н)-один. Гетероарильная группа может быть моно-, би-, три- или полициклической, предпочтительно моно-, би- или трициклической, более предпочтительно моно- или бициклической. Термин "гетероарил" может использоваться наравне с терминами "гетероарильное кольцо", "гетероарильная группа" или "гетероароматическая", любой из этих терминов включает кольца, которые факультативно замещены. Термин "гетероаралкил" относится к алкильной группе, замещенной гетероарилом, где алкильная и гетероарильная части являются независимо факультативно замещенными.
Как используются здесь, термины "гетероцикл", "гетероциклил", "гетероциклический радикал" и "гетероциклическое кольцо" взаимозаменяемы и относятся к стабильным 3-7-членным моноциклическим или к слившимся 7-10-членным или к соединенным мостом 6-10-членным бициклическим гетероциклическим фрагментам, которые либо насыщенные или частично ненасыщенные и обладают, помимо атомов углерода, одним или несколькими, желательно от одного до четырех, гетероатомами, как описано выше. При использовании в отношении кольцевого атома гетероцикла термин "азот" охватывает замещенный азот. Как, например, в гетероциклильном кольце, обладающем 1-3 гетероатомами, отобранными из кислорода, серы или азота, азот может представлять собой N (как в 3,4-дигидро-2Н-пирролиле), NH (как в пирролидиниле) или +NR (как и в N-замещенном пирролидиниле). Гетероциклическое кольцо может быть прикреплено к его подвесной группе в любом гетероатоме или атоме углерода, что приводит к устойчивой структуре, и любой из атомов кольца может быть факультативно замещен. Примеры таких насыщенных или частично ненасыщенных гетероциклических радикалов включают, без ограничения, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, пирролидинил, пирролидонил, пиперидинил, пирролинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, декагидрохинолинил, оксазолидинил, пиперазинил, диоксанил, диоксоланил, диазепинил, оксазепинил, тиазепинил, морфолинил и хинуклидинил.
В некоторых вариантах два смежных заместителя на гетероциклическом кольце, взятые вместе с атомами промежуточного кольца, образуют факультативно замещенное сконденсированное 5-6-членное ароматическое или 3-8-членное неароматическое кольцо, имеющее 0-3 кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из О, N и S. Таким образом, термины "гетероцикл", "гетероциклил", "гетероциклильное кольцо", "гетероциклическая группа", "гетероциклический фрагмент" и "гетероциклический радикал" используются здесь взаимозаменяемо и включают в себя группы, в которых гетероциклическое кольцо сливается с одним или несколькими арильными, гетероарильными или циклоалифатическими кольцами, такими как индолинил, 3Н-индолил, хроманил, фенантридинил или тетрагидрохинолинил, где радикал или точка присоединения находится на гетероциклическом кольце. Гетероциклическая группа может быть моно-, би-, три- или полициклической, предпочтительно моно-, би- или трициклической, более предпочтительно моно- или бициклической. Термин "гетероциклилалкил" относится к алкильной группе, замещенной гетероциклилом, где алкильная и гетероциклильная части являются независимо факультативно замещенными.
Как используется здесь, термин "частично ненасыщенный" относится к кольцевому фрагменту, который включает в себя, по крайней мере, одну двойную или тройную связь между атомами кольца. Термин "частично ненасыщенный" предназначен для того, чтобы охватить кольца, имеющие многочисленные участки ненасыщенности, но не предназначенные для включения фрагментов арила или гетероарила, как они здесь определены.
Термины "галоалифатический", "галогеналкил", "галоалкенил" и "галоалкокси" относятся к алифатической, алкильной, алкенильной или алкоксильной группе, которая в зависимости от ситуации может быть замещена на один или несколько атомов галогена. Используемый здесь термин "галоген" или "гало" означает F, Cl, Br или I. Термин "фторалифатический" относится к галоалифатическому, в котором галогеном является фтор.
Термин "алкилен" относится к двухвалентной алкильной группе. "Алкиленовая цепь" - это группа полиметилена, т.е. -(CH2)n-, где n является натуральным числом, предпочтительно от 1 до 6, от 1 до 4, от 1 до 3, от 1 до 2, или от 2 до 3. Замещенная алкиленовая цепь представляет собой группу полиметилена, в которой один или несколько атомов метиленового водорода замещается заместителем. Подходящие заместители включают описанные ниже для замещенных алифатических групп. Алкиленовая цепь также может быть замещена на одной или более позициях алифатической группой или замещенной алифатической группой.
Термин "замещенный", как используется здесь, означает, что радикал водорода указанного фрагмента замещается на радикал определенного заместителя, при условии, что замена приводит к образованию стабильного или химически возможного соединения. Фраза "один или несколько заместителей", используемая здесь, относится к числу заместителей, тождественному от одного до максимумального числа заместителей, возможно основанному на количестве доступных участков связывания, при условии, что вышеупомянутые условия стабильности и химической осуществимости выполнены. Если не указано иное, факультативно замещенная группа может иметь заместитель в каждой замещаемой позиции группы, а также заместители могут быть одинаковыми или разными.
Арильная группа (в том числе арильный фрагмент аралкила, аралкокси, арилоксиалкила и т.п.) или гетероарильная группа (в том числе фрагмент гетероарила в гетероаралкиле и гетероаралкокси и т.п.) может содержать один или несколько заместителей. Примеры подходящих заместителей на ненасыщенном атоме углерода группы арила или гетероарила включают -гало, -NO2, -CN, -R*, -C(R*)=C(R*)2, -C=C-R*, -OR*, -SR°, -S(O)R°, -SO2R°, -SO3R°, -SO2N(R+)2-N(R+)2-NR+C(O)R*, -NR+C(O)N(R+)2, -NR+CO2R°, -O-CO2R*, -OC(O)N(R+)2, -O-C(O)R*, -CO2R*, -C(O)-C(O)R*, -C(O)R*, -C(O)N(R+)2, -C(O)N(R+)C(=NR+)-N(R+)2, -N(R+)C(=NR+)-C(O)R*, -C(=NR+)-N(R+)2, -C(=NR+)-OR*, -N(R+)-N(R+)2-N(R+)C(=NR+)-N(R+)2, -NR+SO2R°, -NR+SO2N(R+)2, -P(O)(R*)2, -P(O)(OR*)2, -O-P(O)-OR* и -P(O)(NR+)-N(R+)2; или два смежных заместителя, взятые вместе с их промежуточными атомами, образуют 5-6-членное ненасыщенное или частично ненасыщенное кольцо, обладающее 0-3 кольцевыми атомами, выбранными из группы, содержащей - N, О, и S.
Арильная группа (в том числе арильный фрагмент аралкила, аралкокси, арилоксиалкила и т.п.) или гетероарильная группа (в том числе фрагмент гетероарила в гетероаралкиле и гетероаралкокси и т.п.) может содержать один или несколько заместителей. Примеры подходящих заместителей на ненасыщенном атоме углерода группы арила или гетероарила включают -гало, -NO2, -CN, -R*, -C(R*)=C(R*)2, -C=C-R*, -OR*, -SR°, -S(O)R°, -SO2R°, -SO3R°, -SO2N(R+)2-N(R+)2-NR+C(O)R*, -NR+C(O)N(R+)2, -NR+CO2R°, -O-CO2R*, -OC(O)N(R+)2, -O-C(O)R*, -CO2R*, -C(O)-C(O)R*, -C(O)R*, -C(O)N(R+)2, -C(O)N(R+)C(=NR+)-N(R+)2, -N(R+)C(=NR+)-C(O)R*, -C(=NR+)-N(R+)2, -C(=NR+)-OR*, -N(R+)-N(R+)2 -N(R+)C(=NR+)-N(R+)2, -NR+SO2R°, -NR+SO2N(R+)2, -P(O)(R*)2, -P(O)(OR*)2, -O-P(O)-OR* и -P(O)(NR+)-N(R+)2, или два смежных заместителя, взятые вместе с их промежуточными атомами, образуют 5-6-членное ненасыщенное или частично ненасыщенное кольцо, обладающее 0-3 кольцевыми атомами, выбранными из группы, содержащей - N, О и S.
Каждый R+, независимо, представляет собой водород или необязательно замещенную алифатическую, арильную, гетероарильную или гетероциклильную группу, или два R+ на том же атоме азота, взятые вместе с атомом азота, образуют 5-8 членное ароматическое или неароматическое кольцо, имеющее, в дополнение к атому азота, 0-2 кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S. Каждый R* независимо представляет собой водород или необязательно замещенную алифатическую, арильную, гетероарильную или гетероциклильную группу. Каждый R° является факультативно замещенной алифатической или арильной группой.
Алифатическая группа или неароматическое гетероциклическое кольцо могут быть замещены одним или несколькими заместителями. Примеры подходящих заместителей насыщенного углерода алифатической группы или неароматического гетероциклического кольца включают, без ограничения, перечисленные выше для ненасыщенного углерода арильной или гетероарильной группы и следующее: =0, =S, =C(R*)2, =N-N(R*)2, =N-OR*, =N-NHC(O)R*, =N-NHCO2R°, =N-NHSO2R° или =N-R*, где каждый R* и R° является таким, как определено выше.
Подходящие заместители на атоме азота неароматического гетероциклического кольца включают -R*, -N(R*)2, -C(O)R*, -CO2R*, -C(O)-C(O)R*-C(O)CH2C(O)R*, -SO2R*, -SO2N(R*)2, -C(=S)N(R*)2, -C(=NH)-N(R*)2, и -NR*SO2R*, где каждый R* является таким, как определено выше.
Если не указано иное, формулы, отображенные в данном документе, подразумевают включение соединений, которые отличаются только наличием одного или более изотопно обогащенных атомов. Например, соединения, имеющие нынешнюю структуру, за исключением замещения атома водорода дейтерием или тритием или замещения атома углерода 13С- или 14С обогащенным углеродом находятся в пределах рамок изобретения.
Для специалиста в данной области будет очевидно, что некоторые соединения, описанные здесь, могут существовать в таутомерных формах, все таковые таутомерные формы соединений, находятся в рамках изобретения. Если не указано иное, формулы, отображенные выше, подразумевают также включение всех стереохимических форм формул, т.е. R и S конфигурации для каждого асимметричного центра. Таким образом, единичные стереохимические изомеры, а также энантиомерные и диастереомерные смеси данных соединений находятся в рамках изобретения.
Любое соединение, способное ингибировать ферментативную активность Аврора киназы может быть использовано в способах настоящего изобретения. В частности, ингибиторы Аврора киназы включают соединения, описанные в настоящем документе, а также соединения, описанные, например, в документах WO 05/111039, US 2005/0256102, US 2007/0185087, WO 08/021038, US 2008/0045501, WO 08/063525, US 2008/0167292, WO 07/113212, EP 1644376, US 2005/0032839, WO 05/005427, WO 06/070192, WO 06/070198, WO 06/070202, WO 06/070195, WO 06/003440, WO 05/002576, WO 05/002552, WO 04/071507, WO 04/058781, WO 06/055528, WO 06/055561, WO 05/118544, WO 05/ 013996, WO 06/036266, US 2006/0160874, US 2007/0142368, WO 04/043953, WO 07/132220, WO 07/132221, WO 07/132228, WO 04/00833 и WO 07/056164, каждый из которых включен в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме. Также подходящими для использования в способах согласно изобретению являются сольватированные и гидратированные формы любого из этих соединений. Также подходящими для использования в способах согласно настоящему изобретению являются фармацевтически приемлемые соли любого из соединений и сольватированные и гидратированные формы таких солей. Указанные ингибиторы Аврора киназы могут быть приготовлены несколькими способами, хорошо известными специалистам в области органического синтеза, в том числе, но не ограничиваясь, способами синтеза, подробно описанными в вышеприведенных ссылках.
В некоторых вариантах ингибитор Аврора киназы является соединением, представленным формулой (I):
или его фармацевтически приемлемой солью,
где:
кольцо А - это замещенное или незамещенное 5- или 6-членное арильное, гетероарильное, циклоалифатическое или гетероциклильное кольцо;
кольцо В - это замещенное или незамещенное арильное, гетероарильное, циклоалифатическое или гетероциклильное кольцо;
кольцо С - это замещенное или незамещенное арильное, гетероарильное, циклоалифатическое или гетероциклильное кольцо;
Re является водородом, -OR5, -N(R4)2, -SR5 или алифатическим C1-3, факультативно замещенным R3 или R7;
каждый из Rx и Ry представляет собой водород-, фтор- или факультативно замещенный алифатический С1-6; или Rx и Ry, взятые вместе с атомом углерода, к которому они прикреплены, формируют факультативно замещенное 3-6-членное циклоалифатическое кольцо;
каждый R3 независимо является отобранным из группы, состоящей из гало-, -ОН, -O(C1-3алкил), -CN, -N(R4)2, -C(O)(C1-3алкил), -CO2H, -СО2(С1-3алкил), -C(O)NH2 и -C(O)NH(C1-3алкил);
каждый R4 независимо является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой, или два R4 на том же атоме азота, взятые вместе с атомом азота, образуют факультативно замещенное 5-6-членное гетероарильное или 4-8-членное гетероциклильное кольцо, имеющее, в дополнение к атому азота, 0-2 кольцевых гетероатома, отобранных из N, О и S;
каждый R5 независимо является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой; и
каждый R7 независимо является факультативно замещенной арильной, гетероциклильной или гетероарильной группой.
