3-ФЕНОКСИМЕТИЛПИРРОЛИДИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ Российский патент 2014 года по МПК C07D207/08 A61K31/40 

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к 3-феноксиметилпирролидиновым соединениям, обладающим активностью в качестве ингибиторов обратного захвата серотонина (5-HT) и норэпинефрина (NE). Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, способам и промежуточным соединениям с получением таких соединений и способам применения таких соединений для лечения болевого расстройства, такого как нейропатическая боль и другие заболевания.

Предшествующий уровень техники

Боль представляет собой неприятное сенсорное и эмоциональное состояние, связанное с действительным или возможным повреждением ткани, или описывается с точки зрения такого повреждения (International Association for the Study of Pain, Pain Terminology (Международная Ассоциация Исследования Боли, Терминологии Боли)). Хроническая боль сохраняется после острой боли или по истечении ожидаемого времени заживления травмы (American Pain Society. "Pain Control in the Primary Care Setting." 2006:15). Нейропатическая боль представляет собой боль, инициированную или вызванную первичным повреждением или дисфункцией нервной системы. Периферическая нейропатическая боль возникает, когда повреждение или дисфункция поражает периферическую нервную систему, а центральная нейропатическая боль, когда повреждение или дисфункция поражает центральную нервную систему (IASP).

В настоящее время используются несколько типов терапевтических средств для лечения нейропатической боли, включая, например, трициклические антидепрессанты (TCA), ингибиторы обратного захвата серотонина и норэпинефрина (SNRI), лиганды кальциевых каналов (например, габапентин и прегабалин), местный лидокаин и опиоидные агонисты (например, морфин, оксикодон, метадон, леворфанол и трамадол). Однако нейропатическую боль может быть очень трудно лечить при достижении в лучшем случае частичного облегчения боли не более чем у 40-60% пациентов (R. H. Dworkin et al. (2007) Pain 132:237-251 at 247). Кроме того, все терапевтические средства, применяемые в настоящее время для лечения нейропатической боли, вызывают различные побочные эффекты (например, тошноту, седативный эффект, головокружение и сонливость), которые могут ограничить их эффективность у некоторых пациентов (Dworkin et al. supra, at 241).

SNRI, такие как дулоксетин и венлафаксин, часто применяются в качестве терапии первой линии для лечения нейропатической боли. Эти средства ингибируют обратный захват и серотонина (5-гидрокситриамина, 5-HT), и норэпинефрина (NE) путем связывания с транспортерами серотонина и норэпинефрина (соответственно SERT и NET). Однако и дулоксетин, и венлафаксин имеют более высокую аффинность к SERT относительно NET (Vaishnavi et al. (2004) Biol. Psychiatry 55(3):320-322).

Преклинические исследования свидетельствуют о том, что ингибирование и SERT, и NET может быть необходимо для максимально эффективного лечения нейропатической и других состояний, вызывающих хроническую боль (Jones et al. (2006) Neuropharmacology 51(7-8): 1172-1180; Vickers et al. (2008) Bioorg. Med. Chem. Lett. 18:3230-3235; Fishbain et al. (2000) Pain Med. 1(4):310-316; и Mochizucki (2004) Human Psychopharmacology 19:S15-S19). Однако сообщалось, что в клинических исследованиях ингибирование SERT было связано с тошнотой и другими побочными эффектами (Greist et al. (2004) Clin. Ther. 26(9): 1446-1455). Таким образом, ожидается, что терапевтические средства, имеющие более сбалансированную аффинность к SERT и NET или несколько более высокую аффинность к NET, особенно полезны для лечения хронической боли, в то же время вызывая меньше побочных эффектов, таких как тошнота.

Таким образом, существует потребность в новых соединениях, которые могут применяться для лечения хронической боли, такой как нейропатическая боль. В частности, существует потребность в новых соединениях, которые могут применяться для лечения хронической боли и которые вызывают меньше побочных эффектов, таких как тошнота. Существует также потребность в новых соединениях двойного действия, которые с высокой аффинностью ингибируют и SERT, и NET (например, pIC₅₀ ≥8,0 или K_i ≤10 нМ) и сбалансированным ингибированием (например, отношение связывания SERT/NET K_i от 0,1 до 100).

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящее изобретение относится к новым соединениям, которые, как было обнаружено, обладают активностью ингибирования обратного захвата серотонина и активностью ингибирования обратного захвата норэпинефрина. Соответственно, ожидается, что соединения по изобретению могут применяться и иметь преимущества в качестве терапевтических средств для тех заболеваний и расстройств, которые можно лечить ингибированием транспортеров серотонина и/или норэпинефрина, таких как нейропатическая боль. Один аспект изобретения относится к соединению формулы I:

где

R¹ выбран из -C_2-6алкила, -C_3-8диклоалкила, необязательно замещенного 1 или 2 атомами фтора, -C_2-6алкенила и -С_2-6алкинила;

R²-R⁶ независимо выбраны из водорода, галогена, -C_1-6алкила, -CF₃, -O-C_1-6алкила, -CN, -С(О)-C_1-6алкила, -S-C_1-6алкила, -С_3-8циклоалкила и -NO₂; или R⁴ и R⁵ взяты вместе с образованием -СН=СН-СН=СН-; или R⁵ и R⁶ взяты вместе с образованием -СН-СН=СН-СН-;

при условии, что когда R¹ представляет этил, R² представляет фтор-, R⁴ представляет хлор-, R⁵ представляет водород, и R⁶ представляет водород, то R³ не представляет фтор- или хлор-;

или его фармацевтически приемлемой соли.

Другой аспект изобретения относится к соединениям формулы I, имеющим конфигурацию, выбранную из:

или обогащенным стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию.

Еще один аспект изобретения относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель и соединение по изобретению. В таких композициях возможно содержание других активных средств, таких как средства против болезни Альцгеймера, противосудорожные средства, антидепрессанты и средства против болезни Паркинсона, двойные ингибиторы обратного захвата серотонина-норэпинефрина, нестероидные противовоспалительные средства, ингибиторы обратного захвата норэпинефрина, опиоидные агонисты, селективные ингибиторы обратного захвата серотонина, блокаторы кальциевых каналов, симпатолитики и их комбинации. Соответственно, в еще одном аспекте изобретения, фармацевтическая композиция содержит соединение по изобретению, второе активное средство и фармацевтически приемлемый носитель. Другой аспект изобретения относится к комбинации активных средств, содержащей соединение по изобретению и второе активное средство. Соединение по изобретению может включаться в состав вместе или отдельно от дополнительного агента (агентов). При включении в состав отдельно, фармацевтически приемлемый носитель может быть включен с дополнительным агентом (агентами). Таким образом, еще один аспект изобретения относится к комбинации фармацевтических соединений, причем комбинация включает первую фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и первый фармацевтически приемлемый носитель; и вторую фармацевтическую композицию, содержащую второе активное средство и второй фармацевтически приемлемый носитель. Изобретение также относится к набору, содержащему такие фармацевтические композиции, например, где первая и вторая фармацевтические композиции представляют собой отдельные фармацевтические композиции.

Соединения по изобретению обладают активностью ингибирования обратного захвата серотонина и активностью ингибирования обратного захвата норэпинефрина, и поэтому ожидается, что их можно применять в качестве терапевтических средств для лечения пациентов, страдающих заболеванием или расстройством, которое лечится ингибированием транспортеров серотонина и/или норэпинефрина. Таким образом, один аспект изобретения относится к способу лечения: болевого расстройства, такого как нейропатическая боль; депрессивного расстройства, такого как большая депрессия; аффективного расстройства, такого как тревожное расстройство; гиперактивного расстройства с дефицитом внимания; когнитивного расстройства, такого как деменция; стрессового недержания мочи; ожирения или вазомоторных симптомов, связанных с менопаузой, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению.

Еще один аспект изобретения относится к способу ингибирования обратного захвата серотонина у млекопитающего, включающему введение млекопитающему ингибирующего транспортер серотонина количества соединения по изобретению. Еще один аспект изобретения относится к способу ингибирования обратного захвата норэпинефрина у млекопитающего, включающему введение млекопитающему ингибирующего транспортер норэпинефрина количества соединения по изобретению. И другой аспект изобретения относится к способу ингибирования обратного захвата серотонина и обратного захвата норэпинефрина у млекопитающего, включающему введение млекопитающему ингибирующее транспортер серотонина и транспортер норэпинефрина количество соединения по изобретению.

Поскольку соединения по изобретению обладают активностью ингибирования обратного захвата серотонина и активностью ингибирования обратного захвата норэпинефрина, то такие соединения могут также применяться в качестве инструментов исследования. Соответственно, один аспект изобретения относится к способу применения соединения по изобретению в качестве инструмента исследования, включающему проведение биологического анализа с использованием соединения по изобретению. Соединения по изобретению могут также применяться для оценки новых химических соединений. Таким образом, другой аспект изобретения относится к способу оценки тестируемого соединения в биологическом анализе, включающему: (a) проведение биологического анализа тестируемого соединения с получением первой величины анализа; (b) проведение биологического анализа соединением по изобретению с получением второй величины анализа, где стадия (a) проводится до, после или одновременно со стадией (b); и (c) сравнение первой величины анализа, полученной на стадии (a), со второй величиной анализа, полученной на стадии (b). Иллюстративные биологические анализы включают анализ обратного захвата серотонина и анализ обратного захвата норэпинефрина. Еще один аспект изобретения относится к способу изучения биологической системы или образца, содержащему транспортеры серотонина, транспортеры норэпинефрина или оба транспортера, причем способ включает: (a) контактирование биологической системы или образца с соединением по изобретению и (b) определение эффектов, вызванных соединением, на биологическую систему или образец.

Изобретение также относится к способам и промежуточным соединениям, применяемым с получением соединений по изобретению. Соответственно, один аспект изобретения относится к способу получения соединений формулы I, включающему снятие защиты с соединения формулы XI:

или его соли, где P представляет аминозащитную группу, с получением соединений формулы I, где R¹ и R^2-6 имеют значение, как определено в формуле I. В других аспектах, изобретение относится к новым промежуточным соединениям, используемым в таких способах.

Еще один аспект изобретения относится к применению соединения по изобретению с получением лекарственного средства, в частности с получением лекарственного средства, применяемого для лечения связанных с болью расстройств, депрессивных расстройств, аффективных расстройств, гиперактивного расстройства с дефицитом внимания, когнитивных расстройств, стрессового недержания мочи, ожирения, для ингибирования обратного захвата серотонина у млекопитающего или для ингибирования обратного захвата норэпинефрина у млекопитающего. Еще один аспект изобретения относится к применению соединения по изобретению в качестве инструмента исследования. Другие аспекты и варианты осуществления изобретения раскрыты в настоящем описании.

Детальное описание изобретения

В одном аспекте, настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы I:

или их фармацевтически приемлемой соли.

Используемый в настоящем описании термин «соединение по изобретению» включает все соединения, охватываемые формулой I, такие как представители соединений, воплощенных в формулах Ia-Id, II-IV, и все другие подтипы таких формул. Кроме того, когда соединения по изобретению содержат основную или кислотную группу (например, амино или карбоксильную группы), соединение может существовать в виде свободного основания, свободной кислоты или в различных солевых формах. Все такие солевые формы включены в объем изобретения. Соответственно, специалистам в данной области должно быть понятно, что, пока нет иных указаний, ссылка в настоящем изобретении на соединение, например ссылка на «соединение по изобретению» или «соединение формулы I», включает соединение формулы I, а также фармацевтически приемлемые соли этого соединения. Кроме того, сольваты соединений формулы I включены в объем настоящего изобретения.

Соединения формулы I содержат, по меньшей мере, два хиральных центра, и поэтому данные соединения могут быть получены и использованы в различных стереоизомерных формах. Соответственно, пока нет иных указаний, изобретение также относится к рацемическим смесям, чистым стереоизомерам (например, энантиомерам и диастереоизомерам), обогащенным стереоизомерами смесям и тому подобным. Когда химическая структура изображена в настоящем описании без какой-либо стереохимической характеристики, то понятно, что все возможные стереоизомеры охватываются такой структурой. Так, например, предполагается, что термины «соединение формулы I», «соединения формулы II» и т.д. включают все возможные стереоизомеры соединения. Аналогичным образом, когда в настоящем описании показан и назван конкретный стереоизомер, то специалистам в данной области должно быть понятно, что, пока нет иных указаний, небольшие количества других стереоизомеров могут присутствовать в композициях по изобретению, при условии, что возможность использования композиции в целом не исключается присутствием таких других изомеров. Отдельные энантиомеры могут быть получены многочисленными способами, которые хорошо известны в данной области, включая хиральную хроматографию с использованием подходящей хиральной стационарной фазы или носителя или химическое превращение их в диастереоизомеры, разделение диастереоизомеров обычными средствами, такими как хроматография или перекристаллизация, последующую регенерацию исходных энантиомеров. Кроме того, при целесообразности, пока нет иных определений, все цис-транс или E/Z изомеры (геометрические изомеры), таутомерные формы и топоизомерные формы соединений по изобретению включены в объем изобретения.

Конкретнее, соединения формулы I содержат, по меньшей мере, два хиральных центра, указанных символами * и ** в следующей формуле:

В одном стереоизомере оба атома углерода, идентифицированные символами * и **, имеют конфигурацию (R). Данный вариант осуществления изобретения показан в формуле Ia:

В данном варианте осуществления, соединения имеют (R,R) конфигурацию у атомов углерода * и ** или обогащены стереоизомерной формой, имеющей (R,R) конфигурацию у данных атомов углерода.

В другом стереоизомере оба атома углерода, идентифицированные символами * и **, имеют (S) конфигурацию. Данный вариант осуществления изобретения показан в формуле Ib:

В данном варианте осуществления, соединения имеют (S,S) конфигурацию у атомов углерода * и ** или обогащены стереоизомерной формой, имеющей (S,S) конфигурацию у этих атомов углерода.

Еще в одном варианте осуществления, атом углерода, идентифицированный символом *, имеет (S) конфигурацию, а атом углерода, идентифицированный символом **, имеет (R) конфигурацию. Данный вариант осуществления изобретения показан в формуле Ic:

В данном варианте осуществления, соединения имеют (S,R) конфигурацию у атомов углерода * и ** или обогащены стереоизомерной формой, имеющей (S,R) конфигурацию у этих атомов углерода.

В еще одном стереоизомере атом углерода, идентифицированный символом *, имеет (R) конфигурацию, а атом углерода, идентифицированный символом **, имеет (S) конфигурацию. Данный вариант осуществления изобретения показан в формуле Id:

В данном варианте осуществления, соединения имеют (R,S) конфигурацию у атомов углерода * и ** или обогащены стереоизомерной формой, имеющей (R,S) конфигурацию у этих атомов углерода.

Соединения формулы Ia и Ib являются энантиомерами, и поэтому, в отдельных аспектах, данное изобретение относится к каждому отдельному энантиомеру (т.е. Ia или Ib), рацемической смеси Ia и Ib или обогащенной энантиомером смеси Ia и Ib, содержащей преимущественно Ia или преимущественно Ib. Аналогичным образом, соединения формулы Ic и Id являются энантиомерами, и поэтому, в отдельных аспектах, данное изобретение относится к каждому отдельному энантиомеру (т.е. Ic или Id), рацемической смеси Ic и Id или обогащенной энантиомером смеси Ic и Id, содержащей преимущественно Ic или преимущественно Id.

В одном варианте осуществления изобретения, соединение формулы I представляет собой 3-[l-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин или его стереоизомер. В другом варианте осуществления изобретения, соединение формулы I представляет собой 3-[l-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин, имеющий конфигурацию, выбранную из:

или обогащено стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию. Например, в одном варианте осуществления, соединение формулы I представляет собой (R)-3-[(R)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин или обогащено стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию. В другом варианте осуществления, соединение формулы I представляет собой (S)-3-[(S)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин или обогащено стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию. В еще одном варианте осуществления, соединение формулы I представляет собой (S)-3-[(R)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин или обогащено стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию. В еще одном варианте осуществления, соединение формулы I представляет собой (R)-3-[(S)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин или обогащено стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию.

В некоторых вариантах осуществления, для оптимизации терапевтической активности соединений по изобретению, например для лечения нейропатической боли, может быть желательно, чтобы атомы углерода, идентифицированные символами * и **, имели конкретную (R,R), (S,S), (S,R) или (R,S) конфигурацию или были обогащены стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию. Например, в одном варианте осуществления, соединения по изобретению имеют (S,R) конфигурацию формулы Ic или обогащены стереоизомерной формой, имеющей (S,R) конфигурацию, а в другом варианте осуществления, соединения по изобретению имеют (R,S) конфигурацию формулы Id или обогащены стереоизомерной формой, имеющей (R,S) конфигурацию. В другом варианте осуществления, соединения по изобретению присутствуют в рацемической смеси, например, в виде смеси энантиомеров формулы Ia и Ib или в виде смеси энантиомеров формулы Ic и Id.

Настоящее изобретение также включает изотопически меченые соединения формулы I, т.е. соединения формулы I, где один или более атомов были заменены или обогащены атомами, имеющими такое же атомное число, но атомную массу, отличную от атомной массы, которая преобладает в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединение формулы I, включают без ограничения ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸О, ³⁵S, ³⁶Cl и ¹⁸F. Особый интерес представляют соединения формулы I, обогащенные тритием или углеродом-14, которые могут использоваться, например, в исследованиях тканевого распределения; соединения формулы I, обогащенные дейтерием, особенно в участке метаболизма, приводя, например, к получению соединений, имеющих большую метаболическую устойчивость; и соединения формулы I, обогащенные излучающим позитроны изотопом, таким как ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O и ¹³N, которые могут использоваться, например, в исследованиях с использованием позитронно-эмиссионной томографии (PET).

Было обнаружено, что соединения по изобретению обладают активностью ингибирования обратного захвата серотонина и активностью ингибирования обратного захвата норэпинефрина. Среди других свойств, ожидается, что такие соединения могут применяться в качестве терапевтических средств для лечения хронической боли, такой как нейропатическая боль. Путем комбинирования двойной активности в одном соединении может быть достигнута двойная терапия, т.е. активность ингибирования обратного захвата серотонина и активность ингибирования обратного захвата норэпинефрина при использовании одного активного компонента. Поскольку фармацевтические композиции, содержащие один активный компонент, обычно легче составлять, чем композиции, содержащие два активных компонента, то такие однокомпонентные композиции обеспечивают значительное преимущество перед композициями, содержащими два активных компонента.

Многие комбинированные ингибиторы обратного захвата серотонина и норэпинефрина (SNRI) более избирательны в отношении SERT, чем NET. Например, милнаципран, дулоксетин и венлафаксин проявляют селективность (измеренную в виде pK_i), соответственно в 2,5, 10 и 100 раз выше в отношении SERT, по сравнению с NET. Однако некоторые менее избирательны, такие как бицифадин, который имеет pK_i при SERT 7,0 и pK_i при NET 6,7. Поскольку может быть желательным избегание селективных соединений, в одном варианте осуществления изобретения соединения имеют более сбалансированную SERT и NET активность.

Номенклатура, использованная в настоящем описании для названия соединений по изобретению, иллюстрируется в разделе «Примеры» настоящего описания. Данная номенклатура была получена с использованием коммерчески доступного программного обеспечения AutoNom (MDL, San Leandro, California). Соединения формулы I имеют 3-феноксиметилпирролидиновое ядро. Таким образом, соединения формулы I, где R¹ представляет -C_2-6алкил, были названы 3-(l-феноксиалкил)пирролидинами и т.д.

Репрезентативные варианты осуществления

Следующие заместители и величины предназначены для предоставления репрезентативных примеров различных аспектов и вариантов осуществления изобретения. Данные репрезентативные величины предназначены для дальнейшего определения и иллюстрации таких аспектов и вариантов осуществления и не предназначены для исключения других вариантов осуществления или для ограничения объема изобретения. В этом отношении, пока нет определенного указания, представление, что конкретная величина или заместитель являются предпочтительными, ни коим образом не предназначено для исключения других величин или заместителей из изобретения.

В одном аспекте, данное изобретение относится к соединениям формулы I:

где R¹ представляет -C_2-6алкил, -C_3-8циклоалкил, необязательно замещенный 1 или 2 атомами фтора, -С_2-6алкенил или -С_2-6алкинил. В одном варианте осуществления, R¹ представляет -С_2-6алкил, примеры которого включают этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил и 3-пентил. В другом варианте осуществления, R¹ представляет -С_{3- 8}циклоалкил, примеры которого включают циклопропил, циклопентил и циклогексил. В другом варианте осуществления -С_3-8циклоалкил замещен 1 или 2 атомами фтора, примеры которого включают 4,4-дифторциклогексил. В другом варианте осуществления, R¹ представляет -С_2-6алкенил, примеры которого включают бут-3-енил. В другом варианте осуществления, R¹ представляет -С_2-6алкинил, примеры которого включают этил и проп-2-инил.

R²-R⁶ независимо выбраны из водорода, галогена, -С_1-6алкила, -CF₃, -O-C_1-6алкила, -CN, -С(О)-С_1-6алкила, -S-C_1-6алкила, -С_3-8циклоалкила и -NO₂; или R⁴ и R⁵ взяты вместе с образованием CH=CH-CH=CH-; или R⁵ и R⁶ взяты вместе с образованием -CH-CH=CH-CH-.

Однако следует отметить, что когда R¹ представляет этил, R² представляет фтор-, R⁴ представляет хлор-, R⁵ представляет водород, и R⁶ представляет водород, то R³ не представляет фтор- или хлор-.

В одном варианте осуществления, когда R¹ представляет этил, R² представляет хлор-, R⁴ представляет хлор-, R⁵ представляет водород, и R⁶ представляет водород, то R³ не представляет водород.

В некоторых вариантах осуществления, одно или более положений арильного кольца замещены не водородом. Например, один такой вариант осуществления может быть описан указанием, что «R⁵ представляет неводородную группу». Это, как понятно, означает, что R⁵ может представлять любую из неводородных групп, определенных в формуле I, т.е., галоген, -C_1-6алкил, -CF₃, -O-C_1-6алкил, -CN, -C(O)-C_1-6алкил, -S-C_1-6алкил, -CF₃, -C_3-8циклоалкил и -NO₂; или R⁵ взят вместе с R⁴ с образованием -CH=CH-CH=CH-, или взят вместе с R⁶ с образованием -CH-CH=CH-CH-. В одном варианте осуществления, по меньшей мере, одна из групп R²-R⁶ представляет неводородную группу. В другом варианте осуществления, по меньшей мере, две из групп R²-R⁶ представляют неводородные группы. В еще одном варианте осуществления, по меньшей мере, три из групп R²-R⁶ представляют неводородные группы. В одном варианте осуществления, по меньшей мере, четыре из групп R²-R⁶ представляют неводородные группы, и в еще одном варианте осуществления, все из групп R²-R⁶ представляют неводородные группы.

Иллюстративные галогенные группы включают фтор-, хлор-, бром- и йод-. Иллюстративные -C_1-6алкильные группы включают -CH₃ («Me»), -CH₂CH₃ («Et») и -CH(CH₃)₂. Иллюстративные -O-C_1-6алкильные группы включают -OCH₃ («OMe»), -O-CH₂CH₃ и -OCH(CH₃)₂. Иллюстративные -C(O)-C_1-6алкильные группы включают -C(O)CH₃ и -C(O)CH₂CH₃. Иллюстративные -S-C_1-6алкильные группы включают -SCH₃. Иллюстративные -C_3-8циклоалкильные группы включают циклогексил.