Кольцо А - это замещенное или незамещенное 5- или 6-членное арильное, гетероарильное, циклоалифатическое или гетероциклильное кольцо. Примеры кольца А включают фурано, дигидрофурано, тиено, дигидротиено, циклопентено, циклогексено, 2Н-пирроло, пирроло, пирролино, пирролидино, оксазоло, тиазоло, имидазоло, имидазолино, имидазолидино, пиразоло, пиразолино, пиразолидино, изоксазоло, изотиазоло, оксадиазоло, триазоло, тиадиазоло, 2Н-пирано, 4Н-пирано, бензо, пиридино, пиперидино, диоксано, морфолино, дитиано, тиоморфолино, пиридазино, пиримидино, пиразино, пиперазино и триазино, любая из групп, в котором может быть замещенной или незамещенной. Предпочтительные значения для кольца А включают, без ограничения, замещенные или незамещенные кольца, отобранные из группы, состоящей из фурано, тиено, пирроло, оксазоло, тиазоло, имидазоло, пиразоло, изоксазоло, изотиазоло, триазоло, бензо, пиридино, пиридазино, пиримидино и пиразино.
Кольцо А может быть замещенным или незамещенным. В некоторых вариантах, каждый заменяемый насыщенный кольцевой атом углерода в кольце А является незамещенным или является замещенным на =O, =S, =C(R5)2, =N-N(R4)2, =N-OR5, =N-NHC(O)R5, =N-NHCO2R6, =N-NHSO2R6, =N-R5 или -Rb, где Rb, R4, R5 и R6 являются такими, как описано ниже. Каждый заменяемый ненасыщенный кольцевой атом углерода в кольце А является незамещенным или замещенным на Rb. Каждый заменяемый кольцевой атом азота в кольце А является незамещенным или замещенным на -R9b , и один кольцевой атом азота в кольце А является факультативно замещенным. Каждый R9b независимо является -C(O)R5, -С(О)N(R4)2, -CO2R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2, или алифатический C1-4 факультативно замещенный на R3 или R7.
Каждый Rb независимо является R2b, факультативно замещенной алифатической или факультативно замещенной арильной, гетероциклильной или гетероарильной группой, или два смежных Rb, взятые вместе с промежуточными кольцевыми атомами, образуют факультативно замещенное сконденсированное 4-8-членное ароматическое или неароматическое кольцо, имеющее 0-3 кольцевых гетероатома, выбранных из группы, содержащей О, N и S.
Каждый R2b независимо является гало, -NO2, -CN, -C(R5)=C(R5)2-C(R5)=C(R5)(R10), -C=C-R5, -C=C-R10, -OR5, -SR6, -S(O)R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2-N(R4)2 -NR4C(O)R5, -NR4C(O)N(R4)2, -NR4CO2R6, -O-CO2R5, -OC(O)N(R4)2, -O-C(O)R5, -CO2R5, -C(O)-C(O)R5, -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -C(=NR4)-N(R4)2, -C(=NR4)-OR5, -N(R4)-N(R4)2, -N(R4)C(=NR4)-N(R4)2-N(R4)SO2R6, -N(R4)SO2N(R4)2, -P(O)(R5)2, или -P(O)(OR5)2, где переменные R4, R5 и R7 имеют значения, описанные выше; каждый R6 независимо является факультативно замещенной алифатической или арильной группой; и каждый R10 независимо является -CO2R5 или -C(O)N(R4)2.
В некоторых вариантах кольцо А является замещенным 0-2 заместителями Rb. В некоторых таких вариантах каждый Rb независимо является алифатическим С1-3 или R2b и каждый R2b независимо является отобранным из группы, состоящей из -гало, -NO2, -C(R5)=C(R5)2, -C=C-R5, -OR5 и -N(R4)2. В некоторых вариантах каждый R6 независимо является отобранным из группы, состоящей из -гало, алифатического C1-3, фторалифатического C1-3 и -OR5, где R5 является водородом или алифатическим C1-3. В определенных предпочтительных вариантах кольцо А является замещенным 0, 1 или 2 заместителями, предпочтительно 0 или 1 заместителем, независимо отобранными из группы, состоящей из хлора, фтора, брома, метила, трифторметила и метокси.
В некоторых вариантах кольцо В является замещенным или незамещенным моно- или бициклическим арильным или гетероарильным кольцом, отобранным из группы, состоящей из фуранила, тиенила, пирролила, оксазолила, тиазолила, имидазолила, пиразолила, изоксазолила, изотиазолила, оксадиазолила, триазолила, тиадиазолила, фенила, пиридила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила, триазинила, индолизинила, индолила, изоиндолила, индазолила, бензо[b]фуранила, бензо[b]тиенила, бензимидазолила, бензтиазолила, бензоксазолила, пуринила, хинолила, изохинолила, циннолила, фталазинила, хиназолинила, хиноксалинила, нафтиридинила и птеридинила.
Каждый замещаемый насыщенный кольцевой атом углерода в кольце В является незамещенным или является замещенным на =0, =S, -C(R5)2, =N-N(R4)2, =N-OR5, =N-NHC(O)R5, =N-NHCO2R6, =N-NHSO2R6, =N-R5 или -Rc. Каждый замещаемый ненасыщенный кольцевой атом углерода в кольце В является незамещенным или замещенным на -Rc. Каждый замещаемый кольцевой атом азота в кольце В является незамещенным или является замещенным на -R9c, и один кольцевой атом азота в кольце В является факультативно окисленным. Каждый R9c независимо является -C(O)R5, -C(O)N(R4)2-CO2R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2 или алифатическим C1-4, факультативно замещенным на R3 или R7. Кольцо В может быть незамещенным или может быть замещенным на любое одно или более колец его компонентов, в которых заместители могут быть одинаковыми или различными. В некоторых вариантах кольцо В является замещенным на 0-2 независимо отобранных Rc и 0-3 независимо отобранных R2c или C1-6 алифатических групп. Переменные R3, R4, R5, R6 и R7 являются таковыми, как оговорено выше для кольца А, и Rc и R2c описаны ниже.
Каждый Rc независимо является R2c, факультативно замещенным алифатическим C1-6 или факультативно замещенным арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой.
Каждый R2c независимо является -гало, -NO2, -CN, -C(R5)=C(R5)2 -C(R5)=C(R5)(R10), -C≡C-R5, -C≡C-R10, -OR5, -SR6, -S(O)R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2, -N(R4)2, -NR4C(O)R5, -NR4C(O)N(R4)2, -NR4CO2R6, -O-CO2R5, -OC(O)N(R4)2-O-C(O)R5, -CO2R5, -C(O)-C(O)R5, -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -C(=NR4)-N(R4)2, -C(=NR4)-OR5, -N(R4)-N(R4)2, -N(R4)C(=NR4)-N(R4)2, -N(R4)SO2R6, -N(R4)SO2N(R4)2, -P(O)(R5)2 или -P(O)(OR5)2.
В некоторых вариантах кольцо В представляет собой моноциклическое 5- или 6-членное арильное или гетероарильное кольцо, замещенное 0-2 независимо отобранными R2c и 0-2 независимо отобранными R2c или C1-6 алифатическими группами. В отдельных таких вариантах кольцо В представляет собой замещенное или незамещенной кольцо фенила или пиридила.
В некоторых вариантах кольцо В является замещенным на 0-2 заместителя Rc. В некоторых таких вариантах каждый Rc независимо является алифатическим C1-3 или R2c и каждый R2c независимо является отобранным из группы, состоящей из -гало, -NO2, -C(R5)=C(R5)2 -OC-R5, -OR5, и -N(R4)2. В некоторых вариантах каждый Rc независимо является отобранным из группы, состоящей из -гало, алифатического C1-3, галоалифатического C1-3 и -OR5, где R5 является водородом или алифатическим С1-3. В определенных предпочтительных вариантах кольцо В является замещенным 0, 1, или 2 заместителями, независимо отобранными из группы, состоящей из хлора, фтора, брома, метила, трифторметила и метокси.
Каждый заменяемый насыщенный кольцевой атом углерода в кольце С является незамещенным или замещенным на =O, =S, =C(R5)2, =N-N(R4)2, =N-OR5, =N-NHC(O)R5, =N-NHCO2R6, =N-NHSO2R6, =N-R5 или -Rd. Каждый заменяемый ненасыщенный кольцевой атом углерода в кольце С является незамещенным или замещенным на Rd. Каждый заменяемый кольцевой атом азота в кольце С является незамещенным или замещенным на -R9d, и один кольцевой атом азота в кольце С является факультативно окисленным. Каждый R9d независимо является -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -CO2R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2 или алифатическим C1-4, факультативно замещенным на R3 или R7. Кольцо С может быть незамещенным или может быть замещенным на любое одно или более колец его компонентов, в котором заместители могут быть одинаковыми или разными. В некоторых вариантах кольцо С является замещенным 0-2 независимо отобранными Rd и 0-3 независимо отобранными R2d или C1-6 алифатическими группами. Переменные R3, R4, R5, R6 и R7 являются таковыми, как оговорено выше для колец А и В. Переменные Rd и R2d описаны ниже.
Каждый Rd независимо является R2d, факультативно замещенный алифатической, или факультативно замещенный арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой.
Каждый R2d независимо является -гало, -NO2, -CN, -C(R5)=C(R5)2, -C(R5)=C(R5)2(R10), -C=C-R5, -C=C-R10, -OR5, -SR6, -S(O)R6, -SO2R6, -S02N(R4)2-N(R4)2, -NR4C(O)R5, -NR4C(O)N(R4)2, -NR4CO2R6, -O-CO2R5, -OC(O)N(R4)2, -O-C(O)R5, -CO2R5, -C(O)-C(O)R5, -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -C(=NR4)-N(R4)2, -C(=NR4)-OR5, -N(R4)-N(R4)2, -N(R4)C(=NR4)-N(R4)2, -N(R4)SO2R6, -N(R4)SO2N(R4)2, -P(O)(R5)2 или -Р(O)(OR5)2. Кроме того, R2d может представлять собой -SO3R5, -C(O)N(R4)C(=NR4)-N(R4)2 или -N(R4)C(=NR4)-N(R4)-C(O)R5.
В некоторых вариантах кольцо С является моноциклическим 5- или 6-членным арильным или гетероарильным кольцом, которое является замещенным 0-2 независимо отобранными заместителями Rd и 0-2 независимо отобранными R2d или С1-6 алифатическими группами. В некоторых таких вариантах кольцо С является факультативно замещенным гетероарильным кольцом, отобранным из группы, состоящей из пиридила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, имидазолила, пиразолила, и оксазолила. В некоторых других вариантах кольцо С - это замещенное или незамещенное фенильное кольцо. В некоторых вариантах, кольцо С является моноциклическим 5- или 6-членным арильным или гетероарильным кольцом, которое является замещенным 0, 1 или 2 заместителями Rd, как описано выше.
В некоторых других вариантах кольцо С является моноциклическим 5- или 6-членным гетероциклильным или циклоалифатическим кольцом, которое является замещенным 0-2 независимо отобранными заместителями Rd и 0-2 независимо отобранными R2d или C1-6 алифатическими группами.