В одном варианте осуществления, R¹ представляет -C_2-6алкил, который изображен в виде формулы II:

где R²-R⁶ имеют значения, определенные в формуле I. В другом конкретном варианте осуществления, R¹ представляет -C_3-6алкил. В другом варианте осуществления, R¹ представляет -C_3-8циклоалкил, необязательно замещенный 1 или 2 атомами фтора, который изображен в виде формулы III:

где R²-R⁶ имеют значения, определенные в формуле I. В еще одном варианте осуществления, R¹ представляет -C_2-6алкенил, который изображен в виде формулы IV:

где R²-R⁶ имеют значения, определенные в формуле I. В еще одном варианте осуществления, R¹ представляет -C_2-6алкинил, который изображен в виде формулы V:

где R²-R⁶ имеют значения, определенные в формуле I.

В одном конкретном варианте осуществления, R² и R³ представляют неводородные группы, тогда как R⁴, R⁵ и R⁶ представляют водород, что изображено в виде формулы VI:

где R¹ является таким, как определено для формулы I.

В одном конкретном варианте осуществления, R² и R⁴ представляют неводородные группы, тогда как R³, R⁵ и R⁶ представляют водород, что изображено в виде формулы VII:

где R¹ является таким, как определено для формулы I.

В одном конкретном варианте осуществления, R³ и R⁴ представляют неводородные группы, тогда как R², R⁵ и R⁶ представляют водород, что изображено в виде формулы VIII:

где R¹ является таким, как определено для формулы I.

В одном конкретном варианте осуществления, R², R³ и R⁴ представляют неводородные группы, тогда как R⁵ и R⁶ представляют водород, что изображено в виде формулы IX:

где R¹ является таким, как определено для формулы I.

В одном конкретном варианте осуществления, R², R⁴ и R⁶ представляют неводородные группы, тогда как R⁵ и R⁶ представляют водород, что изображено в виде формулы X:

где R¹ является таким, как определено для формулы I.

В одном варианте осуществления, R² представляет водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃, -O-C_1-6алкил, -C(O)-C_1-6алкил, -S-C_1-6алкил, -C_3-8циклоалкил или -NO₂; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X. В другом варианте осуществления, R² представляет водород, фтор-, хлор-, -CH₃,-CH₂CH₃, -CF₃, -O-CH₃, -O-CH₂CH₃, -C(O)-CH₃, -S-CH₃, циклогексил или -NO₂; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X.

В одном варианте осуществления, R³ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃, -O-C_1-6алкил или -S-C_1-6алкил; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X. В другом варианте осуществления, R³ представляет водород, фтор-, хлор-, -CH₃, -CF₃, -O-CH₃ или -S-CH₃; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X.

В одном варианте осуществления, R⁴ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃ или -O-C_1-6алкил; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X. В другом варианте осуществления, R⁴ представляет водород, фтор-, хлор-, -CH₃, -CF₃ или -O-CH₃; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X.

В одном варианте осуществления, R⁵ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил или -O-С_1-6алкил; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X. В другом варианте осуществления, R⁵ представляет водород, фтор-, хлор-, -СН₃ или -O-СН₃; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X.

В одном варианте осуществления, R₆ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X. В другом варианте осуществления, R₆ представляет водород, фтор-, хлор- или -СН₃; в другом аспекте, данный вариант осуществления имеет формулы II-X.

В еще одном варианте осуществления, R₄ и R₅ взяты вместе с образованием -СН=СН-СН=СН- или R₅ и R₆ взяты вместе с образованием -СН-СН=СН-СН-, что изображено в виде формулы XIa и XIb, соответственно:

и

где R¹ является таким, как определено для формулы I.

Кроме того, конкретные соединения формулы I, которые представляют интерес, включают те, которые представлены ниже в разделе «Примеры», а также их фармацевтически приемлемые соли.

Определения

При описании соединений, композиций, способов и процессов по изобретению, пока нет других указаний, следующие термины имеют следующие значения. Кроме того, пока контекст применения ясно диктует иное, используемые в настоящем описании формы единственного числа включают соответствующие формы множественного числа. Термины «содержащие», «включающие» и «имеющие» предназначены для обозначения включения и значат, что могут быть дополнительные элементы, отличные от перечисленных элементов.

Термин «фармацевтически приемлемый» относится к материалу, который не является биологически или иным образом неприемлемым при использовании в изобретении. Например, термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к материалу, который может быть включен в композицию и введен пациенту, не вызывая неприемлемых биологических эффектов или взаимодействия неприемлемым образом с другими компонентами композиции. Такие фармацевтически приемлемые материалы обычно соответствуют требуемым стандартам токсикологического и производственного тестирования и включают те материалы, которые идентифицируются в качестве подходящих неактивных ингредиентов Администрацией Пищевых Продуктов и Лекарственных Средств США.

Термин «фармацевтически приемлемая соль» означает соль, полученную из основания или кислоты, которая приемлема для введению пациенту, такому как млекопитающее (например, соль, имеющая приемлемую безопасность для млекопитающих при данной схеме дозировки). Однако понятно, что не требуется, чтобы соли, охватываемые изобретением, представляли собой фармацевтически приемлемые соли, такие как соли промежуточных соединений, которые не предназначены для введения пациенту. Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены из фармацевтически приемлемых неорганических или органических оснований и из фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот. Кроме того, когда соединение формулы I содержит и основную группу, такую как амин, и кислотную группу, такую как карбоновая кислота, могут образовываться цвиттерионы, и они включены в используемый в настоящем описании термин «соль». Соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических оснований, включают соли аммония, кальция, меди, трехвалентного железа, двухвалентного железа, лития, магния, трехвалентного марганца, двухвалентного марганца, калия, натрия и цинка и тому подобные. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органических оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, включая замещенные амины, циклические амины, природные амины и тому подобные, такие как аргинин, бетаин, кофеин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лизин, метилглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперадин, полиаминовые смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин, трометамин и тому подобные. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических кислот, включают соли борной, карбоновой, галогенводородной (бромистоводородной, хлористоводородной, фтористоводородной или йодистоводородной), азотной, фосфорной, сульфамовой и серной кислот. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органических кислот, включают соли алифатических гидроксикислот (например, лимонной, глюконовой, гликолевой, молочной, лактобионовой, яблочной и винной кислоты), алифатических монокарбоновых кислот (например, уксусной, масляной, муравьиной, пропионовой и трифторуксусной кислоты), аминокислот (например, аспарагиновой и глутаминовой кислоты), ароматических карбоновых кислот (например, бензойной, п-хлорбензойной, дифенилуксусной, гентизиновой, гиппуровой и трифенилуксусной кислоты), ароматических гидрокислот (например, о-гидроксибензойной, п-гидроксибензойной, l-гидроксинафталин-2-карбоновой и 3-гидроксинафталин-2-карбоновой кислоты), аскорбиновой, дикарбоновой кислоты (например, фумаровой, малеиновой, щавелевой и янтарной кислоты), глюкуроновой, миндальной, муциновой, никотиновой, оротовой, памоевой, пантотеновой, сульфоновой кислоты (например, бензолсульфоновой, камфорсульфоновой, эдисиловой, этансульфоновой, изетионовой, метансульфоновой, нафталинсульфоновой, нафталин-l,5-дисульфоновой, нафталин-2,6-дисульфоновой и п-толуолсульфоновой кислоты), ксинафоевой кислоты и тому подобные.

Термин «сольват» означает комплекс или агрегат, образованный одной или более молекулами растворенного вещества, например соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, и одной или более молекулами растворителя. Такие сольваты обычно представляют собой кристаллические кислоты, имеющие по существу фиксированное молярное соотношение растворенного соединения и растворителя. Репрезентативные растворители включают, в качестве примера, воду, метанол, этанол, изопропанол, уксусную кислоту и тому подобные. Когда растворитель представляет собой воду, то образованный сольват представляет собой гидрат.

Термин «терапевтически эффективное количество» означает количество, достаточное для осуществления лечения при введения нуждающемуся в нем пациенту, т.е. количество лекарственного средства, требуемое с получением желательного терапевтического эффекта. Например, терапевтически эффективное количество для лечения нейропатической боли представляет собой количество соединения, необходимое, например, для снижения, подавления, устранения или предотвращения симптомов нейропатической боли или для лечения причины, лежащей в основе нейропатической боли. С другой стороны, термин «терапевтически эффективное количество» означает количество, достаточное с получением желательного результата, который необязательно должен представлять собой терапевтический результат. Например, при изучении системы, содержащей транспортер норэпинефрина, «эффективное количество» может представлять собой количество, необходимое для ингибирования обратного захвата норэпинефрина.

Термин «лечить» или «лечение», используемый в настоящем описании, означает лечение заболевания или медицинского состояния (такого как нейропатическая боль) у пациента, такого как млекопитающее (в частности, человек), которое включает одно или более из следующих: (a) предотвращение возникновения заболевания или медицинского состояния, т.е. профилактическое лечение пациента; (b) облегчение течения заболевания или медицинского состояния, т.е. устранение или вызов обратного развития заболевания или медицинского состояния у пациента; (c) подавление заболевания или медицинского состояния, т.е. замедление или остановку развития заболевания или медицинского состояния у пациента; или (d) облегчение симптомов заболевания или медицинского состояния у пациента. Например, термин «лечение нейропатической боли» включает предотвращение возникновения нейропатической боли, облегчение нейропатической боли, подавление нейропатической боли и облегчение симптомов нейропатической боли. Термин «пациент» предназначен для включения тех млекопитающих, таких как люди, которые нуждаются в лечении или профилактике заболевания, которые в настоящее время получают лечение для профилактики и лечения определенного заболевания или медицинского состояния, а также тестируемых индивидов, у которых оцениваются соединения по изобретению, или тех, которые используются в анализе, например животное в качестве экспериментальной модели.

Термин «алкил» означает одновалентную насыщенную углеводородную группу, которая может быть линейной или разветвленной. Пока нет иных определений, такие алкильные группы обычно содержат от 1 до 10 атомов углерода и включают, например, -C_1-2алкил, -C_1-3алкил, -C_1-4алкил, -C_1-6алкил и -C_2-6алкил. Репрезентативные алкильные группы включают, в качестве примера, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил, н-нонил, н-децил и тому подобные.

Термин «алкенил» означает одновалентную ненасыщенную группу, которая может быть линейной или разветвленной и которая имеет, по меньшей мере, одну, а обычно 1, 2 или 3 углерод-углеродные двойные связи. Пока нет иных определений, такие алкенильные группы обычно содержат от 2 до 10 атомов углерода и включают, например, -C_2-4алкенил, -C_2-6алкенил и -C_2-10алкенил. Репрезентативные алкенильные группы включают, в качестве примера, этенил, н-пропенил, изопропенил, н-бут-2-енил, бут-3-енил, н-гекс-3-енил и тому подобные.

Термин «алкинил» означает одновалентную ненасыщенную углеводородную группу, которая может быть линейной или разветвленной и которая имеет, по меньшей мере, одну, а обычно 1, 2 или 3 углерод-углеродные тройные связи. Пока нет иных определений, такие алкинильные группы обычно содержат от 2 до 10 атомов углерода и включают, например, -C_2-4алкинил, -C_3-6алкинил и -C_3-10алкинил. Репрезентативные алкинильные группы включают, в качестве примера, этинил, проп-2-инил(н-пропинил), н-бут-2-инил, н-гекс-3-инил и тому подобные.

Термин «циклоалкил» означает одновалентную насыщенную карбоциклическую углеводородную группу. Пока нет иных определений, такие циклоалкильные группы обычно содержат от 3 до 10 атомов углерода и включают, например, -C_3-5циклоалкил, -C_3-6 циклоалкил и -C_3-8циклоалкил. Репрезентативные циклоалкильные группы включают, в качестве примера, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и тому подобные.

Когда определенное число атомов углерода предназначено для определенного термина, используемого в настоящем описании, то число атомов углерода показано перед термином в виде подстрочника. Например, термин «C_1-6алкил» означает алкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, а термин «C_3-8циклоалкил» означает циклоалкильную группу, имеющую от 3 до 8 атомов углерода, где атомы углерода находятся в любой приемлемой конфигурации.

Термин «галоген» означает фтор-, хлор-, бром- и йод-.

Все другие термины, использованные в настоящем описании, используются в их обычном значении, которое понятно специалистам в данной области и которому они предназначены.

Общие синтетические процедуры

Соединения по изобретению могут быть получены из легкодоступных исходных материалов с использованием следующих общих способов, процедур, изложенных в разделе «Примеры», или с использованием других способов, реагентов и исходных материалов, которые известны специалистам в данной области. Хотя следующие процедуры могут иллюстрировать конкретный вариант осуществления изобретения, понятно, что другие варианты осуществления изобретения могут быть аналогичным образом реализованы с использованием тех же или аналогичных способов или путем использования других способов, реагентов и исходных материалов, известных специалистам в данной области. Следует понимать, что когда представлены типичные или предпочтительные условия процесса (т.е. температуры, интервалы времени, молярные соотношения реагентов, растворители, величины давления и т.д.), то, пока нет других указаний, могут также использоваться другие условия процесса. Хотя оптимальные условия реакции будут обычно варьироваться в зависимости от различных параметров реакции, таких как используемые конкретные реагенты, растворители и количества, средние специалисты в данной области могут легко определить подходящие условиях реакции, используя обычные процедуры оптимизации.

Кроме того, как будет очевидно для специалистов в данной области, обычные защитные группы могут быть необходимы или желательны для предотвращения подверганию определенных функциональных групп нежелательным реакциям. Выбор подходящей защитной группы для конкретной функциональной группы, а также подходящих условий и реагентов для защиты и снятия защиты таких функциональных групп хорошо известны в данной области. При желании, могут использоваться защитные группы, отличные от тех, которые иллюстрируются в процедурах, описанных в настоящей заявке. Например, многочисленные защитные группы и их введение и удаление описаны в руководстве Greene and Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999 и в приведенных в нем ссылках.

Конкретнее, в представленных ниже схемах, P представляет «аминозащитную группу», термин, используемый в настоящем описании, для обозначения защитной группы, подходящей для предотвращения нежелательных реакций у аминогруппы. Репрезентативные аминозащитные группы включают без ограничения трет-бутоксикарбонил (BOC), тритил (Tr), бензилоксикарбонил (Cbz), 9-фторенилметоксикарбонил (Fmoc), формил и тому подобные. Стандартные методики и реагенты снятия защиты, такие как TFA в DCM или HCl в 1,4-диоксане, метаноле или этаноле, используются для удаления защитных групп, если они присутствуют. Например, группа BOC может быть удалена с использованием кислотного реагента, такого как хлористоводородная кислота, трифторуксусная кислота и тому подобные; тогда как группа Cbz может быть удалена использованием условий каталитического гидрирования, таких как H₂ (1 атм.), в 10% Pd/C спиртовом растворителе.

Подходящие инертные разбавители для применения в указанных схемах включают, в качестве иллюстрации, а не ограничения, тетрагидрофуран (THF), ацетонитрил, N,N-диметилформамид (DMF), диметилсульфоксид (DMSO), толуол, дихлорметан (DCM), хлороформ (CHCl₃) и тому подобные.

Все реакции обычно проводятся при температуре в пределах диапазона от примерно -78°C до 110°C, например при комнатной температуре. Ход реакций может контролироваться использованием тонкослойной хроматографии (TLC), высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) (ВЭЖХ) и/или LCMS (жидкостной хроматографии, масс-спектрометрии) до завершения. Реакции могут завершаться за минуты, могут занимать часы, обычно от 1-2 часов и до 48 часов, или дни, например до 3-4 дней. После завершения полученная смесь или продукт реакции может, кроме того, обрабатываться с получением желательного продукта. Например, полученная смесь или продукт реакции может подвергаться одной или более из следующих процедур: разбавление (например, насыщенным NaHCO₃); экстракция (например, этилацетатом, CHCl₃, DCM, водной HCl); промывание (например, DCM, насыщенным водным NaCl или насыщенным водным NaHCO₃); сушка (например, над MgSO₄ или Na₂SO₄, или в вакууме); фильтрация; концентрирование (например, в вакууме); повторное растворение (например, в растворе 1:1 уксусной кислоты:H₂O) и/или очистка (например, препаративной HPLC, препаративной HPLC с обращенной фазой или перекристаллизацией).

В качестве иллюстрации, соединения формулы I, а также их соли, могут быть получены по одной или более из следующих схем, а также процедурами, изложенными в примерах. Как известно, хиральный центр *, показанный в схемах, представляет собой S или R и изображен соответственно. Однако хиральный центр ** однозначно неизвестен и был обозначен R или S на основании первого пика элюирования HPLC с обращенной фазой из смеси диастереомерных промежуточных соединений (защищенных спиртов). Установление стереохимии таких хиральных вторичных спиртов может осуществляться с использованием принятого анализа эфира Мошера (см., например, Dale and Mosher (1969) J. Org. Chem. 34(9):2543-2549). Для соединений, где было известно, что хиральный центр * представляет собой S, то первый пик элюирования был обозначен S в хиральном центре **, а второй пик элюирования был обозначен R в хиральном центре **. Для соединений, где, как было известно, хиральный центр * представлял собой R, то первый пик элюирования был обозначен R в хиральном центре **, а второй пик элюирования был обозначен S в хиральном центре **. Кроме того, хотя в схемах иллюстрируется образование одного конкретного стереоизомера, другие стереоизомеры могут быть получены аналогичным образом путем использования исходного материала, имеющего другую стереохимию.

Схема I

Соединения формулы I могут быть получены взаимодействием соответствующего спиртового исходного материала и желательного, необязательно замещенного, фторбензола с использованием реакции нуклеофильного ароматического замещения (S_NAr). Эта реакция обычно проводится с использованием гидрида натрия (NaH) в растворителе, таком как DMF. Снятие защиты затем обеспечивает получение желательного соединения формулы I.

Схема II

Соединения формулы I могут быть также получены с использованием реакции сочетания Митсунобу (Mitsunobu and Yamada (1967) M. Bull. Chem. Soc. JPN. 40:2380-2382) из спиртового исходного материала и необязательно замещенного фенола. Данная реакция обычно проводится с использованием стандартных условий реакции сочетания Митсунобу с использованием окислительно-восстановительной системы, содержащей азодикарбоксилат, такой как диэтилазодикарбоксилат или диизопропилазодикарбоксилат и фосфатный катализатор, такой как трифенилфосфат. Снятие защиты затем обеспечивает получение желательного соединения формулы I.

Схема III

Соединения формулы I могут быть также получены сочетанием рацемической смеси соответствующего спиртового исходного материала с необязательно замещенным йодбензолом в условиях реакции Ульмана с получением рацемической смеси соединений формулы I. Реакция Ульмана обычно проводится в присутствии катализатора йодида меди(I)/1,10-фенантролина и основания, такого как карбонат цезия, в соответствующем растворителе, таком как толуол или DMF. Хиральное разделение с последующим снятием защиты затем обеспечивает получение желательного стереоизомера формулы I. Альтернативно, рацемический продукт может быть сначала подвергнут снятию защиты, а затем отделяться хиральной HPLC с нормальной фазой.

Спиртовые исходные материалы могут быть получены опосредованным 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси свободнорадикальным окислением (TEMPO) сложного трет-бутилового эфира (S)-3-гидроксиметилпирролидин-1-карбоновой кислоты с получением трет-бутилового эфира (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты.

Данный способ особенно пригоден ввиду минимизации количества рацемизации, которая может происходить во время окисления. Сложный трет-бутиловый эфир 3-гидроксиметилпирролидин-1-карбоновой кислоты, где Р представляет Воc или бензил, имеется в продаже. Альтернативно, сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-гидроксиметилпирролидин-1-карбоновой кислоты может окисляться с ипользованием любого окисляющего агента, подходящего для превращения первичного спирта в альдегид. Репрезентативные окисляющие агенты включают, например, диметилсульфоксид, реагент Коллина, реагент Corey, пиридинийдихромат и тому подобные. Следующая стадия включает реакцию Гриньяра между формильным соединением и реагентом Гриньяра, R¹-MgX, где X представляет, например, хлор- или бром-. Данная стадия обычно проводится с использованием стандартных условий реакции Гриньяра. Иллюстративные реагенты Гриньяра включают пропилмагний хлорид (R¹ представляет пропил), циклопропилмагний бромид (R¹ представляет циклопропил), этинилмагнийбромид (R¹ представляет -C_2-6алкинил) и тому подобные. (R,R) и (R,S) спиртовые исходные материалы могут быть получены аналогичным образом с использованием (R)-Boc-3-пирролидинметанола, также известного как сложный трет-бутиловый эфир (R)-3-гидроксиметилпирролидин-1-карбоновой кислоты.

При желании, фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I могут быть получены контактированием формы свободной кислоты или основания соединения формулы I с фармацевтически приемлемым основанием или кислотой.

Считается, что некоторые из промежуточных соединений, описанных в настоящей заявке, являются новыми, и, соответственно, такие соединения относятся к еще одним аспектам изобретения, включая, например, соединения формулы XI:

или его соль, где Р представляет аминозащитную группу, в частности трет-бутоксикарбонил (ВОС), где R¹ и R^2-6 являются такими, как определено в формуле I. В одном варианте осуществления, соединения по изобретению могут быть получены снятием защиты соединений формулы XI с получением соединений формулы I или их фармацевтически приемлемых солей.

Другие детали, относящиеся к определенным условиям реакции и другим процедурам получения репрезентативных соединений по изобретению или их промежуточных соединений, описаны в изложенном в настоящем описании разделе «Примеры».

Полезность

Соединения по изобретению обладают активностью ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина. Таким образом, данные соединения могут применяться при лечении в качестве комбинированных ингибиторов обратного захвата серотонина и норэпинефрина (SNRI). В одном варианте осуществления, соединения по изобретению обладают одинаковой или приблизительно одинаковой активностью ингибирования обратного захвата серотонина и активностью ингибирования обратного захвата норэпинефрина.

Константа ингибирования (K_i) соединения представляет собой концентрацию лиганда в анализе ингибирования связывания радиолиганда, который занял бы 50% транспортеров, если бы радиолиганд не присутствовал. Величины K_i могут быть определены в результате исследований связывания радиолиганда с ³H-низотексином (для транспортера норэпинефрина, NET) и ³H-циталопрамом (для транспортера серотонина, SERT), как описано в Анализе 1. Данные величины K_i получены по величинам IC₅₀ в анализе связывания с использованием уравнения Cheng-Prusoff и K_d радиолиганда (Cheng & Prusoff (1973) Biochem. Pharmacol. 22(23):3099-3108). Функциональные величины IC₅₀ могут быть определены в функциональных анализах ингибирования захвата, описанных в Анализе 2. Данные величины IC₅₀ могут быть превращены в величины K_i с использованием уравнения Cheng-Prusoff и K_m медиатора для транспортера. Однако следует отметить, что условия анализа захвата, описанные в Анализе 2, таковы, что величины IC₅₀ очень близки к величинам K_i, если желательно математическое преобразование, поскольку концентрация нейромедиатора (5-HT, NE, или DA), используемого в анализе, гораздо ниже его K_m для соответствующего транспортера. В одном варианте осуществления, соединения по изобретению проявляют SERT K_i/NET K_i в диапазоне от 0,1 до 100; в другом варианте осуществления, проявляют SERT K_i/NET K_i в диапазоне от 0,3 до 100; а в еще одном варианте осуществления, проявляют SERT K_i/NET K_i в диапазоне от 0,3 до 10.