В некоторых вариантах ингибитор Аврора киназы является соединением, представленным формулой (II):
или его фармацевтически приемлемой солью,
где:
Re является водородом или алифатическим C1-3, факультативно замещенным на R3 или R7;
кольцо А является замещенным с 0-3 Rb;
каждый Rb независимо является отобранным из группы, состоящей из алифатического C1-6, R2b, R7b, -T1-R2b и -T1-R7b-;
каждый R2b независимо является -гало, -NO2, -CN, -C(R5)=C(R5)2, -C=C-R5, -OR5, -SR6, -S(O)R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2, -N(R4)2, -NR4C(O)R5, -NR4C(O)N(R4)2, -NR4CO2R6, -O-CO2R5, -OC(O)N(R4)2, -O-C(O)R5, -CO2R5, -C(O)-C(O)R5, -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -C(=NR4)-N(R4)2, -C(=NR4)-OR5, -N(R4)-N(R4)2, -N(R4)C(=NR4)-N(R4)2, -N(R4)SO2R6, -N(R4)SO2N(R4)2, -P(O)(R5)2 или -Р(O)(OR5)2;
каждый R7b независимо является факультативно замещенной арильной, гетероциклильной или гетероарильной группой;
кольцо В является замещенным 0-2 независимо отобранными Rc и 0-2 независимо отобранными R2c или C1-6 алифатическими группами;
каждый Rc независимо является отобранным из группы, состоящей из алифатического C1-6, R2c, R7c, -T1-R2c и -T1-R7c;
каждый R2c независимо является -гало, -NO2, -CN, -C(R5)=C(R5)2, -C=C-R5, -OR5, -SR6, -S(O)R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2, -N(R4)2, -NR4C(O)R5, -NR4C(O)N(R4)2, -NR4CO2R6, -O-CO2R5, -OC(O)N(R4)2, -O-C(O)R5, -CO2R5, -C(O)-C(O)R5, -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -C(=NR4)-N(R4)2, -C(=NR4)-OR5, -N(R4)-N(R4)2, -N(R4)C(=NR4)-N(R4)2, -N(R4)SO2R6, -N(R4)SO2N(R4)2, -P(O)(R5)2 или -Р(O)(OR5)2;
каждый R7c независимо является факультативно замещенной арильной, гетероциклильной или гетероарильной группой;
Т1 представляет собой C1-6 алкиленовую цепь, факультативно замещенную на R3 или R3, где Т1 или его часть факультативно образует часть от 3- до 7-членного кольца;
кольцо С является замещенным 0-2 независимо отобранными Rd и 0-3 независимо отобранными R2d или C1-6 алифатическими группами;
каждый Rd независимо является отобранным из группы, состоящей из алифатического С1-6, R2d, R7d, -T2-R2d, -T2-R7d, -V-T3-R2d и -V-Т3-R7d;
Т2 представляет собой C1-6 алкиленовую цепь, факультативно замещенную на R3 или R3b, где алкиленовая цепь факультативно прерывается -C(R5)=C(R5), -С≡С-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -SO2N(R4)-, -N(R4)-, -N(R4)C(O)-, -NR4C(O)N(R4)-, -N(R4)CO2-, -C(O)N(R4)-, -C(O)-, -C(O)-C(O)-, -CO2, -OC(O)-, -ОС(O)O-, -OC(O)N(R4)-, -N(R4)-N(R4)-, -N(R4)SO2- или -SO2N(R4)- и где Т2 или его часть факультативно образует часть 3-7-членного кольца;
Т3 представляет собой C1-6 алкиленовую цепь, факультативно замещенную на R3 или R3b, где алкиленовая цепь факультативно прерывается -C(R5)=C(R5), -С≡С-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -SO2N(R4)-, -N(R4)-, -N(R4)C(O)-, -NR4C(O)N(R4)-, -N(R4)CO2-, -C(O)N(R4)-, -C(O)-, -C(O)-C(O)-, -CO2, -OC(O)-, -ОС(O)O-, -OC(O)N(R4)-, -N(R4)-N(R4)-, -N(R4)SO2-, или -SO2N(R4)-, и где Т3 или его часть факультативно образует часть 3-7-членного кольца;
V является -C(R5)=C(R5), -С≡С-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -SO2N(R4)-, -N(R4)-, -N(R4)C(O)-, -NR4C(O)N(R4)-, -N(R4)CO2-, -C(O)N(R4)-, -C(O)-, -C(O)-C(O)-, -CO2, -OC(O)-, -ОС(O)O-, -OC(O)N(R4)-, -C(NR4)=N-, -C(OR5)=N-, -N(R4)-N(R4)-, -N(R4)S02-, N(R4)SO2N(R4)-, -P(O)(R5)-, -P(O)(OR5)-O-, -P(O)-O-, или -Р(O)(NR5)-N(R5)-;
R2d является -гало, -NO2, -CN, -C(R5)=C(R5)2, -C≡C-R5, -OR5, -SR6, -S(O)R6, -SO2R6, -SO2N(R4)2, -N(R4)2, -NR4C(O)R5, -NR4C(O)N(R4)2, -NR4CO2R6;, -O-CO2R5, -OC(O)N(R4)2, -O-C(O)R5, -CO2R5, -C(O)-C(O)R5, -C(O)R5, -C(O)N(R4)2, -C(=NR4)-N(R4)2, -C(=NR4)-OR5, -N(R4)-N(R4)2, -N(R4)C(=NR4)-N(R4)2, -N(R4)SO2R6, -N(R4)SO2N(R4)2, -P(O)(R5)2 или -Р(O)(OR5)2 и
каждый R7d независимо является факультативно замещенной арильной, гетероциклильной или гетероарильной группой;
каждый R3 независимо является отобранным из группы, состоящей из -гало, -ОН, -О(C1-3алкил), -CN, -N(R4)2, -C(O)(C1-3алкил), -CO2H, -CO2(C1-3алкил), -C(O)NH2 и -C(O)NH(C1-3алкил);
каждый R3b независимо является алифатическим C1-3, факультативно замещенным на R3 или R7, или два заместителя R3b на том же атоме углерода, взятые вместе с атомом углерода, к которому они прикреплены, формируют 3-6-членное карбоциклическое кольцо;
каждый R4 независимо является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой; или два R4 на том же атоме азота, взятые вместе с атомом азота, образуют факультативно замещенное 5-8-членное гетероарильное или гетероциклильное кольцо, имеющее в дополнение к атому азота 0-2 кольцевых гетероатома, отобранных из N, О и S;
каждый R5 независимо является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой;
каждый R6 независимо является факультативно замещенной алифатической или арильной группой и
каждый R7 независимо является факультативно замещенной арильной, гетероциклильной или гетероарильной группой.
Таблица 1 содержит химические названия конкретных примеров соединений формулы (II).
В некоторых вариантах ингибитор Аврора киназы представлен формулой (III)
или ее фармацевтически приемлемой солью,
где:
Ra является отобранным из группы, состоящей из алифатического C1-3, фторалифатического С1-3, -R1, -T-R1, -R2
и -T-R2;
Т является С1-3 алкиленовой цепью, факультативно замещенной на фтор;
R1 представляет собой факультативно замещенную арильную, гетероарильную или гетероциклильную группу;
R2 является отобранным из группы, состоящей из гало, -C=C-R3, -CH=CH-R3, -N(R4)2 и -OR5;
R3 является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой;
каждый R4 независимо является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой; или два R4 на том же атоме азота, взятые вместе с атомом азота, образуют факультативно замещенное 5-6-членное гетероарильное или 4-8-членное гетероциклильное кольцо, имеющее в дополнение к атому азота 0-2 кольцевых гетероатома, отобранных из N, O и S;
R5 является водородом или факультативно замещенной алифатической, арильной, гетероарильной или гетероциклильной группой и
Rb является отобранным из группы, состоящей из фтора, хлора, -СН3, -CF3, -ОН, -ОСН3, -OCF3, -ОСН2СН3 и -OCH2CF3.
В некоторых вариантах R1 является 5- или 6-членным арильным, гетероарильным или гетероциклильным кольцом, факультативно замещенным одним или двумя заместителями, независимо отобранными из группы, состоящей из гало, алифатического C1-3 и фторалифатического C1-3. В отдельных вариантах R1 представляет собой кольцо фенила, фурила, пирролидинила или тиенила, факультативно замещенное одним или двумя заместителями, независимо отобранными из группы, состоящей из гало, алифатического C1-3 и фторалифатического C1-3.
В некоторых вариантах R3 является водородом, алифатическим C1-3, фторалифатическим C1-3 или -CH2-ОСН3.
В некоторых вариантах R5 является водородом, алифатическим С1-3, фторалифатическим C1-3.
В отдельных вариантах R'1 является гало, алифатическим C1-3, фторалифатическим C1-3, -ОН, -О (C1-3 алифатический), -О (C3-3 фторалифатический), -C=C-R3, -CH=CH-R3 или факультативно замещенным кольцом пирролидинила, тиенила, фурила или фенила, где R3 является водородом, алифатическим C1-3, фторалифатическим C1-3 или -СН2-ОСН3. В отдельных частных вариантах, Ra является отобранным из группы, состоящей из хлора, фтора, алифатического С1-3, фторалифатического C1-3, -ОСН3, -OCF3, -С=С-Н, -С=С-СН3, -С=С-CH2OCH3, -СН=СН2, -СН=СНСН3, N-метилпирролидинила, тиенила, метилтиенила, фурила, метилфурила, фенила, фторфенила и толила.
Таблица 2 содержит химические названия конкретных примеров соединений формулы (III).
В одном варианте соединение формулы (III) представляет собой 4-{[9-хлор-7-(2-фтор-6-метоксифенил)-5Н-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино}-6-метоксибензоевую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль. В отдельном варианте соединение формулы (III) представляет собой натрия 4-{[9-хлор-7-(2-фтор-6-метоксифенил)-5Н-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино}-2-метоксибензоат.
Любое антитело, способное связываться с антигеном CD20, может быть использовано в способах данного изобретения. Антитела, которые связываются с антигеном CD20, включают, например, С2 В8 (ритуксимаб; Ритуксан®) (патент США No5736137 включен в данный документ в качестве ссылки.); меченное иттрием - [90] 2138 мышиное антитело, обозначенное как Y2B8 (патент США No5736137 включен в данный документ в качестве ссылки); мышиные IgG2a 131, факультативно меченные 131 I для создания 131 I-B1 антитела (BEXXARTM®) (патент США No5595721 включен в данный документ в качестве ссылки); мышиные моноклональные антитела 1F5 (Press et al. Blood 69 (2): 584-591 (1987)); химерные антитела 2Н7 (патент США No5677180 включен в данный документ в качестве ссылки), а также моноклональные антитела L27, G28-2, 93-1133, В-С1 или NU-B2, коммерчески доступные от Международной мастерской типирования лейкоцитов (Valentine et al., In: Leukocyte TypingUI (McMichael, Ed., p.440, Oxford University Press (1987)).
В некоторых вариантах анти-CD20 антитело является ритуксимабом. Ритуксимаб представляет собой полученное с помощью генной инженерии химерное мышиное/человеческое моноклональное антитело. Ритуксимаб представляет собой IgG, каппа-иммуноглобулин, содержащий мышиные переменные участки последовательности легких и тяжелых цепей и человеческие постоянные участки последовательности. Ритуксимаб обладает сродством к связыванию с антигеном CD20 около 8,0 нм. Он является коммерчески доступным, например, от компании Genentech (Южный Сан-Франциско, Калифорния).
В некоторых вариантах анти-CD20 антитело, используемое в настоящем изобретении, может быть введено вместе со стандартными химиотерапевтическими лекарственными средствами/комбинацией, как, например, со схемой химиотерапии CHOP, которая является схемой, состоящей из комбинации циклофосфамида, доксорубицина, винкристина и преднизолона. Назначение ритуксимаба утверждено в комбинации с химиотерапией CHOP для лечения определенных типов лимфом, и эта комбинация стала известна, как RCHOP-химиотерапия.
Соединения формул (I), (II) и (III), также как соединения, описанные в таких документах, как, например, WO 05/111039, US 2005/0256102, US 2007/0185087, WO 08/021038, US 2008/0045501, WO 08/063525, US 2008/0167292, WO 07/113212, EP1644376, US 2005/0032839, WO 05/005427, WO 06/070192, WO 06/070198, WO 06/070202, WO 06/070195, WO 06/003440, WO 05/002576, WO 05/002552, WO 04/071507, WO 04/058781, WO 06/055528, WO 06/055561, WO 05/118544, WO 05/013996, WO 06/036266, US 2006/0160874, US 2007/0142368, WO 04/043953, WO 07/132220, WO 07/132221, WO 07/132228, WO 04/00833 и WO 07/056164, являются ингибиторами Аврора киназы. Соединения могут быть исследованы in vitro или in vivo в отношении их способности связываться с и/или ингибировать Аврора киназу. Анализы in vitro включают исследование, позволяющее определить ингибирование способности Аврора киназы фосфорилировать белковый или пептидный субстрат. Дополнительные исследования in vitro предоставляют количественный анализ способности соединения связываться с Аврора киназой. Связывание ингибитора может быть измерено с помощью радиоактивной метки ингибитора до связывания, изолирования комплекса ингибитор/Аврора киназа и установления количества радиоактивно меченных связей. В качестве альтернативы, связывание ингибитора может быть определено путем проведения конкурентного эксперимента, в котором новые ингибиторы инкубируют с Аврора киназой, связанной с радиоактивно меченными лигандами. Также может быть исследована способность соединений оказывать влияние на клеточные или физиологические функции, опосредованные активностью Аврора киназы. Исследования каждого из этих видов деятельности являются известными в данной области техники.
В другом аспекте, следовательно, изобретение предоставляет способ ингибирования клеточного роста/клеточной пролиферации, включающий контактирование клетки с ингибитором Аврора киназы в сочетании с анти CD20 антителом, таким, как, например, ритуксимаб. В другом варианте изобретение предоставляет способ ингибирования клеточного роста/клеточной пролиферации, включающий контактирование клетки с ингибитором Аврора киназы в сочетании с RCHOP химиотерапией.
Предпочтительно, чтобы способ согласно изобретению вызывал ингибирование клеточной пролиферации клеток, с которыми осуществлялся контакт. Фраза "ингибирование пролиферации клеток" используется для обозначения способности ингибитора Аврора киназы и/или анти-CD20 антитела ингибировать увеличение количества клеток или клеточный рост в клетках, с которыми осуществлялся контакт по сравнению с клетками, которые не контактировали с ингибитором и/или антителом. Оценка клеточной пролиферации может быть проведена путем подсчета клеток, используя счетчик клеток или путем исследования жизнеспособности клеток, например, с помощью анализов БДУ, МТТ, ХТТ или WST. Если клетки находятся в массиве роста (например, плотная опухоль или орган), такое оценивание клеточной пролиферации может быть выполнено путем измерения новообразования, например циркулем, и сравнением размера новообразования контактировавших клеток с неконтактирующими клетками.
Предпочтительно, если рост новообразования из клеток, контактировавших с ингибитором Аврора киназы и анти-CD20 антителом, замедляется как минимум на 50% по сравнению с ростом неконтактировавших клеток. В различных вариантах клеточная пролиферация контактировавших клеток ингибируется, по крайней мере, на 75%, по крайней мере, на 90% или, по крайней мере, на 95% по сравнению с неконтактировавшими клетками. В некоторых вариантах, фраза "ингибирование клеточной пролиферации" включает уменьшение контактировавших клеток по сравнению с неконтактировавшими клетками. Таким образом, ингибитор Аврора киназы и/или анти-CD20 антитело, которые ингибируют клеточную пролиферацию в контактировавших клетках, могут стимулировать контактировавшие клетки претерпевать торможение роста, претерпевать задержание роста, претерпевать программируемую гибель клеток (например, апоптоз) или претерпевать некротическую гибель клеток.
В другом аспекте изобретение предоставляет фармацевтическую композицию, содержащую i) ингибитор Аврора киназы; и ii) анти-CD20 антитело. В некоторых вариантах ингибитор Аврора киназы является отобранным из группы, состоящей из i) соединений формулы (I), (II) и (III); ii) соединений, описанных, например, в документах WO 05/111039, US 2005/0256102, US 2007/0185087, WO 08/021038, US 2008/0045501, WO 08/063525, US 2008/0167292, WO 07/113212, EP 1644376, US 2005/0032839, WO 05/005427, WO 06/070192, WO 06/070198, WO 06/070202, WO 06/070195, WO 06/003440, WO 05/002576, WO 05/002552, WO 04/071507, WO 04/058781, WO 06/055528, WO 06/055561, WO 05/118544, WO 05/013996, WO 06/036266, US 2006/0160874, US 2007/0142368, WO 04/043953, WO 07/132220, WO 07/132221, WO 07/132228, WO 04/00833 и WO 07/056164; и их фармацевтически приемлемых солей.
Если в таких композициях используют фармацевтически приемлемую соль ингибитора Аврора киназы, предпочтительно, чтобы соль была получена из неорганической или органической кислоты или основания. Для обзора подходящих солей, см., например работы Berge et al, J. Pharm. Sci. 66:1-19 (1977) и Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed, ed. A. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000.
Heограничивающие примеры подходящих кислых аддитивных солей включают следующие: ацетат, адипат, алгинат, аспартат, бензоат, бензен сульфонат, бисульфат, бугират, цитрат, камфорат, камфары сульфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецисульфат, этансульфонат, фумарат, люкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, 2-нафталенсульфонат, никотинат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенил-пропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, тозилат и андеканоат.
Подходящие примеры основных аддитивных солей включают без ограничений соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия и калия, соли щелочноземельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли с органическими основаниями, такие как дициклогексиламин, N-метил-D-глюкамин, t-бугиламин, этилен диамин, этаноламин и холин, и соли с аминокислотами, такие как аргинин, лизин, и так далее.
Также основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы с такими агентами, как низкоалкильные галогениды, такие как метил, этил, пропил и бутил хлориды, бромиды и йодиды; диалкил сульфаты, такие как диметил, диэтил, дибутил и диамил сульфаты, длинноцепочечные галогениды, такие какдецил, лаурил, миристил и стеарил хлориды, бромиды и йодиды, аралкил галогениды, такие как бензил и фенэтил бромиды и другие. Таким образом, получают водо- или маслорастворимые или дисперсные продукты.
Термин "фармацевтически приемлемый носитель" используется в данном документе в отношении вещества, совместимого с субъектом-реципиентом, предпочтительно млекопитающим, более предпочтительно человеком, которое является пригодным для доставки активного агента к целевому месторасположению без ограничения активности агента. Токсичность или побочные эффекты, ассоциированные с носителем, предпочтительно являются соизмеримыми с приемлемым соотношением риск/преимущество для планового использования активного агента.
Термины "носитель", "адьювант" или "транспортное средство" используются взаимозаменяемо в данном документе и включают любой и все растворители, разбавители и другие жидкие транспортные средства, вспомогательные средства в виде дисперсий и суспензий, поверхностно- активные вещества, изотонические агенты, сгущающие или эмульгирующие вещества, консерванты, твердые связующие вещества, смазочные вещества и подобные в соответствии с особенностями требуемой лекарственной формы Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed, ed. A.Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000 описали различные носители, используемые в разработке фармацевтически приемлемых композиций и известные технологии их изготовления. За исключением тех случаев, когда любой обычный носитель является несовместимым с соединениями изобретения, как, например, производя любое нежелательное биологическое действие или взаимодействуя иным опасным образом с любым другим компонентом(ами) фармацевтически приемлемой композиции, ее использование предполагается в рамках этого изобретения. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей включают, но не ограничиваясь, ионообменники, окись алюминия (глинозем), алюминия стеарат, лецитин, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как динатрия гидрофосфат, калия гидрофосфат, карбонат натрия, бикарбонат натрия, карбонат калия, бикарбонат калия, гидроксид магния и гидроксид алюминия, глицин, сорбиновая кислота, или сорбат калия, частичные глицеридные смеси насыщенных растительных жирных кислот, вода, апирогенная вода, соли и электролиты, такие как протамин сульфат, динатрия гидрофосфат, калия гидрофосфат, натрия хлорид и соли цинка, коллоидный диоксид кремния, магния трисиликат, поливинил пирролидон, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-блок-сополимеры, ланолин, сахара, такие как лактоза, глюкоза, сахароза, крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал, целлюлоза и ее производные, такие как натрия карбоксиметил целлюлоза, этил целлюлоза и ацетат целлюлозы, порошкообразный трагакант; солод, желатин, тальк, наполнители, такие как какао масло и воск для суппозиториев, масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и масло сои, гликоли, такие как пропиленгликоль и полиэтилен гликоль, эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат, агар, альгиновая кислота, изотонический раствор, раствор Рингера, спирты, такие как этанол, изопропиловый спирт, гексадециловый спирт и глицерин, циклодекстрины, любриканты, такие как лаурилсульфат натрия и магния стеарат, нефтяные углеводороды, такие как минеральное масло и вазелин. Вещества-красители, высвобождающие вещества, вещества для покрытия, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты могут также присутствовать в композиции в соответствии с рецептурой.
Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть изготовлены способами, хорошо известными в данной области, такими как обычное гранулирование, смешивание, растворение, инкапсуляция, лиофилизация или эмульгирующие процессы, среди прочих. Композиции могут быть произведены в различных лекарственных формах, включая гранулы, преципитаты или взвеси, порошки, в том числе сублимированные, высушенные ротором или распылением порошки, аморфные порошки, таблетки, капсулы, сиропы, суппозитории, инъекции, эмульсии, эликсиры, суспензии или растворы. Составы могут необязательно содержать растворители, разбавители и другие жидкие транспортные средства, вспомогательные средства в виде дисперсий и суспензий, поверхностно-активные вещества, модификаторы рН, изотонические агенты, сгущающие или эмульгирующие вещества, стабилизаторы и консерванты, твердые связующие вещества, смазочные вещества и подобные в соответствии с особенностями требуемой лекарственной формы.
В соответствии с предпочтительным вариантом композиции данного изобретения составлены для фармацевтического введения млекопитающим, предпочтительно человеку. Такие фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить перорально, парентерально, ингаляционно, местно, ректально, через нос, защечно, вагинально или через имплантированный резервуар. Термин "парентеральный", используемый здесь, включает подкожные, внутривенные, внутримышечные, внутрисуставные, внутрисиновиальные, интрастернальные, интратекальные, внутрипеченочные, внутрь очага повреждения и внутричерепные инъекции или вливания. Предпочтительно композиции вводят перорально, внутривенно или подкожно. Составы композиций, согласно настоящему изобретению, могут быть предназначены для короткого действия, быстрого высвобождения или пролонгированного действия. Более того, соединения могут быть введены местными, а не системными способами, такими как введение (например, в виде инъекций) непосредственно в опухоли.
Жидкие лекарственные формы для перорального применения включают, но не ограничиваясь, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как, например, воду или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бугиленгликоль, циклодекстрины, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло зародышей пшеницы, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и эфиры жирных кислот сорбита и их смеси. Кроме инертных разбавителей, композиции для орального введения могут также включать адъюванты, такие как увлажняющие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Препараты для инъекций, например, стерильные водные или масляные инъекционные суспензии могут быть получены в соответствии с известными способами с использованием подходящих диспергирующих или увлажняющих веществ и суспендирующих веществ. Стерильным инъекционным препаратом может также быть стерильный раствор для инъекций, суспензия или эмульсия в нетоксичном разбавителе или растворителе, приемлемом для парентерального введения, например, как раствор в 1,3-бугандиоле. Среди приемлемых транспортных средств и растворителей, которые могут быть использованы, находятся вода, раствор Рингера, U.S.Р. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жирные (нелетучие) масла обычно используют в качестве растворяющей или суспендирующей среды. Для этой цели может быть использовано любое жирное нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, используется в приготовлении инъекционного лекарственного средства. Инъекционные препараты могут быть стерилизованы, например, путем фильтрации через фильтр, удерживающий бактерии, либо путем включения стерилизующих агентов в виде стерильных твердых композиций, которые перед использованием могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или других стерильных инъекционных средах. Композиции, составленные для парентерального введения, могут быть введены путем болюсной инъекции или путем рассчитанного по времени введения или могут быть введены путем непрерывной инфузии.
Для того чтобы продлить эффект соединения согласно настоящему изобретению, часто является желательным замедлить всасывание вещества, введенного в виде подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть достигнуто путем использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного вещества с плохой растворимостью в воде. Скорость поглощения соединения в этом случае зависит от скорости его растворения, что, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической структуры. Кроме того, задержка поглощения парентерально введенного соединения осуществляется путем растворения или суспендирования соединения в масляном носителе. Лекарственные формы в виде инъекционных депо производятся путем формирования микрокапсульного матрикса соединения в биоразлагаемых полимерах, таких как, например, полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения соединения к полимеру и свойств конкретного используемого полимера можно управлять скоростью высвобождения соединения. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Лекарственные формы в виде инъекционных депо, также изготавливают путем заключения соединения в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.
Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно являются суппозиториями, которые могут быть получены путем смешивания соединений этого изобретения с подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при комнатной температуре, но жидкими при температуре тела и, следовательно, расплавляются в прямой кишке или вагинальный полости и высвобождают активное соединение.
Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешивают, по крайней мере, с одним инертным, фармацевтически приемлемым наполнителем или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат и/или а) наполнителем или добавкой, таким как крахмал, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит, кремниевая кислота, б) связующими веществами, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, алгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза, гуммиарабик, в) увлажнителями, такими как глицерин, г) дезинтегрирующими агентами, такими как агар-агар, карбонат кальция, крахмал из картофеля или тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, д) задерживающими раствор агентами, такими, как парафин, е) ускорителями абсорбции, такими, как соединения четвертичного аммония, ж) увлажняющими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и глицерина моностеарат, з) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и и) смазочными материалами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтилен гликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси. В отношении капсул, таблеток и пилюль эти лекарственные формы могут также содержать буферные агенты, такие как фосфаты или карбонаты.
Твердые композиции подобного типа могут быть также использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых заполненных желатиновых капсулах, с использованием таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочный сахар, а также с использованием полиэтиленгликоля с высокой молекулярной массой и подобных веществ. Твердые лекарственные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль, и гранул могут быть изготовлены с покрытием и в оболочках, как, например, кишечнорастворимое покрытие и другие покрытия, хорошо известные в области техники разработки фармацевтических рецептур. Они могут факультативно содержать контрастирующие вещества, а также могут быть из таких композиций, которые высвобождают активный ингредиент(ы) только или преимущественно в определенной части желудочно-кишечного тракта, при необходимости, с отсроченным действием. Примеры вложенных композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции подобного типа могут быть также использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых заполненных желатиновых капсулах, с использованием таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочный сахар, а также с использованием полиэтиленгликоля с высокой молекулярной массой и подобных веществ.
Активные соединения могут также быть в микроинкапсулированной форме с одним или более вспомогательными веществами, как отмечено выше. Твердые лекарственные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с покрытием и в оболочках, как например кишечнорастворимое покрытие, покрытие, контролирующее высвобождение лекарственного средства, и другие покрытия, хорошо известные в области техники разработки фармацевтических рецептур. В таких твердых лекарственных формах активное соединение может быть смешано, по крайней мере, с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие лекарственные формы могут также содержать, как это принято в стандартной практике, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, таблетированные смазывающие вещества и другие таблетированные средства, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль эти лекарственные формы могут также содержать буферные агенты. Они могут факультативно содержать контрастирующие вещества, а также могут быть из таких композиций, которые высвобождают активный ингредиент(ы) только или преимущественно в определенной части желудочно-кишечного тракта, при необходимости, с отсроченным действием. Примеры вложенных композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски.
Лекарственные формы соединений этого изобретения для местного или трансдермального введения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы и пластыри. Активный компонент смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами и буферами, которые могут потребоваться. Офтальмологические составы, ушные капли и глазные капли также рассматриваются в рамках этого изобретения. Кроме того, настоящее изобретение предполагает использование трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество в обеспечении контролируемой доставки соединения к телу. Такие лекарственные формы могут быть приготовлены путем растворения или распределения соединения в соответствующей среде. Усилители всасывания также могут быть использованы для увеличения поступления соединения через кожу. Скорость может контролироваться либо посредством мембраны, контролирующей скорость, или путем диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.
Формулировка антитела или фрагмента для введения будет варьироваться в зависимости от выбранного способа введения и рецептуры средства (например, раствор, эмульсия, капсулы). Соответствующая фармацевтическая композиция для введения, содержащая антитело или его функциональный фрагмент, может быть приготовлена в физиологически приемлемом транспортном средстве или носителе. Смесь антител и/или их фрагментов также может быть использована. Для растворов или эмульсий подходящие носители включают, например, водные или спиртовые/водные растворы, эмульсии или суспензии, в том числе изотонический раствор хлорида натрия и буферные среды. Парентеральные транспортные средства могут включать раствор хлорида натрия, декстрозу Рингера, раствор декстрозы и хлорида натрия, лактата Рингера или жирные масла. Многообразие соответствующих водных носителей, известное специалистам в данной области техники, включает воду, буфер воды, солевой буфер, полиолы (например, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль), раствор декстрозы и глицин. Внутривенные транспортные средства могут включать в себя различные добавки, консерванты или пополнители жидкости, питательные вещества или электролиты (см., в общих чертах, Remington's Pharmaceutical Science, 16th Edition, Mack, Ed. 1980). Композиции могут дополнительно содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, необходимые для того, чтобы приблизительно соответствовать физиологическим условиям, такие как рН настраивающие и буферные вещества, и вещества, регулирующие токсичность, например, ацетат натрия, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид кальция и натрия лактат. Антитела и фрагменты согласно этому изобретению могут быть лиофилизированы для хранения и восстановления в подходящем носителе перед использованием в соответствии с известными техниками лиофилизации и восстановления. Оптимальная концентрация активного ингредиента(ов) в выбранной среде может быть определена эмпирически, в соответствии с процедурами, хорошо известными специалисту в данной области, и будет зависеть от заданного конечного фармацевтического препарата. Для ингаляции антитело или фрагмент могут быть растворены и загружены в подходящий дозатор для введения (например, пульверизатор, распылитель, дозатор для аэрозоля, находящийся под давлением).