Другим показателем ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина является величина pIC₅₀. В одном варианте осуществления, соединения по изобретению имеют величины ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина pIC₅₀ ≥7; в другом варианте осуществления, соединения по изобретению имеют величину ингибирования обратного захвата серотонина pIC₅₀ ≥7, а ингибирования обратного захвата норэпинефрина pIC₅₀ ≥8; в еще одном варианте осуществления, соединения по изобретению имеют величину ингибирования обратного захвата серотонина pIC₅₀ ≥8, а ингибирования обратного захвата норэпинефрина pIC₅₀ ≥7, а в другом варианте осуществления, соединения по изобретению имеют величину ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина pIC₅₀ ≥8. В одном конкретном варианте осуществления, такие соединения имеют формулу II-IV.

В другом варианте осуществления, соединения по изобретению избирательны в отношении ингибирования SERT и NET, в сравнении с допаминовым транспортером (DAT). Например, в данном варианте осуществления, соединениями, представляющими особый интерес, являются те, которые проявляют сродство связывания с SERT и NET, которое, по меньшей мере, в 5 раз выше, чем сродство связывания с DAT, или которое, по меньшей мере, в 10 раз выше, чем с DAT, или, по меньшей мере, в 20 или 30 раз выше, чем с DAT. В другом варианте осуществления, соединения не проявляют значительное ингибирование DAT. В еще одном варианте осуществления, соединения проявляют ингибирование активности DAT менее чем на 50% при измерении в концентрации 794 нМ. В используемых условиях анализа, соединение, которое проявляет ингибирование ≤50%, по оценкам, имело бы величину pK_i DAT ≤6,1.

В еще одном варианте осуществления, соединения по изобретению обладают активностью ингибирования обратного захвата допамина, а также активностью ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина. Например, в данном варианте осуществления, представляющими особый интерес соединениями являются те, которые проявляют pIC₅₀ на SERT и NET более чем или равную 8,0 и pIC₅₀ на DAT более чем или равную 7,0.

Следует отметить, что в некоторых случаях соединения по изобретению могут обладать или слабой активностью ингибрования обратного захвата серотонина, или слабой активностью ингибрования обратного захвата норэпинефрина. В этих случаях, специалистам в данной области будет понятно, что такие соединения еще могут в первую очередь применяться соответственно в качестве или ингибитора NET, или ингибитора SERT или могут применяться в качестве инструментов исследования.

Иллюстративные анализы для определения активности ингибирования обратного захвата серотонина и/или норэпинефрина соединений по изобретению включают в качестве иллюстрации, а не ограничения, анализы, которые измеряют связывание SERT и NET, например, как описано в Анализе 1 и в публикации Tsuruda et al. (2010) Journal of Pharmacological and Toxicological Methods 61(2):192-204. Кроме того, он применяется для понимания уровня связывания и обратного захвата DAT в анализе, таком как анализ, описанный в Анализе 1. Полезные вторичные анализы включают анализы захвата нейромедиаторов для измерения ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина в клетки, экспрессирующие соответствующий человеческий или крысиный рекомбинантный транспортер (hSERT, hNET или hDAT), как описано в Анализе 2, и свзывание радиолигандов ex vivo и анализы обратного захвата нейромедиаторов, которые используются для определения in vivo занятия SERT, NET и DAT в ткани, как описано в Анализе 3. Другие анализы, которые могут использоваться для оценки фармакологических свойств тестируемых соединений, включают те, которые перечислены в Анализе 4. Иллюстративные анализы in vivo включают тест с введением формалина в подушечку лапы, описанный в Анализе 5, который является надежным прогностическим показателем клинической эффективности для лечения нейропатической боли, и модель перевязки спинальных нервов, описанная в Анализе 6. Указанные выше анализы могут использоваться при определении возможности терапевтического применения, например активности облегчения нейропатической боли, соединений по изобретению. Другие свойства и возможности применения соединений по изобретению могут быть продемонстрированы с использованием различных анализов in vitro и in vivo, хорошо известных специалистам в данной области.

Ожидается, что соединения по изобретению могут применяться для лечения и/или профилактики медицинских состояний, в развитии которых участвует функция моноаминового транспортера, в частности тех состояний, которые опосредованы или реагируют на ингибирование обратного захвата серотонина и норэпинефрина. Таким образом, ожидается, что пациентов, страдающих заболеванием или расстройством, которое лечится ингибированием транспортера серотонина и/или норэпинефрина, можно лечить введением терапевтически эффективного количества ингибитора обратного захвата серотонина и норэпинефрина по изобретению. Такие медицинские состояния включают, в качестве примера, такие болевые расстройства как нейропатическая боль, фибромиалгия и хроническая боль, депрессивные расстройства, такие как большая депрессия, аффективные расстройства, такие как тревожное расстройство, гиперактивное расстройство с дефицитом внимания, когнитивные расстройства, такие как деменция, и стрессовое недержание мочи.

Количество активного средства, вводимого на дозу, или общее количество, вводимое в день, может быть задано или оно может определяться на основе отдельного пациента путем учета многочисленных факторов, включая природу и тяжесть состояния пациента, подвергаемого лечению состояния, возраста, массы тела и общего состояния здоровья пациента, переносимости пациентом активного средства, пути введения, фармакологических аспектов, таких как профили активности, эффективности, фармакокинетики и токсикологии активного средства, и любых вводимых вторичных средств, и тому подобных факторов. Лечение пациента, страдающего заболеванием или медицинским состоянием (таким как нейропатическая боль), может начинаться заданной дозировкой или дозировкой, определяемой лечащим врачом, и будет продолжаться в течение периода времени, необходимого для предотвращения, облегчения, подавления или уменьшения симптомов заболевания или медицинского состояния. Состояние пациентов, подвергаемых такому лечению, обычно контролируется на плановой основе для определения эффективности лечения. Например, при лечении нейропатической боли показатель эффективности лечения может включать измерение качества жизни пациента, например улучшение типов сна пациента, посещение работы, способность переносить физические нагрузки и получать лечение в амбулаторных условиях и т.д. Шкалы оценки тяжести боли, функционирующие на основе оценки тяжести боли у отдельных пациентов, могут также использоваться для содействия оценке уровня боли у пациента. Показатели других заболеваний и состояний, описанных в настоящей заявке, хорошо известны специалистам в данной области и вполне доступны для лечащего врача. Непрерывный контроль врачом обеспечит введение оптимального количества активного средства в любое данное время, а также облегчение определения длительности лечения. Это имеет особое значение, когда также вводятся вторичные средства, поскольку их выбор, дозировка и длительность лечения могут также подбираться в ходе лечения с тем, чтобы вводилось самое низкое количество активного средства, которое проявляет желательную эффективность, и, кроме того, введение продолжалось столько, сколько необходимо для успешного лечения заболевания или медицинского состояния.

Болевые расстройства

Было показано, что SNRI оказывают благоприятный эффект на боль, например, при диабетической нейропатии, связанной с болезненными ощущениями (дулоксетин, Goldstein et al. (2005) Pain 116:109-118; венлафаксин, Rowbotham et al. (2004) Pain 110:697-706), фибромиалгии (дулоксетин, Russell et al. (2008) Pain 136(3):432-444; милнаципран, Vitton et al. (2004) Human Psychopharmacology 19:S27-S35) и мигрени (венлафаксин, Ozyalcin et al. (2005) Headache 45(2):144-152). Таким образом, один вариант осуществления относится к способу лечения болевого расстройства, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. Обычно терапевтически эффективное количество представляет собой количество, которое достаточно для облегчения боли. Иллюстративные болевые расстройства включают в качестве примера острую боль, постоянную боль, хроническую боль, боль при воспалении и нейропатическую боль. Конкретнее, они включают боль, связанную или вызванную артритом, боль в спине, включая хроническую боль в поясничной области; боль, связанную со злокачественными заболеваниями, включая боль, связанную с опухолью (например, костную боль, головную боль, лицевую боль или висцеральную боль), и боль, связанную с лечением злокачественных заболеваний (например, синдром после химиотерапии, синдром хронической послеоперационной боли и пострадиационный синдром); синдром запястного туннеля; фибромиалгию; головные боли, включая хронические головные боли напряжения; воспаление, связанное с полимиалгией, ревматоидным артритом и остеоартритом; мигрень; нейропатическую боль, включая синдром комплексной региональной боли; общую боль; послеоперационную боль; боль в плечевой области; синдромы центральной боли, включая боль после инсульта, и боль, связанную с травмами спинного мозга и рассеянным склерозом; фантомную боль в конечностях; боль, связанную с болезнью Паркинсона; и висцеральную боль (например, синдром раздраженной кишки). Особый интерес представляет лечение нейропатической боли, которая включает диабетическую периферическую нейропатию (DPN), нейропатию, связанную с ВИЧ-инфекцией, постгерпетическую невралгию (PHN) и вызванную химиотерапией периферическую нейропатию. При применении для лечения болевых расстройств, таких как нейропатическая боль, соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими средствами, включая противосудорожные средства, антидепрессанты, мышечные релаксанты, NSAID (нестероидные противовоспалительные лекарственные средства), опиоидные агонисты, селективные ингибиторы обратного захвата серотонина, блокаторы натриевых каналов и симпатолитические средства. Иллюстративные соединения в пределах указанных классов описаны в настоящей заявке.

Депрессивные расстройства

Другой вариант осуществления относится к способу лечения депрессивного расстройства, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. Обычно терапевтически эффективное количество составляет количество, которое достаточно для облегчения депрессии и обеспечения ощущения общего благополучия. Иллюстративные депрессивные расстройства включают в качестве примера, а не ограничения, депрессию, связанную с болезнью Альцгеймера, биполярным расстройством, онкологическими заболеваниями, жестоким обращением с детьми, бесплодием, болезнью Паркинсона, состоянием после инфаркта миокарда и психозом; дистимию; синдром сварливого или раздражительного старика; индуцированную депрессию; большую депрессию; детскую депрессию; постклимактерическую депрессию; послеродовую депрессию; рецидивирующую депрессию; одиночные эпизоды депрессии и субсиндромную симптоматическую депрессию. Особый интерес представляет лечение большой депрессии. При использовании для лечения депрессивных расстройств соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими средствами, включая антидепрессанты и двойные ингибиторы обратного захвата серотонина-норэпинефрина. Иллюстративные соединения внутри данных классов описаны в настоящей заявке.

Аффективные расстройства

Другой вариант осуществления относится к способу лечения аффективного расстройства, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. Иллюстративные аффективные расстройства включают, в качестве примера, а не ограничения: тревожные расстройства, такие как общее тревожное расстройство; избегающее расстройство личности; расстройства приема, такие как нервная анорексия, нервная булимия и ожирение; обсцессивно-компульсивное расстройство; паническое расстройство; расстройства личности, такие как избегающее расстройство личности и гиперактивное расстройство с дефицитом внимания (ADHD); посттравматический стрессовый синдром; фобии, такие как агорафобия, а также простая и другие специфические фобии, и социальная фобия; предменструальный синдром; психотические расстройства, такие как шизофрения и мания; сезонное аффективное расстройство; половая дисфункция, включая преждевременную эякуляцию, мужскую импотенцию, и женская половая дисфункция, такая как женская сексуальная дисфункция с расстройством возбуждением; социальное тревожное расстройство и расстройства, связанные со злоупотреблением психоактивными веществами, включая зависимости от химических веществ, таких как злоупотребление алкоголем, бензодиазепинами, кокаином, героином, никотином и фенобарбиталом, а также синдромы отмены, которые могут возникать в результате этих зависимостей. При использовании для лечения аффективных расстройств соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими средствами, включая антидепрессанты. Иллюстративные соединения внутри этих классов описаны в настоящей заявке.

Атомоксетин, который в 10 раз избирательнее в отношении NET, утвержден для применения при лечении гиперактивного расстройства с дефицитом внимания (ADHD), и клинические исследования показали, что SNRI, венлафаксин, может также оказывать благоприятный эффект при лечении ADHD (Mukaddes et al. (2002) Eur. Neuropsychopharm. 12(Supp 3):421). Таким образом, ожидается, что соединения по изобретению могут также применяться в способах лечения гиперактивного расстройства с дефицитом внимания введением пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. При использовании для лечения депрессии соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими средствами, включая антидепрессанта. Иллюстративные соединения внутри этих классов описаны в настоящей заявке.

Когнитивные расстройства

Другой вариант осуществления изобретении относится к способу лечения когнитивного расстройства, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. Иллюстративные когнитивные расстройства включают, в качестве примера, а не ограничения: деменцию, которая включает дегенеративную деменцию (например, болезнь Альцгеймера, болезнь Крейтцфельдта-Якоба, хорею Хантингтона, болезнь Паркинсона, болезнь Пика и сенильную деменцию), сосудистую деменцию (например, мультиинфарктную деменцию) и деменцию, связанную с поражениями, занимающими внутричерепное пространство, травмой, инфекциями и связанными состояниями (включающими ВИЧ-инфекцию), метаболизмом, токсинами, аноксией и витаминной недостаточностью; и легкое когнитивное нарушение, связанное со старением, такое как связанное с возрастом нарушение памяти, амнестическое расстройство и возрастное снижение когнитивной функции. При использовании для лечения когнитивных расстройств соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими средствами, включая средства против болезни Альцгеймера и средств против болезни Паркинсона. Иллюстративные соединения внутри этих классов описаны в настоящей заявке.

Другие расстройства

Было также показано, что SNRI эффективны для лечения стрессового недержания мочи (Dmochowski (2003) Journal of Urology 170(4):1259-1263). Таким образом, другой вариант осуществления относится к способу лечения стрессового недержания мочи, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. При использовании для лечения стрессового недержания мочи соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими средствами, включая противосудорожные средства. Иллюстративные соединения внутри этих классов описаны в настоящей заявке.

Дулоксетин, SNRI, подвергается клиническим испытаниям для оценки эффективности при лечении синдрома хронической усталости, и недавно было показано, что он эффективен при лечении фибромиалгии (Russell et al. (2008) Pain 136(3):432-444). Ожидается также, что соединения по изобретению, ввиду их способности ингибировать SERT и NET, могут применяться для этого, и другой вариант осуществления изобретения относится к способу лечения синдрома хронической усталости, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению.

Было показано, что сибутрамин, ингибитор обратного захвата поглощения и норэпинефрина, и допамина, может применяться при лечении ожирения (Wirth et al. (2001) JAMA 286(11):1331-1339). Ожидается также, что соединения по изобретению, ввиду их способности ингибировать NET, могут применяться для этого, и другой вариант осуществления изобретения относится к способу лечению ожирения, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению.

Было показано, что десвенлафаксин, SNRI, ослабляет вазомоторные симптомы, связанные с менопаузой (Deecher et al. (2007) Endocrinology 148(3):1376-1383). Ожидается также, что соединения по изобретению, ввиду их способности ингибировать SERT и NET, могут применяться для этого, и другой вариант осуществления изобретения относится к способу лечения связанных с менопаузой вазомоторных симптомов, включающему введение пациенту терапевтичыески эффективного количества соединения по изобретению.

Инструменты исследования

Поскольку соединения по изобретению обладают и активностью ингибирования обратного захвата серотонина, и активностью ингибирования обратного захвата норэпинефрина, то они могут также применяться в качестве инструментов исследования для исследования или изучения биологических систем или образцов, имеющих транспортеры серотонина или норэпинефрина. Любая биологическая система или образец, имеющий транспортеры серотонина и/или норэпинефрина, могут использоваться в таких исследованиях, которые могут проводиться или in vitro, или in vivo. Репрезентативные биологические системы или образцы, подходящие для таких исследований, включают без ограничения клетки, клеточные экстракты, плазматические мембраны, образцы ткани, изолированные органы, млекопитающих (таких как мыши, крысы, морские свинки, кролики, собаки, свиньи, люди и т.д.) и тому подобные, причем особый интерес представляют млекопитающие. В одном конкретном варианте осуществления изобретения, обратный захват серотонина у млекопитающего ингибируется введением ингибирующего обратный захват серотонина количества соединения по изобретению. В другом конкретном варианте осуществления, обратный захват норэпинефрина у млекопитающего ингибируется введением ингибирующего обратный захват норэпинефрина количества соединения по изобретению. Соединения по изобретению могут также использоваться в качестве инструментов исследования путем проведения биологических анализов с использованием таких соединений.

При использовании в качестве инструмента исследования, обычно контактируют биологическую систему или образец, содержащий транспортер серотонина и/или транспортер норэпинефрина, с ингибирующим обратный захват серотонина или ингибирующим обратный захват норэпинефрина количеством соединения по изобретению. После воздействия соединения на биологическую систему или образец эффекты ингибирования обратного захвата серотонина и/или обратного захвата норэпинефрина определяют с использованием обычных процедур и оборудования. Воздействие охватывает контактирование клеток или ткани с соединением, введение соединения млекопитающему, например, внутрибрюшинным или внутривенным введением и т.д. Данная стадия определения может включать измерение реакции, т.е. количественный анализ, или может включать наблюдение, т.е. качественный анализ. Измерение реакции включает, например, определение эффектов соединения на биологическую систему или образец с использованием обычных процедур и оборудования, такие как анализы обратного захвата серотонина и норэпинефрина. Результаты анализа могут использоваться для определения уровня активности, а также количества соединения, необходимого для достижения желательного результата, т.е. количество, ингибирующее обратный захват серотонина и обратный захват норэпинефрина.

Кроме того, соединения по изобретению могут применяться в качестве инструментов исследования для оценки других химических соединений и, таким образом, могут также использоваться при скрининговых анализах для выявления, например, новых соединений, имеющих и активность ингибирования обратного захвата серотонина, и активность ингибирования обратного захвата норэпинефрина. Таким образом, соединение по изобретению используется в качестве стандарта при анализе для обеспечения возможности сравнения полученных результатов с тестируемым соединением и с соединениями по изобретению для идентификации тех тестируемых соединений, которые имеют примерно равную или превышающую активность ингибирования обратного захвата, если она имеет место. Например, данные обратного захвата для тестируемого соединения или группы тестируемых соединений сравниваются с данными обратного захвата для соединения по изобретению для идентификации тех испытуемых соединений, которые имеют желательные свойства, например испытуемые соединения, имеющие активность ингибирования обратного захвата, примерно равную или превышающую активность соединения по изобретению, если она имеет место. Данный аспект изобретения включает в качестве отдельного варианта осуществления и получение данных сравнения (с использованием соответствующих анализов), и анализ данных тестирования для идентификации представляющих интерес тестируемых соединений. Таким образом, тестируемое соединение может оцениваться в биологическом анализе способом, включающим стадии: (a) проведение биологического анализа тестируемого соединения с получением первой величины анализа; (b) проведение биологического анализа с соединением по изобретению с получением второй величины анализа; где стадия (a) проводится до, после или одновременно со стадией (b); и (c) сравнение первой величины анализа со стадии (a) со второй величиной анализа со стадии (b). Иллюстративные биологические анализы включают анализы обратного захвата серотонина и норэпинефрина.

Фармацевтические композиции и препаративные формы

Соединения по изобретению обычно вводятся пациенту в форме фармацевтической композиции или препаративной формы. Такие фармацевтические композиции могут вводиться пациенту любым приемлемым путем введения, включая без ограничения пероральный, ректальный, вагинальный, интраназальный, ингаляционный, местный (включая трансдермальный) и парентеральный способы введения. Кроме того, соединение по изобретению может вводиться, например, перорально, множественными дозами в день (например, дважды, три раза или четыре раза в день), одной дневной дозой, двумя дозами в день, одной недельной дозой и т.д. Следует понимать, что в обсуждаемых в настоящем описании фармацевтических композициях может применяться любая форма соединений по изобретению (т.е. свободное основание, фармацевтически приемлемая соль, сольват и т.д.), которая пригодна для конкретного пути введения.

Соответственно, в одном варианте осуществления, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и соединение по изобретению. При желании, композиции могут содержать другие терапевтические и/или составляющие средства. При обсуждении композиций «соединение по изобретению» может также именоваться в настоящем описании «активным средством» для того, чтобы отличить его от других компонентов препаративной формы, таких как носитель. Таким образом, понятно, что термин «активное средство» включает соединения формулы I, а также фармацевтически приемлемые соли и сольваты этого соединения.

Фармацевтические композиции по изобретению обычно содержат терапевтически эффективное количество соединения по изобретению. Однако специалистам в данной области будет понятно, что фармацевтическая композиция может содержать больше чем фармацевтически эффективное количество, т.е. основные объемы композиций, или менее чем эффективное количество, т.е. отдельные единичные дозы, предназначенные для множественного введения, для достижения терапевтически эффективного количества. Обычно композиция будет содержать примерно от 0,01 до 95% мас. активного средства, включая примерно от 0,01 до 30% мас., например, примерно от 0,01 до 10% мас., причем действительное количество зависит от самой препаративной формы, пути введения, частоты введения и т.д. В одном варианте осуществления, композиция, подходящая для пероральной дозированной формы, например, может содержать примерно 5-70% мас. или примерно от 10 до 60% мас. активного средства.

В фармацевтических композициях по изобретению может использоваться любой обычный носитель или эксципиент. Выбор конкретного носителя или эксципиента или комбинаций носителей или эксципиентов будет зависеть от используемого пути введения для лечения конкретного пациента или типа медицинского состояния или заболевания. В этом отношении, получение подходящей композиции для конкретного пути введения вполне укладывается в компетенцию специалистов в фармацевтических областях. Кроме того, носители или эксципиенты, используемые в таких композициях, имеются в продаже. В качестве еще одной иллюстрации, обычные методики составления композиций описаны в руководствах Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20^th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (2000); и H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7^th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (1999).

Репрезентативные примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают без ограничения следующие: сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза, такая как микрокристаллическая целлюлоза и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; эксципиенты, такие как масло какао и воски суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, масло хлопковых семян, масло саффлора, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и масло соевых бобов; гликоли, такие как пропиленгликоль; полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; забуферивающие агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт; растворы с фосфатным буфером; сжатые пропелленты, такие как хлорфторуглероды и гидрофторуглероды; и другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических композициях.

Фармацевтические композиции обычно получаются тщательным смешиванием активного средства с фармацевтически приемлемым носителем и одним или более возможными ингредиентами. Полученная однородно смешанная смесь может затем формироваться или загружаться в таблетки, капсулы, пилюли, баллончик, картриджи, дозаторы и тому подобные с использованием обычных процедур и оборудования.

В одном варианте осуществления, фармацевтические композиции подходят для перорального введения. Одна иллюстративная схема введения представляла бы собой пероральную дозированную форму, вводимую один или два раза в день. Подходящие композиции для перорального введения могут быть представлены в форме капсул, таблеток, пилюль, лепешек, облаток, драже, порошков, гранул, растворов или суспензий в водной или неводной жидкости; эмульсий масла в воде или воды в масле; эликсиров или сиропов и тому подобных; причем каждая содержит заданное количество активного средства.

Когда композиция предназначена для перорального введения в твердой дозированной форме (т.е. в виде капсул, таблеток, пилюль и тому подобных), то она будет обычно содержать активное средство и один или более фармацевтически приемлемых носителей, таких как цитрат натрия или дикальцийфосфат. Твердые дозированные формы могут также содержать наполнители или агенты, увеличивающие объем, такие как крахмалы, микрокристаллическую целлюлозу, лактозу, сахарозу, глюкозу, маннит и/или салициловую кислоту; связывающие агенты, такие как карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или акация; увлажнители, такие как глицерин; дезинтегрирующие агенты, такие как агар-агар, карбонат кальция, крахмал картофеля или тапиоки, альгиновая кислота, определенные силикаты и/или карбонат натрия; агенты, задерживающие растворение, такие как парафин; ускорители всасывания, такие как соединения четвертичного аммония; смачивающие агенты, такие как цетиловый спирт и/или глицеринмоностеарат; абсорбенты, такие как каолин и/или бентонитовая глина; лубриканты, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, луарилсульфат натрия и/или их смеси; красящие агенты и забуферивающие агенты.

Агенты, регулирующие высвобождение, смачивающие агенты, покрывающие агенты, подслащивающие агенты, отдушки и ароматизирующие агенты, консерванты и антиоксиданты могут также присутствовать в фармацевтических композициях. Иллюстративные покрывающие агенты для таблеток, капсул, пилюль и тому подобных включают те, которые используются для энтеросолюбильных покрытий, такие как ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетат фталат, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, сополимеры метакриловой кислоты-сложного эфира метакриловой кислоты, ацетаттримеллитат целлюлозы, карбоксиметилэтилцеллюлоза, ацетатсукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы и тому подобные. Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают растворимые в воде антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, цистеин гидрохлорид, бисульфат натрия, метабисульфат натрия, сульфит натрия и тому подобные; растворимые в масле антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол, бутилированный гидрокситолуол, лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и тому подобные; и агенты, образующие хелаты металлов, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота, сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и тому подобные.

Композиции могут также составляться для обеспечения медленного или контролируемого высвобождения активного средства с использованием, в качестве примера, гидроксипропилметилцеллюлозы в варьирующихся пропорциях или другие полимерные матрицы, липосомы и/или микросферы. Кроме того, фармацевтические композиции по изобретению могут содержать контрастирующие агенты и могут составляться так, чтобы они высвобождали только или предпочтительно активное средство в определенной части желудочно-кишечного тракта, возможно, отсроченным образом. Примеры заливающих композиций, которые могут использоваться, включают полимерные вещества и воски. При целесообразности, активное средство может также быть представлено в микроинкапсулированной форме с одним или более из описанных выше эксципиентов.

Подходящие жидкие дозированные формы для перорального введения включают, в качестве примера, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Жидкие дозированные формы обычно содержат активное средство и инертный разбавитель, такой как, например, воду или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (например, масло хлопковых семян, арахиса, кукурузы, семян, оливок, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и их смеси. Суспензии могут содержать суспендирующие агенты, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбита и сорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксида алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант и их смеси.

При предназначенности для перорального введения, фармацевтические композиции по изобретению могут быть упакованы в виде единичной дозированной формы. Термин «единичная дозированная форма» относится к физически дискретной единице, подходящей для введения пациенту, т.е. каждой единице, содержащей заданное количество активного средства, рассчитанное с получением желательного терапевтического эффекта, или отдельно, или в комбинации с одной или более дополнительных единиц. Например, такие единичные дозированные формы могут представлять собой капсулы, таблетки, пилюли и тому подобные.

В другом варианте осуществления, соединения по изобретению подходят для ингаляционного введения и обычно представлены в форме аэрозоля или порошка. Такие композиции в целом вводятся с использованием хорошо известных устройств доставки, таких как распылитель, сухой порошок или ингалятор отмеренной дозы. Распылительные устройства создают высокоскоростной воздушный поток, который вызывает распыление композиции в виде тумана, который переносится в дыхательные пути пациента. Иллюстративная помещенная в распылитель препаративная форма содержит активное средство, растворенное в носителе, с образованием раствора или микронизировано и объединено с носителем с образованием суспензии микронизированных частиц вдыхаемого размера. Ингаляторы сухого порошка вводят активное средство в виде свободно текущего порошка, который диспергируется в воздушном потоке дыхательных путей пациента во время вдыхания. Иллюстративная препартивная форма в виде сухого порошка содержит активное средство, в сухом виде смешанное с эксципиентом, таким как лактоза, крахмал, маннит, декстроза, полимолочная кислота, полилактид-ко-гликозид и их комбинации. Ингаляторы отмеренной дозы подают отмеренное количество активного средства с использованием сжатого газа-пропеллента. Иллюстративная препаративная форма в отмеренной дозе содержит раствор или суспензию активного средства в сжиженном пропелленте, таком как хлорфторуглерод или гидрофторалкан. Возможные компоненты таких препаративных форм включают совместные растворители, такие как этанол или пентан, и поверхностно-активные вещества, такие как сорбитан триолеат, олеиновая кислота, лецитин и глицерин. Такие композиции обычно получают добавлением охлажденного или сжатого гидрофторалкана в подходящий контейнер, содержащий активное средство, этанол (если он присутствует) и поверхностно-активное вещество (если оно присутствует). С получением суспензии активное средство микронизируется и затем комбинируется с пропеллентом. Альтернативно, препаративная форма в виде суспензии может быть получена распылительной сушкой покрытия из поверхностно-активного вещества на микронизированные частицы активного средства. Затем препаративная форма загружается в аэрозольный баллончик, который образует часть ингалятора.

Соединения по изобретению могут также вводиться парентерально (например, подкожной, внутривенной, внутримышечной или внутрибрюшинной инъекцией). Для такого введения, активное средство предоставляется в стерильном растворе, суспензии или эмульсии. Иллюстративные растворители с получением таких препаративных форм включают воду, солевой раствор, спирты с низкой молекулярной массой, такие как пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, масла, желатин, сложные эфиры жирных кислот, такие как этилолеат, и тому подобные. Типичная препаративная форма для парентерального введения представляет собой стерильный водный раствор активного средства с pH 4-7. Препаративные формы для парентерального введения могут также содержать один или более солюбилизаторов, стабилизаторов, консервантов, смачивающих агентов, эмульгаторов и диспергирующих агентов. Стерильность данных препаративных форм может обеспечиваться использованием стерильной инъецируемой среды, стерилизующего агента, фильтрации, облучения или нагревания.

Соединения по изобретению могут также вводиться трансдермально с использованием известных систем и эксципиентов для трансдермальной доставки. Например, соединение может смешиваться с усилителями проницаемости, такими как пропиленгликоль, полиэтиленгликоль монолаурат, азациклоалкан-2-оны и тому подобными, и включаться в накладку или аналогичную систему доставки. При желании, в таких трансдермальных композициях могут использоваться дополнительные эксципиенты, включая желатинирующие агенты, эмульгаторы и буферы.

При желании, соединения по изобретению могут вводиться в комбинации с одним или более другими терапевтическими средствами. Так, в одном варианте осуществления, в композициях по изобретению возможно содержание других лекарственных средств, которые совместно вводятся с соединением по изобретению. Например, композиция может, кроме того, содержать одно или более лекарственных средств (также именуемых «вторичным средством (средствами)»), выбранных из группы средств против болезни Альцгеймера, противосудорожных средств (противоэпилептических средств), антидепрессантов, средство против болезни Паркинсона, двойных ингибиторов обратного захвата серотонина-норэпинефрина (SNRI), нестероидных противовоспалительных средств (NSAID), ингибиторов обратного захвата норэпинефрина, опиоидных агонистов (опиоидных анальгетиков), селективных ингибиторов обратного захвата серотонина, блокаторов кальциевых каналов, сипатолитиков и их комбинаций. Многочисленные примеры таких терапевтических средств хорошо известны в данной области, и их примеры описаны в настоящей заявке. Путем комбинирования соединения по изобретению с вторичным средством может быть достигнуто тройное лечение, т.е. активность ингибирования обратного захвата серотонина, активность ингибирования обратного захвата норэпинефрина и активность, связанная с вторичным средством (например, антидепрессантная активность), с использованием лишь двух активных компонентов. Поскольку фармацевтические композиции, содержащие два активных компонента, обычно легче составлять, чем композиции, содержащие три активных компонента, то такие двухкомпонентные композиции обеспечивают значительное преимущество перед композициями, содержащими три активных компонента. Соответственно, в еще одном аспекте изобретения, фармацевтическая композиция содержит соединение по изобретению, второе активное средство и фармацевтически приемлемый носитель. В композицию могут быть также включены третье, четвертое и т.д. активные средства. При комбинированном лечении количество соединения по изобретению, которое вводится, а также количество вторичных средств может быть меньше, чем количество, обычно вводимое при монотерапии.

Соединение по изобретению может быть или физически смешано со вторым активным средством с образованием композиции, содержащей оба средства, или каждое средство может присутствовать в отдельных и различных композициях, которые вводятся пациенту одновременно или последовательно. Например, соединение по изобретению может комбинироваться со вторым активным средством с использованием обычных процедур и оборудования с образованием комбинации активных средств, содержащей соединение по изобретению и второе активное средство. Кроме того, активные средства могут комбинироваться с фармацевтически приемлемым носителем с образованием фармацевтической композиции, содержащей соединение по изобретению, второе активное средство и фармацевтически приемлемый носитель. В данном варианте осуществления, компоненты композиции обычно смешиваются для создания физической смеси. Затем физическая смесь вводится в терапевтически эффективном количестве с использованием любого из путей, описанных в настоящей заявке.

Альтернативно, активные средства могут оставаться разделенными и разобщенными перед введением пациенту. В данном варианте осуществления, средства физически не смешиваются вместе перед введением, но вводятся одновременно или в различное время в виде отдельных композиций. Такие композиции могут быть упакованы отдельно или могут быть упакованы вместе в наборе. При введении в различное время вторичное средство обычно вводится менее чем через 24 часа после введения соединения по изобретению в диапазоне приблизительно от одновременного введения с введением соединения по изобертению до примерно 24 часов после его введения. Это также именуется последовательным введением. Таким образом, соединение по изобретению может перорально вводиться одновременно или последовательно с другим активным средством с использованием двух таблеток, по одной таблетке для каждого активного средства, где последовательное может означать введение непосредственно после введения соединения по изобретению или позднее, через некоторое заданное время (например, через час или через три часа). Альтернативно, комбинация может вводиться различными путями введения, т.е. одно перорально, а другое - путем ингаляции.

В одном варианте осуществления, набор включает первую дозированную форму, содержащую соединение по изобретению, и, по меньшей мере, одну дополнительную дозированную форму, содержащую один или более вторичных средств, описанных в настоящей заявке, в количествах, достаточных для осуществления способов по изобретению. Первая дозированная форма и вторая (или третья и т.д.) дозированная форма вместе содержат терапевтически эффективное количество активных средств для лечения или профилактики заболевания или медицинского состояния у пациента.

Вторичное средство (средства) при включении присутствуют в терапевтически эффективном количестве, т.е. обычно вводятся в количестве, которое вызывает терапевтически благоприятный эффект при совместном введении с соединением по изобретению. Вторичное средство может быть в форме фармацевтически приемлемой соли, сольвата, оптически чистого стереоизомера и т.д. Таким образом, предполагается, что вторичные средства, перечисленные ниже, включают все такие формы и имеются в продаже или могут быть получены с использованием обычных процедур и реагентов.

Репрезентативные средства против болезни Альцгеймера включают, без ограничения: донепезил, галантамин, мемантин, ривастигмин, селегилин, такрин и их комбинации.

Репрезентативные противосудорожные средства (противоэпилептические средства) включают, без ограничения: ацетазоламид, албутоин, 4-мино-3-гидроксимасляную кислоту, бекламид, карбамазепин, цинромид, клометиазол, клоназепам, диазепам, диметадион, этеробарб, этадион, этосуксимид, этотоин, фелбамат, фосфенитоин, габапентин, лакозамид, ламотригин, лоразепам, бромид магния, сульфат магния, мефенитоин, мефобарбитал, метсуксимид, мидазолам, нитразепам, оксазепам, окскарбазепин, параметадион, фенацемид, фенетурид, фенобарбитал, фенсуксимид, фенитоин, бромид калия, прегабалин, примидон, прогабид, бромид натрия, вальпроат натрия, султиам, тиагабин, топирамат, триметадион, вальпроевую кислоту, вальпромид, вигабатрин, зонисамид и их комбинации. В конкретном варианте осуществления, противосудорожное средство выбрано из карбамазепина, габапентина, прегабалина и их комбинаций.

Репрезентативные антидепрессанты включают, без ограничения: адиназолам, амитриптилин, кломипрамин, дезипрамин, дотиепин (например, дотиепин гидрохлорид), доксепин, имипрамин, лофепрамин, миртазапин, нортриптилин, протриптилин, тримипрамин, венлафаксин, зимелидин и их комбинации.

Репрезентативные средства против болезни Паркинсона включают, без ограничения: амантадин, апоморфин, бензтропин, бромкриптин, карбидопа, дифенгидрамин, энтакапон, леводопа, перголид, прамипексол, ропинирол, селегилин, толкапон, тригексифенидил и их комбинации.

Репрезентативные двойные ингибиторы обратного захвата серотонина-норэпинефрина (SNRI) включают, без ограничения: бицифадин, десвенлафаксин, дулоксетин, милнаципран, нефазодон, венлафаксин и их комбинации.

Репрезентативные нестероидные противовоспалительные средства (NSAID) включают, без ограничения: ацеметацин, ацетаминофен, ацетилсалициловую кислоту, алклофенак, алминопрофен, амфенак, амиприлозу, амоксиприн, аниролак, апазон, азапропазон, бенорилат, беноксапрофен, безпиперилон, броперамол, буклоксовую кислоту, карпрофен, клиданак, диклофенак, дифлунизал, дифталон, эноликам, этодолак, эторикоксиб, фенбуфен, фенклофенак, фенклозовую кислоту, фенопрофен, фентиазак, фепразон, флуфенамовую кислоту, флуфенизал, флупрофен, флурбипрофен, фурофенак, ибуфенак, ибупрофен, индометацин, индопрофен, изоксепак, изоксикам, кетопрофен, кеторолак, лофемизол, лорноксикам, меклофенамат, меклофенамовую кислоту, мефенамовую кислоту, мелоксикам, месаламин, миропрофен, мофебутазон, набуметон, напроксен, нифлумовую кислоту, нимезулид, нитрофлурбипрофен, олсалазин, оксапрозин, окспинак, оксифенбутазон, фенилбутазон, пироксикам, пирпрофен, пранопрофен, салсалат, судоксикам, сульфасалазин, сулиндак, супрофен, теноксикам, тиопинак, тиапрофеновую кислоту, тиоксапрофен, толфенамовую кислоту, толметин, трифлумидат, зидометацин, зомепирак и их комбинации. В конкретном варианте осуществления, NSAID выбрано из этодолака, флубипрофена, ибупрофена, индометацина, кетопрофена, кеторолака, мелоксикама, напроксена, оксапрозина, пироксикама и их комбинаций. В конкретном варианте, NSAID выбрано из ибупрофена, индометацина, набуметона, напроксена (например, напроксена натрия) и их комбинаций.

Репрезентативные мышечные релаксанты включают, без ограничения: каризопродол, хлорзоксазон, циклобензаприн, дифлунизал, метаксалон, метокарбамол и их комбинации.

Репрезентативные ингибиторы обратного захвата норэпинефрина включают, без ограничения: атомоксетин, бупроприон и метаболит бупроприона гидроксибупроприон, мапротилин, ребоксетин (например, (S,S)-ребоксетин), вилоксазин и их комбинации. В конкретном варианте осуществления, ингибитор обратного захвата норэпинефрина выбран из атомоксетина, ребоксетина и их комбинаций.

Репрезентативные опиоидные агонисты (опиоидные анальгетики) включают, без ограничения: бупренорфин, буторфанол, кодеин, дигидрокодеин, фентанил, гидрокодон, гидроморфон, леваллорфан, леворфанол, меперидин, метадон, морфин, налбуфин, налмефен, налорфин, налоксон, налтрексон, налорфин, оксикодон, оксиморфон, пентазоцин, пропоксифен, трамадол и их комбинации. В определенных вариантах осуществления, опиоидный агонист выбран из кодеина, дигидрокодеина, гидрокодона, гидроморфона, морфина, оксикодона, оксиморфона, трамадола и их комбинаций.

Репрезентативные селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (SSRI) включают, без ограничения: циталопрам и метаболит циталопрама десметилциталопрам, дапоксетин, эсциталопрам (например, эсциталопрам оксалат), флуоксетин и метаболит десметил флуоксетина норфлуоксетим, флувоксамин (например, флувокамин малеат), пароксетин, серталин и метаболит серталина деметилсерталин и их комбинации. В определенных вариантах осуществления, SSRI выбран из циталопрама, пароксетина, серталина и их комбинаций.

Репрезентативные блокаторы натриевых каналов включают, без ограничения: карбамазепин, фосфенитоин, ламотригнин, лидокаин, мексилетин, оксакарбазепин, фенитоин и их комбинации.

Репрезентативные симпатолитики включают, без ограничения: атенолол, клонидин, доксазосин, гуанетидин, гуанфацин, модафинил, фентоламин, празосин, резерпин, толазолин (например, толазолин гидрохлорид), тамсулозин и их комбинации.

Следующие препаративные формы иллюстрируют репрезентативные фармацевтические композиции по настоящему изобретению.

Иллюстративные твердые желатиновые капсулы для перорального введения

Соединение по изобретению (50 г), высушенную распылением лактозу (440 г) и стеарат магния (10 г) тщательно смешивают. Заем полученную композицию загружают в твердые желатиновые капсулы (500 мг композиции на капсулу).

Альтернативно, соединение по изобретению (20 мг) тщательно смешивают с крахмалом (89 мг), микрокристаллической целлюлозой (89 мг) и стеаратом магния (2 мг). Смесь затем пропускают через сито 45 меш по стандарту США и загружают в твердую желатиновую капсулу (200 мг композиции на капсулу).

Иллюстративный препарат в виде желатиновой капсулы для перорального введения

Соединение по изобретению (100 мг) тщательно смешивают с моноолеатом полиоксиэтиленсорбитана (50 мг), крахмальным порошком (250 мг). Затем смесь загружают в желатиновую капсулу (400 мг композиции на капсулу).

Альтернативно, соединение по изобретению (40 мг) тщательно смешивают с микрокристаллической целлюлозой (Avicel PH 103; 259,2 мг) и стеаратом магния (0,8 г). Затем смесь загружают в желатиновую капсулу (размер #1, Белая, Матовая) (300 мг композиции на капсулу).

Иллюстративный препарат в виде таблетки для перорального введения

Соединение по изобретению (10 мг), крахмал (45 мг) и микрокристаллическую целлюлозу (35 мг) пропускают через сито 20 меш по стандарту США и тщательно смешивают. Полученные таким образом гранулы сушат при 50-60°C и пропускают через сито 16 меш по стандарту США. Раствор поливинилпирролидона (4 мг в виде 10% раствора в стерильной воде) смешивают с карбоксиметилкрахмалом натрия (4,5 мг), стеаратом магния (0,5 мг) и тальком (1 мг) и данную смесь затем пропускают через сито 16 меш по стандарту США. Затем к гранулам добавляют карбоксиметилкрахмал натрия, стеарат магния и тальк. После смешивания смесь прессуют в таблетировочной машине с получением таблетки массой 100 мг.

Альтернативно, соединение по изобретению (250 мг) тщательно смешивают с микрокристаллической целлюлозой (400 мг), диоксидом кремния в парообразном состоянии (10 мг) и стеариновой кислотой (5 мг). Смесь затем прессуют для формирования таблеток (665 мг композиции на таблетку).

Альтернативно, соединение по изобретению (400 мг) тщательно смешивают с кукурузным крахмалом (50 мг), кроскармеллозой натрия (25 мг), лактозой (120 мг) и стеаратом магния (5 мг). Затем смесь прессуют для формирования таблетки с одной насечкой (600 мг композиции на таблетку).

Иллюстративная суспензионная препаративная форма для перорального введения

Следующие ингредиенты смешивали с образованием суспензии, содержащей 100 г активного средства на 10 мл суспензии:

Ингредиенты Количество Соединение по изобретению 1,0 г Фумаровая кислота 0,5 г Хлорид натрия 2,0 г Метилпарабен 0,15 г Пропилпарабен 0,05 г Гранулированный сахар 25,5 г Сорбит (70% раствор) 12,85 г Veegum^® K (силикат магния алюминия) 1,0 г Отдушка 0,035 мл Красящие агенты 0,5 мг Дистиллированная вода Сколько требуется до 100 мл

Иллюстративная инъецируемая препаративная форма для введения путем инъекции

Соединение по изобретению (0,2 г) смешивают с буферным 0,4 M раствором ацетата натрия (2,0 мл). pH полученного раствора по необходимости доводят до pH 4 с использованием 0,5N водной хлористоводородной кислоты или 0,5N водного гидроксида натрия и затем добавляют достаточное количество воды для инъекций с получением общего объема 20 мл. Затем смесь фильтруют через стерильный фильтр (0,22 микрон) с получением стерильного раствора, подходящего для введения путем инъекции.

Иллюстративные композиции для введения ингаляцией

Соединение по изобретению (0,2 мг) микронизируют и затем смешивают с лактозой (25 мг). Затем данную смесь загружают в желатиновый ингаляционный картридж. Содержимое картриджа вводят, например, с использованием ингалятора сухого порошка.

Альтернативно, микронизированное соединение по изобретению (10 г) диспергируют в растворе, полученном растворением лецитина (0,2 г) в деминерализованной воде (200 мл). Полученную суспензию сушат распылением и затем микронизируют с образованием микронизированной композиции, содержащей частицы, имеющие средний диаметр менее чем примерно 1,5 мкм. Затем микронизированную композицию загружают в картриджи ингалятора отмеренной дозы, содержащие сжатый 1,1,1,2-тетрафторэтан в количестве, достаточном для обеспечения от примерно 10 мкг до примерно 500 мкг соединения по изобретению на дозу при введении ингалятором.

Альтернативно, соединение по изобретению (25 мг) растворяют в забуференном цитратом (pH 5) изотоническом солевом растворе (125 мл). Смесь перемешивают и обрабатывают ультразвуком до растворения соединения. pH раствора проверяют и при необходимости доводят до pH 5 медленным добавлением водного 1N гидроксида натрия. Раствор вводят, используя распылительное устройство, которое обеспечивает подачу от примерно 10 мкг до примерно 500 мкг соединения по изобретению на дозу.

ПРИМЕРЫ

Следующие способы получения и примеры представлены для иллюстрации определенных вариантов осуществления изобретения. Однако пока нет иных указаний, данные определенные варианты осуществления ни в коей мере не предназначены для ограничения объема изобретения.