Антитело или фрагмент можно вводить в виде однократной дозы или многократных доз. Дозировка может быть определена способами, известными в данной области техники и зависит, например, от выбранного антитела или фрагмента, возраста субъекта, чувствительности и переносимости лекарственных средств и общего состояния здоровья. Антитела и их антиген-связывающие фрагменты, такие как человеческие, гуманизированные и химерные антитела и их антиген-связывающие фрагменты часто могут вводиться с меньшей частотой, чем другие виды терапии. Например, эффективное количество антител может находиться в пределах от около 0,01 мг/кг до примерно 5 мг/кг или 10 мг/кг, вводимое ежедневно, еженедельно, раз в две недели или ежемесячно.
Настоящее изобретение предлагает новую комбинированную терапию для лечения гематологических злокачественных заболеваний. Используемый здесь термин "гематологические злокачественные заболевания" включает в себя любое злокачественное заболевание, связанное с клетками кровотока, костного мозга и лимфоидной системы, в том числе печени, селезенки и лимфатических узлов. Неограничивающие примеры гематологических злокачественных заболеваний включают В- и Т-клеточные лимфомы и лейкемии. Неограничивающие примеры В- и Т-клеточных лимфом, включают, например, низкодифференцированную/фолликулярную неходжкинскую лимфому (НХЛ), из малых лимфоцитов (МЛ) НХЛ, Т- или В- пролимфоцитную лейкемию, диффузную крупноклеточную из В-клеток НХЛ, периферическую Т-клеточную лимфому, лимфому из клеток зоны мантии, лимфому из клеток маргинальной зоны, В- или Т-клеточную лимфобластную лимфому, лимфому Беркитта, первичную лимфому щитовидной железы, макроглобулинемию Вальденстрема или лимфоплазмоцитарную лимфому. Неограничивающие примеры лейкозов включают, например, хронический лейкоцитарный лейкоз, острый миелобластный лейкоз (ОМЛ), острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелобластный лейкоз, лимфобластный лейкоз, лимфоцитарный лейкоз, моноцитарный лейкоз, миелоидный лейкоз и промиелоцитарный лейкоз. Неограничивающие примеры гематологических злокачественных заболеваний дополнительно включают, например, множественную миелому, синдромы миелодисплазии (МДС), в том числе рефракторную анемию (РА), рефракторную анемию с кольцевидными сидеробластами (РАКС), (рефракторную анемию с избытком бластов (РАИБ) и РАИБ в трансформации (РАИБ-Т); и миелопролиферативные синдромы. Специалистам в этой области должно быть понятно, что эти патологические состояния часто могут иметь различные названия из-за отличающихся/изменяющихся систем классификации.
В некоторых вариантах гематологические злокачественные заболевания, которые лечат способом согласно изобретению, являются такими, в которых активность Аврора киназы является усиленной и в которых экспрессируется антиген CD20. В некоторых вариантах гематологические злокачественные заболевания являются отобранными из группы, состоящей из лимфомы, лейкемии и множественной миеломы. В некоторых вариантах лимфомы отобраны из группы, состоящей из В-клеточной лимфомы, неходжкинской лимфомы и лимфомы из клеток мантийной зоны.
Термин "пациент", используемый здесь, означает животное, предпочтительно млекопитающее, более предпочтительно человек. В некоторых вариантах пациент был пролечен лекарственным средством, например, ингибитором Аврора киназы или анти-CD20 антителом, перед началом лечения согласно способу изобретения. В некоторых вариантах пациент является пациентом с риском развития или пациентом, испытывающим рецидив гематологического злокачественного заболевания.
Выражение «терапевтически эффективное количество» относится к количеству лекарственного вещества (например, ингибитору Аврора киназы и/или анти-CD20 антителу), эффективного для лечения или профилактики или улучшения симптомов гематологических злокачественных заболеваний, рассматриваемых в данном документе.
Композиции для использования в способе изобретения могут быть составлены в форме единицы лекарственной формы для легкости введения и единообразия дозировки. Выражение "единица лекарственной формы", используемое здесь, относится к физически дискретным единицам вещества, предназначенным для пациентов, подлежащих лечению. Следует, однако, иметь в виду, что общее суточное использование соединений и композиций согласно настоящему изобретению будет определяться лечащим врачом в пределах обоснованной медицинской оценки. Стандартная единица лекарственной формы для парентерального введения может быть в ампулах или в многодозовых контейнерах.
Ингибитор Аврора киназы может быть введен с анти-CD20 антителом в одной лекарственной форме или в виде отдельной лекарственной формы. При приеме внутрь в качестве отдельной лекарственной формы, анти-CD20 антитело может быть введено согласно изобретению до, во время или после введения ингибитора Аврора киназы.
Как специально предусмотрено в настоящем документе, изобретение включает в себя следующие способы: способ лечения пациента, страдающего от гематологического злокачественного заболевания, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с анти-CD20 антителом (например, до или после); способ лечения пациента, страдающего от гематологического злокачественного заболевания, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с ритуксимабом (например, до или после); способ лечения пациента, страдающего от лимфомы, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с анти-CD20 антителом (например, до или после); способ лечения пациента, страдающего от лимфомы, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с ритуксимабом (например, до или после); способ лечения пациента, страдающего от лейкемии, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с анти-CD20 антителом (например, до или после); способ лечения пациента, страдающего от лейкемии, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с ритуксимабом (например, до или после); способ лечения пациента, страдающего от множественной миеломы, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с анти-CD20 антителом (например, до или после); и способ лечения пациента, страдающего от множественной миеломы, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с ритуксимабом. (например, до или после).
В некоторых частных воплощениях способ согласно изобретению включает введение пациенту, страдающему от гематологических злокачественных заболеваний, терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы формулы (I), (II) или (III), как определено здесь, одновременно или последовательно с ритуксимабом (например, до или после).
Кроме того, изобретение относится к использованию ингибитора Аврора киназы для изготовления лекарственного средства для лечения гематологических злокачественных новообразований. В других конкретных вариантах изобретение относится к использованию ингибитора Аврора киназы формулы (I), (II) или (III), как определено здесь, в производстве лекарственного средства для использования в комбинированной терапии с ритуксимабом для лечения гематологических злокачественных заболеваний.
Если не определено иное, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют тот же смысл, как это обычно понимается любым из специалистов в области техники, к которой принадлежит это изобретение. Хотя любые методы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны здесь, могут быть использованы в практике или тестировании настоящего изобретения, предпочтительные способы, приборы и материалы, - это те, которые описаны здесь. Все публикации, упомянутые здесь, являются включенными в данный документ в качестве ссылки во всей их полноте с целью описания и раскрытия материалов и методик, которые, как сообщается в публикации, могут быть использованы в связи с изобретением.
ПРИМЕРЫ
Определения
Экспериментальный обзор
Lyl9-Luc, WSU-ДКВКЛ2-Luc и РНТХ-22-06 модели, описанные в этих исследованиях, являются клеточными линиями ДКВКЛ человека, трансфицированными люциферазой. Эти модели были выращены у иммунокомпрометированных мышей подкожно в боковых частях или путем диссеминации по всему телу посредством введения инъекции в хвостовую вену. Перорально вводили 4-{[9-хлор-7-(2-фтор-6-метоксифенил)-5Н-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино}-2-метоксибензоевая кислота (III-1) двумя схемами дозирования: один раз в день и два раза в день, также вводили ритуксимаб в виде ВВ инъекции ОРН×3. Эффективность, рост опухоли и выживаемость после лечения у мышей, пролеченных Соединением III-1 и ритуксимабом, сравнивали как при проведении монотерапии этими веществами или в комбинации.
ПОДКОЖНЫЕ МОДЕЛИ
ПРИМЕР 1: Сочетание специфического ингибитора Аврора А киназы (соединение III-1) и ритуксимаба в модели подкожной Ly19 лимфомы. выращенной у самок мышей с ТКИД.
Экспериментальный обзор
В данном эксперименте ведется наблюдение in vivo за объемом опухоли после лечения с помощью комбинации Соединения III-1 и ритуксимаба. Рост опухоли контролируют с помощью нониусного циркуля. Средний объем опухоли рассчитывают по формуле V=W2×L/2. Когда средний объем опухоли достигает около 200 мм3, животных распределяют случайным образом в следующие восемь групп лечения, каждая из которых состоит из десяти мышей:
- Транспортное средство
- 3 мг/кг Соединение III-1 (ОРД)
- 10 мг/кг Соединение III-1 (ОРД)
- 10 мг/кг Соединение III-1 (ДРС)
- 10 мг/кг ритуксимаб (ОРН)
- 3 мг/кг Соединение III-1 (ОРД)+10 мг/кг ритуксимаб (ОРН)
- 10 мг/кг Соединение III-1 (ОРД)+10 мг/кг ритуксимаб (ОРН)
- 10 мг/кг Соединение III-1 (ДРС)+10 мг/кг ритуксимаб (ОРН)
Животных прививают 4.0×106 клеток из клеточной линии Ly-19 в виде импланта в боковую область (клеточная суспензия). Соединения вводят в течение 21 дня и измеряют объемы опухоли на 0, 5, 13, 15, 18 и 21 дни. После окончания лечения выживших мышей продолжают оценивать на 25, 28, 33, 36, 40, 43, 47, 50, 54, 60 и 62 день.
Существуют несколько конечных точек в данном эксперименте. Основная цель - это определить, является ли сочетание Соединения III-1 и ритуксимаба более эффективным средством для уменьшения объема опухоли, чем монотерапия любым из этих препаратов. Второй конечной точкой является межгрупповая оценка уровня возобновления роста опухоли после завершения лечения.
Статистическая методология
Статистический анализ проводят с помощью линейной модели регрессии смешанных эффектов. Эта модель учитывает различия в тенденциях роста опухоли между контрольными и пролеченными образцами. Статистическое моделирование проводят в два этапа: приведение модели в соответствие и выбор модели. На первом этапе семью из десяти тесно связанных моделей регрессии смешанных эффектов устанавливают на данные исследования. Используют данные со всех временных точек исследования, в том числе данные относительно мышей, которые были умерщвлены до конца исследования. Для каждой группы лечения устанавливают квадратичную линию тренда для роста опухоли, которая состоит из условий для роста опухоли (до трех): нулевого порядка (начало координат), первого порядка (наклон) и второго порядка (кривизна). Каждый вид лечения лекарственным средством затем моделируют до двух условий взаимодействия, одно описывающее различия в наклоне, а другое с описанием разницы в кривизне в связи с лекарственной терапией. Кроме того, учитывают специфическую мышиную изменчивость с помощью включения случайных эффектов для каждой мыши с тремя условиями: мышь-специфический эффект начало координат, наклон или кривизна. Повторные измерения роста опухоли для данной мыши моделируют с помощью ковариационной структуры симметрии соединения.
Путем первой фильтрации моделей выполняют выбор модели, алгоритм подбора, который не был способен привести в соответствие численно устойчивым образом (в частности, путем удаления моделей, которые продемонстрировали чувствительность к исходному значению коэффициента автокорреляции, и тех, для кого вариационная-ковариационная матрица случайных эффектов не была определена позитивно). Затем выбирается модель, подходящая наилучшим образом, с помощью статистического критерия, который называют байесовский информационный критерий (БИК), который является мерой доброкачественности подходящей модели и который учитывает количество параметров, используемых в модели, и абсолютную величину остатков - разницу между подходящими и наблюдаемыми значениями. БИК поддерживает модели, которые являются простыми (экономными) и которые хорошо соответствуют базовым данным.
Подгонку модели и процедуру отбора проводят дважды, один раз на исходных (непреобразованных) данных и один раз на log10 преобразованных данных. Как только автоматизированная процедура подгонки и отбора модели завершены, создают две наиболее подходящие модели, одну на логарифмически преобразованных данных, а другую на непреобразованных данных. Исследователь затем изучает диагностические графики, созданные двумя статистическими моделями и отбирает одну из них по качеству модели, подходящей для изучения. Выбор производят на основе распределения остатков, а также их поведения по отношению к установленным значениям. Очевидные отклонения в остатках свидетельствуют о недостаточной подгонке модели, подсказывая, что при отклонении остатка в данных модель несостоятельна для того, чтобы ее приняли во внимание.
После выбора соответствующей статистической модели рассчитывают величину эффекта как разницу между площадью под кривой подходящей модели (ΔAUC) для пролеченной и контрольной групп в сравнении с площадью под кривой подходящей модели для контрольной группы. Показатель ΔAUC, равный 0, означает, что кривые для группы лечения и контрольной группы были одинаковы, в то время как отрицательное значение ΔAUC указывает на торможение роста опухоли в результате лечения.
Значение величины эффекта для данного попарного сравнения оценивают с помощью перестановочного анализа. Во время этой процедуры назначения мышей в группы лечения и контроля перетасовывают случайным образом. Метрическую ΔAUC рассчитывают для сравнения между этими новыми условными группами и процесс повторяют 2000 раз. Это приводит к эмпирическому распределению значений ΔAUC для нулевой гипотезы, которое фиксирует отсутствие разницы в значениях ΔAUC между группами лечения и контроля. Зарегистрированное р-значение является соотношением переставляемых значений ΔAUC, которые больше, чем ΔAUC из исходной группы распределения. Р-значения <0,05 считаются существенными.