Пока нет иных указаний, следующие аббревиатуры имеют следующие значения, и любые другие аббревиатуры, используемые в настоящем описании, и не определенные имеют их стандартное значение:

AcOH уксусная кислота BH₃•Me₂S комплекс борана-диметилсульфида BSA бычий сывороточный альбумин DCM дихлорметан (т.е. метиленхлорид) DIAD диизопропилазодикарбоксилат DMEM модифицированная по способу Дульбекко среда Игла DMF N,N-диметилформамид DMSO диметилсульфоксид EDTA этилендиаминтетрауксусная кислота Et этил EtOAc этилацетат EtOH этанол FBS фетальная телячья сыворотка hDAT человеческий транспортер допамина HEPES 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота hNET человеческий транспортер норэпинефрина hSERT человеческий транспортер серотонина LiHMDS гексаметил дисилазид лития Me метил MeCN ацетонитрил MeOH метанол PBS солевой раствор с фосфатным буфром PPh₃ трифенилфосфин TEMPO 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилокси, свободный радикал TFA трифторуксусная кислота THF тетрагидрофуран

Любые другие аббревиатуры, используемые в настоящем описании, но не определенные, имеют их стандартное, общепринятое значение. Пока нет других примечаний, все материалы, такие как реагенты, исходные материалы и растворители, закупали у торговых поставщиков (таких как Sigma-Aldrich, Fluka Riedel-de Haen и тому подобных) и использовали без дополнительной очистки.

Во всех соединениях, описанных в примерах, два хиральных центра идентифицированы символами * и **. При описании стереохимии сначала обозначается атом углерода, указанный символом *. Таким образом, обозначение «SR» представляет соединение, имеющее (S) конфигурацию у атома углерода, указанного символом *, а имеющие (R) конфигурацию - у атома углерода **. То же справедливо для рацемических смесей. Например, обозначение «RS/SR» представляет рацемическую смесь (R,S) соединений и (S,R) соединений, т.е. смесь соединений, имеющих (R) конфигурацию у атома углерода * и (S) конфигурацию у атома углерода **, и соединения, имеющие (S) конфигурацию у атома углерода * и (R) конфигурацию у атома углерода **.

Следует отметить, что хиральный центр * известен и представлен в названии соединения и/или в таблице. Однако хиральный центр **, определенный в названии соединения и/или в таблице, однозначно неизвестен и основан на первом пике элюирования ВЭЖХ с обращенной фазой из смеси диастереомерных промежуточных соединений (защищенных спиртов).

Получение 1

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидроксипропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

К раствору сложного трет-бутилового эфира (S)-3-гидроксиметилпирролидин-1-карбоновой кислоты (4,0 г, 19,9 ммоль, 1,0 экв.) в DCM добавляли TEMPO (62 мг, 0,4 ммоль, 0,02 экв.) и бромид калия (120 мг, 1,0 ммоль, 0,05 экв.). Полученную смесь охлаждали над льдом (и небольшим количеством соли, -4°C). По каплям добавляли смесь 1:1 0,7M гипохлорита натрия в воде и насыщенного NaHCO₃ (всего 56 мл). Полученной смеси давали возможность отстояться в ледяной бане до разделения слоев (~5 минут). Слои разделяли и экстрагировали DCM (3×30 мл). Органический слой промывали водой (30 мл) и насыщенным водным NaCl (30 мл), затем сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением сложного трет-бутилового эфира (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (3,0 г), который использовали без дополнительной очистки.

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (1 г, 5 ммоль) и THF (10 мл, 100 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. По каплям добавляли 1,0 M этилмагнийбромида в THF (7,5 мл, 7,5 ммоль) в течение 10 минут. Смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем реакцию гасили добавлением по каплям насыщенного водного NH₄Cl (30 мл). Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (1×30 мл) и насыщенным водным NaCl (1×30 мл), затем сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением сложного трет-бутилового эфира (S)-3-(1-гидроксипропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты.

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-(1-гидроксипропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,5 г, 6,5 ммоль) очищали препаративной ВЭЖХ. Остаток растворяли в 50% AcOH/H₂O и диастереомеры разделяли с использованием градиента 10-50% AcOH/H₂O (0,05% TFA) в течение 80 минут на колонке 2" со скоростью 40 мл/мин. Собранные фракции лиофилизировали с получением каждого диастереомера в виде масла (565 мг, SS, 1-й пик элюирования; 565 мг, SR, 2-й пик элюирования). Каждый диастереомер растворяли в DCM (4 мл) и добавляли HCO₃ смолу (1 г @ 1,95 ммоль/г) для извлечения остаточной TFA. Смесь перемешивали в течение 1 часа. Продукт отфильтровывали и растворитель удаляли с получением указанного в заголовке соединения.

ПРИМЕР 1

(S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

60% NaH в минеральном масле (60:40, NaH:минеральное масло, 10 мг, 260 мкмоль) медленно добавляли к смеси сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((S)-1-гидроксипропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (50 мг, 0,2 ммоль, 1 экв.) в DMF (680 мкл, 8,7 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. Добавляли 2,4-дихлор-1-фторбензол (76 мкл, 3 экв.) и смесь нагревали при 90°C в течение 3 часов. Реакцию гасили MeOH (1 мл). DMF и MeOH удаляли под пониженным давлением, оставляя защищенное BOC промежуточное соединение, сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-[(S)-1-(2,4-дихлорфенокси)пропил]пирролидин-1-карбоновой кислоты. Снятие защиты проводили с использованием 1,25 M HCl в EtOH (1,7 мл, 2,2 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (41,5 мг). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₃H₁₇Cl₂NO, 274,07; найдено 274,0.

Моногидрохлорид

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-[(S)-1-(2,4-дихлорфенокси)пропил]пирролидин-1-карбоновой кислоты (22,0 г, 58,8 ммоль) растворяли в EtOAc (50 мл, 500 ммоль) и охлаждали до 0°C. Раствор HCl получали медленным добавлением ацетилхлорида (40,0 мл, 562 ммоль) в EtOH (100 мл, 2000 ммоль) при 0°C, затем добавляли к раствору EtOAc при перемешивании. Полученную смесь перемешивали при 0°C до комнатной температуры в течение ночи, затем концентрировали выпариванием на роторном испарителе. Добавляли EtOAc (200 мл) и раствор снова концентрировали выпариванием на роторном испарителе. Добавляли дополнительный EtOAc (200 мл) и раствор концентрировали выпариванием на роторном испарителе. Продукт сушили в глубоком вакууме с получением указанной в заголовке соли в виде густого масла/полутвердого вещества (16,7 г, чистота >99%).

ПРИМЕР 2

Соблюдая процедуры, описанные в примерах выше, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, получали соединения с 2-1 до 2-75, имеющие формулу IIa в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлорфенокси)пропил]пирролидин

2. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)пропил]пирролидин

3. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)пропил]пирролидин

4. (S)-3-[(R)-l -(4-Хлорфенокси)пропил]пирролидин

5. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)пропил]пирролидин

6. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)пропил]пирролидин

7. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

8. (S)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

9. (S)-3-[(S)-1-(3-Фторфенокси)пропил]пирролидин

10. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)пропил]пирролидин

11. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)пропил]пирролидин

12. (S)-3-[(S)-1-(4-Фторфенокси)пропил]пирролидин

13. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)пропил]пирролидин

14. (S)-3-[(R)-1-(4- Хлор-3-метилфенокси)пропил]пирролидин

15.(S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3,5-диметилфенокси)пропил]пирролидин

16. (S)-3-[(S)-1-(3-Трифторметилфенокси)пропил]пирролидин

17. (S)-3-[(S)-1-(4-Трифторметилфенокси)пропил]пирролидин

18. (S)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

19. (R)-3-[(R)-1-(3,5-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

20. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-5-метоксифенокси)пропил]пирролидин

21. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-4-фторфенокси)пропил]пирролидин

22. (S)-3-[(S)-1-(3,5-Дифтор-4-метоксифенокси)пропил]-пирролидин

23. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлорфенокси)пропил]пирролидин

24. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлорфенокси)пропил]пирролидин

25. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-6-фторфенокси)пропил]пирролидин

26. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-6-фторфенокси)пропил]пирролидин

27. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-6-метилфенокси)пропил]пирролидин

28. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

29. (R)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

30. (R)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

31. (S)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

32. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-4-фторфенокси)пропил]пирролидин

33. (R)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

34. (S)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)пропил]пирролидин

35. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-фторфенокси)пропил]пирролидин

36. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-3,5-дифторфенокси)пропил]пирролидин

37. (S)-3-[(S)-1-(2,3,6-Трихлорфенокси)пропил]пирролидин

38. (S)-3-[(R)-1-(2,3,6-Трихлорфенокси)пропил]пирролидин

39. (S)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлор-6-фторфенокси)пропил]пирролидин

40. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3,6-дифторфенокси)пропил]пирролидин

41. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-3,6-дифторфенокси)пропил]пирролидин

42. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-3-фторфенокси)пропил]пирролидин

43. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-метилфенокси)пропил]-пирролидин

44. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)пропил]-пирролидин

45. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)пропил]-пирролидин

46. (S)-3-[(S)-1-(2-Фторфенокси)пропил]пирролидин

47. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-фторфенокси)пропил]пирролидин

48. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)пропил]пирролидин

49. (S)-3-[(S)-1-(2,6-Дифторфенокси)пропил]пирролидин

50. (S)-3-[(S)-1-(2,3,4-Трифторфенокси)пропил]пирролидин

51. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Дифтор-4-метилфенокси)пропил]-пирролидин

52. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2,6-дифторфенокси)пропил]пирролидин

53. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2,6-дифторфенокси)пропил]пирролидин

54. (S)-3-[(R)-1-(6-Хлор-2-фтор-3-метилфенокси)пропил]-пирролидин

55. (S)-3-[(S)-1-(2,4,6-Трифторфенокси)пропил]пирролидин

56. (S)-3-[(S)-1-(2,3,5,6-Тетрафторфенокси)пропил]пирролидин

57. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дифтор-3-метоксифенокси)пропил] пирролидин

58. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)пропил]пирролидин

59. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)пропил]пирролидин

60. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)пропил]пирролидин

61. (R)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)пропил]пирролидин

62. (S)-3-((S)-1-о-Толилоксипропил)пирролидин

63. (S)-3-((R)-1-о-Толилоксипропил)пирролидин

64. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)пропил]пирролидин

65. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)пропил]пирролидин

66. (S)-3-[(S)-1-(2-Этил-4-фторфенокси)пропил]пирролидин

67. (S)-3-[(S)-1-(2-Метоксифенокси)пропил]пирролидин

68. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метоксифенокси)пропил]пирролидин

69. (S)-3-[(S)-1-(4-Фтор-2-метоксифенокси)пропил]пирролидин

70. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-5-фтор-2-метоксифенокси)пропил]-пирролидин

71. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)пропил]-пирролидин

72. (R)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)пропил]-пирролидин

73. (R)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)пропил]-пирролидин

74. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)пропил]-пирролидин

75. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)пропил]пирролидин

Получение 2

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-гидроксибутил)пирролидон-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (2,2 г, 11 ммоль) и THF (20 мл, 300 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли 2,0 M пропилмагнийхлорид в простом эфире (11,0 мл, 22,1 ммоль) в течение 1 часа. Смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем по каплям добавляли насыщенный водный NH₄Cl (20 мл) для гашения реакции. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (1×100 мл) и насыщенным водным NaCl (1×100 мл), затем сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением бледно-желтого масла (2,6 г). Масло очищали препаративной ВЭЖХ двумя разными партиями загрузки 1,3 г в 1:1 AcOH/H₂O (6 мл). Диастереомеры отделяли градиентом (5-70% MeCN/H₂O; 0,05% TFA; в течение 70 мин на колонке 2" BDS). Фракции для пика 1 собирали и лиофилизировали с получением масла. Фракции для пика 2 лиофилизировали, затем повторно очищали. Оба продукта идентифицировали как чистый с использованием ЯМР и ВЭЖХ и идентифицировали по массе LCMS (жидкостной хроматографией, масс-спектрометрией, ЖХМС):

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (810 мг; 1-й пик элюирования). ¹H NMR (400 МГц, CDC1₃) δ 3,60-3,35 (м, 3H); 3,25 (дд, J=17,8, 11,4, 1H); 2,99 (т, J=9,8, 1H); 2,38-2,25 (м, 2H); 2,25-2,13 (м, 1H); 2,04 (тд, J=11,2, 6,3, 1H); 1,80-1,65 (м, 1H); 1,58-1,25 (м, 11H); 0,95 (т, J=6,9, 3H).

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (780 мг; 2-й пик элюирования). ¹H NMR (400 МГц, CDC1₃) δ 3,65-3,43 (м, 3H); 3,26 (дд, J=16,0, 7,6, 1H); 3,13 (т, J=8,9, 1H); 2,38-2,15 (м, 3H); 1,88 (дтд, J=14,1, 6,8, 2,4, 1H); 1,72-1,55 (м, 1H); 1,55-1,34 (м, 11H); 0,95 (т, J=6,7, 3H).

ПРИМЕР 3

(S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (50 мг, 0,2 ммоль) растворяли в DMF (1,0 мл, 13 ммоль). Медленно добавляли NaH (5,9 мг, 246 мкмоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Добавляли 1,2-дихлор-3-фторбензол (67,8 мг, 411 мкмоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 3 часов, затем концентрировали. Добавляли 1,2M HCl в EtOH (1,0 мл, 1,2 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Продукт концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (19 мг, чистота 100%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₄H₁₉Cl₂NO, 288,08; найдено 288,0.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9,89 (уш.с, 1Н), 9,53 (уш.с, 1Н), 7,16-7,04 (м, 2H), 6,81 (дд, J=8,1, 1,5 Гц, 1Н), 4,36 (дд, J=11,3, 5,8 Гц, 1Н), 3,50-3,36 (м, 2H), 3,36-3,22 (м, 1Н), 3,15-3,00 (м, 1Н), 2,77 (пд, J=8,2, 5,2 Гц, 1Н), 2,34-2,06 (м, 2H), 1,77-1,66 (м, 1Н), 1,60 (ддд, J=14,0, 12,0, 7,2 Гц, 1Н), 1,45-1,32 (м, 2H), 0,92 (т, J=7,3 Гц, 3H).

ПРИМЕР 4

Соблюдая процедуры, описанные в примерах выше, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, получали соединения с 4-1 до 4-72, имеющие формулу IIb в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

2. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

3. (R)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

4. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

5. (S)-3-[(S)-1-(4-Фторфенокси)бутил]пирролидин

6. (S)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

7. (S)-3-[(R)-1-(3,5-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

8. (R)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

9. (R)-3-[(R)-1-(3,5-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

10. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)бутил]пирролидин

11. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)бутил]пирролидин

12. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

13. (S)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

14. (R)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

15. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)бутил]пирролидин

16. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)бутил]пирролидин

17. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)бутил]пирролидин

18. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)бутил]пирролидин

19. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

20. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

21. (R)-3-[(S)-1-(2-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

22. (R)-3-[(R)-1-(2-Хлорфенокси)бутил]пирролидин

23. (S)-3-[(R)-(2,3-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

24. (R)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

25. (R)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

26. (S)-3-[(R)-1-(2,3,6-Трихлорфенокси)бутил]пирролидин

27. (S)-3-[(S)-1-(2,3,6-Трихлорфенокси)бутил]пирролидин

28. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

29. (S)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

30. (R)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

31. (R)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

32. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-4-фторфенокси)бутил]пирролидин

33. (S)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

34. (S)-3-[(R)-1-(2,6-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

35. (R)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

36. (R)-3-[(R)-1-(2,6-Дихлорфенокси)бутил]пирролидин

37. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-4-метилфенокси)бутил]пирролидин

38. (R)-3-[(S)-1-(2-Хлор-4-метилфенокси)бутил]пирролидин

39. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-3-фторфенокси)бутил]пирролидин

40. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-фторфенокси)бутил]пирролидин

41. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-метилфенокси)бутил]пирролидин

42. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)бутил]-пирролидин

43. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)бутил]-пирролидин

44. (S)-3-[(R)-1-(2,3-Дифторфенокси)бутил]пирролидин

45. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Дифторфенокси)бутил]пирролидин

46. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-фторфенокси)бутил]пирролидин

47. (R)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-фторфенокси)бутил]пирролидин

48. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-фторфенокси)бутил]пирролидин

49. (S)-3-[(R)-1-(2,3,4-Трифторфенокси)бутил]пирролидин

50. (S)-3-[(S)-1-(2,3,4-Трифторфенокси)бутил]пирролидин

51. (S)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлор-2-фторфенокси)бутил]пирролидин

52. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлор-2-фторфенокси)бутил]пирролидин

53. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)бутил]пирролидин

54. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

55. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

56. (R)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

57. (R)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

58. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

59. (R)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

60. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

61. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)бутил]пирролидин

62. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Диметилфенокси)бутил]пирролидин

63. (R)-3-[(R)-1-(2,3-Диметилфенокси)бутил]пирролидин

64. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

65. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

66. (R)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

67. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

68. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

69. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

70. (R)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

71. (R)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

72. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метоксифенокси)бутил]пирролидин

Получение 3

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидрокси-2-метилпропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (10,0 г, 50,2 ммоль) и THF (100 мл, 1000 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли 2,0 M изопропилмагнийхлорид в THF (30,1 мл, 60,2 ммоль) в течение 10 минут. Смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем по каплям добавляли насыщенный водный NH₄Cl (100 мл) для гашения реакции. THF удаляли в вакууме, и полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×100 мл), и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (1×100 мл), затем сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией в нормальной фазе (300 г SiO₂, 12 г неочищенного, 50-60% простого диэтилового эфира в гексанах) с получением следующих соединений в виде прозрачных масел.

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидрокси-2-метилпропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (3,8 г; 1-й пик элюирования). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 4,60-4,38 (уш.с, 1Н), 3,40-3,22 (м, 2H), 3,28-3,02 (м, 2H), 2,94-2,82 (м, 1Н), 2,28-2,12 (м, 1Н), 1,92-1,82 (м, 1Н), 1,70-1,56 (м, 1Н), 1,52-1,44 (м, 1Н), 1,38 (с, 9H), 0,87 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,83 (д, J=6,8 Гц, 3H).

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (2,8 г; 2-й пик элюирования). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 4,50-4,40, (уш.с, 1Н) 3,42-3,28 (м, 2H), 3,18-3,06 (м, 2H), 3,04-2,92 (м, 1Н), 2,26-2,12 (м, 1Н), 1,78-1,68 (м, 1Н), 1,62-1,46 (м, 2H), 1,38 (с, 9H), 0,88 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,82 (д, J=6,7 Гц, 3H).

Отнесение стереохимии указанного в заголовке соединения проводили анализом Мошера (Dale and Mosher (1969) J. Org. Chem. 34(9):2543-2549) на материале, который элюировался вторым. Используя данный анализ, определили, что материал 2-го пика элюирования представляет собой (S,R):

Протон δ (S,R,S) δ (S,R,R) δ (S,R,S) -
δ (S,R,R) На 5,040 5,029 0,011 Hb 2,486 2,511 -0,025 Hc, He Перекрытие не эквивалентное H's Перекрытие не эквивалентное H's ND Hd, Hd' 0,912 0,876 0,036 He' Перекрытие с Boc Перекрытие с Boc ND Hf 3,209 3,212 -0,003 Hf' 2,988 3,050 -0,062 Hg Перекрытие с OMe Перекрытие с OMe ND Hg' 3,364 3,389 -0,025 ND: не определяемо

Следует отметить, что первые две буквы соответствуют материалу 2-го пика элюирования, а третья буква диастереомера относится к хиральному центру сложного эфира Мошера.

Диастереомер SRS: 1Н, CDCl₃, δ м.д. 7,60-7,51 (м, 2H); 7,43-7,37 (м, 3H); 5,04 (дд, J=8,0, 4,0, 1Н); 3,52 (с, 3H); 3,51-3,45 (м, 1Н); 3,36 (т, J=8,4, 1Н); 3,28-3,12 (м, 1Н); 3,07-2,90 (м, 1Н); 2,59-2,39 (м, 1Н); 1,97-1,80 (м, 2H); 1,59-1,45 (м, 1Н); 1,43 (с, 9H); 0,93 (д, J=6,8, 3H); 0,90 (д, J=6,8, 3H).

Диастереомер SRR: 1Н, CDCl₃, δ м.д. 7,62-7,52 (м, 2H); 7,44-7,36 (м, 3H); 5,06-4,98 (м, 1Н); 3,52 (с, 3H); 3,52-3,45 (м, 1Н); 3,39 (т, J=8,8, 1Н); 3,30-3,14 (м, 1Н); 3,10-2,96 (м, 1Н); 2,60-2,40 (м, 1Н); 1,96-1,80 (м, 2H); 1,58-1,45 (м, 1Н); 1,43 (с, 9H); 0,96 (м, 6H).

ПРИМЕР 5

(S)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидрокси-2-метилпропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (750 мг, 3,1 ммоль) растворяли в DMF (11 мл, 140 ммоль). Промытый и высушенный NaH (222 мг, 9,3 ммоль) медленно добавляли тремя порциями и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут в атмосфере азота. Добавляли 1-хлор-4-фторбензол (984 мкл, 9,3 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 1 часа, охлаждали до комнатной температуры. И реакцию гасили MeOH, затем концентрировали. Смесь разделяли между EtOAc и водой (по 25 мл каждого) для удаления избыточных солей натрия. Водный слой реэкстрагировали EtOAc (3×25 мл) и органические слои объединяли и концентрировали. Неочищенное, защищенное BOC промежуточное соединение, сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-[(S)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин-1-карбоновой кислоты, затем очищали на силикагеле (колонка 40 г, 0-75% EtOAc в гексанах в течение 30 минут). Желательные фракции собирали и концентрировали с получением BOC-защищенного промежуточного соединения в виде прозрачного масла (481 мг). Снятие защиты проводили, используя 1,25 M HCl в EtOH (11 мл, 13 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота. Твердые вещества повторно растворяли в смеси 1:1 AcOH/H₂O (10 мл) и очищали препаративной ВЭЖХ (10-70% градиент MeCN/H₂O). Желательные фракции собирали с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (481 мг, чистота 98%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₄H₂₀ClNO, 254,12; найдено 254,0.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9,80-9,58 (м, 2H); 7,23-7,18 (м, 2H); 6,88-6,81 (м, 2H); 4,20 (т, J=5,5, 1Н); 3,40-3,28 (м, 2H); 3,27-3,15 (м, 1Н); 2,97-2,87 (м, 1Н); 2,75 (кв.д, J=13,7, 7,8, 1Н); 2,18-2,08 (м, 1Н); 2,06-1,97 (м, 1Н); 1,92 (кв.д, J=13,5, 6,7, 1Н); 0,98 (д, J=0,98, 3H); 0,97 (д, J=0,98, 3H).

Кристаллический моногидрохлорид

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидрокси-2-метилпропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (2,6 г, 10,7 ммоль, 1,0 экв.) и l-хлор-4-фторбензол (3,4 мл, 32,0 ммоль, 3,0 экв.) растворяли в DMF (12 мл, 150 ммоль). Тремя порциями медленно добавляли NaH (385 мг, 16,0 ммоль, 1,5 экв.) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут в атмосфере азота. Смесь нагревали при 90°C в течение 3 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь экстрагировали гексанами (50 мл) и промывали водой (50 мл). Водный слой реэкстрагировали гексанами (50 мл). Органические слои объединяли, сушили в атмосфере Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенное, защищенное BOC промежуточное соединение затем очищали колоночной хроматографией (элюируя гексанами и простым эфиром, 0-100%, флэш-хроматография). Снятие защиты проводили, используя 1,20 M HCl в EtOH (150 мл, 180 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов. Раствор концентрировали досуха с получением неочищенного продукта в виде моносоли HCl. Неочищенную моносоль HCl растворяли в изопропаноле (5 мл) с получением масла, которое нагревали до 55°C. Медленно добавляли простой диизопропиловый эфир (25 мл) при постоянном перемешивании с образованием однородного раствора, который охлаждали до комнатной температуры. Реакционный сосуд соскребали и затравочные кристаллы (полученные в результате нагревания и медленного охлаждения 100 Mg неочищенной соли HCl с использованием аналогичных условий) добавляли во время процесса охлаждения. Образовывались твердые вещества, и раствору давали возможность осесть при комнатной температуре в течение 1 часа. Твердые вещества отфильтровывали и промывали простым диизопропиловым эфиром (10 мл) с получением белого твердого вещества (1,4 г). Фильтрат концентрировали и кристаллизацию повторяли дважды для выхода общего количества 2,4 г (в результате 3 осаждений). Осадок растворяли в воде и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого кристаллического твердого вещества (2,4 г, чистота 99%).

ПРИМЕР 6

Соблюдая процедуры, описанные выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, получали соединения с 6-1 по 6-77, имеющие формулу IIc в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(S)-1-(2-Фторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

2. 3-[1-(2-Фторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

3. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-Фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

4. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-Фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

5. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

6. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

7. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлор-2-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

8. (S)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлор-2-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

9. (R)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлор-2-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

10. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2,3-дифторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

11. 3-[l-(2-Хлорфенокси)-2-метилпропил] пирролидин

12.(S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

13. 3-[l-(2,3- Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

14.(S)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

15.(R)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

16.(R)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

17. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

18. 3-[l-(2- Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

19. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

20. (R)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

21.(S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

22.(S)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

23.(R)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

24. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-4-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

25. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-4-трифторметилфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

26.(S)-3-[(R)-1-(2,5-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

27. 3-[l-(2,6-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

28.(S)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

29.(S)-3-[(R)-1-(2,6-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

30. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

31. (S)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлор-6-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

32. (R)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

33. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дихлор-6-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

34. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлор-6-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

35. (S)-3-[(S)-2-Метил-1-(2,3,6-трихлорфенокси)-пропил]-пирролидин

36. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3,6-дифторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

37. (R)-3-[(R)-1-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)-2-метилпропил]пирролидин

38. (S)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлор-3,5-дифторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

39. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

40. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

41. (R)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

42. (R)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

43. (S)-3-[(R)-l-(2,3-Диметилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

44. (S)-3-[(R)-l-(4-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

45. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

46. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

47. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

48. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-2-метилпропил] пирролидин

49. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

50. 3-[1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

51. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

52. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

53. (S)-3-[(S)-2-Метил-1-(2-нитрофенокси)пропил]пирролидин

54. (S)-3-[(S)-1-(3-Фторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

55. 3-[l-(3-Фторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

56. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

57. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

58. (R)-3-[(R)-l-(4-Хлор-3-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

59. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

60. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

61. (R)-3-[(R)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

62. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

63. (S)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

64. (R)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

65. (R)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

66. (S)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

67. 3-[l-(3,5-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

68.(S)-3-[(R)-1-(3,5-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

69.(R)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

70. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

71. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)-2-метилпропил]-пирролидин

72. 3-[2-Метил-1-(3-трифторметилфенокси)пропил]пирролидин

73. 3-[1-(4-Фторфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

74. 3-[l-(4-Хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

75. (R)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

76. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин

77. 3-[2-Метил-1-(4-трифторметилфенокси)пропил]пирролидин

Получение 4

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-1-гидроксипентил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (3,8 г, 18,8 ммоль) и THF (40 мл, 500 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли 2,0 M н-бутилмагний хлорид в простом эфире (14,1 мл, 28,2 ммоль) в течение 20 минут. Смеси давали возможность нагреться медленно до комнатной температуры в течение ночи. Затем по каплям добавляли насыщенный водный NH₄Cl (100 мл) для гашения реакции. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (1×100 мл) и насыщенный водный NaCl (1×100 мл), затем сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме для оставления бледно-желтого масла (5,2 г). Масло очищали препаративной ВЭЖХ. Остаток растворяли в 50% AcOH/H₂O и диастереомеры отделяли с использованием градиента (10-70% MeCN/H₂O и 0,05% TFA) в течение 80 минут на колонке 2" со скоростью 40 мл/мин. Собранные фракции лиофилизировали с получением следующих соединений в виде масел: сложный трет-бутиловый эфир (S)-1-((S)-1-гидроксипентил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (100 мг; 1-й пик элюирования) и сложный трет-бутиловый эфир (S)-1-((R)-1-гидроксипентил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (789 мг; 2-й пик элюирования).

ПРИМЕР 7

(S)-3-((R)-1-(2,4,5-Трифторфенокси)пентил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-1-гидроксифенил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (40,0 мг, 155 мкмоль) растворяли в DMF (100 мл, 12,9 ммоль). При перемешивании медленно добавляли 60% гидрид натрия в масле (0,4:0,6 гидрид натрия:минеральное масло, 18,6 мг, 311 мкмоль) и смесь перемешивали в течение 15 минут. Добавляли 1,2,4,5-тетрафторбензол (52,1 мкл, 466 мкмоль). Затем смесь нагревали при 90°C в течение 3 часов. Реакцию гасили MeOH (1 мл) и растворитель удаляли под пониженным давлением. Добавляли 1,25 M HCl в EtOH (2,0 мл, 2,5 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Продукт концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанное в заголовке соединения в виде моносоли TFA (19,2 мг, чистота 97%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₅H₂₀F₃NO, 288,15; найдено 288,2.

ПРИМЕР 8

Соблюдая процедуры, описанные выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, получали соединения с 8-1 по 8-13, имеющие формулу IId в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлорфенокси)пентил]пирролидин

2. (S)-3-[(R)-1-(2-Трифторметилфенокси)пентил]пирролидин

3. (S)-3-[(R)-1-(4-Фторфенокси)пентил]пирролидин

4. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)пентил]пирролидин

5. (S)-3-[(R)-1-(4-Трифторметилфенокси)пентил]пирролидин

6. (S)-3-[(R)-1-(2,3-Дихлорфенокси)пентил]пирролидин

7. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)пентил]пирролидин

8. (S)-3-[(R)-1-(2,4-Дихлорфенокси)пентил]пирролидин

9. (S)-3-[(R)-1-(2-Хлор-4-метилфенокси)пентил]пирролидин

10. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)пентил]пирролидин

11. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)пентил]-пирролидин

12. (S)-3-[(R)-1-(2,6-Дихлорфенокси)пентил]пирролидин

13. (S)-3-[(R)-1-(3,5-Дихлорфенокси)пентил]пирролидин

Получение 5

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидрокси-3-метилбутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (6,0 г, 30,1 ммоль) и THF (60 мл, 700 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли 2,0 M изобутилмагний хлорида в простом эфире (18,1 мл, 36,1 ммоль) в течение 10 минут. Смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем по каплям добавляли водный насыщенный NH₄Cl (100 мл) для гашения реакция. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×100 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (1×100 мл) и насыщенным водным NaCl (1×100 мл), затем сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (80 г SiO₂, простой этиловый эфир) с получением сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((S)-1-гидрокси-3-метилбутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,6 г) и сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((R)-1-гидрокси-3-метилбутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (2,2 г) в виде масел.

Данный эксперимент повторяли в аналогичных условиях, и продукт имел следующие ЯМР характеристики.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 3,59 (ддд, J=9,8, 7,0, 2,8 Гц, 1Н), 3,46 (д, J=21,5 Гц, 2H), 3,24 (тд, J=10,2, 7,2 Гц, 1Н), 2,97 (дд, J=22,4, 12,3 Гц, 2H), 2,25-2,09 (м, 1Н), 2,08-1,97 (м, 1Н), 1,90-1,65 (м, 2H), 1,46 (с, 9H), 1,43-1,36 (м, 1Н), 1,17 (ддд, J=13,8, 9,8, 2,8 Гц, 1Н), 0,92 (дд, J=13,7, 6,6 Гц, 6H).

ПРИМЕР 9

(S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидрокси-3-метилбутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (50 мг, 0,2 ммоль) растворяли в DMF (940 мкл, 12 ммоль). Затем медленно добавляли гидрид натрия (5,6 мг, 233 мкмоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Добавляли l,2-дихлор-3-фторбензол (64,1 мг, 388 мкмоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 3 часов, затем концентрировали в вакууме. Добавляли 1,2 M HCl в EtOH (1,1 мл, 1,3 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Продукт концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ для выхода указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (37,4 мг, чистота 100%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₅H₂₁Cl₂NO, 302,10; найдено 302,2.

ПРИМЕР 10

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, соединения от 10-1 до 10-86, имеющие формулу IIe, в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(S)-1-(2-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

2. 3-[1-(2-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

3. 3-[1-(2-Хлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

4. (S)-3-[(S)-1-(2-Метоксифенокси)-3-метилбутил]пирролидин

5. (S)-3-[(S)-1-(3-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

6. 3-[1-(3-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

7. 3-[3-Метил-1-(3-трифторметилфенокси)бутил]пирролидин

8. (S)-3-[(S)-1-(4-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

9. 3-[l-(4-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

10. 3-[1-(4-Хлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

11. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

12. (R)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

13. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

14. (R)-3-[(R)-1-(4- Хлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

15. 3-[3-Метил-1-(4-трифторметилфенокси)бутил]пирролидин

16. (S)-3-[(S)-3-Метил-1-(4-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

17. (S)-3-[(R)-3-Метил-1-(4-трифторметилфенокси)бутил]-пирролидин

18. (S)-3-[(R)-l-(3-Хлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

19. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

20. 3-[1-(2-Фтор-3-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

21. (S)-3-[(S)-1-(2-Фтор-3-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

22. 3-[1-(2,3-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

23. (S)-3-[(R)-l-(2,3-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

24. (R)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

25. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

26. 3-[1-(3-Фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

27. (S)-3-[(R)-l-(2-Хлор-3-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

28. (R)-3-[(S)-l-(2-Хлор-3-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

29. 3-[1-(2-Хлор-3-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

30. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

31. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

32. (R)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

33. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

34. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

35. 3-[1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

36. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

37. (R)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-3-метилбутил] пирролидин

38. 1-[2-Фтор-6-((S)-3-метил-1-(S)-пирролидин-3-илбутокси)-фенил]этанон

39. 3-[1-(4-Хлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

40. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

41. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

42. (S)-3-[(S)-1-(2,4-Дитхлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

43. (R)-3-[(S)-1-(2,4-Дитхлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

44. (S)-3-[(R)-1-(2,4-Дитхлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

45. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

46. (R)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

47. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

48. 3-[1-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

49. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2-метоксифенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

50. (S)-3-[(S)-1-(5-Фтор-2-метоксифенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

51. (S)-3-[(S)-1-(2,5-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

52. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-6-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

53. 3-[l-(2,6-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

54. (S)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

55. (S)-3-[(R)-1-(2,6-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

56. (R)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

57. (S)-3-[(S)-3-Метил-1-(2,4,5-трифторфенокси)бутил]-пирролидин

58. 3-[l-(3,6-Дихлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

59. 3-[l-(3-Хлор-2,6-дифторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

60. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2,6-дифторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

61. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

62. 3-[l-(2-Хлор-3,6-дифторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

63. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3,6-дифторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

64. 3-[l-(2,3-Дихлор-6-фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

65. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлор-6-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

66. 3-[l-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

67. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

68. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-2,3-дифторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

69. (S)-3-[(S)-1-(3,6-Дихлор-2-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

70. 3-[l-(4-Хлор-3-фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

71. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

72. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

73. (S)-3-[(R)-1-(3,4-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

74. (S)-3-[(S)-1-(3,4-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

75. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

76. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-3-метилфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

77. (S)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

78. 3-[l-(3,5-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

79. (S)-3-[(R)-1-(3,5-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

80. (R)-3-[(S)-1-(3,5-Дихлорфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

81. (S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

82. 3-[1-(3-Хлор-5-фторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

83. (S)-3-[(R)-1-(3-Хлор-5-фторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

84. 3-[l-(2,6-Дихлор-3,5-дифторфенокси)-3-метилбутил]-пирролидин

85. (S)-3-[(S)-1-(2,6-Дихлор-3,5-дифторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

86. (S)-3-[(S)-1-(2-Хлор-3,5,6-трифторфенокси)-3-метилбутил]пирролидин

Получение 6

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-2-этил-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (0,8 г, 3,8 ммоль) и THF (8 мл, 90 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли 2 M 3-пентилмагний бромид в простом эфире (4,70 мл, 9,4 ммоль) в течение 1 часа. Смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем по каплям добавляли водный насыщенный NH₄Cl (5 мл) для гашения реакции. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×25 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (25 мл) и насыщенным водным NaCl (25 мл), затем сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (5-25% EtOAc в гексанах) с получением следующих соединений в виде прозрачных масел:

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-2-этил-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (48 мг, 2-й пик элюирования). ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 3,59-3,55 (м, 1Н), 3,49-3,44 (м, 2H), 3,26-3,23 (м, 1Н), 3,14-3,08 (м, 1Н), 2,46-2,38 (м, 1Н), 1,89-1,82 (м, 1Н), 1,62-1,53 (м, 2H), 1,46 (с, 9H), 1,44-1,39 (м, 2H), 1,26-1,15 (м, 2H), 0,95-0,90 (м, 6H).

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-2-этил-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (28 мг, 1-й пик элюирования). ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 3,51-3,43 (м, 2H), 3,39-3,34 (м, 1Н), 3,27-3,20 (м, 1Н), 2,97-2,89 (м, 1Н), 2,42-2,34 (м, 1Н), 2,09-2,03 (м, 1Н), 1,76-1,68 (м, 1Н), 1,61-1,54 (м, 1Н), 1,46 (с, 9H) 1,45-1,40 (2H, м), 1,29-1,23 (м, 1Н), 1,10-1,04 (м, 1Н), 0,95-0,90 (м, 6H).

ПРИМЕР 11

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-[(R)-1-(2,3-дихлорфенокси)-2-этилбутил]пирролидина

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-2-этил-1-гидроксибутил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (28 мг, 0,1 ммоль) растворяли в DMF (380 мкл, 4,9 ммоль). Медленно добавляли 60% гидрид натрия в масле (0,4:0,6, гидрид натрия:минеральное масло, 18,6 мг, 310 мкмоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Добавляли l,2-дихлор-3-фторбензол (23,8 мкл, 206 мкмоль) и смесь перемешивали при 70°C в течение 3 часов. Смесь концентрировали, обрабатывали 1,25 M HCl в EtOH (578 мкл, 722 мкмоль), затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Продукт концентрировали в вакууме, повторно растворяли в смеси 1:1 AcOH:H₂O, фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (5,3 мг, чистота 97%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₆H₂₃Cl₂NO, 316,12; найдено 316,3.

ПРИМЕР 12

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и замещая соответствующие исходные материалы и реагенты, было также получено соединение 12-1, имеющее формулу IIf, в виде моносоли TFA:

1. (S)-3-[(S)-1-(2,3-Дихлорфенокси)-2-этилбутил]пирролидин

ПРИМЕР 13

(S)-3-[(S)-1-(Нафталин-1-илокси)пропил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидроксипропил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (500 мг, 2,2 ммоль) растворяли в DMF (8,0 мл, 100 ммоль). 60:40 NaH:минерального масла (262 мг, 6,5 ммоль) осторожно добавляли тремя отдельными порциями и затем перемешивали в течение 15 минут. Смесь затем обрабатывали 2-фторнафталином (562 мкл, 4,4 ммоль) и перемешивали при 70°C в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли дополнительные 200 мг 60% NaH:минерального масла и смесь перемешивали при 70°C в течение 14 часов. Реакцию гасили MeOH до прекращения выделения пузырьков. Смесь концентрировали и BOC-промежуточное соединение очищали хроматографией на силикагеле (0-30% EtOAc в гексанах). Затем очищенный материал обрабатывали 1,25 М HCl в EtOH (12,2 мл, 15,3 ммоль) и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь концентрировали и помещали в глубокий вакуум с получением указанного в заголовке соединения в виде маслянистого соединения (моносоли HCl; 242 мг). MS m/z: [М+Н]⁺ рассчитано для C₁₇H₂₁NO, 256, 16; найдено 256,2.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,94 (с, 2Н), 8,22-8,14 (м, 1Н), 7,90-7,83 (м, 1Н), 7, 56-7,36 (м, 4Н), 7,06 (д, J=7,l Гц, 1Н), 4,70 (д, J=5,6 Гц, 1Н), 3, 39-3,33 (м, 1Н), 3,20-31,5 (м, 2Н), 2,99-2,84 (м, 1Н), 2,76-2,71 (м, 1Н), 2,12-2,08 (м, 1Н), 1,98-1,88 (м, 1Н), 1,80-1,69 (м, 2Н), 0,91 (т, J=7,4 Гц, ЗН).

ПРИМЕР 14

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, были также получены соединения от 14-1 до 14-9, имеющие формулу XIa, в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(R)-1-(Нафталин-1-илокси)пропил]пирролидин

2. (S)-3-[(R)-1-(Нафталин-1-илокси)бутил]пирролидин

3. (S)-3-[(S)-1-(Нафталин-1-илокси)бутил]пирролидин

4. (R)-3-[(S)-2-Метил-1-(нафталин-1-илокси)пропил]пирролидин

5. (S)-3-[(S)-2-Метил-1-(нафталин-1-илокси)пропил]пирролидин

6. (S)-3-[(R)-2-Метил-1-(нафталин-1-илокси)пропил]пирролидин

7. (R)-3-[(R)-2-Метил-1-(нафталин-1-илокси)пропил]пирролидин

8. (S)-3-[(S)-2-Метил-1-(нафталин-1-илокси)бутил]пирролидин

9. (S)-3-[(R)-2-Метил-1-(нафталин-1-илокси)бутил]пирролидин

Получение 7

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-циклопропилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты и сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-циклопропилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (1,0 г, 5 ммоль) и THF (10 мл, 100 ммоль) объединяли в атмосфере азота и полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли 0,5 M циклопропилмагний бромид в THF (15 мл, 7,5 ммоль) в течение 10 минут. Смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем по каплям добавляли насыщенный NH₄Cl (30 мл) для гашения реакции. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (1×30 мл) и насыщенным водным NaCl (1×30 мл), затем сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ (15-55% MeCN:H₂O +0,05% TFA в течение 80 минут) на колонке 2" с получением сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((R)-циклопропилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (520 Mg, 2-й пик элюирования) и сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((S)-циклопропилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (418 мг, 1-й пик элюирования). Лиофилизированные твердые вещества растворяли в EtOAc и промывали насыщенным водным NH₄CO₃, органические вещества отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли под пониженным давлением.

Для соединения (S,S) (1-й пик элюирования): ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 3,69-3,48 (м, 3H), 3,48-2,98 (м, 6H), 2,87-2,65 (м, 2H), 2,63-2,16 (м, 2H), 2,16-1,88 (м, 2H), 1,80-1,64 (м, 5H), 1,47 (с, 20H), 1,01-0,86 (м, 2H), 0,68-0,35 (м, 4H), 0,35-0,20 (м, 4H).

Для соединения (S,R) (2-й пик элюирования): ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 3,71-3,39 (м, 1Н), 3,35-3,12 (м, 1Н), 2,88-2,70 (м, 1Н), 2,39 (дд, J=15,3, 8,9 Гц, 1Н), 2,05-1,91 (м, 1Н), 1,84-1,64 (м, 1Н), 1,46 (с, 4H), 1,01-0,87 (м, 1Н), 0,67-0,46 (м, 1Н), 0,27 (д, J=19,2 Гц, 1Н).

ПРИМЕР 15

(S)-3-[(R)-(3-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-циклопропилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,0 г, 4,1 ммоль) растворяли в DMF (15 мл, 200 ммоль). Промытый и высушенный гидрид натрия (298 мг, 12,4 ммоль) осторожно добавляли тремя отдельными порциями и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Добавляли 2-хлор-6-фтортолуол (749 мкл, 6,2 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи при 70°C. Смесь концентрировали, и защищенное BOC промежуточное соединение очищали хроматографией на силикагеле (0-10% EtOAc в гексанах в течение 10 минут, 10-50% через 10 минут), и желательные фракции выделяли и концентрировали. Неочищенный материал затем обрабатывали 1,25 M HCl в EtOH (23,2 мл, 29,0 ммоль) и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Продукт концентрировали в вакууме и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (240 мг, чистота 99,4%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₅H₂₀ClNO, 266,12; найдено 266,0.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 9,14 (с, 2H), 7,15 (т, J=8,1 Гц, 1Н), 7,08-7,01 (м, 2H), 4,04 (т, J=7,3 Гц, 1Н), 3,42-3,32 (м, 1Н), 3,29-3,20 (м, 1Н), 3,19-3,09 (м, 1Н), 3,08-2,98 (м, 1Н), 2,74-2,63 (м, 1Н), 2,24 (с, 3H), 2,13-2,01 (м, 1Н), 1,86-1,73 (м, 1Н), 1,11-1,01 (м, 1Н), 0,52-0,44 (м, 1Н), 0,43-0,35 (м, 1Н), 0,27-0,20 (м, 1Н), 0,19-0,11 (м, 1Н).