Для исследований комбинированного лечения также регистрируют степень синергии (в дополнение к степени торможения роста опухоли в каждой группе исследования относительно контроля). Для измерения степени синергии подход и результаты, описанные здесь, являются по существу эквивалентными, за исключением того, что величину эффекта определяют иначе и тестирование перестановки проводят в четырех группах, а не в двух. Величину эффекта для комбинаций определяют как: ΔAVC=[AUCA×B-AUCctl-(AUCA-AUCctl+AUCB-AUCctl)]/AUCctl (где А×В представляет собой комбинированное лечение, ctl является контролем и А и В являются лекарственнымим веществами, которые используют отдельно). ΔAUC менее нуля означает, что комбинированное лечение привело к большему уменьшению площади под кривой, чем сумма отдельных видов лечения, что указывает на синергическое торможение роста опухоли. Перестановочное тестирование проводят с целью сравнения разницы между контролем и комбинированным лечением с разницей, которую можно было бы наблюдать, если бы лечение было чисто аддитивным. Измерение синергии, описанное здесь, представлено на основе расчетов ΔAUC и на основе расчетов ТРО. Поскольку расчеты ΔAUC охватывают весь период лечения на протяжении эксперимента, такие расчеты считаются более полными и точными, чем расчеты ТРО.
Результаты
В этом исследовании всех животных во всех группах лечения выдержали 21 день лечения.
Средний объем опухоли в группе, которая получала транспортное средство, увеличился почти в шестнадцать, со 180 мм3 на день 0 до более 2850 мм3 на день 21, и это привело к значению средней площади под кривыми зависимости логарифма (кратности изменений) от времени (AUC), равному 12,9. Значения AUC, и, следовательно, объемы опухоли в каждый группе лечения были меньше по сравнению с группой, получавшей транспортное средство (таблица 3а). Результаты модели линейной регрессии продемонстрировали, что все эти различия по отношению к группе, получавшей транспортное средство, были значительными (см. таблицу 3b).
Среднее процентное изменение в площади под logic кратным изменением против суточных кривых (AUC) по отношению к средней AUC группы, получающей транспортное средство.
Краткое изложение результатов линейной модели регрессии смешанных эффектов
Три группы комбинированного лечения продемонстрировали последовательное уменьшение объема опухоли, и во всех группах он были значительно ниже, чем в соответствующих им группах терапии единственным лекарственным средством. Группа, которой вводили Соединение III-1 (3 мг/кг ОРД)+ритуксимаб (10 мг/кг), продемонстрировала синергический эффект, в то время как две другие комбинации при рассмотрении значений AUC были аддитивными (таблица 4). Если рассматривать торможение роста опухоли, то все три комбинации являлись субаддитивными (таблица 5, таблица 6).
Синергическая: показатель <0, аддитивная: показатель =0, субаддитивная: показатель >0. Оценка основана на том, включает ли 95% доверительный интервал показатель 0
Средний процент снижения роста опухоли относительно среднего объема опухоли в группе, получающей транспортное средство.
Синергическая: показатель <0, аддитивная: показатель=0, субаддитивная: показатель >0. Оценка основана на том, включает ли 95% доверительный интервал показатель 0.
Чтобы определить, возобновила ли опухоль рост после окончания лечения, строят кусочно-линейную модель регрессии смешанных эффектов, чтобы сравнить коэффициент наклона объема опухоли, зарегистрированный между 9 и 21 днями с коэффициентом наклона между 21 и 62 днями (или раньше, если все животные в группе умерли). Все исследованные группы продемонстрировали увеличение наклона после лечения, которое было, по крайней мере, минимально значимым (табл.7), что дает основания предположить, что объемы опухоли прекращают уменьшаться или в случаях Соединения III-1 (10 мг/кг орд) и ритуксимаба (10 мг/кг), начинают расти снова.
Контрольная точка была установлена на день 21. Изменение коэффициента наклона было рассчитано как наклон (дни от 21 до 62) - наклон (дни от 13 до 21). Р-значения <0,05 указывают на то, что разница в наклоне значительно отличается от нуля.
Выводы
Влияние комбинации Соединения III-1 с ритуксимабом на объемы опухоли изучались in vivo в исследовании подкожного ксенотрансплантата. Соединение III-1 в дозе 3 мг/кг ОРД, Соединение III-1 в дозе 10 мг/кг ОРД и Соединение III-1 в дозе 10 мг/кг ДРС вводили как в виде монотерапии, так и в комбинации с ритуксимабом в дозе 10 мг/кг. Все группы лечения имели значительно более низкую площадь под кривыми зависимости логарифма (кратности изменений) от времени по сравнению с группой, получавшей транспортное средство в течение первых 21 дней. Кроме того, средняя AUC в группе комбинации Соединение III-1 в дозе 3 мг/кг+ритуксимаб была значительно ниже, чем в соответствующих группах монотерапии. Удивительно, но комбинация Соединения III-1 с ритуксимабом продемонстрировала синергический терапевтический эффект в данной модели подкожной лимфомы. Когда лечение было завершено, объемы опухоли перестали продолжать уменьшение, а в некоторых случаях возобновили рост.
ПРИМЕР 2: Сочетание специфического ингибитора Аврора А киназы (Соединение III-1) и ритуксимаба в модели подкожной WSU-Luc лимфомы, выращенной у самок мышей с ТКИД.
Экспериментальный обзор
Данный эксперимент наблюдает in vivo за объемом опухоли после лечения с помощью комбинации Соединения III-1 и ритуксимаба. Рост опухоли контролируют с помощью нониусного циркуля. Средний объем опухоли рассчитывают по формуле V=W2×L/2. Когда средний объем опухоли достигает около 250 мм3, животных распределяют случайным образом в следующие шесть групп лечения, состоящих из десяти мышей в каждой группе:
- Транспортное средство
- 3 мг/кг Соединение III-1 (ПО, ОРД)
- 10 мг/кг Соединение III-1 (ПО, ОРД)
- 10 мг/кг ритуксимаб (ВВ, ОРН)
- 3 мг/кг Соединение III-1+10 мг/кг ритуксимаб
- 10 мг/кг Соединение III-1+10 мг/кг ритуксимаб
Животных прививают 4,0×106 клеток из клеточной линии WSU-DLCL2 в виде импланта в боковую область (клеточная суспензия). Соединения вводят в течение 21 дня, и измеряют объемы опухоли на 0, 4, 7, 11, 15, 18 и 20 дни. Основная цель - исследовать вопрос о том, является ли комбинация Соединения III-1 и ритуксимаба синергической.
Статистическая методология
Статистическая методология, используемая в этих экспериментах, является такой же, как описано выше в примере 1.
Результат
Средний объем опухоли в группе, которая получала транспортное средство, увеличился более чем в девять раз, с 201 мм3 на день 0 до более 1903 мм3 на день 20.
Объемы опухоли в каждый группе лечения были меньше по сравнению с группой, получавшей транспортное средство (таблица 8).
Среднее процентное изменение в площади под logic кратным изменением против суточных кривых (AUC) по отношению к средней AUC группы, получающей транспортное средство.
Обе группы комбинированного лечения при сравнении показателей AUC являются аддитивными по отношению к группам лечения отдельными средствами (Таблица 9).
Синергическая: показатель <0, аддитивная: показатель =0, субаддитивная: показатель >0. Оценка основана на том, включает ли 95% доверительный интервал показатель 0
[0123] Обе группы лечения при наблюдении за торможением роста опухоли являются субаддитивными по отношению к группам лечения отдельными средствами (таблица 10 и таблица 11).
Средний процент снижения роста опухоли относительно среднего объема опухоли в группе, получающей транспортное средство.
Синергическая: показатель <0, аддитивная: показатель =0, субаддитивная: показатель >0. Оценка основана на том, включает ли 95% доверительный интервал показатель 0.
Выводы
[0124] Влияние комбинации Соединения III-1 с ритуксимабом на объемы опухоли изучались in vivo в исследовании подкожного ксенотрансплантата. Соединение III-1 в дозе 3 мг/кг и в дозе 10 мг/кг вводили ПО, ОРД и ритуксимаб в дозе 10 мг/кг вводили ВВ, ОРН как в виде монотерапии, так и в комбинации. Ни одна группа, которой проводилось лечение комбинацией лекарственных средств, не продемонстрировала синергического взаимодействия по сравнению с назначением монотерапии соответствующими лекарственными средствами, при рассмотрении AUC или торможения роста опухоли.
ПРИМЕР 3: Сочетание специфического ингибитора Аврора А киназы (Соединение III-1) и ритуксимаба в модели подкожной первичной диффузной крупноклеточной из В-клеток лимфомы (РНТХ-22-06). выращенной у самок мышей с ТКИД.
Экспериментальный обзор
[0125] Данный эксперимент наблюдает in vivo за объемом опухоли после лечения с помощью комбинации Соединения III-1 и ритуксимаба. Рост опухоли контролируют с помощью нониусного циркуля. Средний объем опухоли рассчитывают по формуле V=W2×L/2. Когда средний объем опухоли достигает около 200 мм3, животных распределяют случайным образом в следующие шесть групп лечения, состоящих из десяти мышей в каждой группе:
- Транспортное средство
- 10 мг/кг Соединение III-1 (ПО, ДРС)
- 20 мг/кг Соединение III-1 (ПО, ДРС)
- 10 мг/кг ритуксимаб (ВВ, ОРН)
- 10 мг/кг Соединение III-1+10 мг/кг ритуксимаб
- 20 мг/кг Соединение III-1+10 мг/кг ритуксимаб
[0126] Животных прививают 2×5 мм3 опухолевой массы из первичного куска опухоли PHTX-22L-6 в виде импланта в боковую область (троакар). Соединения вводят в течение 21 дня и измеряют объемы опухоли на 0, 3, 7, 10, 14, 17, 21, 24 и 27 день и анализируют.
Основной целью является исследовать вопрос о том, является ли комбинация Соединения III-1 и ритуксимаба синергической.
Статистическая методология
[0127] Статистическая методология, используемая в этих экспериментах, является такой же, как описано выше в примере 1.
Результат
Средний объем опухоли в группе, которая получала транспортное средство, увеличился более чем в девять раз, с 268 мм3 на день 0 до более 2563 мм3 на день 27. Объемы опухоли в каждый группе лечения были меньше по сравнению с группой, получавшей транспортное средство (таблица 12).
Среднее процентное изменение в площади под log10 кратным изменением против суточных кривых (AUC) по отношению к средней AUC группы, получающей транспортное средство.
Обе группы комбинированного лечения при сравнении показателей AUC являются аддитивными по отношению к группам лечения отдельными средствами (таблица 13).
Синергическая: показатель <0, аддитивная: показатель =0, субаддитивная: показатель >0. Оценка основана на том, включает ли 95% доверительный интервал показатель 0.
Обе группы лечения при наблюдении за торможением роста опухоли являются субаддитивными по отношению к группам лечения отдельными средствами (таблица 14 и таблица 15).
Средний процент снижения роста опухоли относительно среднего объема опухоли в группе, получающей транспортное средство.
Синергическая: показатель <0, аддитивная: показатель =0, субаддитивная: показатель >0. Оценка основана на том, включает ли 95% доверительный интервал показатель 0.
Выводы
Влияние комбинации Соединения III-1 с ритуксимабом на объемы опухоли изучались in vivo в исследовании подкожного ксенотрансплантата. Соединение III-1 в дозе 10 мг/кг и в дозе 20 мг/кг вводили ПО, ДРС и ритуксимаб в дозе 10 мг/кг вводили ВВ ОРН как в виде монотерапии, так и в комбинации. Ни одна группа, с которой проводилось лечение комбинацией лекарственных средств, не продемонстрировала синергического взаимодействия по сравнению с назначением монотерапии соответствующими лекарственными средствами, при рассмотрении AUC или торможения роста опухоли, что может быть связано со значительной активностью единичного лекарственного средства, которая наблюдается в этой модели
ДИССЕМИНИРОВАННЫЕ МОДЕЛИ
ПРИМЕР 4: Сочетание специфического ингибитора Аврора А киназы (Соединение III-1) и ритуксимаба в модели диссеминированной лимфомы клеточной линии Lyl9-Luc, выращенной у самок мышей с ТКИД.
Экспериментальный обзор
Эксперименты in vivo с использованием диссеминированной Lyl9-Luc модели лимфомы выполняют в двух вариантах. Эксперимент состоит из наблюдения за объемом опухоли после лечения комбинацией Соединения III-1 и ритуксимаба. Объемы опухоли оценивают раз в неделю в течение всего периода прививки и лечения с использованием системы визуализации Xenogen BBIS® (Xenogen Corporation, Аламеда, штат Калифорния). Чтобы получить изображение мыши, ей за 10 минут до процедуры вводят внутрибрюшинно (ВБ) инъекцию люциферазы (15 мг/мл) и в течение всего процесса сканирования 2-5 минут проводят анестезию 2% раствором изофлуорана. Визуализацию каждый мыши с помощью Xenogen проводят в дорзальной и вентральной проекциях. Сумму измерений 2 фотонных потоков используют для анализа.
Противоопухолевый эффект каждой группы лечения определяют путем расчета процента ТРО ([средний объем опухоли контрольной группы - средний объем опухоли группы лечения]×100/Δ средний объем опухоли контрольной группы) в конце лечения. Мышей взвешивают один раз в неделю в течение всего срока изучения и определяют максимальное процентное изменение массы тела в ходе лечения. За выживанием животных наблюдают до 132 дней после лечения. Животных исключают из исследования, когда они достигают гуманных конечных точек (>20% потери массы тела или паралич обеих передних либо задних конечностей), определяют среднюю выживаемость каждой группы и сравнивают выживаемость группы лечения с группой контроля. Группы лечения оценивают, чтобы определить, были ли эффекты лечения комбинацией лекарственных средств синергическими, аддитивными или субаддитивными по отношению к контролю.
Статистический анализ
Торможение роста опухоли (ТРО): Данные фотонного потока log10-трансформируют и эти значения за период лечения сравнивают между группами лечения для того, чтобы оценить, являются ли различия в тенденциях с течением времени статистически значимыми. Линейную модель регрессии смешанных эффектов с использованием ограниченного максимального правдоподобия приводят в соответствие с данными. Тест ANOVA проводят, чтобы определить, существуют ли статистически значимые различия между группами лечения и контроля.
Площадь под кривой (AUC): Log10-трансформированные кратные изменения значений фотонного потока (опухолевой массы) от исходного уровня также используют для расчета значения AUC для каждого животного. Значения AUC для мышей в данной группе лечения затем вместе усредняют для создания среднего значения AUC и связанных стандартных ошибок.
Эффекты синергизма: расчет показателя синергизма используют для решения вопроса о том, являются ли эффекты комбинированного лечения синергическими, аддитивными или субаддитивными по сравнению с монотерапией. Эффективность комбинированного лечения считают синергической, если показатель синергизма равен меньше 0, аддитивной, если показатель синергизма составляет 0, и субаддитивной, если показатель синергизма составляет больше 0. Стандартные ошибки и 95% доверительные интервалы (рассчитывается как 2*СО) используют для того, чтобы определить, значительно ли показатель синергизма отличается от нуля.
Возобновление роста опухоли: для того чтобы сравнить уровень возобновления роста опухоли после прекращения лечения, строят кусочно заданную линейную модель регрессии смешанных эффектов, отдельно для каждой группы лечения с наблюдением за мышами после периода лечения. Все р-значения <0,05 в этом отчете считают существенными.
Уровень выживаемости: уровень выживаемости животных в каждой группе лечения наносят на график с использованием кривых Каплан-Майера и логорифмического рангового теста для сравнения уровня выживаемости среди групп лечения попарно.
Эксперимент №1: Диссеминированная модель лимфомы Lyl9-Luc
Животных, перенесших введение ксенотрансплантатов Lyl9-Luc, лечат Соединением III-1 и ритуксимабом в качестве монотерапии и в комбинации. Значение ТРО, рассчитанное на 24 день, является схожим между группами лечения (89,6%-100,3%). Рост опухоли значительно тормозится во всех группах, которым проводят лечение в виде монотерапии, и в группах комбинированного лечения по сравнению с группой, получающей транспортное средство (р<0,001, таблица 16).
день 24
день 24
*
а. В каждой группе лечения находятся 10 мышей.
б. Для каждой дозы мыши получают 100 мкл Соединения III-1 и/или дозированного раствора ритуксимаба, приготовленных в концентрации 0,75, 2,5, 5,0 и 7,5 мг/мл (3, 10, 20, 30 мг/кг Соединения III-1) или 2,0 мг/мл (10 мг/кг ритуксимаба). Эти дозированные растворы готовят обычным образом, основываясь на исторически известной массе мыши, которая составляет 25 или 20 граммов соответственно. Все дозы являются приблизительными.
в. Средние объемы опухоли и значения ТРО рассчитывают на день 24.
г. ТРО=ТРО расчет В - торможение роста опухоли (ТРО=[(Δ средний объем в контрольной группе-Δ средний объем в группе лечения)×100/Δ средний объем в контрольной группе], р-значения рассчитывают с помощью ANOVA, р<0,05 считается статистически значимым. Значения ТРО будут больше чем 100%, когда средний объем в группе лечения в конце лечения меньше, чем в начале лечения.
д. Логарифмический ранговый анализ используют для сравнения уровня выживаемости в каждой группе лечения с группой тестирования, которой вводят транспортное средство, значение р<0,05 считается статистически значимыми. * = группа комбинированного лечения имеет значительно больший период выживания, чем соответствующие группы лечения отдельными лекарственными средствами (р<0,004).
е. Животные, которым вводили Соединение III-1 в дозе 10 мг/кг ДРС и в дозе 30 мг/кг ОРД, получали 5 дней перерыва в лечении со дня 13 по день 17.
ж. Транспортное средство, используемое в ГЛ-1 и в группах лечения, представляет собой 10% HP-β-CD плюс 1% NaHCO3. Транспортное средство, используемое в группе лечения ритуксимабом, представляет собой 0,9% хлорида натрия.
Индивидуальные биолюминесцентные изображения всего организма всех мышей во всех группах лечения выполняют с использованием системы визуализации Xenogen BBIS®. Любая биолюминесценция, наблюдаемая на изображениях организма в целом, означает присутствие опухоли в модели мышей. Наличие/рост опухоли у каждой мыши оценивают с помощью этой системы до начала лечения в день 0, а после окончания лечения на день 24; и у мышей, остающихся в исследовании на день 52. На день 24 наблюдается поразительное уменьшение флуоресцентного импульса от опухоли в результате лечения Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг, комбинацией Соединения III-1 в дозе 3 мг/кг с ритуксимабом и комбинацией Соединения III-1 в дозе 10 мг/кг с ритуксимабом. Мыши, получающие комбинированное лечение демонстрируют незначительные или отсутствующие доказательства диссеминированной опухоли лимфомы. На день 52, тем не менее, рост опухоли очевиден у мышей, оставшихся в группах лечения одним лекарственным средством Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг и ритуксимабом в дозе 10 мг/кг.
Значения потока фотонов (опухолевой массы) от исходного показателя до дня 24 были использованы для расчета значений AUC для каждого животного, также было рассчитано процентное снижение AUC по отношению к среднему показателю AUC для транспортного средства (таблица 17а). Расчет показателя синергизма применили к данным AUC, чтобы определить, являлись ли эффекты комбинированного лечения синергическими, аддитивными или субаддитивным по отношению к лечению отдельными лекарственными средствами. Этот анализ продемонстрировал, что комбинированное лечение Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг ОРД с ритуксимабом в дозе 10 мг/кг ОРН было синергическим при сравнении log10 трансформированных кратных изменений и комбинированное лечение Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг с ритуксимабом в дозе 10 мг/кг ОРН продемонстрировало аддитивный эффект (таблица 17b).
Все мыши, которых лечили транспортным средством, достигли предопределенной конечной точки в виде паралича и были умерщвлены между днем 21 и днем 31, однако все мыши в обеих группах комбинированного лечения были живы до дня 132. К концу исследования (день 132) число мышей, оставшихся в живых в группах монотерапии Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг. Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг и ритуксимабом в дозе 10 мг/кг составило 1 из 10, 3 из 10 и 1 из 10 соответственно. Медиана выживаемости в днях для каждой группы представлена в таблице 18. Логарифмический ранговый анализ, проведенный для сравнения уровня выживаемости между группами, продемонстрировал, что все группы лечения имели значительно более длительный период выживания, чем группа, которой вводили транспортное средство, и все группы комбинированного лечения имели значительно более длительный период выживания, чем каждая группа монотерапии (таблица 16). Таблица 16 также демонстрирует среднюю величину максимального изменения массы тела в группах со дня 0 до дня 24. Максимальная потеря массы тела в группе транспортного средства составила 5,9% на день 24. Все остальные группы лечения набрали массу за время исследования, включая группы монотерапии и комбинированной терапии. Лечение Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг или в дозе 10 мг/кг по схеме ОРД или ритуксимабом в дозе 10 мг/кг по схеме ОРН переносилось хорошо.
а. Показатель ТРО был рассчитан на день 24, р-значения были рассчитаны с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA), значение р<0,05 считается статистически значимым.
б. Максимальное изменение массы тела.
в. Логарифмический ранговый анализ используют для сравнения уровня выживаемости в каждой группе лечения с группой, которой вводят транспортное средство, значение р<0,05 считается статистически значимыми.
Эксперимент №2: Диссеминированная модель лимфомы Lyl9-Luc
Мышам вводились лекарственные средства в соответствии со следующими группами лечения.
Результаты
Мышей взвешивали и оценивали объемы опухоли с помощью расчета Xenogen импульса (средний поток фотонов), один раз в неделю во время прививки и на протяжении всего периода лечения и после завершения лечения до конца исследования.
Лечение началось через 7 дней после прививки опухолевых клеток в хвостовую вену, со средним показателем измерения потока фотонов, равным 1×107 на 0 день лечения. Показатель ТРО, рассчитанный на день 23 (2 дня после введения дозы), был схожим между группами лечения (75,8-100%). Рост опухоли был значительно ингибирован (Р<0,001) во всех группах, включая группы монотерапии (Соединение III-1 или ритуксимаб) и группы комбинированного лечения Соединением III-1+ритуксимабом по сравнению с контролем (таблица 20).
Чтобы лучше сравнить рост опухоли и ответ на лечение между группами, для каждой группы были рассчитаны средние значения AUC на основе уровней фотонного потока, отображающих опухолевую массу. Значения AUC для каждой группы на протяжении периода лечения до дня 23 (2 дня после окончания лечения) подытожены в таблице 21а.
[0147] Средние показатели потока фотонов увеличились примерно в два log в группе, которой вводили транспортное средство на протяжении 23-дневного периода, что отразило средний рост опухолевой массы почти в два раза и привело к среднему показателю AUC, равному 30,4 (таблица 21а). Показатели AUC и, следовательно, опухолевая масса были меньше в каждой из групп лечения по сравнению с группой транспортного средства. Четкая ответная реакция на введение лекарственного средства в значениях AUC наблюдалась в группах лечения ритуксимабом. Результаты модели линейной регрессии продемонстрировали, что все эти различия относительно группы, которой вводили транспортное средство, были значимыми (р<0,01, таблица 21b). Кроме того, группа комбинированного лечения (Соединение III-1 в дозе 3 мг/кг+ритуксимаб в дозе 10 мг/кг) продемонстрировала последовательное уменьшение опухолевой массы (-20,0), что было значительно ниже, чем в любой из соответствующих групп лечения единственным лекарственным средством (Соединение III-1 в дозе 3 мг/кг и ритуксимаб в дозе 10 мг/кг, Р<0,01). Фактически мыши в этой группе имели значения потока фотонов, которые были на исходном уровне до проведения прививки, в базовом диапазоне (поток фотонов = 4-7×105), что дает возможность предположить, что опухоли исчезли.
Расчет показателя синергизма применительно к этим данным используют для того, чтобы определить, являются ли эффекты комбинированного лечения синергическими, аддитивными или субаддитивными по сравнению с монотерапией. Этот анализ продемонстрировал, что комбинированное лечение Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг плюс ритуксимаб в дозе 10 мг/кг было синергическим при сравнении log10-трансформированных кратных изменений (таблица 22).
После лечения у оставшихся мышей наблюдали за ростом опухоли до дня 125, чтобы определить, возобновит ли опухоль рост после окончания лечения. Кусочно заданные линейные модели регрессии смешанных эффектов были построены, чтобы сравнить наклон log потока между днями 9 и 23 с наклоном между днями 23 и 125 (или раньше, если все животные в группе умерли). Из-за потери мышей от паралича во многих группах только группа лечения комбинацией Соединения III-1 и ритуксимаба и группа лечения ритуксимабом в дозах 10 и 5 мг/кг были оценены. Ни одна из групп не имела значительно отличающихся изменений в наклонах после прекращения лечения на день 23 (таблица 23), что свидетельствует о том, что рост опухоли/торможение существенно не изменились после прекращения лечения. Эти данные позволяют предположить, что эффект ингибирования каждой из соответствующих групп лечения, по всей видимости, продолжался до 104 дня после окончания лечения.
Индивидуальные биолюминесцентные изображения всего организма всех мышей во всех группах лечения выполняют с использованием системы визуализации Xenogen BBIS®. Наличие/рост опухоли у каждой мыши оценивают с помощью этой системы до начала лечения в день 0, за 3 дня до окончания лечения (день 18); и на протяжении 104 дней после окончания лечения (день 125). На день 18 наблюдается поразительное уменьшение флуоресцентного импульса от опухоли в результате лечения комбинацией Соединения III-1 в дозе 3 мг/кг с ритуксимабом по сравнению с любой другой группой лечения или с контрольной группой. Мыши, получающие комбинированное лечение, демонстрируют незначительные или отсутствующие доказательства диссеминированной опухоли лимфомы, тогда как рост опухоли был очевиден в группе монотерапии Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг и во всех группах монотерапии ритуксимабом. Биолюминисцентные изображения мышей в группе комбинированного лечения Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг и ритуксимабом на день 125 не продемонстрировали доказательств роста опухоли. Вследствие потери мышей от паралича в других группах лечения биолюминисцентная визуализация в этих группах не проводилась
Все мыши, которых лечили транспортным средством, достигли предопределенной конечной точки в виде паралича и были умерщвлены между днем 21 и днем 31. Ответная реакция на введение лекарственного средства наблюдалась в показателях выживаемости в группе лечения ритуксимабом у 3 из 10, 1 из 10, 1 из 10 и 0 из 10 мышей, оставшихся ко дню 125 в группах, получавших лекарственное средство в дозах 10, 5, 1 и 0.5 мг/кг, соответственно. Логарифмический ранговый анализ, проведенный для сравнения уровня выживаемости между группами, продемонстрировал, что все группы лечения имели значительно более длительный период выживания, чем группа, которой вводили транспортное средство, и все группы комбинированного лечения имели значительно более длительный период выживания, чем каждая группа монотерапии. Ни одна из мышей в группе комбинированного лечения не была удалена из исследования на протяжении 125 дней испытаний.