ПРИМЕР 16

Соблюдая процедуры, описанные выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, получали также соединения с 16-1 по 16-104, имеющие формулу IIIa, в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(S)-(2-Хлорфенокси)циклопропилметил]пирролидин

2. (S)-3-[(R)-(2-Хлорфенокси)циклопропилметил]пирролидин

3. (S)-3-((S)-циклопропил-о-толилоксиметил)пирролидин

4. (S)-3-[(R)-циклопропил-(2-метилсульфонилфенокси)метил]-пирролидин

5. (S)-3-[(S)-циклопропил-(2-метилсульфонилфенокси)метил]-пирролидин

6. (R)-3-[(S)циклопропил-(2,3-дихлорфенокси)метил]пирролидин

7. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,3-дихлорфенокси)метил]пирролидин

8. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,3-дихлорфенокси)метил]пирролидин

9. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-3-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

10. (S)-3-[(R)-(2-Хлор-3-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

11. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-2-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

12. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,3-диметилфенокси)метил]-пирролидин

13. (R)-3-[(S)-(3-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

14. (R)-3-[(R)-(3-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

15. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

16. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

17. (S)-3-[(R)-(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

18. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-2-метоксифенокси)циклопропилметил]-пирролидин

19. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

20. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,4-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

21. (R)-3-[(R)циклопропил-(2,4-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

22. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-4-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

23. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-4-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

24. (R)-3-[(R)-(2-Хлор-4-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

25. (S)-3-[(S)-(2-Бром-4-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

26. (R)-3-[(R)-(2-Бром-4-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

27. (R)-3-[(R)циклопропил-(2,4-диметилфенокси)метил]-пирролидин

28. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-диметилфенокси)метил]-пирролидин

29. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

30. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

31. (R)-3-[(S)-(4-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

32. (R)-3-[(R)-(4-Хлор-2-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

33. (R)-3-[(R)циклопропил-(2-этил-4-фторфенокси)метил]-пирролидин

34. (S)-3-[(S)циклопропил-(2-этил-4-фторфенокси)метил]-пирролидин

35. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)-циклопропилметил]пирроллидин

36. (R)-3-[(R)-(4-Хлор-2-трифторметилфенокси)-циклопропилметил]пирроллидин

37. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2-метоксифенокси)циклопропилметил]-пирролидин

38. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-2-метоксифенокси)циклопропилметил]-пирролидин

39. (S)-3-[(R)циклопропил-(4-фтор-2-метоксифенокси)метил]-пирролидин

40. (S)-3-[(S)циклопропил-(4-фтор-2-метоксифенокси)метил]-пирролидин

41. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2-этоксифенокси)циклопропилметил]-пирролидин

42. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-2-этоксифенокси)циклопропилметил]-пирролидин

43. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2-циклогексилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

44. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,6-дихлорфенокси)-метил]пирролидин

45. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-6-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

46. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,3,4-трифторфенокси)метил]-пирролидин

47. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,3,4-трифторфенокси)метил]-пирролидин

48. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2,3-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

49. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-2,3-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

50. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,3-дифтор-4-метилфенокси)метил]-пирролидин

51. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,3-дифтор-4-метилфенокси)метил]-пирролидин

52. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дихлор-3-фторфенокси)метил]-пирролидин

53. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-2,4-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

54. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дифтор-3-метоксифенокси)-метил]пирролидин

55. (S)-3-[(S)циклопропил-(3,4-дихлор-2-метоксифенокси)-метил]пирролидин

56. (S)-3-[(R)циклопропил-(3,4-дихлор-2-метоксифенокси)-метил]пирролидин

57. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,5-дихлор-3-фторфенокси)метил]-пирролидин

58. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,3,6-трихлорфенокси)метил]-пирролидин

59. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,3-дихлор-6-фторфенокси)метил]-пирролидин

60. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,3-дихлор-6-фторфенокси)метил]-пирролидин

61. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-3,6-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

62. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-6-фтор-3-метилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

63. (S)-3-[(R)-(2-Хлор-6-фтор-3-метилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

64. (S)-3-[(S)-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)-циклопропилметил]пирролидин

65. (S)-3-[(R)-(2-Хлор-6-фтор-3-метоксифенокси)-циклопропилметил]пирролидин

66. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-2,6-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

67. (S)-3-[(R)-(3-Хлор-2,6-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

68. (S)-3-[(S)-(6-Хлор-2-фтор-3-метилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

69. (S)-3-[(R)-(6-Хлор-2-фтор-3-метилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

70. (S)-3-[(S)-(6-Хлор-2-фтор-3-метоксифенокси)-циклопропилметил]пирролидин

71. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4,5-трихлорфенокси)метил]-пирролидин

72. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дихлор-5-метилфенокси)метил]-пирролидин

73. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,4-дихлор-5-метилфенокси)метил]-пирролидин

74. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-5-фтор-2-метоксифенокси)-циклопропилметил]пирролидин

75. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дихлор-6-фторфенокси)метил]-пирролидин

76. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,4-дихлор-6-фторфенокси)метил]-пирролидин

77. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дихлор-6-метилфенокси)метил]-пирролидин

78. (S)-3-[(R)циклопропил-(2,4-дихлор-6-метилфенокси)метил]-пирролидин

79. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

80. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-2,6-дифторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

81. (S)-3-[(S)циклопропил-(2-этил-4,6-дифторфенокси)метил]-пирролидин

82. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-2,6-диметилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

83. (S)-3-[(S)циклопропил-(2,4-дихлор-3,5-диметилфенокси)-метил]пирролидин

84. (S)-3-[(S)-(3-Хлорфенокси)циклопропилметил]пирролидин

85. (S)-3-[(R)-(3-Хлорфенокси)циклопропилметил]пирролидин

86. (S)-3-[(S)циклопропил-(3-метилсульфанилфенокси)метил]-пирролидин

87. (S)-3-[(S)циклопропил-(3,4-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

88. (S)-3-[(R)циклопропил-(3,4-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

89. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-4-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин-пирролидин

91. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-3-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

92. (R)-3-[(R)-(4-Хлор-3-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

93. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-3-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

94. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-3-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

95. (S)-3-[(R)-(4-Хлор-3-метилфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

96. (S)-3-[(S)циклопропил-(3,5-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

97. (S)-3-[(R)циклопропил-(3,5-дихлорфенокси)метил]-пирролидин

98. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-5-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

99. (S)-3-[(R)-(3-Хлор-5-фторфенокси)циклопропилметил]-пирролидин

100. (S)-3-[(S)-(3-Хлор-5-метоксифенокси)циклопропилметил]-пирролидин

101. (S)-3-[(S)-(4-Хлор-3,5-диметилфенокси)-циклопропилметил]пирролидин

102. (S)-3-[(R)-(3-Хлорфенокси)циклопропилметил]пирролидин

103. (S)-3-[(S)-(3-Хлорфенокси)циклопропилметил]пирролидин

104. (S)-3-[(S)циклопропил-(4-трифторметилфенокси)метил]-пирролидин

Получение 8

Сложный трет-бутиловый эфир 3-(циклопентилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир 2-оксопирролидин-1-карбоновой кислоты (9,3 г, 50,4 ммоль) растворяли в THF (60 мл, 800 ммоль) в атмосфере азота и затем охлаждали при -78°C. Добавляли 2 M литий диизопропиламид в гептан/THF/этилбензоле (34 мл) в течение 40 минут и полученную смесь перемешивали в течение 1,5 часов при -78°C. Циклопентанкарбонил хлорид (6,1 мл, 50 ммоль) растворяли в THF (4,0 мл, 49 ммоль) и медленно добавляли по каплям через шприц к смеси в течение 30 минут, затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (50 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Смесь экстрагировали EtOAc (200 мл). Органический слой промывали насыщенным водным NaHCO₃ (2×75 мл), затем насыщенным водным NaCl. Водные слои объединяли и реэкстрагировали EtOAc (75 мл). Органические слои объединяли, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Затем материал помещали в высокий вакуум на 10 минут с получением неочищенного масла. Масло растворяли в 50% AcOH/H₂O и очищали препаративной ВЭЖХ (10-70% MeCN/H₂O; 0,05% TFA; в течение 80 минут на колонке 2" со скоростью 40 мл/мин). Фракции собирали и лиофилизировали с получением сложного трет-бутилового эфира 3-циклопентанкарбонил-2-оксопирролидин-1-карбоновой кислоты (6 г) в виде желтого твердого вещества. MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₅H₂₃NO₄, 281,3; найдено 282,2.

Сложный трет-бутиловый эфир 3-циклопентанкарбонил-2-оксопирролидин-1-карбоновой кислоты (1,2 г, 4,4 ммоль) растворяли в THF (3,5 мл, 43,7 ммоль) в атмосфере азота. С помощью шприца добавляли 2M BH₃•Me₂S в THF (6,6 мл, 13,1 ммоль) в течение 15 минут. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем нагревали при 65°C в течение 24 часов. Еще через 48 часов смесь помещали в ледяную баню и реакцию медленно гасили холодным MeOH (100 мл). Смесь перемешивали в течение 15 минут, затем разводили EtOAc (30 мл) и промывали насыщенным водным NaHCO₃ (2×50 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали выпариванием в роторном испарителем с получением масла (300 мг). Масло очищали препаративной ВЭЖХ (колонка 2”; 5-50% MeCN/H₂O; буфер 0,1% TFA; со скоростью 40 мл/мин в течение 80 минут). Желательные фракции собирали, замораживали и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (939 мг). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₅H₂₇NO₃, 269,3; найдено 270,4.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 3,60-3,50 (м, 4H), 3,40 (т, 1Н), 2,00-1,59 (м, 1Н), 1,58-1,56 (м, HH), 1,50 (с, 9H).

ПРИМЕР 17

3-[(2-Хлор-4-метилфенокси)циклопентилметил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир 3-(циклопентилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (94 мг, 35 мкмоль) растворяли в DMF (1,1 мл, 14 ммоль). Добавляли 60% гидрид натрия в масле (60:40, гидрид натрия:минеральное масло, 17 мг, 420 мкмоль) и смесь перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. Добавляли 3-хлор-4-фтортолуол (130 мкл, 1,0 ммоль), и смесь нагревали при 90°C в течение 24 часов. Реакцию гасили MeOH (1 мл) и DMF/MeOH удаляли в вакууме. Твердые вещества отфильтровывали и затем снимали защиту с использованием 1,25 M HCl в EtOH (1,0 мл, 1,3 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре.

Неочищенный продукт растворяли в смеси 1:1 AcOH:H₂O (1,4 мл), фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде смеси всех 4 стереоизомеров (R,R, R,S, S,S и S,R) в виде моносолей TFA (4,2 мг, чистота 100%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₇H₂₄ClNO, 294,15; найдено 294,2.

ПРИМЕР 18

Соблюдая процедуры, описанные выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, были также получены соединения от 18-1 до 18-12, имеющие формулу IIIb, в виде моносолей TFA:

Некоторые продукты получали в виде «смесей» четырех стереоизомеров: R,R, R,S, S,S и S,R. Некоторые продукты отделяли и очищали препаративной ВЭЖХ, причем 2-й пик обозначен как смесь энантиомеров SS/RR.

1. 3-[Циклопентил-(2,3-дихлорфенокси)метил]пирролидин

2. 3-[(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)циклопентилметил]-пирролидин

3. 3-[(3-Хлор-2-трифторметилфенокси)циклопентилметил]-пирролидин

4. 3-[Циклопентил-(2,4-дихлорфенокси)метил]пирролидин

5. 3-[Циклопентил-(2,4-дихлорфенокси)метил]пирролидин

6. 3-[(2-Хлор-4-метилфенокси)циклопентилметил]пирролидин

7. 3-[(4-Хлор-2-метилфенокси)циклопентилметил]пирролидин

8. 3-[Циклопентил-(2,6-дихлорфенокси)метил]пирролидин

9. 3-[Циклопентил-(3,5-дихлорфенокси)метил]пирролидин

10. 3-[Циклопентил-(3,5-дихлорфенокси)метил]пирролидин

11. 3-[(4-Хлорфенокси)циклопентилметил]пирролидин

12. 3-[Циклопентил-(4-фторфенокси)метил]пирролидин

Получение 9

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-циклогексилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (2,8 г, 13,8 ммоль) растворяли в THF (50 мл) в атмосфере азота и охлаждали при -78°C. Шприцем добавляли циклогексилмагний хлорид (2,0 M в простом эфире; 10,0 мл, 20,0 ммоль, 1,4 экв.) в течение приблизительно 10 минут. Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 20 минут, затем помещали в ледяную баню на 30 минут. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (15 мл). THF удаляли под пониженным давлением и остающийся материал экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Органические вещества промывали водой (25 мл) и насыщенным водным NaCl (25 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного продукта. Этот материал растворяли в MeCN (10 мл), воде (8 мл) и MeOH (11 мл). Материал очищали препаративной ВЭЖХ 3 порциями (колонка 2" C18; 20-50% MeCN в течение 1 часа; желательное соединение извлекали при ~46%). Фракции собирали отдельно в результате первого элюирования и второго элюирования и MeCN удаляли. Каждую фракцию экстрагировали DCM (3×125 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((S)-циклогексилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,1 г; 1-й пик элюирования) и сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((R)-циклогексилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (1,1 г; 2-й пик элюирования).

ПРИМЕР 19

(S)-3-((S)-Циклогексил-(2,6-дихлорфенокси)метил)пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((R)-циклогексилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (190 мг, 670 мкмоль) объединяли с PPh₃ (79 мг, 0,3 ммоль), THF (0,2 мл) и 2,6-дихлорфенолом (73 мг, 0,5 ммоль). Добавляли DIAD (59 мкл, 0,3 ммоль) и смеси давали возможность отстояться при комнатной температуре в течение 2 часов. Добавляли EtOH (1,0 мл) и 4,0 N HCl в диоксане (0,5 мл, 2,0 ммоль) и смеси давали возможность отстояться при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли под пониженным давлением, и остающийся материал растворяли в 50% AcOH (6 мл) и очищали препаративной ВЭЖХ (колонка 1" Cl8; 10-50% MeCN в течение 1 часа). Чистые фракции объединяли и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (37 мг, чистота 95%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₇H₂₃Cl₂NO, 328,12; найдено 328,4.

ПРИМЕР 20

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, были также получены соединения от 20-1 до 20-7, имеющие формулу IIIc, в виде моносолей TFA:

(S,R) соединения были получены с использованием (S,R) спирта. Соединения RR/SS и RS/SR получали с использованием соответственно (R,R) спирта и (R,S) спирта.

1. (S)-3-[(R)-Циклогексил-(2-фторфенокси)метил]пирролидин

2. 3-[ Циклогексил-(2-метоксифенокси)метил]пирролидин

3. (S)-3-[(R)-Циклогексил-(2-нитрофенокси)метил]пирролидин

4. l-[2-((R)-Циклогексил-(S)-пирролидин-3-ил-метокси)фенил]-этанон

5. (S)-3-[(R)-(2-Хлор-3-фторфенокси)циклогексилметил]-пирролидин

6. 3-[Циклогексил-(3,5-дихлорфенокси)метил]пирролидин

7. (S)-3-[(R)-Циклогексил-(3-фторфенокси)метил]пирролидин

Получение 10

Сложный трет-бутиловый эфир 3-[(4,4-дифторциклогексил)гидроксиметил]пирролидин-1-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение было получено способом, аналогичным способу, описанному в получении 9 для синтеза сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((R)-циклогексилгидроксиметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты. Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты и LiHMDS растворяли в THF в атмосфере азота и охлаждали при -78°C. Затем добавляли 4,4-дифторциклогексанкарбонилхлорид (полученный обработкой 4,4-дифторциклогексанкарбоновой кислоты тионил хлоридом в THF при 50°C в течение 2 часов) и полученную смесь перемешивали при -78°C, затем ей давали возможность достичь комнатной температуры в течение ночи. Добавляли BH₃•Me₂S в THF и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 1 часа. Твердые вещества (1,03 г) отделяли и растворяли в смеси 1:1 AcOH:H₂O (20 мл) и очищали препаративной ВЭЖХ (BDS, 40-60%). Это повторяли дважды с получением:

SS/RR стереоизомеров (220 мг; 1-й пик элюирования). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 3,37-3,26 (м, 2H), 3,20-3,15 (м, 1Н), 3,13-3,06 (м, 1Н), 2,94-2,85 (м, 1Н), 2,30-2,16 (м, 1Н), 2,04-1,94 (м, 2H), 1,90-1,56 (м, 6H), 1,42-1,40 (м, 1Н), 1,39 (с, 9H), 1,34-1,26 (м, 2H);

SR/RS стереоизомеров (360 мг; 2-й пик элюирования). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 3,40-3,32 (м, 2H), 3,20-3,08 (м, 2H), 3,03-2,94 (м, 1Н), 2,29-2,18 (м, 1Н), 2,04-1,94 (м, 2H), 1,84-1,68 (м, 4H), 1,60-1,55 (м, 2H), 1,52-1,44 (м, 1Н), 1,39 (с, 9H), 1,33-1,29 (м, 2H).

ПРИМЕР 21

3-[(3,5-Дихлорфенокси)-(4,4-дифторциклогексил)метил]пирролидин

Объединяли сложный трет-бутиловый эфир (R)-3-[(S)-(4,4-дифторциклогексил)гидроксиметил]пирролидин-1-карбоновой кислоты (44,0 мг, 138 мкмоль), йодид меди (I) (7,9 мг, 41 мкмоль), о-фенантролин (15 мг, 83 мкмоль) и карбонат цезия (89,8 мг, 276 мкмоль). Добавляли 1,3-дихлор-5-йодбензол (75,2 мг, 276 мкмоль) с последующим добавлением толуола (220 мкл, 2,1 ммоль). Через смесь барботировали воздух, сосуд герметично укупоривали и смесь нагревали при 105°C в течение 48 часов. Смесь фильтровали, промывали DCM и концентрировали. Неочищенный материал обрабатывали 1,25 M HCl в EtOH (5,8 мл, 7,2 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали, повторно растворяли в смеси 1:1 AcOH:H₂O и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (1,5 мг, чистота 96%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₇H₂₁Cl₂F₂NO, 364,10; найдено 364,0.

ПРИМЕР 22

(S)-3-[(S)-Циклопропил(нафталин-1-илокси)метил]пирролидин

Объединяли сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-циклопропилгидроксиметил)пирролидин-l-карбоновой кислоты (35 мг, 140 мкмоль), йодид меди (I) (8,3 мг, 43,5 мкмоль), о-фенантролин (15,7 мг, 87 мкмоль) и 1-йоднафталин (73,7 мг, 290 мкмоль). Добавляли толуол (463 мкл, 4,4 ммоль) с последующим добавлением карбоната цезия (94,5 Mg, 290 мкмоль). Через смесь барботировали воздух, сосуд герметично укупоривали и смесь нагревали при 105°C в течение 72 часов. Смесь фильтровали, промывали DCM и концентрировали. Неочищенный материал обрабатывали 1,25 M HCl в EtOH (1,2 мл, 1,5 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали, повторно растворяли в смеси 1:1 AcOH:H₂O и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (3,5 мг, чистота 99%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₈H₂₁NO, 268,16; найдено 268,2.

ПРИМЕР 23

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, были также получены соединения от 23-1 и 23-2, имеющие формулу VIa, в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(R)-Циклопропил-(2-метил-3-винилфенокси)метил] пирролидин

2. (S)-3-[(S)-(4-Хлорнафталин-1-илокси)циклопропилметил] пирролидин

Получение 11

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидроксибут-3-енил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (1,5 г, 7,5 ммоль) растворяли в THF (15,0 мл, 186 ммоль). Реакционную смесь охлаждали при -78°C перед добавлением по каплям аллилмагний бромида (1,0 M в простом эфире; 11,3 мл, 11,3 ммоль). Полученной смеси давали возможность медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Реакцию гасили насыщенным водным NH₄Cl (30 мл), добавляемым по каплям. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл), затем объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaHCO₃ (1×30 мл) и насыщенным водным NaCl (1×30 мл), затем сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта, который затем очищали препаративной ВЭЖХ (10-50% MeCN:H₂O; 0,05% TFA; в течение 80 минут). Каждый диастереомер растворяли в EtOAc и свободном основании добавлением насыщенного водного NH₄CO₃. Органические вещества отделяли, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли с получением сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((S)-1-гидроксибут-3-енил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (105 мг; 1-й пик элюирования) и сложного трет-бутилового эфира (S)-3-((R)-1-гидроксибут-3-енил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (90 мг; 2-й пик элюирования).

ПРИМЕР 24

(S)-3-[(S)-1-(3-Хлор-2-метилфенокси)бут-3-енил]пирролидин

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-((S)-1-гидроксибут-3-енил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (31 мг, 130 мкмоль) растворяли в DMF (470 мкл, 6,1 ммоль). Осторожно добавляли 60% гидрид натрия в масле (0,4:0,6, гидрид натрия:минеральное масло, 10,1 мг, 169 мкмоль) и смеси давали возможность постоять в течение 15 минут. Добавляли 2-хлор-6-фтортолуол (47,0 мкл, 390 мкмоль). Смесь перемешивали при 70°C в течение 3 часов. Реакцию гасили MeOH и растворитель удаляли. Добавляли 1,2 M HCl в EtOH (630 мкл, 760 мкмоль) и смесь перемешивали в течение ночи. Продукт концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (1 Mg, чистота 100%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₅H₂₀ClNO, 266,12; найдено 266,0.

ПРИМЕР 25

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, были также получены соединения от 25-1 и 25-2, имеющие формулу IVa, в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[(S)-1-(4-Хлорфенокси)бут-3-енил]пирролидин

2. (S)-3-[(R)-1-(4-Хлор-2-метилфенокси)бут-3-енил]пирролидин

Получение 12

Сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-(l-гидроксипроп-2-инил)пирролидин-1-карбоновой кислоты

0,5 M Этилмагний бромид в THF (6,3 мл, 3140 мкмоль) добавляли по каплям в течение 5 минут к перемешиваемому раствору сложного трет-бутилового эфира (S)-3-формилпирролидин-1-карбоновой кислоты (0,5 г, 2 ммоль) в THF (5 мл, 60 ммоль) при 0°C. Смеси давали возможность нагреться до комнатной температуры. Через 4 часа реакцию гасили добавлением насыщенного водного NH₄Cl (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Органические слои объединяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Затем материал растворяли в смеси MeCN (2,0 мл), воды (3,0 мл) и AcOH (3,0 мл), фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой. Смешанные фракции объединяли и лиофилизировали. После лиофилизации твердые вещества разделяли между EtOAc (40,0 мл) и насыщенным NaHCO₃ (20,0 мл). Органический слой промывали насыщенным водным NaCl (20,0 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде желтоватого масла (168,2 Mg).

ПРИМЕР 26

(S)-3-[l-(2,3,6-Трихлорфенокси)проп-2-инил]пирролидин

Смесь сложного трет-бутилового эфира (S)-3-(1-гидроксипроп-2-инил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (21,0 мг, 93,2 мкмоль) и DIAD (22,0 мкл, 112 мкмоль) растворяли в толуоле (65 мкл, 610 мкмоль) при комнатной температуре. PPh₃ (29,3 мг, 112 мкмоль) и 2,3,6-трихлорфенол (20,2 мг, 102 мкмоль) растворяли в толуоле (0,1 мл, 1 ммоль) и нагревали при 100°C. Смесь сложного трет-бутилового эфира медленно добавляли в фенольную смесь при 100°C и перешивали в течение 1 часа. Затем прекращали нагревание смеси и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем смесь концентрировали и полученный остаток обрабатывали 1,25 M HCl в EtOH (0,6 мл, 0,8 ммоль) при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток повторно растворяли в смеси 50% AcOH/H₂O (1,4 мл) и MeCN (0,2 мл), фильтровали и очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой с получением указанного в заголовке соединения в виде моносоли TFA (21,2 мг, чистота 99%). MS m/z: [M+H]⁺ рассчитано для C₁₃H₁₂Cl₃NO, 304,00; найдено 304,0.

ПРИМЕР 27

Следуя процедурам, описанным выше в примерах, и заменяя соответствующие исходные материалы и реагенты, были также получены соединения от 27-1 и 27-2, имеющие формулу Va, в виде моносолей TFA:

1. (S)-3-[1-(2,3-4-Дихлорфенокси)проп-2-инил]пирролидин

2. (S)-3-[1-(4-Хлор-2-метилфенокси)проп-2-инил]пирролидин

Анализ 1

Анализы связывания hSERT, hNET и hDAT

Анализы мембранного связывания радиолигандов использовали для измерения ингибирования связывания меченых лигандов (³H-циталопрама или ³H-низоксетина или ³H-WIN35428) с мембранами, полученными из клеток, экспрессирующих соответствующий человеческий рекомбинантный транспортер (hSERT или hNET или hDAT) для определения величин pK_i тестируемых соединений у транспортеров.

Получение мембран из клеток, экспрессирующих hSERT, hNET или hDAT

Происходящие из человеческих эмбриональных почек (HEK-293) линии рекомбинантных клеток, устойчиво трансфецированные соответственно hSERT или hNET, выращивали в среде DMEM с добавлением 10% диализированной FBS (для hSERT) или FBS (для hNET), 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 2 мМ L-глутамина и 250 мкг/мл аминогликозидного антибиотика G418, в содержащем 5% CO₂ увлажненном инкубаторе при 37°C. Когда культуры достигали слияния 80%, клетки тщательно промывали в PBS (без Ca²⁺ и Mg²⁺) и поднимали 5 мМ EDTA в PBS. Клетки осаждали центрифугированием, ресуспендировали в лизисном буфере (10 мМ Tris-HCl, pH 7,5, содержащий 1 мМ EDTA), гомогенизировали, осаждали центрифугированием, затем ресуспендировали в 50 мМ Tris-HCl, pH 7,5 и 10% сахарозе при 4°C. Концентрацию белка мембранной суспензии определяли с использованием аналитического набора Bio-Rad Bradford Protein Assay. Мембраны подвергали быстрому замораживанию и хранили при -80°C. Мембраны яичников китайских хомячков, экспрессирующие hDAT (CHO-DAT), закупали у компании PerkinElmer и хранили при -80°C.

Анализы связывания

Анализы связывания выполняли в 96-луночном планшете в общем объеме 200 мкл аналитического буфера (50 мМ Tris-HCl, 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, pH 7,4) с 0,5, 1 и 3 мкг мембранного белка соответственно для SERT, NET и DAT. Исследования связывания насыщения для определения величин K_d радиолиганда соответственно для ³H-циталопрама, ³H-низоксетина или ³H-WIN35428 проводили с использованием 12 различных концентраций радиолигандов в диапазоне 0,005-10 нМ (³H-циталопрам); 0,01-20 нМ (³H-низоксетин) и 0,2-50 нМ (³H-WIN35428). Анализы ингибирования для определения величин K_i тестируемых соединений проводили с 1,0 нМ ³H- циталопрама, 1,0 нМ ³H-низоксетина или 3,0 нМ H-WIN35428, при 11 различных концентрациях тестируемого соединения в диапазоне от 10 пкМ до 100 мкМ.

Получали основные растворы (10 мМ в DMSO) тестируемого соединения и серийные разведения осуществляли с использованием буфера разведения (50 мМ Tris-HCl, 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, pH 7,4, 0,1% BSA, 400 мкМ аскорбиновой кислоты). Неспецифическое связывание радиолигандов определяли в присутствии 1 мкМ дулоксетина, 1 мкМ дезипрамина или 10 мкМ GBR 12909 (каждый в буфере разведения) соответственно для анализов hSERT, hNET или hDAT.

После 60 минут инкубации при 22°C (или периода, достаточного для достижения равновесия) мембраны собирали быстрой фильтрацией через 96-луночный планшет UniFilter GF/B, предварительно обработанный 0,3% полиэтиленимином, и промывали 6 раз 300 мкл промывочного буфера (50 мМ Tris-HCl, 0,9% NaCl, pH 7,5 при 4°C). Планшеты сушили в течение ночи при комнатной температуре, добавляли приблизительно 45 мкл MicroScint™-20 (Perkin Elmer) и связанную радоактивность количественно определяли посредством жидкостной сцинтилляционной спектроскопии. Кривые ингибирования и изотермы насыщения анализировали, используя пакет программного обеспечения GraphPad Prism Software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA). Величины IC₅₀ получали по кривым зависимости реакции от концентрации с использованием алгоритма сигмоидальной кривой зависимости реакции от дозы (вариабельной крутизны) с использованием Prism GraphPad. Величины Kd и B_max для радиолиганда получали по изотермам насыщения с использованием алгоритма глобальной подгонки связывания насыщения с использованием Prism GraphPad. Величины pK_i (отрицательный декадный логарифм K_i) для тестируемых соединений рассчитывали по величинам IC₅₀ наилучшей подгонки, а величину K_d радиолиганда - с использованием уравнения Cheng-Prusoff equation (Cheng & Prusoff (1973) Biochem. Pharmacol. 22(23):3099-3108): K_i=IC₅₀/(l+[L]/K_d), где [L]=концентрация радиолиганда.

Было обнаружено, что соединения по изобретению, которые тестировали в данном анализе, проявляли величины pK_i, представленные ниже:

 

 

 

 

 

 

  n.d. = не определялось  

АНАЛИЗ 2

Анализы захвата нейромедиаторов клетками, экспрессирующими hSERT, hNET и hDAT

Анализы захвата нейромедиаторов использовали для измерения ингибирования захвата ³H-серотонина (³H-5-HT), ³H-норэпинефрина (³H-NE) и ³H-допамина (³H-DA) в клетки, экспрессирующие транспортер (hSERT, hNET или hDAT) для определения величин _PIC₅₀ тестируемых соединений у транспортеров.

Анализы захвата ³ H-5-HT, ³ H-NE и ³ H-DA

Линии клеток, происходящих из HEK-293, устойчиво трансфецированные соответственно hSERT, hNET или hDAT, выращивали в среде DMEM с добавлением 10% диализированной FBS (для hSERT) или FBS (для hNET и hDAT), 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 2 мМ L-глутамина и 250 мкг/мл аминогликозидного антибиотика G418 (для hSERT и hNET) или 800 мкг/мл (для hDAT), в инкубаторе с увлажненной средой 5% CO₂ при 37°C. Когда культуры достигали слияния 80%, клетки тщательно промывали в PBS (без Ca²⁺ и Mg²⁺) и поднимали 5 мМ EDTA в PBS. Клетки собирали центрифугированием при 1100 об/мин в течение 5 минут, однократно промывали ресуспензированием в PBS, затем центрифугировали. Супернатант удаляли и клеточный осадок после центрифугирования ресуспендировали, осторожно растирали в порошок в имеющем комнатную температуру бикарбонатном буфере Кребса-Рингера, содержащем HEPES (10 мМ), CaCl₂ (2,2 мМ), аскорбиновую кислоту (200 мкМ) и паргилин (200 мкМ), pH 7,4. Конечная концентрация клеток в клеточной суспензии составляла 7,5×10⁴ клеток/мл, 1,25×10⁵ клеток/мл и 5,0×10⁴ клеток/мл соответственно для линий клеток SERT, NET и DAT.

Анализы захвата нейромедиаторов выполняли в 96-луночном планшете в общем объеме 400 мкл аналитического буфера (бикарбонатного буфера Кребса-Рингера, содержащего HEPES (10 мМ), CaCl₂ (2,2 мМ), аскорбиновую кислоту (200 мкМ) и паргилин (200 мкМ), pH 7,4) с 1,5×10⁴ и 2,5×10⁴ клеток соответственно для SERT, NET и DAT. Анализы ингибирования для определения величин pIC₅₀ тестируемых соединений проводили с 11 различными концентрациями в диапазоне от 10 пкМ до 100 мкМ. Получали основные растворы (10 мМ в DMSO) тестируемого соединения и готовили серийные разведения с использованием 50 мМ Tris-HCl, 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, pH 7,4, 0,1% BSA, 400 мкМ аскорбиновой кислоты. Тестируемые соединения инкубировали в течение 30 минут при 37°C с соответствующими клетками перед добавлением меченого радиоактивной меткой нейромедиатора, ³H-5-HT (конечная концентрация 20 нМ), ³H-NE (конечная концентрация 50 нМ) или ³H-DA (конечная концентрация 100 нМ). Неспецифический захват нейромедиаторов определяли в присутствии 2,5 мкМ дулоксетина, 2,5 мкМ дезипрамина или l0 мкМ GBR-12909 (каждый в буфере разведения) соответственно для hSERT, hNET или hDAT.

После 10-минутной инкубации при 37°C с радиолигандом клетки собирали быстрой фильтрацией через 96-луночный планшет UniFilter GF/B, предварительно обработанный 1% BSA, и промывали 6 раз 650 мкл промывочного буфера (ледяного PBS). Планшеты сушили в течение ночи при 37°C, добавляли ~45 мкл MicroScint™-20 (Perkin Elmer) и включенную радиоактивность количественно определяли посредством жидкостной сцинтилляционной спектроскопии. Кривые ингибирования анализировали с использованием пакета программного обеспечения GraphPad Prism Software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA). Величины IC₅₀ получали по кривым зависимости реакции от концентрации с использованием алгоритма сигмоидальной кривой зависимости реакции от дозы (вариабельной крутизны) с использованием Prism GraphPad.

Соединения по изобретению тестировали в данном анализе в анализе на основе флуоресценции, как описано в публикации Tsuruda et al. (2010) Journal of Pharmacological and Toxicological Methods 61(2):192-204 (данные, указанные в таблице звездочкой), и были найдены следующие величины pIC₅₀ ингибирования обратного захвата серотонина и норэпинефрина:

 

 

 

 

 

  n.d. = не определялось  

АНАЛИЗ 3

Исследование вовлечения транспортеров SERT и NET ex vivo

Анализы ex vivo связывания радиолигандов и захвата нейромедиаторов использовали для определения вовлечения транспортеров SERT и NET in vivo в выбранных областях мозга после введения in vivo (острого или хронического) тестируемых соединений. После введения тестируемого соединения (внутривенным, внутрибрюшинным, пероральным, подкожным или другими путями) в соответствующей дозе (от 0,0001 до 100 мг/кг) крыс (≥ n=4 на группу) подвергали эвтаназии в определенные точки времени (от 10 минут до 48 часов) путем декапитации, и делали срезы мозга на льду. Делали срезы релевантных областей мозга, замораживали и хранили при -80°C до использования.

Анализы Ex Vivo связывания радиолигандов SERT и NET

Для анализов ex vivo связывания радиолигандов проводили мониторинг исходных скоростей ассоциации SERT- (³H-циталопрам) и NET- (³H-низоксетин) селективных радиолигандов с неочищенными гомогенатами мозга крыс, полученными у животных, леченых носителем и тестируемым соединением (см. публикацию Hess et al. (2004) J. Pharmacol. Exp. Ther. 310(2):488-497). Неочищенные гомогенаты мозговой ткани получали гомогенизированными замороженными кусочками ткани в буфере 0,15 мл (на мг влажной массы) 50 мМ Tris-HCl, 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, pH 7,4. Анализы ассоциации радиолигандов выполняли в 96-луночном аналитическом планшете в общем объеме аналитического буфера 200 мкл (50 мМ Tris-HCl, 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 0,025% BSA, pH 7,4) м 650 мкг влажной массы ткани (эквивалентной 25 мкг белка). Гомогенаты инкубировали в течение периода до 5 минут соответственно с ³H-циталопрамом (3 нМ) и ³H-низоксетином (5 нМ) перед окончанием анализа быстрой фильтрацией через 96-луночный планшет UniFilter GF/B, предварительно обработанный 0,3% полиэтиленимином. Затем фильтры промывали 6 раз 300 мкл промывочного буфера (50 мМ Tris-HCl, 0,9% NaCl, pH 7,4 при 4°C). Неспецифическое связывание радиолигандов определяли в присутствии 1 мкМ дулоксетина или 1 мкМ дезипрамина, соответственно для ³H-циталопрама или ³H-низоксетина. Планшеты сушили в течение ночи при комнатной температуре, добавляли ~45 мкл MicroScint™-20 (Perkin Elmer) и связанную радиоактивность количественно определяли посредством жидкостной сцинтилляционной спектроскопии. Исходные скорости ассоциации ³H-циталопрама и ³H-низоксетина определяли линейной регрессией с использованием пакета программного обеспечения GraphPad Prism Software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA). Определяли среднюю скорость ассоциации радиолигандов с гомогенатами ткани мозга животных, получавших лечение носителем. Затем определяли % вовлечения тестируемых соединений, используя следующее уравнение:

% вовлечения=100×(1-(исходная скорость ассоциации для ткани, обработанной тестируемым соединением/средняя скорость ассоциации для ткани, обработанной носителем))

Величины ED₅₀ определяли нанесением на график зависимости десятичного логарифма дозы тестируемого соединения от % вовлечения. Величины ED₅₀ получали по кривым зависимости реакции от концентрации с использованием алгоритма сигмоидальной кривой зависимости реакции от дозы (вариабельной крутизны) с использованием Prism GraphPad.

Ex Vivo анализы захвата SERT и NET

Ex vivo анализы захвата нейромедиаторов, при которых захват ³H-5-HT или ³H-NE в неочищенные гомогенаты мозговой ткани крыс, полученной у животных, леченых носителем и тестируемым соединением, использовали для измерения вовлечения транспортеров SERT и NET in vivo (см. публикацию Wong et al. (1993) Neuropsychopharmacology 8(l):23-33). Неочищенные гомогенаты мозговой ткани получали гомогенизацией кусочков замороженной ткани в 0,5 мл (на мг влажной массы) 10 мМ буфера HEPES при pH 7,4, содержащем 0,32 М сахарозы, 200 мкМ аскорбиновой кислоты и 200 мкМ паргилина при 22°C. Анализы захвата нейромедиаторов выполняли в 96-луночном планшете Axygen в общем объеме 350 мкл аналитического буфера (бикарбонатный буфер Кребса-Рингера с 10 мМ HEPES, 2,2 мМ CaCl₂, 200 мкМ аскорбиновой кислоты и 200 мкМ паргилина, pH 7,4) с 50 мкг белка. Гомогенаты инкубировали в течение 5 минут при 37°C соответственно с ³H-5-HT (20 нМ) и H-NE (50 нМ) перед окончанием анализа быстрой фильтрацией через 96-луночный планшет UniFilter GF/B, предварительно обработанный 1% BSA. Планшеты промывали 6 раз 650 мкл промывочного буфера (ледяного PBS) и сушили в течение ночи при 37°C перед добавлением ~45 мкл MicroScint™-20 (Perkin Elmer). Включенную радиоактивность количественно определяли посредством жидкостной сцинтилляционной спектроскопии. Неспецифический захват нейромедиаторов определяли в параллельных анализах, при которых гомогенаты ткани инкубируются с ³H-5-HT (20 нМ) или ³H-NE (50 нМ) в течение 5 минут при 4°C.

АНАЛИЗ 4

Другие анализы

Другие анализы, которые используются для оценки фармакологических свойств тестируемых соединений, включают без ограничения анализы кинетики связывания лигандов на холоде (Motulsky and Mahan (1984) Molecular Pharmacol. 25(1): 1-9) с мембранами, полученными из клеток, экспрессирующих hSERT или hNET; обычные анализы мембранного связывания радиолигандов с использованием меченых радиоактивными изотопами, например тритием, тестируемых соединений; анализы связывания радиолигандов с использованием нативной ткани, полученной, например, из мозга грызунов или человека; анализы захвата нейромедиаторов с использованием тромбоцитов человека или грызунов; анализы захвата нейромедиаторов с использованием неочищенных или чистых препаратов синаптосом из мозга грызунов.

АНАЛИЗ 5

Тест введения формалина в подушечку лапы

Соединения оценивают для выявления их способности ингибировать поведенческую реакцию, вызванную инъекцией 50 мкл формалина (5%). Металлическая лента фиксируется к левой задней лапе самцов крыс Sprague-Dawley (200-250 г), и каждую крысу адаптируют к ношению ленты в течение 60 минут помещением внутрь пластикового цилиндра (диаметром 15 см). Соединения готовят в фармацевтически приемлемых носителях и вводят системно (внутрибрюшинно, перорально) в заданные точки времени перед провокационной формалиновой пробой. Спонтанное связанное с болевым ощущением поведение, состоящее в отдергивании инъецированной (окольцованной) задней лапы, непрерывно подсчитывают в течение 60 минут с использованием автоматического анализатора ноцицепции (UCSD Anesthesiology Research, San Diego, CA). Антиноцицептивные свойства тестируемых изделий определяют сравнением числа отдергиваний лапы у крыс, получавших носитель, и крыс, получавших тестируемое соединение (Yaksh TL et al., «An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay» (2001) J. Appl. Physiol. 90(6):2386-2402).

АНАЛИЗ 6

Модель перевязки спинномозговых нервов

Проводится оценка способности соединений устранять тактильную аллодинию (повышенную чувствительность к безопасному механическому раздражению), вызванную повреждением нерва. Самцов крыс Sprague-Dawley хирургически готовят, как описано в публикации Kim and Chung «An experimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat» (1992) Pain 50(3):355-363. Механическую чувствительность определяют как реакцию отдергивания лапы на 50% в ответ на безопасные механические раздражители (Chaplan et al., «Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw» (1994) J. Neurosci. Methods 53(l):55-63) до и после повреждения нерва. Через 1-4 недели после операции соединения готовят в фармацевтически приемлемых носителях и вводят системно (внутрибрюшинно, перорально). Степень вызванной повреждением нерва механической чувствительности до и после лечения служит в качестве показателя антиноцицептивных свойств соединений.

Хотя настоящее изобретение было описано со ссылкой на его определенные аспекты или варианты осуществления, специалистам в данной области будет понятно, что различные изменения могут быть внесены или эквиваленты могут быть заменены без отхода от сущности и объема изобретения. Кроме того, в той степени, в которой это допускается применимыми патентными законами и инструкциями, все публикации, патенты и патентные заявки, приведенные в настоящем описании, полностью включены в него путем ссылки в той же степени как если бы каждый документ был отдельно включен в настоящее описание путем ссылки.

Изобретение относится к 3-феноксиметилпирролидинам формулы (I), приведенной ниже, где R¹ означает -C_2-6алкил, -C_3-8циклоалкил, необязательно замещенный 1 или 2 атомами фтора, -C_2-6алкенил и -C_2-6алкинил; R²-R⁶ независимо означают водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃, -O-C_1-6алкил, -CN, -C(О)-C_1-6алкил, -S-C_1-6алкил, -C_3-8циклоалкил и -NO₂; или R⁴ и R⁵ взяты вместе с образованием -CH=СН-СН=CH-; или R⁵ и R⁶ взяты вместе с образованием -CH-СН=СН-СН-; при условии, что когда R¹ означает этил, R² означает фтор-, R⁴ означает хлор-, R⁵ означает водород, и R⁶ означает водород, то R³ не означает фтор- или хлор-; или к их фармацевтически приемлемым солям. Соединения формулы (I) являются ингибиторами обратного захвата серотонина и норэпинефрина. Описан способ их получения и промежуточные соединения, используемые для получения соединений формулы (I). 4 н. и 24 з.п. ф-лы, 26 пр.

1. Соединение формулы I

где
R¹ выбран из -C_2-6алкила, -C_3-8циклоалкила, необязательно замещенного 1 или 2 атомами фтора, -C_2-6алкенила и -C_2-6алкинила;
R²-R⁶ независимо выбраны из водорода, галогена, -C_1-6алкила, -CF₃, -O-C_1-6алкила, -CN, -C(О)-C_1-6алкила, -S-C_1-6алкила, -C_3-8циклоалкила и -NO₂; или R⁴ и R⁵ взяты вместе с образованием -CH=СН-СН=CH-; или R⁵ и R⁶ взяты вместе с образованием -CH-СН=СН-СН-;
при условии, что когда R¹ представляет этил, R² представляет фтор-, R⁴ представляет хлор-, R⁵ представляет водород, и R⁶ представляет водород, то R³ не представляет фтор- или хлор-;
или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, где R¹ представляет -C_2-6алкил, выбранный из этила, пропила, изопропила, бутила, изобутила и 3-пентила.

3. Соединение по п.1, где R¹ представляет -C_3-8циклоалкил, необязательно замещенный 1 или 2 атомами фтора, выбранный из циклопропила, циклопентила, циклогексила и 4,4-дифторциклогексила.

4. Соединение по п.1, где R¹ представляет бут-3-енил.

5. Соединение по п.1, где R¹ представляет -C≡СН.

6. Соединение по п.1, где R² представляет водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃, -O-C_1-6алкил, -C(O)-С_1-6алкил, -S-C_1-6алкил, -C_3-8циклоалкил или -NO₂.

7. Соединение по п.6, где R² представляет водород, фтор-, хлор-, -CH_3, -CH₂CH₃, -CF₃, -O-CH₃, -O-CH₂CH₃, -C(O)-CH₃, -S-CH₃, циклоалкил или -NO₂.

8. Соединение по п.1, где R³ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃, -O-С_1-6алкил или -S-C_1-6алкил.

9. Соединение по п.8, где R³ представляет водород, фтор-, хлор-, -СН₃, -CF₃, -O-СН₃ или -S-CH₃.

10. Соединение по п.1, где R⁴ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил, -CF₃ или -O-C_1-6алкил.

11. Соединение по п.10, где R⁴ представляет водород, фтор-, хлор-, -СН₃, -CF₃ или -O-СН₃.

12. Соединение по п.1, где R⁵ представляет водород, галоген, -C_1-6алкил или -O-C_1-6алкил.

13. Соединение по п.12, где R⁵ представляет водород, фтор-, хлор-, -СН₃ или -O-СН₃.

14. Соединение по п.1, где R⁶ представляет водород, галоген или -C_1-6алкил.

15. Соединение по п.14, где R⁶ представляет водород, фтор-, хлор- или -СН₃.

16. Соединение по п.1, где R⁵ и R⁶ взяты вместе с образованием -CH=СН-СН=СН-.

17. Соединение по п.1, где R² и R³ представляют неводородные группы, a R⁴, R⁵ и R⁶ представляют водород.

18. Соединение по п.1, где R² и R⁴ представляют неводородные группы, a R³, R⁵ и R⁶ представляют водород.

19. Соединение по п.1, где R³ и R⁴ представляют неводородные группы, a R², R⁵ и R⁶ представляют водород.

20. Соединение по п.1, где R², R³ и R⁴ представляют неводородные группы, a R⁵ и R⁶ представляют водород.

21. Соединение по п.1, где R², R⁴ и R⁶ представляют неводородные группы, a R³ и R⁵ представляют водород.

22. Соединение по п.1, которое представляет собой 3-[1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидин.

23. Соединение по п.1, которое имеет конфигурацию, выбранную из


или обогащено стереоизомерной формой, имеющей такую конфигурацию.

24. Соединение по п.23, которое выбрано из (R)-3-[(R)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидина, (S)-3-[(S)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидина, (S)-3-[(R)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидина и (R)-3-[(S)-1-(4-хлорфенокси)-2-метилпропил]пирролидина.

25. Способ получения соединения по любому из пп.1-24, включающий снятие защиты с соединения формулы

где P представляет аминозащитную группу, выбранную из трет-бутоксикарбонила, тритила, бензилоксикарбонила, 9-флюоренилметоксикарбонила и формила, с получением соединения формулы I или его соли.

26. Промежуточное соединение, пригодное в синтезе соединения по любому из пп.1-24, имеющее формулу

где P представляет собой трет-бутоксикарбонил.

27. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора обратного захвата серотонина и норэпинефрина, содержащая соединение по любому из пп.1-24 и фармацевтически приемлемый носитель.

28. Соединение по любому из пп.1-24, обладающее активностью ингибитора обратного захвата серотонина и норэпинефрина.