Таблица 24 демонстрирует среднюю величину максимального изменения массы тела в группах со дня 0 до дня 22 исследования. Максимальная потеря массы тела в группе транспортного средства составила 1,75% на день 22. Все остальные группы лечения набрали массу за время исследования, включая группы монотерапии и комбинированной терапии. Лечение Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг по схеме ОРД или ритуксимабом в дозе 10 мг/кг по схеме ОРН переносилось хорошо.
Выводы
Эксперименты визуализации in vivo у мышей с ТКИД, переносящих диссеминированную Lyl9-Luc лимфому, были выполнены в двух вариантах с целью подтверждения эффекта Соединения III-1 и ритуксимаба как лекарственных средств для монотерапии и для комбинированного лечения. Опухолевая масса и ТРО были определены с использованием количественных изображений Xenogen у мышей, получающих различные дозы Соединения III-1 с ритуксимабом в дозе 10 мг/кг и без ритуксимаба. Рост опухоли был значительно ингибирован во всех группах лечения (Р<0,001). Опухолевая масса, представленная как значения AUC потока фотонов, на протяжении всего периода лечения была значительно ниже во всех группах лечения по сравнению с контролем. Комбинированное лечение Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг и ритуксимабом в дозе 10 мг/кг, как обнаруживается, обеспечивает синергический эффект, который значительно снизил опухолевую массу по сравнению с лечением любым из лекарственных средств в качестве монотерапии, тем самым подтверждая синергический эффект, наблюдаемый в модели подкожной Lyl9 лимфомы, рассмотренной выше (см. пример 1). Выживаемость животных была значительно выше в каждый из групп лечения по сравнению с группой, которой вводили транспортное средство, и значительно выше в группах комбинированного лечения по сравнению с соответствующими группами монотерапии. После лечения не было никаких существенных изменений в темпах роста опухоли в любой из групп до 52 дней в первой репликации и 125 дней во второй репликации. Таким образом, результаты двух экспериментов согласуются друг с другом, и эти данные подтверждают, что комбинация Соединения III-1 и ритуксимаба является наиболее эффективным средством для лечения диссеминированной Lyl9-Luc лимфомы у мышей с ТКИД, приводя к снижению опухолевой массы до неопределяемого уровня.
ЭКСПЕРИМЕНТ 5: Сочетание специфического ингибитора Аврора А киназы (Соединение III-1) и ритуксимаба в модели диссеминированной лимфомы клеточной линии WSU-ДКВКЛ 2-luc, выращенной у самок мышей с ТКИД.
Экспериментальный обзор
Два отдельных исследования проводят в WSU-ДКВКЛ 2-Luc модели. Соединение III-1 изначально вводят в низких дозах (3 мг/кг или 10 мг/кг по схеме ОРД) самостоятельно и в комбинации с ритуксимабом или в более высоких дозах (10 мг/кг или 20 мг/кг по схеме ДРС) в виде монотерапии или в комбинации с ритуксимабом. После лечения за животными наблюдают до дня 132, чтобы сравнить выживаемость между группами лечения и группой, которой вводят транспортное средство.
В первом исследовании WSU-ДКВКЛ 2, Соединение III-1 при ведении в качестве единственного лекарственного средства в дозе 3 мг/кг или в дозе 10 мг/кг ОРД существенно не подавляло рост опухоли в этой модели (ТРО=50,9%, р>0,05, ТРО=88,2%, р>0,05 соответственно). Ритуксимаб при ведении в качестве единственного лекарственного средства (10 мг/кг ОРН) или в комбинации с Соединением III-1 в дозе 3 мг/кг или 10 мг/кг значительно ингибировал рост опухоли (ТРО=83,6%, р<0,05, ТРО=91,8%, р 0,05, ТРО=99,0%, р<0,001 соответственно) у мышей с ТКИД, которым введены WSU-DLCL2-Luc ксенотрансплантаты (таблица 25). Во втором исследовании, когда Соединение III-1 вводили в качестве единственного лекарственного средства в дозе 10 мг/кг или 20 мг/кг ДРС, рост опухоли в этой модели продемонстрировал значительное торможение (ТРО=99,7%, р<0,001 для обеих групп). Ритуксимаб, введенный как единственное лекарственное средство в дозе 10 мг/кг ОРН (ТРО=88,4%, р<0,001) и в комбинации с Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг или 20 мг/кг ДРС, привел к значительному торможению роста опухоли (ТРО=99,6% и 99,9% соответственно, р<0,001 для обоих), (таблица 25).
день 21
день 21
день 21
день 21
день 9
а. В каждой группе лечения находятся 10 мышей.
б. Для каждой дозы мыши получают 100 мкл Соединения III-1 и/или дозированного раствора ритуксимаба, приготовленных в концентрациях 0,75, 2,5, 5,0 и 7,5 мг/мл (3, 10, 20, 30 мг/кг Соединения III-1) или 2,0 мг/мл (10 мг/кг ритуксимаба). Эти дозированные растворы готовят обычным образом, основываясь на исторически известной массе мыши, которая составляет 25 или 20 граммов соответственно. Все дозы являются приблизительными.
в. Средние объемы опухоли, и значения ТРО рассчитывают на 21 день (1-е исследование) и на 22 день(2-е исследование)
г. ТРО=ТРО расчет В - торможение роста опухоли (ТРО=[(Δ средний объем в контрольной группе - Д средний объем в группе лечения)×100/Δ средний объем в контрольной группе], р-значения рассчитывают с помощью ANOVA, р<0,05 считается статистически значимым.
д. Логарифмический ранговый анализ используют для сравнения уровня выживаемости в каждой группе лечения с группой, которой вводят транспортное средство, значение р<0,05 считается статистически значимыми.
е. Транспортное средство, используемое в ГЛ-1 и в группах лечения, представляет собой 10% HP-β-CD плюс 1% NaHCO3. Транспортное средство, используемое в группе лечения ритуксимабом, представляет собой 0,9% хлорида натрия.
Ж. Животные, которым вводили Соединение III-1 в дозе 20 мг/кг ДРС, и животные в группе лечения комбинацией Соединения III-1 в дозе 20 мг/кг и ритуксимаба в дозе 10 мг/кг ОРН получали 5 дней перерыва в лечении со дня 9 по день 13.
После окончания лечения за выживанием животных наблюдали до дня 125 (первое исследование) или до дня 130 (второе исследование). Средняя выживаемость в днях для каждой группы представлена в таблице 25, и среднюю выживаемость группы лечения сравнили с группой, которой вводили транспортное средство. В первом исследовании все животные, получавшие транспортное средство, были подвергнуты эвтаназии в гуманной конечной точке (паралич) до дня 44, и все группы лечения продемонстрировали значительно больший период выживания по отношению к группе, получавшей транспортное средство (р<0,04-0,001, таблица 25). К концу исследования (день 125), 1 из 10 мышей оставалась в группе монотерапии ритуксимабом и в группе комбинированного лечения с Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг. Во 2-м исследовании все животные, получавшие транспортное средство, были подвергнуты эвтаназии в гуманной конечной точке до дня 68. За исключением группы монотерапии ритуксимабом (р>0,05), все группы лечения продемонстрировали значительно больший период выживания относительно группы, получавшей транспортное средство (р<0,001, таблица 25). Число мышей, оставшихся в живых в конце исследования (день 130), было 1 из 10 в группе монотерапии Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг и в группе монотерапии ритуксимабом, 5 из 10 в группе монотерапии Соединением III-1 в дозе 20 мг/кг и в группе комбинированного лечения с Соединением III-1 в дозе 10 мг/кг и 8 из 10 мышей в группе комбинированного лечения с Соединением III-1 в дозе 20 мг/кг.
Объемы опухоли были меньше в каждой из групп лечения в первом исследовании по сравнению с группой, получавшей транспортное средство (таблица 26а). Обе группы комбинированного лечения были аддитивными относительно групп монотерапии такими же лекарственными средствами при сравнении значений AUC (таблица 26b).
Объемы опухоли были меньше в каждый из групп лечения во втором исследовании по сравнению с группой, получавшей транспортное средство (таблица 27а). Обе группы комбинированного лечения были субаддитивными относительно групп монотерапии такими же лекарственными средствами при сравнении значений AUC (таблица 27b).
В конце лечения на 21-й день в первом исследовании потеря массы тела составила менее 5% для всех групп (таблица 25). Во втором исследовании, тем не менее, лечение Соединением III-1 в дозе 20 мг/кг по схеме, ДРС и лечение комбинацией Соединения III-1 в дозе 20 мг/кг ДРС и ритуксимаба в дозе 10 мг/кг ОРН приводили к среднему показателю максимальной потери массы тела, равному 8,9% (день 9) и 12,2% (день 9) соответственно. Этот эффект был управляемый путем предоставления всем животным в этих группах 5-дневного перерыва в лечении (дни с 9 по 13); после чего животные восстановили массу тела. Ни одна другая группа лечения не продемонстрировала максимальную потерю массы тела больше чем 3,9% (таблица 25).
Хотя вышеупомянутое изобретение было описано более подробно в целях ясности и понимания, эти конкретные варианты должны рассматриваться как иллюстративные, а не как ограничительные. Специалист в данной области из прочтения раскрытия этого изобретения оценит по достоинству, что различные изменения в форме и деталях могут быть сделаны без отклонения от истинного объема изобретения, которое должно быть определено скорее приложенной формулой изобретения, а не конкретными воплощениями.
Патент и научная литература, упомянутые в установленных в данном документе сведениях, доступны для специалистов в данной области техники. Если иное не определено, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют то же значение, которое обычно подразумевается любым из специалистов в данной области техники, к которой принадлежит это изобретение. Выданные патенты, приложения и ссылки, которые приводятся здесь, являются включенными в данный документ в качестве ссылки в том же объеме, как если бы каждый документ был специально и индивидуально упомянут для включения в виде ссылки. В случае несоответствия настоящее раскрытие, включая определения, будет контролироваться.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ВАЗОПРЕССИНА | 1994 |
|
RU2149160C1 |
| Способ получения пиримидо-2-бензазепинов или их фармакологически совместимых кислотно-аддитивных солей (и его вариант) | 1980 |
|
SU1181547A3 |
| КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ АЗЕПИНА И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В КАЧЕСТВЕ АНТИДИУРЕТИЧЕСКИХ АГЕНТОВ | 2001 |
|
RU2269517C2 |
| (3-ЦИКЛОАЛКИЛ-2,3,4,5-ТЕТРАГИДРО-1Н-БЕНЗО[d]АЗЕПИН-7-ИЛОКСИ)ПРОИЗВОДНЫЕ, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ Н3 РЕЦЕПТОРОВ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ | 2003 |
|
RU2388752C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ 2-ФЕНИЛАМИНОПИРИМИДИНА В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ БОГАТОЙ ЛЕЙЦИНОМ ПОВТОРНОЙ КИНАЗЫ 2 (LRRK2) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА | 2012 |
|
RU2661197C2 |
| СЕЛЕКТИВНЫЕ АНТАГОНИСТЫ Н4-ГИСТАМИНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЕСТИБУЛЯРНЫХ НАРУШЕНИЙ | 2009 |
|
RU2589846C2 |
| ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ВИЧ ИНФЕКЦИИ | 2021 |
|
RU2780103C1 |
| ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ | 2020 |
|
RU2780101C2 |
| ИМИДАЗО[1,5-а] ПИРИМИДО[5,4-d][1] БЕНЗАЗЕПИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ РЕЦЕПТОРА GABA A | 2002 |
|
RU2287531C2 |
| ПИРИМИДИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ | 2013 |
|
RU2623221C2 |
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ лечения гематологических злокачественных заболеваний, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с анти-CD20 антителом, где ингибитор Аврора киназы представляет собой 4-{[9-хлор-7-(2-фтор-6-метоксифенил)-5Н-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино}-2-метоксибензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и где анти-CD20 антитело представляет собой ритуксимаб. Изобретение обеспечивает более эффективное лечение по сравнению с монотерапией. 7 з.п. ф-лы, 4 пр., 27 табл.
1. Способ лечения пациента, страдающего от гематологических злокачественных заболеваний, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества ингибитора Аврора киназы одновременно или последовательно с анти-СD20 антителом, где ингибитор Аврора киназы представляет собой 4-{[9-хлор-7-(2-фтор-6-метоксифенил)-5Н-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино}-2-метоксибензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и где анти-СD20 антитело представляет собой ритуксимаб.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что гематологическое злокачественное заболевание представляет собой лимфому, лейкемию или множественную миелому.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что лимфома представляет собой неходжкинскую лимфому.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что неходжкинская лимфома представляет собой лимфому из клеток зоны мантии, диффузную крупноклеточную из В-клеток неходжкинскую лимфому, лимфому Беркитта или фолликулярную неходжкинскую лимфому.
5. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что пациент предварительно пролечен с анти-СD20 антителом.
6. Способ по п.4, отличающийся тем, что неходжкинская лимфома представляет собой диффузную крупноклеточную из В-клеток неходжкинскую лимфому.
7. Способ по п.4, отличающийся тем, что неходжкинская лимфома представляет собой лимфому Беркитта
8. Способ по любому из пп.1-4, 6 или 7, отличающийся тем, что ингибитор Аврора киназы представляет собой натрия 4-{[9-хлор-7-(2-фтор-6-метоксифенил)-5Н-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино}-2-метоксибензоат.
| Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок | 1923 |
|
SU2008A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| ЛЕЧЕНИЕ В-КЛЕТОЧНЫХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИТЕЛ ПРОТИВ CD40L В КОМБИНАЦИИ С АНТИТЕЛАМИ ПРОТИВ CD20 И/ИЛИ ХИМИОТЕРАПИЕЙ И ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИЕЙ | 2000 |
|
RU2305561C2 |
